Parti 2 Il-Lipożo tal-Glycoside Phenylethanol Tinibtinibixxi l-Attivazzjoni tal-HSC indotta mill-PDGF permezz tar-Regolament tal-Passaġġ tas-Sinjalar FAKPI3KAkt
Mar 06, 2022
Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materjali u Metodi
4.1. Materjali
CPhGs (glikosid tal-phenylethanoid mill-cistanche)inxtraw mingħand Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, iċ-Ċina). Il-kontenut tal-echinaceakien aktar minn 35%, u dak tal-acteoside kien aktar minn 16%. Lecithin inxtara minn Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Shanghai, iċ-Ċina). 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycerol-3-phosphocholine (DPPC) u l-kolesterol ġew fornuti minn Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, l-Istati Uniti). Ċellula stellata epatika tal-far immortalizzata kienet ipprovduta minn Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Shanghai, iċ-Ċina). Il-mezz modifikat ta 'Dulbecco Eagle (DMEM) inxtara minn Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, l-Istati Uniti). Is-serum bovin tal-fetu (FBS) inxtara minn Gibco Life Technologies (Waltham, MA, l-Istati Uniti). Peniċillina (100 卩g/mL) u streptomycin (100 卩g/mL) kienu prodotti ta' Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoli bromideum] (5 mg/mL) inxtraw minn Sigma (Oakville, ON, il-Kanada). L-attività LDH ġiet ivvalutata bl-użu ta 'kit ta' analiżi LDH minn Beijing Solar Science &Amp Technology Co., Ltd. (Beijing, iċ-Ċina). Il-FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I u propidium iodide (PI)/RNase Staining Buffer inxtraw kollha minn BD Biosciences (San Diego, CA, USA) u rrPDGF-BB ġie pprovdut minn R&D Systems (Minneapolis, MN, l-Istati Uniti). Ir-reaġent TRIzol inxtara minn Thermo Fisher Scientific, Inc. Il-kit ta' Sinteżi tal-Ewwel Strand revertAid cDNA kien il-prodott ta' Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, il-Litwanja). TB Green Premix Ex Taq TM II inxtara minn Takara (Dalian, iċ-Ċina). Is- soluzzjoni tal- piroliżi tar- ripa kienet ipprovduta minn Thermo Fisher Scientific, Inc. Inibitur tal- Protease phenylmethylsulfonyl fluoride u t- taħlita ta ' inibitur tal- fosfatażi bi spettru wiesa ' nxtrat minn Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, iċ- Ċina). Il-faxex tal-proteini ġew viżwalizzati minn Sottostrat tal-Blotting tal-Punent pierce™ ECL, li ġie pprovdut minn Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). L-enzima għerq il-mustarda li tittikketta IgG kontra l-fenek inxtrat minn Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Shanghai, iċ-Ċina). Is-Super Signal West Femto Trial Kit ġie fornut minn Thermo Fisher Scientific, Inc. Rabbit anti-p-actin, a-SMA, collagen-1, FAK, PI3K, phospho-PI3K, Akt, u l-antikorp phospho-Akt inxtraw kollha minn Beijing Bios Antibodies Biological Co., Ltd. (Beijing, iċ-Ċina). Ix-X-3-FAK u X-3-NC inxtraw mingħand Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Shanghai, iċ-Ċina). Il- Lipofectamine 2000 ġie pprovdut minn Invitrogen.
4.2. Preparazzjoni tal-Lipożomi tas-CPhG
Il-leċitina, id-DPPC, u l-kolesterol (1:2:2, m/m/m) ġew maħlula f'taħlita ta' kloroform u metanol (2:1 v/v), imdawwar biex jifforma film f'temperatura ta' 49-50 °C, uCPhGs(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche)(250 卩g/mL) ġew miżjuda sussegwentement. Is-soluzzjoni reattiva ġiet iddawwar u idratata kontinwament, u l-membrana fosfolipid ġiet trasferita fl-ilma biex tifforma lipożomi CPG. Il-proċess liposome inkapsulat ġie ripetut skont il-metodi ta 'hawn fuq. Biex tikseb liposome uniformi, il-liposome inkapsulat ġie estruż 5 darbiet b'membrana mikroporuża ta '0.45 卩m u ffiltrat 18-20 darba b'membrana 0.22 卩m. Il-lipożomi CPG inħażnu f'temperatura ta' 4 °C. Id-distribuzzjoni tad-daqs tal-partiċelli tkejlet permezz ta 'analizzatur tad-daqs tal-partiċelli tal-lejżer, il-forma ta' partiċella ġiet osservata permezz ta 'mikroskopija tal-elettroni tat-trażmissjoni, u l-effiċjenza tat-tagħbija u l-inkapsulament tal-mediċina ġew iddeterminati mill-HPLC.
4.3. Rilaxx In Vitro mil-Lipożomi u s-CPhGs tas-CPG(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche)
Il-profil ta' rilaxx in vitro tal-lipożomi CPG uCPhGs(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche) twettaq bl-użu tal-metodu tal-membrana tad-dijalisi. Total ta' 5 mL ta' kull kampjun ġie trasferit f'borża tad-dijalisi b'qatgħa ta' piż molekulari ta' 14,000 Da ta' 14,000 Da ta' piż molekulari ta' 14,000 Da f'temperatura ta' 37 °C. Il-midjum tar-rilaxx (3 mL) ġie rtirat u sostitwit b'soluzzjoni ta' buffer isopycnic PBS (pH = 6.0) f'intervalli ta' ħin skedati (0.5,1, 2, 4, 8,12,16, 24, u 48 h). Il-konċentrazzjonijiet tal-echinacoside fil-lipożomi tas-CPG uCPhGsfil-mezz ta' rilaxx kienu determinati minn
HPLC. Ir-rilaxx kumulattiv (%) tal-lipożomi CPG uCPhGs(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche) ġie kkalkulat bl-użu tal-Ekwazzjoni li ġejja (1):
fejn Cn hija l-konċentrazzjoni tal-mediċina fil-midjum tar-rilaxx fil-punt tal-kampjunar nth, V huwa l-volum tal-midjum rilaxxat, u W hija d-doża totali.
Biex tifhem aħjar il-karatteristika ta 'rilaxx in vitro tal-CPhG(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche) lipożomi uCPhGs, ġew applikati tliet mudelli differenti biex jaqblu mad-dejta tar-rilaxx miksuba: (a) il-mudell tal-kinetika ta' ordni żero, (b) il-mudell kinetika tal-ewwel ordni, u (c) il-mudell Higuchi mogħti f'Ekwazzjonijiet (2)-(4):
fejn Mt/Mo hija l-frazzjoni tal-kurkumina rilaxxata mill-kampjun fil-ħin t, u k hija l-kostant tar-rilaxx tal-mudelli differenti. Il-koeffiċjent ta' korrelazzjoni huwa kkalkulat biex juri l-grad ta' twaħħil bejn il-mudell tar-rilaxx u d-dejta.
4.4. Ċitotossiċità
Għall-HSCs, densità ta' 1 x 105 ċelloli/mL indurati fi pjanċi ta' 96 bir u tħalliet tikber mil-lum għal għada f'37 °C f'inkubatur ta' 5% tas-CO2. Il-vitalità taċ-ċelluli ġiet ittestjata fuq firxa wiesgħa ta 'CPhGkonċentrazzjonijiet lipożomi (117.79,58.90, 29.45, 14.72, 7.36, 3.68,1.84, 0.92, u 0.46 卩g/ mL) biex tiskopri ċ-ċelloli vitali tat-test u tikkalkula l-valuri IC50. Imbagħad, iċ-ċelloli ġew inkubati f'temperatura ta' 37 °C għal 4 siegħa b'20 卩L ta' MTT (5 mg/mL f'soluzzjoni PBS). Il-prodott vjola tal-MTT-Product ġie maħlul f'150 卩L DMSO, u Qarrej tal-Assorbanza tal-Ispettru Multiskan (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) intuża biex ikejjel l-assorbatur f'490 nm. Il-formula li ġejja (Ekwazzjoni (5)) intużat biex jiġi kkalkulat il-perċentwal tal-vijabbiltà taċ-ċelloli:
4.5. Tossiċità taċ-Ċelloli tal-Lipożomi CPhG fuq HSCs
Iċ-ċelloli nżergħu fi pjanċi ta '6 bjar, u t-tossiċità tal-HSCs tkejlet bl-użu ta' Kit ta 'skoperta LDH. Iċ-ċelloli kienu miksija b'densità ta' 2 x 105 ċelloli/bir fi pjanċi ta' 6 bjar f'temperatura ta' 37 °C f'inkubatur b'5% CO2. Wara t-tkabbir matul il-lejl, iċ-ċelloli ġew ittrattati biCPhGlipożomi (29.45, 14.72, u 7.36 卩g/ mL). Kontroll vojt (midja DEME) inżamm simultanjament. Wara 24 siegħa, iċ-ċelloli nġabru minn trypsin u ċentrifugazzjoni. Kull grupp ta ' ċelloli ngħata strettament skond l- istruzzjonijiet tal- kit. Ir-rata ta 'tnixxija LDH tal-fluwidu tal-kultura taċ-ċelloli mbagħad ġiet ikkalkulata.
4.6. Analiżi tal-Apoptożi
Iċ-ċelloli ġew ikkoltivati fi pjanċi ta' 6 bjar b'densità ta' 2 x 105 ċelloli/bir f'temperatura ta' 37 °C f'inkubatur b'5% CO2. Wara t-tkabbir matul il-lejl, iċ-ċelloli ġew ittrattati biCPhGlipożomi (29.45, 14.72, u 7.36 卩g/ mL), u mbagħad l-apoptożi tal-HSCs tkejlet bl-użu tal-Kit ta' Sejbien tal-Apoptożi tal-Anness FITC. Il- konċentrazzjonijiet kienu bbażati fuq l- IC50 iddeterminat mill- assaġġ taċ- ċitotossiċità. Kontroll vojt (midja DEME) inżamm simultanjament. Wara 24 siegħa, iċ-ċelloli nġabru minn trypsin u ċentrifugazzjoni u maħsula bil-PBS u sospiżi f'buffer vinkolanti ta '500 卩L. Imbagħad, iċ-ċelloli kienu mtebbgħin b'5 卩L Annexin V-FITC u 5 卩L PE. Iċ-ċelloli ġew inkubati f'temperatura ambjentali għal 30 minuta fid-dlam, u r-rata apoptotika tkejlet bl-użu ta 'FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, L-Istati Uniti).
4.7. Analiżi tal-Arrest taċ-Ċiklu taċ-Ċelloli
HSCs (2 X 105 ċelluli/2 mL/bir) ġew ittrattati għal 24 siegħa biCPhGlipożomi f'29.45, 14.72, u 7.36 ^g/mL f'pjanċi ta' 6 bir. Kontroll vojt (midja DEME) inżamm simultanjament. Iċ-ċelloli nħasdu u nħaslu b'1 mL ta' PBS u ffissati b'75% etanol matul il-lejl f'temperatura ta' 4 °C. Iċ-ċelloli mbagħad ġew ċentrifugati u sospiżi mill-ġdid f'500 soluzzjoni ta' jodur tal-propidium (PI)/RNase li jtebba' f'temperatura ta' 37 °C għal 30 minuta fid-dlam. Fl- aħħarnett, iċ- ċelloli tkejlu bl- użu ta ' FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson). Il-proporzjonijiet taċ-ċelloli fil-fażijiet G0 / G1, S, u G2 / M taċ-ċiklu taċ-ċellula ġew analizzati mis-softwer FACS Diva (Becton Dickinson).
4.8. L-effett tal-CPhG(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche) Liposome fuq il-Mogħdija tas-Sinjalar Medjata mill-PDGF u PI3K / Akt
4.8.1. Analiżi tal-Proliferazzjoni
Il-linji HSC (1 X 105 ċelloli / mL) indurati fi pjanċi ta '96 bir u tħallew jikbru matul il-lejl f'37 °C f'inkubatur ta' 5% CO2. Wara 24 siegħa ta' kultura taċ-ċelloli, iċ-ċelloli ġew maqsuma b'mod każwali fil-ħames gruppi li ġejjin: Kontroll vojt (ikkultivat f'DMEM li fih 10% FBS biss), PDGF-BB (ikkultivat f'DMEM li fih 50 卩g/L PDGF-BB), aCPhGintervent lipożomi (stimulat b'medja li fiha 50 昭/mL PDGF-BB 24 h). Imbagħad, iċ-ċelloli ġew ittrattati b'29.45,14.72, u 7.36 Rg / mL ta 'lipożomi CPhG. Iċ-ċelloli kienu kontinwament ikkutivati għal 24 siegħa, 48 siegħa, u 72 siegħa fl-inkubatur f'temperatura ta' 37 °C għal 4 siegħa b'20 rL ta'MTT (5 mg/mL f'soluzzjoni PBS). Il-prodott vjola MTT-formazan ġie maħlul f'150 rL ta 'DMSO u stmat billi tkejjel l-assorbenza f'490 nm f'Qarrej ta' Assorbanza tal-Ispettru Multiskan (Thermo Fisher Scientific, Inc.), u l-IC50 ġie kkalkulat. Kampjuni kwadriplikati saru għal kull konċentrazzjoni f'erba 'esperimenti indipendenti. Il-formula li ġejja (Ekwazzjoni (6)) ikkalkulat il-perċentwal tal-vijabbiltà taċ-ċelloli:
4.8.2. Reazzjoni Kwantitattiva fil-Katina tal-Polimerażi f'Ħin Reali (qRT-PCR)
Iċ-ċelloli nżergħu fi pjanċi ta' 6 bjar b'densità ta' 1 X 105 ċelloli/mL. Dan il-metodu ta' raggruppament huwa l-istess bħal dak ta' qabel. Wara 24 siegħa, l-RNA totali ġiet estratta miċ-ċelloli kkoltivati minn reaġent TRIzol. Il-konċentrazzjoni u l-purità tal-RNA tkejlu f'260/280 nm bl-użu ta' spettrofotometru ultravjola skont il-proporzjon standard TAL-OD260/OD280 ta' 1.8-2.0. Ir- reazzjonijiet ta ' traskrizzjoni inversa ġew traskritti b' mod rivers mill- RNA bl- użu tal- kit ta ' Sintesi cDNA ta ' l- Ewwel Strand revertAid. TB Green Premix Ex TaqTM II intuża biex ikejjel l-espressjoni tal-ġeni. Il-qRT-PCR sar bl-użu ta 'sistema ABI QuantStudio™6 Flex Real-Time PCR (Biosystems Applikati, Foster City, CA, USA). Is-sekwenzi primer ġew sintetizzati minn Sangon Biotech (Shanghai, iċ-Ċina) (Tabella 4).
4.8.3. Analiżi tal-Blot tal-Punent
Il- proteini totali estratti mill- HSCs fi gruppi differenti tħejjew kif deskritt qabel. Fil-qosor, il-proteini simili ġew separati permezz ta ' 10% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) u mbagħad trasferiti għall-membrani tal-fluworidu polivinylidene (PVDF) (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden- Wuerttemberg, il-Ġermanja). Imbagħad, il- membrani PVDF ġew imblukkati fi 3% BSA u inkubati mil- lum għal għada f' 4 ◦C bl- antikorpi primarji. L-għada, ġie miżjud IgG kontra l-fenek tal-mogħoż bit-tikketta HRP (dilwizzjoni ta' 1:25,000; 1 h). Il-faxex tal-proteini ġew viżwalizzati permezz ta 'Sottostrat ta' Blotting tal-Punent ta 'Pierce™ ECL u dehru bl-użu tas-Sistema ta' Immaġini FluorChem E (Protein Simple, San Francisco, CA, USA), li ġew normalizzati b'β-actin bħala kontroll intern.
4.8.4. Esperimenti ta 'Espressjoni Żejda tal-FAK
Iċ- ċelloli kienu maqsuma fil- grupp ta ' kontroll medju normali, il- grupp ta ' stimulazzjoni PDGF- BB, l- istimulazzjoni PDGF- BB + grupp X- 3- FAK, l- istimulazzjoni PDGF- BB + grupp X- 3- NC, l- istimulazzjoni PDGF- BB + X- 3- FAK +CPhGgrupp liposome, u l-istimulazzjoni rrPDGF-BB + X-3-NC +CPhGgrupp liposome. Il-linji HSC (1 × 105 ċelloli / mL) indurati fi pjanċi ta '6 bjar u tħallew jikbru matul il-lejl f'37 ◦C f'inkubatur ta' 5% CO2. L-għada, il-PDGF-BB (ikkutivat fid-DMEM li fih 50 μg/L PDGF-BB) ġew miżjuda u kkoltivati. Fit-tielet jum, pEX-3-FAK u X-3-NC ġew dilwiti f'mezz ħieles mill-antibijotiċi, imħallta tajjeb mal-lipofectamine 2000, u tħallew joqogħdu f'37 ◦C għal 20 min, qabel ma ġew miżjuda ma 'kull bir taċ-ċelloli f'37 ◦C. Wara li ġie inkubat għal 5 sigħat, il-midjum li fih 10% serum ġie sostitwit għal 48 siegħa, u fil-ħames jum, il-midjum ġie sostitwit bil-konċentrazzjoni ta' 29.45 μg/mL CPhG liposome għal 24 siegħa. Imbagħad, kull bir inġabar fit-tieni, it-tielet, il-ħames u s-sitt jum, u nstabu l-espressjonijiet tal-proteini tal-ġeni FAK, PI3K, Akt, p-PI3K, u p-Akt.
4.9. Analiżi Statistika
Id-dejta ġiet espressa bħala l-mezz ± devjazzjoni standard (SD). Is-softwer SPSS 16.0 (IBM, New York, NY, USA) intuża għal analiżi statistiċi. Is-sinifikat tad-differenza ġie kkalkulat b'test ANOVA f'direzzjoni waħda u segwit minn test LSD. L-ekwazzjoni tax-xoljiment tad-droga kienet mgħammra minn Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, l-Istati Uniti).
5. Konklużjonijiet
Bħala konklużjoni, ir-riżultati tagħna juru liCPhG(glikosid tal-fenilensoli minn cistanche) il-lipożomi jinibixxu b'mod sinifikanti l-attivazzjoni tal-HSCs, billi jnaqqsu b'mod sinifikanti l-iżvilupp tal-fibrożi tal-fwied billi jżidu l-apoptożi u jirregolaw iċ-ċiklu taċ-ċellula fl-HSCs. L-inibizzjoni tal-attivazzjoni tal-mogħdijiet tas-sinjalar FAK/PI3K/Akt tista' tkun il-mekkaniżmu sottostanti li bih il-CPhGil- lipożomi jipproteġu kontra mard kroniku tal- fwied assoċjat mal- fibrożi. Dawn is- sejbiet jipprovdu għarfien ġdid dwar il- mekkaniżmi ta ' din il- formulazzjoni l- ġdida tal- mediċina bħala kandidat antifibroġeniku għat- trattament futur tal- fibrożi epatika. Madankollu, il-mekkaniżmi sottostanti huma aktar kumplessi minn dak deskritt hawnhekk, u r-riżultati tagħna ma jeskludux l-involviment possibbli ta' apparati oħra kkawżati mill-CPhGlipożomi għall-kura tal-fibrożi tal-fwied.
Kontribuzzjonijiet tal-Awtur:T.L., J.Z., S.-P.Y., L.M., u S.-L.Z. maħsub u ddisinjat l-esperimenti. S.-L.Z., S.-P.Y., T.L., J.Z., X.-T.M., u X.-YY. analizza d-dejta. S.-L.Z. u JŻ kitbu l-manuskritt. T.L., L.M., u J.Z. irrevedew il-manuskritt. L-awturi kollha jaqraw u approvaw il-manuskritt finali.
Fondi:Din ir-riċerka kienet iffinanzjata mill-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina, numru tal-għotja 81560628.
Rikonoxximenti:Dan ix-xogħol kien appoġġjat finanzjarjament mill-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina (Nru 8156140127). L-awturi jixtiequ jesprimu r-ringrazzjament sinċier tagħhom lil Jun Zhao u Xin Wang għat-titjib tagħhom tal-kitba ta 'dan id-dokument.
Kunflitti ta' Interess:L-awturi ma jirrappurtaw l-ebda dikjarazzjoni ta 'interess.
Referenzi
1. Zhang, H.; Xemx, D.; Wang, G.; Cui, S.; Qasam, R.A.; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin itaffi l- fibrożi tal- fwied permezz ta ' soppressjoni ta ' ċellula stellata epatika attivata. Bijokimika. Bijofiżi. Res. Komuni. 2019,511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Fibrożi tal-fwied: Patofiżjoloġija, miri patoġenetiċi, u kwistjonijiet kliniċi. Mol. Aspetti Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, Y.J.; Wu, Y.C.; Chen, I.F.; Wu, Y.L.; Chuang, CW; Huang, H.H.; Kuo, S.M. Effetti Ripatriċi ta 'Astaxanthin-Hyaluronan Nanoaggregates kontra Retrorsine-CCl (4)-Indotta fibrożi tal-fwied u Nekrożi. Molekuli 2018,23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Xemx, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla jippromwovi attivazzjoni għolja taċ- ċelluli stellati epatiċi kkaġunati mill- glukożju u mill- PDGF billi jinduċi awtofaġja permezz ta 'mogħdija ta' sinjalar CaMKKp / ERK. Tossiko. Lett. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, J.E. Ir- rwol taċ- ċitokini derivati miċ- ċelluli stellati epatiċi (HSC) f' infjammazzjoni epatika u immunità. Ċitokina 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosail-glikosidi tal-fenilinidi jinduċu apoptożi fiċ-ċelloli eca-109 permezz tal-passaġġ dipendenti fuq il-mitokondrija. Fuq il-kol. Lett. 2019,17, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Int, S.P.; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, S.L.; Liu, T. Phenylethanol Glycosides minnCistanche tubulosaRażżan l- Attivazzjoni taċ- Ċelluli Stellati Epatiċi u Imblokka l- Konduzzjoni ta ' Mogħdijiet ta ' Sinjalar f' TGF- beta1/ smad bħala aġenti potenzjali tal- Fibrożi Anti- Epatika. Molekuli 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Int, S.P.; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, S.L.; Liu, T. Effetti preventivi tal-glikosidi tal-fenilatanojdi minnCistanche tubulosadwar fibrożi epatika kkaġunata mill- albumina tas- serum bovin fil- firien. DARU J. Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, X.L.; Wang, M.; Liu, L. L-effiċjenza tan-nassa u l-assorbiment ta 'erba' tipi ta 'prolipożomi. J. Xin Jiang Med. Univ. 2007, 8, 787-790.
10. Li, pY.; Du, SY.; Lu, Y.; Sistema ta 'kunsinna tad-droga Chen, X.N. Bio-adhesive u l-applikazzjoni tagħha fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Geddum. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Twil, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Nitroimidazole derivattiv inkorpora lipożomi għall- għoti ta ' mediċini li jikkawżaw l- ipoksja u effikaċja terapewtika mtejba f' xenografts tat- tumur derivati mill- pazjent. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Sistema ta 'kunsinna ta' mediċini liposome li timmira lejn il-fwied u l-progress ta 'riċerka tagħha f'mard tal-fwied. Geddum Dinji. J. Digest. 2016, 24,4238. [CrossRef]
13. Zhou, B.H.; Tan, P.P.; Jia, L.S.; Zhao, W.P.; Wang, JJ; Wang, HW PI3K / AKT li jindika l-involviment tal-passaġġ fl-apoptożi kkawżata mill-fluworidu f'C2C12cells. Chemosphere 2018,199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Echinacoside Jistimula l-Proliferazzjoni taċ-Ċelloli u Jipprevjeni l-Apoptożi taċ-Ċelloli fiċ-Ċelloli Epiteljali Intestinali MODE-K permezz ta 'Regolamentazzjoni Up tat-Trasformazzjoni tal-Espressjoni tal-Fattur-p1 tat-Tkabbir. J. Pharm. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Attività anti-nociceptive u anti-infjammatorja kkawżata minnCistanche deserticolaf'annimali gerriema. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolal-estratt iżid il-formazzjoni tal-għadam fl-osteoblasts. J. Pharm. Farmakol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. Effett ta 'Cistanches HerbaEstratt milwiema dwar it-Telf tal-Għadam fil-Far Ovariektomija. Int J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Studji dwar l-effett seedattiv ta 'Cistanche deserticola.J. Ethnopharmacol. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Attività antifatigue ta 'estratt b'ħafna feni feneni mil-fenienitanojdi minnCistanche deserticola. Fit phytother. Res. 2010, 24, 313-315. [CrossRef]
20. Ġen, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Effetti newroprotettivi ta 'echinacoside fil-mudell MPTP tal-ġurdien tal-marda ta' Parkinson. Eur. J. Farmakol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; L-Istati Uniti, il-K., il-Kummissjoni, il-Q.K. Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Acylated phenylethanoid aminoglycosides b'attività epatoprotettiva mill-pjanta tad-deżert Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Prevenzjoni ta 'Cistanche salsa Estratt fuq Fibrożi Epatika Indotta minn Carbon Tetrachloride fil-Firien. Geddum. Med veġetali 2013, 5,199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Il-preparazzjoni tal-prolipo likwidu tal-glikosidi Cistanche phenylethanoid: Formulazzjoni ottimizzata, karatterizzazzjoni, u prolipo xi pilloli tat-taqtir evalwazzjoni in vitro u in vivo. Eur J. Pharm. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, P.M.; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Maltempata, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Il- fibrożi tal- fwied taffettwa l- proprjetajiet immirati tas- sistemi tal- kunsinna tal- mediċini għas- subsettijiet tal- makrofaġi in vivo. Bijomaterjali 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Xemx, H.; Li, S.; Yu, P.; Gallun, H. Disinn tal-kompożizzjoni u applikazzjoni medika tal-lipożomi. Eur. J. Med. Chem. 2019,164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, K.R.; Sadhu, partiċelli lipożomi etanoliċi mgħobbija bil-V. Flurbiprofen għal applikazzjonijiet bijomediċi. J. Microbiol. Il-Metodi 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. L-effett tal-ħlas tal-wiċċ fuq l-internalizzazzjoni ċellulari dipendenti fuq id-daqs tal-lipożomi. Chem. Phys. Lipidi 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Xemx, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Lipożomi mgħobbija bil- galangin, immirati lejn il- fwied: Ottimizzazzjoni u effikaċja epatoprotettiva. J. Deliv tad-Droga. Sci. Technol. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Fibrożi epatika: Wasal iż- żmien li tmur ma 'miri terapewtiċi speċifiċi għal ċelluli stellati epatiċi. Epatbilitazzjoni Dis. Int. 2018,17,192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, B.M.; Nattamai, K.; Kannella, A.; Floriana, M.C.; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, D.R.; Abdollahi, A. Mekkaniżmi Speċifiċi għaċ-Ċelloli Staminali Jiżguraw Fedeltà Ġenomika fi ħdan l-HSCs u mat-Tixjiħ tal-HSCs. Rep. 2015,13, 2412-2424. [CrossRef]
31. Brea, R.; Moviment, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 jinduċi apoptożi ta ' ċelluli stellati epatiċi u jnaqqas il- fibrożi tal- fwied fil- ġrieden billi jnaqqas ir- regolamentazzjoni ta ' miR- 23a- 5p u miR- 28a- 5p. Biochim. Bijofiżi. Acta Biophys. Inklużi Photosynth. 2018,1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, F.K.B.; Jensen, T.L.; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, A.S.; Pundhir, S.; Rehn, M.; Pawlu, F.; Giladi, A.; Hasemann, M.S.; et al. Differenzi fl-Istatus taċ-Ċiklu taċ-Ċelloli Taħt l-Eteroġeneità Traskriterettiva fil-Kompartiment HSC. Rep taċ-Ċellula 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, N.M.; El-Maadawy, W.H.; Seif El-Din, S.H.; Hammam, O.A.; Mohamed, S.H.; Ezzat, S.M.; Safar, M.M.; Saleh, S. Rosmarinic acid ittaffi l-fibrogenesis epatika permezz ta 'soppressjoni ta' attivazzjoni / proliferazzjoni taċ-ċelluli stellati epatiċi u induzzjoni ta 'apoptożi. Pac. J. Trop. Med. 2017,10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, X.X.; Zhang, X.Y.; Ding, Y.Z.; Li, X.; Guan, X.M.; Li, H.; Cheng, M.; Cui, X.D. Effetti taċ- ċelluli proġenituri endoteljali fuq il- proliferazzjoni u l- funzjoni bijoloġika ta ' ċelluli stellati epatiċi taħt stress shear. Geddum. J. Appl. Physiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, X.H.; Liu, H.H.; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DC; Cui, J.F.; Chen, R.X. Ċelluli stellati epatiċi attivati jippromwovu l-progressjoni ta 'karċinoma epatoċellulari residwa wara s-sħana mis-sopravivenza awtofaġja sa proliferazzjoni. Int J. Hyperthermia 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY.; Le, C.T.; Kantata, KY.; Choi, DC; Cho, E.H. Succinate jinduċi fibrogenesis epatika billi jippromwovi l- attivazzjoni, il- proliferazzjoni u l- migrazzjoni, u jinibixxi l- apoptożi ta ' ċelloli stellati epatiċi. Bijokimika. Bijofiżi. Res. Komuni. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, R.A. Mekkaniżmi tal-fibrożi tal-fwied. Clin. Ċmien. Att 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, B.L.; Roth, K. 2.16一Mechanisms of Liver Fibrosis. Fit-tossikoloġija Komprensiva, it-tielet ed.; McQueen, C.A., Ed.; Elsevier: Oxford, ir-Renju Unit, 2018; pp. 397 ^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, C.V.; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, A.M. Mudelli ta' espressjoni ta' PDGF-A, -B, -C u -D u r-riċetturi PDGF a u |3 f'ċelloli stellati epatiċi tal-firien attivati (HSC). Ċitokini 2005, 31, 349-357. [CrossRef]
