Myricetin Ittejjeb l-Apoptosi U l-Infjammazzjoni tal-HUVECs Indotti LDL Ox Via LncRNA GAS5 Li Jirregola l-Espressjoni Ta 'MiR 29a 3p

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

L-aterosklerożi (AS) hija kawża sinifikanti ta 'morbidità u mortalità fost mard kardjovaskulari, li inizjalment hija attivata minn disfunzjoni endoteljali u kkaratterizzata minn influss ta' komponenti ta 'lipoproteini ateroġeniċi. Huwa l-fattur potenzjali ewlieni tal-biċċa l-kbira tal-mard fatali, bħal infart mijokardijaku, anġina instabbli, mewt kardijaka f'daqqa, u puplesija. Għalkemm l-etjoloġija hija involuta, it-teorija tar-rispons għall-ħsara li l-ħsara taċ-ċelluli endoteljali vaskulari (EC) hija l-mekkaniżmu tal-bidu ta 'AS għadha adottata b'mod wiesa'3,4.Ossidattivlipoproteina ta 'densità baxxa (ox-LDL) intweriet li hija involuta fil-formazzjoni ta' aterosklerożi, u l-ħsara endoteljali vaskulari indotta tagħha hija waħda mill-patoġenesi bikrija ta 'aterosklerożi. S'issa, il-kontroll tal-iżvilupp tal-AS jibqa' sfida ewlenija minħabba li l-mekkaniżmi molekulari tal-AS mhumiex mifhuma bis-sħiħ. Għalhekk, it-tnaqqis tal-ħsara tal-KE kkaġunata mill-ox-LDL u l-ispjegazzjoni ulterjuri tal-mekkaniżmu tagħha jistgħu jkunu strateġija potenzjali għall-prevenzjoni u t-trattament tal-AS. Myricetin (Myr) huwa flavonoid naturali komuni li jinsab f'ħafna frott, ħxejjex u ħxejjex aromatiċi. Myr għandu rwol sostanzjali fit-trattament u l-prevenzjoni ta’ xi mard, inkluż l-osteoporożi dijabetika, il-karċinoma epatoċellulari8, il-fwied alkoħoliku³,u l-kanċer tal-ġilda9,minħabba l-kapaċità qawwija tagħha ta 'kelating tal-ħadid,antiossidant, u attivitajiet ta' tneħħija ta' radikali ħielsa. Riċentement, il-kardjoprotettivir-rwol ta 'Myr ġibed l-attenzjoni mill-komunità tar-riċerka. Myr wera effett protettiv fuq lipopolysaccharide(LPS) indottmijokardijaku infjammatorjukorriment, kardijakuipertrofija, u iskemija/riperfużjoni(I/R)-inġurja mijokardijaka3. Madankollu, l-effett ta 'Myr fuq il-metaboliżmu tal-lipidi u l-aterosklerożi mhuwiex mifhum bis-sħiħ.

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

materjali u metodi

Kultura taċ-ċelluli, mudell ta 'ħsara kkaġunata mill-ox-LDL, u proliferazzjoni.

Ċelloli Endoteljali tal-Vina Umbilikali tal-Bniedem (HUVECs) mill-Bank taċ-Ċelloli tal-Akkademja tax-Xjenzi Ċiniża (Shanghai, iċ-Ċina) ġew ikkultivati ​​f'DMEM supplimentat b'10 fil-mija FBS taħtnormossikukundizzjonijiet f'37 grad. L-HUVECs ġew ittrattati b'konċentrazzjonijiet differenti（50,100,200 ug/ml）tal-ox-LDL（Unjoni-Bio Teknoloġija,Iċ-Ċina）u nġabru fl-24 siegħa għal aktar kejl. Skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur, ir-rati ta 'proliferazzjoni taċ-ċelloli tkejlu b'assaġġ CCK8 (Solarbio, iċ-Ċina).

Cistanche jista 'jtejjeb l-immunità

Analiżi taċ-ċitometrija tal-fluss ta 'apoptosi b'tebgħa doppja ta' PI u annexin V.

L-apoptosi taċ-ċelluli ġiet evalwata permezz ta 'ċitometrija tal-fluss bl-użu ta' kit ta 'assaġġ ta' apoptożi ta 'tebgħa doppja ta' PI u annexin V (Solarbio, China) wara l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

Kejl ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS). L-ROS intraċellulari ġie ddeterminat bl-użu tal-Kit tal-Assaġġi ROS（Beyotime,Iċ-Ċina）. Fil-qosor,ċelluli ġew inkubati b'10 μM DCHF-DA għal 20 min, u mbagħad l-intensità tal-fluworexxenza ġiet evalwata taħt microplate reader.

Assaġġ tal-immunopreċipitazzjoni (RIP) tal-RNA.

L-RIP twettaq bl-użu ta' Magna RIP Kit (Millipore, USA) skont il-protokoll tal-manifattur18. Fil-qosor, iċ-ċelloli HUVEC inġabru u ġew lisati f'buffer tal-liżi RIP komplut. L-estratt tal-proteina taċ-ċellula sħiħa ġie mbagħad inkubat b'buffer RIP li fih żibeġ manjetiċi konjugati ma 'antikorp uman anti-AGO2 jew IgG normali tal-ġurdien ta' kontroll negattiv. L-RNA rkuprat imbagħad ġie skopert bil-qRT-PCR.

Assaġġ tal-RNA Fluorescent in Situ Hybridization (FISH). Sondi speċifiċi għas-sekwenza GAS5 u miR-29a-3p ġew iddisinjati u sintetizzati minn RiboBio.Kit FISH (RiboBio) intuża biex jiskopri sinjali tas-sonda skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. In-nuklei kienu mtebbgħin b'DAPI.

Assaġġ reporter doppju-luciferase. Intuża l-assaġġ ta' reporter dual-luciferase biex jinstab l-interazzjoni bejn GAS5 u r-reġjun promotur miR-29a-3p.

Is-sekwenzi tat-tip selvaġġ u tal-mutazzjoni tas-siti ta 'rbit (WT-GAS5 u MUT-GAS5) ġew iddisinjati u sintetizzati. Iċ-ċelluli HUVEC ġew trasfettati flimkien ma' vettur WT(Mut)GAS5 u miR-NC jew miR-29a-3p bl-użu ta' Lipofectamine 2000 Transfection Reagent(Invitrogen). Wara 48 siegħa ta 'trasfezzjoni, intużat sistema ta' analiżi ta 'reporter Dual-Luciferase (Promega) biex twettaq l-assaġġ ta' luciferase.

Determinazzjoni ta' VCAM-1, IL-6, u MCP-1.

Il-livelli ta' proteina supernatant ta' kimo-attrazzjoni ta' monoċiti-1(MCP-1), interleukin-6 (IL{-6), u molekula ta' adeżjoni taċ-ċelluli vaskulari 1 (VCAM{{6} })kienu determinati minn kits ELISA.IL-6 ELISA Kit (ab178013), MCP-1 kit ELISA (ab179886),u VCAM-1 kit ELISA (ab223591)intużaw skont il-manifattur istruzzjonijiet.

Real-Time Kwantifikat PCR(gRT-PCR).

L-RNA totali ġie iżolat bl-użu ta 'reaġent Trizol (Takara Bio Inc., Ġappun）skond il-protokoll tal-manifattur. Is-cDNA ġie ġġenerat mill-RNA totali（2 ug）b'cDNA Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems, USA), u PCR f'ħin reali bbażata fuq SYBR twettqet biex tiskopri t-traskrizzjonijiet totali tal-mRNA fuq sistema ta 'PCR rapida f'ħin reali Applied Biosystems(ABI) 7300. Is-sekwenzi tal-primer kienu elenkati hawn taħt.

Assaġġ Western blot.

L-espressjoni tal-proteina ta 'Bax, Bcl-2, caspase3, CD31, SM22a, p-p65, p65, p-IkBa, IkBa u TLR4, ġiet imkejla permezz ta' Western blotting. Kampjuni ta' proteini iżolati miċ-ċelloli HUVEC (25 ug)) ġew solvuti bl-użu ta' SDS-PAGE u mbagħad tmexxew għal membrana tal-polyvinylidene fluoride (PVDF) (Millipore, USA) billi ġew ittestjati b'GAPDH (#2118,1:5000, Cell Signaling), Bax (#2772S,1:1000, Sinjali taċ-Ċelloli), Bcl-2 (#15071S,1:1000, Sinjalazzjoni taċ-Ċelloli),caspase3(#9662S,1:1000, Sinjalazzjoni taċ-Ċelluli), CD31 (ab9498,1:1000 , Abcam), SM22a (ab14106,1:1000,Abcam),p-p65 (10745-1-AP 1:1000, Proteintech), p65 (66535-1-Ig,1:1000,Protein-tech), p-IkBa(10268-1-AP,1:1000, Proteintech),IkBa({66418-1-Ig,1:1000, Proteintech) u TLR4({66350-1-Ig, 1:1000, Proteintech) antikorp segwit minn antikorp sekondarju xieraq. Il-blots kollha tal-Punent ġew ripetuti mill-inqas tliet darbiet. Fl-aħħarnett, l-espressjoni tal-proteina ġiet viżwalizzata b'sistema msaħħa ta 'chemiluminescence(ECL).

Assaġġ ta' immunofluworexxenza.

Ċelloli mkabbra fuq slides ġew iffissati, permeabilizzati, imblukkati, u immunostained matul il-lejl b'antikorpi ta 'CD31 (ab9498, 1:200, Abcam) u SM22a (ab14106,1:200, Abcam). Wara l-ħasil, it-tieni antikorpi speċifiċi tat-tikketta FITC IgG ġew inkubati b'ċelloli kontinwament. Fl-aħħarnett, l-immaġini nkisbu taħt mikroskopju (Olympus, Ġappun) b'ingrandiment xieraq.

Analiżi statistika.Ir-riżultati kollha jintwerew bħala l-mezzi±żball standard tal-medja (SEM). Riżultati statistikament sinifikanti ġew determinati bl-użu ta 'ANOVA one-way, segwit mit-test Student-Newman-Keuls(SNK)q. Valur p<0.05 was="" considered="" to="" be="">

Riżultati

Myricetin jnaqqas l-apoptożi u ROS indotta mill-ox-LDL f'HUVECs.

L-ewwelnett, inkubazzjoni ta '100 ug/ml ox-LDL għal 24 siegħa wasslet għal tnaqqis sinifikanti dipendenti fuq id-doża fil-vijabbiltà taċ-ċelluli. Pretrattament b'l uM Myr għal 2 sigħat ma kellu l-ebda influwenza sinifikanti fuq il-vijabbiltà taċ-ċelluli. Madankollu,2.5 u 5 μM Myr ikkawżaw tnaqqis sinifikanti fil-vijabbiltà taċ-ċelluli (Fig. 1A u B). Barra minn hekk, aħna ndunat li t-titjib ta 'ROS indott minn ox-LDL fl-HUVECs kien imnaqqas minn Myr (Fig. 1C). Aħna eżaminajna wkoll l-effett ta 'Myr fuq l-apoptożi. Barra minn hekk, iċ-ċitometrija tal-fluss u r-riżultat tal-proteini relatati mal-apoptożi wrew ukoll li l-apoptożi HUVEC indotta minn ox-LDL ta '100 ug/ml kienet ċelluli pretrattati b'MYR maqluba b'mod drammatiku li jiddependu mid-doża (Fig. 1D u E).

Myricetin jinibixxi r-rispons infjammatorju u EndMT f'ċelluli HUVEC indotti minn ox-LDL. It-tbajja 'l-immunofluworexxenza wriet li l-inkubazzjoni ta' HUVECs b'ox-LDL naqqset l-espressjoni tal-markatur endoteljali CD31, u żiedet l-espressjoni tal-markatur mesenkimali SM22a, li jindika li l-kundizzjoni ox-LDL tqanqal EndMT. Iżda dawn l-effetti huma mitigati mill-MYR. B'mod konsistenti, western blot wera li Myr attenwat il-livell ta 'proteina SM22a upregulated f'HUVECs indotti minn ox-LDL (Fig, 2A u B). Fil-preżenza ta' ox-LDL, il-livelli mRNA ta 'IL-6, MCP{{ 11}}, VCAM-1 kienu ovvjament upregulated fl-HUVECs, filwaqt li t-trattament Myr biddel dawn il-bidliet aberranti (Fig.2C). Bl-istess mod, riżultati simili ġew ikkonfermati aktar minn ELISA (Fig. 2D).

L-espressjoni żejda tal-GAS5 ttaffi l-effetti protettivi tal-myricetin kontra HUVEC iniur medjat minn ox-LDL.

Aħna skoprejna aktar l-espressjoni ta 'GAS5 f'HUVECs b'gRT-PCR. Kif muri f'Fig.3A, livell ogħla b'mod sinifikanti ta 'GAS5 kien osservat fil-grupp ox-LDL milli fil-kontroll. B'kuntrast, il-livell ta 'mRNA ta' GAS5 tnaqqas fil-grupp ittrattat b'Myr b'mod dipendenti fuq id-doża. Din id-dejta indikat li GAS5 jista' jinvolvi fl-effett ta' Myr fuq iċ-ċelloli endoteljali. Biex nifhmu l-mekkaniżmi li bihom GAS5 jista 'jinvolvi fl-effett protettiv ta' Myr, użajna pcDNA-GAS5 biex jesprimu żżejjed l-espressjoni ta 'GAS5 f'HUVECs. L-espressjoni ta 'GAS5 ġiet imsaħħa minn pcDNA-GAS5, li inizjalment naqset minn Myr f'HUVECs indotti minn ox-LDL (Fig. 3B). Aktar esperimenti wrew li l-vijabbiltà taċ-ċelloli HUVEC b'espressjoni żejda GAS5 naqset b'mod sinifikanti, u l-apoptosi kienet elevata b'mod notevoli taħt it-trattament ta 'Myr (Fig.3C u D). Barra minn hekk, espressjoni eċċessiva ta 'GAS5 f'HUVECs ittrattati b'ox-LDL uriet kontenut ogħla ta' ROS meta mqabbla ma 'kontroll imqabbel (Fig. 3E). Din id-dejta tissuġġerixxi li r-regolazzjoni 'l fuq tal-espressjoni ta' GAS5 attenwa l-effetti protettivi ta 'Myr kontra l-ħsara HUVEC medjata minn ox-LDL.

miR-29a-3p hija mira ta' GAS5 f'HUVEC.

Il-mira GAS5 ġiet identifikata permezz RegRNA 2. 0 u star-Base, ir-riżultati tat-tfittxija ġew murija fil-Fig. 4A. Fost dawn il-miRNAs, miR-29a-3p kien l-aktar tnaqqis sinifikanti fil-ħsara HUVEC medjata minn ox-LDL (Fig. 4B). Saru analiżi tal-bijoinformatika biex ibassru r-reġjuni li jorbtu bejn GAS5 u miR-29a-3p (Fig.4C). Biex tiġi vvalidata din il-previżjoni tal-bijoinformatika, l-analiżi tal-ġene reporter dual-luciferase indikaw li GAS5-WIpreżenta attività tal-luċiferażi aktar baxxa mill-grupp MUT korrispondenti, li kkonferma r-relazzjoni ta' rbit ta' GAS5 u miR-29a-3p (Fig. 4D). Sadanittant, il-livell ta 'GAS5 arrikkit minn Ago2 RIP kien ogħla fiċ-ċelloli trasfettati b'miR-29a-3p minn dak fil-grupp miR-NC (Fig.4E). Sadanittant, l-analiżi FISH f'HUVECcells wriet li GAS5 kien ko-lokalizzat ma' miR-29a-3p prinċipalment fin-nukleu (Fig. 4F). Dawn is-sejbiet issuġġerew li GAS5 immirat lejn miR-29a-3p.

Il-miR-29a-3p jimitaw l-effetti ta' GAS5 f'HUVEC indott minn ox-LDL ittrattat b'Myricetin.

Kif muri f'Fig. 5A, l-espressjoni ta' miR-29a-3p żdiedet b'mod sinifikanti fl-ox-LDL flimkien ma' Myr flimkien ma' pcDNA-GAS5 flimkien ma' miR-29a-3 p jimita grupp meta mqabbel mal-ox-LDL flimkien ma 'Myr flimkien ma' pcDNA-GAS5 flimkien ma 'grupp ta' kontroll jimitaw (Fig. 5A). Barra minn hekk, GAS5 upregulated żied b'mod sinifikanti l-vijabbiltà ta 'HUVECs indotti ox-LDL ittrattati minn Myr, filwaqt li l-kotransfection pcDNA-GAS5andmiR-29a-3p jimita f'HUVECs aboliti dawn l-effetti (Fig.5B). Barra minn hekk, il-produzzjoni ta 'ROS u l-apoptosi fl-ox-LDL indotti HUVECs ittrattati minn Myr wara espressjoni żejda ta' GAS5, filwaqt li miR-29a-3p jimitaw innewtralizzaw dawn l-effetti (Fig.5C u D).

sh-GAS5 jew miR-29a-3p jimitaw jistgħu jaċċelleraw ir-rwol protettiv ta 'Myricetin fiċ-ċelluli HUVECs indotti minn ox-LDL.

Biex tesplora jekk GAS5 u miR-29a-3p kinux involuti f'mekkaniżmu regolatorju medjat minn Myr, HUVECs ġew trasfettati b'NC, sh-GAS5 jimita l-kontroll, miR-29a{{7} }p jimita. L-espressjoni ta 'GAS5 naqset b'mod sinifikanti fil-grupp sh-GAS5 meta mqabbel mal-grupp NC (Fig.6A). Wara t-trasfezzjoni, ox-LDL flimkien ma' Myr żiedu l-vijabbiltà meta mqabbla mal-grupp ox-LDL, u l-inibizzjoni ta' GAS5 jew miR-29a{-3p regolata 'l fuq żiedet il-vijabbiltà ta' HUVECs indotti minn ox-LDL ittrattati minn Myr(Fig.6B). Barra minn hekk, l-apoptosi taċ-ċelluli mrażżna Myr ikkawżata minn ox-LDL, li sussegwentement ġiet mibdula minn sh-GAS5 u miR-29a-3p jimitaw (Fig.6C). Barra minn hekk, il-livell ta 'proteina ta' CD31 u SM22a żdied

Myricetin inattivat il-mogħdija tas-sinjalar TLR4/NF-KB f'HUVEC trattat b'ox-LDL billi rregola GAS5 'l isfel jew irregola 'l fuq ta' miR-29a-3p. Il-mogħdija tas-sinjalar TLR4/NF-KB hija involuta mill-qrib fil-proċess tal-AS. Sabiex tesplora jekk Myr irażżanx il-mogħdija tas-sinjalar TLR4/NF-B, it-TLR4, u bosta proteini downstream pivotali, eż., p-p65, p65, p-IkBa, IkBa, u TLR4, ġew identifikati fiċ-ċelloli HUVEC permezz tal-western blot analiżi. Figura 6 turi li Myr irregola l-espressjoni ta 'p-p65, p-IkBa, u TLR4 meta mqabbla mal-grupp ox-LDL, filwaqt li l-livell ta' proteina ta 'p-p65,p-IkBa. u TLR4 naqsu f'ox-LDL flimkien ma' Myr flimkien ma' sh-GAS5 u ox-LDL flimkien ma' Myr flimkien ma' miR-29a-3p jimitaw gruppi meta mqabbla mal-grupp ox-LDL flimkien ma' Myr (Fig.7) . Meħuda flimkien, dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li l-passaġġ GAS5/miR-29a-3p/TLR4/NF-KB jista' jkun wieħed mill-mekkaniżmi sottostanti li permezz tiegħu Myr naqqas iċ-ċelluli HUVEC infjammatorji u EndMT. Diskussjoni

AS hija kundizzjoni infjammatorja persistenti li tinbeda mid-depożizzjoni kif ukoll mill-akkumulazzjoni ta 'lipoproteini ta' densità baxxa fil-ħajt tal-arterja19. Minkejja avvanzi tremendi kemm fl-istudju bażiku kif ukoll xjentifiku, għadu fost ir-raġunijiet ewlenin għall-mewt fid-dinja2. F'dan l-istudju, esplorajna l-mekkaniżmu molekulari ta 'Myr fuq ħsara indotta mill-ox-LDL ta' HUVECs, u żvela r-rwol kruċjali ta 'lncRNA GAS5 f'dan l-avveniment. Ir-riżultati tagħna ssuġġerew li Myr jirregola l-vijabbiltà taċ-ċelluli HUVECs, ROS, apoptożi, infjammazzjoni, u EndMT permezz tal-mogħdija GAS5/miR-29a-3p/TLR4/NF-KB, li tiċċara mekkaniżmu ġdid ta’ Myr fuq protezzjoni kontra AS.

Ox-LDL intwera li jinduċi ġenerazzjoni mtejba ta 'ROS, li għandha rwol kritiku fil-progressjoni ta' AS. Evidenza sostanzjali tissuġġerixxi li l-istress ossidattiv miżjud għandu rwol prominenti fil-patoġenesi ta 'disfunzjoni endoteljali vaskulari flimkien ma' EndMT taċ-ċelluli endoteljali, infjammazzjoni u apoptożi. Aħna użajna HUVECs stimulati b'ox-LDL biex jissimulaw l-okkorrenza ta 'aterosklerożi bikrija, u r-rispons infjammatorju u EndMT ta' HUVECs żdiedu, u Myr inibixxa b'mod sinifikanti r-rispons infjammatorju u EndMT għal HUVECs stimulati b'ox-LDL. Myr huwa magħruf li jeżerċita effetti ċitoprotettivi antiossidanti f'diversi ċelloli, inkluż linja taċ-ċelluli HUVEC21. Studju preċedenti sab li Myr wera effetti pro-proliferattivi u anti-apoptotiċi fil-ħsara taċ-ċelluli kardjomijoċiti H9c2 indotti minn LPS2. F'dan l-istudju ta 'riċerka, aħna ċċekkjaw ir-riżultat ta' Myr fuq il-verżjoni taċ-ċelluli aterosklerotiċi indotti mill-ox-LDL. Ir-riżultati tagħna ssuġġerew li t-trattament minn qabel ta '5 μM Myr jista' jdawwar b'mod konsiderevoli t-tnaqqis indott mill-ox-LDL tal-vijabbiltà taċ-ċelluli f'HUVECs. Ir-riżultati tagħna wrew li t-terapija ox-LDL tista’ tirreklama l-infjammazzjoni u l-EndMT ta’ HUVECs permezz tar-regolazzjoni ta’ CD31, SM22a, u ċitokini infjammatorji (IL-6, MCP-1, VCAM-1), li jista' jitreġġa' lura permezz ta' trattament minn qabel Myr. Diversi elementi stabbilixxew li l-infjammazzjoni u l-EndMT jakkumpanjaw l-aterosklerożi23. Studju preċedenti sab li l-inibizzjoni tal-espressjoni ta' VCAM-1 u ICAM-1 ġiet rikonoxxuta bħala strateġija essenzjali kontra l-aterosklerożi24. Barra minn hekk, il-vaċċin irażżan EndMT endoteljali indott mill-ox-LDL permezz ta 'markatur endoteljali CD31 li jirregola 'l isfel u markatur mesenkimali SM22a25 li jirregola 'l fuq. Is-sejbiet tagħna huma fi qbil sostanzjali ma 'dawn ir-riċerki.

L-espressjoni ta' GAS5 kienet espressa ħafna kemm fil-mudelli tal-bniedem kif ukoll tal-annimali26,27.F'dan l-istudju, sibna li GAS5 kien regolat 'il fuq u miR-29a-3p kien regolat 'l isfel fil-ħsara HUVEC indotta minn ox-LDL . It-trattament Myr jista’ jreġġa’ lura dawn l-effetti. Studju preċedenti wera li Mvr inibixxi l-espressjonijiet HMGB1, TLR4, u MyD88 fin-newroni, u rrestawra l-ħsara u l-infjammazzjoni newronali kkawżati mill-attivazzjoni tal-mogħdijiet tas-sinjali NF-KB u MAPK * 8.F'dan l-istudju, ir-regolazzjoni 'l fuq ta' lncRNA GAS5 u r-regolazzjoni 'l isfel ta' miR-29a-3p wasslet għal tnaqqis fl-apoptosi taċ-ċelluli, infjammazzjoni, u EndMT, kif ukoll tnaqqis fl-attività tal-mogħdija tas-sinjalar TLR4/NF-KB. Skont is-sejbiet tagħna, Myr inaqqas p-p65, p-IkBa, u TLR4 f'HUVECs billi jirregola GAS5/miR-29a-3p li jnaqqas ir-rispons infjammatorju u EndMT f'HUVECinjury indott minn ox-LDL. Fl-aħħarnett, l-istudju ta 'riċerka tagħna espost li Myr huwa kapaċi jtejjeb l-apoptożi taċ-ċelluli, l-infjammazzjoni taċ-ċelluli, u EndMT permezz tal-passaġġ GAS5/miR-29a-3p/TLR4/NF-KB (Fig.8), li jissuġġerixxi Myr bħala aġent terapewtiku potenzjali għall-AS. Barra minn hekk, GAS5 ġie propost li jkun molekula mira promettenti li tinvolvi l-proċessi patofiżjoloġiċi ta 'AS.

Referenzi

1. Kondapalli, L., Bottinor, W. & Lenneman, C. Billi nirrilaxxaw il-brejkijiet bl-immunoterapija, qed naċċelleraw l-aterosklerożi?.

Ċirkolazzjoni 142(24), 2312-2315(2020).

2. Libby, P.Ridker, PM& Hansson, GKProgress u sfidi fit-traduzzjoni tal-bijoloġija tal-aterosklerożi. Natura 473(7347),

317-325 (2011).

3. Couto, NFet al. Alterazzjonijiet OxLDL fid-dinamika tal-membrana taċ-ċelluli endoteljali jwasslu għal bidliet fit-traffikar tal-vesikuli u jżidu

suxxettibilità taċ-ċelluli għall-ħsara.Biochim.Biophys.Acta Biomembranes 1862,183139 (2019).

4. Yamagata, K. Effett protettiv ta 'epigallocatechin gallate fuq disturbi endoteljali fl-aterosklerożi. J. Cardiovasc. Pharmacol.75,

292-298(2019).

5. Gao, S. & Liu, J.Assoċjazzjoni bejn lipoproteina ossidizzata ta 'densità baxxa li tiċċirkola u mard kardjovaskulari aterosklerotiku.

Dis kroniku. Transl. Med. 3(2),89-94 (2017).

6. Torisu,K. et al.Awtofaġija endoteljali intatta hija meħtieġa biex iżżomm l-omeostażi tal-lipidi vaskulari.Aging Cell15(1),187-191 (2016).

7. Pan,X. et al.Attivazzjoni tas-sinjal Nrf2/HO-1 b'Myricetin għall-attenwazzjoni tad-degradazzjoni tal-ECM fil-kondroċiti umani u t-titjib tal-osteoartrite murina. Int. Immunofarmakol. 75,105742 (2019).

8.Li, M.et al.Myricetin irażżan il-propagazzjoni ta 'karċinoma epatoċellulari permezz ta' espressjoni li tirregola 'l isfel ta' YAP. Ċelloli 8(4),

358(2019).

9. Guo, C.et al. Myricetin Ittejjeb l-akkumulazzjoni tal-lipidi indotta mill-etanol fiċ-ċelloli tal-fwied billi tnaqqas il-bijosintesi tal-aċidu xaħmi. Mol

Nutr. Ikel Res. 63(14), e1801393 (2019).