Parti 2: Estratti Ta' Cistanche Deserticola Jistgħu Antagonizzaw Immunosenescence U Jestendu l-Ħajja tal-Ħajja fil-Ġrieden Suxxettibbli għas-Senescence Aċċelerat 8 (SAM-P8)
Mar 12, 2022
Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com
3.5. Estratti dfCistanche deserticola(ECD)Ippromwovi.
Apoptożi u Inibixxi Necrosis ta 'Lymphocytes fil-ġrieden SAM-P8. Il-livelli ta 'nekrożi u apoptożi fil-popolazzjonijiet tal-limfoċiti tad-demm ġew analizzati permezz ta' tbajja doppja b'Annexin V-FITC V/PI. Dan wera li l-proporzjon ta 'limfoċiti nekrotiċi f'SAM-P8micwas ogħla b'mod sinifikanti milli f'annimali ta' kontroll SAM-R1, filwaqt li l-proporzjon ta 'limfoċiti apoptotiċi kien aktar baxx (Figura 7). Is-supplimentazzjoni tad-dieta tal-ġrieden SAM-P8 bi tliet dożi differenti ta 'ECD setgħet tinibixxi l-livelli ta' nekrożi li dehru f'popolazzjonijiet ta 'limfoċiti periferali, filwaqt li ż-żewġ livelli ogħla biss ta' supplimentazzjoni ta 'ECD jipproduċu bidla sinifikanti fil-livell ta' limfoċiti apoptotiċi (Figura 7).
3.6.Estratti ta'Cistanche deserticola(ECD) Naqqas iċ-Ċitokine Proinfjammatorju IL-6 fil-Ġrieden SAM-P8.
Bħala indikatur ieħor tal-kapaċità tal-ECD li jinfluwenza bidliet relatati mal-età fis-sistema immuni, l-effett tas-supplimentazzjoni tad-dieta tal-ECD fuq il-livell ta 'numru ta' ċitokini (IFN-, TNF-, IL-2.IL{{4 }}.IL-10, GM-CSF, u IL-3) ġew analizzati bl-użu ta ' cytometric bead array analysis (CBA) li tinvolvi tbajja b'antikorpi ttikkettjati b'żebgħa fluworexxenti flimkien ma' żibeġ ċitometriċi qbid. Ir-riżultati (Figura8) wrew li ċ-ċitokin infjammatorju IL-6 ma żdiedx fil-ġrieden SAM-P8 ta' 8-xhur meta mqabbla mal-ġrieden SAM-R1 ta' kontroll tal-istess età, iżda żdiedet b'mod sinifikanti meta imqabbel ma'6-ġrieden SAM-R1 ta' xahar (riżultati mhux murija). Madankollu, supplimentazzjoni tad-dieta b'dożi għoljin u medji ta' ECD kienet kapaċi tipproduċi tnaqqis statistikament sinifikanti fil-livell ta' IL-6 fil-plażma (Figuri 8(a) u 8(b),<>
(IFN-, TNF-, IL-2, IL-10, GM-CSF, u IL-3) ma wrew l-ebda varjazzjonijiet sinifikanti bejn SAM-P8, SAM-R1, u gruppi ta’ ġrieden ittrattati bl-ECD (dejta mhux muri).
4. Diskussjoni
Id-difiża immuni kontra mikro-organiżmi invażivi ġodda jew ċelluli tat-tumur endoġeni tiddependi fuq id-diversità tar-repertorju taċ-ċelluli T, li mbagħad jiddependi fuq il-ġenerazzjoni u l-manutenzjoni ta’ ċelluli T naive[19]. Matul il-proċess ta 'tixjiħ, id-diversità tar-repertorju taċ-ċelluli T intwera li tiċkien b'mod drammatiku minħabba t-tnaqqis progressiv ta' ċelluli T naive fil-pool ta 'riżerva periferali. Huwa dan in-nuqqas ta' ċelluli T inġenji li jirrispondu li kien maħsub li huwa responsabbli għas-suxxettibilità ta' anzjani għal infezzjoni, kanċer, u riżultati ħżiena wara t-tilqim [20]. Diversi interventi, inklużi restrizzjoni kalorika [7], eżerċizzju [21], u supplimentazzjoni ta 'vitamina E [8], kollha ntużaw biex jimlew b'suċċess iċ-ċelluli T naive u b'hekk jestendu l-ħajja u jnaqqsu l-bidu ta' infezzjoni u kanċer fost l-anzjani. F'dan l-istudju, wrejna li l-ECD huwa kapaċi jżid il-livell ta 'ċelluli T naive fil-pool periferali u kien hemm estensjoni konkomitanti tal-ħajja u tnaqqis fil-frekwenza tal-formazzjoni tat-tumur fil-ġrieden aċċelerati bis-senescence (ECDtherapeutic groupversusSAM-P8 ,0 kontra 1/6). Għalhekk, jidher raġonevoli li jiġi konkluż li l-kapaċità tal-ECD li ireġġa' lura t-tnaqqis dipendenti fuq l-età taċ-ċelluli T naive periferali tista' tikkontribwixxi għall-effetti magħrufa tagħha fit-tnaqqis tal-mard relatat mal-età li ġej minn osservazzjonijiet kliniċi fit-tul.
5. Materjali u Metodi
5.1.Materjali.
Fir-rispons immuni normali, wara l-konteniment u l-eliminazzjoni ta 'antiġen barrani, ħafna miċ-ċelluli T estiżi b'mod klonali jgħaddu minn apoptosi b'frazzjoni żgħira biss tinżamm bħala ċelluli T tal-memorja. Konsegwentement, hekk kif l-organiżmu immuni-kompetenti jixjieħ, iċ-ċelluli T tal-memorja periferali jakkumulaw bħala riżultat ta 'ħajja ta' espożizzjoni għal anti-ġeni barranin li jikkonvertu ċelluli T naive f'ċelluli tal-memorja[22,23]. Numru ta 'studji ssuġġerew li difetti ta' apoptożi tal-limfoċiti f'annimali anzjani u bnedmin jikkontribwixxu wkoll għat-tkabbir tal-kompartiment taċ-ċelluli T tal-memorja [24,25]. Barra minn hekk, studju reċenti wera li abbundanza żejda ta 'ċelluli T tal-memorja periferali tista' tinibixxi l-proliferazzjoni omeostatika ta 'ċelluli T naive [26]. Dawn l-istudji reċenti ssuġġerew ukoll li ċ-ċelluli T tal-memorja jistgħu joħorġu livelli għoljin ta 'ċitokini proinfjammatorji li jistgħu jikkontribwixxu għal infjammazzjonijiet persistenti f'diversi tessuti ta' l-anzjani. Konsegwentement, it-tnaqqis tal-livell ta 'ċelluli T tal-memorja għandu jkun ta' benefiċċju kemm għall-proliferazzjoni omeostatika ta 'ċelluli T naive kif ukoll biex itaffi l-istat infjammatorju żejjed li jidher f'organiżmi anzjani. F'dan l-istudju, suppliment tad-dieta b'ECD intwera li jista 'jnaqqas il-livell ta' ċelluli T tal-memorja periferali u jżid il-livelli ta 'ċelluli T naive. Barra minn hekk, is-supplimentazzjoni tal-ECD żiedet l-ispazju tal-apoptożi għal limfoċiti naive ġodda. In-nekrożi fil-limfoċiti periferali, li hija prinċipalment indotta minn stress ossidattiv f'annimali senili, ġiet inibita wkoll.
Teżisti evidenza estensiva li tindika li t-tixjiħ f'organiżmu mhux biss huwa kkaratterizzat minn defiċjenza immuni iżda wkoll minn żieda fl-infjammazzjoni kronika[27. L-istatus proinfjammatorju huwa manifestat bl-aktar mod ċar f'żieda, u IL-1, fiċ-ċirkolazzjoni flimkien ma 'frekwenzi miżjuda ta' mard infjammatorju kroniku assoċjat mat-tixjiħ bħall-marda ta 'Alzheimer, mard ta' Parkinson, u aterosklerożi. Waħda mill-aktar ċitokinesi infjammatorji prominenti hija IL-6 u l-konċentrazzjoni fil-plażma tagħha tiżdied mat-tixjiħ u l-mard relatat mal-età [18,28,29], u studji epidemjoloġiċi jissuġġerixxu li IL-6 huwa bijomarkatur tajjeb tal-lonġevità peress li hija relatata mill-qrib mal-mortalità f'koorti ta 'pazjenti anzjani [30,31]. B'mod konsistenti ma' dan, għadd ta' interventi terapewtiċi li jnaqqsu l-konċentrazzjoni ta' IL-6 huma kapaċi
Figura 6: L-effetti tas-supplimentazzjoni tad-dieta ECD fuq l-antiġen taċ-ċelluli staminali-1 (Sca-1) fil-limfoċiti tad-demm periferali tal-ġrieden SAM-P8. Ġrieden maskili SAM-P8 ta 'tmien xhur u SAM-RI ta' kontroll ġew maqsuma f'5 gruppi. It-3 gruppi ta’ trattament ta’ annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba’ ġimgħat b’dieti supplimentati b’dożi baxxi (100mg/kg), medji 500mg/kg), u għoljin ta’ 250 mg/kg) ta’ ECD u ż-żewġ gruppi ta’ annimali ta’ kontroll ġew mitmugħa fuq il- l-istess dieta mingħajr suppliment. Wara s-sawm għal 12-il siegħa, inġabar demm periferali minn annimali anestetizzati u suġġett għal analiżi FACS kollha kif deskritt fit-Taqsima 5. (a) FACSplots rappreżentattivi tal-gruppi differenti ta' ġrieden iġġenerati mill-gting fuq l-antiġen taċ-ċelluli staminali-1 (Sca{{{ 20}})ċelluli pożittivi.(b) Istogramma li turi l-perċentwal ta' antiġen taċ-ċelluli staminali-1 (Sca{-1)ċelluli pożittivi fid-demm periferali tal-gruppi differenti ta' annimali.Bars jirrappreżentaw il-laħam SD (f'kull grupp,{ {23}}).w*<0.01 sam-p8="" versus="" sam-r1;**=""><0.01 each="" treated="" group="" versus="" sam-p8="" group="" (by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">
Figura 7: L-effetti tas-supplimentazzjoni tad-dieta ECD fuq l-apoptożi u n-nekrożi tal-limfoċiti fil-ġrieden SAM-P8 ta 'età. Ġrieden maskili SAM-P8 ta 'tmien xhur u SAM-RI ta' kontroll ġew maqsuma f'5 gruppi. It-3 gruppi ta’ trattament ta’ annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba’ ġimgħat b’dieti supplimentati b’dożi baxxi (100mg/kg), medji (500mg/kg) u għoljin (2500mg/kg) ta’ ECD u ż-żewġ gruppi ta’ annimali ta’ kontroll ġew mitmugħa bihom. l-istess dieta mingħajr suppliment. Wara s-sawm għal 12-il siegħa, inġabar demm periferali minn annimali anestetizzati u suġġett għal analiżi FACS kollha kif deskritt fit-Taqsima 5. (a) FACSplots rappreżentattivi tal-gruppi differenti ta 'ġrieden iġġenerati billi gating fuq limfoċiti tad-demm b'tebba doppja b'Annexin V-FITC /PI. (b) Istogramma li turi l-perċentwal ta' limfoċiti apoptotiċi (ċelluli pożittivi ta' Annexin V-FITC) fid-demm periferali tal-gruppi differenti ta' annimali. (c) Istogramma li turi l-perċentwal ta' limfoċiti nekrotiċi (ċelluli pożittivi PI) fid-demm periferali tal-gruppi differenti ta' annimali. Il-vireg jirrappreżentaw il-mear SD (f'kull grupp,= 10)."<0.05 sam-p8=""><0.05each treated="" groupversussam-p8group(by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">
Figura 8: Effetti tas-supplimentazzjoni tad-dieta ECD fuq il-livell ta 'ċitokini proinfjammatorji tas-serum L6 tal-ġrieden SAM-P8. Ġrieden maskili ta 'tmien xhur SAM-P8 u kontroll SAM-RI ġew maqsuma, f'5 gruppi. It-3 gruppi ta' trattament ta 'annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba' ġimgħat b'dieti supplimentati b'baxx (100mg/kg), medju (500mg/ kg), u dożi għoljin (2500mg/kg) ta 'ECD, u ż-żewġ gruppi ta' annimali ta 'kontroll ġew mitmugħa bl-istess dieta mingħajr suppliment. Wara s-sawm għal 12-il siegħa, il-plażmi nġabru u ċ-ċitokini fil-plażma fil-gruppi differenti tal-annimali ġew determinati permezz ta' immunoassay ċitometriku b'firxa ta' żibeġ kollha kif deskritt fit-Taqsima 5.(a) EACSplots rappreżentattivi tal-gruppi differenti ta' ġrieden iġġenerati minn gatingonIL-6 firxa ta 'żibeġ ċitometriċi. (b)Istogramma li turi l-konċentrazzjonijiet taċ-ċitokina IL6 fil-plażma tal-gruppi ta' annimali differenti.Bars jirrappreżentaw il-medja±SD (f'kull grupp,= 10).<0.001each treated="" group="" versus="" sam-p8="" group="" (by="" one-way="" anova="" with="" post="" hoc="">
itaffi l-mard relatat mal-età [18]. F'dan l-isfond, kien sinifikanti li f'dan l-istudju s-supplimentazzjoni tad-dieta bl-ECD kienet kapaċi tnaqqas il-konċentrazzjonijiet periferali ta' IL-6, bl-implikazzjoni li dan l-effett jista' jikkontribwixxi għall-mekkaniżmi sottostanti tat-tnaqqis tal-frekwenza ta' mard relatat mal-età li inkisbu permezz tal-użu fit-tul tal-ECD fil-prattika klinika.
Flimkien mal-bidliet fir-rispons immuni adattiv li jseħħ bl-età, hemm ukoll bidliet kbar fl-immunità intrinsika bħala età tal-organiżmu. Fost dawn, il-bidliet fiċ-ċelloli naturali killer [18], l-ewwel linja ta’ komponenti ċellulari li jipprovdu lisi ċitotossika diretta taċ-ċelloli tat-tumur u taċ-ċelloli infettati bil-virus, kienu estensivi peress li l-anzjani juru suxxettibilità akbar kemm għall-iżvilupp tat-tumur kif ukoll għall-infezzjonijiet tal-virus [32]. ]. Dan l-istudju indika li ċ-ċelluli CD3 flimkien ma 'Ly49 flimkien ma' NK kienu preżenti f'livelli aktar baxxi b'mod sinifikanti fil-ġrieden SAM-P8 senili meta mqabbla ma 'annimali ta' kontroll SAM-R1, li jista 'jkun fattur sottostanti ieħor li jikkunsidra ż-żieda fis-suxxettibilità tal-ġrieden anzjani għall-kanċer u l-infezzjoni tal-virus. Iż-żieda fil-livell ta 'ċelluli NK dehru f'dan l-istudju wara suppliment tad-dieta bl-ECD tista' għalhekk tkun ta 'benefiċċju għal organiżmi anzjani f'termini ta' reżistenza akbar għall-iżvilupp tat-tumur u l-infezzjoni tal-virus. Madankollu, huma meħtieġa aktar studji biex jiċċaraw ir-rwol tal-effett tal-ECD fuq iċ-ċelloli NK f'organiżmi anzjani.
Bħala konklużjoni, dan l-istudju wera li t-trattament tas-substrain suxxettibbli tal-ġurdien aċċelerat għas-senescence, SAM-P8, b'ECD jista 'jikkaġuna treġġigħ lura sinifikanti ta' alterazzjonijiet tal-immunosenescence relatati mal-età. Defiċjenzi kemm fil-popolazzjonijiet taċ-ċelluli periferali kif ukoll tal-milsa ta 'ċelluli T naive u ċelluli NK tnaqqsu, filwaqt li tnaqqsu wkoll il-livelli ta' ċelluli tal-memorja żejda. Barra minn hekk, is-suppliment tad-dieta bl-ECD kien kapaċi jrażżan kemm in-nekrożi fil-limfoċiti periferali kif ukoll il-livelli taċ-ċitokin proinfjammatorju, IL-6. Fl-aħħarnett, barra minn hekk, biex iġibu bidliet fis-sistema immuni senile, is-suppliment tad-dieta ECD tawwal b'mod sinifikanti l-ħajja tal-mic senileSAM-P8.
Referenzi
[1] Y.Jiang u PF.Tu, "Analiżi tal-kostitwenti kimiċiCistanchespeċi, "Ġurnal tal-Kromatografija A, vol.1216, nru 11, pp.1970-1979,2009.
[2] Q.Xiong K. Hase Y.Tezuka,T.Tani,T.Namba,uSKadota. "Attività epatoprotettiva ta 'phenylethanoids minnCistanche deserticola," PlartaMedica,vol.64,nru.2,pp.120-125,1998.
[3]"Immunoloġija u tixjiħ fl-Ewropa. Proċediment tat-2 Konferenza dwar il-Bijoloġija Bażika u l-Impatt Kliniku tal-Immunosenescence Marzu 22-26, 2001, Cordoba, Spanja, "Experimental Gerontology, vol.37, Nru.{{5} }, pp.183-473,2002.
[4] G.-D. Xuan u C.-Q. Liu, "Riċerka dwar il-effett ta 'phenylethanoid glycosides(PEG) tal-Cistanche deserticolafuqkontra t-tixjiħfil-ġrieden ta' età indotti minn D-galactose,"Journal of Chinese Medicinal Materials, vol31, no 9, pp. 1385-1388,2008.
[5] D.Aw, ABSilva, u DBPalmer, "Immunosenescence emerging challenges for an aging population," Immwmology, vol.120, no.4, pp.435-446,2007.
