Effetti Neuroendokrini-Immuni Ta' Cistanche Deserticola U l-Prodotti Tagħha tal-Inbid Ross fil-Firien Indotti minn Glukokortikojdi-Ⅰ

1. Introduzzjoni

Cistanche deserticola, li tissejjaħ "ġinseng tad-deżert," hija mediċina tradizzjonali Ċiniża li ilha tintuża għal sekli sħaħ bħala ħaxix yang-toniku għaljsaħħaħ il-kliewi u jsaħħaħ il-yang[1]. Tmien speċi u varjazzjoni waħda ta'Cistanche Herba ġew irreġistrati fiċ-Ċina u bissCistanche deserticolaYC Ma uCistanche tubulosa(Schenk) Wight huma rreġistrati fil-Farmakopea Ċiniża [2]. Studji farmakoloġiċi wrew liCistanches Herbaesibiti newroprotettivi [3], immunomodulatorji [4], kardjoprotettivi [5], kontra l-għeja [6], anti-infjammatorji [7], epatoprotettivi [8], antiossidanti [9], antibatteriċi [10], lassattivi [11], u kontra t-tumur effetti [12]. L-ispettru wiesa 'ta' attivitajiet bijoloġiċi rrappurtati ta 'dan il-ġeneru ġie attribwit għall-kompożizzjoni fitokimika kumplessa u varjata tiegħu.Cistanche deserticolafih phenylethanol glycosides, iridojdi, polysaccharides [13], eċċ. Il-kontenut ta 'phenylethanoid glycosides huwa l-ogħla fil-materjali mediċinali oriġinali [14].

TUBULOSA TA' CISTANCHE NATURALI GĦAT-TĦAĠIT TAL-KLIEI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

L-ipproċessar tal-Materia Medica Ċiniża (CMM) huwa teknika farmaċewtika tradizzjonali biex tissodisfa r-rekwiżiti differenti għat-trattament, l-għoti u t-teħid ta 'preparazzjonijiet skont it-teorija tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Dawk il-prodotti pproċessati jissejħu biċċiet tad-decoction, li jintużaw fil-kliniċi. L-ipproċessar għandu l-għan li jsaħħaħ l-effikaċja biex titnaqqas it-tossiċità tad-drogi mhux raffinati. 2015 Chinese Pharmacopoeia rreġistrat li Cistanche flieli ħoxnin (CD) u ross inbid-steamed Cistanche (WCD) jistgħu jintużaw bħala biċċiet decoction fil-klinika. Il-grupp ta 'riċerka tagħna wera li l-effett lassattiv kien meħlus, u l-effetti ta' kontra t-tixjiħ u yang-kliewi ġew imtejba wara li Cistanche ġie steamed bl-inbid tar-ross [15].

Il-funzjoni tal-assi hypothalamus-pituitary-adrenal glandola-thymus glandola (HPAT) hija diżordinata fis-sindromu tad-defiċjenza tal-kliewi-yang [16]. Pazjenti b'defiċjenza tal-kliewi-yang għandhom ukoll disfunzjoni immuni estensiva. Disfunzjoni tal-assi HPA hija relatata mill-qrib mal-immunodefiċjenza. It-teorija tan-netwerk newroendokrinali-immuni (NEI) turi li s-sistemi immuni u newroendokrini jaqsmu ħafna ligands u riċetturi [17], u l-ipotalamu huwa meqjus bħala l-pern li jgħaqqad in-newroendokrinali mas-sistemi immuni.

F'dan l-istudju, aħna rreplikajna defiċjenza tal-kliewi-yang fil-firien mudell b'injezzjoni ta 'kortikosterojdi eżoġeni u esplorajna l-mekkaniżmu tad-defiċjenza tal-kliewi-yang b'reazzjoni għal prodotti pproċessati differenti ta' Cistanche deserticola mill-perspettiva tal-funzjoni endokrinali-immuni.

2. Materjali u Metodi

2.1. Materjali u Reaġenti

Cistanche deserticola inġabret minn Alashan Neimenggu fl-2019.5 u identifikat bħala z-zkuk imnixxfin imlaħħam ta 'Cistanche deserticola YC Ma mill-Prof. Yanjun Zhai (Skola tal-Farmaċija, Università ta' Liaoning tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, iċ-Ċina). Il-kampjuni tal-vawċers ġew ippreservati fiċ-Ċentru tat-Teknoloġija tal-Inġinerija tal-Ipproċessar ta 'Liaoning.

Komposti standard ta 'ajugol inxtraw minn Chengdu Pure Chem-Standard Co., Ltd. (Chengdu, iċ-Ċina); cistanoside F,echinacoside, cistanoside A, u isoacteosideinxtraw mingħand Must Company (Sichuan China); acteoside inxtara minn Dalian Meilun Bio. Co, Ltd (Dalian, iċ-Ċina). L-aċetonitrile u l-metanol tal-grad MS inxtraw minn Merck KGaA (Darmstadt, il-Ġermanja). L-aċidu formiku ta 'grad HPLC inxtara minn Merck KGaA (Darmstadt, il-Ġermanja). L-inbid tar-ross inxtara minn Zhejiang Brand Tower Shaoxing Wine Co., Ltd. (Zhejiang, iċ-Ċina).

Kortikosterone (CAS: 50-22-6, purità > 98%, TCI Shanghai Development Ltd. Co.), pilloli chinkuei shin chewan (Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd.), far ACTH, CRH, T, IL{{ 2}}, IFN-c, TNF- , IL-2, u IL-10 kits ta' skoperta ELISA inxtraw minn Nanjing Jiancheng Co., Ltd. Il-kit ELISA tal-cortisol tal-firien ġie pprovdut minn BOSK Co., antikorp CD4 far, antikorp CD8a (nri 561833 u 559976), RBC lysate (Solarbio, R1010), soluzzjoni buffer PBS (Solarbio, P1020-500), TRIzol (MAN0001271), CaM, u -actin primers upstream u downstream ġew ipprovduti mill-Guangzhou Invitrogen Co. Reverse Transcription Kit (nru. RR037A) u cDNA Synthesis Kit (nru. 10000068167) ġew ipprovduti minn Bole Life Medicine Products (Shanghai) Co., Ltd. Chloroform, isopropanol, 75% etanol, u urethane soluzzjoni kollha kienu analitikament puri u prodotti minn Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd Ilma ultrapur kien prodott mis-sistema Milli-Q (18.2 MΩ, Millipore, MA, USA).

2.2. Strumenti Sperimentali

Markatur tal-enżimi (Thermo, mudell 3530911931), washer tal-pjanċa awtomatika (mudell HBS- 4009), miter tal-forza tal-push-pull tal-wiri diġitali (mudell VICTOR- 50N), ċentrifuga tal-iffriżar b'veloċità għolja (mudell Sigma 3k15 ), spettrofotometru ultramikro (mudell B-50Q), amplifikatur tal-ġeni (mudell L96G), PCR kwantitattiv ta' fluworexxenza f'ħin reali (mudell StepOne), ċitometru tal-fluss (mudell AC66051710132), mikrotomu tal-paraffin (mudell Laika), mikroskopju (Olympus). , il-mudell BS-53), u strument tal-ilma pur (mudell F7JA36507) intużaw.

2.3. Preparazzjoni ta' Kampjuni għal Esperimenti UPLC-Q-TOF-MS u Farmakoloġiċi

WCD ġie pproċessat mill-istess lott ta 'Cistanche deserticolafil-laboratorju tagħna. Għall-preparazzjoni ta 'WCD, biċċiet CD niexfa (5 mm ħxuna) (100 g) ġew infużi b'inbid tar-ross (30 mL), steamed bi pressjoni għolja (1.25 kPa) għal 4 sigħat, u mbagħad imnixxfa f'55 grad.

It-trabijiet oħxon ta 'CD u WCD kienu mxarrba f'10 darbiet 95% etanol għal 0.5 sigħat, estratti bir-rifluss 3 darbiet kull darba għal siegħa, u ffiltrati, u l-filtrati 3 darbiet ġew magħquda. L-etanol ġie rkuprat taħt pressjoni mnaqqsa, u l-estratt inkiseb għall-amministrazzjoni. L-estratt (1 mL) ġie miżjud ma '50% metanol, u ġab il-volum totali għal 20 mL, u maħżun f'4 gradi għall-analiżi tal-kontenut.

CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.4. Kundizzjonijiet UPLC-QqQ-MS għall-Analiżi ta' Estratti ta' CD u WCD

2.4.1. Kundizzjonijiet Analitiċi LCThMS

Is-sistema UPLC-MSThMS b'softwer MassLynx 4.1 Analyst intużat biex twettaq l-akkwist u l-ipproċessar tad-dejta. Il-kolonna analitika kienet Acquity UPLC BEH C18 (1{{10}}{0 mm × 2.1 mm, 1.7 μm) f'temperatura ta' 40 grad C. Il-fażi mobbli kien 0.1% soluzzjoni milwiema ta 'aċidu formiku (A) u aċetonitrile li fih 0.1% aċidu formiku (B). Il-gradjent ta' elużjoni kien 0.00–1.00 min bi 3% B, 1.01–2.00 min bi 3%–11.5% B, 2.01–3.{{29 }} min bi 12% B, 3.01–4.00 min bi 15% B, 4.01–5.00 min bi 20% B, 5.01–6.00 min bi 22 % B, 6.01–8.00 min b'25% B, u 8.01–9.00 min b'10% B. Ir-rata tal-fluss kienet 0.3 mLTh min, u l-volum tal-injezzjoni kien 1.0 μL.

L-ispettrometru tal-massa quadruple triple Waters (Xevo TQD, Waters Corp., Milford, MA, USA) mgħammar b'sors ta 'jonizzazzjoni elettrospray (ESI) intuża fil-modalità tal-jone negattiv. Il - gass tad - desolvazzjoni kien nitroġenu b'rata ta ' fluss ta ' 500 LTh f'temperatura ta ' 250 grad . Il-komposti kollha misjuba ġew imkejla fil-modalità ta 'monitoraġġ ta' reazzjoni multipla (MRM); It-Tabella 1 turi l-parametri tal-enerġija, u t-Tabella 2 turi l-kurvi tal-kalibrazzjoni għall-komponenti analizzati.

2.4.2. Preparazzjoni ta' Sustanzi ta' Referenza

Tubuloside A (3.02 mg), echinacoside (3.00 mg), 2′-acetylatteoside (2.34 mg), acteoside (2.45 mg), isoacteoside (0.61 mg), cistanoside F ( 2.14 mg), salidroside (3.39 mg), aċidu geniposidic (2.84 mg), ajugol (1.58 mg), u catalpol (2.39 mg) ġew maħlula fil-metanol biex jippreparaw soluzzjoni ta 'ħażna. Is-soluzzjoni tal-istokk ġiet dilwita bil-metanol biex tikseb il-konċentrazzjonijiet xierqa għas-soluzzjonijiet standard tax-xogħol. Is-soluzzjonijiet ippreparati kollha ġew maħżuna f'4 gradi qabel l-użu.

2.5. Preparazzjoni u Raggruppament ta' Mudelli ta' Annimali

Firien maskili SD (180-220 g) inxtraw minn Liaoning Changsheng Biotechnological Co., Numru tal-permess tal-annimali: SCXK (Liao) 2015-0001. Il-firien kollha nżammu b'aċċess ħieles għall-ikel u l-ilma f'25 grad u umdità relattiva ta '30-50%. L-annimali kienu miżmuma għal 7 ijiem qabel l-esperimenti.

Mitt far ġew maqsuma b'mod każwali fi grupp 10: grupp ta 'kontroll vojt (BC), grupp ta' kontroll mudell (MC), grupp ta 'kontroll pożittiv (PC), grupp ta' kontroll tal-inbid tar-ross (WC), CD b'doża għolja (CD -HD), grupp ta’ CD ta’ doża medja (CD-MD), grupp ta’ CD ta’ doża baxxa (CD-LD), grupp ta’ doża għolja ta’ WCD (WCD-HD), grupp ta’ doża tan-nofs ta’ WCD (WCD-MD), u Grupp ta' doża baxxa ta' WCD (WCD-LD). Id-dożi ta’ CD-HDThWCD-HD, CD-MDTh WCD-MD, u CD-LDThWCD-LD kienu 5.48 gTh (kg ∙ d), 2.74 gTh (kg ∙ d), u 1.37 gTh (kg ∙ d), rispettivament. Id-doża għall-grupp PC kienet 1.646 gTh (kg ∙ d), u għall-grupp WC, 1 mLTh100 g għal 40 jum. Fis-6 jum wara l-għoti, il-firien ġew injettati taħt il-ġilda bis-suspensjoni tal-ilma tal-corticosterone (corticosterone + 0.1% dimethyl sulfoxide + 0.1% Tween{-80 + 0.9% sodium chloride) ħlief għall-grupp BC [18]. Il-konċentrazzjoni ta 'corticosterone kienet 5 gThL, u d-doża kienet 0.1 mLTh100 g. Il-firien fil-grupp BC ingħataw salina normali + 0.1% dimethyl sulfoxide + 0.1% Tween{- 80 + 0.9% sodium chloride b'injezzjoni fl-istess doża.

2.6. Determinazzjoni tal-Funzjonijiet tal-Assi HPA

2.6.1. Test tal-Piż, it-Temperatura u l-Qawwa taż-Żamma

Twettaq test tal-piż kull 3 ijiem, u t-temperatura ttieħdet kull 6 ijiem. matul l-esperiment. Fid-39 jum, is-saħħa massima tar-riġlejn ta’ wara kienet imkejla b’miter tal-qabda. Il-firien tpoġġew fuq pjattaformi lixxi, u b'hekk ir-riġlejn ta 'wara tagħhom jaqbdu l-arblu. Il-firien istintwalment jaqbdu kwalunkwe oġġett biex jipprevjenu li jiċċaqilqu lura meta d-denb jinġibed sakemm il-forza tal-ġibda taqbeż il-qabda. Meta l-far tilef il-qabda tiegħu, il-preamplifikatur jista 'jirreġistra awtomatikament il-forza massima tal-qabda.

2.6.2. Determinazzjoni tal-Livell ta 'T, CRH, ACTH, CORT, u Cortisol fis-Serum

Siegħa wara l-aħħar amministrazzjoni, il-firien ġew anestetizzati b'injezzjoni intraperitoneali ta 'soluzzjoni ta' uretan (20 gTh100 mL). Imbagħad, il-kampjuni tad-demm inġabru, ġew ċentrifugati f'3500 r għal 15-il minuta biex jiksbu s-serum, u maħżuna f'-20 grad. Il-konċentrazzjonijiet ta 'T, CRH, ACTH, CORT, u cortisol ġew imkejla b'kits ELISA tal-firien skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

2.6.3. Osservazzjonijiet tal-Mikroskopju

L-istruttura morfoloġika tat-tessut tal-glandola adrenali kienet osservata bit-tbajja 'HE. Tessut adrenali ġie ffissat f'10% paraformaldehyde, deidratat fl-etanol, magħmul trasparenti b'soluzzjoni ta 'xylene, inkorporat b'metodi konvenzjonali, maqtugħ għal flieli ħoxnin ta' 4 μm, dewaxed b'soluzzjoni ta 'xylene, idratat bil-gradjent ta' etanol, u mbagħad imtebba b'ematossilin u eosin soluzzjoni tat-tebgħa. Wara li saret trasparenti bil-xylene, il-pjanċa ġiet issiġillata b'gomma newtrali u osservata taħt mikroskopju.

2.6.4. Tbajja immunoistokimika tal-espressjoni tal-proteini Bax, Bcl-2, Caspase{-3, Fas, u FasL fil-glandola adrenali

Sezzjonijiet adrenali tal-far iffissati bil-formalina u inkorporati fil-paraffin ġew deparaffinizzati u idratati mill-ġdid wara li nqatgħu bi ħxuna ta '4 μm. Għall-imblukkar tal-attività tal-perossidasi endoġena, is-sezzjonijiet ġew preinkubati fi blokk tal-perossidu tal-idroġenu għal 10 min. Is-sezzjonijiet ġew mgħaddsa f'0.01 M ċitrat (pH 6.0) u msaħħna sa jagħli. Il-proċess ġie ripetut wara 5-10 min. Wara t-tkessiħ, is-sezzjonijiet ġew maħsula b'PBS (pH 7.2-7.6) 1-2 darbiet, ħallew f'temperatura tal-kamra għal madwar 5 min, u maħsula b'PBS (pH 7.2-7.6) 2-3 darbiet. Is-soluzzjoni ta 'l-imblukkar ta' 5% BSA ġiet miżjuda f'temperatura tal-kamra, u l-likwidu żejjed fuq is-sezzjoni tħawwad 20 min wara. Antikorpi primarji dilwiti speċifiċi għal FasTh FasL, Bcl-2ThBax, u caspase{-3 (1:100 dilwit b'PBS) ġew miżjuda u inkubati f'37 grad għal siegħa jew 4 gradi matul il-lejl. Is-sezzjonijiet ġew maħsula 2-3 darbiet b'PBS (pH 7.2-7.6). Imbagħad, ġie miżjud mogħoż bijotinilat kontra l-ġurdien IgG, u t-taqsimiet ġew imnixxfa fi 20-37 grad għal 20 min u maħsula b'PBS (pH 7.2-7.6) 4 darbiet għal 5 min. Wara ħasil bir-reqqa fil-PBS, is-sezzjonijiet ġew inkubati b'taħlita ta 'reaġenti A u B għal 30 min, inkubati b'PBS għal 45 min, u finalment żviluppati b'substrat DAB (DAKO) għal 30 min qabel ma ġew kemmxejn counterstained b'ematossilin, deidratat, u mmuntati.

CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAS-SENSAZZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.7. Determinazzjoni ta' Funzjonijiet Immuni

2.7.1. Kalkolu ta' l-Indiċi ta' l-Organi Immuni

Siegħa wara l-aħħar amministrazzjoni, il-firien ġew anestetizzati b'injezzjoni intraperitoneali ta 'soluzzjoni ta' urethane (20 gTh100 mL), u mbagħad il-milsa u l-glandola tat-timu tneħħew u jintiżnu immedjatament f'barnuża sterili. Il-koeffiċjenti tal-piż tal-milsa jew tat-timu (%) � piż tal-milsa jew tat-timu (mg) Piż tal-ġisem (g).

2.7.2. Sejbien ta' Sottogruppi ta' Limfoċiti T fid-Demm Periferali

L-isplenoċiti u l-emoċiti ġew inkubati bl-antikorpi monoklonali anti-CD4 (PE) u anti-CD8 (FITC) għal 30 min fid-dlam. Ġew miżjuda 2 mL ta 'lysate eritroċiti, u s-soluzzjoni tħallat permezz ta' vortex. Is-soluzzjoni tħalla fid-dlam għal 10 min u ċentrifugata għal 5 min. Is-supernatant ġie mormi, u mbagħad is-soluzzjoni ġiet maħsula 3 darbiet b'PBS kiesaħ bis-silġ u sospiża mill-ġdid f'soluzzjoni permeabilizzanti tal-PBS. Mill-inqas 10,000 ċelluli ġew analizzati permezz ta' ċitometrija tal-fluss fi żmien siegħa minn kull tebgħa Mab.

2.7.3. Determinazzjoni tal-Livell ta' IL-10, IL-6, IL-2, TNF- , u IFN-c fis-Serum

Siegħa wara l-aħħar amministrazzjoni, il-firien ġew anestetizzati b'injezzjoni intraperitoneali ta 'soluzzjoni ta' uretan (20 gTh100 mL), u ttieħed demm mill-aorta addominali. Id-demm ġie ċentrifugat f'3500 r għal 15-il minuta biex jikseb is-serum u maħżun f'-20 grad. Il-konċentrazzjonijiet ta' IL-10, IL-6, IL-2, TNF- , u IFN-c ġew skoperti b'kits ELISA tal-firien skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

2.8. Espressjoni ta 'CaM fit-Tessuti Hypothalamus u Hypophysis

L-RNA totali ġie estratt mit-tessuti tal-ipotalamu u tal-ipofiżi permezz ta 'TRIzol. It-traskrizzjoni inversa twettqet fuq 10 μL ta 'RNA totali skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Ammonti ugwali ta’ cDNA ġew analizzati permezz ta’ qPCR fil-preżenza ta’ żebgħa li torbot id-dsDNA (Promega, USA) u s-Sistema CFX 96 Real-time PCR (Bio-Rad, USA) biex tħares lejn il-ġeni differenti taħt il-kundizzjonijiet tal-attivazzjoni inizjali f’ 95 grad għal 10 min, 40 ċiklu ta 'denaturazzjoni f'95 grad għal 15 s, u estensjoni ta' ittemprar f'60 grad għal 1 min.

Primers għal CaM u -actin huma mogħtija fit-Tabella 1, u -actin intuża bħala kontroll intern. Kull kampjun kien normalizzat bl-użu tad-differenza fil-limiti kritiċi (Ct) bejn il-ġene fil-mira u -actin. L-ekwazzjoni li ġejja ntużat biex tiddeskrivi r-riżultat: ΔΔCt � (ġene fil-mira Ct − ġene Ct -actin) grupp sperimentali − (ġene mira Ct − ġene Ct -actin) grupp ta 'kontroll. Il-livelli ta' mRNA ta' kull kampjun imbagħad tqabblu, bl-użu tal-ġene fil-mira tal-espressjoni 2- ΔΔCt. Ir-riżultati ta' kull grupp ġew medjati (Tabella 3).

2.9. Analiżi Statistika

Id-dejta kollha ġiet analizzata bl-użu ta' softwer SPSS (verżjoni 19.0, SPSS Institute Inc., Chicago, IL). Id-differenzi bejn il-gruppi ġew analizzati b'analiżi tal-varjanza b'miżuri ripetuti f'direzzjoni waħda (ANOVA). Ir-riżultati ġew espressi bħala medja ± devjazzjoni standard (SD) bl-użu tas-softwer GraphPad Prism (verżjoni 6.0, San Diego, CA, USA). Differenzi b'valur P inqas minn 0.05 tqiesu statistikament sinifikanti.

3. Riżultati Sperimentali

3.1. UPLC-QqQ-MSAnaliżi

Biex tinkiseb l-aħjar separazzjoni, forma tal-quċċata, u żmien qasir ta 'analiżi, il-kundizzjonijiet kromatografiċi inklużi l-kolonna, il-fażi mobbli u l-programm tal-gradjent ġew studjati fl-esperiment preliminari tagħna. Il-kromatogrammi tipiċi bil-mod MRM huma ppreżentati fil-Figura 1.

Mit-Tabella 4, nistgħu naraw li l-kontenuti ta 'phenylethanoid glycosides f'WCD żdiedu meta mqabbla ma' dawk ta 'CD, speċjalment għal echinacoside u acteoside, filwaqt li l-kontenut ta' iridojdi naqas f'WCD.

3.2. Regolament għall-Funzjoni tal-Assi HPA

3.2.1. Test tal-Piż, it-Temperatura u l-Qawwa taż-Żamma

Il-firien tal-grupp MC u l-gruppi sperimentali wrew sintomi ta 'defiċjenza tal-kliewi-yang gradwalment wara li ngħataw kortikosterone. Is-sintomi, bħal telf ta 'piż, ipotermja, telf ta' tleqqija tax-xagħar, spirtu imdendel, dewmien fir-rispons, u tnaqqis sinifikanti fil-konsum u l-attività tal-ilma, tjiebu ħafna fil-gruppi CD u WCD. Figura 2(a) turi l-bidliet fil-piż. Il-piż ta 'kull wieħed mill-gruppi tad-droga żdied, speċjalment fil-gruppi CDHD u WCD-HD. Iż-żieda fil-piż fil-grupp MC kienet l-aktar baxxa. Figura 2(b) turi l-bidliet fit-temperatura, li kienu l-aktar baxxi fil-grupp MC, u t-temperatura żdiedet fil-gruppi WCD-HD, WCD-MD, u WCD-LD.

Il-Figura 2(c) turi li l-qawwa taż-żamma żdiedet għall-grupp BC u kull wieħed mill-gruppi sperimentali, u l-grupp WCD-MD kien l-ogħla, li wera li sinjali ta 'dgħjufija indotta minn defiċjenza tal-kliewi-yang tjiebu wara l-amministrazzjoni.

3.2.2. Livelli ta 'T, CRH, ACTH, CORT, u Cortisol

Figura 3 turi li meta mqabbel ma’ dawk tal-grupp BC, il-livell ta’ T, CRH, ACTH, u CORT fis-serum tal-firien naqas (P <0.01) u l-livell ta’ kortisol naqas (P < 0.05) fil-grupp MC. Meta mqabbel ma’ dawk tal-grupp MC, il-livell ta’ T fil-gruppi WCD-HD u WCD-MD żdied (P <0.01), il-livell ta’ CRH fid-WCD-LD, Il-gruppi WCD-MD, u WC tjiebu (P <0.01), il-kontenut ta' ACTH żdied fil-gruppi CD-HD, WCD-MD, u WCD-HD (P < 0.01), il-livell CORT imtejjeb fil- Gruppi CD-MD, WCD-MD, u WCD-HD (P <0.01) u mtejba fil-gruppi CDHD u WCD-LD (P <0.05), u l-livell ta 'cortisol żdied f'kull wieħed mill-gruppi tad-droga.

3.2.3. Riżultati ta' Osservazzjoni tal-Mikroskopju

It-tessut tal-glandola adrenali jista 'jinqasam fis-saff kortikali u s-saff tal-medulla. Is-saffi kortikali jinkludu saffi globulari, mazz, u reticular. Iċ-ċelloli fihom aktar lipidi, u s-saff tal-medulla jikkonsisti l-aktar minn ċelluli pheochromocytoma u ammont żgħir ta 'tessut fibruż. Kif muri fil-Figura 4, sibna li kollox kien normali fil-grupp BC, filwaqt li fil-grupp MC, il-kortiċi adrenali kellha iperplażja ovvja, atrofija ċellulari, u densità dejjem tiżdied. L-istrixxa tal-bozza ħxuna, u ż-żona fascikulari trasluċida, zona reticularis dejqa, u ċelloli iżgħar urew kulur irregolari u konġestjoni kapillari. Fil-grupp PC, il-konfini kortikali u medulari kienu viżibbli. Iċ-ċelloli tal-meded globulari u tal-qatta ġew irranġati b'mod ugwali, u l-istruttura morfoloġika kienet ġiet restawrata. L-istess restawr aħjar kien osservat fil-gruppi WCD, u l-effetti fil-grupp WCD-MD kienu aħjar minn dawk tal-gruppi WCD-HD u WCD-LD. Il-morfoloġija tal-glandola adrenali fil-gruppi CD ma kinitx tajba daqs dik fil-gruppi WCD.

CISTANCHE TUBULOSA NATURALI GĦAT-TITJIB TAL-FUNZJONI SESSWALI PHGS75% ECH 30% ACT 12%