Ingredjenti Antiossidanti Ġodda Mill-Prodotti Sekondarji tal-Birrerija Għal Formulazzjonijiet Kożmetiċi

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

Astratti:L-għan ta' dan ix-xogħol kien li jiġu evalwati l-kontenut totali tal-fenol u l-attività antiossidanti ta' tipi differenti ta' birer maħduma bl-idejn (Ego, Alter, IFiat Lux, Triplo Malto, Ubi, u Maior), kif ukoll il-materjali tal-bidu (malts, ħops u ħmira), il-prodotti intermedji, u l-prodotti tal-iskart (malts, ħops u ħmira eżawriti), minħabba l-użu tagħhom f'formulazzjonijiet kożmetiċi innovattivi. Estrazzjonijiet mill-bidu u l-kampjuni eżawriti ttieħdu mill-ilma jew 70° alkoħol. Il-kontenut totali tal-fenol (Folin Ciocalteau Essay) tal-prodotti kollha tal-birra kien jiddependi fuq il-prodott speċifiku li qed jiġi investigat. L-ogħla valuri nstabu fil-bidu tal-ħops (li jvarja minn madwar 93 sa 155 mg GAE/g, skont is-solvent tal-estrazzjoni), dawk intermedji fil-bidu tax-xgħir u l-ħmira tal-bidu, u l-inqas valuri fil-wort. Il-kontenut totali tal-fenol fil-birer finali joriġina mill-fenoli li ġew estratti mill-ingredjenti differenti, jiġifieri l-malts tal-bidu, il-ħops u l-ħmira, iżda l-valuri mhux negliġibbli kienu għadhom osservati fi prodotti użati. Il-metodu użat għall-evalwazzjoni tal-attività antiossidanti, il-kapaċità antiossidanti ekwivalenti ta' Trolox (LPPH), il-ferric-ion li jnaqqas il-parametru antiossidanti (FRAP), u l-attività ta' scavenging ta' katjoni radikali u t-tnaqqis tal-potenza (ABTS) influwenzaw bil-qawwa r-riżultati. B'mod ġenerali, ir-riżultati rriflettew ix-xejra osservata għall-kontenut totali tal-fenol: li l-birer huma arrikkiti progressivament minn fenoli li joriġinaw mill-ingredjenti kollha tal-bidu, u li l-prodotti eżawriti għad għandhom attività antiossidanti mhux negliġibbli.kolesterol cistancheHuwa interessanti li wieħed jinnota li l-ħmira tal-iskart spiss uriet valuri ogħla minn dawk tal-materjal tal-bidu; jista 'jiġi dedott li l-ħmira tkun kapaċi tassorbi fenoli mill-birra waqt il-birra. Billi jitqies l-interess fl-isfruttament tal-iskart derivat mill-ipproċessar tal-ikel, l-attività bijoloġika tal-iskart Alter brewery products ġiet evalwata fuq il-kultura taċ-ċelloli tal-kerajolinċiti (prodotti eżawriti ta' xgħir, ħops u ħmira). Saru assaġġi in vitro preliminari fiċ- ċelloli haCaT tal- keratinoċiti biex tiġi evalwata l- bijoattività potenzjali ta ' estratti eżawriti. Fost l-estratti eżawriti, l-estratti tal-ħops u tal-ħmira eżawriti wrew il-kapaċità li jtejbu l-attività mitokondrijali u jipprevjenu l-istress ossidattiv fiċ-ċelloli HaCaT, żewġ karatteristiċi fit-tixjiħ tal-ġilda, Bħala konklużjoni, dan l-istudju joffri evidenza li l-iskart minn birer maħduma bl-idejn jista 'jkun sors interessanti ta' fenoli għall-preparazzjoni ta 'kożmetiċi anti-aging tal-ġilda.

Kliem ewlieni:birra tas-snajja; prodotti tal-birra; kontenut totali ta' fenol; attività antiossidanti; ċitotossiċità;anti-aging

1. Introduzzjoni

Craftbeer sar dejjem aktar popolari fl-Istati Uniti u fl-Ewropa [1,2], b'riperkussjonijiet importanti għall-ekonomija [3]. Dan is-suċċess kien xprunat mill-interess tal-konsumatur fit-togħma ta' birer ġodda b'togħmiet u aromi differenti [2] u attenzjoni għall-benefiċċji għas-saħħa tal-konsum moderat tal-birra [4].

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

B'differenza mill-birer kummerċjali, il-birer tas-snajja mhumiex iffiltrati u mhux pasturizzati, u b'hekk il-karatteristiċi sensorjali tagħhom jibqgħu mhux mibdula mill-proċess tal-birra. Barra minn hekk, sustanzi ta' benefiċċju għas-saħħa, bħall-antiossidanti, jistgħu wkoll jiġu meħlusa.

Il-birer kummerċjali u l-prodotti tal-iskart tagħhom diġà ġew evalwati għall-proprjetajiet antiossidanti tagħhom. Zhao et al. [5] iddetermina l-profili tal-fenol u l-attivitajiet antiossidanti korrispondenti ta' 34 birra kummerċjali u sab differenzi notevoli fil-kontenut fenoliku totali u individwali u fl-attività antiossidanti. L-aktar komposti fenoliċi abbundanti kienu aċidi galliċi u feruliċi. Fl-istess perjodu, Ribeiro Tafulo et al. [6] ddeterminat l-attività antiossidanti ta' 27 birra kummerċjali oħra, bl-użu ta' diversi metodi spettrofotometriċi. Dik l-istess sena, Piazzon et al.,2010 [7]evalwa l-attività antiossidanti u l-kontenut fenoliku ta' tipi differenti ta' birer kummerċjali (abbati, ale, bock, qamħ, lager, pilsner, u dealcoholized), u sabet varjetà kbira fosthom. Fi studju dwar il-birer magħmulin mid-dar, Farcas et al. [8] iddetermina l-kontenut totali tal-polifenol u l-attività antiossidanti matul il-proċess kollu tal-produzzjoni, li jibda mill-materja prima (xgħir u ħops)u jispiċċa bl-iskart irkuprat. Huma wrew li kontenut inizjali ogħla ta' polifenol totali u attività antiossidanti fil-materja prima kienu dovuti għall-preżenza ta' xgħir u li l-kontenut totali tal-polifenol naqas ħafna meta għadda għall-birra u x-xgħir eżawrit fil-prodott finali tal-birra u fix-xgħir eżawrit. Il-ħmira ma ġietx analizzata.

Cistanche jista 'anti-aging

Il-fatt li l-komposti antiossidanti derivati mix-xgħir tal-malt ġew ippruvati minn Zhao u ko-ħaddiema [9], li wrew l-attività antiossidanti u l-kontenut totali tal-fenol ta' diversi varjetajiet ta' xgħir tal-maltu. Awturi oħra identifikaw sebgħa u erbgħin kompost tal-fenol minn erba' tipi ta' birra kummerċjali, bl-użu ta' kromatografija likwida flimkien ma' teknika ibrida ta' spettrometrija tal-massa quadrupole Orbitrap ibrida tal-joni tal-joni tal-elettrospray [10]. Riċentement, l-identifikazzjoni ta' komposti fenoliċi u tan-nitroġenu b'piż molekulari baxx fil-birer tas-snajja nkisbet permezz ta' analiżi HPLC-ESI-MS/MS [11]. L-awturi ppruvaw jiddifferenzjaw it-tipi ta 'birer, bħal IPA, Lager, u Weiss, skond il-komposti fenoliċi u tan-nitroġenu, iżda ma sabu l-ebda differenza sinifikanti f'dawn il-komposti fost id-diversi tipi ta' birra.

Aktar reċentement [12], 20 kompost fenoliku, pereżempju, aċidu galliku, katekina, aċidu caffeic, quercetin, xanthohumol, u humulone, intgħażlu u ġew ikkwantifikati f'birra tas-snajja differenti, dud, ingredjenti tal-bidu tal-birra (xgħir malt, ħops, u ħmira) u prodotti sekondarji (ħliefa tax-xgħir, ħops użat, u ħmira eżawrita). Minn dan l-istudju, instab li kienu jeżistu differenzi sinifikanti fost il-kampjuni kollha u li l-kompożizzjoni tal-birra tiddependi fuq il-proċess ta 'riċevuta u birra. Il-komposti fenoliċi tal-birer oriġinaw l-aktar mill-malt tax-xgħir, u, interessanti, il-ħmira kienet kapaċi tassorbi komposti fenoliċi minn sorsi oħra.

Għalhekk, l-evalwazzjoni tal-antiossidanti fil-prodotti tal-iskart mill-produzzjoni tal-birra tista' tkun ta' importanza kbira jekk wieħed iqis it-tkabbir rapidu tas-suq tal-birra tas-snajja madwar id-dinja.

L-isfruttament ta' prodotti sekondarji tal-birrerija biex jiġu żviluppati prodotti tas-saħħa bħal kożmetiċi u/jew supplimenti jgħin biex tiżdied is-sostenibbiltà tal-produzzjoni tal-birra. Dan l-istudju għandu bosta għanijiet: jevalwa l-kontenut totali tal-fenol u l-attività antiossidanti ta' tipi differenti ta' birer tas-snajja Taljani (lager, ambra, xgħir triplu, aħmar u iswed), u jevalwa l-intermedjarju tal-produzzjoni tagħhom, kif ukoll il-prodotti tal-iskart tagħhom. L-attività bijoloġika tal-estratti tal-iskart mill-birrerija Alter kienet għalhekk evalwata fuq il-keratinoċiti umani. Dan jiftaħ opportunitajiet ġodda u interessanti biex jiġu sfruttati ingredjenti ġodda minn prodotti sekondarji tal-birrerija għal formulazzjonijiet kożmetiċi.

2. sperimentali

2.1. Materjali

11-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH),2,4,6-Tris(2-pyridyl)-s-triazine (TPTZ), (±)-6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchromane-2-carboxylic acid (TROLOX), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-aċidu sulfoniku) melħ diammonium(98%TLC)(ABTS), aċidu galliku, ir-reaġent ACS tal-karbonat tas-sodju monoidrat, l-aċetat tas-sodju u l-etanol (grad assolut tal-etanol) inxtraw mingħand Sigma-Aldrich (Steinheim, il-Ġermanja). Il-manganiż (IV)ossidizza attivat (>90%)u r-reaġent tal-fenol ta' Folin-Ciocalteu nxtara minn Fluka (Buchs, l-Isvizzera). L-aċetat tas-sodju anidru u l-ħadid anidru (III)klorur inxtraw minn J.T. Baker (Center Valley, PA, USA) u karbonat tas-sodju anidru nxtara minn Carlo Erba (Milan, l-Italja). Is-solventi u r-reaġenti kollha kienu ta' grad analitiku. L-ilma ultrapure ġie prodott minn Gradient Milli-Q (Millipore, Molsheim, Franza). Materjali tal-bidu, birer tal-artiġjanat, ħniex, u l-prodotti tal-iskart tagħhom kienu ġentilment fornuti minn Birrificio Collesi (Apecchio, l-Italja).

Il-karatteristiċi dettaljati tal-birer investigati f'dan l-istudju huma pprovduti fit-Tabella 1. It-tip ta' xgħir tal-bidu u ħops iddetermina d-differenzi ewlenin fost il-birer kollha. Ħames malts tal-bidu differenti jistgħu jintużaw, ta 'spiss f'taħlitiet u fi proporzjonijiet differenti. Il-ħops Perle u Saaz jintużaw fi proporzjonijiet differenti għall-aromi differenti tagħhom. L-istess ħmira, Saccharomyces Cerevisiae, intużat għall-birer kollha, li kienu kollha tipi ta 'fermentazzjoni għolja. Il-kombinazzjonijiet varji jipproduċu tipi differenti ta 'birer (lager, ambra, xgħir triplu, aħmar, u iswed) b'kontenut ta' alkoħol li jvarja minn 6.0 sa 9.0% V / V.

2.2. Tħejjija tal-Kampjun

Qabel l-analiżi, il-materjali tal-bidu (xgħir, ħops, u ħmira), birer, ħniex, u skart (xgħir, ħops u ħmira eżawriti) kienu soġġetti għal proċessi differenti skont l-istat fiżiku tagħhom, li jistgħu jitnixxfu solidu, solidu umdu, jew likwidu turbid (Tabella 2).

Solidi u likwidi umdi ġew l-ewwel soġġetti għal lijofilizzazzjoni f'temperatura ta '-50 ° C u pressjoni ta' 0.03 bar (FreeZone 1 Liter Benchtop Series77400 freeze-dryer, LABCONCO, Kansans City, MO, USA). Is-solidi mnixxfa kienu soġġetti għat-tħin f'mitħna tal-qtugħ. Sussegwentement, il-kampjuni kollha kienu suġġetti għal estrazzjonijiet. Ammont ta' kampjun kien miżun b'attenzjoni u mxerred f'100 mL ta' solvent (ilma jew 70°etanol). Il-likwidu li rriżulta tqiegħed fil-garafina Erlenmeyer, li mbagħad ingħalqet bir-reqqa. Il-kampjuni tħawwdu manjetikament għal 24 siegħa f'temperatura ambjentali, imbagħad ċentrifugati fi 12,000 rpm f'20 °C għal 10 min biex jitneħħew partiċelli mhux maħlula (Zetalab CNZ-140H-E, Padova, l-Italja). Il- kampjuni kienu lajofilizzati u maħżuna f' - 20°C f' kunjetti ta ' 50 mL polyethylene b' għatu bil- kamin (BD Falcon TM, BD Biosciences, Bedford, MA, USA) sabiex jiġu żgurati l- aħjar kundizzjonijiet ta ' ħażna.

2.3. Determinazzjoni totali tal-Kontenut tal-Fenol

Il-Kontenut Totali tal-Fenol (TPC) tal-kampjuni ġie ddeterminat skont il-metodu tal-ispettrofotometriku folin-Ciocalteu [13] b'xi modifiki [14]. Fil-qosor, il-prodotti kollha mnixxfa bil-friża ntużaw biex jippreparaw soluzzjonijiet limpid f'konċentrazzjoni ta' 10 mg mL-1. Alikwota ta' 50 μL ta' din is-soluzzjoni ġiet miżjuda ma' 150 μL tar-reaġent tal-fenol ta' Folin-Ciocalteu, dilwit 1:4 bl-ilma. Imbagħad, ġiet miżjuda 50 uL ta 'Na, soluzzjoni saturata CO3. Wara inkubazzjoni f'temperatura ambjentali għal 10 min, l-assorbenza ta' kull bir ġiet determinata f'765 nm bl-użu ta' qarrej tal-mikroplate (FLUOstar Omega, BMG Labtech GmbH, Ortenberg, il-Ġermanja). Il-kejl tqabbel ma' soluzzjoni standard ta' kalibrazzjoni ta' aċidu galliku (GA), u r-riżultati ġew espressi bħala milligrammi ta' ekwivalenti ta' aċidu galliku (GAE) għal kull gramma ta' prodott sekondarju (mg GAE/g).

2.4. Evalwazzjoni tal-Attività Antiossidanti

L-attività antiossidanti tal-birra tas-snajja u l-prodotti sekondarji ġiet evalwata bil-kejl tal-kapaċità radikali ta' scavenging tal-katjoni tad-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)(ABTS*)kapaċità radikali ta' scavenging cation, u l-Kapaċità Antiossidanti li Tnaqqas il-Ferric(FRAP).dożaġġ tal-cistanche redditTrolox(6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid) intuża bħala standard ta' kalibrazzjoni. Il- valuri ġew espressi bħala mmol Trolox ekwivalenti/ g tal- kampjun bħala funzjoni ta ' IC50, definita bħala l- konċentrazzjoni tal- materjal ittestjat meħtieġ biex jikkawża tnaqqis ta ' 50% fid- DPPH inizjali, ABTS jew konċentrazzjoni tal- ħadid.

2.5. Evalwazzjoni tal-Kapaċità Antiossidanti Ekwivalenti ta' Trolox (DPPH)

L-attività ta' scavenging radikali ħieles mid-DPPH ġiet evalwata permezz ta' analiżi analitika tal-mikroplejt skont metodi ppubblikati qabel[15] b'xi modifiki [16]. Fil-qosor, alikwot ta' 50 μL tal-kampjun (konċentrazzjoni ta' 10 mg mL-')u l-istandard ġie miżjud ma' 150 μL ta' DPPH f'etanol assolut fi pjanċa mikrotitrata ta' 96 bir (BD FalconTM)Wara inkubazzjoni f'temperatura ta' 37 °C għal 20 minuta, l-assorbenza ta' kull bir ġiet iddeterminata f'517 nm bl-użu ta' qarrej tal-mikroplate. L-attività antiossidanti ġiet ikkalkulata u espressa kontra l-ammont Trolox skont l-Ekwazzjoni (1)[17] fejn Ag u A huma l-assorbenzi tas-soluzzjoni radikali DPPH● f'517 nm fil-preżenza tal-kampjun ta' kontroll u l-kampjuni tal-estratt, rispettivament.

2.6. Attività ta' Scavenging ta' Katjoni Radikali u Qawwa ta' Tnaqqis (ABTS)

L-assaġġ ABTS twettaq skont il-proċeduri preċedenti [18] u applikat għal analiżi tal-pjanċi tal-mikrolitru ta' 96 bir. Is-soluzzjoni ABTS*+ (5 mM)ġiet ippreparata billi ossidizza ABTS ma 'MnO, fl-ilma għal 30 min fid-dlam. Alikwot ta' 50 μL tal-konċentrazzjonijiet differenti ta' kampjun u standard (Trolox) ġie miżjud ma' 150 μL ta' soluzzjoni ABTS* fi pjanċa mikrotitrata ta' 96 bir (BD FalconTM).benefiċċji ta ' l-estratt taċ-cistancheWara l-inkubazzjoni f'temperatura ambjentali għal 10 min, l-assorbenza ta' kull bir ġiet determinata f'734 nm bl-użu ta' qarrej tal-mikroplejt. Il-valuri ġew ikkalkulati u espressi kontra l-ammont ta' Trolox skont l-Ekwazzjoni (2) [17] fejn Ag u A huma l-assorbenzi tas-soluzzjoni radikali OHe f'734 nm fil-preżenza tal-kampjun ta' kontroll u l-kampjuni tal-estratt, rispettivament.

2.7. Parametru Antiossidanti (FRAP) li jnaqqas il-Ferric-long

Il-valuri tal-FRAP tal-birra tas-snajja/prodotti sekondarji ġew iddeterminati skont metodu ppubblikat qabel [19], b'xi modifiki [20]. Ir-reaġent FRAP tħejja billi tħalla t-tliet soluzzjonijiet li ġejjin:

1. 50mL0.3M acetate buffer pH3.6(1.23g ta' aċetat tas-sodju f'50 mL ta' aċidifikazzjoni ta' l-ilma

b'aċidu aċetiku);

2. 5mLofstock soluzzjoni ta' 5mTPTZ(2,4,6-Tripyridyl-s-triazine) [15.6mg]f'40 mM HCl;3. 5 mL ta' 5 mM FeCl3:6 H2O (16.2 mg) f'40 mM HCl.

Ir-reaġent FRAP ġie msaħħan f'temperatura ta' 37°CC qabel l-użu. Alikwoti ta' kampjun ta' 25 μL (soluzzjonijiet fil-konċentrazzjoni ta' 10 mg mL-1)ġew miżjuda fi tliet kopji fi bjar ta' pjanċa ta' 96 bir (BD Falcone). L-analiżi nbdiet billi żdied 175 μL ta' reaġent FRAP ma' kull bir. Il-pjanċa tħawwdet immedjatament fi qarrej tal-pjanċa FLUOstar Omega għal 30s u r-reazzjoni tħalliet taħdem għal 10 min wara li l-pjanċa nqrat fuq qarrej tal-pjanċi (593 nm). Soluzzjoni ta' referenza ta' Trolox kienet taħdem simultanjament u ntużat biex tiġġenera l-kurva ta' kalibrazzjoni b'rigressjoni lineari. Il-kurva standard kienet lineari bejn 25 u 800μM Trolox(TE). Ir-riżultati ġew espressi f'kampjun ekwivalenti ta' μM Trolox (TE) g-I.

2.8. Kulturi taċ-Ċelloli

Il-linja taċ-ċelloli tal-keratinoċiti umani, HaCaT, tkabbru regolarment fil-Medju tal-Ajkla modifikata ta' Dulbecco (DMEM), issupplimentata b'10 % serum bovin tal-fetu (FBS), 2 mM L-glutamine,50 U/mL peniċillina, u 50ug/mL streptomycin f'Cin inkubatur umidifikat b'5%CO. Biex tiġi evalwata ċ- ċitotossiċità, l- attività mitokondrijali, u l- formazzjoni ta ' ROS intraċellulari, iċ- ċelloli HaCaT inżergħu fi pjanċi ta ' 96 bir f' 2×10 * ċelloli/ tajjeb. L-esperimenti kollha saru wara 24 siegħa ta' inkubazzjoni f'temperatura ta' 37 °C f'5%CO,. Għall-esperimenti biċ-ċelloli HaCaT, soluzzjonijiet ta 'stokk ta' estratti eżawriti tħejjew fl-ilma b'60 mg / mL. Is-soluzzjonijiet ta' stokkijiet imbagħad ġew dilwiti f'mezz sħiħ biex jinkisbu l-konċentrazzjonijiet mixtieqa ta' estratti eżawriti.

2.9. Ċitotossiċità u Attività Mitokondrijali

Il-vijabbiltà taċ-ċellola ġiet evalwata bit-tnaqqis ta' 3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide(MTT) għall-formażan li ma jinħallx, kif deskritt qabel 21]. Fil-qosor, iċ-ċelloli HaCaT ġew ittrattati għal 24 siegħa b'konċentrazzjonijiet differenti ta' estratt (0.003-3 mg/mL) f'temperatura ta' 37°C f'5 %CO. Sussegwentement, il-mezz ta 'trattament ġie sostitwit b'MTT fis-Soluzzjoni ta' Melħ Bilanċjata ta 'Hank (HBSS)( 0.5 mg / mL) għal 2 siegħa f'37 °C f'5%CO. Wara l- ħasil b' HBSS, il- kristalli formażani ġew maħlula fl- isopropanol. Il-livelli ta' formażan tkejlu(570 nm, filtru ta' referenza 690 nm)bl-użu tal-qarrej tal-pjanċi b'ħafna tikketti VICTORTM X3(PerkinElmer, Waltham, MA, USA). Il-vijabbiltà taċ-ċelloli ġiet espressa bħala perċentwal taċ-ċelloli ta' kontroll.

L-attività mitokondrijali kienet iddeterminata mill-MTT, kif deskritt qabel, b'modifiki żgħar [22].effetti sekondarji cistanche deserticolaFil-qosor, iċ-ċelloli HaCaT ġew ittrattati għal 4 siegħa jew b'DMEM 10% FBS (medium tan-nutrijenti) jew salina buffered fosfati ta 'Dulbecco (soluzzjoni salina mingħajr nutrijenti) fil-preżenza ta' estratt ta '0.03 mg/ mL f'37 °C f'5%CO. Sussegwentement, il- kura ġiet sostitwita b' MTT għal 2 siegħa b' 37°Cin5% CO2. Wara l- ħasil b' HBSS, il- kristalli formażani ġew maħlula fl- isopropanol. Il-livelli ta' formażan li kkorrelataw ma' l-attività mitokondrijali tkejlu (570 nm, filtru ta' referenza 690 nm) bl-użu tal-qarrej tal-pjanċa b'ħafna saffi VICTORTM X3 (PerkinElmer). L-attività mitokondrijali ġiet espressa bħala perċentwal ta' ċelloli ta' kontroll.

2.10. Formazzjoni TA' ROS intraċellulari

Il-formazzjoni ta' speċijiet ta' ossiġnu reattiv (ROS) ġiet evalwata permezz ta' sonda fluworexxenti 2'-7'dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCF-DA), kif deskritt qabel [23](iċ-ċelloli HaCaT ġew ittrattati għal 2 siegħa b'estratt ta' 0.03 mg/mL f'37Cin 5 % CO2. Sussegwentement, il-midjum tat-trattament tneħħa u 100 μL ta' H2DCF-DA(10ug/mL)ġie miżjud ma' kull bir. Wara 30 min ta' inkubazzjoni f'temperatura ambjentali, is-soluzzjoni H2DCF-DA ġiet sostitwita b'soluzzjoni ta' H2O2 (100 μM) għal 30 min. Sett parallel ta' ċelloli HaCaT ġie ttrattat b'H2O, u estratt ta' 0.03 mg/mL għal 30 minuta.cistanche genghis khanIl-formazzjoni ROS tkejlet f'termini ta' Unitajiet Arbitrarji ta' Fluworexxenza, AUF(eċċitazzjoni f'485 nm u emissjoni f'535 nm), bl-użu tal-qarrej tal-pjanċi b'ħafna saffi VICTORTM X3(PerkinElmer). Id-dejta hija espressa bħala żieda ta' darba fil-formazzjoni ta' ROS kontra ċelloli mhux trattati (jiġifieri, AUF ta' ċelloli ttrattati b'H, O,/AUF ta' ċelloli mhux ittrattati).

Dan l-artikolu huwa estratt mill-Kożmetiċi 2021, 8, 96. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040096 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics