Parti 2: Omoarginine Ittejjeb in-Nefropatija Dijabetika Indipendenti Miċ-Nitric Oxide Synthase-3

Għal aktar informazzjoni. kuntatttina.xiang@wecistanche.com

3. RIŻULTATI

3.1 Karatteristiċi tal-ġurdien

Ġrieden dijabetiċi selvaġġi u NOS3- kellhom piż tal-ġisem b'mod sinifikanti inqas meta mqabbel ma 'ġrieden mhux dijabetiċi wara 24 ġimgħa, li żdied b'mod sinifikanti bl-omoarginine fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-7. Il-glukożju fid-demm kien ogħla fit-tipi selvaġġi dijabetiċi kollha u l-ġrieden NOS3-7. Il-proporzjon tal-kliewi/piż tal-ġisem kien ogħla b'mod sinifikanti fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-7, filwaqt li t-trattament b'omoarginine naqqas b'mod sinifikanti l-proporzjon tal-qalb/piż tal-ġisem fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-. Il-pressjoni tad-demm sistolika żdiedet b'mod sinifikanti fil-ġrieden NOS3-7meta mqabbla mat-tip selvaġġ u wriet xejra ta' tnaqqis; għalkemm mhux sinifikanti permezz ta' trattament b'omoarginine fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-/. (Tabella 1).

3.2 L-omoarġinina tnaqqas l-albuminurja fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-/-

Id-dijabete żiedet b'mod sinifikanti l-albuminurja kemm fil-ġrieden tat-tip selvaġġ kif ukoll NOS3-/ meta mqabbla man-normal, effett imnaqqas b'mod sinifikanti bit-trattament bl-omoarginine (Figura 1). Peress li r-riżultati osservati fil-ġrieden tat-tip selvaġġ kienu konsistenti mal-istudju preċedenti tagħna (Wetzel et al., 2019) dwar l-effett protettiv tal-omoarginine fid-DN, aħna analizzajna biss NOS3-/ġrieden għall-bqija ta 'dan l-istudju.

3.3 L-omoarġinina tnaqqas il-livelli ta' BUN fil-plażma fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-7-

Wara evalwajna l-effetti tal-għoti tal-omoarginine fuq il-livelli ta' BUN fil-plażma fil-ġrieden NOS3-. Il-livelli ta 'BUN fil-plażma żdiedu fil-ġrieden dijabetiċi u tnaqqsu permezz ta' trattament b'omoarginine (Figura 2).

Ikklikkja biex tkun taf dwar l-użi organiċi ta' cistanche

3.4 L-espressjonijiet NOS1 u NOS2 mhumiex mibdula fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-

Sussegwentement, iddeterminajna jekk id-dijabete u/jew l-omoarginine biddlux l-espressjoni ta' isoformi oħra ta' NOS fil-kliewi minn ġrieden NOS3 -. Ir-riżultati tagħna juru li la d-dijabete u lanqas l-omoarginine ma affettwaw l-espressjoni tal-ġeni NOS1 jew NOS2 fil-ġrieden NOS3-7 (Figura 3).

3.5 L-omoarġinina tnaqqas il-patoloġija glomerulari u l-fibrożi fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-

Analiżi ta 'sezzjonijiet glomerulari mtebbgħin PAS uriet li l-ġrieden NOS3--dijabetiċi kienu assoċjati ma' żieda fil-volum glomerulari, ċellulari glomerulari, ħxuna tal-membrana tal-kantina glomerulari (GBM), u indiċi ta 'ħsara glomerulari meta mqabbla ma' ġrieden NOS3一 mhux dijabetiċi; effett imnaqqas b'mod sinifikanti bl-użu ta 'trattament omoarginine (Tabella 2 u Figura 4a). Barra minn hekk, il-ġrieden NOS3 dijabetiċi wrew perċentwal akbar ta 'fibrożi (bl-użu ta' ImageJ) f'sezzjonijiet imtebbgħin trikromju ta 'Masson (Figura 4b,c) 24 ġimgħa wara d-dijabete, li tnaqqset permezz ta' trattament b'homoarginine.

3.6 L-omoarġinina tnaqqas il-markaturi fibrotiċi tal-kliewi fil-ġrieden NOS3-/- dijabetiċi

Analiżi tal-PCR f'ħin reali turi żidiet notevoli fil-fibronektin tal-kliewi (Figura 5a), TGF (Figura 5b), actin tal-muskoli lixxi (Figura 5c), u E-cadherin (Figura 5d) wara d-dijabete f'NOS 3-/ġrieden. Is-supplimentazzjoni ta 'l-omoarġinina tnaqqas b'mod sinifikanti ż-żieda f'dawn il-markaturi tal-fibrożi.

3.7 L-omoarġinina tnaqqas l-infiltrazzjoni tal-makrofaġi glomerulari f'NOS3-/ġrieden dijabetiċi

NOS3-/ġrieden dijabetiċi wrew żieda notevoli fil-makrofagi tal-kliewi infiltranti wara d-dijabete (Figura 6) meta mqabbla ma 'ġrieden mhux dijabetiċi. It-trattament b'Homoarginine naqqas b'mod sinifikanti l-infiltrazzjoni tal-makrofagi 24 ġimgħa wara d-dijabete.

3.8 Omoarginine tnaqqas il-fibrożi kardijaka u ttejjeb il-funzjoni kardijaka fil-ġrieden dijabetiċi NOS3-7-r

Ġrieden dijabetiċi NOS3-/ urew perċentwal akbar ta’ fibrożi (bl-użu ta’ ImageJ) f’sezzjonijiet imtebba’ bil-trikromju ta’ Masson (Figura 7a,b) 24 ġimgħa wara d-dijabete, li tnaqqset permezz ta’ trattament b’homoarginine. Barra minn hekk, ġrieden dijabetiċi NOS3-7 kellhom tnaqqis sinifikanti fil-frazzjoni ta' ejection (EF) u frazzjonali li qed tiċkien (FS) (Figura 7c-e) meta mqabbla ma' kontrolli mhux dijabetiċi fi 22 ġimgħa ta' dijabete, effett restawrat b'mod sinifikanti bl-użu ta' homoarginine trattament.

3.9 Homoarginine jirrestawra l-kumpless MCU u r-regolaturi tiegħu fil-ġrieden dijabetiċi Ins2Akita

Kampjuni tal-kliewi derivati ​​mill-pubblikazzjoni preċedenti tagħna (Wetzel et al.,2019) ġew analizzati għall-kumpless MCU u r-regolaturi tiegħu. Il-ġrieden dijabetiċi kellhom żieda sinifikanti fl-MCU tal-kliewi u r-regolatur pożittiv tiegħu, l-espressjoni MCUR1, flimkien ma’ tnaqqis fir-regolatur negattiv tal-MCU tal-kliewi, l-espressjoni MICU1 (Figura 8), meta mqabbla ma’ kontrolli mhux dijabetiċi ta’ 18-il ġimgħa fil-ġrieden Ins2Ak, filwaqt li ġrieden dijabetiċi kkurati b'supplimentazzjoni ta 'homoarginine restawraw il-kumpless MCU u r-regolaturi tiegħu għal livelli normali.

3.10 Homoarginine jirrestawra l-ġrieden kumplessi tal-MCU u r-regolaturi tiegħu fin-NOS dijabetiċi3-7-

NOS 3-/ġrieden dijabetiċi kellhom żieda sinifikanti fl-MCU tal-kliewi (Figura 9a) flimkien ma 'tnaqqis sinifikanti fir-regolatur negattiv tagħha, l-espressjoni MICUl (Figura 9b, c), meta mqabbla ma' kontrolli mhux dijabetiċi wara 24 ġimgħa ta 'dijabete , billi ġrieden dijabetiċi NOS3-kkurati b'supplimentazzjoni ta' homoarginine restawraw il-kumpless MCU u r-regolatur negattiv tiegħu għal livelli normali.

4 DISKUSSJONI

In-nefropatija dijabetika tibqa' kumplikazzjoni importanti u mhux solvuta tad-dijabete. Il-pubblikazzjoni preċedenti tagħna wriet li s-supplimentazzjoni ta 'homoarginine tagħtikliewiprotezzjoni f’mudelli ta’ ġrieden dijabetiċi (Wetzel et al., 2019). Madankollu, il-mekkaniżmu eżatt li bih l-omoarginine jimmedja dawn l-effetti ma kienx ċar. L-istudju attwali juri li s-supplimentazzjoni ta 'homoarginine timmedjarenaliprotezzjoni tat-tessuti f'DN indipendenti minn NOS3 li fl-aħħar mill-aħħar se tbiddel il-fehim tagħna tal-mekkaniżmu(i) li bihom l-omoarginine jinduċi protezzjoni renali u kardijaka fid-DN. L-effett protettiv ta 'homoarginine fid-DN jista' jiġi medjat permezz tat-titjib tal-funzjoni mitokondrijali.

Disfunzjoni endoteljali, ikkaratterizzata minn bijodisponibilità mnaqqsa ta 'NO, u stress ossidattiv miżjud hija karatteristika distintiva tad-dijabete (Creager et al., 2003) u DN (Goligorsky et al., 2001). Ir-rwol tal-espressjoni u l-azzjoni NOS3 fid-DN huwa kontroversjali; għalhekk għalkemm intwera li l-livell baxx jew in-nuqqas ta’ NOS3 jaggrava d-DN (Wang et al,2011; Zhao et al.,2006), pubblikazzjoni reċenti (Natarajan et al.,2019) wriet li l-espressjoni żejda ta’ NOS3 fil-ġrieden Ins2Aki taggrava DN probabbilment permezz ta' diżakkoppjar akbar ta' NOS3 u stress ossidattiv aktar milli b'żieda fil-produzzjoni/azzjoni ta' NO renali. Minħabba li l-omoarginine jista 'jkun sottostrat għal NOS billi jżid L-arginine (Hecker et al., 1991; Moali et al., 1998), jista' wkoll jimmedja l-effett tiegħu permezz ta 'azzjoni/produzzjoni NO. Madankollu, il-pubblikazzjoni preċedenti tagħna wriet li s-supplimentazzjoni orali ta 'arginine sorprendentement ma pprovdietx jew tnaqqas l-ebda markatur ta' ħsara fil-kliewi f'mudelli ta 'ġrieden dijabetiċi, minkejja li żiedu b'suċċess il-livelli ta' arginine fil-plażma u l-kliewi (You et al.,2014). L-interazzjoni diretta bejn il-livelli ta 'homoarginine u l-produzzjoni ta' NO hija kontroversjali. Homoarginine jista' jnaqqas is-sintesi NO mill-arginine permezz ta' (a)kompetizzjoni ta' arginine u homoarginine għall-assorbiment ċellulari minn trasportaturi katjoniċi ta' amino acids (CAT) (Chafai et al, 2017; Hagos et al.,2006); (b) permezz ta' trans-stimulazzjoni ta' CAT, li mbagħad jista 'jżid l-effluss ċellulari ta' arginine; u (c) b'kompetizzjoni ta 'homoarginine u arginine għal NOS(Pilz et al., 2015), għalkemm l-omoarginine huwa sottostrat inqas effiċjenti għal din l-enzima (Moali et al.,1998; Zwan et al,2013). Għalkemm l-omoarginine jista 'jżid id-disponibbiltà ta' l-arginine u għalhekk is-sintesi NO bl-inibizzjoni ta 'arginase, dan huwa improbabbli minħabba l-affinità dgħajfa ta' homoarginine għal arginase (Marz et al, 2010). Madankollu, l-omoarginine jista 'jikkontribwixxi għas-sintesi ta' NO billi jservi bħala sottostrat għal NOS għax l-omoarginine, anke bl-affinità aktar dgħajfa tiegħu għal NOS meta mqabbel ma 'arginine, jista' jiġi metabolizzat għal NO u homocitrulline (Drechsler et al., 2011).

Biex teżamina l-mekkaniżmu ta 'l-effett protettiv ta' homoarginine fid-DN, investigajna l-effetti ta 'supplimentazzjoni ta' homoarginine fuq disfunzjoni tal-kliewi, bidliet istopatoloġiċi glomerulari, u reklutaġġ ta 'makrofagi f'NOS3-/-u l-mudell tal-ġurdien dijabetiku littermate tat-tip selvaġġ tagħhom. Is-supplimentazzjoni ta' l-omoarġinina tejbet b'mod sinifikanti l-albuminurja dijabetika f'ġrieden dijabetiċi selvaġġi u NOS3-7, li tikkonferma s-sejba preċedenti tagħna (Wetzel et al, 2019), u kienet assoċjata ma' patoloġija glomerulari mnaqqsa u espressjoni ta' markaturi fibrotiċi tal-kliewi f'NOS{{ dijabetiċi. 5}}ġrieden.

Meħuda flimkien, ir-riżultati tagħna jindikaw rwol dirett tal-effett protettiv tal-homoarginine fid-DN u jappoġġjaw il-kunċett li l-homoarginine jimmedja l-protezzjoni tat-tessut renali indipendenti minn NOS3. Kemm il-morbidità kardjovaskulari kif ukoll il-mortalità huma miżjuda f'pazjenti b'DN. Fil-qalb, livelli aktar baxxi ta 'omoarginine huma relatati ma' żieda fit-tħaxxin tal-ventrikulari tax-xellug, EF aktar baxx, u NTproBNP ogħla (Bahls et al.,2018). Bil-maqlub, is-supplimentazzjoni tal-omoarginine tippreserva l-funzjoni kardijaka fil-mudell murin ta 'insuffiċjenza tal-qalb wara infart mijokardijaku (Atzler et al.,2017). Fl-istudju attwali, nuru wkoll li l-effett protettiv ta 'homoarginine biex itejjeb il-funzjoni kardijaka u jnaqqas il-fibrożi kardijaka huwa indipendenti mill-espressjoni ta' NOS3 b'mod simili għall-effett tiegħu fuq il-kliewi. Ma nistgħux madankollu neskludu l-effett emodinamiku tal-omoarginine fid-DN minħabba t-tendenza tagħha li tnaqqas il-pressjoni tad-demm; għalkemm mhux sinifikanti.

Il-mekkaniżmu tal-effett protettiv homoarginine jidher li huwa marbut ma 'modulazzjonijiet tal-funzjoni mitokondrijali regolati mill-kumpless MCU u r-regolaturi tiegħu. Disfunzjoni mitokondrijali għandha rwol ċentrali fil-korriment tal-kliewi (Brooks et al.,2009;Coughlan &Sharma,2016;Hallan & Sharma,2016;Long et al..2016; Sharma,2015; Sun et al.2008;Wang et al. .,2012;You et al.,2016;Yu et al 2006;Zhan et al.,2013).Fil-kliewi, iċ-ċelloli endoteljali huma speċjalment vulnerabbli għal disfunzjoni mitokondrijali (Hong et al.,2012) u jikkontribwixxu għal stress ossidattiv, tnaqqis persistenti tal-enerġija, indeboliment ta 'mekkaniżmi ta' tiswija dipendenti fuq l-enerġija, u mewt taċ-ċelluli fil-ħsara fil-kliewi (Funk et al., 2010; Funk & Schnellmann, 2012).MCU huwa kumpless multimeriku involut fl-assorbiment rapidu ta 'Ca' fil-mitokondrija u ġie muri li jkun disregolat fil-patoloġija kardijaka (Liao et al.,2015; Luongo et al.,2015; Nemaniet al,2018; Tomar et al,2019; Woods et al,2019). Ca2 mitokondrijali flimkien ma 'assorbiment medjat mill-kumpless MCU għandu rwol kritiku fit-trasduzzjoni tas-sinjali, il-bijoenerġetika u l-mewt taċ-ċelluli, u d-disregolazzjoni tagħha hija marbuta ma' diversi mard tal-bniedem. Għalkemm l-apoptosi tal-podoċiti ġiet marbuta ma 'disregolazzjoni tal-MCU (Xu et al.,2018; Yuan et al.,2017), ir-rwol tal-kumpless MCU u l-interazzjoni tiegħu mas-supplimentazzjoni tal-homoarginine f'DN mhumiex magħrufa. Id-dejta attwali tagħna fil-ġrieden dijabetiċi wriet li l-amministrazzjoni ta 'homoarginine naqqset b'mod sinifikanti l-espressjoni ta' MCU, żiedet ir-regolatur negattiv tal-MCU (MICU1), u naqqset ir-regolatur pożittiv tal-MCU (MCUR1) f'DN, u dan l-effett huwa indipendenti mill-espressjoni NOS3. Għalhekk, aħna nispekulaw li hemm assoċjazzjoni bejn is-sinjalar ta 'Ca' mitokondrijali u riżultati kliniċi avversi fid-DN. In-normalizzazzjoni tal-funzjoni mitokondrijali hija meħtieġa biex tirrestawra l-metaboliżmu ossidattiv matul DN. Huma meħtieġa studji addizzjonali biex jikkonfermaw l-effett dirett ta 'homoarginine fuq il-funzjoni mitokondrijali.

Bħala konklużjoni, l-istudju tagħna juri għall-ewwel darba li l-mekkaniżmu ta 'protezzjoni tat-tessut renali u kardijaku bl-użu ta' supplimentazzjoni ta 'homoarginine f'DN huwa indipendenti minn NOS3, u x'aktarx huwa medjat bit-titjib tad-disfunzjoni mitokondrijali. Ir-riżultati tal-istudju tagħna jistgħu finalment jirriżultaw f'interventi terapewtiċi ġodda mfassla biex iżidu l-homoarginine fit-trattament tad-DN.

Benefiċċji ta'Cistanche

1. Cistanche hija mediċina tradizzjonali Ċiniża tajba ħafna għat-tonifikazzjoni tal-kliewi. Jista 'mhux biss tonify l-yin tal-kliewi, iżda wkoll tonify l-yang tal-kliewi, u l-effett farmakoloġiku tiegħu huwa relattivament ħafif. Imbagħad hija aħbar tajba għall-irġiel.

2. Cistanche hija rikka fl-alkalojdi,echinacoside, u sustanzi newtrali kristallini, kif ukoll xi oligoelementi u vitamini, li jistgħu jsaħħu b'mod effettiv il-kliewi, il-yang u d-demm. Għandu effett tajjeb fuq is-sintomi ta 'defiċjenza yang, u jista' effettivament jipprevjeni l-fenomenu ta 'telf ta' piż.

3. Cistanche jistgħu mhux biss jittrattaw maskiliimpotenza, emissjoni bil-lejl, u eġakulazzjoni prematura, tista 'wkoll tittratta l-mestrwazzjoni irregolari tan-nisa, amenorrea, u mard ġinekoloġiku ieħor.

Min aktar ma jistax jiekol cistanche

1. Dawk b'defiċjenza ta 'yin tal-kliewi. Minħabba l-effett ta 'Cistanche fit-tisħin u nutrizzjoni tal-kliewi-yang, nies b'defiċjenza ta' yin tal-kliewi se jaggravaw is-sintomi ta 'defiċjenza ta' yin bħal ħames sħana mqalleb, irqad bla kwiet u mimdud, aktar ħolm, ilsien aħmar, u inqas kisi, sabiex in-nies b'defiċjenza ta 'yin tal-kliewi m'għandux jiekol cistanche.

2. Nies b'dijarea minħabba defiċjenza tal-milsa. Cistanche għandu l-effett li jxarrab in-nixfa u twitti l-imsaren. Nies b'defiċjenza tal-milsa u dijarea jistgħu jaggravaw is-sintomi tad-dijarea u l-ippurgar maħlul. Għalhekk, nies b'defiċjenza tal-milsa u dijarea m'għandhomx jieklu cistanche.

3. Minuri. Cistanche huwa toniku qawwi. Minuri għadhom fl-istadju tal-iżvilupp fiżiku u mentali. Tiekol cistanche ma jwassalx għat-tkabbir u l-iżvilupp tagħhom stess. Għalhekk, jekk ma jkunx meħtieġ, huwa rakkomandat li l-minuri ma jieklux cistanche.

Għalhekk, jekk għandek bżonn ssaħħaħ il-kliewi tiegħek, Cistanche huwa suppliment tajjeb, u jekk għandek kundizzjonijiet oħra, jekk jogħġbok użah taħt il-parir tat-tabib tiegħek.