Riċerka Fuq Evalwazzjoni Komprensiva tal-Kwalità Multi-Indiċi Ta' Cistanches Herba Ibbażata Fuq Il-Metodu tal-Piż KRITIKU

WEI Wei, QI Yuning, CHEN Weiying, ZHU Shunjuan, HOU Jianzhong
(Ċentru ta' Spezzjoni u Ittestjar tal-Kwalità ta' Jiuquan fil-Provinċja ta' Gansu, Jiuquan, Gansu 735000, iċ-Ċina)

Astratt:L-għan kien li jiġi stabbilit metodu ta' evalwazzjoni komprensiv b'ħafna indiċi għall-valutazzjoni tal-kwalità ta' Cistanche deserticola, u biex jiġu evalwati xjentifikament id-differenzi fil-kwalità fost Cistanches Herba minn sorsi differenti (Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa) u żoni ta' produzzjoni differenti. Il-kontenut ta 'ħames phenylethanoid glycosides (echinacoside, verbascoside, tubuloside A, isoacteoside, u 2'-acetylatteoside) ġew determinati bl-użu ta' kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC). Il-metodu tal-ippeżar CRITIC ġie impjegat biex jiġi kkalkulat il-piż ta 'kull komponent, u l-punteġġi komprensivi tal-kampjuni ġew ikkalkulati. L-analiżi tal-cluster ġiet applikata biex tanalizza l-mudelli tad-differenzi fil-kwalità fost il-kampjuni. Ir-riżultati wrew li ġew osservati differenzi fil-kwalità bejn Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa. Il-punteġġi ta' evalwazzjoni ta' Cistanche tubulosa kienu ġeneralment ogħla minn dawk ta' Cistanche deserticola. L-analiżi tal-cluster raggruppat Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa f'kategoriji distinti. Il-kwalità ta' Cistanche deserticola wriet varjazzjoni minima, filwaqt li l-kwalità ta' Cistanche tubulosa varjat f'żoni ta' produzzjoni differenti. Il-mudell stabbilit f'dan l-istudju jista' jikkwantifika b'mod oġġettiv id-differenzi fil-kwalità fost Cistanches Herba minn oriġini u żoni ta 'produzzjoni differenti, u jipprovdi bażi xjentifika għall-evalwazzjoni tal-kwalità ta' Cistanche.

Kliem ewlieni: Cistanches Herba;metodu tal-piż KRITIKA; analiżi tal-clusters;evalwazzjoni tal-kwalità

Cistanche herba estratt għall-bejgħ

 

 

 

 

 

Cistanches Herba tikkonsisti fiz-zkuk sukkulenti mnixxfin u bil-qoxra ta' Cistanche deserticola YC Ma jew Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, l-ewwel magħrufa komunement bħala cistanche tad-deżert. Cistanches Herba huwa sħun fin-natura u ħelu u mielħa fit-togħma. Jittonifika l-yang tal-kliewi, jibbenefika l-essenza u d-demm, u xarrab l-imsaren biex ittaffi l-istitikezza. Jintuża għal defiċjenza ta 'yang tal-kliewi, defiċjenza ta' essenza u demm, impotenza u infertilità, uġigħ u dgħjufija tal-qadd u l-irkopptejn, dgħjufija tal-muskoli u l-għadam, u nixfa intestinali bi stitikezza. Il-komponenti farmakoloġikament attivi tiegħu, bħal phenylethanoid glycosides, polysaccharides, u iridojdi, ġew ikkonfermati li għandhom attivitajiet antiossidanti, kontra t-tixjiħ, immunomodulatorji u newroprotettivi. Bħala materjal mediċinali tradizzjonali Ċiniż rinomat, huwa elenkat bħala ħaxix tal-ogħla grad fil-Classic ta 'Materia Medica ta' Shennong u huwa magħruf bħala l-"ġinseng tad-deżert." Huwa mqassam prinċipalment fir-reġjuni tal-majjistral tal-Mongolja ta 'ġewwa, Gansu, Xinjiang, u Ningxia.

Bid-domanda tas-suq li qed tiżdied, ir-riżorsi selvaġġi qed joqorbu lejn it-tnaqqis u l-kultivazzjoni artifiċjali saret mainstream. L-edizzjoni tal-2005 tal-Farmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina espandiet Cistanche tubulosa bħala sors botaniku legali ta 'Cistanches Herba. Iż-żewġ sorsi għandhom limiti tat-test separati, iżda biss għal estrattivi u l-kontenut ta 'echinacoside u verbascoside, li ma jistgħux jirriflettu b'mod komprensiv il-karatteristiċi b'ħafna komponenti u multi-mira tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Il-kompożizzjoni kimika ta 'Cistanches Herba tvarja minħabba ż-żona tal-produzzjoni, il-ħin tal-ħsad, u l-metodi tal-ipproċessar. Għalhekk, l-istabbiliment ta 'sistema ta' evalwazzjoni xjentifika u sistematika tal-kwalità huwa ta 'sinifikat kbir biex tiġi żgurata s-sigurtà u l-effikaċja ta' materjali mediċinali u biex jiġi promoss l-iżvilupp industrijali sostenibbli. F'dan l-istudju, ġew analizzati 20 lott ta 'Cistanches Herba minn żoni ta' produzzjoni differenti f'Jiuquan. HPLC intuża biex jiddetermina simultanjament ħames phenylethanoid glycosides-echinacoside, tubuloside A, verbascoside, isoacteoside, u 2′-acetylatteoside. Il-metodu tal-ippeżar CRITIC intuża biex jassenja piżijiet lil kull indikatur għal evalwazzjoni komprensiva tal-kwalità taż-żewġ sorsi botaniċi, u l-analiżi tal-gruppi (CA) intużat biex tinterpreta d-differenzi skont l-oriġini botanika u ż-żona tal-produzzjoni, bil-għan li tipprovdi bażi xjentifika għall-evalwazzjoni tal-kwalità ta 'Cistanches Herba.

1 Strumenti u Materjali ta' cistanche

1.1 Strumenti u tagħmir

Sistema HPLC Agilent 1260 Infinity [inkluża pompa kwaternarja, awtosampler, forn tal-kolonna, u detector DAD; Teknoloġiji Agilent (Ċina) Co., Ltd.]; XP205DR bilanċ analitiku elettroniku (Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.); KQ-500DE cleaner ultrasoniku (Kunshan Ultrasonic Instruments Co., Ltd.).

 

1.2 Reaġenti

Standards ta 'referenza: verbascoside (lott Nru . 111530-201914, purità 95.2%) u echinacoside (lott Nru . 111670-201706, purità 89.7%) inxtraw mill-Istituti Nazzjonali għall-Kontroll tal-Ikel u d-Droga; tubuloside A (lott Nru B20471, purità akbar minn jew ugwali għal 98%), isoacteoside (lott Nru B21535, purità akbar minn jew ugwali għal 98%), u 2′-acetylacteoside (lott Nru B21779, purità akbar minn jew ugwali għal 98%) kienu mixtrija minn Shanghai Yuan. Il-metanol kien grad HPLC (Merck). Ilma ultrapur kien ippreparat internament. Reaġenti oħra kienu ta 'grad analitiku.

 

1.3 Kampjuni

Għaxar lottijiet ta 'Cistanche deserticola u għaxar lottijiet ta' Cistanche tubulosa inġabru minn bażijiet ta 'kultivazzjoni ta' Cistanches Herba u spiżeriji fiż-żona ta 'Jiuquan, ittikkettati R1-R20 (ara Tabella 1). Ġew identifikati mid-Deputat Direttur u l-Ispiżjar tat-TCM Hou Jianzhong taċ-Ċentru ta 'Spezzjoni u Ittestjar tal-Kwalità ta' Jiuquan bħala zkuk imnixxfin u bil-qoxra ta 'Cistanche deserticola YC Ma jew Cistanche tubulosa (Schenk) Wight. Kampjuni ta 'vawċers huma depożitati fl-Istitut tal-Ittestjar tad-Drogi u l-Kożmetiċi taċ-Ċentru ta' Spezzjoni u Ittestjar tal-Kwalità ta 'Jiuquan.

Tabella 1 Sors ta' informazzjoni ta' kampjuni ta' Cistanches Herba

R1|Cistanche deserticola|Dazhuangzi Town, Jinta County, Jiuquan City

R2|Cistanche deserticola|Jiashan New Town, Distrett ta 'Suzhou, Belt Jiuquan

R3|Cistanche deserticola|Xiqu Town, Jinta County, Jiuquan City

R4|Cistanche deserticola|Zhonghe Town, Jinta County, Jiuquan City

R5|Cistanche deserticola|Shuanglong Town, Distrett ta 'Suzhou, Belt Jiuquan

R6|Cistanche deserticola|Belt ta' Hongliu, Kontea ta' Guazhou, Belt ta' Jiuquan

R7|Cistanche deserticola|Hongshagang Town, Dunhuang City, Jiuquan

R8|Cistanche deserticola|Belt Yumen, Jiuquan

R9|Cistanche deserticola|Tashi Town, Guazhou County, Jiuquan City

R10|Cistanche deserticola|Zongtai Township, Yumen City, Jiuquan

R11|Cistanche tubulosa|Dazhuangzi Town, Jinta County, Jiuquan City

R12|Cistanche tubulosa|Distrett ta 'Suzhou, Belt Jiuquan

R13|Cistanche tubulosa|Distrett ta 'Suzhou, Belt Jiuquan

R14|Cistanche tubulosa|Distrett ta 'Suzhou, Belt Jiuquan

R15|Cistanche tubulosa|Distrett ta 'Suzhou, Belt Jiuquan

R16|Cistanche tubulosa|Hongshagang Town, Dunhuang City, Jiuquan

R17|Cistanche tubulosa|Hongshagang Town, Dunhuang City, Jiuquan

R18|Cistanche tubulosa|Hongshagang Town, Dunhuang City, Jiuquan

R19|Cistanche tubulosa|Liangzhong Township, Yumen City, Jiuquan

R20|Cistanche tubulosa|Liugou Township, Anxi County, Jiuquan

 

2 Metodi u Riżultati

2.1 Preparazzjoni ta' soluzzjoni ta' referenza mħallta

Iżen b'mod preċiż verbascoside 10.45 mg, echinacoside 11.56 mg, tubuloside A 10.59 mg, isoacteoside 19.63 mg, u 2′-acetylacteoside 9.03 mg fi fliexken volumetriċi separati ta '50 mL, dewweb b'50% metanol, u żid sal-volum. Ħallat sew biex tikseb is-soluzzjonijiet ta' referenza tal-istokk. Imbagħad ippipetta b'mod preċiż 1.00 mL ta' kull soluzzjoni stokk f'kunjett volumetriku ta' 10 mL, iddilwixxi sal-volum b'50% metanol, u ħallat biex tikseb is-soluzzjoni ta' referenza mħallta.

Servizz ta 'Appoġġ Ta' Wecistanche-Għal aktar dettalji dwar il-kooperazzjoni
Email:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel:+86 15292862950

 

2.2 Preparazzjoni tas-soluzzjonijiet tat-test

Għaddi trabijiet tal-kampjuni minn għarbiel Nru. 3; iżen madwar 1 g preċiż f'kunjett volumetriku kannella ta' 100 mL. Żid 80 mL ta’ 50% metanol, agħmel it-tapp, ħawwad, iżen, xarrab għal 30 min, u ssebbaħ għal 40 min (250 W, 35 kHz). Kessaħ għat-temperatura tal-kamra, iżen mill-ġdid, żid 50% metanol biex tikkumpensa għal telf ta 'piż, ħawwad sew, ħalli toqgħod, ferra s-supernatant, u ffiltra. Iġbor il-filtrat sussegwenti bħala s-soluzzjoni tat-test.

 

2.3 Kundizzjonijiet kromatografiċi

Uża kolonna InertSustain C18 (4.6 mm × 250.0 mm, 5 μm). Fażi mobbli: metanol (A) u 0.1% soluzzjoni ta 'aċidu fosforiku (B). Gradjent għall-fażi A: 0-6 min, 20%; 6-18 min, 20%→30%; 18–35 min, 30%→45%. Rata tal-fluss: 1.0 mL/min; temperatura tal-kolonna: 35 grad; tul ta 'mewġ ta' skoperta: 330 nm; volum ta 'injezzjoni: 10 μL. Pjanċi teoretiċi għal kull komponent ma kinux inqas minn 5,000. Il-kromatogrammi tas-soluzzjoni ta’ referenza mħallta u s-soluzzjonijiet tat-test huma murija fil-Figura 1.

 

2.4 Validazzjoni tal-metodoloġija għad-determinazzjoni tal-kontenut

2.4.1 Test ta' preċiżjoni

Injetta s-soluzzjoni ta' referenza mħallta mit-taqsima 2.1 sitt darbiet konsekuttivament taħt il-kundizzjonijiet fit-taqsima 2.3. L-RSDs tal-ogħla żoni għall-analiti kollha kienu Inqas minn jew ugwali għal 0.86%, li jindika preċiżjoni tajba tal-istrument.

 

2.4.2 Test tar-ripetibbiltà

Iżen b'mod preċiż sitt porzjonijiet tal-kampjun R2 (madwar 1.0 g kull wieħed) u pprepara sitt soluzzjonijiet tat-test għal kull sezzjoni 2.2. Analizza taħt il-kundizzjonijiet fit-taqsima 2.3. L-RSDs taż-żoni peak kienu Inqas minn jew ugwali għal 1.12%, li jindika ripetibbiltà tajba tal-metodu.

 

2.4.3 Test ta' stabbiltà

Ipprepara soluzzjoni tat-test mill-kampjun R1 bħal f'sezzjoni 2.2. Injetta fi 0, 2, 4, 8, 12, u 24 siegħa taħt il-kundizzjonijiet f'sezzjoni 2.3. L-RSDs taż-żoni peak kienu Inqas minn jew ugwali għal 1.20%, li jindikaw stabbiltà tajba tas-soluzzjoni fi żmien 24 siegħa.

 

2.4.4 Linearità

Ipprepara serje ta 'soluzzjonijiet ta' referenza mħallta billi tippipetta b'mod preċiż 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, u 2.0 mL ta 'kull soluzzjoni stokk fi fliexken volumetriċi ta' 10 mL u ddilwixxi sal-volum b'50% metanol. Injetta taħt il-kundizzjonijiet fit-taqsima 2.3. Plott konċentrazzjoni kontra l-ogħla żona biex tikseb ekwazzjonijiet ta 'kalibrazzjoni u firxiet lineari (Tabella 2). Ir-riżultati wrew linearità tajba għal echinacoside, tubuloside A, verbascoside, isoacteoside, u 2′-acetylatteoside fil-meded rispettivi tagħhom.

Tabella 2 Riżultati tal-istudju tal-linearità

Echinacoside|y=2397.4x − 15.363|r=0.9987|firxa lineari: 0.0046–0.0462 mg·L−1

Tubuloside A|y=9428.7x − 7.104|r=0.9984|firxa lineari: 0.0024–0.0242 mg·L−1

Verbascoside|y=12609.5x − 8.507|r=0.9986|firxa lineari: 0.0024–0.0418 mg·L−1

Isoacteoside|y=11600.3x − 11.359|r=0.9985|firxa lineari: 0.0079–0.0786 mg·L−1

2′-Acetylatteoside|y=10901.8x − 5.216|r=0.9985|firxa lineari: 0.0036–0.0362 mg·L−1

2.4.5 Irkupru
Ipprepara disa' porzjonijiet ta' kampjun ta' kontenut magħruf (R1), madwar 0.5 g kull wieħed. Spike f'50%, 100%, u 150% tal-kontenut nominali b'ammonti xierqa ta 'verbascoside, echinacoside, tubuloside A, isoacteoside, u 2'-acetylatteoside. Ipprepara s-soluzzjonijiet tat-test skont it-taqsima 2.2 u analizza skont it-taqsima 2.3. L-irkupri medji kienu 99.58%, 99.24%, 100.26%, 99.84%, u 100.46%, b'RSDs ta '1.26%, 1.67%, 1.03%, 1.39%, u 1.71%, rispettivament, li jindikaw preċiżjoni tajba.

 

2.4.6 Determinazzjoni tal-kontenut

Iżen b'mod preċiż madwar 1 g ta 'trab Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa, ipprepara soluzzjonijiet tat-test għal kull sezzjoni 2.2, analizza għal kull sezzjoni 2.3, u kkalkula l-kontenut ta' verbascoside, echinacoside, tubuloside A, isoacteoside, u 2′-acetylacteoside. Ir-riżultati huma murija fit-Tabella 3.

Tabella 3 Riżultati tad-determinazzjoni tal-kontenut ta' ħames komponenti f'Cistanches Herba (mg·g-1)

R1: Echinacoside 4.81|Tubuloside A 0.16|Verbascoside 0.58|Isoacteoside 0.26|2′-Acetylatteoside 0.49

R2: 5.02 | 0.13 | 0.70 | 0.30 | 0.61

R3: 6.62 | 0.24 | 0.67 | 0.21 | 0.43

R4: 5.25 | 0.18 | 0.82 | 0.34 | 0.67

R5: 5.63 | 0.17 | 0.75 | 0.21 | 0.39

R6: 6.85 | 0.24 | 0.91 | 0.29 | 0.44

R7: 6.08 | 0.23 | 0.63 | 0.20 | 0.54

R8: 5.17 | - | 0.49 | 0.18 | 0.24

R9: 6.78 | 0.28 | 0.73 | 0.27 | 0.37

R10: 5.44 | 0.19 | 0.68 | 0.24 | 0.26

R11: 16.77 | 0.97 | 1.20 | 1.19 | -

R12: 13.80 | 1.22 | 2.07 | 1.98 | 0.08

R13: 17.06 | 2.09 | 4.82 | 2.08 | 0.14

R14: 18.56 | 2.86 | 4.76 | 2.89 | 0.16

R15: 20.47 | 3.62 | 5.17 | 1.84 | 0.21

R16: 15.38 | 3.16 | 3.86 | 1.09 | 0.18

R17: 16.23 | 2.97 | 4.43 | 1.44 | 0.17

R18: 15.02 | 2.40 | 3.59 | 1.38 | 0.18

R19: 17.56 | 3.06 | 4.91 | 1.52 | 0.19

R20: 14.87 | 2.64 | 4.05 | 1.26 | 0.20

 

2.5 Evalwazzjoni tal-kwalità bl-użu tal-metodu tal-ippeżar CRITIC

2.5.1 Standardizzazzjoni tad-dejta

Peress li l-kontenuti mkejla tal-indikaturi varjaw sostanzjalment, kull indikatur ġie ttrattat bħala indikatur tat-tip ta 'benefiċċju u standardizzat għall-firxa [0, 1] bl-użu tal-formula (1).

 

2.5.2 Determinazzjoni tal-piżijiet

Ir-riżultati standardizzati tal-20 lott ġew importati fil-pjattaforma tal-ipproċessar tad-dejta onlajn SPSSPRO, u l-metodu CRITIC intuża biex jiġu kkalkulati l-piżijiet (Tabella 4). Kif muri fit-Tabella 4, il-kontenut ta 'informazzjoni (1.936) ta' 2′-acetylatteoside kien ogħla b'mod sinifikanti minn dak ta 'indikaturi oħra (0.683-0.758), prinċipalment minħabba l-miżura ta' kunflitt għoli ħafna tiegħu (6.786), li jindika korrelazzjoni baxxa ħafna ma 'indikaturi oħra. Għalhekk, ipprovda informazzjoni unika fis-sistema ta 'evalwazzjoni u ammonta għal 40.112% tal-piż totali, u sar l-indikatur dominanti. Il-piżijiet tal-erba 'indikaturi l-oħra (echinacoside, tubuloside A, verbascoside, u isoacteoside) kienu relattivament ibbilanċjati.

Tabella 4 Riżultati tal-kalkoli tal-fatturi tal-piż

Indikatur: Echinacoside|Varjabbiltà 0.367|Kunflitt 2.064|Informazzjoni 0.758|Piż 15.705%

Indikatur: Tubuloside A|0.352|1.940|0.683|14.150%

Indikatur: Verbascoside|0.392|1.881|0.737|15.275%

Indikatur: Isoacteoside|0.330|2.157|0.713|14.759%

Indikatur: 2′-Acetylatteoside|0.285|6.786|1.936|40.112%

 

2.5.3 Evalwazzjoni komprensiva

Ibbażat fuq il-piżijiet determinati, il-punteġġi ta 'evalwazzjoni komprensivi tal-lottijiet 20 ġew ikkalkulati bl-użu tal-formula (2). Ir-riżultati huma murija fit-Tabella 5. Instabu differenzi notevoli bejn iż-żewġ sorsi botaniċi. Cistanche tubulosa ġeneralment kellha kontenut ogħla ta 'echinacoside u verbascoside, li wassal għal punteġġi komprensivi ogħla minn Cistanche deserticola.

Tabella 5 Punteġġi ta' evalwazzjoni komprensiva KRITIKA għal Cistanches Herba

R1: 0.307 (rank 14)

R2: 0.386 (rank 10)

R3: 0.292 (rank 15)

R4: 0.432 (rank 8)

R5: 0.258 (rank 17)

R6: 0.313 (rank 13)

R7: 0.351 (rank 12)

R8: 0.147 (rank 20)

R9: 0.265 (rank 16)

R10: 0.179 (rank 19)

R11: 0.236 (rank 18)

R12: 0.335 (rank 12)

R13: 0.533 (rank 4)

R14: 0.632 (rank 2)

R15: 0.667 (rank 1)

R16: 0.497 (rank 6)

R17: 0.530 (rank 5)

R18: 0.469 (rank 7)

R19: 0.565 (rank 3)

R20: 0.425 (rank 9)
 

 

2.6 Analiżi tal-cluster

Il-kontenuti mkejla tal-20 lott ġew importati fl-SPSS 20.0. Il-metodu tal-ġar l-aktar imbiegħed u d-distanza Ewklidjana kwadrata ntużaw bħala l-metriċi, u r-rabta bejn il-gruppi ġiet applikata għal raggruppament (ara l-Figura 2). Ir-riżultati indikaw differenzi fil-kwalità bejn iż-żewġ sorsi botaniċi: Cistanche deserticola u Cistanche tubulosa miġbura fi gruppi separati. Cistanche deserticola wera varjazzjoni żgħira fi ħdan il-grupp, filwaqt li Cistanche tubulosa wera differenzi fil-kwalità fost iż-żoni tal-produzzjoni u setgħet tinqasam aktar fi tliet sottogruppi, li ġeneralment kienet konsistenti mal-evalwazzjoni komprensiva bbażata fuq CRITIC.