L-inibizzjoni tal-plejtlits tipprevjeni l-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3 u l-korriment fil-kliewi kkaġunat mis-sepsis
Mar 28, 2022
Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
Marivee Borges-Rodriguez, et al
Astratt:
Il-plejtlits, medjaturi ċellulari tat-trombożi, huma attivati waqt is-sepsis u huma dejjem aktar rikonoxxuti bħala medjaturi tar-rispons immuni. L-attivazzjoni tal-plejtlits tiżdied b'mod sinifikanti f'pazjenti b'sepsis meta mqabbla ma' pazjenti ta' kontroll tal-ICU. Minkejja din il-korrelazzjoni, ir-rwol tal-plejtlits attivati fil-kontribut għall-patofiżjoloġija tas-sepsis għadu mhux ċar. Preċedentement urejna attivazzjoni inflammasome tal-proteina tar-riċettur 3 inflammasome (NLRP3) li tixbah lil NOD f'plejtlits indotti minn sepsis minn firien ta 'puntura taċ-ċecal-ligation (CLP). Il-plejtlits attivati kienu assoċjati ma' żieda fl-edema pulmonari u korriment glomerulari fil-kontrolli CLP vs. SHAM. F'dan l-istudju, investigajna jekk l-inibizzjoni tal-attivazzjoni tal-plejtlits ittaffix l-attivazzjoni ta 'NLRP3 u l-ħsara fil-kliewi u fil-pulmun b'rispons għal CLP. CLP sar fil-firien Sprague Dawley (SD) maskili u femminili (n=10/grupp) biex jinduċu sepsis addominali u firien SHAM servew bħala kontrolli. Subsett ta' annimali CLP ġew ittrattati b'Clopidogrel (10 mg/kg/kuljum, CLP flimkien ma' CLOP) biex jinibixxu l-attivazzjoni tal-plejtlits. Fi 72 siegħa wara CLP, l-attivazzjoni tal-plejtlits, u l-assemblaġġ tal-inflammasome NLRP3 ġew evalwati, IL-1 u IL{-18 ġew imkejla fil-plażma, u t-tessuti, il-patoloġija renali u pulmonari, u l-funzjoni renali ġew evalwati. Il-plejtlits attivati kienu 7.8 ± 3.6 fil-mija f'Sham, 22 ± 6 fil-mija f'CLP u naqsu b'mod sinifikanti għal 14.5 ± 0.6 fil-mija f'CLP flimkien ma' CLOP (n=8-10/grupp, p < 0.05)="" .="" l-assemblaġġ="" inflammasome="" nlrp3="" ġie="" inibit="" fil-plejtlits="" ta="" 'clp="" flimkien="" ma'="" annimali="" clop="" vs.="" clp.="" żidiet="" sinifikanti="" fil-plażma="" u="" fil-kliewi="" il-1="" u="" il{-18="" b'rispons="" għal="" clp="" naqsu="" bil-kura="" b'clopidogrel.="" korriment="" tal-kliewi,="" iżda="" mhux="" l-istoloġija="" tal-pulmun="" jew="" il-funzjoni="" tal-kliewi="" tjiebu="" f'clp="" flimkien="" ma'="" clop="" vs.="" clp.="" din="" id-dejta="" tipprovdi="" evidenza="" li="" l-plejtlits="" attivati="" jistgħu="" jikkontribwixxu="" għal="" ħsara="" fil-kliewi="" kkaġunata="" minn="" sepsis,="" possibilment="" permezz="" tal-attivazzjoni="" ta'="" nlrp3="" fil-plejtlits.="" il-plejtlits="" jistgħu="" jkunu="" mira="" terapewtika="" biex="" titnaqqas="" il-ħsara="" renali="" f'pazjenti="">
Kliem ewlieni:sepsis; NLRP3; plejtlits; Clopidogrel; korriment multi-organi; attivazzjoni endoteljali;infjammazzjoni
estratt ta' cistanche tubolosa : kontra l-infjammazzjoni
1. Introduzzjoni
Is-sepsis hija rispons infjammatorju mhux regolat ta' l-ospitanti li jhedded il-ħajja għal aġent infettiv [1] u waħda mill-kawżi ewlenin tal-mewt fid-dinja. Mill-inqas 1.7 miljun adult fl-Amerika jiżviluppaw sepsis u kważi 270,000 Amerikani jmutu bħala riżultat tas-sepsis kull sena [2]. Is-sepsis twassal għal disfunzjoni multi-organi inkluża ħsara akuta fil-pulmun (ALI) [3],akutakliewikorriment(AKI) [4,5], disfunzjoni ematoloġika u tas-sistema nervuża ċentrali, fost oħrajn. Numru dejjem jikber ta 'organi involuti fis-sepsis huwa assoċjat ma' żieda fil-mortalità [6]. Il-modalitajiet ta' trattament attwali jiffokaw fuq kura ta' appoġġ; madankollu, il-mortalità għadha għolja. Ġie rrappurtat li madwar 35 sa 50 fil-mija tal-imwiet fl-isptar huma dovuti għal sepsis [7]. Huwa kruċjali li tiġi identifikata mira terapewtika li tista' ttejjeb il-mortalità minħabba sepsis.
Il-plejtlits ġew rikonoxxuti bħala li għandhom rwol fl-immunità [8,9], minbarra r-rwol tagħhom fl-emostasis u t-trombożi. Tromboċitopenja tidher ta' spiss f'sepsis u huwa maħsub li sseħħ minħabba l-attivazzjoni u l-konsum tal-plejtlits; madankollu, ir-rwol tagħha fil-proċess tal-marda għadu mhux ċar. Tromboċitopenja hija assoċjata ma' l-iżvilupp ta' MOF (falliment f'ħafna organi) u żieda fil-mortalità ta' 90-jum [10–14]. Il-plejtlits jistgħu jkunu parti integrali mir-rispons infjammatorju għal sepsis. Mekkaniżmu potenzjali li bih il-plejtlits jistgħu jikkontribwixxu għal korriment multi-organi huwa permezz tal-attivazzjoni tal-proteina tar-riċettur 3 inflammasome (NLRP3) bħal NOD. NLRP3 huwa riċettur ta' sinjalazzjoni immuni ċitosolika li jwassal għal qsim medjat minn caspase-1 u attivazzjoni ta' IL-1B u IL{-18 u kien implikat fil-patoġenesi ta' proċessi ta' mard infjammatorju bħall-ażma [15 ], Parkinson's [16], mard infjammatorju tal-musrana [17], u sepsis [18]. L-inibizzjoni tal-assemblaġġ tal-inflammasome NLRP3 intwera li hija protettiva kontra l-ħsara tal-organi kkaġunata minn sepsis [19-23]. Preċedentement urejna li NLRP3 inflammasome huwa attivat fil-plejtlits bi tweġiba għal ligation-puncture cecal (CLP) u huwa assoċjat ma 'korriment multi-organi b'rispons għal sepsis polimikrobjali f'mudell ta' far CLP ta '72 siegħa. Fl-istudju preżenti, aħna ipoteżijna li l-imblukkar tal-attivazzjoni tal-plejtlits b'Clopidogrel (CLOP) inaqqas l-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3, il-ħsara renali u pulmonari b'reazzjoni għal sepsis polimikrobjali.
cistanche flavonoids: kontra l-infjammazzjoni
2. Riżultati
2.1. Attivazzjoni tal-Pjanċa u Assemblea Inflflammasome NLRP3
Bl-użu taċ-ċitometrija tal-fluss, iddeterminajna l-perċentwali tal-attivazzjoni tal-plejtlits fost il-gruppi. Sibna li l-attivazzjoni tal-plejtlits żdiedet fil-firien CLP bi 22 ± 6 fil-mija, meta mqabbla ma 'SHAM 7.8 ± 3.6 fil-mija (p <0.{{10}}5), u="" attenwata="" f'clp="" flimkien="" mal-firien="" clop="" b'14.5="" ±="" 0.6="" fil-mija="" (p=""><0.05, figura="" 1).="" l-assemblaġġ="" ta="" 'l-inflammasome="" nlrp3="" fil-plejtlits="" ġie="" vvalutat="" billi="" viżwalizzaw="" il-ko-lokalizzazzjoni="" ta'="" nlrp3="" ma="" 'proteina="" speck-like="" assoċjata="" ma'="" apoptosi="" (asc)="" bl-użu="" ta="" 'immunoċitokimika="" (figura="" 2).="" il-ko-lokalizzazzjoni="" ta="" 'komponenti="" inflammasome="" fil-plejtlits="" clp="" kienet="" 83="" darba="" akbar="" meta="" mqabbla="" ma'="" plejtlits="" sham="" (figura="" 2c).="" barra="" minn="" hekk,="" l-assemblaġġ="" tal-inflammasome="" naqas="" fil-plejtlits="" ta'="" clp="" flimkien="" ma'="" clop="" meta="" mqabbel="" ma'="">
2.2. Ċitokini Assoċjati ma' Inflflammasome
L-attivazzjoni ta' NLRP3 tirriżulta fir-rilaxx ta' ċitokini pro-infjammatorji IL-1 u IL-18 fil-forom attivi tagħhom. Aħna kejlu ż-żewġ ċitokini fil-plażma,pulmun, ukliewiomoġenatita' SHAM, CLP, u CLP flimkien ma' CLOP permezz ta' ELISA. Plażma IL{{0}} żdied b'mod sinifikanti minn 9 ± 21 pg/mL f'Sham għal 77 ± 31 pg/mL f'CLP (p <{{10}}.0 5,="" figura="" 3a).="" l-għoti="" ta'="" clopidogrel="" wera="" tnaqqis="" fil-plażma="" il-1="" 48="" ±="" 38="" pg/ml;="" madankollu,="" it-tnaqqis="" ma="" kienx="" statistikament="" sinifikanti="" meta="" mqabbel="" ma'="" clp="" (p=""><0.05 vs.="" sham).="" bl-istess="" mod,="" il-kliewi="" il-1="" kien="" elevat="" f'clp="" 4="" ±="" 3="" pg/mg,="" meta="" mqabbel="" ma'="" sham="" 2.5="" ±="" 0.9="" pg/mg="" (p="">< 0.05,="" figura="" 3b).="" il-kura="" b'clopidogrel="" naqqset="" b'mod="" sinifikanti="" l-il-1="" renali="" għal="" 1.8="" ±="" 0.8="" pg/mg="" (p="">< 0.05).="" fil-pulmuni,="" il-1="" żdied="" b'mod="" sinifikanti="" minn="" 70="" ±="" 16="" pg/mg="" f'sham="" għal="" 106="" ±="" 36="" pg/mg="" f'clp="" (p="">< 0.05)="" u="" ma="" kienx="" differenti="" b'mod="" sinifikanti="" f'annimali="" kkurati="" b'clopidogrel="" (80="" ±="" 23="" pg).="" mg,="" figura="">
Plażma IL{{0}} ma kinitx skoperta fil-firien SHAM; madankollu, il-medja tal-plażma IL-18 kienet 26 ± 6 pg/mL f'CLP. Importanti, l-għoti ta' Clopidogrel irriżulta f'livelli aktar baxxi ta' IL-18 fil-plażma (12 ± 9 pg/mL; p <0.{{20}}5, figura="" 3d).="" bl-istess="" mod,="" il-{{10}}="" renali="" kien="" elevat="" f'clp="" (396="" ±="" 65="" pg/mg)="" meta="" mqabbel="" ma'="" sham="" (317="" ±="" 73="" pg/mg;="" p="">< 0.05).="" kura="" b'clopidogrel="" naqqset="" il-kliewi-18="" għal="" 214="" ±="" 70="" pg/mg="" (p="">< 0.05,="" figura="" 3e).="" fil-pulmuni,="" il-18="" żdied="" b'mod="" sinifikanti="" minn="" 704="" ±="" 219="" pg/mg="" f'sham="" għal="" 999="" ±="" 158="" pg/mg="" f'clp="" (p="">< 0.05)="" u="" baqa'="" elevat="" f'annimali="" kkurati="" b'clopidogrel="" 1014="" ±="" 235="" pg/mg="" (="" p=""><0.05 vs="" sham,="" figura="">
2.3. Attivazzjoni Endoteljali
Aħna kejlu l-livelli fil-plażma ta' angiopoietin{{0}} u endocan bħala markaturi ta' attivazzjoni endoteljali fi gruppi Sham, CLP u CLP flimkien ma' CLOP permezz ta' ELISA. L-endokan tal-plażma żdied b'mod sinifikanti minn 1234 ± 327 pg/mL f'Sham għal 1978 ± 306 pg/mL f'CLP (p <{{20}}}.05 vs.="" sham).="" endocan="" tnaqqas="" b'mod="" sinifikanti="" għal="" 1521="" ±="" 283="" pg/ml="" f'firien="" clp="" trattati="" b'clopidogrel="" (p=""><0.05 vs="" clp,="" figura="" 4a).="" instabu="" riżultati="" simili="" għall-anġjopoetin-2.="" l-anġjopojetin-2="" żdiedet="" b'mod="" sinifikanti="" minn="" 5603="" ±="" 2142="" pg/ml="" f'sham="" għal="" 56,767="" ±="" 40,{000="" pg/ml="" f'clp="" (p="">< 0.05="" vs.="" sham)="" u="" naqset="" b'mod="" sinifikanti="" fil-firien="" ittrattati="" b'clopidogrel="" għal="" 22,486="" ±="" 13,616="" pg/ml="" (p=""><0.05 vs="" clp,="" figura="">
2.4. Korriment fil-pulmun
Analiżi istoloġika tal-pulmuni minn kull grupp wriet żieda sinifikanti fl-infiltrazzjoni tan-newtrofili b'punteġġ medju ta' {{0}}.6 ± 0.2 fil-firien CLP meta mqabbel ma' punteġġ ta' {{6} }.10 ± {{10}}.10 fil-firien Falz (p < 0.05).="" aħna="" osservajna="" wkoll="" li="" l-għoti="" ta'="" clopidogrel="" lill-firien="" clp="" ma="" biddilx="" l-infiltrazzjoni="" tan-newtrofili="" (punteġġ="" 0.5="" ±="" 0.4,="" figura="" 5a).="" instabu="" riżultati="" simili="" fil-ħxuna="" tal-ħajt="" alveolari="" b'żieda="" sinifikanti="" f'clp="" bi="" ħxuna="" medja="" ta="" '1.2="" ±="" 0.1="" µm="" meta="" mqabbla="" ma'="" 0.8="" ±="" 0.3="" µm="" fil-firien="" sham="" (p="">< 0.05).="" l-għoti="" ta'="" clopidogrel="" lill-firien="" clp="" ma="" tejbitx="" il-ħxuna="" tal-ħajt="" alveolari="" (figura="">
2.5. Korriment fil-Kliewi
Kif ppubblikajna qabel, il-GFR naqas b'mod sinifikanti minn 2.1 ± 0.8 mL/min/100 g iżda fil-firien Sham għal {{10}}} .7 ± 0.2 mL/min/100 g iżda fil-firien CLP (p < 0.05).="" l-għoti="" ta'="" clopidogrel="" wera="" titjib="" fil-gfr="" għal="" 1.3="" ±="" 0.5="" ml/min/100="" g="" iżda="" meta="" mqabbel="" ma'="" clp,="" madankollu="" mhux="" statistikament="" sinifikanti="" (figura="" 6a).="" analiżi="" istoloġika="" wriet="" żieda="" fil-ħsara="" glomerulari="" fil-grupp="" clp="" meta="" mqabbel="" ma="" 'sham.="" it-trattament="" b'clopidogrel="" tejbet="" b'mod="" sinifikanti="" l-ħsara="" glomerulari="" f'annimali="" clp="" (figura="">
benefiċċji tas-saħħa cistanche: funzjoni aħjar tal-kliewi
3. Diskussjoni
Sepsis hija rispons immuni mhux regolat għal aġent infettiv, ħafna drabi assoċjat ma 'falliment ta' diversi organi u magħruf li għandu mortalità għolja. Hemm bżonn għall-identifikazzjoni ta' terapija ġdida li tista' timmodula r-rispons infjammatorju u tnaqqas il-mortalità. Il-plejtlits ġew postulati li għandhom rwol fl-immunomodulazzjoni. Naturalment, il-kaskata tal-koagulazzjoni u l-attivazzjoni tal-plejtlits kienu fokus prominenti tal-investigazzjoni. L-għoti ta' proteina Ċ, enzima endoġena antikoagulanti, ġiet assoċjata ma' sopravivenza mtejba f'pazjenti b'sepsis severa [24]. Fil-Ġappun, il-linji gwida dwar is-sepsis jinkludu l-użu ta 'amministrazzjoni ta' antitrombina f'ħin f'pazjenti settiċi b'DIC u wrew riżultati mtejba [25]. Dan jissuġġerixxi li l-inibizzjoni tal-attivazzjoni tal-plejtlits tista 'ttejjeb ir-riżultati fis-sepsis. Ir-rispons infjammatorju waqt is-sepsis huwa definittivament kumpless u jista 'jinvolvi aktar minn mogħdija waħda. Preċedentement ippublikajna li l-plejtlits mill-mudell tas-sepsis polimikrobjali CLP żiedu l-assemblaġġ/attivazzjoni tal-plejtlets NLRP3 u kienu assoċjati ma 'ħsara fil-pulmun u fil-kliewi [26]. F'dan l-istudju, aħna ddejna niddeterminaw ir-rwol tal-inibizzjoni tal-plejtlits fir-rispons infjammatorju fl-istess mudell bl-użu tal-inibitur P2Y12, Clopidogrel.
Kif ippubblikat qabel, l-attivazzjoni tal-plejtlits żdiedet b'reazzjoni għal sepsis polimikrobjali fil-mudell CLP meta mqabbla mal-firien Sham. Sibna li l-għoti ta 'Clopidogrel naqqset l-attivazzjoni tal-plejtlits fil-firien CLP u interessanti, kien osservat ukoll tnaqqis fl-assemblaġġ ta' NLRP3 inflammasome fil-plejtlits. Sibna wkoll tendenza fit-tnaqqis ta' IL-1B u IL-18 li jiċċirkolaw fil-plażma ta' annimali kkurati b'Clopidogrel meta mqabbla mal-grupp CLP. Fi studju ppubblikat qabel, aħna rrapportajna li l-inibizzjoni diretta ta 'NLRP3 inflammasome b'MCC950 irriżulta fi tnaqqis ta' IL-1B u IL-18 fil-plażma [27]. Dan jissuġġerixxi li l-inibizzjoni tal-attivazzjoni tal-plejtlits b'Clopidogrel u t-tnaqqis fiċ-ċitokini infjammatorji f'dan il-mudell ta' sepsis hija medjata, parzjalment, minn mekkaniżmi NLRP3. Għalhekk, jeħtieġ li jsiru aktar studji biex jiġu definiti b'mod aktar ċar il-mogħdijiet infjammatorji medjati minn NLRP3 fil-plejtlits.
Multi-organ failure (MOF) occurs frequently in sepsis. Previously published studies reported that in mice, the CLP model caused significant pulmonary damage; and depletion of platelets reduced CLP-induced edema and neutrophil recruitment in the bronchoalveolar space by >60 fil-mija [28]. Preċedentement ippublikajna li żieda fl-attivazzjoni tal-plejtlits kienet assoċjata ma 'disfunzjoni u korriment ta' organi multipli fil-mudell tal-far CLP [26]. Id-dejta tagħna turi tnaqqis sinifikanti fl-IL-1 u IL-18 fl-kliewita’ annimali kkurati b’clopidogrel. Il-kombinazzjoni ta 'insuffiċjenza renali akuta u sepsis hija assoċjata ma' mortalità ta '70 fil-mija, meta mqabbla ma' mortalità ta '45 fil-mija fost pazjenti b'insuffiċjenza renali akuta biss [29]. Ir-rata ta 'filtrazzjoni glomerulari (GFR) hija indikatur ta'kliewifunzjoniu jonqos b'żieda fil-ħsara renali. It-trattament b'clopidogrel tejbet il-ħsara fil-kliewi fil-firien CLP, li tissuġġerixxi li l-attivazzjoni tal-plejtlits jista 'jkollha rwol fl-iżvilupp ta' AKI indotta minn sepsis.
Benefiċċji ta 'estratt ta' cistanche: itejjeb il-funzjoni tal-kliewi
Konsistenti mar-rwol tiegħu li jikkawża MOF, l-iżvilupp ta 'ALI u sindromu ta' distress respiratorju akut (ARDS) huwa komuni f'pazjenti b'sepsis u ħafna drabi jirriżulta fil-ħtieġa għal ventilazzjoni mekkanika f'din il-popolazzjoni ta 'pazjenti. L-evidenza tissuġġerixxi li l-attivazzjoni tal-plejtlits għandha rwol importanti fl-iżvilupp ta 'MOF f'pazjenti settiċi [8,30]. Studji preċedenti appoġġaw dan billi wrew infiltrazzjoni mnaqqsa tan-newtrofili fil-pulmuni ta 'ġrieden settiċi indotti minn CLP wara tnaqqis tal-plejtlits [28]. Barra minn hekk, Liverani et al. irrapporta li ġrieden ittrattati minn qabel b'Clopidogrel kienu reżistenti għal ALI indotta minn sepsis [31]. Madankollu, l-istudju attwali ma setax juri xi evidenza sinifikanti ta' tnaqqis ta' IL- 1, infiltrazzjoni tan-newtrofili, jew ħxuna tal-ħajt alveolari fil-pulmuni. Dan jista' jkun minħabba l-użu ta' speċi ta' annimal differenti, doża ta' Clopidogrel, u differenzi oħra fid-disinn sperimentali.
It-tnixxija kapillari hija karatteristika prominenti tas-sepsis. Proteini bħall-fattur tat-tkabbir vaskulari angiopoietin-2 huma magħrufa li jippromwovu l-infjammazzjoni, disfunzjoni endoteljali u huma assoċjati ma' żieda fil-mortalità fl-isptar f'pazjenti b'sepsis [32]. Endocan huwa markatur ieħor ta 'disfunzjoni taċ-ċelluli endoteljali u kien relatat mas-severità tal-mard u r-riżultat ta' pazjenti settiċi [33]. Sibna wkoll li dawn il-markaturi ta 'attivazzjoni u disfunzjoni endoteljali kienu elevati fil-mudell CLP, u naqsu fil-grupp ta' trattament Clopidogrel. Bl-istess mod, osservajna żieda żgħira, iżda insinifikanti fil-GFR fil-grupp ikkurat b'clopidogrel. Dan jissuġġerixxi li l-attivazzjoni tal-plejtlits għandha xi effett modulatorju fuq ir-rispons infjammatorju għal sepsis.
F'dan l-istudju, l-inibizzjoni tal-attivazzjoni tal-plejtlits ma ssarrafx għal titjib sinifikanti fil-funzjoni tal-organi. Huwa possibbli li d-doża magħżula ta '10 mg/kg/jum kienet biżżejjed biex tattenwa l-attivazzjoni tal-plejtlits, l-attivazzjoni ta' NLRP3, ċitokini, u markaturi ta 'attivazzjoni endoteljali, iżda ma ssarrfitx għal attenwazzjoni ta' ħsara fil-pulmun jew titjib fil-funzjoni renali. Liverani, et al. preċedentement uża doża inizjali ta '30/mg/kg/jum fi ġrieden tat-tip selvaġġ u P2Y12 knock-out, li ssarraf f'inibizzjoni ta' ħsara fil-pulmun indotta minn sepsis [31]. Fl-istess studju, Clopidogrel ingħata qabel l-induzzjoni tas-sepsis. Din id-differenza kbira tista 'tispjega n-nuqqas ta' titjib sinifikanti fil-funzjoni tal-pulmun jew tal-kliewi osservat fl-istudju tagħna.
Filwaqt li l-istudju attwali jissuġġerixxi rwol għall-attivazzjoni tal-plejtlits fil-kontribut għall-infjammazzjoni u l-attivazzjoni endoteljali b'reazzjoni għal sepsis, hemm limitazzjonijiet li għandhom jiġu nnutati. L-ewwel, filwaqt li ġew imkejla markaturi ta 'attivazzjoni endoteljali, huma ġġustifikati esperimenti addizzjonali biex tiġi vvalutata l-funzjoni endoteljali. Barra minn hekk, il-kontribut ta' fatturi oħra derivati mill-plejtlits ma kienx ikkontrollat f'dan l-istudju. Għalhekk, għad hemm mistoqsijiet mhux imwieġba dwar kif il-plejtlits jikkontribwixxu għall-patoloġija kkaġunata mis-sepsis u l-falliment tal-organi.
Ir-rwol ta 'Clopidogrel fit-tnaqqis tal-mortalità f'sepsis kien kontroversjali b'rapporti ta' tnaqqis fl-inċidenza ta 'ARDS u ventilazzjoni mekkanika, iżda l-ebda tnaqqis fil-mortalità [34]. Jeħtieġ li jsiru aktar studji biex jiġi ddeterminat il-mekkaniżmu eżatt li bih il-plejtlits jikkontribwixxu għal ħsara u disfunzjoni fl-organi fis-sepsis. Dan l-istudju jappoġġa aktar esplorazzjoni tal-plejtlits bħala mira terapewtika f'pazjenti settiċi.
cistanche tubolosa benefiċċji għas-saħħa: ittejjeb il-funzjoni renali
4. Materjali u Metodi
4.1. Annimali
Intużaw firien Sprague Dawley femminili u maskili mixtrija minn Envigo (Indianapolis, IN, USA). Il-proċeduri sperimentali kollha esegwiti f'dan l-istudju kienu skont il-linji gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa għall-użu u l-kura tal-annimali. Il-protokolli kollha ġew approvati mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali fiċ-Ċentru Mediku tal-Università ta 'Mississippi. Il-kura u l-immaniġġjar tal-annimali kienu skont il-linji gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa għal trattament etiku tal-annimali.
4.2. Ligazzjoni u Titqib taċ-Ċekali
L-esperimenti kollha in vivo tagħna twettqu fi 12- sa 13-firien irġiel u nisa ta' ġimgħa li jiżnu bejn wieħed u ieħor 225–325 g. L-annimali kienu maqsuma b'mod każwali f'żewġ gruppi: il-grupp ta 'operazzjoni finta (SHAM, n=10) u l-grupp ta' titqib tal-ligazzjoni taċ-ċekali (CLP, n=10). Taħt anestesija isoflurane, il-kirurġija CLP saret fuq subsett ta 'firien biex tinduċi sepsis polimikrobjali addominali kif iddeskrivejna qabel [26,27]. Salina imsaħħan minn qabel (20 mL/kg, 37 ◦C) ġiet injettata taħt il-ġilda immedjatament wara l-operazzjoni għar-risuxxitazzjoni. Annimali mħaddma b'mod falz għaddew mill-istess proċedura kirurġika mingħajr ligazzjoni jew titqib taċ-ċecum. Il-firien tpoġġew lura fil-gaġeġ tagħhom wara l-kirurġija, u l-ikel u l-ilma ġew ipprovduti ad libitum. F'24 siegħa wara CLP, l-inċiżjoni ta 'qabel reġgħet infetħet u ċ-ċecum nekrotiku tneħħa bir-reqqa. Il-kavità addominali ġiet maħsula b'10 mL ta 'soluzzjoni salina sterili sħuna. L-inċiżjoni addominali reġgħet ingħalqet f'saffi. L-annimali ngħataw antibijotiku ta’ spettru wiesa’ kuljum (Naxcel 5 mg/kg) u nkisbet analġeżija b’buprenorphine SR (1.2 mg/kg) matul il-perjodu sperimentali ta’ 72 siegħa. L-aggregazzjoni tal-plejtlits ġiet imblukkata bl-għoti ta' kuljum ta' Clopidogrel (10 mg/kg/kuljum) għal 3 ijiem f'subsett ta' firien CLP (CLP flimkien ma' CLOP; n=12) permezz ta' gavage esophageal għal 3 ijiem. Fl-aħħar tal-protokoll, l-annimali ġew sagrifikati taħt anestesija profonda. Inġabru demm u tessuti għal aktar analiżi.
4.3. Iżolament tal-plejtlets
Id-demm arterjali ġie miġbud f'tubi vacutainer ta 'aċidu-ċitrat-dextrose u ċentrifugat f'200 × g għal 20 min biex tinkiseb plażma b'ħafna plejtlits. Plażma b'ħafna platelets (PRP) tħallat ma 'volum ugwali ta' buffer HEP (140 mmol/L NaCl, 2.7 mmol/L KCl, 3.8 mmol/L HEPES, 5 mmol/L EGTA, pH 7.4) li kien fih 1 µM PGE1. Din it-taħlita mbagħad ġiet ċentrifugata f'100 × g għal 20 min biex jitħaffef l-RBC u l-WBC li kien fadal li fihom intużaw 40 µL tas-supernatant biex jingħaddu l-plejtlits. Il-PRP imbagħad ġie ċentrifugat fi 800 × g għal 20 min, is-supernatant ġie mormi u l-pellet ġie sospiż mill-ġdid fil-buffer ta’ Tyrode (134 mmol/L NaCl, 12 mmol/L NaHCO3, 2.9 mmol/L KCl, 0.34 mmol/L Na2HPO4,1,1). mmol/L MgCl2, 10 mmol/L HEPES) li fih 5 mmol/L glukożju u 3 mg/mL BSA.
4.4. Ċitometrija tal-Fluss
Plejtlits iżolati friski (106) ġew sospiżi mill-ġdid f'50 µL ta' buffer ta' Tyrode. Il-plejtlits ġew inkubati (RT għal 30 min) bi CD41 kontra l-ġurdien konjugat (FITC) (Clone MWReg30, BioLegend, San Diego, CA, USA) u Allophycocyanin(APC) konjugat kontra l-ġurdien/far CD62P (Klonu RMP{{ {9}}, Bijoleġġenda). Minimu ta'10,000 avvenimenti għal kull gate ġew akkwistati bl-użu ta' MACsQuant Analyzer 10 (Miltenyi Biotec, Auburn, CA, USA) u analizzati bl-użu ta' softwer FlowLogic (Innovation, Sydney, Awstralja). Il-plejtlits kienu distinti permezz ta' rbit speċifiku ta' anti-CD41 u tifrix karatteristiku 'l quddiem u fil-ġenb. Il-plejtlits li tebgħu pożittivi għal CD41 u CD62P kienu nominati platelets attivati.
4.5. Mikroskopija konfokali u ħafifa
Il-plejtlits (107) minn firien Sham jew CLP jew stimulati b'LPS jew mingħajru tħallew jaderixxu ma' slides permanox (Lab-Tek, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Iċ-ċelloli aderenti ġew iffissati f'10 fil-mija formalin għal 30 min, maħsula 3Xs b'PBS għal 10 min atRT, u permeabilizzati b'100 fil-mija metanol kiesaħ bis-silġ għal 10 min. Il-pjastri ġew imblukkati f'PBS b'10 fil-mija serum tal-mogħoż u tal-fniek għal siegħa, maħsula u inkubati b'antikorp anti-NLRP3 tal-fenek (NBP2-12446, Novus Biologicals, Littleton, CO, USA) għal 2 sigħat f'RT. Slajds imbagħad ġew maħsula u inkubati b'Alexa Fluor 488 anti-fenek (A11070, Thermo FisherScientific) għal siegħa f'RT. Il-pjastri reġgħu ġew maħsula u inkubati b'antikorp anti-ASC tal-fenek konjugat Alexa Fluor647-(NBP1-78977AF647, Novus Biologicals) għal siegħa f'temperatura ambjentali. Il-kontrolli ġew ipproċessati b'mod identiku, ħlief għall-ommissjoni tal-antikorpi primarji. Il-preparazzjonijiet ġew immuntati f'Cytoseal 60 (Thermo Fisher Scientific) u analizzati fuq mikroskopju tal-iskannjar konfokali Nikon C1 (Nikon Inc., Melville, NY, USA). L-immaġini nqabdu permezz ta’ mikroskopju Nikon Eclipse 55i mgħammar b’kamera bil-kulur Nikon-Fi1 (Nikon) u ġew analizzati bl-użu ta’ softwer NIS-Elements D 3.0.
4.6. Kwantifikazzjoni ta 'Bijomarkaturi ta' Attivazzjoni Endoteljali u Ċitokini
Il-livelli fil-plażma ta' Angiopoietin-2 (MANG20, R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) u Endocan-1 (MBS039900, MyBioSource, San Diego, CA, USA) ġew imkejla bħala markaturi ta' disfunzjoni endoteljali minn ELISA skond għall-protokoll tal-manifattur. Plażma,kliewi, u l-pulmun IL-1 (RLB00, R&D Systems) u IL-18 (ab213909, Abcam, Boston, MA, USA) ġew ikkwantifikati mill-ELISA skont il-protokoll tal-manifattur.Kliewiu lisati tal-pulmun ġew ippreparati bil-BioPlex Cell Lysis Kit (171304011, BioRad, Hercules, CA, USA) skont il-protokoll tal-manifattur.
4.7. Valutazzjoni ta' Korriment tal-Pulmun
Histological evaluation was performed on the lungs via hematoxylin and eosin (H&E)staining. A lung lobe was formalin-fixed. The tissue was subsequently paraffin-embedded and 5-µm sections were stained with (H&E). Sections were evaluated for neutrophil infiltration into the alveolar space. Five sections were scored in a blinded fashion on a scale of0–2 with 0 representing o neutrophils in the alveolar space, 1 representing 1–5 neutrophils in the alveolar space, and 2 representing >5 newtrofili fl-ispazju alveolari. Stampi nqabdu permezz ta' mikroskopju Nikon Eclipse 55i mgħammar b'kamera bil-kulur Nikon DS-Fi1 (Nikon Inc.) f'40X bl-użu ta' softwer NIS-Elements D 3.0. Il-ħxuna tal-ħajt alveolari ġiet imkejla bl-użu ta 'softwer NIS-Elements D 3.0. Id-dejta ġiet normalizzata għal valuri sham.
4.8. Valutazzjoni ta' Korriment Glomerulari Renali
Kliewiwere collected, weighed, and fixed in a 10% buffered formalin solution. Paraffin sections (3 µm) were prepared and stained with Periodic acid-Schiff to assess the degree of glomerular injury on approximately 30 images per section, per rat. Thirtyglomeruli per section were scored in a blinded fashion on a 0–4 scale with 0 representing a normal glomerulus, 1 representing a 25% loss, 2 representing a 50% loss, 3 representing a 75% loss, and 4 representing >75 fil-mija telf ta 'kapillari fit-trofof. L-immaġini nqabdu bl-użu tal-istess mikroskopju, kamera, u softwer kif imsemmi qabel.
4.9. Kejl tal-Funzjoni Renali
Matul il-proċedura CLP, kateter ġie mdaħħal fil-vina ġugulari u esternalizzat taħt il-ġilda fuq wara tal-għonq. Il-kateter ġie mlaħalħa b'salina eparinizzata kuljum sat-tmiem tal-protokoll ta' tlett ijiem. Fl-aħħar jum tal-protokoll, il-firien għaddew minn anestesija qasira tal-isoflurane sabiex jiġbru l-apparat NIC-Kidney (MediBeacon; Mannheim, il-Ġermanja) magħmul minn żewġ dajowds li jarmu d-dawl li jeċitaw FITC sinistrin f’480 nm, fotodijodu li jarmi d-dawl f’ 531 nm, mikroproċessur, u batterija. Dan l-apparat kien imwaħħal mad-dahar tal-far bl-użu ta 'garża li teħel b'żewġ naħat (MediBeacon) u mwaħħla b'ġakketta tal-gerriema ma' reġjun imqaxxar fuq in-naħa ta 'wara tal-far. Il-firien tħallew jirkupraw f'gaġeġ separati għal 15-il minuta u ġie rreġistrat kejl tal-linja bażi. Wara l-kejl tal-linja bażi, ingħatat injezzjoni bolus ta' FITC-sinistrin (5 mg/100 g piż tal-ġisem; FTC-FS001, MediBeacon) permezz tal-vina ġugulari segwita minn injezzjoni bolus ta' salina sterili. Matul perjodu ta’ sagħtejn wara l-injezzjoni tal-bolus, il-kinetika ta’ eskrezzjoni ta’ FITC-sinistrin tkejlet b’mod transkutanju u ntużat biex tiġi kkalkulata l-half-life ta’ eliminazzjoni (t1/2) ta’ FITC-sinistrin bl-użu ta’ mudell ta’ kompartiment wieħed bis-softwer ta’ evalwazzjoni MDPLab (MediBeacon) biex tikkalkula GFR minn fattur ta 'konverżjoni vvalidat derivat empirikament [35,36].
reviżjoni cistanche: ittejjeb il-funzjoni tal-kliewi
4.10. Analiżi Statistika
L-analiżi tal-qawwa tiddetermina li n ta' 10–12-il annimali/grupp jikseb qawwa (1- ) ta' 0.80 u probabbiltà ta' żball tat-Tip 1 ( ) ta '0.05 biex tiskopri differenza ta' mill-inqas 5-10 fil-mija fl-attivazzjoni tal-plejtlits bejn il-firien Sham u CLP. Id-dejta kollha hija espressa bħala medja± SD. Id-dejta kollha ġiet iċċekkjata biex tkun konsistenti mad-distribuzzjoni Gaussjana mit-test tan-normalità D'Agostino-Pearson. Analiżi statistiċi saru b'ANOVA one-way bit-test ta' paraguni multipli ta' Tukey bħala analiżi post hoc. Valur ta' p < 0.05="" kien="" ikkunsidrat="" statistikament="">
Kontribuzzjonijiet tal-Awtur:
Konċettwalizzazzjoni, CAS, JMW, u DCC; metodoloġija, JMW u D.CC; validazzjoni, OKT, JMW, u DCC; analiżi formali, MB-R., CAS, OKT, JMW andD.CC; investigazzjoni, MB-R., CAS, OKT, RWT, CHB, CAG, GAT, JMW, u DCC; riżorsi, JMW u DCC; kurazzjoni tad-dejta, MB-R., CAS, u DCC; kitba—preparazzjoni tal-abbozz oriġinali, MB-R., u CAS; kitba—reviżjoni u editjar, MB-R., CAS, OKT, RWT, CHB, CAG, GAT, JMW, u DCC; viżwalizzazzjoni, MB-R., CAS, JMW, u DCC; superviżjoni, OKT, u DCC; amministrazzjoni tal-proġett, DCC; akkwist ta' fondi, DCC L-awturi kollha qraw u qablu mal-verżjoni ppubblikata tal-manuskritt.
Finanzjament:
Ir-riċerka rrappurtata f'din il-pubblikazzjoni kienet appoġġata mill-Istitut Nazzjonali tax-Xjenzi Mediċi Ġenerali tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa taħt in-Numru tal-Premju P20GM104357 u P30GM103328. Din ir-riċerka kienet iffinanzjata mill-Istitut Nazzjonali tal-Qalb tal-Pulmun u tad-Demm tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa taħt in-Numri tal-Premju F31HL149257 (OKT), R00HL130456 (DCC), u R01HL151407 (DCC), u l-Istitut Nazzjonali tad-Dijabete u Diġestiva uKilwaMardtal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa taħt Numru tal-Premju R01DK109133 (JMW) Il-kontenut huwa biss ir-responsabbiltà tal-awturi u mhux neċessarjament jirrappreżenta l-opinjonijiet uffiċjali tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa.
Dikjarazzjoni tal-Bord ta' Reviżjoni Istituzzjonali:
Il-proċeduri sperimentali kollha esegwiti f'dan l-istudju twettqu skont il-linji gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa għall-użu u l-kura tal-annimali. Il-protokolli kollha ġew approvati mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali fiċ-Ċentru Mediku tal-Università ta 'Mississippi (Protokoll 1487A, Approvat 07/02/2019). Il-kura u l-immaniġġjar tal-annimali kienu skont il-linji gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa għal trattament etiku tal-annimali.
Dikjarazzjoni tad-Disponibbiltà tad-Data:
Id-dejta kollha b'appoġġ għar-riżultati rrappurtati hija ppreżentata fil-manuskritt u hija disponibbli liberament.
Kunflitti ta' Interess:
L-awturi ma jesprimu l-ebda kunflitt ta' interess.
Referenzi
1. Greco, E.; Lupia, E.; Bosco, O.; Vizio, B.; Montrucchio, G. Platelets u Multi-Organ Failure f'Sepsis. Int. J. Mol. Sci. 2017, 18, 2200.
2. Rhee, C.; Dantes, R.; Epstein, L.; Murphy, DJ; Seymour, CW; Iwashyna, TJ; Kadri, SS; Angus, DC; Danner, RL; Fiore, AE; et al. Inċidenza u Xejriet ta' Sepsis fl-Isptarijiet tal-Istati Uniti bl-Użu ta' Dejta Klinika vs. Talbiet, 2009–2014. JAMA 2017, 318, 1241–1249.
3. Kim, WY; Hong, SB Sepsis u Sindrome ta' Distress Respiratorju Akut: Aġġornament Riċenti. Tuberc. Respir. Dis. (Seoul) 2016, 79, 53–57.
4. Alobaidi, R.; Basu, RK; Goldstein, SL; Bagshaw, SM Korriment akut fil-kliewi assoċjat ma' Sepsis. Semin. Nephrol. 2015, 35, 2–11.
5. Umbro, I.; Ġentili, G.; Tinti, F.; Muresan, P.; Mitterhofer, AP Avvanzi riċenti fil-patofiżjoloġija u l-bijomarkaturi ta 'korriment akut tal-kliewi kkaġunat minn sepsis. J. Infetta. 2016, 72, 131–142.
6. Bilevicius, E.; Dragosavac, D.; Dragosavac, S.; Araujo, S.; Falcao, AL; Terzi, RG Insuffiċjenza ta' organi multipli f'pazjenti settiċi. Braz. J. Infetta. Dis. 2001, 5, 103–110.
7. Liu, V.; Escobar, GJ; Greene, JD; Soule, J.; Whippy, A.; Angus, DC; Iwashyna, TJ Imwiet fl-Isptar f'pazjenti b'sepsis minn 2 koorti indipendenti. JAMA 2014, 312, 90–92.
8. Katz, JN; Kolappa, KP; Becker, RC Lil hinn mit-trombożi: Il-plejtlits versatili f'mard kritiku. Sidru 2011, 139, 658–668.
9. Smyth, SS; McEver, RP; Weyrich, AS; Morrell, CN; Hoffman, MR; Arepally, GM; Franċiż, PA; Dauerman, HL; Becker, RC; Platelet Colloquium, P. Funzjonijiet tal-plejtlets lil hinn mill-emostasi. J. Tromb. Haemost. 2009, 7, 1759–1766.
10. de Stoppelaar, SF; van 't Veer, C.; van der Poll, T. Ir-rwol tal-plejtlits fis-sepsis. Tromb. Haemost. 2014, 112, 666–677.
11. Nawaz, M.; Dickfeld, T.; Bogner, C.; Fateh-Moghadam, S.; Neumann, FJ Funzjoni tal-plejtlets f'sindromi settiċi ta' disfunzjoni ta' organi multipli. Kura Intensiva Med. 1997, 23, 379–385.
12. Layios, N.; Delierneux, C.; Hego, A.; Huart, J.; Gosset, C.; Lecut, C.; Maes, N.; Geurts, P.; Joly, A.; Lancellotti, P.; et al. Tbassir ta 'sepsis f'pazjenti morda b'mod kritiku permezz ta' markaturi ta 'attivazzjoni tal-plejtlits fuq id-dħul fl-ICU: Studju pilota prospettiv. Kura Intensiva Med. Exp. 2017, 5, 32.
13. Russwurm, S.; Vickers, J.; Meier-Hellmann, A.; Spangenberg, P.; Bredle, D.; Reinhart, K.; Losche, W. L-attivazzjoni tal-plejtlets u l-lewkoċiti jikkorrelataw mas-severità tad-disfunzjoni tal-organi settiċi. Xokk 2002, 17, 263–268.
14. Vanderschueren, S.; De Weerdt, A.; Malbrain, M.; Vankersschaever, D.; Frans, E.; Wilmer, A.; Bobbaers, H. Tromboċitopenja u pronjosi fil-kura intensiva. Krit. Kura Med. 2000, 28, 1871–1876.
15. Theofanis, E.; Semitekolou, M.; Morianos, I.; Sanitas, K.; Xanthou, G. Targeting NLRP3 Inflammasome Attivazzjoni f'Ażma Severa. J. Clin. Med. 2019, 8, 1615.
16. Haque, ME; Akther, M.; Jakaria, M.; Kim, IS; Azam, S.; Choi, DK Immira l-infjammasoma mikrogliali NLRP3 u r-rwol tiegħu fil-marda ta 'Parkinson. MOV. Disturb. 2020, 35, 20–33.
17. Liu, L.; Dong, Y.; Ye, M.; Jin, S.; Yang, J.; Joosse, ME; Sun, Y.; Zhang, J.; Lazarev, M.; Brant, SR; et al. Ir-Rwol Patoġeniku tal-Attivazzjoni tal-Inflammasome NLRP3 f'Mard Infjammatorju tal-Musrana Kemm tal-Ġrieden kif ukoll tal-Bnedmin. J. Crohn's Colitis 2017, 11, 737–750.
18. Danielski, LG; Giustina, AD; Bonfante, S.; Barichello, T.; Petronilho, F. L-NLRP3 Inflammasome u r-rwol tiegħu fl-Iżvilupp tas-Sepsis. Infjammazzjoni 2020, 43, 24–31.
19. Luo, YP; Jiang, L.; Kang, K.; Fei, DS; Meng, XL; Nan, CC; Pan, SH; Zhao, MR; Zhao, MY Hemin jinibixxi l-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3 f'korriment akut tal-pulmun ikkaġunat mis-sepsis, li jinvolvi heme oxygenase-1. Int. Immunofarmakol. 2014, 20, 24–32.
20. Qamar, JS; Lee, S.; Park, MA; Siempos, II; Haslip, M.; Lee, PJ; Yun, M.; Kim, CK; Howrylak, J.; Ryter, SW; et al. L-UCP2-sintażi tal-aċidu xaħmi indott jippromwovi l-attivazzjoni tal-infjammasomi NLRP3 waqt is-sepsis. J. Clin. Investig. 2015, 125, 665–680.
[PubMed]21. Gong, Z.; Zhou, J.; Li, H.; Gao, Y.; Xu, C.; Zhao, S.; Chen, Y.; Cai, W.; Wu, J. Curcumin irażżan l-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3 u tipproteġi kontra xokk settiku indott minn LPS. Mol. Nutr. Ikel Res. 2015, 59, 2132–2142.
22. Wang, P.; Huang, J.; Li, Y.; Chang, R.; Wu, H.; Lin, J.; Huang, Z. Il-Monossidu tal-Karbonju Eżoġenu Tnaqqas il-Ħsara Akuta fil-Kliewi Ikkaġunata minn Sepsis u Inibixxi l-Attivazzjoni tal-Inflammasome NLRP3 fil-Firien. Int. J. Mol. Sci. 2015, 16, 20595–20608.
23. Kalbitz, M.; Fattahi, F.; Karru, JJ; Jajou, L.; Malan, EA; Ġebel, FS; Huber-Lang, M.; Russell, MW; Ward, PA Attivazzjoni kkumplimentata tal-infjammasoma kardijaku NLRP3 fis-sepsis. FASEB J. 2016, 30, 3997–4006.
24. Bernard, GR; Vincent, JL; Laterre, PF; LaRosa, SP; Dhainaut, JF; Lopez-Rodriguez, A.; Steingrub, JS; Garber, GE; Helterbrand, JD; Ely, EW; et al. u Proteina umana rikombinanti CWEiSSsg. Effikaċja u sigurtà tal-proteina Ċ attivata mill-bniedem rikombinanti għal sepsis severa. N. Engl. J. Med. 2001, 344, 699–709.
25. Iba, T.; Thachil, J. Preżenti u futuri ta 'terapija antikoagulanti bl-użu ta' antithrombin u trombomodulin għal koagulazzjoni intravaskulari disseminata assoċjata mas-sepsis: Perspettiva mill-Ġappun. Int. J. Hematol. 2016, 103, 253–261.
26. Kornelju, DC; Baik, CH; Travis, OK; Abjad, DL; Żgħażagħ, CM; Austin Pierce, W.; Tarki, CA; Poudel, B.; Williams, JM NLRP3 inflammasome attivazzjoni fil-plejtlits bi tweġiba għal sepsis. Physiol. Rep 2019, 7, e14073.
27. Kornelju, DC; Travis, OK; Tramel, RW; Borges-Rodriguez, M.; Baik, CH; Greer, M.; Giachelli, CA; Tardo, GA; Williams, JM NLRP3 inibizzjoni inflammasome ttaffi l-attivazzjoni tal-plejtlits indotta minn sepsis u tipprevjeni korriment multi-organi fi titqib ta 'ligation cecal. PLoS ONE 2020, 15, e0234039.
28. Asaduzzaman, M.; Lavasani, S.; Rahman, M.; Zhang, S.; Braun, OO; Jeppsson, B.; Thorlacius, H. Platelets jappoġġjaw ir-reklutaġġ pulmonari ta 'newtrofili f'sepsis addominali. Krit. Kura Med. 2009, 37, 1389–1396.
29. Schrier, RW; Wang, W. Insuffiċjenza renali akuta u sepsis. N. Engl. J. Med. 2004, 351, 159–169.
30. Vincent, JL; Yagushi, A.; Pradier, O. Funzjoni tal-plejtlets fis-sepsis. Krit. Kura Med. 2002, 30, S313–S317.
31. Liverani, E.; Rico, MC; Tsygankov, AY; Kilpatrick, LE; Kunapuli, Riċettur SP P2Y12 Modula Infjammazzjoni Indotta minn Sepsis. Arter. Tromb. Vasc. Biol. 2016, 36, 961–971. [CrossRef]
32. Siner, JM; Bhandari, V.; Engle, KM; Elias, JA; Siegel, MD Livelli elevati ta' angiopoetin 2 fis-serum huma assoċjati ma' żieda
mortalità fis-sepsis. Xokk 2009, 31, 348–353.
33. Scherpereel, A.; Depontieu, F.; Grigoriu, B.; Cavestri, B.; Tsicopoulos, A.; Ġentili, T.; Jourdain, M.; Pugin, J.; Tunnel, AB; Lassalle, P. Endocan, markatur endoteljali ġdid fis-sepsis tal-bniedem. Crit Care Med. 2006, 34, 532–537.
34. Valerio-Rojas, JC; Jaffer, IJ; Kor, DJ; Gajic, O.; Cartin-Ceba, R. Riżultati ta 'sepsis severa u pazjenti ta' xokk settiku fuq trattament kroniku kontra l-plejtlits: Studju ta 'koorti storiku. Krit. Kura Res. Prattika. 2013, 2013, 782573.
35. Pill, J.; Issaeva, O.; Wonderer, S.; Sadick, M.; Kranzlin, B.; Fiedler, F.; Klotzer, HM; Kramer, U.; Gretz, N. Profil farmakoloġiku u tossiċità ta 'sinistrin ittikkettat bil-fluworexxeina, markatur ġdid għall-kejl tal-GFR. L-Ark ta’ Naunyn-Schmiedeberg. Pharmacol. 2006, 373, 204–211.
36. Pill, J.; Kraenzlin, B.; Jander, J.; Sattelkau, T.; Sadick, M.; Kloetzer, HM; Deus, C.; Kraemer, U.; Gretz, N. Sinistrin ittikkettat bil-fluorescein bħala markatur tar-rata ta 'filtrazzjoni glomerulari. Eur. J. Med. Chem. 2005, 40, 1056–1061.
