Mhux Kollha Vaping Huwa L-istess: Effetti Pulmonari Differenzjali Ta Vaping Cannabidiol Versus Nikotina

 ASTRATT

Motivazzjoni Vaping sar metodu popolari ta 'nifs ta' diversi sustanzi psikoattivi. Filwaqt li l-evalwazzjoni tal-effetti respiratorji tal-vaping iffokat primarjament fuq prodotti li fihom in-nikotina, il-vaping tal-cannabidiol (CBD) qed isir dejjem aktar popolari. Bħalissa għadu mhux magħruf jekk l-effetti fuq is-saħħa tan-nikotina vaping u l-kannabinojdi humiex simili.

Għanijiet

Dan l-istudju jqabbel ħdejn xulxin l-effetti pulmonari ta 'inalazzjoni akuta ta' CBD vaporizzat kontra n-nikotina.

Metodi

Saru studji in vivo ta 'inalazzjoni fil-ġrieden u esperimenti ta' ċitotossiċità in vitro ma 'ċelluli umani biex jiġu vvalutati l-effetti li jinduċu ħsara fil-pulmun tas-CBD jew aerosols tan-nikotina emessi minn apparati vaping.

cistanche suppliment benefiċċji-żieda l-immunità

Kejl u riżultati ewlenin

L-infjammazzjoni pulmonari fil-ġrieden ġiet skurjata mill-istoloġija, iċ-ċitometrija tal-fluss, u l-livelli ta 'kwantifikazzjoni ta' ċitokini u kimokini proinfjammatorji. Il-ħsara fil-pulmun ġiet evalwata bl-istoloġija, il-kejl tal-attività tal-myeloperoxidase, u l-livelli ta' newtrophil elastase fil-fluwidu tal-ħasil tal-bronkoalveolari u t-tessut tal-pulmun. L-integrità epiteljali/endoteljali tal-pulmun ġiet evalwata billi kkwantifikaw il-livelli tal-proteini BAL, it-tnixxija tal-albumina, u t-tnixxija pulmonari tal-FITC-dextran. L-istress ossidattiv ġie ddeterminat billi tkejjel il-potenzjal antiossidant fil-BAL u l-pulmuni. L-effetti ċitotossiċi tas-CBD u l-aerosols tan-nikotina fuq in-newtrofili umani u ċ-ċelloli epiteljali żgħar tal-passaġġi tan-nifs umani ġew evalwati bl-użu ta 'sistema ta' interface arja-likwidu in vitro. Inalazzjoni ta 'aerosol CBD irriżulta f'bidliet infjammatorji akbar, ħsara fil-pulmun aktar severa, u stress ossidattiv ogħla meta mqabbel man-nikotina. L-ajrusol tas-CBD wera wkoll tossiċità ogħla għaċ-ċelloli umani meta mqabbla man-nikotina.

Konklużjonijiet

Il-vaping tas-CBD jinduċi rispons infjammatorju qawwi u jwassal għal aktar bidliet patoloġiċi assoċjati ma 'ħsara fil-pulmun minn nikotina vaping.

INTRODUZZJONI

Is-snin 90 bħala mod alternattiv ta' użu tal-kannabis. Il-vaporizzaturi tal-kannabis kienu tipikament apparati kbar li saħħnu ħwawar tal-kannabis imnixxfa sal-punt tal-vaporizzazzjoni tal-kannabinojdi. Fil-bidu tas-snin 2000, vaporizzaturi iżgħar portabbli ħarġu bħala 'e-sigaretti' u saru mod popolari ta 'amministrazzjoni tan-nikotina.1 Is-sigaretti elettroniċi jsaħħnu n-nikotina f'soluzzjoni aktar milli minn weraq tat-tabakk imnixxef. Riċentement, vaporizzaturi fis-suq tal-kannabis segwew tranżizzjoni simili, b'użu akbar ta 'estratti likwidi tal-kannabis.2–7 Aerosols emessi minn prodotti tal-vaping fihom mhux biss sustanzi psikoattivi bħal nikotina u kannabinojdi (primarjament tetrahydrocannabinol (THC) u cannabidiol (CBD)) iżda wkoll tossiċi respiratorji (eż., formaldehyde, acrolein, benzaldehyde).8–11 Ħafna kostitwenti kimiċi involuti fil-vaping tan-nikotina u l-kannabinojdi huma simili, u oħrajn huma differenti ħafna, u jagħtu importanza lill-kunsiderazzjoni ta’ dawn il-kwistjonijiet fil-kuntest tal-fehim tal-konsegwenzi respiratorji ta’ vaping iż-żewġ sustanzi. Bħala eżempju, solventi użati fil-prodotti vaping li fihom in-nikotina u l-kannabinojdi jistgħu jkunu differenti, minħabba l-proprjetajiet lipofiliċi tal-kannabinojdi. ta 'e-sigaretti u ħsara fil-pulmun assoċjata mal-vaping (VALI).13 14 Numru limitat ta' studji dwar l-effetti respiratorji tal-vaping iffokaw primarjament fuq prodotti li fihom in-nikotina. Studji in vitro jissuġġerixxu li n-nikotina tal-vaping tista' tattiva ċ-ċelloli immuni u tfixkel xi wħud mill-funzjonijiet ewlenin tagħhom.15 Studji fuq l-annimali wrew li l-espożizzjoni għan-nikotina mis-sigaretti elettroniċi taffettwa ħażin ir-risponsi immunoloġiċi.16 17 Studji ta' osservazzjoni tal-bniedem wrew li n-nikotina tal-vaping irażżan. aspetti tas-sistema immuni intrinsika fiċ-ċelloli epiteljali nażali.18 19 Studji epidemjoloġiċi rrappurtaw assoċjazzjonijiet bejn vaping tan-nikotina u kundizzjonijiet respiratorji kroniċi (sogħla kronika, bronkite, ażma).20–24 Peress li r-riċerka dwar ir-riżultati tas-saħħa respiratorja u immunoloġika assoċjati bl-użu tal-kannabis iffoka esklussivament fuq il-kannabis affumikat,25–31 bħalissa mhux magħruf jekk l-effetti fuq is-saħħa tan-nikotina vaping u l-kannabinojdi humiex simili. Dan l-istudju kellu l-għan li jqabbel, f'format ġenb ma 'ġenb, l-impatt ta' inalazzjoni akuta ta 'kannabinojdi vaporizzati kontra n-nikotina.

Tabella 1 Tqabbil ta' kimiċi misjuba fi prodotti tal-vaping (likwidi mhux imsaħħna) użati f'esperimenti ta' espożizzjoni in vivo u in vitro

MATERJALI U METODI

Il-metodi użati huma deskritti f'aktar dettall fil-fajl supplimentari onlajn.

Prodotti tal-vaping

Aħna użajna żewġ prodotti tal-vaping kummerċjali, wieħed li fih CBD u l-ieħor li fih in-nikotina (imqassar f'ċifri bħala CBD-vape u Nic-vape). Il-miżwed li fih is-CBD kien CalmVape minn The Kind Group LLC u l-miżwed li fih in-nikotina kien Juul minn Juul Labs. Iż-żewġ prodotti nxtraw onlajn fl-Istati Uniti fit-2 ta' Novembru020. Il-miżwed CalmVape kienu ttikkettjati bħala li fihom 50mg/mL ta 'CBD maħlul f'taħlita ta' trigliċeridi ta 'katina medja (MCT) u kellhom togħma naturali. Juul kien ittikkettat bħala li fih 5.0% nikotina maħlul f'taħlita ta 'propylene glycol (PG) gliċerina veġetali (VG) u togħma Virginia Tobacco. Aħna ttestjajna likwidi mhux imsaħħna u msaħħna kif ukoll emissjonijiet iġġenerati miż-żewġ prodotti bl-użu ta’ analiżi tal-kromatografija–spettrometrija tal-massa validati u ppubblikati qabel.32 L-ingredjenti primarji identifikati fil-likwidi miż-żewġ prodotti huma elenkati fit-Tabella 1. Lista dettaljata ta’ kimiċi identifikati f’ soluzzjonijiet imsaħħna, inklużi rendimenti ta’ erba’ komposti karboniliċi potenzjalment tossiċi (formaldehyde, acetaldehyde, acetone, u acrolein) f’aerosols emessi huma pprovduti f’figuri supplimentari onlajn E1–E4 u tabelli supplimentari onlajn E1 u E2.

cistanche suppliment benefiċċji-kif tissaħħaħ is-sistema immuni

Ġrieden

Ġrieden C57BL/6NCr maskili u femminili ta 'sitt ġimgħat ġew akkwistati minn Charles River Laboratory (Wilmington, Massachusetts, USA) u miżmuma taħt kundizzjonijiet speċifiċi ħielsa mill-patoġeni b'ċikli ta' dawl/dlam ta '12/12-il siegħa. In-numru ta' annimali għal kull grupp ta' espożizzjoni kien n=10 (5 irġiel u 5 nisa, ħlief għal Nic-vape li kien fih 5 irġiel u 4 nisa; ġurdien femminili wieħed kien ta' daqs żgħir ħafna u kien jeħtieġ li jiġi ewtanizzat qabel ma jitlesta l-istudju ). L-esperimenti kollha twettqu skont il-linji gwida stabbiliti mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali u kkonformaw mar-regolamenti statali, federali u NIH kollha.

Kundizzjonijiet ta' espożizzjoni għall-annimali

Aerosols minn prodotti tal-vaping ġew prodotti bl-użu ta' ġeneratur tal-ajrusol tas-sigaretti elettroniċi deskritt qabel.14 33 L-apparat Juul intuża biex iż-żewġ prodotti jiġu aerosolizzati. L-annimali ġew esposti f'kamra ta 'induzzjoni modifikata ta' 15 L kull jum għal total ta '20 puff iġġenerat fuq siegħa (puff 1 kull 3min), 5 ijiem/ġimgħa għal ġimagħtejn. Kull puff kellha volum ta '55mL u kienet aerosolizzata fuq tul ta' 3s. Aerosols minn kull prodott vaping ġew iġġenerati bl-użu ta 'protokoll ta' nfiħ identiku maħsub biex jimita l-imġieba ta 'vaping ta' vapers tan-nikotina b'esperjenza.34 Minħabba nuqqas ta 'pubblikazzjonijiet li jiddeskrivu l-imġieba ta' vaping fost il-vapers tas-CBD, segwejna l-istess protokolli ta 'nefħa għaż-żewġ prodotti. Għalkemm ma kejlniex is-CBD u n-nikotina fl-arja ġewwa l-kmamar tal-espożizzjoni tal-annimali, stmajna abbażi tal-volum ta’ likwidu vaporizzat kuljum, CBD u konċentrazzjoni ta’ nikotina f’likwidi, aerosol, u rati tal-fluss tal-arja li l-annimali kienu esposti bħala medja għal 20.5 mg/ m3 CBD u 22.8 mg/m3 nikotina. Annimali ta' kontroll ġew esposti għal arja ffiltrata bl-użu tal-istess protokoll ta' espożizzjoni.

Kundizzjonijiet ta' espożizzjoni in vitro

Iċ-ċelloli użati f'esperimenti in vitro kienu esposti direttament għal puffs iġġenerati friski f'sistema ta 'espożizzjoni magħluqa fejn il-kmamar tal-interface arja-likwidu (ALI) kienu miżmuma ġewwa inkubatur ta' 37 grad. Għal esperimenti ALI, użajna l-istess apparati ta 'vaping b'sistema magħluqa u formulazzjonijiet likwidi mill-ġdid kif użati għall-esperimenti ta' espożizzjoni in vivo deskritti hawn fuq. Dettalji tal-metodu huma pprovduti f'fajl supplimentari onlajn.

benefiċċji cistanche għall-irġiel isaħħu s-sistema immuni

Ikklikkja hawn biex tara l-prodotti Cistanche Enhance Immunity

【Staqsi għal aktar】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Valutazzjoni ta 'infjammazzjoni pulmonari

L-infjammazzjoni tal-pulmun ġiet ikkalkulata permezz ta 'ċitometrija tal-fluss, istokimika, u billi jiġu kkwantifikati livelli ta' ċitokini u kimokini (figura supplimentari onlajn E5), 14 35 36, u dettalji kompluti huma pprovduti f'fajl supplimentari onlajn.

Valutazzjoni tal-ħsara fil-pulmun

L-integrità epiteljali/endoteljali tal-pulmun ġiet evalwata billi kkwantifika l-livelli ta 'proteini b'BCA, u tnixxija ta' albumina ispazju bronkoalveolari sistemika b'ELISA bl-użu ta 'kampjuni BAL u tnixxija bronkoalveolari għal sistemika billi tkejjel il-fluworexxenza fil-plażma 1 siegħa wara l-instillazzjoni intratrakeali tas-sonda fluworexxenti. Livelli ta' newtrophil elastase (NE),37 38 ġew imkejla f'BAL u tessut tal-pulmun bl-użu ta' kit NE ELISA minn sistemi ta' R&D (Kat. #DY4517-05) skont il-protokoll tal-manifattur. L-attività tal-myeloperoxidase (MPO) tkejjel b'assaġġ kalorimetriku fil-BAL u fit-tessut tal-pulmun39 bl-użu ta' kit ta' analiżi MPO minn Abcam (Cat. #ab105136) bl-użu tal-istruzzjonijiet tal-manifattur. It-tebgħa Oil Red O intużat biex tivviżwa l-makrofagi alveolari mgħobbija bil-lipidi.14 Id-dettalji tal-assaġġ huma mogħtija fil-fajl supplimentari onlajn. Evalwazzjonijiet istoloġiċi f'sezzjonijiet tal-pulmuni ġew ikklassifikati minn patologu veterinarju kif deskritt qabel.40 41

Kejl ta 'stress ossidattiv fil-ġrieden BAL u pulmuni

Risposti infjammatorji akuti jegħlbu malajr is-sistemi antiossidanti biex jippromwovu l-ħsara fil-pulmun.

Testijiet ta' ċitotossiċità in vitro

Ċelloli epiteljali tal-passaġġi tan-nifs żgħar tal-bniedem (hSAECs) minn LONZA u newtrofili umani purifikati kienu esposti direttament għal CBD iġġenerat frisk u aerosols tan-nikotina f'kulturi ta 'interface arja-likwidu. Il-protokoll tal-espożizzjoni u d-dettalji metodoloġiċi jinsabu fil-materjal supplimentari onlajn. Iċ-ċitotossiċità ġiet imkejla bl-użu ta 'esklużjoni ta' żebgħa blu ta 'trypan, teħid ta' żebgħa aħmar newtrali, u analiżi ta 'apoptosi ta' Annexin V-FITC kif deskritt fil-fajl supplimentari onlajn.

Kejl tal-livelli NE fil-midja tal-kultura PMN

Il-livelli ta' NE fil-midja kondizzjonata tal-kultura taċ-ċelluli PMN esposti għall-ajrusol wara l-perjodu ta' rkupru ġew ikkwantifikati permezz ta' kit ELISA minn sistemi ta' R&D (Kat. #DY4517-05) wara l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

Assaġġ tal-permeabilità FITC-dextran

Il-permeabilità paraċellulari, tul monosaff ta 'SAECs umani esposti għall-ajrusol minn kulturi ALI, saret biex tiġi vvalutata l-integrità tal-barriera u d-dettalji huma deskritti fil-fajl supplimentari onlajn.

Analiżi statistika

Differenzi statistikament sinifikanti bejn il-valuri medji tal-grad ta 'gruppi ta' espożizzjoni differenti (CBD, nikotina, u kontrolli ta 'l-arja) ġew determinati billi twettaq it-test mhux parametriku ta' Kruskal-Wallis. Il-valuri P ġew ikkoreġuti għal ttestjar multiplu bl-użu tal-metodu tar-rata ta' skoperta falza (FDR) ta' 'proċedura lineari step-up f'żewġ stadji ta' Benjamini, Krieger, u Yekutieli, u d-differenzi bejn iż-żewġ gruppi tqiesu statistikament sinifikanti f'p<0.05when FDR was set at Q<0.1. We also evaluated if there were differences between male versus female mice in the responses to inhalation of CBD and nicotine aerosols in comparison with air. All statistical analyses were carried out using GraphPad Prism V.9.3.1 software (GraphPad; La Jolla, California, USA).

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

RIŻULTATI

L-espożizzjoni għall-aerosol tas-CBD irriżulta f’akkumulazzjoni akbar ta’ ċelluli immuni intrinsiċi u adattivi fil-pulmuni meta mqabbla mal-espożizzjoni għan-nikotina

L-infiltrat totali taċ-ċelluli immuni kien ogħla b'mod sinifikanti fil-pulmuni tal-ġrieden wara l-inalazzjoni ta' aerosols tas-CBD minn nikotina jew arja ffiltrata (figura 1A). Seba 'mill-10 sottosettijiet ta' ċelluli immuni studjati kellhom impatt sinifikanti aktar wara l-espożizzjoni tas-CBD meta mqabbla man-nikotina. L-analiżi immunofenotipika wriet infiltrazzjoni statistikament sinifikanti ta’ newtrofili CD11b+Ly6G+ fil-pulmuni tal-ġrieden wara l-inalazzjoni ta’ CBDaerosols (14488 vs 3674 newtrofili fl-arja, p<0.05) as well as following nicotine aerosol exposure (15410 vs 3674 neutrophils in air, p<0.001) (figure 1B). Total numbers of CD11bCD- 11c+Siglec-F+ alveolar macrophages were significantly reduced following CBD-Vape or Nic-Vape inhalation as compared with air-exposed mice (15965 cells in CBD and 18834 cells in NicVape vs 43465 cells in air (p<0.05)) (figure 1C). Inhalation of both CBD and nicotine aerosols resulted in significantly lower numbers of pulmonary interstitial CD11bCD11c+CD206+ macrophages as compared with air-exposed control mice (11460 vs 47319 cells for CBD-Vape, p<0.0001) and 27727 vs 47319 cells for Nic-Vape, p<0.05). The reduction in the numbers of pulmonary interstitial macrophages was significantly greater following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine (11460 cells in CBD-vape vs 27727 cells in Nic-Vape, p<0.05) (figure 1D). CD11bCD11c+arginase-1+ macrophages were significantly reduced following inhalation of both CBD-Vape and Nic-Vape compared with air-exposed control (13450 vs 44009 for CBD-Vape (p<0.001), and 24280 vs 44009 for Nic-Vape (p<0.05)) (figure 1E). However, the reduction in the numbers of CD11bD11c+arginase-1+ macrophages was significantly more following inhalation of CBD aerosols compared with Nic-Vape (13450 cells in CBD-vape vs 24280 cells in Nic-Vape (p<0.05). The number of CD19+ B cells was not statistically different (figure 1F). Following inhalation of CBD aerosols, the numbers of CD8+ and CD4+ T cells in the lungs were, respectively, 3.3-fold (p<0.001) and 5.6-fold (p<0.0001) higher than following nicotine inhalation (figure 1G, H). CD4+IL-17A+ T cells were not altered in the lungs following CBD-Vape or Nic-Vape exposures as compared with air control (figure 1I). CD4+RORγt + T cells, expressing the master transcription factor essential for the differentiation into proinflammatory Th17 cells, were significantly increased following inhalation of CBD aerosols as compared with both nicotine (11983 vs. 2015; p<0.001) and air exposure (11983 vs. 5887; p<0.05) (figure 1J). Furthermore, CBD aerosols resulted in markedly increased infiltration of CD4+Foxp3+ regulatory T cells into the lungs compared with nicotine (4401 cells in CBD-Vape vs 1688 cells in Nic-Vape; p<0.001) (figure 1K). There were no statistically significant differences observed between male and female mice concerning the infiltration of any of the innate and adaptive immune cells, regardless of the different exposure conditions (online supplemental figure E6A–K). Relatively more Oil Red O-positive lipid-laden macrophages were detected in BAL following CBD-aerosol inhalation compared with nicotine aerosol (0.66 vs 0.32; p<0.05) or air-exposure (0.66 vs 0.15; p<0.001) (figure 2A). Lung tissue sections of air-breathing mice contained rare (typically 1–2 positive cells in the entire lung lobe) lipid-containing, Oil Red O-positive intra-alveolar macrophages (online supplemental figure E7A). In contrast, lungs from CBD and nicotine-exposed animals regionally contained one or more Oil Red O-positive macrophages within multiple alveolar lumina that were often adjacent to one another (online supplemental figure E7B, C), with no obvious differences found in males versus females. Histological examination of H&E-stained lung tissue sections from filtered air-breathing control mice showed air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (figure 2B). In contrast, peribronchiolar and/or intrabronchiolar, perivascular, alveolar infiltrates, and interstitial infiltrates of lymphocytes, macrophages, and granulocytes were the predominant findings in the CBD and nicotine-exposed mouse lungs (figure 2C–E). Small focal lesions and occasionally larger and more regionally extensive focal lesions were noted. Lesions were found primarily near terminal bronchioles and often subpleural. The frequency and severity of lesions were greater following CBD aerosol inhalation compared with nicotine. The male mice showed a greater frequency of most lesions as compared with female mice following inhalation of both CBD and nicotine.

Figura 1 Impatt ta 'espożizzjoni akuta għal aerosols CBD jew nikotina fuq l-infiltrazzjoni taċ-ċelluli immuni pulmonari. Numru totali ta' lewkoċiti (A), CD11b+ Ly6G+ newtrofili (B), CD11b-CD11c+ Siglec-F + makrofaġi (C), CD11b- CD11c+ CD206+ makrofaġi (D), CD11b- CD11c+ arginase+ makrofaġi (E) u numri ta' ċelluli CD19+ B (F), ċelluli CD8+ T (G), ċelluli CD4+ T (H), CD4+ IL17A+ (I) u CD 4+ ROR t + ċelluli T infjammatorji (J) u CD4+ FOXP{3+ ċelluli T (K) fil-pulmuni tal-ġrieden esposti għall-arja, nikotina, jew aerosol tas-CBD ġew determinati mill-fluss ċitometrija bl-użu ta 'markaturi speċifiċi u wara strateġija ta' gating kif deskritt qabel u murija fil-figura supplimentari onlajn 1. Id-dejta tintwera bħala box plots bi whiskers f'min u max. Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi hija kkunsidrata sinifikanti f'p<0.05, the statistical significance of the difference between the two groups is indicated with symbols *p<0.05; ***p<0.001; ****p<0.0001after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with false discovery rate (FDR) correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each exposure condition, n=10 mice (5 males+5 females) (n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape) were used. CBD, cannabidiol.

L-ajrusol tas-CBD kellu effett modulatorju aktar qawwi fuq il-livelli taċ-ċitokini mill-ajrusol tan-nikotina

Sibna li l-inalazzjoni ta’ aerosol tas-CBD żiedet b’mod sinifikanti l-livelli taċ-ċitokini IL-5, IL{-6, u G-CSF fil-BAL meta mqabbla ma’ kemm l-espożizzjonijiet tan-nikotina kif ukoll l-arja (p<0.01) and enhanced the levels of chemokine KC compared with air-control only (p<0.001) (figure 3A–D). Levels of IL-2 were significantly lower following CBD and Nic-vape aerosol exposures compared with air (p<0.05) (figure 3E). IL-10 and IFN-γ levels were significantly reduced only after CBD aerosol exposure compared with air (p<0.05) (figure 3F, G). IL-1α levels were not significantly different, though there was a trend for the values to be lower following exposure to CBD-Vape aerosols (figure 3H). There were no statistically significant differences observed between male and female mice in the levels of these cytokines or chemokines (online supplemental figure E8A–H and online supplemental table E3).

L-espożizzjoni għal aerosols tas-CBD irriżulta f'aktar ħsara endoteljali tal-pulmun milli espożizzjoni għall-ajrusol tan-nikotina

Il-livelli totali ta' proteini fil-BAL kienu elevati wara l-inalazzjoni ta' aerosols tas-CBD meta mqabbla mal-kontrolli tal-arja (435µg/mL vs 287µg/mL; p<0.01) (figure 4A, left panel). Additionally, serum albumin levels leaking into the BAL were markedly increased following CBD aerosol inhalation when compared with both nicotine aerosol (70303ng/mL vs 32741ng/mL in NicVape; p<0.01) and air inhalation (70303ng/mL vs 26042ng/ mL in air control; p<0.0001) (figure 4B, left panel). The systemic leak of FITC-dextran from the lungs into the plasma was markedly higher following CBD aerosol inhalation than Nic-vape aerosol (469.9ng/mL vs 227.6ng/mL in Nic-Vape; p<0.01) or air exposures (469.9ng/mL vs 157.5ng/mL in air control; p<0.0001) (figure 4C, left panel). Furthermore, the FITC-dextran leak following Nic-vape aerosol exposure was not significantly different when compared with air control (227.6ng/mL vs 157.5ng/mL). There were no statistically significant differences observed in the levels of these markers when comparing male with female mice following any of the exposures (figure 4A–C, right panels and online supplemental table E3). It is known that elastase activity in inflammatory diseases increases and correlates with the levels of elastase proteins and neutrophil infiltrates as the disease progresses.45 46 NE levels in the BAL were markedly augmented following inhalation of CBD aerosols (1.8-fold vs air; p<0.001) and Nic-Vape aerosols (1.42-fold vs air; p<0.01) (figure 5A, left panel). The levels of NE measured in lung tissue were significantly increased following CBD-Vape as compared with both Nic-Vape (1.3-fold; p<0.01) and air (1.41-fold; p<0.001) (figure 5B, left panel). There were no statistically significant differences observed in NE levels between male and female mice, measured either in the BAL or lung tissues (figure 5A, B, right panels and online supplemental table E3). We detected higher MPO activity in lung tissues following inhalation of CBD aerosols compared with nicotine aerosols (~2fold; p<0.05) and air (~8.44fold; p<0.0001) (figure 6A). BAL MPO activity following CBD and nicotine aerosol-inhalation was equivalent, but greater than air controls (p<0.01) (online supplemental figure E9A). There were no statistically significant differences observed in MPO activity between male and female mice, either in lung tissue or in the BAL (figure 6B; online supplemental figure E9B and online supplemental table E3).

Figura 2 Bidliet infjammatorji fil-pulmuni wara espożizzjoni man-nifs għal aerosols CBD u nikotina. Fl-aħħar ta 'l-espożizzjonijiet, il-ġrieden ġew ewtanizzati, it-trakea kkanulata biex tiġbor BAL f'1% FBS f'PBS, u l-pulmuni ġew maħsuda. (A) Ċelloli BAL cytospin fuq slides tal-ħġieġ kienu mtebbgħin b'0.5% soluzzjoni Oil Red O u ċelluli Oil Red O-pożittivi ġew magħduda kif deskritt fil-metodi. Ir-riżultati huma murija bħala box plots bi whiskers f'min u max. Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi hija kkunsidrata sinifikanti f'p<0.05 and indicated with the symbols *p<0.05; ***p<0.001 by performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons using GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for CBD-vape and air exposure and n=9 (5 males+4 females) for Nic-vape). (B–E) Left lung lobes from all mice were embedded, sectioned and H&E stained as described in the methods. (B) (Air): Image of the histologically unremarkable lung from air-breathing control mouse showing air-filled alveolar lumina bounded by thin alveolar walls (arrows). H&E, ×20. (C) Nic-vape: Peribronchiolar lymphocytic, macrophagic (arrowhead) granulocytic infiltrate (circle). H&E, ×20 magnification. B=bronchiolar lumen. (D, E) CBD-vape: Perivascular infiltrates composed of mononuclear (lymphocytes and macrophages) and granulocytic infiltrates (arrows). Intra-alveolar granulocytes (circles) and macrophages (arrowheads) were also present. H&E, ×20 magnification. BD, cannabidiol; B, bronchiolar lumen; FDR, false discovery rate; PBS, phosphate-buffered saline; V, vessel lumen.

L-espożizzjoni għas-CBD u l-aerosols tan-nikotina naqqset il-potenzjal antiossidant pulmonari

Il-kapaċità totali tal-antiossidanti naqset sew fiż-żewġ tessut tal-pulmun (p<0.01vs air) and BAL (p=0.001vs air) following inhalation of CBD aerosols (figure 7A; online supplemental figure E10A). However, following nicotine aerosol exposure it was significantly reduced only in the BAL (p<0.01vs air) compared with air (online supplemental figure E10A). We did not observe any statistically significant differences in the antioxidant potential between male and female mice for each exposure group, either in lung tissue or in the BAL (figure 7B; online supplemental figure E10B and online supplemental table E3).

Figura 3 Modulazzjoni tal-ambjent infjammatorju taċ-ċitokini/chemokine fil-fluwidu BAL wara l-inalazzjoni ta 'CBD u aerosols tan-nikotina. Livelli ta 'ċitokini u chemokines relatati mal-infjammazzjoni varji fil-BAL (A-H) tal-ġrieden wara ġimgħatejn ta' espożizzjoni għall-arja, aerosols Nic-Vape, jew aerosols CBD-Vape ġew ikkwantifikati bl-użu ta 'MULTIPLEX MAP Kit kif deskritt f'materjali u metodi. Id-dejta tintwera bħala box plots bi whiskers f'min u max. Twettaq test Kruskal-Wallis mhux parametriku b'korrezzjoni FDR għal paraguni multipli biex tara jekk kinux jeżistu differenzi statistikament sinifikanti bejn iż-żewġ gruppi bl-użu ta 'softwer GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA). Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi hija kkunsidrata sinifikanti f'p<0.05 and is indicated with symbols *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001; ****p<0.0001. In each experiment n=10 for CBD-vape and air exposure (5 males+5 females) and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape). CBD, cannabidiol.

L-ajrusol tas-CBD kien aktar tossiku mill-ajrusol tan-nikotina għall-hSAECs u ħarbat l-integrità tal-barriera epiteljali tagħhom

Aħna osservajna li meta SAECs umani ġew esposti in vitro għal aerosols tas-CBD għal siegħa, il-morfoloġija taċ-ċelluli epiteljali kienet imfixkla b'mod notevoli (figura 8A, B vs 8C). Il-mewt taċ-ċelluli fl-hSAECs żdiedet b'mod sinifikanti biss wara l-espożizzjoni għall-ajrusol tas-CBD meta mqabbla mal-arja (41% vs. 12.5% ​​fil-kontroll tal-arja; p<0.05) (figure 8D, E). Even though the cell death following CBD-Vape exposure was higher compared with exposure to nicotine aerosols, it, however, did not reach statistical significance (41% vs. 16% in Nic-Vape). Additionally, exposure to CBD aerosols diminished the epithelial barrier integrity of human SAECs compared with air by 2.1-fold (p<0.05) and while the exposure to nicotine aerosols also showed an increased trend, it was not significantly different compared with air-control (1.7-fold decrease in Nic-Vape vs air control) (figure 8F).

sistema immunitarja li żżid il-pjanti cistanche

Aerosols tas-CBD iżda mhux aerosols tan-nikotina indoxxew mewt taċ-ċelluli apoptotiċi f'newtrofili umani purifikati, iżda t-tnejn tejbu r-rilaxx ta' NE

Espożizzjoni akuta għall-aerosols tas-CBD indotta mewt taċ-ċelluli mmarkata fin-newtrofili umani purifikati (44.5% mewt taċ-ċelluli wara CBDVape vs. 14% fil-kontroll tal-arja; p<0.0001) and (44.5% vs 21%cell death in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9A). CBD aerosol-induced neutrophil cell death was mainly due to increased apoptosis compared with air (29% vs. 10% in air control; p<0.0001) and compared with Nic-Vape (29% vs. 12% in Nic-Vape; p<0.001) (figure 9B). Furthermore, both CBD and nicotine aerosols lead to enhanced accumulation of NE levels in the neutrophil cell culture media as compared with air control (2-fold increase in CBD-Vape; p<0.001and 1.45-fold increase in Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). However, the levels were significantly higher following CBD versus nicotine exposure (CBD-Vape 1.4-fold higher than Nic-Vape; p<0.05) (figure 9C). Pictures of human neutrophils after ALI exposures and the 24-hour recovery period are provided in online supplemental figure E12. Importantly, an aliquot of purified neutrophils that were incubated in media (unexposed) for the duration of the experiment showed low cell death (~11%) that was equivalent to values noted in neutrophils exposed to air (~14%) in the ALI chambers (figure 9A), nor was apoptosis or increased NE levels induced (figure 9B, C).

Figura 4 Markers ta 'ħsara fil-pulmun indotta wara espożizzjoni man-nifs għal CBD u aerosols tan-nikotina. Fl-aħħar tal-esponimenti, il-ġrieden ġew ewtanizzati, inħasdu BAL u l-livelli ta 'proteini totali (A) u (B) albumina fil-BAL ġew kwantifikati kif deskritt fit-taqsima Materjali u Metodi. (C) Il-livelli ta 'FITC-dextran li jnixxu fil-plażma ġew kwantifikati. Il-pannelli tax-xellug f'kull figura jirrappreżentaw data minn irġiel u nisa flimkien, filwaqt li l-pannelli tal-lemin jirrappreżentaw data bħala irġiel kontra nisa. Ir-riżultati huma murija bħala box plots bi whiskers f'min u max. Id-differenzi bejn il-gruppi huma kkunsidrati sinifikanti f'p<0.05 and are indicated as symbols **p<0.01, ****p<0.0001, calculated after performing non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by employing GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures and n=9 (5 males+4 females) for the Nic-Vape group. CBD, cannabidiol.

Figura 5 Livelli ta 'elastasi newtrofili fil-pulmuni mkejla wara espożizzjoni għal aerosols CBD u nikotina. Fl-aħħar tal-esponimenti tal-2-ġimgħa, il-ġrieden ġew ewtanizzati, il-BAL u l-pulmuni ġew maħsuda, u t-tessuti ġew ippreparati. (A, B) Il-livelli NE fil-BAL u l-lysates tat-tessut tal-pulmun ġew ikkwantifikati b'ELISA. Il-pannelli tax-xellug f'kull figura juru dejta bħala rġiel flimkien, filwaqt li l-pannelli tal-lemin jirrappreżentaw dejta bħala rġiel kontra Nisa. Ir-riżultati huma murija bħala box plots bi whiskers f'min u max. Intuża test Kruskal-Wallis mhux parametriku b'korrezzjoni FDR għal paraguni multipli biex tara jekk kinux jeżistu differenzi statistikament sinifikanti bejn iż-żewġ gruppi bl-użu ta 'softwer GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA). Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi tqieset sinifikanti f'p<0.05 and is indicated with symbols **p<0.01, ***p<0.001. In each experiment n=10 (5 males+5 females) for air and CBD-vape exposures each and n=9 (5 males+4 females) for Nic-Vape. CBD, cannabidiol; NE, neutrophil elastase.

DISKUSSJONI

Is-sejbiet tagħna wrew li l-effetti detrimentali fuq is-sistema immunitarja u l-ħsara fil-pulmun wara espożizzjoni man-nifs għal prodotti vaping li fihom kannabinojdi kienu aktar severi milli wara espożizzjoni għal aerosols minn apparat vaping li fih in-nikotina. Aħna skoprejna l-effett ta 'ħsara tas-CBD vaporizzat li jaffettwa l-omeostażi immuni pulmonari bl-użu ta' mudell tal-ġurdien ta 'vaping u esperimenti in vitro ma' ċelloli umani. L-istudji tagħna wrew li l-vaping tas-CBD jinduċi mikroambjent pulmonari proinfjammatorju, li jwassal għal akkumulazzjoni notevoli ta 'ċelluli immuni infjammatorji li juru attività mtejba ta' fatturi li jagħmlu ħsara lit-tessuti bħal MPO u NE u li jwassal għal induzzjoni ta 'korriment fil-pulmun permezz ta' proċessi li jistgħu jinkludu stress ossidattiv. Għalkemm diversi studji eżaminaw l-effetti respiratorji tan-nikotina tal-vaping, sa fejn nafu aħna, dan huwa l-ewwel rapport li juri li anke l-espożizzjoni għal żmien qasir għal CBD vaporizzat tbiddel il-ambjent infjammatorju fil-pulmun, li jwassal għal ħsara fil-pulmun. Huwa importanti li wieħed jinnota li użajna prodotti tal-vaping li fihom is-CBD mingħajr THC, biex neliminaw kwalunkwe influwenza potenzjali tat-THC fuq l-effetti pulmonari. Minħabba restrizzjonijiet legali fl-aċċess għall-prodotti tal-vaping li fihom it-THC, ma stajniex inwettqu esperimenti li jqabblu wkoll l-effetti tal-vaping tat-THC. Studju reċenti wieħed irrapporta li s-CBD fil-prodotti tal-vaping jista' jitqies bħala prekursur tat-THC, u b'hekk il-problema kompliet tikkomplika billi jinduċi effetti indipendenti mis-CBD, medjati mit-THC relatati mal-użu ġenerali tal-prodotti tal-vaping tal-kannabis.47

Barra minn hekk, kwalunkwe effett tossiku respiratorju tal-vaping jista’ potenzjalment jiġi aggravat mill-preżenza ta’ kostitwenti oħra tal-prodotti tal-vaping, inklużi solventi differenti (MCT fil-prodott tas-CBD u PG: VG fil-prodotti tan-nikotina), togħmiet differenti u terpeni preżenti fiż-żewġ prodotti kif żvelat minn analiżi tal-prodott. Ġew skoperti bosta prodotti sekondarji ta 'degradazzjoni potenzjali fiż-żewġ soluzzjonijiet imsaħħna, li jissuġġerixxu li ż-żewġ prodotti huma suxxettibbli għal temperaturi għoljin. Madankollu, ġew skoperti livelli ogħla ta 'komposti tal-karbonil f'aerosols li fihom is-CBD, li jissuġġerixxu li l-prodott tal-vaping tas-CBD użat fl-istudju tagħna seta' kien aktar suxxettibbli għal degradazzjoni termali meta mqabbel mal-prodotti tan-nikotina. Dan jista 'jkun minħabba differenzi fil-kompożizzjoni kimika ta' żewġ soluzzjonijiet u/jew differenzi fil-kundizzjonijiet ta 'vaporizzazzjoni ġewwa apparati vaping. Bosta markaturi ta 'infjammazzjoni u ħsara pulmonari mkejla fl-istudju tagħna kienu ogħla b'mod konsistenti wara espożizzjoni għal prodotti vaping li fihom is-CBD minn apparati vaping li fihom in-nikotina. Pereżempju, nirrapportaw li n-nifs ta 'żejt vape CBD aerosolizzat ikkawżat titjib ħafna aktar b'saħħtu fin-numri kemm ta' ċelluli CD4+ kif ukoll CD8+ T, u numri għoljin ta 'newtrofili fil-pulmuni. Profil simili ta’ żieda fin-newtrofili u modulazzjoni taċ-ċelluli CD4+ u CD{8+ T deher fil-pulmun ta’ pazjent li kellu żejt tal-kannabis vaped li kkawża ħsara fil-pulmun u insuffiċjenza respiratorja.3 Teżisti rabta stretta bejn ċelluli T infjammatorji, fatturi li jimmobilizzaw newtrofili, u reklutaġġ ta’ newtrofili f’disturbi infjammatorji pulmonari.48 Żieda fl-ambjent infjammatorju fil-pulmuni wara espożizzjoni għal aerosols tas-CBD tista’ orkestra l-akkumulazzjoni u/jew l-attivazzjoni ta’ newtrofili fl-ispazju bronkoalveolari direttament, permezz tar-rilaxx ta’ speċifiċi. fatturi li jimmobilizzaw newtrofili bħal IL-6, G-CSF, u KC (CXCL1) jew indirettament permezz ta' attivazzjoni ta' makrofaġi tal-pulmun residenti u ċelluli epiteljali.49 50 Huwa possibbli wkoll li aerosols tas-CBD jistgħu jagħmlu ħsara lill-epitelju tal-pulmun u jibdew proċess ta’ reklutaġġ u attivazzjoni tan-newtrofili permezz ta’ mekkaniżmi li jinkludu ħsara fit-tessut lokali.51 Tabilħaqq, nuru li l-aerosols tas-CBD jagħmlu ħsara lill-integrità epiteljali u jinduċu l-mewt taċ-ċelluli fl-hSAECs, li jissuġġerixxu li l-aerosols tas-CBD jistgħu jinduċu direttament ħsara fit-tessuti tal-pulmun u jattivaw DAMPs biex jimmedjaw l-infjammazzjoni pulmonari. . L-infiltrazzjoni tan-newtrofili u l-qerda tat-tessut tal-pulmun indotta minn NE huma magħrufa li jimmedjaw il-ħsara pulmonari indotta mid-duħħan tas-sigaretti u l-integrità tal-barriera epiteljali kompromessa. iż-żieda tan-numri ta 'newtrofili li jakkumulaw fil-pulmuni tal-ġrieden esposti għal aerosols tas-CBD (14488 vs 3674 fl-arja) jista' jkollu konsegwenzi bijoloġiċi minħabba l-istatus ta 'attivazzjoni tagħhom. Dawn iċ-ċelluli granuloċitiċi huma s-sors ta 'żewġ fatturi importanti, myeloperoxidase u NE li huma involuti f'attività mikroċidali u remodeling pulmonari. Il-livelli mtejba ta' MPO, kif osservati fl-istudju tagħna, huma kkunsidrati bħala markatur sinifikanti ta' stress infjammatorju u ossidattiv f'diversi mard inkluż korriment fil-pulmun.39 58 Proteina MPO rilaxxata minn newtrofili attivati ​​taġixxi bħala modulatur awtokrini, li juri ċitokini proinfjammatorji simili. proprjetajiet li jinduċu l-attivazzjoni tal-PMN, b'mod li huwa indipendenti mill-attività katalitika tal-MPO.59 Għalhekk, fid-dawl ta 'dawn ir-rapporti u s-sejbiet preżenti tagħna, aħna nipposponu li l-inalazzjoni kronika tal-ajrusol tas-CBD tista' twassal għal mikroambjent proinfjammatorju qawwi li jista 'jkun aktar ta' detriment għall-pulmun. omeostażi u jista' jaggrava aktar il-mard eżistenti tal-pulmun. L-infiltrazzjoni tan-newtrofili fil-pulmuni wara l-inalazzjoni tal-ajrusol tas-CBD tista' possibbilment tiġi indotta mir-regolazzjoni 'l fuq ta' chemokines solubbli bħal KC, u għalhekk tista 'tkun responsabbli għal livelli mtejba ta' NE misjuba fil-BAL u fit-tessut tal-pulmun. Peress li l-espożizzjoni għall-ajrusol tas-CBD indotta r-rilaxx ta 'NE minn newtrofili umani in vitro, dan jappoġġja l-konklużjoni li l-aerosols tas-CBD għandhom il-potenzjal li jattivaw direttament in-newtrofili in vivo u jkabbru l-infjammazzjoni pulmonari fl-utenti. Hekk kif il-livelli ta 'NE u l-attività assoċjata jiżdiedu waqt risponsi infjammatorji medjati minn newtrofili,46 aħna għalhekk kejlu biss il-livelli ta' NE bħala indiċi tal-attività tiegħu. Barra minn hekk, l-impatt detrimentali tal-vaping CBD x'aktarx jista' jiġi aggravat minn sistemi antiossidanti indeboliti kif osservajna, fejn fatturi bħal MPO indott minn CBD-Vape jista' jkollhom rwoli kritiċi.39 58 CD4+Ċelloli ROR t + T , li jesprimu l-fattur ta 'traskrizzjoni prinċipali essenzjali għad-divrenzjar f'ċelluli Th17 proinfjammatorji, ġew miżjuda u mbassra mikroambjent proinfjammatorju indott minn aerosols tas-CBD. Żieda fl-induzzjoni taċ-ċelloli regolatorji CD4+FoxP3+ T (Tregs) tista' tkun mekkaniżmu wieħed li permezz tiegħu l-vaping tas-CBD jista' jinduċi immunosoppressjoni. Tregs jrażżnu l-attivazzjoni, il-proliferazzjoni, u l-produzzjoni taċ-ċitokini taċ-ċelluli CD4+ u CD{8+ T u huma implikati fit-trażżin taċ-ċelluli dendritiċi permezz ta' molekuli kostimulattivi li jirregolaw 'l isfel.60 Tregs jesprimu l-katina tar-riċettur IL-2. , li jiffaċilita l-konsum ta' IL-2 u b'hekk jista' jċaħħad liċ-ċelloli T effector mid-disponibbiltà ta' IL-2, li jikkontribwixxi għas-soppressjoni taċ-ċelluli T effector.61 Għalhekk, il-livelli ta' IL-2 naqsu fil-BAL minħabba CBD Żieda ta' Tregs ikkawżata mill-ajrusol tista' timmedja disfunzjoni taċ-ċelluli T u soppressjoni tal-immunità adattiva fil-pulmuni, iżid is-suxxettibilità għal infezzjonijiet respiratorji, u jinduċi riżultati ħżiena għat-tilqim profilattiku. Aħna osservajna tnaqqis sinifikanti fin-numru ta 'makrofaġi interstizjali tal-pulmun wara l-espożizzjoni għas-CBD. Siglec-F+, tipikament meqjus bħala markatur eosinophil, huwa espress ħafna f'makrofaġi alveolari tal-marieni, u meta jintuża flimkien ma 'CD11c, jipprovdi l-aktar identifikazzjoni preċiża ta' makrofaġi alveolari fil-pulmun tal-ġurdien. It-tnaqqis sinifikanti fin-numri ta 'makrofagi alveolari CD11bCD11c + Siglec-F + osservati fil-ġrieden esposti għal CBD huwa appoġġjat minn studji preċedenti. piż tal-patoġenu pulmonari li kkorrelata ma' ħin ta' rkupru mdewma u żieda fil-mortalità wara l-infezzjoni.16 Tnaqqis notevoli fin-numri ta 'arginase pulmonari anti-infjammatorji-1+ M2 makrofaġi wara l-inalazzjoni tal-aerosol tas-CBD jista' jkompli jikkontribwixxi għal omeostasi immuni pulmonari disregolata u ħsara .63 Il-mikroambjent proinfjammatorju ogħla misjub fil-pulmuni wara l-inalazzjoni tas-CBD jista 'jiġi parzjalment attribwit għan-numri mnaqqsa ta' makrofaġi pulmonari M2 anti-infjammatorji. Numri mnaqqsa ta 'makrofaġi jistgħu jaffettwaw b'mod sinifikanti r-risponsi pulmonari għal infezzjonijiet respiratorji, li jistgħu jiġu aggravati minn makrofagi-fagoċitosi li ma jiffunzjonawx. Għalhekk, l-espożizzjoni għall-aerosols minn sigaretti elettroniċi li fihom in-nikotina kkaġuna tnaqqis fil-fagoċitosi ta’ Haemophilus influenza (NTHI) mhux tajpabbli mill-makrofagi, l-aktar minħabba l-preżenza ta’ aromatizzanti tas-sigaretti elettroniċi.64 Peress li l-aromatizzanti komuni jintużaw ukoll għall-formulazzjonijiet tas-CBD, tqajjem il-possibbiltà li disfunzjoni tal-makrofaġi kkaġunata mill-ajrusol tas-CBD tista 'tiġi intensifikata biż-żieda ta' diversi kimiċi aromatizzanti.

Figura 6 Żieda tal-attività tal-myeloperoxidase (MPO) fil-pulmuni wara l-espożizzjoni għal aerosols CBD u nikotina. (A, B) Aħna kejlu l-attività MPO f'lisati tat-tessut tal-pulmun ta 'annimali esposti għal nikotina jew aerosol CBD bl-użu ta' kit ta 'assaġġ MPO minn Abcam kif deskritt fid-dettall fit-taqsima tal-materjal supplimentari. Il-pannell tax-xellug juri d-dejta bħala rġiel, filwaqt li l-pannell tal-lemin jirrappreżenta d-dejta bħala rġiel kontra nisa. Id-dejta tintwera bħala box plots bi whiskers f'min u max. Twettaq test Kruskal-Wallis mhux parametriku b'korrezzjoni FDR għal paraguni multipli biex tara jekk kinux jeżistu differenzi statistikament sinifikanti bejn iż-żewġ gruppi bl-użu ta 'softwer GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA). Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi tqieset sinifikanti f'p<0.05 and is indicated with the symbols *p<0.05, ****p<0.0001. In each experiment n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate

Figura 7 Bidliet fil-potenzjal antiossidant fil-pulmun wara l-espożizzjoni għas-CBD u l-aerosols tan-nikotina. Fi tmiem l-esponimenti għan-nikotina jew aerosols tas-CBD, il-ġrieden ġew ewtanizzati u ġew ippreparati lisati tat-tessut tal-pulmun. (A, B) Il-livelli totali ta 'antiossidanti fil-lysates tat-tessuti tal-pulmun ġew ikkwantifikati bl-użu tal-kit tal-assaġġ antiossidant ta' Cayman (Cat # 709001) kif deskritt fid-dettall fit-taqsima tal-materjal supplimentari onlajn. Il-pannell tax-xellug juri d-dejta bħala rġiel u nisa flimkien, filwaqt li l-pannell tal-lemin jirrappreżenta d-dejta bħala rġiel kontra nisa. Id-dejta tintwera bħala box plots bi whiskers f'min u max. Intuża test Kruskal-Wallis mhux parametriku b'korrezzjoni FDR għal paraguni multipli biex tara jekk kinux jeżistu differenzi statistikament sinifikanti bejn iż-żewġ gruppi bl-użu ta 'softwer GraphPad Prism V.9 (GraphPad; La Jolla, California, USA). Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi tqieset sinifikanti f'p<0.05 and is indicated by the symbol **p<0.01. In each experiment, n=10 mice for air and CBD-vape exposures each (5 males+5 females) and n=9 for the Nic-Vape group (5 males+4 females). CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

Figura 8 Morfoloġija taċ-ċelluli epiteljali, ċitotossiċità, u integrità tal-barriera epiteljali taċ-ċelluli epiteljali żgħar tal-passaġġi tal-arja tal-bniedem (SAEC) wara espożizzjoni għal aerosols CBD u nikotina. SAECs tal-bniedem (0.5miljun ċelluli/inserzjoni tal-kultura f'format ta' 6-well plate) ġew ikkultivati ​​f'medja ta' tkabbir kompluta matul il-lejl u l-għada esposti direttament fl-interface arja-likwidu (ALI) għal 110 puffs ta' aerosols li fihom arja, nikotina (50mg/mL nikotina) jew CBD (50mg/mL) kif deskritt fil-metodi. L-aerosols kollha ġew iġġenerati f'volum ta 'puff ta' 55mL kif deskritt fit-taqsima tal-Metodi. Fi tmiem l-espożizzjonijiet, iċ-ċelloli tneħħew mill-kamra ALI u ġew inkubati f'medja ta 'tkabbir kompluta għal 24 siegħa f'temperatura ta' 37 grad. Wara li ntemm il-perjodu ta' rkupru, iċ-ċelloli l-ewwel ġew immaġinati (A–C) f'×200 f'mikroskopju b'kuntrast ta' fażi (Olympus IX73) u mbagħad analiżi tat-tossiċità taċ-ċelluli bl-użu (D) tal-metodu trypan blue (imkejjel bħala perċentwal ta' mewt taċ-ċelluli) jew (E ) twettqu metodu ta 'assorbiment aħmar newtrali (impinġi bħala perċentwali tal-kontroll tal-arja). Għal (F) analiżi tal-permeabilità tal-FITC-dextran, 1 miljun SAECs/inserts tal-kultura tal-bniedem ġew ikkultivati ​​matul il-lejl u l-għada esposti direttament fl-ALI għal 110 puffs ta 'arja, nikotina (50mg/mL nikotina) jew CBD (50mg/mL) li fihom aerosols. Mat-tlestija tal-esponimenti, FITC-dextran f'konċentrazzjoni ta '10mg/mL ġie miżjud mal-kamra apikali u inkubat għal 2.5 sigħat. kampjuni nħasdu mill-kamra basolaterali u l-fluworexxenza ġiet imkejla bl-użu ta 'wavelengths Exci485/Emi528 f'qarrej tal-pjanċa ibrida H1 ta' sinerġija (BioTek). Il-konċentrazzjoni ta 'FITC-dextra fil-kamra basolaterali ġiet ikkalkulata bl-użu ta' kurva standard. Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi tqieset sinifikanti f'p<0.05 and is indicated with the symbol *p<0.05, calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). Results are depicted as box plots with whiskers at min and max from three independent experiments each performed in triplicate as described in online supplemental methods. CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate; SAECs, small airway epithelial cells.

Figura 9 Mewt taċ-ċelluli apoptotiċi f'newtrofili umani purifikati u livelli ta 'newtrophil elastase (NE) rilaxxati wara espożizzjoni għal aerosols CBD u nikotina. In-newtrofili tal-bniedem ippurifikati mid-demm sħiħ inżergħu fi 0.8miljun ċelluli/insert ta' kultura f'format ta' 6-well plate u immedjatament esposti għal 110 nifs ta' Arja, nikotina (50mg/mL nikotina), jew CBD ( Aerosols li fihom 50mg/mL) fl-interface arja-likwidu f'volum puff ta' 55mL kif deskritt fit-taqsima Metodi. Fi tmiem l-espożizzjonijiet, iċ-ċelloli tneħħew mill-kamra ALI u rkuprati f'medja ta 'tkabbir kompluta għal 24 siegħa. Sussegwentement, il-mewt taċ-ċelluli ġiet imkejla bl-użu ta '(A) trypan blue dye-exclusion assay u (B) annexin V-FITC apoptosis kif imsemmi fid-dettall fit-taqsima Metodi. Immedjatament wara l-iżolament, alikwot tan-newtrofili purifikati nżamm f'medju komplut f'inkubatur tas-CO2 bħala 'kontrolli mhux esposti' negattivi għat-tul kollu tal-assaġġ, biex jiġi stmat il-limitu ta' mewt taċ-ċelluli, induzzjoni ta' apoptożi, jew livelli ta' NE f' in-nuqqas ta' kwalunkwe espożizzjoni. (C) Il-livelli ta 'NE ġew kwantifikati f'midja kondizzjonata maħsuda wara li l-perjodu ta' rkupru intemm billi twettaq NE ELISA kif diskuss fit-taqsima tal-Metodi. Id-dejta hija murija bħala box plots bi whiskers f'min u max minn esperimenti indipendenti kull wieħed imwettaq fi tliet kopji. Għall-assaġġ tal-apoptożi: data medja minn n=5 donaturi għal kull grupp. Għall-metodu trypan blue: dejta medja minn donaturi ta' kontroll mhux esposti n=6, kontroll tal-arja u donaturi Nic-Vape n=7, u donaturi CBD-Vape n{=8. Għal dejta medja tal-assaġġ NE minn n=6 donaturi għal kull grupp). Id-differenza bejn iż-żewġ gruppi tqieset sinifikanti f'p<0.05 which is indicated by the symbols *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001 calculated using non-parametric Kruskal-Wallis test with FDR correction for multiple comparisons by GraphPad Prism V.9 software (GraphPad; La Jolla, California, USA). ALI, air–liquid interface; CBD, cannabidiol; FDR, false discovery rate.

Tabella 2 Tqabbil ta’ diversi markaturi tar-riżultati tal-istudju wara espożizzjoni għal prodott vaping li fih CBD (CBD-vape) u prodott vaping li fih in-nikotina (Nic-vape)

Il-preżenza ta 'makrofaġi intra-alveolari mgħobbija bil-lipidi osservati f'ċelluli rkuprati mill-BAL tal-ġrieden wara l-inalazzjoni ta' aerosol CBD fl-istudju tagħna jikkorrobora ma 'rapport preċedenti li wera l-bidu ta' pnewmonja lipoid eżoġena f'pazjent li vaped żjut tal-kannabis u kellu lipidi. -mgħobbija makrofaġi tal-pulmun.65 Peress li l-pnewmonja lipoid eżoġena b'makrofaġi tal-pulmun mgħobbi bil-lipidi hija karatteristika ta 'EVALI, għalhekk tissuġġerixxi li n-nifs taż-żejt vape CBD jista' ma jkunx mingħajr riskju u jista 'jwassal għal korriment fil-pulmun f'vapers tal-kannabis. Il-każijiet ippreżentati fir-rapporti kliniċi EVALI ssuġġerew rabta etjoloġika aktar b'saħħitha bejn il-vaping tal-kannabis u l-insuffiċjenza respiratorja meta mqabbla mal-vaping tan-nikotina. ma osservax il-preżenza ta 'makrofaġi ragħwa.14 Filwaqt li r-riskji ġenerali għal kumplikazzjonijiet pulmonari assoċjati mal-vaping jistgħu jkunu aktar baxxi meta mqabbla mat-tipjip, il-vaping jidher li joħloq riskju għas-saħħa respiratorja, speċjalment fil-vapers tal-kannabis fit-tul. Fil-qosor, l-istudju tagħna jistabbilixxi b'mod ċar li milieu proinfjammatorju fil-pulmuni indott minn inalazzjoni ta 'aerosol CBD kien akbar minn dak indott minn aerosols tan-nikotina, u dan kien rifless minn tfixkil tal-integrità tal-barriera pulmonari u ħsara fil-pulmun (miġbura fil-qosor fit-Tabella 2). Dan jissuġġerixxi li l-vaping tal-kannabis jista' potenzjalment iwassal għal riżultati aktar severi, inkluż żieda fis-suxxettibilità għal infezzjonijiet respiratorji, reazzjonijiet ħżiena għat-tilqim profilattiku, u aggravar tas-sintomi f'pazjenti b'mard infjammatorju pulmonari sottostanti.16–19 35 36 69 70 Aħna ma osservajna l-ebda effett. bidliet viżibbli fl-imġiba tal-annimali waqt jew wara l-esponimenti, u lanqas bidliet fil-piż meta mqabbla mal-kontroll tal-arja (figura supplimentari onlajn E11). F'dan l-istudju, l-espożizzjoni għall-ajrusol tan-nikotina ma induċiex il-livelli ta 'ċitokini/kimokini varji fil-BAL bl-istess punt meta mqabbla ma' studju preċedenti. omoġenati wara espożizzjonijiet tan-nikotina-aerosol, u l-livelli tat-traskrizzjoni kultant ma jissarrfux għal bidliet meta mkejla fil-livelli tal-proteini kif isir minna. Barra minn hekk, il-profil taċ-ċitokini u l-modulazzjoni tas-sistema immunitarja huma dipendenti fuq il-likwidu elettroniku speċifiku, il-metodu tal-ġenerazzjoni tal-ajrusol/it-tul tal-espożizzjoni, u l-kimiċi tat-togħma miżjuda. Filwaqt li l-kannabis wriet benefiċċji għas-saħħa fil-ġestjoni tal-uġigħ, fl-irqad u fit-taffija tas-sintomi ta’ dardir/rimettar ikkawżat mill-kimoterapija f’pazjenti bil-kanċer u f’pazjenti li jesperjenzaw aċċessjonijiet,72–76 sempliċement hemm nuqqas ta’ evidenza robusta dwar is-sikurezza tal-kannabis meta titwassal mill-vaping. prodotti. F'dan ir-rigward, l-istudju tagħna huwa ġdid u jidentifika r-rwol ta 'l-inalazzjoni ta' aerosol CBD fl-induzzjoni ta 'infjammazzjoni pulmonari u ħsara fil-pulmun.

cistanche tubulosa-titjib tas-sistema immuni

Peress li l-istudju tagħna uża mudelli ta 'espożizzjoni ta' annimali u in vitro, jeħtieġ li jiġu kkunsidrati diversi limitazzjonijiet meta jiġu estrapolati r-riżultati ppreżentati għal espożizzjoni fil-ħajja reali fil-bnedmin. Limitazzjoni waħda ta' dan l-istudju hija li l-fokus tiegħu kien biss fuq espożizzjoni għal żmien qasir. Ir-riżultat ta 'espożizzjoni kronika fit-tul għal CBD-aerosols, u l-impatt tagħhom fuq ir-reazzjonijiet għal infezzjoni respiratorja u/jew tilqim profilattiku huma ta' importanza. Il-metodoloġija tal-espożizzjoni tal-annimali tagħna kienet ibbażata fuq sistema ta 'espożizzjoni tal-ġisem kollu u l-espożizzjoni tal-imnieħer biss tista' forsi tkun aktar adattata biex tissimula l-espożizzjoni ta 'vapers b'esperjenza. Minkejja li użajna sistema ta’ espożizzjoni tal-ġisem kollu, aħna vverifikajna li d-depożizzjoni fuq pil tal-annimali (u ħitan tal-gaġġa) ma kkontribwietx għall-inġestjoni ta’ partikuli permezz tat-tiswir tal-annimali u b’hekk influwenzat it-tossiċità osservata. Aħna użajna numru limitat ta 'ġrieden għal kull grupp ta' espożizzjoni; huwa probabbli li numri akbar ta 'ġrieden setgħu saħħew aktar il-konklużjonijiet tal-istudju tagħna. Għalkemm il-mudell ALI in vitro jipprovdi approċċ speċifiku għall-espożizzjoni man-nifs għat-twettiq tal-istudju bijoloġiku dwar l-effetti fuq is-saħħa relatati mal-użu ta 'prodotti vaping, l-estrapolazzjoni tad-dejta minn studji in vitro għal riskji umani tibqa' ipotetika. Studji ta 'osservazzjoni u sperimentali futuri ma' utenti regolari ta 'CBD u prodotti vaping li fihom in-nikotina huma meħtieġa biex jikkonfermaw is-sejbiet tagħna. Fl-aħħarnett, fl-esperimenti tagħna, l-annimali u ċ-ċelloli ġew esposti għal aerosols miż-żewġ prodotti ġġenerati b'mod identiku. Madankollu, l-utenti tal-prodotti tal-vaping ibbażati fuq il-kannabis jistgħu jużaw dawn il-prodotti b'mod differenti ħafna mill-vapers tan-nikotina (eż., inqas frekwenti). Hekk kif toħroġ dejta minn studji ta' osservazzjoni fost il-vapers tal-kannabis, differenzi potenzjali fix-xejriet tal-użu tal-prodott osservati f'kundizzjonijiet realistiċi għandhom jitqiesu meta tiġi simulata l-espożizzjoni tal-annimali u in vitro f'ambjenti tal-laboratorju. Studji futuri għandhom jinvestigaw l-effetti respiratorji ta 'prodotti vaping li fihom spettru wiesa' ta 'kannabinojdi, inkluż THC.

REFERENZI

1 Dipartiment tas-Saħħa tal-Istati Uniti u. Użu tas-sigaretti elettroniċi fost iż-żgħażagħ u l-adulti żgħażagħ: rapport tal-kirurgu ġenerali [PDF–8.47 MB] ikona PDF. Atlanta, GA: Dipartiment tas-Saħħa u Servizzi Umani, CDC, 2016.

2 Borodovsky JT, Crosier BS, Lee DC, et al. It-tipjip, il-vaping, l-ikel: il-legalizzazzjoni qed taffettwa l-mod kif in-nies jużaw il-kannabis? Int J Drug Policy 2016;36:141–7.

3 He T, Oks M, Esposito M, et al. " Tree-in-bloom ": korriment akut sever fil-pulmun indott mill-vaping taż-żejt tal-kannabis. Ann Am Thorac Soc 2017;14:468–70.

4 Knapp AA, Lee DC, Borodovsky JT, et al. Xejriet emerġenti fl-amministrazzjoni tal-kannabis fost l-adolexxenti li jużaw il-kannabis. J Adolesc Health 2019;64:487–93.

5 Kriegel D. Vaping marijuana vs tipjip: hemm rebbieħ? 2021. Disponibbli: https:// vaping360.com/learn/vaping-vs-smoking-weed/ [Aċċessat fil-15 ta' Settembru 2021].

6 Volkow ND, Baler RD, Compton WM, et al. Effetti avversi fuq is-saħħa tal-użu tal-marijuana. N Engl J Med 2014;370:2219–27.

7 Pahr K, Carter A. Gwida tal-Bidu għas-CBD. linja tas-saħħa. 2019. Disponibbli: https://www. healthline.com/health/your-cbd-guide [Aċċessat fid-19 ta' Awwissu 2021].

8 Suleiman SA. Tossiċità tal-idrokarburi tal-pitrolju in vitro: effett ta 'n-alkanes, benżin u toluene fuq makrofaġi alveolari pulmonari u enzimi lisosomali tal-pulmun. Arch Toxicol 1987;59:402–7.

9 Lachenmeier DW, Kuballa T, Reusch H, et al. Benżin fil-meraq tal-karrotta tat-trabi: aktar għarfien dwar il-mekkaniżmu tal-formazzjoni u l-valutazzjoni tar-riskju inkluża d-dejta tal-konsum mill-istudju Donald. Food Chem Toxicol 2010;48:291–7.

10 Li YS, Li YF, Li QN, et al. It-tossiċità pulmonari akuta fil-ġrieden indotta minn nanotubi tal-karbonju b'ħafna ħitan, benżin, u l-kombinazzjoni tagħhom. Environ Toxicol 2010;25:409–17.

11 Anderson RP, Zechar K. Il-korriment fil-pulmun min-nifs taż-żejt tal-butan hash jimita l-pnewmonja. Respir Med Case Rep 2019;26:171–3.

12 Holt AK, Poklis JL, Peace MR. Analiżi retrospettiva ta 'kostitwenti kimiċi f'likwidi regolati u mhux regolati tas-sigaretti elettroniċi. Front Chem 2021;9:752342.

13 Blount BC, Karwowski MP, Shields PG, et al. Vitamina E aċetat fil-fluwidu tal-ħasil tal-bronkoalveolari assoċjat ma 'EVALI. N Engl J Med 2020;382:697–705.

14 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, et al. Mudell ta 'annimali ta' aċetat ta 'vitamina E li jittieħed man-nifs u ħsara fil-pulmun bħal EVALI. N Engl J Med 2020;382:1175–7.

15 Merecz-Sadowska A, Sitarek P, Zielinska-Blizniewska H, ​​et al. Sommarju ta' studji in vitro u in vivo li jevalwaw l-impatt tal-espożizzjoni tas-sigaretti elettroniċi fuq organiżmi ħajjin u l-ambjent. Int J Mol Sci 2020;21:652.

16 Sussan TE, Gajghate S, Thimmulappa RK, et al. L-espożizzjoni għal sigaretti elettroniċi tfixkel id-difiżi pulmonari kontra l-batterja u l-virali f'mudell tal-ġurdien. PLoS One 2015;10:e0116861.

17 Hwang JH, Lyes M, Sladewski K, et al. L-inalazzjoni tas-sigaretti elettroniċi tbiddel l-immunità intrinsika u ċ-ċitokini tal-passaġġi tan-nifs filwaqt li żżid il-virulenza tal-batterja li tikkolonizza. J Mol Med (Berl) 2016;94:667–79.

18 Martin EM, Clapp PW, Rebuli ME, et al. L-użu tas-sigaretti elettroniċi jirriżulta f'soppressjoni ta 'ġeni ta' rispons immuni u infjammatorju fiċ-ċelloli epiteljali nażali simili għad-duħħan tas-sigaretti. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 2016;311:L135–44.

19 Rebuli ME, Glista-Baker E, Hoffman JR, et al. L-użu tas-sigaretti elettroniċi jbiddel ir-rispons immuni tal-mukuża tal-imnieħer għall-virus tal-influwenza attenwat ħaj. Prova klinika. Am J Respir Cell Mol Biol 2021;64:126–37.

20 Bloom JW, Kaltenborn WT, Paoletti P, et al. Effetti respiratorji tas-sigaretti mhux tat-tabakk. Br Med J (Clin Res Ed) 1987;295:1516–8.

21 Wills TA, Pagano I, Williams RJ, et al. Użu tas-sigaretti elettroniċi u disturb respiratorju f'kampjun adult. Drug Alcohol Depend 2019;194:363–70.

22 Xie W, Kathuria H, Galiatsatos P, et al. Assoċjazzjoni tal-użu tas-sigaretti elettroniċi b'kundizzjonijiet respiratorji inċidentali fost l-adulti tal-Istati Uniti mill-2013 sal-2018. JAMA Netw Open 2020;3:e2020816.

23 Bhatta DN, Glantz SA. Assoċjazzjoni tal-użu tas-sigaretti elettroniċi ma 'mard respiratorju fost l-adulti: analiżi lonġitudinali. Am J Prev Med 2020;58:182–90.

24 Li D, Sundar IK, McIntosh S, et al. Assoċjazzjoni tat-tipjip u l-użu tas-sigaretti elettroniċi ma 'tħarħir u sintomi respiratorji relatati fl-adulti: riżultati trasversali mill-valutazzjoni tal-popolazzjoni ta' studju dwar it-tabakk u s-saħħa (mogħdija), mewġa 2. Tob Control 2020;29:140–7.

25 Tashkin DP, Coulson AH, Clark VA, et al. Is-sintomi respiratorji u l-funzjoni tal-pulmun f'dawk li jpejpu tqal abitwali tal-marijuana biss, dawk li jpejpu tal-marijuana u t-tabakk, dawk li jpejpu tat-tabakk biss, u dawk li ma jpejpux. Am Rev Respir Dis 1987;135:209–16.

26 Tashkin DP. Marijuana affumikata bħala kawża ta 'korriment fil-pulmun. Monaldi Arch Chest Dis 2005;63:93–100.

27 Tashkin DP. Effetti tat-tipjip tal-marijuana fuq il-pulmun. Ann Am Thorac Soc 2013;10:239–47.

28 Baldwin GC, Tashkin DP, Buckley DM, et al. Il-marijuana u l-kokaina jfixklu l-funzjoni tal-makrofagi alveolari u l-produzzjoni taċ-ċitokini. Am J Respir Crit Care Med 1997;156:1606–13.

29 Taylor DR, Poulton R, Moffitt TE, et al. L-effetti respiratorji tad-dipendenza fuq il-kannabis fl-adulti żgħażagħ. Dipendenza 2000;95:1669–77.

30 Aldington S, Williams M, Nowitz M, et al. Effetti tal-kannabis fuq l-istruttura, il-funzjoni u s-sintomi pulmonari. Thorax 2007;62:1058–63.

31 Moore BA, Augustson EM, Moser RP, et al. Effetti respiratorji tal-użu tal-marijuana u tat-tabakk f'kampjun tal-Istati Uniti. J Gen Intern Med 2005;20:33–7.

32 Goniewicz ML, Knysak J, Gawron M, et al. Livelli ta 'karċinoġeni magħżula u tossiċi fil-fwar minn sigaretti elettroniċi. Tob Control 2014;23:133–9.

33 Bhat TA, Kalathil SG, Leigh N, et al. Effetti akuti tal-inalazzjoni tal-ajrusol tal-prodott tat-tabakk imsaħħan (IQOS) fuq ħsara fit-tessut tal-pulmun u bidliet infjammatorji fil-pulmuni. Nicotine Tob Res 2021;23:1160–7.

34 Kosmider L, Jackson A, Leigh N, et al. Imġieba ta 'nefħa ċirkadjana u topografija fost l-utenti tas-sigaretti elettroniċi. Tob Regul Sci 2018;4:41–9.

35 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, et al. Id-duħħan sekondaman jinduċi infjammazzjoni u jfixkel l-immunità għal infezzjonijiet respiratorji. J Immunol 2018;200:2927–40.

36 Bhat TA, Kalathil SG, Bogner PN, et al. AT-rvd1 itaffu l-infjammazzjoni pulmonari aggravata mid-duħħan sekondaman u jerġa 'jġib l-immunità antibatterika mrażżna mid-duħħan sekondaman. J Immunol 2021;206:1348–60.

37 Carden D, Xiao F, Moak C, et al. Neutrophil elastase jippromwovi ħsara mikrovaskulari tal-pulmun u proteolysis ta 'cadherins endoteljali. Ġurnal Amerikan tal-Fiżjoloġija-Qalb u Fiżjoloġija Ċirkolatorja 1998;275:H385–92.

38 Kawabata K, Hagio T, Matsuoka S. Ir-rwol tan-newtrophil elastase f'korriment akut tal-pulmun. Eur J Pharmacol 2002;451:1–10.

39 Khan AA, Alsahli MA, Rahmani AH. Myeloperoxidase bħala bijomarkatur attiv tal-marda: perspettivi bijokimiċi u patoloġiċi reċenti. Med Sci (Basel) 2018;6:33.

40 Dietert K, Gutbier B, Wienhold SM, et al. Spettru ta 'istopatoloġiji speċifiċi għal patoġeni u mudell f'mudelli tal-ġrieden ta' pnewmonja akuta. PLoS One 2017;12:e0188251.

41 Butt YM, Smith ML, Tazelaar HD, et al. Patoloġija ta' ħsara fil-pulmun assoċjata mal-vaping. N Engl J Med 2019;381:1780–1.

42 Lee WL, Downey GP. Attivazzjoni tan-newtrofili u ħsara akuta fil-pulmun. Curr Opin Crit Care 2001;7:1–7.

43 Fink MP. Rwol ta 'speċi ta' ossiġnu u nitroġenu reattiv fis-sindromu ta 'distress respiratorju akut. Curr Opin Crit Care 2002;8:6–11.

44 Abraham E. Newtrofili u ħsara akuta fil-pulmun. Crit Care Med 2003;31:S195–9.

45 Pham CTN. Newtrophil serine proteases jirfinaw ir-rispons infjammatorju. Int J Biochem Cell Biol 2008;40:1317–33.

46 Arecco N, Clarke CJ, Jones FK, et al. Il-livelli u l-attività tal-elastasi huma miżjuda fil-muskolu distrofiku u jfixklu s-sopravivenza, il-proliferazzjoni u d-divrenzjar taċ-ċelluli myoblast. Sci Rep 2016;6:24708.

47 Czégény Z, Nagy G, Babinszki B, et al. CBD, huwa prekursur tat-THC fis-sigaretti elettroniċi. Sci Rep 2021;11:8951.

48 Lindén A, Laan M, Anderson GP. Newtrofili, interleukin-17A u mard tal-pulmun. Eur Respir J 2005;25:159–72.

49 Ma K, Yang L, Shen R, et al. Iċ-ċelloli Th17 jirregolaw il-produzzjoni ta 'CXCL1 fil-kanċer tas-sider. Int Immunopharmacol 2018;56:320–9.

50 Becker S, Quay J, Koren HS, et al. Espressjoni MCP-1 kostituttiva u stimulata, GRO alfa, beta, u gamma fl-epitelju tal-passaġġ tan-nifs uman u makrofaġi bronkoalveolari. Am J Physiol 1994;266:L278–86.

51 Potey PM, Rossi AG, Lucas CD, et al. Newtrofili fil-bidu u r-riżoluzzjoni ta 'infjammazzjoni pulmonari akuta: fehim tal-funzjoni bijoloġika u l-potenzjal terapewtiku. J Pathol 2019;247:672–85.

52 Heijink IH, Brandenburg SM, Postma DS, et al. Id-duħħan tas-sigaretti jfixkel il-funzjoni tal-barriera epiteljali tal-passaġġ tan-nifs u l-irkupru tal-kuntatt taċ-ċelluli maċ-ċelluli. Eur Respir J 2012;39:419–28.

53 Aghapour M, Raee P, Moghaddam SJ, et al. Disfunzjoni tal-barriera epiteljali tal-passaġġi tal-arja f'mard pulmonari ostruttiv kroniku: rwol tal-espożizzjoni għad-duħħan tas-sigaretti. Am J Respir Cell Mol Biol 2018;58:157–69.

54 Shapiro SD, Goldstein NM, Houghton AM, et al. Newtrophil elastase tikkontribwixxi għall-enfisema indotta mid-duħħan tas-sigaretti fil-ġrieden. Am J Pathol 2003;163:2329–35.

55 Antunes MA, Rocco PRM. Enfisema pulmonari indotta minn Elastase: għarfien minn mudelli sperimentali. An Acad Bras Cienc 2011;83:1385–96.

56 Ghosh A, Coakley RD, Ghio AJ, et al. L-użu kroniku tas-sigaretti elettroniċi jżid il-livelli tal-elastasi tan-newtrofili u tal-matrix metalloprotease fil-pulmun. Am J Respir Crit Care Med 2019;200:1392–401.

57 Fortunati E, Kazemier KM, Grutters JC, et al. In-newtrofili umani jaqilbu għal fenotip attivat wara li jidħlu fil-pulmun irrispettivament minn mard infjammatorju. Clin Exp Immunol 2009;155:559–66.

58 Faith M, Sukumaran A, Pulimood AB, et al. Kemm hi indikatur affidabbli tal-infjammazzjoni l-attività tal-myeloperoxidase? Clin Chim Acta 2008;396:23–5.

59 Lau D, Mollnau H, Eiserich JP, et al. Myeloperoxidase jimmedja l-attivazzjoni tan-newtrofili b'assoċjazzjoni ma' integrini CD11b/CD18. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:431–6.

60 Schmidt A, Oberle N, Krammer PH. Mekkaniżmi molekulari ta' soppressjoni taċ-ċelluli T medjata minn treg. Front Immun 2012;3:51.

61 Thornton AM, Shevach EM. Iċ-ċelluli T immunoregolatorji CD4+CD25+ jrażżnu l-attivazzjoni taċ-ċelluli T poliklonali in vitro billi jinibixxu l-produzzjoni tal-interleukin 2. J Exp Med 1998;188:287–96.

62 Kalininskiy A, Kittel J, Nacca NE, et al. Espożizzjonijiet tas-sigaretti elettroniċi, infezzjonijiet fl-apparat respiratorju, u immunità intrinsika indebolita: reviżjoni narrattiva. Pediatr Med 2021;4:5.

63 Lucas R, Czikora I, Sridhar S, et al. Arginase 1: medjatur mhux mistenni ta 'disfunzjoni tal-barriera kapillari pulmonari f'mudelli ta' korriment akut tal-pulmun. Front Immunol 2013;4:228.

64 Ween MP, Whittall JJ, Hamon R, et al. Fagoċitożi u infjammazzjoni: esplorazzjoni tal-effetti tal-komponenti tal-fwar tas-sigaretti elettroniċi fuq il-makrofagi. Physiol Rep 2017;5:e13370.

65 Gay B, Field Z, Patel S, et al. Korriment fil-pulmun ikkawżat mill-vaping: każ ta 'pnewmonja lipoid assoċjata ma' sigaretti elettroniċi li fihom il-kannabis. Każ Rep Pulmonol 2020;2020:7151834.

66 Abeles M, Popofsky S, Wen A, et al. Ħsara fil-pulmun assoċjata mal-vaping ikkawżata mill-inalazzjoni taż-żejt tal-kannabis. Pediatr Pulmonol 2020;55:226–8.

67 Adapa S, Gayam V, Konala VM, et al. Tossiċità pulmonari akuta indotta mill-vaping tal-kannabis: serje ta 'każijiet u reviżjoni tal-letteratura. J Investig Med High Impact Case Rep 2020;8:2324709620947267.

68 Conuel EJ, Chieng HC, Fantauzzi J, et al. Il-ħsara fil-pulmun assoċjata mal-vaping taż-żejt tal-kannabinojdi u d-dehra radjografika tagħha. Am J Med 2020;133:865–7.

69 Lugade AA, Bogner PN, Thatcher TH, et al. L-espożizzjoni għad-duħħan tas-sigaretti taggrava l-infjammazzjoni tal-pulmun u tikkomprometti l-immunità għal infezzjoni batterika. J Immunol 2014;192:5226–35.

70 Bhat TA, Kalathil SG, Miller A, et al. Medjaturi speċjalizzati favur ir-riżoluzzjoni jegħlbu s-soppressjoni immuni kkaġunata mill-espożizzjoni għad-duħħan passiv. J Immunol 2020;205:3205–17.

71 Garcia-Arcos I, Geraghty P, Baumlin N, et al. L-espożizzjoni kronika tas-sigaretti elettroniċi fil-ġrieden jinduċi karatteristiċi ta 'COPD b'mod dipendenti fuq in-nikotina. Thorax 2016;71:1119–29.

72 Booz GW. Cannabidiol huwa strateġija terapewtika emerġenti biex jitnaqqas l-impatt tal-infjammazzjoni fuq l-istress ossidattiv. Free Radic Biol Med 2011;51:1054–61.

73 Rosenberg EC, Tsien RW, Whalley BJ, et al. Kannabinojdi u epilessija. Newroterapewtika 2015;12:747–68.

74 Akkademji Nazzjonali tax-Xjenzi, Inġinerija, Mediċina; Taqsima tas-Saħħa u l-Mediċina. Effetti terapewtiċi tal-kannabis u l-kannabinojdi. Fi: L-Effetti tas-Saħħa tal-Cannabis u l-Cannabinoids: L-Istat attwali tal-Evidenza u Rakkomandazzjonijiet għar-Riċerka. L-Istampa tal-Akkademji Nazzjonali, 2017.

75 Thiele EA, Marsh ED, French JA, et al. Cannabidiol f'pazjenti b'aċċessjonijiet assoċjati mas-sindromu Lennox-gestalt (GWPCARE4): prova ta' fażi 3 randomised, double-blind, ikkontrollata bi plaċebo. Lancet 2018;391:1085–96.

76 Amministrazzjoni tal-Ikel u d-Droga tal-Istati Uniti. L-FDA tapprova l-ewwel mediċina magħmula minn ingredjent attiv derivat mill-marijuana biex tikkura forom rari u severi ta 'epilessija. 2018. Disponibbli: https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ ucm611046.htm [Aċċessat fil-15 ta' Settembru 2021].