Parti II: Karatteristiċi tad-Distribuzzjoni tal-Flora Imsaren f'Pazjenti b'Defiċjenza ta' Yang fil-Msa u l-Kliewi Wara Risezzjoni Radikali Ta' Stadju II (Riskju għoli)/stadju III Kanċer tal-Kolon Ⅷ
Sep 30, 2024
1 Sfond tar-riċerka
Ye Tianshi ppropona fil-"Każijiet Mediċi tal-Gwida Klinika" li "is-sitt qi iweġġgħu lin-nies, u jinbidel skont il-persuna. Nies b'defiċjenza ta' yin għandhom nar qawwi, u l-ħażen jirritorna fil-kamp aktar spiss; nies b'defiċjenza ta' yang għandhom umdità qawwija, u l-ħażen iweġġa 'l-qi aktar spiss." Jiġifieri, nies b'defiċjenza ta 'yin jew nar qawwi huma faċilment invaditi minn qi ħażen sħun u sħun, filwaqt li nies b'defiċjenza yang jew yin qawwi u kiesaħhuma faċilment affettwati minn qi ħażen kiesaħ u niedja, li huwa l-hekk imsejjaħ "qi l-istess jattira lil xulxin".Il-mediċini tal-kimoterapija jistgħu faċilment jagħmlu ħsara lill-milsa u lill-kliewi tal-ġisem tal-bniedem, li jwassal għal soppressjoni tal-mudullun; abbażi ta’ dan, jista’ jiġi dedott li għal nies b’defiċjenza tal-milsa u tal-kliewi, il-mediċini tal-kimoterapija jistgħu jkunu aktar probabbli litagħmel ħsara lill-milsa u lill-kliewi, li jirriżulta f'soppressjoni tal-mudullun.
Skont it-teorija li "dak li hemm ġewwa għandu jiġi rifless barra" ("Danxi Xinchuan"), sindromi differenti tal-istess marda għandu jkollhom ċerti komunitajiet u differenzi fil-livelli makro u mikro. Din id-differenza ġiet ikkonfermata fir-riċerka tal-flora intestinali ta 'pazjenti b'epatite B kronika [sindromu ta' sħana niedja tal-milsa u tal-istonku u depressjoni tal-fwied u sindromu ta' defiċjenza tal-milsa],pressjoni għolja sindromu Yin u sindromu Yang[2], sindromu tas-sħana niedja tan-nefropatija dijabetika u sindromu tas-sħana mhux niedja [3], kolite ulċerattiva tas-sindromu tas-sħana niedja tal-musrana l-kbira u tal-milsa usindromu ta 'defiċjenza ta' yang tal-kliewi[4]. Il-flora intestinali mhix biss relatata mill-qrib mal-okkorrenza u l-iżvilupp tal-kanċer tal-kolorektum [5-7], iżda tista' wkoll tkun involuta fil-medjazzjoni tal-ħsara tal-mukuża gastrointestinali kkawżata mit-trattament tat-tumur [8-111 u t-trażżin tal-mudullun [12] . Allura, hemm ċerti karatteristiċi tal-flora intestinali ta 'pazjenti b'defiċjenza ta' yang tal-milsa u tal-kliewi wara risezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon?
Din il-parti hija bbażata fuq ir-riċerka klinika "Studju dwar l-effett sinerġistiku u l-mekkaniżmu ta 'preskrizzjoni sekwenzjali tat-tisħiħ tal-milsa u l-kliewi fuq kimoterapija awżiljarja tal-kanċer tal-kolon" li qed titwettaq mit-tim tat-tuturi. Pazjenti li jkunu waslu biex jirċievu kimoterapija awżiljarja wara resezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon jintużaw bħala oġġetti ta’ riċerka biex jesploraw ix-xebh u d-differenzi fil-flora intestinali bejn pazjenti b’defiċjenza ta’ milsa u kliewi yang wara risezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon u dawk mingħajr defiċjenza ta’ milsa u yang tal-kliewi. , u jippruvaw jiżvelaw id-differenzi mikroskopiċi bejn il-milsa u d-defiċjenza ta 'yang tal-kliewi wara risezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon u dawk mingħajr defiċjenza ta' milsa u yang tal-kliewi f'termini ta 'flora intestinali.
Ħxejjex aromatiċi ĠODDA GĦAL DEFIĊJENZA TA' YIN U YANG TAL-KLIEIMATULKIMOTERAPIJA
Servizz ta 'Appoġġ Ta Wecistanche-L-akbar esportatur ta' cistanche fiċ-Ċina:
Email:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950
2 Dejta klinika u metodi ta' riċerka
2.1 Disinn tar-riċerka
L-istudju jadotta l-metodu ta 'studju trasversali biex jiġbor dejta ġenerali u informazzjoni dwar is-sindromu TCM ta' pazjenti bidefiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewiu pazjenti mingħajr defiċjenza ta 'yang tal-milsa u tal-kliewi wara resezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon stadju II (riskju għoli) / stadju III; 16s rDNA high-throughput sekwenzar teknoloġija hija użata biex tanalizza l-karatteristiċi tad-distribuzzjoni tal-flora intestinali f'pazjenti b'defiċjenza yang milsa u kliewi wara risezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon.
2.2 Sors tas-suġġetti
Pazjenti li għaddew minn risezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon u ġew dijanjostikati bħala stadju II (riskju għoli)/stadju u kienu waslu biex jgħaddu mill-ewwel kimoterapija awżiljarja fl-unità ta' impriża tal-proġett (Isptar Xiyuan, Akkademja taċ-Ċina tax-Xjenzi Mediċi Ċiniżi) u
iċ-ċentri tal-fergħa minn Ottubru 2018 sa Diċembru 2020. Mill-31 ta 'Diċembru 2020, l-informazzjoni dwar il-każ iddaħħlet fis-sistema ta' ġestjoni tad-dejta tal-prova klinika tad-droga (qbid ta 'dejta elettrika, EDC) tal-Isptar Xiyuan, Akkademja taċ-Ċina tax-Xjenzi Mediċi Ċiniżi.
2.3 Informazzjoni etika
Dan l-istudju ġie rivedut u approvat mill-Kumitat tal-Etika Medika tal-unità (numru tal-approvazzjoni: Isptar Xiyuan, Akkademja taċ-Ċina tax-Xjenzi Mediċi Ċiniżi 2018XLA048-2). Is-suġġetti fehmu u kienu konxji tal-kontenut u l-pjan tar-riċerka, u ffirmaw volontarjament il-formola tal-kunsens infurmat biex jipparteċipaw f'dan l-istudju.
2.4 Kriterji dijanjostiċi tal-mard
Id-dijanjosi tal-kanċer tal-kolon tirreferi għall-kriterji dijanjostiċi tal-"Istandards ta 'Dijanjożi u Trattament ta' Tumur Malinn Komuni Ċiniżi" tad-Dipartiment tal-Amministrazzjoni Medika tal-Ministeru tas-Saħħa tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina. L-istadju kliniku jadotta s-sistema ta' stadju TNM rikonoxxuta internazzjonalment (Kumitat Konġunt Amerikan dwar il-Kanċer, AJCC, it-8 edizzjoni).
2.5 Kriterji tad-dijanjosi tas-sindromu tat-TCM
Id-dijanjosi tas-sindromu tat-TCM tirreferi għall-ispeċjalità ewlenija "Il-Ħdax-il Pjan ta 'Ħames Snin" tal-Amministrazzjoni Nazzjonali tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża - dijanjosi klinika u pjan ta' trattament għal mard ewlieni tat-tumur. It-tipi ta’ sindromu komuni ta’ kanċer tal-kolorektum huma ħames tipi ta’ defiċjenza: diżarmonija tal-fwied-milsa, defiċjenza tal-milsa u staġnar tal-qi, defiċjenza tal-yang tal-milsa-kliewi, defiċjenza tal-yin tal-fwied-kliewi, u defiċjenza tal-qi u tad-demm [13], kif ġej:
(1) Sindromu ta 'diżarmonija tal-fwied-milsa: distensjoni u uġigħ fil-kustilji, distensjoni addominali u telf ta' aptit, depressjoni, ippurgar maħlul, jew uġigħ addominali u ippurgar artab, uġigħ meħlus wara dijarea, u polz fil-fdal.
(2) Defiċjenza tal-milsa u sindromu ta 'staġnar tal-qi: distensjoni u uġigħ fl-istonku u l-kustilji, tifwik, sulluzzu, rigurġitazzjoni ta' l-aċidu, depressjoni, telf ta 'aptit, kisi ta' l-ilsien isfar irqiq, u polz stringy.
(3) Defiċjenza ta 'yang tal-milsa u tal-kliewi: biża' mill-kesħa, riġlejn kesħin, jbiddel ċar, uġigħ fid-dahar, uġigħ addominali kiesaħ, dijarea kronika, jew indiġestjoni, jew edema u oliguria, ilsien pallidu u xaħam b'kisja abjad u tiżloq, u fond u dgħajfa polz.
(4) Defiċjenza ta 'yin tal-fwied u tal-kliewi: sturdament u tinnitus, irritabilità, ras tqila u saqajn ħfief, uġigħ fid-dahar, ħolm frekwenti u spermatorrhea, ilsien aħmar bi ftit kisi, u polz stringy u fin.
(5) Qi u defiċjenza tad-demm: għeja, qtugħ ta 'nifs u għażżien, jbiddel pallidu jew bajda, sturdament, xufftejn u dwiefer pallidu, palpitazzjonijiet u nuqqas ta' rqad, ippurgar mhux iffurmat jew prolapse anali, ilsien pallidu u polz dgħajjef.
2.6 Kriterji ta' inklużjoni u esklużjoni
2.6.1 Kriterji ta' inklużjoni
(1) Pazjenti b'dijanjosi patoloġika ċara tal-kanċer tal-kolon; marġini ta' risezzjoni patoloġika huma negattivi.
(2) TNM stadju III (riskju għoli) u IIIIII.
(3) Pazjenti li jkunu waslu biex jirċievu kimoterapija CapeOX fi żmien 6 ġimgħat wara risezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon.
(4) L-ebda parteċipazzjoni fi provi kliniċi terapewtiċi oħra fi żmien 30 jum qabel randomizzazzjoni.
(5) Età 18-75 snin, is-sess mhux limitat; Il-punteġġ ECOG huwa 0-1; nisa tqal, li qed ireddgħu jew f'età li jista' jkollhom it-tfal mhumiex eliġibbli għall-inklużjoni. Nisa f'età li jista' jkollhom it-tfal mhumiex eliġibbli sakemm ma jkollhomx kontraċezzjoni adegwata.
(6) L-ebda tumuri malinni ma seħħew f'partijiet oħra tal-ġisem (ħlief għal karċinoma ċervikali in situ ikkurata bis-sħiħ, karċinoma taċ-ċelluli bażali jew squamous tal-ġilda, jew tumuri oħra li jkunu tfejqu permezz ta 'kirurġija u ma seħħewx għal mill-inqas 5) snin).
(7) Data tal-laboratorju: rutina tad-demm: WBC Akbar minn jew ugwali għal 3.5 × 109 / L; NEUT Ikbar minn jew ugwali għal 1.5 × 109 / L; PLT Akbar minn jew ugwali għal 100 × 109 / L; HGB Akbar minn jew ugwali għal 90 g / L; Funzjoni tal-fwied u tal-kliewi: TBIL Inqas minn jew ugwali għal 1.5 × ULN; AST, ALT Inqas minn jew ugwali għal 2.5 × ULN; Scr Inqas minn jew ugwali għal 1.5 × ULN; CEA: 0-5.
(8) Kunsens infurmat iffirmat.
(9) Id-differenzazzjoni tas-sindromu TCM tinkludi defiċjenza ta 'yang tal-milsa u tal-kliewi, disarmonija tal-fwied u tal-milsa, defiċjenza tal-milsa u staġnar tal-qi, defiċjenza tal-yin tal-fwied u tal-kliewi, u defiċjenza ta' qi u demm. Disarmonija tal-fwied u tal-milsa, defiċjenza tal-milsa u staġnar tal-qi, defiċjenza ta 'yin tal-fwied u tal-kliewi, u defiċjenza ta' qi u demm huma kklassifikati bħala defiċjenza ta 'yang mhux milsa u tal-kliewi.
2.6.2 Kriterji ta' esklużjoni
(1) Pazjenti li huma determinati mir-riċerkaturi jew it-tobba li jattendu li ma jeħtiġux kimoterapija CapeOX.
(2) Pazjenti b'kumplikazzjonijiet kardjovaskulari severi, kumplikazzjonijiet ċerebrovaskulari, epatite attiva, u disfunzjoni severa tal-fwied u tal-kliewi.
(3) Kwalunkwe kundizzjoni jew kundizzjoni instabbli li jistgħu jipperikolaw is-sigurtà tal-pazjenti u l-konformità tagħhom mal-istudju, bħall-iskiżofrenja u mard mentali sever ieħor.
(4) Pazjenti b'kolostomija.
2.7 Ġbir u ttestjar tal-kampjuni
2.7.1 Ġbir tal-kampjuni
Qabel il-bidu tal-kimoterapija awżiljarja, ir-riċerkaturi se jintroduċu s-sinifikat tal-istudju għas-suġġetti, jiffirmaw il-formola tal-kunsens infurmat, u jqassmu l-kit tal-ġbir tal-kampjuni tal-ippurgar iddedikat MGIEasy. 1-2 jiem qabel il-bidu tal-ewwel kimoterapija awżiljarja, is-suġġetti ġabru kampjuni skont l-istruzzjonijiet tat-teħid tal-kampjuni u għaddew il-kampjuni tal-ippurgar lir-riċerkaturi fil-ħin.
Ir-riċerkaturi ħadu l-kampjuni, ivverifikaw u vverifikaw l-ismijiet tas-suġġetti, assenjaw numri tal-kampjuni, u ttrasportawhom lejn Shanghai Meiji Biomedical Technology Co., Ltd. għall-ittestjar.
2.7.2 Proċess ta' sekwenzar tal-rDNA tal-flora intestinali 16s
(1) Estrazzjoni tad-DNA u amplifikazzjoni tal-PCR
① Uża l-kit tal-ħamrija EZNAQ (Omega Bio-tek, Norcross, GA, US) biex tiġbed id-DNA totali; NanoDrop2000 u 1% elettroforesi tal-ġel tal-agarose intużaw biex jiskopru l-konċentrazzjoni u l-purità tad-DNA, u l-kwalità tal-estrazzjoni tad-DNA, rispettivament.
② Uża primers 338F (5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3') u 806R (5'- GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3') biex PCR tamplifika r-reġjun varjabbli V3-V4. Il-proċedura speċifika hija:
a. Pre-denaturazzjoni ta '95 grad għal 3 min, 27 ċiklu (denaturazzjoni ta' 95 grad → ittemprar ta '55 grad → estensjoni ta' 72 grad)
b. Estensjoni ta' 72 grad għal 10 min (strument PCR: ABI GeneAmpR9700).
Fost dawn, is-sistema ta 'amplifikazzjoni tinkludi: 20 μL, 4μL5*FastPfu buffer, 2 μL2.5mM dNTPs, 0.8 μL primer (5 μM), 0.4 μL FastPfu polymerase u 10 ng DNA template .
(2) Illumina Miseq sekwenzar
① Uża 2% ġel agarose biex tirkupra prodotti PCR, uża AxyPrep DNA Gel Extraction Kit (Axygen Biosciences, Union City, CA, USA) għal purifikazzjoni, eluzzjoni Tris-HC1, u skoperta ta 'elettroforesi ta' agarose 2%;
② Uża QuantiFluorTM-ST (Promega, USA) għall-iskoperta u l-kwantifikazzjoni;
③ Irreferi għall-proċeduri operattivi standard tal-pjattaforma Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, USA) biex tibni librerija PE 2*300 tal-frammenti amplifikati purifikati.
Passi tal-kostruzzjoni tal-librerija:
a. Qabbad adapters forma "Y";
b. Uża żibeġ manjetiċi biex tiskrinja u neħħi l-frammenti ta 'l-adapter self-linked;
c. Uża l-amplifikazzjoni tal-PCR biex tarrikkixxi l-mudell tal-librerija; d. Żnatura bl-idrossidu tas-sodju biex tipproduċi frammenti tad-DNA single-stranded.
Uża l-pjattaforma Miseq PE300 ta 'IIlumina għas-sekwenzjar, u ttella' d-dejta mhux ipproċessata fid-database NCBI.
(3) Ipproċessar tad-dejta
Is-sekwenza ta' sekwenza oriġinali kienet ikkontrollata ta' kwalità bl-użu ta' softwer Trimmomatic u spliced bl-użu ta' softwer FLASH, kif ġej:
① Issettja tieqa 50bp. Jekk il-valur medju tal-kwalità fit-tieqa huwa inqas minn 20, aqta 'l-tarf ta' quddiem tat-tieqa.
Neħħi s-sekwenzi kollha wara l-bażi, u mbagħad neħħi s-sekwenzi b'tul ta 'inqas minn 50 bp wara l-kontroll tal-kwalità;
② Splice s-sekwenzi fiż-żewġt itruf skond il-bażijiet sovrapposti. Ir-rata massima ta' nuqqas ta' qbil bejn il-koinċidenzi waqt it-twaħħil hija 0.2, u t-tul għandu jkun akbar minn 10 bp.
③ Aqsam is-sekwenzi f'kull kampjun skont il-barcodes u l-primers fiż-żewġt itruf tas-sekwenza. Uża s-softwer UPARSE (verżjoni 7.1) biex tgħaqqad is-sekwenzi f'OTUs (unitajiet tassonomiċi operattivi) b'xebh ta' 97% [14], u neħħi sekwenzi u kimeri singoli matul il-proċess ta' raggruppament. Uża RDPclassifier (http://rdp.cme.msu.edu/) biex tinnota l-klassifikazzjoni tal-ispeċi għal kull sekwenza.
2.8 Analiżi statistika
(1) SPSS26.0 intuża biex titwettaq analiżi statistika fuq data bażi. Id-dejta kwantitattiva ġiet espressa bħala medja ± devjazzjoni standard (x ± s). Għat-tqabbil bejn il-gruppi, it-test intuża għal data mqassma b'mod normali; test mhux parametriku intuża għal data mhux distribwita b'mod normali; u test chi-square intuża għad-dejta tal-għadd. P<0.05 was considered statistically significant.
(2) Analiżi tal-bijoinformatika: Il-Pjattaforma Major Biotech Cloud https://cloud.majorbio.com intużat biex twettaq annotazzjoni u evalwazzjoni tal-ispeċi, analiżi tal-kompożizzjoni tal-ispeċi, analiżi tat-tqabbil tal-kampjuni, analiżi tad-differenza tal-ispeċi, eċċ.
3 Riżultati
3.1 Informazzjoni bażika
A total of 32 subjects were included in the study for analysis, including 11 patients with spleen and kidney yang deficiency and 21 patients without spleen and kidney yang deficiency. The specific age, gender and primary site of the disease are shown in Tables 2-1, 2-2 and 2-3. There was no statistical difference between the two groups in terms of age, gender composition and distribution of primary sites of colon cancer (P> 0.05).
Tabella 2-1 Distribuzzjoni tal-età tal-pazjenti fiż-żewġ gruppi (x±s) (snin)
3.2 Riżultati tal-analiżi tal-bijoinformazzjoni
3.2.1 Analiżi tad-diversità alfa
Sobs index, ace index, chao index, shannon index, simpson index, etc. are commonly used measurement indicators of Alpha diversity. Among them, the first three are used to evaluate species richness (richness), the Shannon index evaluates species diversity (diversity), and the Simpson index is used to evaluate the evenness of species in the environment (evenness). This study used the Wilcoxon Rank Sum test to perform statistical analysis on the sobs index between groups. The results showed that there was no significant difference in species richness, diversity and evenness between spleen and kidney yang deficiency syndrome and non-spleen and kidney yang deficiency syndrome (P>0.05). (Tabella 2-4, Figura 2-1)
Figura 2-1 Differenzi fl-Indiċi Sobs bejn il-gruppi
(2) Analiżi tal-kompożizzjoni tal-komunità bejn il-gruppi
Fil-livell ta 'phylum, il-flora intestinali ta' pazjenti b'sindromu ta 'defiċjenza ta' milsa-kliewi yang inkludiet: Bacteroidota 50.44%, Firmicutes 34.51%, Proteobacteria 10.81%, Actinobacteriota 1.51%, Verrucomicrobia%, oħrajn 1.089%;
Il-flora intestinali ta 'pazjenti mingħajr is-sindromu tad-defiċjenza ta' milsa-kliewi yang inkludiet: Bacteroidota 45.25%, Firmicutes 40.24%, Proteobacteria 7.86%, Actinobacteriota 3.05%, Verrucomicrobia 2.48%, oħrajn 1.13%. Wieħed jista’ jara li fil-livell tal-phylum, il-flora batterika kemm tal-grupp tas-sindromu tad-defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi kif ukoll il-grupp tas-sindromu tad-defiċjenza yang mhux milsa u tal-kliewi kienu ddominati minn Bacteroidetes u Firmicutes, li jammontaw għal madwar 85% tal-batterja totali . (Figura 2-3, Figura 2-4)
Figura 2-3 Bar graph fil-livell tal-phylum tal-kompożizzjoni tal-flora intestinali f'żewġ gruppi ta' pazjenti
Figura 2-4 Pie chart tal-kompożizzjoni tal-flora intestinali ta' żewġ gruppi ta' pazjenti fil-livell tal-Phylum
Fil-livell tal-Familja, ġiet analizzata l-kompożizzjoni tal-flora intestinali ta 'pazjenti b'sindromu ta' defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi (D) u sindromu ta 'defiċjenza ta' yang mhux milsa u kliewi (N). L-aqwa 5 speċi batterjali fil-grupp tas-sindromu tad-defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi jinkludu: Bacteroidaceae 37.93%, Lachnospiraceae 12.13%, Ruminococcaceae 6.93%, Prevotellaceae 6.02%, Enterobacteriaceae 7.18%; l-aqwa 5 speċi batterjali fil-grupp tas-sindromu ta 'defiċjenza ta' yang mhux milsa u kliewi jinkludu: Bacteroidaceae 34.38%, Lachnospiraceae 19.27%, Ruminococcaceae 5.15%, Prevotellaceae 5.71%, Sutterellaceae 4.18%. (Figura 2-5, Figura 2-6)
Figura 2-5 Istogramma tal-kompożizzjoni tal-flora intestinali ta' żewġ gruppi ta' pazjenti fil-livell tal-Familja
Figura 2-6 Pie chart tal-kompożizzjoni tal-flora intestinali ta' żewġ gruppi ta' pazjenti fil-livell tal-Familja
Figura 2-7 Analiżi NMDS ta' żewġ gruppi ta' komunitajiet fil-livell tal-ispeċi
3.2.4 Analiżi diskriminanti tad-differenza ta' speċi f'diversi livelli Lefse
Sabiex tesplora aktar speċi b'differenzi fl-abbundanza ta' speċi bejn il-gruppi, Lefse (Linear
L-analiżi tad-daqs tal-effett tal-analiżi diskriminanti) tista’ tintuża biex tidentifika d-differenzi tal-ispeċi bejn il-gruppi. Il-passi tal-analiżi Lefse huma kif ġej:
(1) Uża t-test tas-somma tal-klassifikazzjoni Kruskal-Wallis (KW) biex tiskopri l-ispeċi karatteristiċi kollha u tikseb speċijiet differenti b'mod sinifikanti bbażati fuq id-differenzi fl-abbundanza tal-ispeċi bejn il-gruppi.
(2) It-test tas-somma tal-rank Wilcoxon jintuża biex ikompli jittestja l-ispeċijiet differenti b'mod sinifikanti miksuba fil-pass (1) biex jiddetermina jekk is-sottospeċi kollha jikkonverġux għall-istess livell ta' klassifikazzjoni.
(3) Uża l-Analiżi Lineari Diskriminanti (LDA) biex tikseb l-ispeċi differenzjali finali.
Kif muri fil-Figuri 2-8 u 2-9, Clostridia (o_Clostridia_UCG_014), Clostridiaceae (f_norank o Clostridia{ {6}}UCG_014), Clostridium (g_norank f norank o Clostridia_UCG{_014), Flavobacteriales (o_Flavobacteriales ), Flavobacteriaceae (f_Flavobacteriaceae), Flavobacteria (g{_norank Flavobacteriaceac), eċċ. huma l-gruppi batterjali b'abbundanza akbar fl-imsaren ta' pazjenti b'sindromu ta' defiċjenza ta' milsa u kliewi yang. Dawn il-flora jistgħu jkunu l-flora prinċipali responsabbli għad-differenzi bejn pazjenti bis-sindromu ta 'defiċjenza yang milsa-kliewi u dawk mingħajr sindromu ta' defiċjenza yang milsa-kliewi.
Figura 2-8 LEfSe siġra tal-ġerarkija tal-ispeċi fuq diversi livelli
Figura 2-9 LDA bar chart diskriminanti
4 Diskussjoni
Il-flora intestinali hija relatata mill-qrib mal-immunità tal-host[16,17] u l-assorbiment tan-nutrijenti[18,19]. Il-mediċina tradizzjonali Ċiniża temmen li "l-milsa tirregola t-trasport u t-trasformazzjoni", "il-milsa tirregola l-axxendenti l-ċar", u "il-gwardja hija l-qi ħarxa tal-ilma u l-qamħ". Il-funzjonijiet tal-milsa jkopru ħafna aspetti ta 'diġestjoni, assorbiment, eskrezzjoni u reżistenza għal patoġeni esterni. Għalhekk, il-milsa u l-istonku huma l-aktar relatati mill-qrib mal-flora intestinali. F'ħafna mard, il-korrelazzjoni bejn is-sindromu ta 'defiċjenza tal-milsa u prodotti patoloġiċi relatati ma' defiċjenza tal-milsa, bħal sħana niedja, umdità kiesħa, turbidità tal-phlegm, eċċ., U dysbiosis ġiet ikkonfermata. 121-231; l-earth tal-milsa hija relatata mill-qrib mal-injam tal-fwied. "Erba 'Sorsi tal-Qalb Imqaddsa" ta' Huang Yuanyu jgħid "... Meta d-dinja tkun dgħajfa u ma tistax tilħaq l-injam, il-qi ta 'l-injam huwa mblukkat..." F'dawn l-aħħar snin, ir-riċerka dwar il-korrelazzjoni bejn is-sindromu tad-depressjoni tal-fwied u l-flora intestinali hija jiżviluppaw b'mod vigoruż. 124251; hemm ukoll rapporti relatati dwar ir-relazzjoni bejn kidney yang deficiency syndrome1261 u l-flora intestinali. Ir-riċerka dwar il-korrelazzjoni bejn is-sindromu tat-TCM u l-flora intestinali rċeviet aktar u aktar attenzjoni. Dan l-istudju ħa pazjenti li għaddew minn kirurġija radikali għall-kanċer tal-kolon u ppjanaw li jgħaddu minn kimoterapija awżiljarja wara l-operazzjoni bħala s-suġġetti tar-riċerka. Il-pazjenti kienu maqsuma f'żewġ gruppi: is-sindromu ta 'defiċjenza ta' yang tal-milsa u tal-kliewi u sindromu ta 'defiċjenza ta' yang mhux milsa u kliewi, u ġew esplorati l-karatteristiċi tad-distribuzzjoni tal-flora intestinali f'pazjenti b'sindromu ta 'defiċjenza ta' yang tal-milsa u tal-kliewi.
Ir-riżultati wrew li ma kien hemm l-ebda differenza statistika bejn pazjenti b'sindromu ta' defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi u sindromu ta' defiċjenza ta' yang mhux milsa u kliewi f'termini ta 'indiċi SOBs, indiċi ACE, indiċi Chao, indiċi Shannon, indiċi Simpson, eċċ. Ir-rikkezza tal-ispeċi , id-diversità u l-uniformità tal-flora intestinali taż-żewġ gruppi ta 'pazjenti kienu bażikament l-istess.
Fil-livell tal-phylum, il-flora intestinali tal-pazjenti fil-grupp tas-sindromu tad-defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi u l-grupp tas-sindromu tad-defiċjenza yang mhux tal-milsa u tal-kliewi inkludew Bacteroidetes, Firmicutes, Proteobacteria, Actinobacteria, eċċ., Li kienu qrib il-flora intestinali dominanti ta’ nies b’saħħithom [27,28]. Madankollu, kien hemm differenza fil-proporzjon ta 'Firmicutes għal Bacteroidetes (FBR), bl-FBR tal-grupp tas-sindromu ta' defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi jkun 0.68 u l-FBR tas-sindromu ta 'defiċjenza ta' yang mhux milsa u tal-kliewi grupp li jkun 0.89. Studji sabu li bidliet fl-FBR huma assoċjati mal-obeżità [29], pressjoni għolja [27], dijabete [30], sindromu tal-musrana irritabbli [31], eċċ. FBR jista 'jkun relatat mal-istat infjammatorju tal-ġisem. Id-differenza fl-FBR bejn il-grupp tas-sindromu ta 'defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi u l-grupp tas-sindromu ta' defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi tista 'tindika li l-ġisem għandu stati infjammatorji differenti.
Fil-livell tal-familja, il-flora dominanti taż-żewġ gruppi ta 'pazjenti kienet tinkludi Bacteroidetes, Lachnospiraceae, Verrucomicrobiaceae, u Prevotellaceae. Barra minn hekk, in-numru ta ' batterji Enterobacteriaceae fil-passaġġ intestinali tal-milsa u kliewi yang defiċjenza sindromu pazjenti kien ogħla, filwaqt li n-numru ta ' batterji Sutterellaceae fil-grupp mhux milsa u kliewi yang defiċjenza sindromu kien ogħla. Enterobacteriaceae jappartjenu għall-phylum Proteobacteria u huma preżenti b'mod wiesa 'fil-bnedmin u annimali varji. Fl-istess ħin, Enterobacteriaceae jista 'jkun patoġenu opportunistiku, u ż-żieda fl-għadd ta' batterji tagħhom tista 'tkun assoċjata ma' mard metaboliku, disfunzjoni immuni, u mard ieħor [32,33]. Sutterellaceae hija wkoll patoġenu opportunistiku [34]. In-numru ta 'batterji Sutterellaceae fl-imsaren ta' pazjenti bl-awtiżmu [35], sindromu tal-musrana irritabbli [36], u dijarea [37] żdied b'mod sinifikanti.
Barra minn hekk, l-analiżi tad-differenza ta 'speċi f'diversi livelli Lefse sabet li l-abbundanza ta' Flavobacterium u Clostridium fl-imsaren ta 'pazjenti b'sindromu ta' defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi żdiedet, u d-differenza kienet statistikament sinifikanti. Flavobacterium jeżisti prinċipalment fl-ambjent naturali u huwa wkoll patoġenu kondizzjonali. Pazjenti b'immunità baxxa huma suxxettibbli għal infezzjoni bil-Flavobacterium [38]. Għalhekk, hija batterja komuni li tikkawża infezzjonijiet fl-isptar [39]. Studji sabu li n-numru ta 'batterji Flavobacterium fl-imsaren ta' pazjenti bis-sindromu tal-musrana irritabbli huwa mnaqqas. Clostridium huwa involut fil-metaboliżmu tal-aċidi tal-bili fl-imsaren [40]. Bidliet fin-numru tiegħu jistgħu jkunu relatati mad-dipressjoni [411], is-sindromu tal-musrana irritabbli [42], u reazzjonijiet avversi għall-kimoterapija [43].
5 Sommarju
(1) Wara r-resezzjoni radikali tal-kanċer tal-kolon, m'hemm l-ebda differenza sinifikanti fl-abbundanza tal-flora intestinali bejn pazjenti b'sindromu ta 'defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi u dawk mingħajr is-sindromu ta' defiċjenza ta 'yang tal-milsa u tal-kliewi.
(2) Jista 'jkun hemm differenzi fl-FBR intestinali bejn pazjenti b'sindromu ta' defiċjenza ta 'yang tal-milsa u tal-kliewi u dawk mingħajr sindromu ta' defiċjenza ta 'yang tal-milsa u tal-kliewi, u d-daqs tal-kampjun jeħtieġ li jiġi estiż aktar għall-verifika.
(3) Fil-livell tad-dipartiment, in-numru ta 'batterji Enterobacteriaceae fl-imsaren ta' pazjenti b'sindromu ta 'defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi kien ogħla, filwaqt li n-numru ta' batterji Enterobacteriaceae fil-grupp tas-sindromu ta 'defiċjenza ta' yang mhux milsa u tal-kliewi kien ogħla. L-abbundanza ta 'batterji intestinali tal-ġeneru Flavobacterium u Clostridium żdiedet f'pazjenti b'sindromu ta' defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi.
Studji preċedenti ma sabux korrelazzjoni bejn Enterobacteriaceae, Sarteobacteriaceae, Flavobacterium, u Clostridium u majelosoppressjoni; id-daqs tal-kampjun inkluż f'dan l-istudju huwa limitat, u s-suġġett kliniku li fuqu huwa bbażat l-istudju għadu ma ġiex unblinded. Huwa impossibbli li jiġi evalwat jekk hemmx konnessjoni inevitabbli bejn is-sindromu ta 'defiċjenza ta' milsa u yang tal-kliewi u soppressjoni tal-mudullun ikkawżata minn kimoterapija awżiljarja. Ir-relazzjoni bejn is-soppressjoni tal-mudullun, is-sindromu ta 'defiċjenza ta' milsa u yang tal-kliewi u l-flora intestinali għad trid tiġi żvelata fi studji sussegwenti.
Referenzi
[1] Xu Youli. Bidliet fil-flora intestinali f'pazjenti b'epatite B kronika b'sindromu ta' sħana niedja tal-milsa u tal-istonku u depressjoni tal-fwied u sindromu ta' defiċjenza tal-milsa u l-assoċjazzjoni tagħhom ma' proteini relatati mal-metilazzjoni[D]. Chengdu Università tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, 2019.
[2] Chen Yong. Korrelazzjoni bejn is-sindromu Yin-Yang ta 'pressjoni għolja u l-karatteristiċi tal-flora intestinali[D]. Università ta 'Fujian tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, 2019.
[3] Zhao Qihan. Differenzi fil-flora intestinali bejn in-nefropatija dijabetika bis-sindromu tas-sħana niedja u s-sindromu tas-sħana mhux niedja[D]. Università ta 'Beijing tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, 2020.
[4] Chang Binglong. Differenzi fil-flora intestinali bejn pazjenti bis-sindromu tas-sħana niedja tal-musrana l-kbira u s-sindromu tad-defiċjenza yang tal-milsa u tal-kliewi f'kolite ulċerattiva[D]. Università ta 'Beijing tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, 2020.
[5] Marzano M, Fosso B, Piancone E, et al. Indeboliment taċ-ċelloli staminali fl-interface tal-mikrobijota ospitanti fil-kanċer tal-kolorektum[J]. Cancers(Basel), 2021, 13(5).
[6] Liu W, Zhang X,Xu H,et al.Eteroġeneità tal-komunità mikrobjali fi ħdan in-neoplażja tal-kolorektum u l-korrelazzjoni tagħha mal-karċinoġenesi tal-kolorektum[J].Gastroenterology,2021 [7]Heo G,Lee Y,Im E.Interplay bejn l-imsaren mikrobijota u medjaturi infjammatorji fl-iżvilupp tal-kanċer tal-kolorektum[J].Kanċers (Basel),2021,13(4). [8]Wang C,Yang S,Gao L ,et al.Carboxymethyl pachyman (cmp)inaqqas il-mukożite intestinali u jirregola l-mikroflora intestinali fi ġrieden li jġorru tumuri ct26 ittrattati bil-fluorouracil [J].Food Funct,2018 ,9(5):2695-2704. [9]Genaro SC, Lima de Souza Reis LS, Reis SK, et al. Is-supplimentazzjoni probijotika ttaffi l-aggressività tal-firien tat-tumur tal-kolorektum indotti kimikament[J]. Life Sci, 2019, 237(116895. [10]Golkhalkhali B, Rajandram R, Paliany AS, et al. Probijotiku speċifiku għar-razza (preparazzjoni taċ-ċelluli mikrobiċi) u aċidu xaħmi omega-3 fil-modulazzjoni tal-kwalità tal-ħajja u markaturi infjammatorji f'pazjenti bil-kanċer tal-kolorektum: A randomized kkontrollata
