Parti 1: Estratti Ta' Cistanche Deserticola Jistgħu Antagonizzaw l-Immunosenescence U Jestendu l-Ħajja f'ġrieden Suxxettibbli għas-Senescence Aċċelerat Ġurdien 8 (SAM-P8)

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Ke Zhang,1 Xu Ma,1 Wenjun He,1 Haixia Li,1 Shuyan Han,1 Yong Jiang,1

Hounan Wu,2 Li Han,3 Tomohiro Ohno,3 Nobuo Uotsu,3 Kohji Yamaguchi,3 Zhizhong Ma,1,4 u Pengfei Tu1

1 Dipartiment tal-Mediċini Naturali, Skola tax-Xjenzi Farmaċewtiċi, Peking University, Nru 38 Xueyuan Road, Beijing 100191, iċ-Ċina

2 Ċentru Analitiku Mediku u Sanu, Università ta 'Peking, Nru 38 Xueyuan Road, Beijing 100191, iċ-Ċina

3 Fakultà tar-Riċerka Fundamentali, Istitut tar-Riċerka Fancl, Korporazzjoni FANCL, 12-13 Kamishinano, Totsuka-ku, Yokohama, Kanagawa 244-0806, Ġappun

4 Dipartiment ta 'Integrazzjoni tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża u tal-Punent, Skola tax-Xjenzi Mediċi Bażiċi, Università ta' Peking, Nru 38 Xueyuan Road, Beijing 100191, iċ-Ċina

Il-korrispondenza għandha tkun indirizzata lil Zhizhong Ma; zhma@bjmu.edu.cn u Pengfei Tu; pengfeitu@bjmu.edu.cn Riċevuti fid-19 ta' Lulju 2013; Rivedut fit-23 ta’ Ottubru 2013; Aċċettat fil-11 ta' Novembru 2013; Ippubblikat fid-9 ta’ Jannar 2014; Editur Akkademiku: Adair Santos

1. Introduzzjoni

Cistanche deserticola, wieħed mill-aktar popolari mediċini erbali tradizzjonali Ċiniżi / prodotti tas-saħħa, ġie deskritt f'numru ta 'farmakopeji veġetali Ċiniżi storiċi bħala li għandhom proprjetajiet antiaging. Konsegwentement, intuża ħafna fiċ-Ċina għat-trattament ta 'diversi disturbi relatati mal-età inklużi dimenzja senile, impotenza, infertilità, infezzjoni kronika, u disturbi ematopojetiċi fl-anzjani [1]. Approċċi kimiċi moderni ppermettew li żewġ tipi prinċipali ta 'komposti, phenylethanoid glycosides, u oligosaccharides, jiġu iżolati bħala l-ingredjenti attivi ewlenin ta' Cistanche deserticola [1]. Fl-aħħar għaxar snin, Cistanche deserticola u l-estratti tagħha ġew studjati b’mod intensiv u wrew li huma kapaċi jipproteġu n-newroni minn korriment ikkawżat minn newrotossini[2], jinibixxu l-epatotossiċità indotta mit-tetrachloride tal-karbonju [2], u jippromwovu l-irkupru taċ-ċelluli tal-mudullun minn Ħsara mir-radjazzjoni kkaġunata mill-ko [3]. Intwera wkoll li għandu effetti anti-infjammatorji, antiossidanti u kontra t-tixjiħ [4]. Madankollu, jekk Cistanche deserticola tistax iżid il-ħajja u x'inhuma l-mekkaniżmi molekulari sottostanti [3] assoċjati mal-ħajja tiegħu.kontra t-tixjiħproprjetajiet ma ġewx ittestjati b'mod rigoruż.

Estratti ta' Cistanche deserticola kontra t-tixjiħ

L-immunosenescence, jiġifieri, l-alterazzjoni tas-sistema immuni bl-età tifforma l-isfond li fuqu ġiet innutata żieda fis-suxxettibilità għal infezzjonijiet, kanċer, mard newrodeġenerattiv, u mard awtoimmuni fl-anzjani [5]. Interventi terapewtiċi, bħar-restrizzjoni kalorika [6] u s-supplimentazzjoni tal-vitamina E, ġew irrappurtati li huma effettivi biex idewmu l-progressjoni tal-immunosenescence u għalhekk inaqqsu l-morbidità ta’ xi mard relatat mal-età kif ukoll itawlu l-ħajja kemm tal-bnedmin kif ukoll tal-annimali gerriema. [7, 8]. Madankollu, studji f'dan il-qasam huma kkumplikati mill-fatt li t-tixjiħ huwa assoċjat mal-paradoss ta 'defiċjenza immuni simultanja u infjammazzjoni kronika [9]. Dan ifisser li l-istimulazzjoni sempliċi tal-proliberazzjoni tal-limfoċiti jew l-anti-infjammazzjoni ma tirrappreżentax interventi terapewtiċi ideali fit-trattament tat-tixjiħ u l-kundizzjonijiet relatati mal-età [10]. Konsegwentement fit-tfittxija għal interventi mediċi li kapaċi jipprevjenu jew itaffu kundizzjonijiet relatati mal-età inklużi infezzjonijiet, kanċer, mard awtoimmuni, aterosklerożi, u mard newrodeġenerattiv li huma kawżi ewlenin ta’ mewt u diżabilità, u tiswija ta’ difetti fis-sistema immuni għandhom ikunu akkumpanjati minn inibizzjoni ta’ reazzjonijiet infjammatorji.

Il-ġurdien aċċelerat bis-senescence [11] huwa mudell tal-ġurdien inbred, derivat mir-razza AKR/J, li tintuża ħafna fi studji tat-tixjiħ. Is-substrain P8 (SAM-P8) ta 'dawn il-ġrieden għandu ħajja mqassra b'mod sinifikanti meta mqabbel mas-substrain R1 (SAM-R1), li juri wkoll proċess ta' tixjiħ aktar bil-mod [12]. B'mod parallel mat-tixjiħ prematur tagħhom, il-ġrieden SAM-P8 juru wkoll żieda fis-senescence newroloġika, immunosenescence, u defiċits ematopojetiċi relatati mal-età li jimitaw mill-qrib il-karatteristiċi tipiċi tat-tixjiħ tal-bniedem [13, 14]. Analiżi tal-mekkaniżmi sottostanti responsabbli għall-proċess ta 'tixjiħ aċċellerat u disturbi relatati mal-età tindika li disfunzjoni mitokondrijali [15], stress ossidattiv, u żieda fir-rata ta' mutazzjoni tad-DNA somatika kollha jidhru li huma involuti [16, 17]. Din is-sistema tal-ġurdien, bl-isfond ġenetiku omoġenju tagħha, għalhekk, tipprovdi mudell sperimentali eċċellenti għall-istudju tat-terapewtiċi tat-tixjiħ u kontra t-tixjiħ [12] ġew depożitati fl-erbarju tal-Iskola tax-Xjenzi Farmaċewtiċi, l-Università ta 'Peking, iċ-Ċina.

cistanche jista 'anti-aging

2. Materjali u Metodi

2.1. Materjali.

FriskCistanche deserticola YC MAinġabret minn diversi żoni fil-majjistral taċ-Ċina inklużi r-reġjuni awtonomi ta 'Xinjiang, Neimenggu, u Ningxia. Il-kampjuni użati biex jippreparaw l-estratti ġew awtentikati mill-Professur Pengfei Tu, speċjalista tal-farmakognożija fid-Dipartiment tal-Mediċini Naturali, l-Iskola tax-Xjenzi Farmaċewtiċi, l-Università ta 'Peking. Il-kampjun tal-vawċer ta' Cistanche deserticola (numru CD-2007-03-08) użat kellu Science Centre (Beijing, iċ-Ċina). Dan l-istudju ġie approvat mill-Kumitat tar-Riċerka dwar l-Annimali ta 'l-Università ta' Peking u sar skond il-linji gwida għall-Kura u l-Użu ta 'Annimali tal-Laboratorju fl-Università ta' Peking. In-numru taċ-ċertifikazzjoni ta' dawn il-ġrieden kien SCXK2001-2008. Il-ġrieden inżammu f'gaġeġ metaboliċi standard fl-ambjent

C, 45–60 fil-mija umdità, u ċiklu ta 'dawl/dlam ta' 12-il siegħa) u ppermettew aċċess liberu għall-ikel u l-ilma. Wara ġimgħatejn ta 'akklimazzjoni, l-annimali ġew maqsuma f'ħames gruppi: 3 gruppi ta' trattament ECD, grupp ta 'kontroll SAM-R1, u grupp ta' kontroll SAM-P8 mingħajr trattament. Id-dieta tat-3 gruppi ta’ trattament ġiet issupplimentata b’dieta mħallta b’konċentrazzjonijiet differenti ta’ ECD: rendiment ta’ dożi medji baxxi (50 mg/kg), medji (150 mg/kg) u għoljin (450 mg/kg) ta’ ECD kuljum . Is-SAM-R1 u SAM-P8 l-ebda gruppi ta 'kontroll ta' trattament ġew mitmugħa bl-istess dieta mingħajr ECD. Il-kejl tal-konsum tal-ikel tal-annimali kollha sar kull tlett ijiem matul l-esperiment. Pressjoni tad-demm u xhur tal-qalb għat-tul tal-esperiment biex jiddeterminaw l-istat tas-saħħa tal-ġrieden. It-tul tal-ħajja ta 'kull ġurdien kien Vijabbli limfoċiti apoptotiċi u nekrotiċi ġew ikkwantifikati bl-użu tal-kit Annexin V-FITC (Beijing Biosea Biotechnology Co., Ltd., Beijing, Ċina). Il-limfoċiti ġew soġġetti għal tbajja doppja b'annexin V tikkettat konjugat fl-isothiocyanate tal-fluorescein (Annexin V-FITC) u sospiżi b'propid f'200 ta' buffer li torbot (10 mM HEPES/NaOH,

2.2 Preparazzjoni ta' Estratti ta' Cistanche deserticola (ECD) u Analiżi HPLC.

Cistanche deserticola imnixxef bl-arja u mqatta'(2.0 kg) ġie trab u estratt darbtejn b'70 fil-mija etanol għal siegħa. Il-proporzjonijiet tal-pjanti/etanol użati kienu 1/6 (w/w) fl-ewwel estrazzjoni u 1/4 (w/w) fit-tieni. Iż-żewġ estratti ġew magħquda u ffiltrati qabel ma ġew ikkonċentrati għal densità relattiva ta '1.10-1.15 taħt il-pressjoni mnaqqsa f'60 C. Dan il-konċentrat imbagħad ġie mnixxef bil-vakwu u t-trab li rriżulta kien l-estratt ta' Cistanche deserticola (ECD) użat matul dan l-istudju. .

Il-komponenti tal-ECD ġew analizzati bl-użu tal-HPLC kif deskritt qabel [1]. Fil-qosor, 100 mg ta' trab ECD ġie maħlul f'10.0 mL HO u wara l-filtrazzjoni injettat fl-HPLC. Analiżi HPLC twettqet fuq sistema ta 'kromatografija likwida Agilent 1100 (Agilent Co., USA) Il-fażi mobbli kienet tikkonsisti f'taħlita ta' metanol (A) u 0.10 fil-mija aċidu metanojku (B).Ġie impjegat programm ta 'kromatografija gradjent; dan kien 26.5 fil-mija (A) u 73.5 fil-mija (B) f'0-7 min, 26.5-29.5 fil-mija (A) u 73.5-70.5 (B) fi 8-10 min, u 29.5 fil-mija (A) u 70.5 fil-mija (B ) f'20–27 min. Ir-rata tal-fluss inżammet kostanti f'1.0 mL/min, il-volum tal-injezzjoni kien 10 mL, u t-temperatura tal-kolonna nżammet f'25 C. Intuża detector UV f'330 nm biex jimmonitorja l-ħruġ tal-kolonna u jiġġenera kromatogrammi.

Cistanche deserticola imnixxef u mqatta'

Phenylethanoid glycosides u oligosaccharides ta' cistancheġew identifikati mill-ħinijiet ta 'żamma u l-ispettri ta' assorbiment tagħhom. Il-kwantifikazzjoni saret permezz ta 'kurvi ta' kalibrazzjoni standard esterni. Ir-rendiment ta'estratti ta' Cistanche deserticola(ECD) kien madwar 3.33 fil-mija u l-kontenut tal-phenylethanoids kien 17.94 fil-mija. Acteoside u echinacoside kienu żewġ kostitwenti ewlenin f'din il-frazzjoni, bil-kontenut tagħhom ikun 3.80 fil-mija u 8.25 fil-mija, rispettivament. L-oligosaccharides jammontaw għal 82 fil-mija tal-ECD totali. Il-konċentrazzjonijiet tal-komponenti attivi ewlenin tal-ECD huma murija fit-Tabella 1.

2.3 Analiżi tal-Ħajja tal-Annimali.

Dan l-istudju ffoka fuq l-investigazzjoni dwar jekkestratti ta' Cistanche deserticolahuma kapaċi jestendu l-ħajja tal-ġrieden SAM-R1 inxtraw miċ-Ċentru ta 'Tgħammir u Riċerka tal-Annimali tal-Laboratorju tal-ġrieden SAM-P8 tas-Saħħa tal-Università ta' Peking u ireġġgħu lura l-istatus ta 'immunosenescence tagħhom.

2.4. Analiżi Statistika.

Id-dejta tintwera bħala valuri medji SD Il-paraguni bejn gruppi differenti saru b'ANOVA f'direzzjoni waħda b'test post hoc. Fl-istudju dwar il-ħajja, id-dejta għaddiet minn analiżi tas-sopravivenza Kaplan-Meier, li kienet tinkludi l-użu kemm tat-testijiet Log-rank (Mantel-Cox) kif ukoll Gehan-Breslow-Wilcoxon. Analiżi statistika saret bl-użu tal-Pakkett Statistiku għax-Xjenzi Soċjali għall-Windows (SPSS, phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.4) li fih 0.01 fil-mija sodium azide, u suġġett għal analiżi FCM. Is-sottopopolazzjonijiet tal-limfoċiti ġew analizzati bil-fluss ċitometrija bl-użu ta 'ċitometru tal-fluss FACS Calibur (BD Biosciences, San Diego, CA, USA) u softwer ta' analiżi BD CellQuest. Chicago, IL) u li jkun sinifikanti.

Phenylethanoid glycosides u oligosaccharides ta' cistanche

3. Riżultati

Valur ta' inqas minn 0.05 ġie kkunsidrat.Valutazzjoni tal-Vijabilità Ċellulari ta' Limfoċiti T Periferali minn Annexin V-FITC u PI Double Staining u Analiżi FACS. Wara supplimentazzjoni tad-dieta ta 'ġrieden SAM-P8 bi tliet dożi ta' ECD għal 4 ġimgħat, l-annimali ġew imwaħħla għal 12-il siegħa u mbagħad ġew anestetizzati, u nġabar u analizzat demm.

3.1. Analiżi ta 'Komponenti Attivi Potenzjali fl-Estratti ta' Cistanche deserticola (ECD). Kif muri fit-Tabella 1, ECD huwa magħmul prinċipalment minn żewġ tipi ta 'kompost, phenylethanoid glycosides, u oligosaccharides. Fil-phenylethanoid glycosides, l-echinacoside, l-acteoside, u l-{3}}epiloganic acid ġew identifikati, filwaqt li fl-oligosaccharides, ġie identifikat biss galactitol.

3.2.L-ImpattofCistanchedeserticolakbdO4ctfu l-Medju tal-Ħajja tal-Ġrieden SAM-P8. Għal dan u studji sussegwenti ġrieden maskili SAM-P8 ta 'tmien xhur kienu maqsuma f'4 gruppi. Fosthom, grupp wieħed ta' ġrieden kienu mitmugħa b'dieta normali mingħajr ECD, it-3 gruppi l-oħra belgħu separatament id-dieti li fihom proporzjonijiet differenti ta 'ECD. Ġrieden mis-substrain SAM-R1, li għandhom proċess ta 'tixjiħ u ħajja anormali, intużaw bħala grupp ta' kontroll fl-esperimenti kollha.

Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll SAM-R1, il-ħajja medja tal-ġrieden SAM-P8 tqassar b'mod sinifikanti (Figura 1(a);<0.001). although="" supplementation="" of="" diet="" with="" the="" low="" dose(50mg/kg)of="" ecd="" failed="" to="" produce="" a="" significant="" increase="" in="" life="" spanofsam-p8mice,="" at="" the="" medium="" (150="" mg/kg)and="" high(450="" mg/ml)="" supplementary="" doses="" there="" was="" a="" dose-dependent="" increase="" in="" life="" span="" (figures="" 1(a)and=""><0.05 0.0thatwasconfirmedby="" kaplan-meier="" survival="" analysis,="" which="" included="" use="" of="" both="" the="" log-rank="" (mantel-cox)="" and="" gehan-breslow-wilcoxon="">

3.3. Treġġigħ lura ta 'Immunosenescence fil-ġrieden SAM-P8 minn Estratti ta' Cistanche deserticola (ECD). Tnaqqis ta 'limfoċiti T periferali naive u żieda konkomitanti ta' limfoċiti T tal-memorja periferali huma karatteristiċi prominenti ta 'immunosenescence li huma meqjusa b'mod wiesa' bħala r-raġunijiet sottostanti ewlenin għal anormalitajiet immunoloġiċi relatati mal-età. Din l-immunosenescence f'SAM-P8 relattiva għal SAM-R1

aniftalsv0biċ-ċar evidenti meta l-analiżi FACS kellha turi (CD3 flimkien ma' CD44wCD4Bigh)limfoċiti bħala indikatur ta' ċelluli T naive u (CD3 flimkien ma' CD44gh CD45 BR limfoċiti bħala indikatur ta' ċelluli T tal-memorja. Għalhekk, demm periferali inbpth( Figura 2) u ċellola tal-milsa (Figura 3) dehru fil-ġrieden SAM-P8 livelli mnaqqsa ta' ċelluli T naive u livelli miżjuda ta 'ċelluli T tal-memorja. Is-supplimentazzjoni tad-dieta tal-ġrieden SAM-P8 b'ECD instabet li kienet kapaċi ireġġa' lura dawn l-indikaturi ta' immunosenescence f'dożaġġ. moda dipendenti kemm fil-popolazzjonijiet tad-demm periferali (Figura 2) kif ukoll taċ-ċelluli tal-milsa (Figura 3) Bħala indikatur addizzjonali tat-treġġigħ lura tal-immunosenescence bis-suppliment ECD tad-dieta, il-livell taċ-ċelluli naturali killer [18], markatur ċellulari ewlieni tas-sistema immuni intrinsika Dan wera li s-suppliment tad-dieta ECD irriżulta f'żieda dipendenti fuq id-doża fiċ-ċelluli NK(CD3 plus CD49 plus) kemm fid-demm periferali (Figura 4) kif ukoll fil-popolazzjonijiet tal-limfoċiti taċ-ċelluli tal-milsa (Figura 5).

3.4. Estratti ta 'Cistanche deserticola Isaħħu l-Intensità tal-Fluworexxenza Relatice ta' Ċelloli Pożittivi Sca-1 fil-Ġrieden SAM-P8. L-antiġenu taċ-ċelluli staminali-1(Sca-1)huwa wieħed mill-aktar bijomarkaturi prominenti taċ-ċelloli staminali ematopojetiċi (HSC) fil-popolazzjonijiet taċ-ċelluli tal-mudullun. ġew esportati ġodda mill-mudullun għad-demm periferali fejn jgħaddu.

Figura 2:FACSanaliżi tal-effett tas-supplimentazzjoni tad-dieta b'ECD onnaiveand memorja Tlymphocytesin peripheralblood.Eight-xhur maskili SAM-P8 u kontroll SAM-RI ġrieden kienu maqsuma f'5 gruppi. It-3 gruppi ta' trattament ta' annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba' ġimgħat b'dieti supplimentati b'dożi baxxi (100mg/kg), medji (500mg/kg) u għoljin (2500 mg/kg) ta' ECD, u ż-żewġ annimali ta' kontroll

billi gatingon CD3 flimkien ma Tcels. Il-linji murija kull plott jindikaw il-limiti użati biex jiddistingwu CD44x* u CD45 għandhom jintużaw identifikazzjoni baxxa totali ta 'naive (CD3 plus Cp b"C4RB→) u memorja (CD3 flimkien ma CD4hCD 4Bl)T-ċelluli. b) Istogramma li turi gruppi ġew mitmugħa Wara s-sawm għal 12-il siegħa, inġabar demm periferali minn annimali RB Tcellsubsets anestetizzati u soġġett għal analiżi FACS kollha kif deskritt fit-Taqsima 5. fid-demm periferali tal-gruppi ta' annimali differenti.(c)Istogramma li turi l-perċentwal ta' ċelluli T tal-memorja fid-demm periferali tal-gruppi ta' annimali differenti. Il-vireg jirrappreżentaw il-medja±SD (f'kull grupp,=10).<0.05sam-p8versus>

Figura 3: FACSanaliżi tal-effett tas-supplimentazzjoni tad-dieta b'ECD onnaive andmemory Tlimfocytes inspleen. Ġrieden maskili SAM-P8 u controlSAM-RI ta' tmien xhur kienu maqsuma, f'5 gruppi. It-3 gruppi ta' trattament ta 'annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba' ġimgħat b'dieti supplimentati b'dożi baxxi (100mg/kg), medji (500mg/kg), u għoljin (2500mg/kg) ta 'ECD u gruppi ta' l-annimali ta 'kontroll minn gatingon CD3 flimkien ma' Tcells. Il-linji murija fuq kull plott jindikaw li għandhom jintużaw biex jiddistingwu CD44zhand CD45 bw użati biex jippermettu l-identifikazzjoni ta 'naive (CD3 plus CD "CsRB动) u memorja (CD3 plus CD42CD I'm) Tcels. (b) Istogramma li turi kienu mitmugħa fuq l-istess dieta mingħajr suppliment.Wara s-sawm għal 12-il siegħa, il-limfoċiti tal-milsa nġabru minn annimali tas-sottosettijiet taċ-ċelluli RB T anestetizzati u ġew soġġetti għal analiżi FACS kollha deskritti fit-Taqsima 5. (a) FACSplots rappreżentattivi tal-gruppi differenti ta 'mic iġġenerat.

Figura 4: L-effetti tas-supplimentazzjoni tad-dieta ECD fuq ċelluli naturali killer (ċelluli NK, CD3 flimkien ma 'CD49 flimkien ma' ċelluli T) fil-popolazzjonijiet ta 'limfoċiti tad-demm periferali ta' ġrieden SAM-P8. Ġrieden SAM-P8 maskili ta 'tmien xhur u SAM-RI ta' kontroll ġew maqsuma f'5 gruppi. It-3 gruppi ta’ trattament ta’ annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba’ ġimgħat b’dieti supplimentati b’dożi baxxi (100mg/kg), medji (500mg/kg) u għoljin (2500mg/kg) ta’ ECD u ż-żewġ gruppi ta’ annimali ta’ kontroll kienu għall- l-istess dieta mingħajr suppliment. Wara s-sawm għal 12-il siegħa, inġabar demm periferali minn annimali anestetizzati u suġġett għal FACSanalysis kollha kif deskritt fit-Taqsima 5. (a) Rappreżentanti FACS plots tal-gruppi differenti ta 'ġrieden iġġenerati minn gating fuq CD3 plus CD49 plus Tcells. (b) L-istogramma li turi l-perċentwal ta' Tċelluli killer naturali fid-demm periferali tal-gruppi ta' annimali differenti.Bars jirrappreżentaw il-medja±SD (f'kull grupp,=10).=<0.01><0.01 each="" treatedgroup="" versussam-p8group="" (byone="" way="" anovawith="" post="" hoc="">

Figura 5: L-effetti tas-supplimentazzjoni tad-dieta ECD fuq ċelluli qattiel naturali (NKcells, CD3 plus CD49 plus T-cells) fil-limfoċiti tal-milsa tal-ġrieden SAM-P8. Ġrieden SAM-P8 maskili ta 'tmien xhur u SAM-RI ta' kontroll ġew maqsuma f'5 gruppi. It-3 gruppi ta' trattament ta' annimali SAM-P8 ġew mitmugħa għal erba' ġimgħat b'dieti supplimentati b'dożi baxxi (100mg/kg), medji (500mg/kg), u għoljin (2500mg/kg) ta' ECD u ż-żewġ gruppi ta' annimali ta' kontroll kienu mitmugħa bl-istess dieta mingħajr suppliment. Wara s-sawm għal 12-il siegħa. limfoċiti milsa nġabru minn annimali anestetizzati u ġew soġġetti għal analiżi FACSasdeskritta fit-Taqsima 5. (a) FACS rappreżentattivi tal-gruppi differenti ta 'ġrieden iġġenerati permezz ta' gating fuq ċelluli T CD3 flimkien ma 'CD494. (b) Istogramma li turi l-perċentwali T killer naturali. ċelluli fil-limfoċiti tal-milsa tal-gruppi differenti tal-annimali.Bars jirrappreżentaw il-medja SD (f'kull grupp,= 10), # < 0.01="" sam-p8="" yersus=""><0.01 eachtreatedgroup="" versussam-p8group(by="" oneway="">

Differenzjazzjoni ulterjuri f'diversi tipi ta 'limfoċiti maturi. Konsegwentement, dawn iċ-ċelloli Sca-1 pożittivi jirrappreżentaw is-sors ewlieni ta' limfoċiti T naive fid-demm periferali. Figura 6 turi li meta mqabbla mal-ġrieden ta 'kontroll SAM-R1, l-intensità relattiva tal-fluworexxenza taċ-ċelloli Sca-1 pożittivi fil-ġrieden SAM-P8 kienet sostanzjalment aktar baxxa. Supplimentazzjoni tad-dieta ta 'SAM-P8ġrieden bi tliet dożi differenti ta' ECD intweriet li ttejjeb b'mod sinifikanti l-intensità relattiva tal-fluworexxenza taċ-ċelloli Sca-1 pożittivi (Figura 6).

Benefiċċju tal-ħwawar cistanche: kontra t-tixjiħ