Parti 3: Effetti ta 'Isorhamnetin fuq id-dijabete u l-kumplikazzjonijiet assoċjati tagħha: reviżjoni ta' studji in vitro u in vivo u analiżi ta 'transcriptome post hoc tal-mogħdija molekulari involuta

Għal aktar informazzjoni. kuntatttina.xiang@wecistanche.com

5. Analiżi Post Hoc tat-Traskriptome Tbassar l-Effett Potenzjal tal-Isorhamnetin fuq id-Dijabete f'Għodda Ibbażata fuq Ċelloli Staminali

Stabbilijna għodda bbażata fuq iċ-ċelloli staminali bl-użu ta 'perinataliċellula staminali, ċelluli epiteljali amniotiċi tal-bniedem (hAECs), biex jevalwaw il-bijoattivitajiet ta 'komposti naturali li jużaw analiżi tal-mikroarray tal-ġenoma sħiħ [71,140-144]. F'dawn l-aħħar snin, numru dejjem aktar kbir ta 'komposti bijoattivi fil-pjanti mediċinali ġew skrinjati għall-effetti terapewtiċi u preventivi potenzjali tagħhom. F'dan il-kuntest, approċċi bbażati fuq ċelloli staminali li jużaw ċelloli staminali pluripotenti umani (hPSCs) jirċievu attenzjoni kbira bħala mudelli umani in vitro fiżjoloġikament aktar rilevanti għall-iskrinjar tad-droga u l-validazzjoni ta' eluf ta' komposti kemm fir-riċerka akkademika kif ukoll fl-industrija farmaċewtika[{{4} }]. Madankollu, l-hPSCs, inklużi ċelloli staminali embrijoniċi (hESCs) u ċelloli staminali pluripotenti indotti (hiPSCs), għandhom riżorsi limitati taċ-ċelluli, jeħtieġu proċeduri ta’ estrazzjoni invażivi, riprogrammazzjoni għaljin taċ-ċelloli, u proċeduri ta’ manutenzjoni kritiċi, kif ukoll joħolqu restrizzjonijiet etiċi, u għalhekk huma inqas favorevoli bħala sors prattiku għall-iskrinjar tad-droga. Min-naħa l-oħra, l-hAECs huma mneħħija mill-plaċenta tat-terminu mormija, prodott ta 'skart mediku. Ma jeħtiġux proċeduri ta' ħsad invażivi u għandhom tħassib etiku minimu. Barra minn hekk, l-hAECs huma de-rived mill-epiblasts pluripotenti u b'hekk iżommu potenzjal ta' differenzjazzjoni multilineage bħal ESC u jistgħu jiġu differenzjati f'ċelloli mit-tliet saffi tal-mikrobi [148-151].

Ta’ min jinnota li fuq protokoll xieraq ta’ differenzjazzjoni, l-hAECs jistgħu jiġu differenzjati f’ċelluli simili għall-epatoċiti [152-155], kolanġjoċiti [156], u, l-aktar importanti, ċelloli li jipproduċu l-insulina bħall-frixa[157-160 ]. Trapjant ta’ ċelluli pan-kreatiċi indotti minn hAEC fi ġrieden dijabetiċi indotti minn streptozotocin jista’ jinnormalizza l-livell tal-glukożju fid-demm[161]. hAECs[162], kif ukoll exosomes derivati ​​minn hAECs [163], jistgħu jaċċelleraw il-fejqan tal-feriti dijabetiċi permezz tal-promozzjoni tal-anġjoġenesi u l-funzjoni tal-fibroblasti u jnaqqsu l-infjammazzjoni. L-inkorporazzjoni ta 'hAECs f'organoids tal-gżejjer [164] u l-ilqugħ ta' gżejjer indiġeni b'saff ta' hAECs [165] jistgħu jtejbu t-tilqim tal-gżejjer u r-rivaskularizzazzjoni f'mudelli ta 'ġrieden dijabetiċi. Barra minn hekk, ċelluli simili għal epatoċiti derivati ​​minn hAEC, kif ukoll hAEC innifsu, ġew irrappurtati li għandhom effikaċja terapewtika f'mard tal-fwied, inkluż fibrożi epatika [166,167], ċirrożi [168], u insuffiċjenza epatika [169].

Meta wieħed iqis il-patofiżjoloġija kumplessa tad-DM, l-hAEC jista 'ma jkunx mudell ideali in vitro biex jistudja l-effetti anti-dijabetiċi ta' komposti. Madankollu, minħabba l-proprjetajiet tiegħu bħal ċelluli staminali, jista 'jintuża għall-iskrinjar inizjali tal-komposti fil-mira. Preċedentement esplorajna l-potenzjal [170] li jinduċi d-divrenzjar antifibrotiku[71] u epatiku ta 'isorhamnetin fl-hAECs. Fl-istudju preżenti, għamilna analiżi sekondarja mmirata tad-dejta ppubblikata qabel tagħna [71] biex nesploraw il-funzjonalitajiet potenzjali tal-isorhamnetin f'dijabete(Figure 4). Data analysis was conducted for three biological replicates of day 10 control (n = 3) and isorhamnetin-treated (n =3) hAECs. The cells were grown in 3D cell culture. Control cells were maintained in placental basal epithelial cell medium(Promo Cell, Cat.#C-26140)in absence of any differentiation medium or growth factors, whereas treatment cells were supplemented with 20 mM of isorhamnetin (Sigma-Aldrich, Japan) for 10 days. Differentially expressed genes (DEGs) are referred to as genes with a linear fold change>2 u p-valur<0.05(one-way between-subjects="" anova).="" a="" total="" of="" 303="" degs="" were="" identified;="" among="" them,="" 60="" were="" upregulated="" and="" 243="" were="" downregulated.="" details="" of="" methodology="" have="" been="" explained="" elsewhere="" [71,170].="" all="" microarray="" data="" are="" available="" at="" gene="" expression="" omnibus(geo)="" under="" accession="" number:="" gse153149="" (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc="GSE153149,accessed" on="" 24="" november="">

Ikklikkja hawn biex titgħallem aktar prodotti

5.1. Settijiet tal-ġeni tal-Firma tat-Tip taċ-Ċellula

Fl-istudji preċedenti tagħna dwar l-hAECs, sibna li tipi differenti ta 'komposti jistgħu jidderieġu d-divrenzjar ta' hAECs lejn nisel taċ-ċelluli differenti, bħal ester tal-aċidu caffeic, aċidu rosmariniku [142] u derivattiv tal-aċidu caffeoylquinic3,4,5- Tri-O-Caffeoylquinic Acid (TCQA)[140] li jista’ jsaħħaħ id-divrenzjar taċ-ċelluli newrali, filwaqt li antoċjanin, cyanidin-3-O-glucoside(Cy3G), indott id-divrenzjar tal-adipocyte [143] f’hAECs. Aħna osservajna li l-bijoattivitajiet jew il-funzjonalitajiet ta 'komposti naturali jistgħu ġeneralment jiġu mbassra mit-tipi ta' ċelluli arrikkit mid-DEGs.

Aħna eżaminajna s-settijiet tad-dejta tal-firma tat-tip taċ-ċelluli arrikkit b'mod sinifikanti bl-użu tal-Molecular Signatures Database (MSigDB) ver. 7.4 tas-softwer online GSEA (https://software. broadinstitute.org/gsea/index.jsp; aċċessata fis-26 ta’ Novembru 2021)[171]. Dawn is-settijiet tal-ġeni fihom ġeni tal-firma tal-markaturi tal-clusters għal tipi ta 'ċelluli identifikati fi studji ta' sekwenzar ta 'ċellula waħda ta' tessut uman u jiffaċilitaw l-assenjazzjonijiet tat-tip taċ-ċelluli f'settijiet ta 'dejta, bħal esperimenti ta' żvilupp ta 'mudelli organoid.

Sibna li s-sett tal-ġeni tat-tip taċ-ċellula l-aktar arrikkit b'mod sinifikanti kien iċ-ċelloli stromali mesenkimali tal-frixa [172] (Figura 4A). Barra minn hekk, it-tipi ta 'ċelluli duttali u endoteljali tal-frixa ġew arrikkit b'mod sinifikanti [172]. Ġeni tal-firma tal-frixa f'hAECs ittrattati b'isorhamnetin huma involuti fit-tranżizzjoni epiteljali-mesenkimali, sinjalazzjoni TGF, sinjalazzjoni TNF permezz ta 'NF-kB, sinjalazzjoni KRAS, u metaboliżmu tal-aċidu xaħmi. Diversi settijiet tal-ġeni tal-firma tal-fwied ġew ukoll arrikkit b'mod sinifikanti, bħal HSCs, ċelluli kupffer, ċelluli tal-kanal tal-bili [173], u ċelluli mesoteljali tal-fwied tal-fetu [174]. Kien hemm ukoll bosta settijiet ta' ġeni tal-firma tal-muskoli skeletriċi arrikkit b'mod sinifikanti, inklużi ċelluli fibrillin1 flimkien ma' proġenitur fibro-adipogenic (FBN1 flimkien ma FAP), ċelluli proġenitriċi fibro-adipoġeniċi (FAP), u pericites tal-muskoli skeletriċi [175]. Il-funzjonijiet bijoloġiċi tal-ġeni tal-firma tal-fwied f'hAECs ittrattati b'isorhamnetin jinkludu diversi mogħdijiet ta 'rispons infjammatorju, filwaqt li l-ġeni tal-firma tal-muskoli skeletriċi jirregolaw il-fejqan tal-feriti, l-organizzazzjoni tal-fibri tal-kollaġen u l-kaskata MAPK. Is-sinifikat tkejjel bħala r-rata ta' skoperta falza, analog tal-valur p iperġeometriku wara l-korrezzjoni ta' Benjamini u Hochberg għall-ittestjar ta' ipoteżi multipli (valur q FDR<>

5.2.Settijiet tal-ġeni Hallmark Arrikkit b'mod sinifikanti

Sussegwentement, eżaminajna s-settijiet ta' ġeni distintivi sinifikament arrikkit fuq MSigDB (irkuprat fis-26 ta' Novembru 2021). Is-settijiet tal-ġeni Hallmark jirrappreżentaw stati jew proċessi bijoloġiċi speċifiċi u definiti sew iġġenerati bbażati fuq l-identifikazzjoni ta' sovrapożizzjonijiet ta' sett ta' ġeni u ż-żamma ta' ġeni li juru espressjoni koerenti. Il-marki għandhom ġabra ta' 50 sett ta' ġeni kkondensati minn aktar minn 4000 sett ta' ġeni li jikkoinċidu u għalhekk naqqsu l-istorbju u s-superfiċjenza [176].

Settijiet ta’ ġeni sinifikattivi arrikkithom b’mod sinifikanti jinkludu ġeni li jiddefinixxu transizzjoni epiteljali-mesenkimali, ġeni regolati 'l fuq b'rispons għall-ipoksja, ġeni regolati minn NF-kB b'reazzjoni għal TNF, ġeni 'l fuq u regolati 'l isfel bl-attivazzjoni KRAS, ġeni li jimmedjaw l-apoptosi bl-attivazzjoni ta' caspases, ġeni involuti f' mijoġenesi, ġeni regolati 'l fuq b'rispons għal TGF- 1, ġeni regolati 'l fuq minn STAT5 bi tweġiba għall-istimulazzjoni ta' IL-2, ġeni li jiddefinixxu rispons infjammatorju, ġeni involuti f'mogħdijiet u netwerks p53, u ġeni li jikkodifikaw proteini involuti fil-glikolisi u glukoneġenesi (Figura 4B). Is-sinifikat kien ikkunsidrat fil-valur q tal-FDR<>

Sejba interessanti hija l-arrikkiment tal-attivazzjoni tal-KRAS mid-DEGs tal-hAECs ittrattati bl-isorhamnetin. Diversi espressjonijiet tal-ġeni indotti minn KRAS instabu li kienu rregolati b'mod sinifikanti minn isorhamnetin, bħal MMP9, TSPAN1, u ITGBL1. L-ipergliċemija tqanqal instabbiltà ġenomika li twassal għal mutazzjonijiet KRAS fiċ-ċelloli tal-frixa [177] u ġiet assoċjata wkoll ma 'riskju akbar u invażività tal-kanċer tal-frixa [178] u tal-kolon [179]. Wang et al. irrapportaw li l-isorhamnetin irażżan il-proliferazzjoni tal-linja taċ-ċelluli tal-adenokarċinoma tal-frixa PANC-1 permezz ta' attività tal-mogħdija tas-sinjalar Ras/MAPK li tirregola 'l isfel [134]. Għalhekk, kif imsemmi fit-Taqsima 4.2.4, l-effett ta 'isorhamnetin fuq ir-riskju ta' kanċer indott minn KRAS fid-dijabete, speċjalment kanċer tal-frixa, ta 'min ikompli jiġi esplorat.

5.3. Mogħdijiet Arrikkit b'mod sinifikanti

Analiżi ulterjuri tal-mogħdija tad-DEGs twettqet bl-użu tal-Komparative Toxicogenomics Database (CTD)(http://ctdbase.org/; aċċessata fid-29 ta’ Novembru 2021)[180]. CTD jirrappreżenta l-Enċiklopedija ta' Kjoto tal-Ġeni u l-Ġenomi (KEGG) u l-mogħdijiet REACTOME. Sibna li diversiinfjammatorjimogħdijiet, formazzjoni u assemblaġġ tal-kollaġen, mogħdija ta 'sinjalazzjoni PI3K-Akt, u mogħdija ta' sinjalazzjoni AGE-RAGE f'kumplikazzjonijiet dijabetiċi ġew arrikkit b'mod sinifikanti (Figura 4C).

Il-prodotti finali tal-glikazzjoni avvanzata (AGEs) huma prodotti permezz tal-glikazzjoni mhux enżimatika u l-ossidazzjoni tal-proteini, il-lipidi u l-aċidi nuklejċi. Ir-riċetturi għall-prodotti finali tal-glikazzjoni avvanzata (RAGE) jappartjenu għas-superfamilja tal-immunoglobulina. Is-sinjalar AGE/RAGE huwa kaskata kumplessa u kkomplikata li tattiva mogħdijiet multipli tas-sinjali intraċellulari li jinvolvu protein kinase C, NADPH oxidase, u MAPKs, li jirriżultaw f'espressjoni indotta minn NF-kB ta' IL-1, IL{-6, TNF- , VCAM-1, u VEGF. B'mod partikolari, is-sinjalar ta' AGE/RAGE kien implikat f'kalċifikazzjoni vaskulari medjata mid-dijabete permezz ta' attivazzjoni ta' mogħdijiet ta' fibrożi medjata minn TGF, NFkB, u ERK1/2 [181-184]. Sibna li l-isorhamnetin naqas b'mod sinifikanti l-espressjoni tal-ġeni relatata mas-sinjalar ta 'AGE/RAGE, bħal COL1A1, COL1A2, COL4A6, FN1, MMP2, u SERPINE1. Kif diskuss fit-taqsima preċedenti, l-effetti antifibrotiċi ta 'isorhamnetin ġew dokumentati tajjeb [71,74,99,119], u għalhekk, jista' jiġi affermat li isorhamnetin jista 'jkollu wkoll effetti ta' benefiċċju fil-patoloġija vaskulari indotta mid-dijabete.

5.4.Mard Metaboliku Sinjifikament Arrikkit u Espressjonijiet tal-Ġene Relatati

Id-dejta tal-assoċjazzjoni tal-ġeni u l-mard ikkurat ġiet irkuprata mis-CTD (irkuprata fid-29 ta’ Novembru 2021). Aħna ikkurajna biss mard metaboliku arrikkit b'mod sinifikanti. Is-sinifikat tal-arrikkiment ġie kkalkulat bid-distribuzzjoni iperġeometrika aġġustata bil-metodu Bonferroni. Mard metaboliku arrikkit b'mod sinifikanti kien jinkludi DM, glukożju, u disturbi fil-metaboliżmu tal-lipidi, ipergliċemija u obeżità (Figura 4D). Il-mappa tas-sħana turi li PPARs, TGFs, TNFs, ILs, collagen, u espressjonijiet tal-ġeni li jinduċu l-apoptosi kienu rregolati b'mod sinifikanti f'hAECs ittrattati b'isorhamnetin (Figura 4E). Min-naħa l-oħra, ir-riċetturi tal-insulina, il-lipoprotein lipases, u l-inibituri tal-apoptożi kienu regolati b'mod sinifikanti f'hAECs ittrattati b'isorhamnetin.

L-analiżi tad-dejta tal-microarray mmirata tagħna ta 'hAECs ittrattati b'isorhamnetin ikkonfermat ukoll il-potenzjal ta' isorhamnetin fir-regolazzjoni tal-funzjonijiet bijoloġiċi relatati mad-DM u l-kumplikazzjonijiet assoċjati tagħha.

6. Bijodisponibilità u Assorbiment intestinali ta 'Isorhamnetin Aglycone u d-Derivattivi Glycosylated tiegħu

Bil-preżenza ta 'diversi kategoriji ta'flavonojdifin-natura, huwa interessanti li tiġi analizzata l-preżenza ta 'dawn il-komposti fil-ġisem. Meta nitkellmu dwar il-metaboliżmu ta 'isorhamnetin u d-disponibbiltà tiegħu fil-ġisem tal-bniedem wara l-konsum, qed nitkellmu dwar l-oriġini, il-metaboliżmu u t-trasport. Dan huwa bbażat fuq osservazzjoni magħmula mill-kromatografija ta 'xi flavonoids bħal flavonols fis-serum uman. Il-kromatografija likwida-spettrometrija tal-massa tipprovdi ħarsa lejn il-bijodisponibilità ta 'ċerti flavonoids fil-forom ta' aglycone u glycoside tagħhom fil-ġisem [49]. L-ispettrometrija tal-massa tista 'tintuża biex tiddetermina l-flavonoids f'kampjuni bijoloġiċi [185]. Studju rrapporta 23 derivati ​​mħallta ta 'sulfat, metil, glukuronide, u glukożjuquercetinkemm fl-awrina kif ukoll fil-plażma ta 'voluntiera umani 1 siegħa wara l-inġestjoni ta' basal aħmar moqli ħafif. Dan l-istudju skopra glikosidi kemm tal-quercetin kif ukoll tal-isorhamnetin fil-plażma [186].

Diversi fatturi għandhom rwol fid-dħul ta 'nutrijenti mill-apparat diġestiv. Pereżempju, l-enzimi mill-mikrobijota intestinali jaffettwaw id-dħul ta 'komposti fenoliċi.

Studju li sar fuq l-estratti tal-weraq tal-ginkgo f'mudell ta 'ġrieden wera l-importanza tal-mikrobijota tal-musrana fuq il-bijodisponibilità u l-assorbiment mill-passaġġ gastrointestinali ta' xi molekuli bijoattivi, speċjalment isorhamnetin [187]. F'dan il-pass, l-enzimi tal-mikrobijota tal-musrana jipproduċuflavonojdiaglycones u varjetà ta 'prodotti ta' fissjoni taċ-ċirku. Analiżi tal-kampjuni tad-demm sħiħ indikaw li l-assorbiment ta 'isorhamnetin żdied bi trattament antibatteriku, li jissuġġerixxi li l-enzimi tal-mikrobijota tal-musrana għandhom effett negattiv fuq il-farmakokinetiċi ta' molekuli naturali, bħal isorhamnetin.Antibatteriċijew konsum probijotiku jista 'jżid il-bijodisponibilità tal-forma glycoside ta' isorhamnetin. Barra minn hekk, ir-rati ta 'bijotrasformazzjoni in vitro u l-ħinijiet ta' residenza ta 'molekuli bijoattivi kienu differenti bejn firien normali, dijabetiċi u dijabetiċi ta' nefropatija [188].

Min-naħa l-oħra, trasportaturi tal-membrana differenti jikkontrollaw it-trasport tal-flavonoids, bħat-trasportatur tal-glukożju dipendenti mis-sodju 1(SGLT1) u l-proteini 2 u 3 assoċjati mar-reżistenza għal ħafna mediċini (MRP2 u MRP3)[189]. F'dan il-kuntest, it-trasportaturi MRP jirregolaw il-mogħdijiet tat-trasport transċellulari u paraċellulari ta 'isorhamnetin [190]. Ġewwa ċ-ċelloli, it-trasport ta' l-iżorhamnetin min-naħa apikali għan-naħa bażali kien 6.8-9.3-darbiet ogħla. Fil-Figura 5, l-effetti kontra d-dijabete ta 'isorhamnetin huma mqassra.

7. Konklużjonijiet

Isorhamnetin huwa kompost fenoliku tal-familja flavonoid, b'mod aktar preċiż tal-flavonols. Oriġinarjament hija molekula quercetin iżda għaddiet minn metilazzjoni. Isorham-netin huwa mqassam fir-renju tal-pjanti f'ħafna pjanti selvaġġi u kosmetiċi. Barra minn hekk, diversi pjanti mediċinali jipproduċu din il-molekula u diversi studji attestaw l-effett anti-dijabetiku tagħha fost attivitajiet bijoloġiċi oħra. Din id-dejta kollha għalhekk turi l-interess ta 'isorhamnetin fl-industrija terapewtika. Minn din il-perspettiva, ikun interessanti ħafna li jiġi esplorat l-effett tal-isorhamnetin u d-derivattivi tiegħu, iżolati speċjalment mir-riżorsi naturali, fuq disturbi metaboliċi. Huwa wkoll meħtieġ li jiġu enfasizzati u riveduti l-istudji kliniċi mwettqa f'dan il-kuntest bl-użu ta 'frazzjonijiet rikki flavonoid u prodotti naturali sabiex jiġi evitat l-impatt ta' effetti sekondarji kkawżati minn drogi sintetiċi u kimiċi.

Referenzi

1. Gill, SS; Tuteja, N. Speċi ta 'ossiġnu reattiv u makkinarju antiossidant f'tolleranza ta' stress abijotiku f'pjanti ta 'uċuħ tar-raba'. Physiol tal-Pjanti. Biochem. 2010, 48, 909–930. [CrossRef] [PubMed]

2. Corpas, FJ; Gupta, DK; Palma, JM Siti ta' produzzjoni ta' speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) f'organelli minn ċelloli tal-pjanti. Fi Speċi ta 'Ossiġenu Reattiv u Ħsara Ossidattiva f'Pjanti taħt Stress; Springer: Berlin/Heidelberg, il-Ġermanja, 2015; pp. 1–22.

3. Falleh, H.; Oueslati, S.; Guyot, S.; Dali, AB; Magné, C.; Abdelly, C.; Kouri, R. Karatterizzazzjoni LC/ESI-MS/MS ta 'procyanidins u propelargonidins responsabbli għall-attività antiossidant qawwija tal-halophyte li jittiekel Mesembryanthemum edule L. Food Chem. 2011, 127, 1732–1738. [CrossRef]

4. Trabelsi, N.; Oueslati, S.; Falleh, H.; Waffo-Téguo, P.; Papastamoulis, Y.; Mérillon, J.-M.; Abdelly, C.; Ksouri, R. Iżolament ta 'antiossidanti qawwija mill-halophyte mediċinali Limoniastrum guyonianum. Chem tal-Ikel. 2012, 135, 1419–1424. [CrossRef] [PubMed]

5. Boulaaba, M.; Mkadmini, K.; Tsolmon, S.; Han, J.; Smaoui, A.; Kawada, K.; Ksouri, R.; Isoda, H.; Abdelly, C. Effett antiproliferattiv in vitro ta 'estratti ta' Arthrocnemum Indicum fuq ċelluli tal-kanċer Caco-2 permezz ta 'kontroll taċ-ċiklu taċ-ċelluli u identifikazzjoni relatata tal-fenol LC-TOF-MS. Evid.-Komplement Ibbażat. Alternattiv. Med. 2013, 2013, 529375. [CrossRef]

6. Karker, M.; De Tommasi, N.; Smaoui, A.; Abdelly, C.; Ksouri, R.; Braca, A. Flavonoids sulfatati ġodda minn Tamarix Africana u attivitajiet bijoloġiċi tal-estratt polari tiegħu. Planta Med. 2016, 82, 1374–1380. [CrossRef]

7. Bourgou, S.; Rebey, IB; Mkadmini, K.; Isoda, H.; Kouri, R.; Kouri, WM LC-ESI-TOF-MS u GC-MS profiling ta 'Artemisia erbali u evalwazzjoni tal-proprjetajiet bijoattivi tagħha. Ikel Res. Int. 2017, 99, 702–712. [CrossRef]

8. Boulaaba, M.; Medini, F.; Hajlaoui, H.; Mkadmini, K.; Falleh, H.; Kouri, R.; Isoda, H.; Smaoui, A.; Abdelly, C. Attivitajiet bijoloġiċi u analiżi fitokimika ta 'estratti fenoliċi minn Salsola kali L. Rwol ta' fatturi endoġeni fl-għażla tal-aħjar estratti tal-pjanti. S. Afr. J. Bot. 2019, 123, 193–199. [CrossRef]

9. Najjar, H.; Abdelkarim, BA; Doria, E.; Boubakri, A.; Trabelsi, N.; Falleh, H.; Tlili, H.; Neffati, M. Kompożizzjoni fenolika ta' xi pjanti mediċinali Tuneżini assoċjati ma' effett anti-proliferattiv fuq iċ-ċelluli MCF-7 tal-kanċer tas-sider uman. EuroBiotechnol. J. 2020, 4, 104–112. [CrossRef]

10. Bourgou, S.; Bettaieb Rebey, I.; Ben Kaab, S.; Hammami, M.; Dakhlaoui, S.; Sawsen, S.; Msaada, K.; Isoda, H.; Ksouri, R.; Fauconnier, M.-L. Solvent Aħdar biex Jissostitwixxi Hexane għall-Estrazzjoni ta 'Lipidi Bijoattivi minn Kemmun Iswed u Żrieragħ tal-ħabaq. Ikel 2021, 10, 1493. [CrossRef]