MicroRNAs fl-Iżvilupp tal-Kliewi U l-Mard Ⅱ

Żvilupp tal-kliewi

Il-kliewi tal-mammiferi(jew metanephros) huwa organu vitali li għandu rwol kritiku fil-eskrezzjoni ta' skart metaboliku,regolazzjoni tal-volum tal-fluwidu extraċellulari, umanutenzjoni ta 'elettrolituomeostażi aċiduża. Barra minn hekk, il-kliewi tipproduċi ormoni importanti, bħaleritropojetina, calcitriol,renin, uprostaglandini(48). Il-kapaċità funzjonali tal-kliewi tikkorrelata man-numru ta 'nephrons li jiffunzjonaw li huma ffurmati waqt l-iżvilupp tal-kliewi qabel it-twelid, imsejħa wkoll dotazzjoni ta' nephron. Kull kilwa umana fiha medja ta' 1,000,000 nefroni, għalkemm dan in-numru jvarja konsiderevolment, bi stimi li jvarjaw minn 200,000 sa 2,000,{{8 }} nephrons (49, 50). Biltixjiħ,telf ta 'riżerva nephron funzjonaliiseħħ maż-żmien (51, 52); għalhekk, dotazzjoni baxxa ta 'nephron mat-twelid hija assoċjata ma' riskju akbar li tiżviluppa pressjoni għolja u mard kroniku tal-kliewi (CKD) aktar tard fil-ħajja (53-55). Barra minn hekk, CAKUT, li jwassal għal tnaqqis fid-dotazzjoni tan-nephron u l-funzjoni tan-nephron, hija l-kawża ewlenija ta 'insuffiċjenza renali fit-tfal, li tirriżulta f'morbidità u mortalità sinifikanti assoċjati ma' trapjant u dijalisi (56, 57). Għalhekk, fehim aħjar tal-mekkaniżmi ċellulari u molekulari sottostanti l-istabbiliment tan-numru ta 'nephron u l-formazzjoni normali ta' nephron jipprovdi għarfien dwar toroq ġodda biex ibassar, jipprevjeni u jikkura l-mard tal-kliewi tat-tfulija.

KEMM JIEĦU GĦAL ĊISTANCHE BIEX TAĦDEM GĦAL PAZJENTI BIL-MARD TAL-KLIDI?

Żvilupp tal-kliewi metanefriċijibda madwar jum embrijoniku 10.5 (E10.5) fil-ġrieden u madwar il-ħames ġimgħa tat-tqala fil-bnedmin (58). Bi tweġiba għal sinjali induttivi mill-mesenchyme metanephric, il-bud ureteriku jestendi mit-tarf kawdali tal-kanal Wolffian u jinvadi fil-mesenchyme maġenb (Figura 2). Fl-istess ħin, morfoġeni li joħorġu mill-bud ureteriku jinduċu kondensazzjoni tal-mesenchyme metanefriku biex jiffurmaw il-mesenchyme tal-kappa (imsejħa wkoll proġenituri nephron) madwar it-truf tal-bud ureteriku. Hekk kif in-nefroġenesi timxi 'l quddiem, il-bud ureteriku jgħaddi minn rawnds suċċessivi ta' fergħat, titwil u differenzjazzjoni biex jiġġenera l-kanali tal-ġbir tal-kliewi. Sottopopolazzjoni ta 'proġenituri nephron tgħaddi minn tranżizzjoni mesenchymal-epiteljali biex jiffurmaw vesicles renali, li wara l-polarizzazzjoni u t-titwil isiru strutturi tal-ġisem f'forma ta' virgola u S. Fl-aħħarnett, il-porzjon distali tal-ġisem f'forma ta 'S jingħaqad mal-kanal tal-ġbir biex jifforma nephron funzjonali (59-61). Il-ġisem f'forma ta 'S jgħaddi minn aktar differenzjazzjoni biex jifforma t-tipi ta' ċelluli maturi tan-nephron, apparti mill-kanal tal-ġbir. Iċ-ċelloli proġenitriċi stromali Foxd1+ huma ħdejn il-proġenituri tan-nephron fiż-żona kortika ta' barra jew nefroġenika tal-kilwa li qed tiżviluppa (Figura 2) (62). Sinjali mill-istroma kortikali huma maħsuba li jinibixxu l-espansjoni taċ-ċelluli proġenitriċi nephron u jistimulaw id-divrenzjar tagħha, peress li l-ablazzjoni tal-stroma renali tirriżulta f'differenzjazzjoni indebolita tal-proġenitur tan-nephron (63). Iċ-ċelluli proġenitriċi Foxd1+ jagħtu lok għaċ-ċelloli stromali kollha fil-kliewi metanefriċi, inklużi ċelluli interstizjali kortikali u medullari tal-kliewi, periċiti, fibroblasti perivaskulari, ċelluli mesanġjali, u ċelluli vaskulari tal-muskoli lixxi (64, 65). Perturbazzjonijiet fi kwalunkwe pass ta 'dan il-proċess jistgħu jwasslu għal CAKUT, il-kawża ewlenija ta' CKD fit-tfulija (66, 67).

In-nephron matur huwa magħmul minn glomerulus li jaġixxi bħala l-unità ta 'filtrazzjoni u kompartiment tubulari ta' sorption ta 'wara li huwa suddiviż f'tubuli konvoluti prossimali, linja ta' Henle, tubuli konvoluti distali, u kanal ta 'ġbir (Figura 2). Il-barriera tal-filtrazzjoni tal-glomerulus (li tinkludi l-endotelju fenestrat, il-membrana tal-kantina glomerulari, il-proċessi tas-saqajn, u d-dijaframmi tal-qasma tal-podoċiti) tippermetti l-filtrazzjoni tal-plażma u tas-soluti żgħar, filwaqt li żżomm selettivament proteini bħall-albumina u l-immunoglobulini fid-demm (68, 69). Sadanittant, il-kompartiment ta 'riassorbiment tubulari huwa responsabbli għaż-żamma tal-omeostasi tal-ilma, assorbiment mill-ġdid ta' soluti (inklużi sodju, potassju, kalċju, fosfru, manjesju, glukożju, u ħafna oħrajn), u eskrezzjoni ta 'aċidu u skart ieħor.

MiRNAs fil-kliewi li qed jiżviluppaw

Fi studji fil-ġrieden transġeniċi kondizzjonali, il-miRNAs ħarġu bħala regolaturi kritiċi tal-morfoġenesi tal-kliewi f'nisel taċ-ċelluli multipli. L-istudji inizjali li evalwaw rwol funzjonali għall-miRNAs fl-iżvilupp tal-kliewi użaw it-tħassir kondizzjonali ta' Dicer (70) f'nisel renali differenti. Madankollu, Dicer huwa magħruf ukoll li għandu rwoli indipendenti mill-miRNA (71), li kkumplikat l-interpretazzjoni ta 'dawn il-mudelli. Tħassir kondizzjonali ta 'Dicer fil-mesenchyme metanephric bikri jew proġenituri nephron jirriżulta f'apoptożi miżjuda ta' proġenituri nephron, livelli elevati tal-proteina proapoptotic Bim, u waqfien prematur tan-nefroġenesi (72-75) (Tabella 1). Interessanti, it-telf tal-espressjoni Bim f'dicer-deficient nephron pro genitors inaqqas l-apoptożi u parzjalment jerġa 'jġib il-formazzjoni ta' nephron. Żewġ miRNAs espressi fil-proġenituri nephron, miR-17 u miR{-106, ġew identifikati bħala soppressori tal-espressjoni BIM (76). Flimkien, dawn is-sejbiet jindikaw li l-miRNAs jikkontrollaw il-bilanċ bejn is-sopravivenza u l-apoptożi fil-proġenituri tan-nephron biex jiżguraw il-formazzjoni ta 'numru korrett ta' nephrons matul in-nefroġenesi.

Figura 2. Illustrazzjoni skematika tal-istadji tal-iżvilupp tal-kliewi metanefriċi. Sinjali mill-blanzuni ureteriċi jqanqlu l-kondensazzjoni tal-mesenchyme metanefriku biex jiffurmaw għatu tal-proġenituri tan-nephron (kap mesenchyme) madwar it-truf tal-blanzuni ureteriċi. Il-mesenchyme tal-għatu jgħaddi minn transizzjoni mesenkimali-epiteljali biex jiffurmaw vesikli renali, li jiżviluppaw b'mod sekwenzjali f'korpi f'forma ta' virgola u S. Dawn l-istrutturi jgħaqqdu maż-zokk tal-bud ureteriku, li jagħti lok għall-kanal tal-ġbir. Iċ-ċelloli fid-dominju prossimali tal-ġisem f'forma ta' S jiddifferenzjaw f'ċelloli epiteljali speċjalizzati tal-korpuscle renali maturi (jiġifieri, podoċiti u ċelloli tal-kapsula ta' Bowman), filwaqt li ċelloli fil-porzjonijiet tan-nofs u distali jiddifferenzjaw fis-segmenti tubulari tan-nephron (tubuli prossimali). , linji ta 'Henle, u tubuli distali). Maħluq ma 'BioRender.com.

It-tħassir kondizzjonali ta 'Dicer fin-nisel tal-blanzuni ureteriċi jirriżulta fi spettru ta' anormalitajiet li jixbħu ħafna lil CAKUT, inkluża displasja renali u l-iżvilupp ta 'ċisti tal-kanal tal-ġbir (73, 77, 78). It-terminazzjoni prematura tal-morfoġenesi tal-fergħat (bi tweġiba għal espressjoni mnaqqsa ta 'Wnt11 u c-Ret mill-bud ureteriku) x'aktarx hija l-fattur ewlieni li jikkontribwixxi għal displasja renali (73). Il-bidu tal-formazzjoni taċ-ċisti jseħħ f'madwar E15.5 u huwa assoċjat ma 'difetti fit-tul tal-cilia primarju, żieda fil-mewt taċ-ċelluli apoptotiċi, u proliferazzjoni eċċessiva taċ-ċelluli (73). Peress li Dicer għandu rwoli importanti indipendenti mill-miRNA fiċ-ċellula, it-tħassir kondizzjonali ta 'Dgcr8 intuża biex jikkonferma li l-fenotipi osservati f'mudelli kondizzjonali ta' Dicer-knockout huma tabilħaqq ir-riżultat ta 'telf ta' miRNAs. Annimali b'tħassir ta 'Dgcr8 fin-nephron distali u derivattivi tal-kanal tal-ġbir jiżviluppaw hydronephrosis u ċisti tal-kanal tal-ġbir (79), fenotip simili għal CAKUT li jixbah it-telf ta' attività Dicer fin-nisel tal-bud ureteri.

Studji minn żewġ gruppi indipendenti wrew li l-ablazzjoni ta' Dicer min-nisel ta' stroma renali Foxd1+ u d-derivattivi tiegħu jirriżultaw fi spettru ta' anomaliji renali, b'sejbiet konsistenti dwar kliewi ipoplastiċi, numri glomerulari mnaqqsa, maturazzjoni glomerulari anormali, u vaskulari difettużi. disinjar (80, 81). Għalkemm iż-żewġ gruppi ddeskrivew fenotipi fil-biċċa l-kbira konkordanti bl-użu ta 'mudelli simili tal-ġrieden, ġew innutati żewġ differenzi distinti. Nakagawa et al. osserva nuqqas tal-medulla ta 'ġewwa u l-papilla, kif ukoll tnaqqis fiż-żona nefroġenika (80). B'kuntrast, Phua et al. wera espansjoni tal-popolazzjoni tal-proġenitur tan-nephron u papilla renali ppreservata (81). Nakagawa et al. ippropona li dawn id-difetti huma relatati mat-tfixkil tas-sinjalar tal-mogħdija Wnt, li jirriżulta f'bidliet fil-migrazzjoni u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli stromali, minħabba regolazzjoni 'l isfel tal-miRNAs taċ-ċelluli stromali, miR-214, miR-199a{{7 }}p, u miR-199a-3p (80). L-istudju minn Phua et al. issuġġerixxa li bidliet fil-programmi apoptotic (inkluża espressjoni miżjuda ta 'ġeni effetur Bim u p53) jikkontribwixxu għal difetti fenotipiċi (81). Huwa konċepibbli li d-differenzi fl-isfond ġenetiku u/jew l-effiċjenza tar-rikombinazzjoni medjata minn Cre jistgħu jkunu responsabbli għad-differenzi jiddeskrivu dawn l-istudji. Madankollu, il-fenotipi deskritti huma konsistenti mar-rwoli multidimensjonali magħrufa ta 'stroma renali fl-iżvilupp tal-kliewi, u l-mekkaniżmi sottostanti dawn il-fenotipi x'aktarx huma kumplessi minħabba n-natura ta' tħassir ta 'Dicer. Hemm bżonn ta' aktar studji li jeżaminaw miRNAs speċifiċi f'diversi subpopolazzjonijiet stromali biex jiġu definiti aħjar il-mekkaniżmi regolatorji li għandhom x'jaqsmu.

Xogħol aktar reċenti indirizza l-kwistjoni tal-funzjoni ta' miRNAs speċifiċi kemm fil-proġenituri tal-kliewi li qed jiżviluppaw kif ukoll tan-nephron. Bl-użu ta 'mudell ta' ċelloli staminali embrijoniċi umani, Bantounas et al. wera li l-inibizzjoni tal-miR -199a ~ 214 cluster tirriżulta fi glomeruli dismorfiċi, tubuli prossimali aberranti, tnaqqis fl-espressjoni WT1, u żieda fil-kapillari interstizjali f'organoids bħal kliewi (82). Interessanti, it-tħassir globali ta 'miR-210 li jirrispondu għall-ipoksja jirriżulta f'defiċit ta' nephron speċifiku għall-irġiel (83). Pereżempju, it-tħassir kondizzjonali tar-raggruppament miR-17~92 fil-proġenituri tan-nephron u d-derivattivi tagħhom fil-ġrieden ixekkel il-proliferazzjoni taċ-ċelluli proġenitriċi u jnaqqas in-numru ta 'nephrons li qed jiżviluppaw. Bħala riżultat, ġrieden mutanti jiżviluppaw proteinurja, fibrożi renali, u funzjoni renali indebolita (84). Livelli disregolati tal-ġene mira miR-17~92, CFTR, huma implikati fil-proliferazzjoni difettuża ta 'ċelluli proġenitriċi u dotazzjoni mnaqqsa ta' nephron f'dan il-mudell tal-ġrieden (85).

Is-sekwenzjar ta 'RNA żgħir (smRNA-Seq) intuża dejjem aktar biex jipprofila mudelli ta' espressjoni ta 'miRNA u għall-iskoperta ta' speċi miRNA ġodda. smRNA-Seq ta 'ċelluli mesenkimali nefroġeniċi E15.5 identifikaw 162 miRNAs annotati li huma espressi b'mod differenzjat f'din il-popolazzjoni taċ-ċelluli meta mqabbla ma' kliewi sħaħ u 49 speċi miRNA ġdida (86). Interessanti, il-livelli ta 'miR-200 miRNAs tal-familja tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-proġenituri tan-nephron. Minħabba li l-membri tal-familja miR-200 huma regolaturi ewlenin tat-transizzjoni mesenchymal-epiteljali fil-kanal tal-ġbir (87), aħna nispekulaw li l-espressjoni tagħhom tista 'tkun regolata sewwa biex tiżgura divrenzjar epiteljali normali tal-proġenituri nephron matul l-iżvilupp tal-kliewi.

Funzjoni MiRNA fin-nephron matur

Minbarra l-ħtieġa tagħhom matul l-iżvilupp tal-kliewi, il-miRNAs jirregolaw bosta proċessi bijoloġiċi fin-nisel taċ-ċelluli ewlenin li jiffurmaw in-nephron matur (69, 88-91). B'konformità ma' dan, ġiet deskritta espressjoni speċifika għas-segment ta' miRNAs tul in-nephron, inklużi miR-143 u miR-195a fil-glomerulus, miR-107 u miR{{7} }a fit-tubuli prossimali, miR-193 u miR-378a fil-parti ħoxna axxendenti, miR{-874 u miR-155 fit-tubuli konvoluti distali, u miR{{ 12}}c fil-kanal tal-ġbir (87). Barra minn hekk, studji funzjonali fil-kompartimenti tan-nephron matur jappoġġjaw rwoli distinti għall-miRNAs.

Ġrieden nieqsa Dicer jew Drosha fil-podoċiti juru proteinurja mmarkata, glomerulosclerosis, u progressjoni rapida għal insuffiċjenza tal-kliewi, sekondarja għal tfixkil tal-barriera tal-filtrazzjoni glomerulari (90-93). Analiżi in silico wrew li diversi traskrizzjonijiet upregolati fi glomeruli mutanti fihom sekwenzi fil-mira għall-membri tal-familja miR-30. Bħala l-erba' membri tal-familja miR-30 (miR-30c-1, miR-30b, miR{-30d, u miR-30c{ {9}}) huma normalment espressi ħafna fil-podocytes, dawn il-miRNAs jistgħu jkunu responsabbli għall-podocyte ities anormali u t-tfixkil tal-barriera tal-filtrazzjoni glomerulari fil-ġrieden mutanti (91).

B'mod kemxejn sorprendenti, it-tħassir ta 'Dicer mit-tubuli prossimali tal-mammiferi ta' wara t-twelid ma jaffettwax l-iżvilupp tal-kliewi, l-istoloġija, jew il-funzjoni iżda jipproteġi kontra l-iskemija renali/korriment tar-riperfużjoni. Ġrieden mutanti juru funzjoni aħjar tal-kliewi, ħsara fil-kliewi mnaqqsa, apoptożi tubulari aktar baxxa, u sopravivenza mtejba meta mqabbla mal-littermates tagħhom WT (94). Dan x'aktarx jirrifletti s-"somma" tal-effett tat-tħassir ta' miRNAs multipli fit-tubuli prossimali, peress li xogħol ieħor minn dak iż-żmien wera li l-espressjoni ta' miRNAs speċifiċi hija protettiva f'korriment ta' iskemija/riperfużjoni renali (eż., miR-16 u miR-21 95, 96); billi oħrajn jagħmlu ħsara (eż., miR-182; ref. 97).

Għalkemm il-miRNAs jidhru li huma dispensabbli għall-funzjoni tat-tubuli prossimali, huma essenzjali għan-nephrons distali u l-omeostażi tal-kanal tal-ġbir (79, 88, 98). Il-ġbir ta 'inattivazzjoni speċifika għall-kanal ta' Dicer u ġeni oħra kritiċi assoċjati mal-bijoġenesi miRNA (inklużi Dgcr8, Ago1, 2, 3, u 4) tikkawża insuffiċjenza renali fil-ġrieden adulti minħabba fibrożi tubulointerstizjali progressiva u infjammazzjoni interstizjali (88). Dan huwa preċedut minn transizzjoni parzjali epiteljali-mesenkimali (EMT) ta 'ċelluli tal-kanal tal-ġbir, u downregulation tal-membri tal-familja miR-200, li jinibixxu EMT (88). Bl-istess mod, l-ablazzjoni ta 'jew Dicer jew Dgcr8 minn nephron distali u derivattivi tal-bud ureteriċi, rispettivament, tirriżulta f'anormalitajiet renali u insuffiċjenza tal-kliewi (78, 98), li fl-aħħar huma assoċjati ma' downregulation tal-membri tal-familja miR-200 (98). Żieda fl-espressjoni tal-ġene mira miR-200 Pkd1 f'dawn il-ġrieden mutanti tfixkel it-tubulogeneżi u tipproduċi strutturi li jixbħu ċ-ċisti (98). Dawn id-differenzi fir-rekwiżit għal miRNAs funzjonali fit-tubuli prossimali u l-kanal distali nephron/ġbir jistgħu jiġu spjegati mid-distribuzzjoni segmentali tal-miRNAs tul it-tul tan-nephron u l-kanal tal-ġbir fil-kliewi WT (88).

It-tħassir ta 'Dicer f'ċelloli li jxerrdu renin fl-apparat juxtaglomerular jirriżulta f'defiċit ta' ċelloli juxtaglomerular, livelli mnaqqsa ta 'renin li jiċċirkolaw bi tnaqqis konsegwenti fil-pressjoni tad-demm arterjali, funzjoni mnaqqsa tal-kliewi, mudell strixxat ta' fibrożi interstizjali, u anormalitajiet vaskulari (89). It-tnaqqis fiċ-ċelloli juxtaglomerular jissuġġerixxi rekwiżit għal miRNAs maturi fiż-żamma tal-fenotip tagħhom. Aktar tard, miR-330 u miR-125b{-5p ġew identifikati bħala kandidati potenzjali li jew jinibixxu jew jippromwovu, rispettivament, il-fenotip tal-muskoli lixxi taċ-ċelloli juxtaglomerular (99).

Oqsma attivi oħra ta 'riċerka dwar miRNAs f'korriment akut tal-kliewi (8-10), mard tal-kliewi poliċistiku (11), u trapjant tal-kliewi (10), ġew indirizzati b'mod komprensiv f'reviżjonijiet reċenti oħra.

MiRNAs f'mard tal-kliewi pedjatriku F'din it-taqsima, nipprovdu ħarsa ġenerali lejn ir-rwol tal-miRNAs f'mard tal-kliewi tal-iżvilupp, inklużi tumuri CAKUT u Wilms. CAKUT huma fost l-aktar forom frekwenti ta' malformazzjonijiet mat-twelid, li jaffettwaw madwar 3-7 minn 1000 twelid ħaj (100). Tfixkil tal-kliewi u l-iżvilupp tal-passaġġ urinarju t'isfel iwassal għal firxa wiesgħa ta' manifestazzjonijiet kliniċi osservati f'CAKUT, inklużi anomaliji tal-kliewi (jiġifieri, aġenesi renali, ipoplażja u displażja renali, u kliewi displastiċi multiċistiċi), anomaliji ureteropelviċi (jiġifieri ostruzzjoni tal-junction ureteropelvika), sistema ta 'ġbir duplex, u anomaliji tal-bużżieqa u l-uretra (101-103). Din l-eteroġeneità fenotipika hija probabbli minħabba interazzjonijiet kumplessi bejn fatturi ambjentali ġenetiċi, epiġenetiċi, u/jew prenatali li jaffettwaw l-iżvilupp tal-kliewi u tal-passaġġ urinarju t'isfel, li jirriżultaw f'CAKUT (101). Il-biċċa l-kbira tal-għarfien attwali tagħna dwar il-patoġenesi CAKUT ħarġet minn mudelli tal-ġrieden u forom sindromiċi ta 'CAKUT. Dawn l-istudji wasslu għall-identifikazzjoni ta’ diversi ġeni CAKUT, li ħafna minnhom huma implikati fl-iżvilupp bikri tal-kliewi, inklużi PAX2, SALL1, HNF1B, EYA1, GATA3, RET, WNT4, GDNF, SIX1, SIX2, u oħrajn (101, 104, 105). Madankollu, mutazzjonijiet singoli jew varjanti ta 'numru ta' kopji fil-ġeni li jikkodifikaw il-proteini ma jispjegawx il-maġġoranza tal-każijiet CAKUT (~ 80%) (101, 106).

Kif issemma hawn fuq, it-tnaqqis ta 'miRNAs maturi minn nisel taċ-ċelluli differenti tal-kliewi li qed jiżviluppaw f'mudelli tal-ġrieden jirriżulta f'anormalitajiet renali li jimitaw CAKUT uman (73, 74, 78, 79). Barra minn hekk, it-tħassir tal-linja ġerminali ta' MIR17HG, li jikkodifika r-raggruppament miR-17~92, jikkawża s-sindromu ta' Feingold tat-tip 2 fil-bnedmin (107). Għalkemm fenotip renali f'pazjenti bis-sindromu Feingold tat-tip 2 b'mutazzjonijiet MIR17HG għadu mhux definit, inċidenza ta' 18% ta' CAKUT ġiet irrappurtata f'każijiet tas-sindromu Feingold assoċjati ma' mutazzjonijiet MYCN (108, 109). Flimkien, dawn l-osservazzjonijiet jissuġġerixxu li mutazzjonijiet fil-miRNAs espressi waqt l-iżvilupp tal-kliewi jistgħu jikkawżaw CAKUT fil-bnedmin, partikolarment peress li ħafna miRNAs huma kkonservati ħafna bejn il-ġrieden u l-bnedmin.

Biex tittestja din l-ipoteżi, studju wieħed investiga 1248 pazjent b'CAKUT nonsyndromic minn 980 familja u fittex mutazzjonijiet f'96 reġjun stem-loop ta' 73 ġene miRNA tal-iżvilupp renali (106). F'din il-koorti, ġew identifikati 31 individwu bi 17-il varjant ta' nukleotide wieħed differenti li jaffettwaw 16-il ġene miRNA differenti. Fost dawn, żewġ varjanti ġodda fil-miRNAs instabu li huma potenzjalment patoġeniċi. MIR19B1 (membru tar-raggruppament miR-17~92) kien assoċjat mal-preżenza ta 'aġenesi tal-kliewi tal-lemin, u MIR99A kien assoċjat ma' rifluss vesikoureterali sever u ptosi tal-kliewi. Dan in-numru sorprendentement baxx ta 'varjanti patoġeniċi kandidati huwa parzjalment minħabba l-limitazzjonijiet ta' dan l-istudju, peress li l-analiżi ħadet biss mutazzjonijiet fil-ġeni miRNA li kienu inklużi fl-approċċ tal-ġeni kandidati u ma skoprietx varjazzjonijiet tan-numru tal-kopji u arranġamenti kbar tad-DNA (106) .

F'approċċ alternattiv, segmenti tal-ureter minn pazjenti b'varjetà ta 'CAKUT ġew analizzati għal espressjoni differenzjali ta' traskrizzjoni permezz ta 'microarray, għall-preżenza ta' miri miRNA mbassra b'mod bijoinformatiku, u miRNAs maturi permezz ta 'qPCR (110). Bl-użu ta' dan l-approċċ b'diversi punti, ġew identifikati seba' miRNAs bi rwoli potenzjali f'CAKUT, u fost dawn, has-miR-144 żdied b'mod sinifikanti f'pazjenti b'CAKUT. L-analiżi tal-ontoloġija tal-ġeni indikat li l-ġeni fil-mira has-miR-144 mbassra jikkontribwixxu għal proċessi bijoloġiċi involuti fl-iżvilupp CAKUT, inkluż l-iżvilupp tat-tubi (22 ġene fil-mira), l-iżvilupp tas-sistema uroġenitali (18-il ġene fil-mira), l-iżvilupp tal-kliewi (14-il ġene fil-mira) , u l-iżvilupp ta 'organi embrijoniċi (18-il ġeni fil-mira) (110).

Huma meħtieġa aktar studji biex jiġu definiti l-mekkaniżmi molekulari li huma sottostanti r-rwoli patoġeniċi tal-miRNAs f'CAKUT. Sejbiet minn studji bħal dawn se jkunu kritiċi fit-titjib tal-kura tal-pazjenti b'CAKUT u l-prevenzjoni tal-progressjoni tagħhom għal CKD, jipprovdu pariri ġenetiċi xierqa għall-pazjenti u l-familji tagħhom, u jiżviluppaw strateġiji terapewtiċi ġodda.