Melatonin Tipprevjeni l-Infiltrazzjoni tal-Limfoċiti T lejn il-Kliewi tal-Firien Ipertensivi, Indotta minn Dieta Għolja ta' Melħ, Billi Tevita l-Espressjoni ta' Chemokines Ligand CXCR3
Mar 14, 2022
Għal aktar informazzjoni:ali.ma@wecistanche.com
Ariel Bier1, Rawan Khashab2, Yehonatan Sharabi1,2,3, Ehud Grossman1,2,3u Avshalom Leibowitz1,2,3,*
1Mediċina D, Iċ-Ċentru Mediku Chaim Sheba, Tel-Hashomer 5262000, Iżrael; arielbier@gmail.com (AB);Yehonatan.Sharabi@sheba.health.gov.il (YS); Ehud.Grossman@sheba.health.gov.il (EG)2 Hypertension Unit, the Chaim Sheba Medical Center, Tel-Hashomer 5262000, Israel;rawankhasbab@gmail.com3Sackler Fakultà tal-Mediċina, Università ta' Tel-Aviv, Tel-Aviv 6997801, Iżrael*
Astratt: Fi studju preċedenti, urejna danmelatoninjipprevjenikliewiħsara f'mudell ta 'pressjoni għolja kkaġunata mill-melħ billi tnaqqas l-istress ossidattiv. Aħna ipoteżijna li dan l-effett jinvolvi l-proprjetajiet immunomodulatorji ta 'melatonin. Il-firien sensittivi għall-melħ (DSS) Study-Dahl in vivo ġew mitmugħa chow normali, dieta b’ħafna melħ (HSD), jew HSD umelatonin(30 mg/kg/jum) fl-ilma tagħhom għal tmien ġimgħat.Kliewiinħasdu għall-iżolament u l-karatterizzazzjoni immedjati tal-limfoċiti permezz taċ-ċitometrija tal-fluss (CD3 plus CD4 plus u CD3 plus CD8 plus ) u għal chemoattractant tal-limfoċiti (prinċipalment CXCLkimokini) studji tal-espressjoni tal-ġeni. Studju in vitro-far, ċelluli mesanġjali (RMC) ġew ikkultivati f'medju b'ħafna melħ mingħajr u bimelatonin. HSD kien assoċjat ma' infiltrazzjoni renali sinifikanti ta' limfoċiti T CD4 plus u CD8 plus meta mqabbla mal-kontroll. Melatonin tnaqqas b'mod sinifikanti l-infiltrazzjoni tal-limfoċiti renali. HSD żied b'mod sinifikanti l-espressjoni tal-mRNA ta 'CXCLkimokini. Iż-żieda tal-melatonin mal-HSD abolit dan l-effett. It-trattament taċ-ċelloli RMC bil-melħ żied l-espressjoni ta 'CXCL10 u CXCL11 iżda mhux CXCL9. Żiedamelatoninlill-midja tal-kultura evitata din iż-żieda. It-trattament tal-firien mitmugħa b'HSD b'melatonin naqqas l-espressjoni tal-chemoattractantmRNA tal-limfoċiti renali u huwa assoċjat ma 'tnaqqis sinifikanti tal-infiltrazzjoni tal-limfoċiti T tal-kliewi. Il-melħ jista' jkollu effett dirett fuq iċ-ċelloli tal-kliewi li jipproduċu l-kimokini, li jiġi mċatt bit-trattament tal-melatonin.
Kliem ewlieni:melatonin; melħ; Limfoċiti T; pressjoni għolja;kliewi; CXCL 9; CXCL 10; CXCL 11
1. Introduzzjoni
Pressjoni għolja (HTN) hija fattur ewlieni ta 'riskju kardjovaskulari modifikabbli. Minħabba t-tixjiħ tal-popolazzjoni, il-prevalenza ta 'HTN qed tiżdied b'mod kostanti, u tilħaq sa 30 fil-mija f'avvanzi [1]. Minkejja diversi għażliet terapewtiċi mediċi, il-kontroll dinji ta 'HTN huwa fqir. Il-konsegwenzi ta' HTN mhux ikkontrollat huma devastanti, u joħolqu impatt negattiv kbir fuq is-saħħa pubblika [2].
Diversi fatturi ta 'mġieba, ambjentali u ġenetiċi huma involuti fil-patoġenesi ta' HTN. Il-kontenut għoli ta 'melħ fid-dieti tal-Punent ġie implikat bħala kontributur ewlieni għall-HTN u huwa assoċjat ma' żieda fil-morbidità u l-mortalità. Linji gwida u inizjattivi pubbliċi jirrakkomandaw li jitnaqqas il-konsum tal-melħ għall-popolazzjoni ġenerali. Madankollu, mhux kull individwu jista 'jibbenefika minn din ir-restrizzjoni, peress li l-patofiżjoloġija li tgħaqqad is-sensittività tal-melħ ma' HTN mhix mifhuma bis-sħiħ u teħtieġ fehim mekkanistiku mtejjeb [3]. Għalhekk, strateġiji ġodda huma kruċjali għal fehim u kontroll aħjar tal-HTN, li jagħmlu paradigmi ġodda ta 'riċerka ħtieġa immedjata.
Instab li l-infjammazzjoni u l-istress ossidattiv huma involuti fil-patoġenesi ta 'HTN essenzjali. Waqt ir-riċerka għall-kawżi li jibdew u jkomplu dawn il-proċessi, ħafna mudelli sperimentali HTN jissuġġerixxu l-involviment tar-rispons immuni adattiv [4].
Ikklikkja biexBenefiċċji ta 'Cistanche u effetti sekondarji għall-funzjoni tal-kliewi
Ħjiel li jgħaqqad l-immunità adattiva mal-HTN diġà eżistew mis-sittinijiet. Madankollu, dan l-aħħar biss, b'fehim aħjar tas-sistema immunitarja, seta' jinkiseb progress f'din id-direzzjoni. Studju pijunier minn Guzik et al. wera li l-melħ ta 'angiotensin (Ang) II jew deoxycorticosterone (DOC) HTN kien ċċarat fil-ġrieden rag1-/-, li huma defiċjenti fil-limfoċiti T u B, u t-trasferiment adottiv ta' ċelluli T, iżda mhux B, setgħu jirrestawraw ir-rispons BP [5]. Minn dan id-dokument, diversi komponenti ta 'immunità adottiva nstabu li huma rilevanti għall-patoġenesi ta' HTN fil-biċċa l-kbira tal-mudelli ta 'annimali komuni. Ir-rwol taċ-ċelluli T fil-mudell HTN indott mill-melħ ġie wkoll studjat b'mod estensiv. Studji in vitro juru li l-melħ jista 'jimbotta d-divrenzjar naïve taċ-ċelluli T fiċ-ċelluli TH17 [6]. Bosta xogħol in vivo fil-mudelli HTN indotti minn dieta b'ħafna melħ (HSD), bħal firien sensittivi għall-melħ Dhal (DSS), juru infiltrazzjoni estensiva taċ-ċelluli T tal-kliewi [7-9].
Fost il-ħafna proċessi fiżjoloġiċi,melatonin'sl-involviment mar-regolazzjoni tal-pressjoni tad-demm huwa kemmxejn intuwittiv. Il-mudell ċirkadjan tal-pressjoni tad-demm jinkoraġġixxi riċerka estensiva dwar il-melatonin u l-HTN. Ħafna xogħlijiet fil-passat, fil-bnedmin u f'mudelli sperimentali, qabbdu livelli baxxi ta 'melatonin ma' HTN [10]. Hemm xi dejta klinika li tissuġġerixxi li s-supplimentazzjoni tal-melatonin tista' tikkura l-HTN, prinċipalment għal pazjenti b'HTN matul il-lejl [11]. L-inkonsistenza ta 'din id-dejta, madankollu, tqajjem mistoqsijiet dwar jekk il-proprjetajiet tal-melatonin mhux ċirkadjan humiex involuti wkoll fir-regolazzjoni tal-pressjoni tad-demm.
Il-proprjetajiet anti-infjammatorji u anti-ossidattivi tal-melatonin ssuġġerew li l-melatonin jinteraġixxi mas-sistema immuni. Id-dejta emerġenti implikat ir-rwol tas-sinjalar tal-melatonin fl-iżvilupp, l-attivazzjoni, id-divrenzjar u l-memorja taċ-ċelluli T. Hemm evidenza limelatoninriċetturi tal-membrana u nukleari huma preżenti fuq iċ-ċelluli T [12,13].Melatoninjaffettwa l-produzzjoni ta 'ħafna ċitokini involuti fir-rispons immuni, bħall-interferon (IFN) - li huwa regolatur tal-pern tar-rispons Th1 [14].
L-istress ossidattiv u r-rispons taċ-ċelluli T, skond xi riċerkaturi, jaħdmu flimkien biex jippromwovu l-iżvilupp ta 'HTN u ħsara ipertensiva fl-organi [15]. Fix-xogħol preċedenti tagħna, urejna danmelatonininaqqas l-istress ossidattiv lokali (renali) u jipprevjeni l-fibrożi tal-kliewi indotta mill-melħ u l-proteinurja f'mudell tal-far HTN sensittiv għall-melħ (il-mudell DSS) [16]. Peress li l-istress ossidattiv għandu rwol ċentrali fir-rispons immuni adattiv assoċjat ma 'HTN, aħna ipoteżijna li l-proprjetajiet immunomodulatorji tal-melatonin huma responsabbli għar-rwol protettiv tiegħu f'HTN indott minn HSD.
L-għan ta' dan l-istudju huwa li jevalwa jekkmelatonininaqqas ir-rispons taċ-ċelluli T indotti mill-melħ u biex jiċċara l-mekkaniżmi responsabbli għal dan l-effett.
2. Materjali u Metodi
2.1. Annimali u Protokoll ta' Studju
Il-protokoll tal-istudju ġie approvat mill-kumitat tal-etika tal-annimali istituzzjonali fiċ-ċentru mediku ta 'Sheba fl-Iżrael. L-istat tas-saħħa tagħhom kien immonitorjat permezz ta' kejl tal-piż tal-ġisem u osservazzjoni ġenerali ta' kuljum għall-moviment u l-kundizzjonijiet tas-saħħa għal kull annimal. Firien maskili Dahl sensittivi għall-melħ, erba' ġimgħat (RGD Cat# 1582190, RRID: RGD_1582190), kienu jinżammu f'faċilità ta 'l-annimali f'gaġeġ regolari (żewġ firien għal kull gaġġa) f'22 ◦C b'ċiklu ta' 14 hlight/10 h dlam. Il-firien inżammu fuq dieta normali tal-melħ u ngħataw ilma tal-vit biex jixorbu ad libitum għal perjodu ta 'akklimazzjoni ta' ħamest ijiem. Il-firien imbagħad ġew maqsuma fi tliet gruppi (n=8), skond id-dieta, fuq perjodu ta' 8 ġimgħat. Skont il-kumitat tal-etika, annimali li wrew sinjali ta’ mard u tbatija kellhom jiġu sagrifikati.
Il-grupp ta 'kontroll kien mitmugħ dieta standard chow tal-firien (2018 SC; Teklad Envigo, Madison, WI, USA) u ilma tal-vit; il-grupp ta 'dieta b'ħafna melħ (HSD) kien mitmugħ b'dieta msaħħan arrikkita mqabbla (4 fil-mija) (TD.120485; Teklad Envigo, Madison, WI, USA) u ilma tal-vit, u l-melatoningrupp kien mitmugħ l-istess dieta tal-melħ arrikkit (4 fil-mija) b'melatonin (M5250; Sigma, Rehovot, Iżrael) (30 mg/kg/jum) fl-ilma tax-xorb tagħhom. Il-piż tal-ġisem u l-konsum tal-ilma ġew imkejla perjodikament. L-ammont korrett ta' melatonin ġie maħlul fil-ħtiġijiet tal-ilma tal-partita għal kull gaġġa sabiex tingħata d-doża korretta għal kull annimal. Jum żero huwa definit bħala l-jum tal-bidu tal-HSD u l-konsum tal-melatonin. Fl-aħħar tal-istudju, il-firien ġew sagrifikati b'anestetizzazzjoni profonda bi 3 fil-mija isoflurane (il-fond tal-anestesija kkonfermat mill-għasir tas-saqajn ta 'wara) u l-kliewiġew maħsuda. Iż-żewġ kliewi tneħħew u tneħħew. Il-kliewi ttieħdu għall-analiżi taċ-ċitometrija tal-fluss ħlief għal bosta porzjonijiet li tneħħew malajr u snap-ffriżati f'N2 likwidu u maħżuna f'-80 ◦C. Frozentissues intużaw għall-estrazzjoni tal-RNA.
Sintomi tal-mard tal-kliewi ta' Cistanche
2.2. PCR ta' traskrizzjoni inversa kwantitattiva f'ħin reali
Il-livelli tal-espressjoni tal-mRNA tal-ġeni ġew aċċertati fil-kliewitessut permezz ta’ reverse transcriptase-PCR kwantitattiv f’ħin reali (qRT-PCR). L-RNA totali ġie estratt mit-tessut tal-kliewi bl-użu ta 'NucleoSpin RNA Kit (MACHERY-NAGEL, Düren, il-Ġermanja). It-traskrizzjoni inversa twettqet bl-użu ta' Applied Biosystems High-Capacity cDNAReverse Transcription Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Ir-reazzjonijiet qRT-PCR twettqu bl-użu tal-Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems, Warrington, UK) u s-sistema tal-PCR Applied Biosystems 7500 f'ħin reali. Il-kundizzjonijiet taċ-ċikli kienu: l-ewwel pass wieħed ta '95 ◦C għal 0.20 min u mbagħad 40 ċiklu ta' stadju ta 'tidwib għal 3 s f'95 ◦C u stadju estiż ta' 30 s f'60 ◦C. Fl-aħħar ta 'l-40 ċiklu, saret curvestage ta' tidwib. L-mRNA tas-subunità taż-zokk laterali tal-proteina ribosomali P0 (Rplp0) intuża bħala kontroll intern. Il-primers huma elenkati fit-Tabella 1.
Tabella 1. Lista ta 'primers tal-firien użati f'dan l-istudju.
2.3. Iżolament taċ-Ċelloli T mill-Kliewi
Wara li tneħħi l-kapsula renali, it-tnejnkliewiġew ikkapuljati u mdawrin bil-planġer ta' siringa ta' 2 mL permezz ta' passatur taċ-ċelluli ta' 100 µm f'RPMI 1640 li fih 2 mML-glutamina, 10 fil-mija FBS, 10 ug/mL DNase 1 (teknoloġiji taċ-Ċelloli Staminali, Cambridge, MA , USA) u 0.1 fil-mija collagenase tip IV (CLS 4, Worthington Decatur, AL, USA). Is-soluzzjoni ġiet inkubata għal 25 min f'37 ◦C. Soluzzjoni tal-ħasil (DPBS/2 fil-mija FBS/2 mM EDTA) ġiet imbagħad miżjuda mal-omoġenat tal-kliewi biex tilħaq 45 mL u ġiet iffiltrata permezz ta' cellstrainer ta' 70 µm. Is-soluzzjoni ġiet ċentrifugata f'400 × g/7 min. u l-gerbub ġie sospiż f'soluzzjoni tal-ħasil ta' 5 mL u ffiltrat permezz ta' passatur taċ-ċelluli ta' 40 µm u reċenterfuġjat 400 × g/7 min. Il-pellet ġie sospiż mill-ġdid fi 3 ml FBS (10 mM EDTA) u saffi Histopaque-1083 (Sigma, Rehovot, Iżrael), u ċentrifugat f'20 ◦C f'400 × g/30 min bil-brejk mitfi. Is-saff taċ-ċelluli mononukleari li jistrieħu 'l fuq mill-Histopaque tneħħa, maħsul b'soluzzjoni tal-ħasil darbtejn, u sospiż f'soluzzjoni tal-ħasil ta' 5 mL għal analiżi flowcytometric.
2.4. Ċitometrija tal-Fluss
Minn kull grupp,kliewiminn 5-7 firien ġew analizzati. Għal kull kampjun, ittieħdu 1 × 106ċellula. Ċelluli mononukleari iżolati ġew inkubati b'markaturi extraċellulari: anti-CD3 (Thermo Fisher Scientific Cat# 12-0030-82, RRID:AB_465493) u l-kontroll isotip tiegħu (Thermo Fisher Scientific Cat# 12-4742-41, RRID :AB_10753770), anti-CD4 (Thermo FisherScientific Cat# 17-0040-80, RRID:AB_1210581) u l-kontroll tal-isotip tiegħu (Thermo Fisher Scientific Cat# 17-4724-81, RRID: AB_470188), anti-CD8 (Thermo Fisher Scientific Cat# 25-0084-82, RRID:AB_10548361) u l-kontroll tal-isotip tiegħu (Thermo Fisher Scientific Cat# 25-4714-80,RRID: AB_657914). Iċ-ċelloli kollha ġew analizzati permezz taċ-ċitometrija tal-fluss (BD FACSCalibur Flow Cytometry System, RRID: SCR_000401) bl-użu tas-softwer FlowJo (FlowJo, RRID: SCR-008520).
Cistanche-funzjoni tal-kliewi
2.5. Kultura taċ-Ċelloli
Il-linja taċ-ċelluli tal-far mesanġjali, RMC (ATCC Cat# CRL{{0}}, RRID: CVCL_0506), inkisbet minn ATCC®. Iċ-ċellula ġiet ikkultivata fil-mezz Eagle modifikat ta' Dulbecco (01-055-1A, industriji bijoloġiċi, Beit HaEmek, Iżrael) b'4 mM L-glutamina aġġustat biex ikun fih 1.5 g/L bikarbonat tas-sodju u 4.5 g/L glucose u supplimentat b' 0.4 mg/mLG418 u 15 fil-mija serum bovin tal-fetu. Melatonin inkiseb minn Sigma (M5250 Rehovot, Iżrael). A 250 mMmelatoninl-istokk sar fl-etanol. Iċ-ċelloli ġew ikkultivati f'kundizzjonijiet normali jew b'ħafna melħ (biż-żieda ta' 80 mM NaCl mal-medium) mingħajr jew b'melatonin (0.5 mM). It-trattament tal-melatonin kien ikkalkolat 45 min qabel ma żżid NaCl mal-medju. Allexperiments kienu fi pjanċi ta '6 bir bi 3 × 105 ċelluli għal kull bir u saru minn 6 provi indipendenti.
2.6. Analiżi Statistika
Id-dejta hija ppreżentata bħala medja ± SEM Analiżi statistiċi saru bl-użu ta' IBMSPSS Statistics, RRID: SCR_019096. Analiżi one-way tal-varjanza (ANOVA) u l-metodu posthoc Tukey eżaminaw id-differenzi bejn il-gruppi. Id-dejta tal-qPCR f'ħin reali ġiet analizzata bl-użu ta' DataAssist, RRID: SCR_014969.
3. Riżultati
3.1. Melatonin Tipproteġi l-Firien li Jikkunsmaw HSD
L-età tal-firien matul dan l-istudju kienet 4-13-il ġimgħa. F'din l-età, il-benessri tal-firien huwa indikat minn żieda fil-piż li kienet esibita mill-grupp ta 'kontroll [17]. Madankollu, l-HSDgroup laħaq plateau fil-jum 30 u ż-żieda ta 'melatoninlill-HSD tejbet dan il-fenomenu (Figura 1A). Il-grupp HSD wera rata ta 'mortalità għolja, fejn 50 fil-mija tal-firien mietu jew kellhom kundizzjoni klinika li kienet teħtieġ ewtanasja skont ir-regoli tal-kumitat tal-animali, matul il-perjodu sperimentali. Is-supplimenti tal-melatonin prevenuti l-mortalità tal-firien b'mod sinifikanti, fejn wieħed biss minn tmien firien miet f'jum 58, fit-tmiem tal-perjodu sperimentali (Figura 1B).
Figura 1.Melatonintjiebet il-pressjoni tad-demm u s-sopravivenza fl-HSD. Il-firien DSS ġew ittrattati għal 9 ġimgħat b'HSD bil-melatonin u mingħajrhom. Dieta b'ħafna melħ naqqset il-piż tal-ġisem minn jum 36 u melatonin immodera dan l-effett (A). L-HSD żied ir-rata ta' mortalità minn jum 40. It-trattament ta 'HSD-fedrats b'melatonin itejjeb is-sopravivenza tagħhom. (B). (n=8) *-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 melħ u melħ flimkien ma' melatonin kontra kontroll. #-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 melħ kontra l-kontroll u l-melħ flimkien mal-melatonin. HSD—dieta b'ħafna melħ.
3.2. Melatonin Tipprevjeni l-Infiltrazzjoni taċ-Ċelloli T tal-Kliewi Indotta minn HSD
Aħna iżolati ċelluli mill-kliewiu gated minnhom għall-markatur taċ-ċelluli T, CD3. CD3 flimkien ma 'ċelluli kienu gated għal CD4 u CD8. Kemm CD3 plus CD4 plus u CD3 plus CD8 plus kienu ogħla b'mod sinifikanti fl-HSD (5.18 ± 1.62 u 4.6 ± 0.75 fil-mija, rispettivament) meta mqabbla mal-kontroll (0.16 ± {{18} }.{{20}}2 u 0.95 ± 0.15 fil-mija , rispettivament) umelatoninsupplimentazzjoni għall-HSD naqqset kemm CD3 flimkien ma CD4 plus u CD3 flimkien ma CD8 flimkien ma 'ċelluli lura għal-livelli ta' kontroll (0.68 ± 0.21 u 1.37 ± 0.45, rispettivament) (Figura 2A–D).
Figura 2. Melatonin jipprevjeni l-infiltrazzjoni taċ-ċelluli T lejn il-kliewi. Iċ-ċelluli T ġew iżolati mill-kliewi tal-firien u kienu gated għal CD3. Iċ-ċelloli CD3-pożittivi kienu gated għal CD4 u CD8. Melatonin (C) naqqas kemm CD3 plus CD4 plus u CD3 flimkien ma CD8 plus meta mqabbla ma 'HSD mingħajr melatonin (B) bl-ebda differenza mill-grupp ta' kontroll (A). Analiżi għall-firien kollha tidher f'(D) (n=7–8). HSD—dieta b'ħafna melħ. *-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 kontra l-kontroll. #-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 kontra melħ flimkien ma' melatonin.
3.3. Melatonin Inaqqas Ċerti Chemokines tal-Kliewi li Ġew Irregolati fl-HSD
Ir-reklutaġġ ta 'ċelluli T għal tessuti infjammatorji huwa regolat minn chemokineexpression lokali. Aħna, għalhekk, kejlu l-espressjoni ta 'żewġ familji ta' chemokine fil-firienkliewi: il-familja tal-ligand tal-chemokine (CXC motif) (CXCL) u l-familja tal-ligand tal-chemokine (C-Cmotif) (CCL).
Għall-familja CXCL, CXCL 9, 10, u 11 li jattiraw ċelluli T lejn it-tessut fil-mira tagħhom billi jużaw ir-riċettur CXCR3 fuq iċ-ċelluli T, kienu rregolati b'mod sinifikanti fil-firien HSD. Is-supplimenti ta'melatoninlill-HSD naqqsu l-espressjoni tagħhom lura għal-livelli ta 'kontroll. L-istess mudell ġie skopert għal CXCL 1 u 16. Madankollu, għal CXCL12, l-ebda upregulationwas skoperta fl-HSD (Figura 3A).
Għall-familja CCL, CCL 2, 4, 12, 17, 19, u CX3CL1 ma wrew l-ebda regolazzjoni 'l fuq fl-HSD. Għal CCL7, upregulation sinifikanti fl-HSD u sinifikanti downregulation biż-żieda tamelatoningħall-HSD ġiet skoperta (Figura 3B).
Figura 3. Upregulation oftal-kliewikimokinif'HSD bi u mingħajr melatonin. L-espressjoni ta 'chemokine (CXC motif) ligand (CXCL) familja (A), chemokine (CC motif) ligand familja, u CX3CL1 (B) ġew determinati fil-firien. (n=7–8) *-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 kontra l-kontroll. #-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 kontra melħ flimkien ma' melatoning. HSD—dieta b'ħafna melħ.
3.4. L-Effett Dirett tal-Melatonin fuq il-Linja taċ-Ċelloli Mesangjali RMC
Imbagħad iffukajna fuq CXCL9, 10, u 11 li jattiraw ċelluli T billi jorbtu mar-riċettur CXCR3. Iddeterminajna l-espressjoni ta 'dawnkimokinif'ċelloli RMC li huma linja taċ-ċelluli mesanġjali tal-firien.
Aħna kkurajna ċ-ċelloli bi 80 mM NaCl mingħajr u b'0.5 mMmelatonin. Din il-konċentrazzjoni ta 'NaCl żiedet b'mod sinifikanti l-espressjoni ta' CXCR10 b'2.4 ± 0.26-darbiet meta mqabbla mal-kontroll, u ż-żieda ta '0.5 mM melatonin naqset b'mod sinifikanti din l-espressjoni għal 1.4 ± 0.{{10}}darbiet meta mqabbla mal-kontroll (Figura 4A). Għal CXCL11, 80 mM NaCl żiedu b'mod sinifikanti l-espressjoni bi 3 ± 0.48-darbiet meta mqabbla mal-kontroll, u ż-żieda ta '0.5 mM melatonin naqqset b'mod sinifikanti din l-espressjoni għal 1.8 ± 0.{{22 }} darbiet meta mqabbla mal-kontroll (Figura 4B). CXCL9 ma ġiex skopert fiċ-ċelloli RMC.
Figura 4. Il-melħ irregola l-espressjoni CXCL10 u CXCL11 f'linja taċ-ċelluli mesanġjali fejn it-trattament tal-melaton irregola l-espressjoni tiegħu. RMC (linja taċ-ċelluli mesanġjali tal-firien) ġew ittrattati b'melħ80 mM bi u mingħajr 0.5 mM melatonin. CXCL10 (A) u CXCL11 (B) ġew regolati 'l fuq permezz ta' trattament tal-melħ u ż-żieda ta'melatonintnaqqas din ir-regolamentazzjoni. Il-graffs jippreżentaw 6 provi indipendenti. *-p Inqas minn jew ugwali għal 0.001 kontra kontroll #-p Inqas minn jew ugwali għal 0.005 kontra melħ 80 mM u melatonin 0.5 mM. $-p Inqas minn jew ugwali għal 0.05 kontra melħ 80 mM u melatonin 0.5 mM.
4. Diskussjoni
L-effett ta 'benefiċċju ta'melatoninfuq HTN intwera fi studji preċedenti u ġie ssuġġerit bħala kors possibbli ta 'azzjoni għal HTN reżistenti għat-trattament [18]. Fl-ewwel studju tagħna, aħna ffukajna fuq l-istress ossidattiv u żvelaw li l-melatonin inaqqas l-istress ossidattiv indott minn HSD. Fl-istudju preżenti, iffukajna fuq l-effett immuni adattiv u wrejna li l-melatonin itejjeb is-sopravivenza tal-firien mitmugħa bl-HSD. Dan l-effett huwa assoċjat ma 'tnaqqis fiċ-ċelluli T li jinfiltraw fil-kliewi u t-tnaqqis ta'kliewiespressjoni tal-kimokini.
Dejta storika turi li l-firien DSS li jikkunsmaw HSD jiżviluppaw HTN sever u juru rati ogħla ta' mortalità [19]. Dahl innifsu rrapporta waqt li stabbilixxa l-mudell li meta l-firien DSS tqiegħdu fuq HSD (8 fil-mija NaCl) fil-ftim (età ta’ 21-23 jum), żviluppaw malajr HTN u kollha mietu sas-16-il ġimgħa ta’ għalf tal-melħ [20]. Lateron, wara xi modifiki tar-razza, Rapp et al. irrapporta li l-firien kollha kienu mejta fi żmien tmien ġimgħat mill-HSD (8 fil-mija NaCl) [21]. Il-firien fl-istudju tagħna kellhom rata għolja ta 'mortalità iżda ma laħqux il-100 fil-mija, probabbilment minħabba l-persentaġġ aktar baxx (4 fil-mija) ta' melħ fid-dieta tagħhom. Madankollu, huwa ovvju limelatoninsupplimentazzjoni prevenuta b'mod sinifikanti l-mortalità tar-rati.
Iż-żieda fil-piż hija marka tal-benessri tal-firien fl-età ta' 4-13-il ġimgħa. DSS ratsoriginate minn Sprague Dawley, li hija razza karatterizzata tajjeb. Fl-età tal-firien li użajna fl-esperimenti tagħna, il-firien suppost se jżidu l-piż b'mod konsistenti [22].F'ħafna studji fuq l-annimali, it-tnaqqis fil-piż huwa meqjus bħala wieħed mill-"punti finali" tal-esperimenti [23]. Minn diversi studji, huwa ċar li HSD fil-firien DSS jirriżulta f'rati ta 'żieda fil-piż aktar baxxi meta mqabbla mal-kontrolli [24,25]. F'konformità ma' dawn l-istudji, osservajna wkoll differenzi fil-piż bejn il-gruppi. Hawnhekk, il-firien ma żdiedux fil-piż wara erba 'ġimgħat ta' HSD. Melatonin waqqaf dan l-effett tal-HSD ukoll, peress li l-firien li ġew ittrattati bil-melatonin komplew iżidu l-piż, għalkemm inqas mill-kontrolli.
Il-ħila ta'melatoninbiex titnaqqas il-pressjoni tad-demm f'mudelli ta 'annimali ġiet skoperta fl-aħħar tas-snin sebgħin tas-seklu 20 [26-28]. Minn dakinhar, kien irrappurtat f'diversi mudelli oħra, bħal li dieta b'ħafna fruttosju tinduċi sindromu metaboliku fi firien b'pressjoni għolja spontanja [29,30]. L-istudji tagħna f'dan il-qasam huma l-ewwel li juru li l-melatonin għandu rwol fl-HTN indott mill-melħ billi jipprevjeni ħsara lill-organi u jnaqqas il-mortalità.
F'dan l-istudju, wrejna li HSD jinduċi infiltrazzjoni tal-limfoċiti T għall-kliewi, proċess li ġie deskritt fil-firien DSS prinċipalment mill-grupp ta 'Matson [31-33]. Ir-rwol ċentrali ta' dan il-proċess ta 'infiltrazzjoni fil-mudell DSS intwera minn studju reċenti li osserva li l-firien DSS defiċjenti taċ-ċelluli T huma protetti minn HTN indott minn HSD u trasferiment ta' splenocyte jaggrava l-HTN sensittiv għall-melħ [34].
Melatonin jista 'jaffettwa ċ-ċelluli T f'diversi aspetti (għal reviżjoni, ara [35]). Dan l-istudju wera għall-ewwel darba limelatonininaqqas l-attrazzjoni ta 'kemm CD4 plus u CD8 plus Tcells għall-kliewifl-HSD. Dan l-effett ta 'melatonin jista' jkun il-mekkaniżmu li jenfasizza l-effett ta 'benefiċċju tiegħu f'dan il-mudell.
Il-kapaċità tal-melatonin li tnaqqas l-infiltrazzjoni taċ-ċelluli T ġiet deskritta fil-mudell tal-ġrieden sperimentali tal-enċefalomielite awtoimmuni (EAE). F'EAE, il-melatonin intwera li jnaqqas l-infiltrazzjoni taċ-ċelluli CD4 flimkien ma 'T u ċelluli Th17 fis-CNS [36,37].
L-attrazzjoni taċ-ċelluli T lejn tessut speċifiku hija regolata prinċipalment minn konċentrazzjonijiet għolja lokali ta'kimokinili huma ċitokini kimotattiċi li jikkontrollaw il-mudelli migratorji u l-ippożizzjonar taċ-ċelloli immuni. Żewġ familji kbar ta 'chemokine li jinduċu l-infiltrazzjoni taċ-ċelluli T huma l-familji ta' chemokine CXC motif ligand (CXCL) u CC motif ligand (CCL) [38].
Cistanche għat-titjib tal-funzjoni ħażina tal-kliewi
Fl-istudju tagħna, ma sibniex mudell kostanti fir-rispons tal-familja CCL għal HSD u għalmelatonin. Minn disgħakimokinif'din il-familja, CCL7 u CLL21 biss kienu osservati biex iżidu l-espressjoni tagħhom minħabba HSD, u s-supplimentazzjoni ta 'melatonin reducedit. HSD żied l-espressjoni ta' CCL3, iżda ma nstab l-ebda tnaqqis fil-firien ittrattati b'melatonin. Studju reċenti fl-istess mudell wera li HSD jirregola CCL2 inthekliewibilli tuża l-metodu RNA-Seq [39]. Madankollu, dan l-istudju ttestja l-livelli nhar it-3 u l-21 ta’ wara li bdiet id-dieta. Fl-istudju tagħna, ittestjajna l-livelli wara tmien ġimgħat. Huwa possibbli li l-espressjoni tal-chemokine tinbidel matul il-perjodu HSD.
Bil-maqlub, il-livelli tal-biċċa l-kbira tal-familja CXCL, inklużi CXCL 1, 9, 10, 11, u 16, żdiedu fil-firien ittrattati bl-HSD umelatoninis-supplimentazzjoni abolit dan iż-żieda. CXCL12 biss ma wera l-ebda żieda b'reazzjoni għal HSD.
CXCL9, CXCL10, u CXCL11, imsejjħa "ligandi tar-riċettur 3 tal-chemokine CXC li jinduċibbli mill-interferon", huma indotti minn IFN- u huma l-ligandi tar-riċettur tal-chemokine CXC 3(CXCR3). Studji in vivo wrew l-importanza tagħhom fl-attivazzjoni u r-reklutaġġ ta 'limfoċiti T għall-organu fil-mira [40-42]. Youn et al. wera, f'pazjenti umani bi pressjoni għolja, kemm infiltrazzjoni renali taċ-ċelluli T kif ukoll livelli elevati ta' ċirkolazzjoni tat-tliet CXCR3 kollha.kimokini, li jissuġġerixxi li CXCR3 u l-ligands tiegħu huma rilevanti għaċ-ċelloli T involuti fl-HTN tal-bniedem [43]. Studju ieħor wera li CXCL10 huwa elevat f'pazjenti bi pressjoni għolja, u l-livelli tiegħu huma korrelatati mal-valuri tal-pressjoni tad-demm tagħhom [44].
Minħabba dawn l-istudji, iffukajna fuq CXCL9, CXCL10, u CXCL11. Aħna kkultivaw il-linja taċ-ċelluli tal-far mesangjali u ttrattatihom b'80 mM NaCl u 0.5 mM melatonin. Sibna li CXCL 10 u 11 huma regolati 'l fuq fiċ-ċelloli u l-melatonin jabolixxi din l-elevazzjoni. Ir-riżultati tagħna jindikaw li l-effett tal-melħ fl-elevazzjoni ta 'CXCL 10 u 11, u l-effett oppost ta'melatonin, it-tnejn ġew skoperti direttament fiċ-ċelloli mezanġjali. B'kuntrast, CXCL9 ma nstabitx f'dawn iċ-ċelloli.
L-istudju tagħna għandu limitazzjonijiet. Fir-riżultati FACS tagħna, ħafna mis-CD3 plus kienu doublenegative kemm għal CD4 kif ukoll għal CD8. L-istess riżultati dehru fl-istudju ta' Mattson mill-2010 [31]. Madankollu, fi studji aktar reċenti mill-grupp ta' Mattson, iċ-ċelluli CD3 flimkien ma' CD4-CD{8-kienu ftit [32,33,45,46]. It-tnaqqis sinifikanti fiċ-ċelluli CD3 negattivi doppji jista 'jkun riżultat taż-żieda tal-markatur CD45 u l-analiżi biss taċ-ċelloli li kienu CD45pożittivi, li huwa dak li sar fl-istudji aktar tard ta' Mattson. Huwa possibbli li l-popolazzjoni kbira tas-CD3 plus CD4-CD8- hija artifatt. Madankollu, l-ebda artifact mhu magħruf għall-popolazzjoni taċ-ċelluli CD3 plus CD4 plus u CD3 plus CD8 plus.
5. Konklużjonijiet
Bħala konklużjoni, dieta b'ħafna melħ hija assoċjata ma 'infiltrazzjoni taċ-ċelluli T fil-kliewital-firien DSS. Il-melħ żied ukoll l-espressjoni ta 'kimoattratti speċifiċi taċ-ċelluli T fil-kliewi. Trattament mamelatonin(30 mg/kg/jum) neħħew dawn l-effetti (melatonininaqqas l-infiltrazzjoni kkaġunata mill-HSD taċ-ċelluli T fil-kliewi flimkien ma’ tnaqqis fl-espressjoni ta’ chemokine ligand CXCL3).
L-istudju in vitro tagħna juri li l-melħ u l-melatonin jistgħu jirregolaw l-espressjoni tal-kimoattrazzjoni billi jaffettwaw direttamentkliewiċelloli.
Kontribuzzjonijiet tal-Awtur: Conceptualization, AL; analiżi formali, AB u RK; investigazzjoni, RK;metodoloġija, AB u AL; kitba—abbozz oriġinali, AB u AL; kitba—reviżjoni u editjar, YSand EG L-awturi kollha qraw u qablu mal-verżjoni ppubblikata tal-manuskritt.
Finanzjament: Din ir-riċerka ma rċeviet l-ebda finanzjament estern.
Dikjarazzjoni tal-Bord ta 'Reviżjoni Istituzzjonali: Il-protokoll ta' studju ġie approvat mill-kumitat tal-animali istituzzjonali fiċ-ċentru mediku ta 'Sheba, protokoll Nru 1219/19/ANIM u Protokoll tal-Ministeru tas-Saħħa Nru 16418.
Dikjarazzjoni ta' Kunsens Informat: Mhux applikabbli.
Dikjarazzjoni tad-Disponibbiltà tad-Data: Id-dejta ppreżentata f'dan l-istudju hija disponibbli fuq talba mill-awtur korrispondenti.
Rikonoxximenti: L-awturi jirringrazzjaw lil Zehava Shabtai għall-appoġġ tekniku eċċellenti tagħha u lil Michael Kanovsky għas-servizzi editorjali tiegħu.
Kunflitti ta' Interess: L-awturi ma jiddikjaraw l-ebda kunflitt ta' interess.
Referenzi
1. Olsen, MH; Angell, SY; Asma, S.; Boutouyrie, P.; Burger, D.; Chirinos, JA; Damasceno, A.; Delles, C.; Gimenez-Roqueplo, AP;Hering, D.; et al. Sejħa għall-azzjoni u strateġija għall-kors tal-ħajja biex tindirizza l-piż globali tal-pressjoni tad-demm miżjuda fuq il-ġenerazzjonijiet attwali u futuri: Il-Kummissjoni Lancet dwar l-ipertensjoni. Lancet 2016, 388, 2665–2712. [CrossRef]
2. O'Brien, E. Il-Kummissjoni Lancet dwar l-ipertensjoni: L-indirizzar tal-piż globali tal-pressjoni tad-demm miżjuda fuq il-ġenerazzjonijiet attwali u futuri. J. Clin. Hypertens 2017, 19, 564–568. [CrossRef]
3. O'Donnell, M.; Mente, A.; Yusuf, S. Konsum tas-sodju u saħħa kardjovaskulari. Ċirk. Riż. 2015, 116, 1046–1057. [CrossRef]
4. Schiffrin, EL Mekkaniżmi ta 'remodeling ta' arterji żgħar, terapija kontra l-pressjoni għolja u s-sistema immuni fl-ipertensjoni.Clin. Investig. Med. 2015, 38, E394–E402. [CrossRef]
5. Guzik, TJ; Hoch, NE; Kannella, KA; McCann, LA; Rahman, A.; Dikalov, S.; Goronzy, J.; Weyand, C.; Harrison, DG Rwol tat-Tcell fil-ġenesi ta 'pressjoni għolja indotta minn angiotensin II u disfunzjoni vaskulari. J. Exp. Med. 2007, 204, 2449–2460. [CrossRef][PubMed]
6. Kleinewietfeld, M.; Manzel, A.; Titze, J.; Kvakan, H.; Yosef, N.; Linker, RA; Muller, DN; Hafler, DA Il-klorur tas-sodju jmexxi mard awtoimmuni bl-induzzjoni ta 'ċelluli TH17 patoġeniċi. Natura 2013, 496, 518–522. [CrossRef]
7. Mattson, DL; Lund, H.; Guo, C.; Rudemiller, N.; Geurts, AM; Jacob, H. Mutazzjoni ġenetika tar-rikombinazzjoni li tattiva l-ġene 1 inDahl firien sensittivi għall-melħ ittaffi l-ipertensjoni u l-ħsara renali. Em. J. Physiol. Regul. Integer. Komp. Physiol. 2013, 304, 407–414.[CrossRef]
8. Mattson, DL Infiltrazzjoni ċelluli immuni fil-kliewifi pressjoni għolja sensittiva għall-melħ u ħsara fil-kliewi. Em. J. Physiol. Ren. Physiol.2014, 307. [CrossRef] [PubMed]
9. Lu, X.; Crowley, SD Infjammazzjoni fi Pressjoni Għolja Sensittiva għall-Melħ u Ħsara Renali. Curr. Hypertens Rep 2018, 20. [CrossRef][PubMed]
10. Baker, J.; Kempinski, K. Rwol tamelatoninfir-regolazzjoni tal-pressjoni tad-demm: Aġent miżjud kontra l-pressjoni għolja. Clin. Exp. Pharm.Physiol. 2018, 45, 755–766. [CrossRef] [PubMed]
11. Grossman, E.; Laudon, M.; Zisapel, N. Effett ta 'melatonin fuq il-pressjoni tad-demm bil-lejl: Meta-analiżi ta' provi kkontrollati randomised. Vasc. Ġestjoni tar-Riskju tas-Saħħa. 2011, 7, 577–584. [CrossRef] [PubMed]
12. Pozo, D.; Delgado, M.; Fernandez-Santos, JM; Calvo, JR; Gomariz, RP; Martin-Lacave, I.; Ortiz, GG; Guerrero, JM Espressjoni tal-mRNA tar-riċettur Mel1a-melatonin f'sottosettijiet T u B ta 'limfoċiti mit-timu tal-firien u l-milsa. Faseb J. Off. Publ. Fed.Am. Soc. Exp. Biol. 1997, 11, 466–473. [CrossRef]
13. Guerrero, JM; Pozo, D.; García-Mauriño, S.; Osuna, C.; Molinero, P.; Calvo, JR Involviment ta' riċetturi nukleari fil-produzzjoni msaħħa ta' IL-2 mill-melatonin fiċ-ċelloli Jurkat. Ann. NY Acad. Sci. 2000, 917, 397–403. [CrossRef] [PubMed]
14. Farez, MF; Mascanfroni, ID; Méndez-Huergo, SP; Yeste, A.; Murugaiyan, G.; Garo, LP; Balbuena Aguirre, ME; Patel, B.;Ysrraelit, MC; Zhu, C.; et al.MelatoninJikkontribwixxi għall-Istaġjonalità ta 'Rikaduti ta' Sklerożi Multipla. Ċellula 2015, 162, 1338–1352.[CrossRef] [PubMed]
15. Kirabo, A.; Fontana, V.; de Faria, APC; Loperena, R.; Galindo, CL; Wu, J.; Bikineyeva, AT; Dikalov, S.; Xiao, L.; Chen, W.;et al. Proteini DC modifikati isoketal jattivaw iċ-ċelluli T u jippromwovu l-ipertensjoni. J. Clin. Investig. 2014, 124, 4642–4656. [CrossRef][PubMed]
16. Leibowitz, A.; Volkov, A.; Voloshin, K.; Shemesh, C.; Barshack, I.; Grossman, E. Melatonin jipprevjenikliewikorriment f'mudell ta 'pressjoni għolja kkaġunata minn dieta ta' melħ għolja billi tnaqqas l-istress ossidattiv. J. Pineal Res. 2016, 60, 48–54. [CrossRef] [PubMed]
17. Hawkins, P.; Morton, DB; Burman, O.; Dennison, N.; Sanza, P.; Jennings, M.; Lane, S.; Middleton, V.; Roughan, JV; Wells, S.;et al. Gwida għad-definizzjoni u l-implimentazzjoni ta' protokolli għall-valutazzjoni tal-benessri tal-annimali tal-laboratorju: Il-ħdax-il rapport tal-Grupp ta' Ħidma Konġunt BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW dwar ir-Raffinar. Lab. Anim. 2011, 45, 1–13. [CrossRef]
18. Simko, F.; Reiter, RJ; Paulis, L.Melatoninbħala alternattiva razzjonali fit-trattament konservattiv ta 'pressjoni għolja reżistenti.Hypertens Res. 2019, 42, 1828–1831. [CrossRef] [PubMed]
19. Rapp, JP Dahl Firien Suxxettibbli u Reżistenti għall-Melħ. Pressjoni għolja 1982, 4, 753–763. [CrossRef]
20. Dahl, LK; Knudsen, KD; Heine, MA; Leitl, GJ Effetti ta 'inġestjoni kronika ta' melħ eċċessiv. Modifika ta 'pressjoni għolja sperimentali fil-far b'varjazzjonijiet fid-dieta. Ċirk. Riż. 1968, 22, 11–18. [CrossRef] [PubMed]
21. Rapp, JP; Dene, H. Żvilupp u karatteristiċi ta 'razez inbred ta' firien Dahl sensittivi għall-melħ u reżistenti għall-melħ. Hypertens 1985,7, 340–349. [CrossRef]
22. Brower, M.; Grazzja, M.; Kotz, CM; Koya, V. Analiżi komparattiva tal-karatteristiċi tat-tkabbir tal-firien Sprague Dawley miksuba minn sorsi differenti. Lab. Anim Res. 2015, 31, 166–173. [CrossRef]
23. Talbot, SR; Biernat, S.; Bleich, A.; van Dijk, RM; Ernst, L.; Häger, C.; Hilgers, SOA; Koegel, B.; Koska, I.; Kuhla, A.; et al.Defining tat-tnaqqis tal-piż tal-ġisem bħala punt ta' tmiem uman: Valutazzjoni kritika. Lab. Anim 2020, 54, 99–110. [CrossRef] [PubMed]
24. Geschka, S.; Kretschmer, A.; Sharkovska, Y.; Evgenov, OV; Lawrenz, B.; Hucke, A.; Hocher, B.; Stasch, J.-P. L-istimulazzjoni tal-guanylatecyclase solubbli tipprevjeni r-rimodelazzjoni tat-tessut fibrotiku u ttejjeb is-sopravivenza fil-firien Dahl sensittivi għall-melħ. PLoS ONE 2011, 6,e21853. [CrossRef] [PubMed]
25. Wang, Y.; Mu, JJ; Liu, FQ; Ren, KY; Xiao, HY; Yang, Z.; Yuan, ZY Transizzjoni epiteljali għal mesenchymal indotta mill-melħ fil-firien sensittivi għal Dahlsalt hija dipendenti fuq pressjoni tad-demm elevata. Braz. J. Med. Biol. Riż. Dun Bras. Pesquisa Med. E Biol. 2014, 47, 223–230.[CrossRef]
26. Holmes, SW; Sugden, D. Proċedimenti: L-effett tal-melatonin fuq pressjoni għolja indotta mill-pinealektomija fil-far. Br. J. Pharm.1976, 56, 360P–361P.
27. Zanoboni, A.; Zanoboni-Muciaccia, W. Pressjoni għolja sperimentali fil-firien pinealectomized. Ħajja Sci. 1967, 6, 2327–2331. [CrossRef]
28. Zanoboni, A.; Forni, A.; Zanoboni-Muciaccia, W.; Zanussi, C. Effett tal-pinealektomija fuq il-pressjoni tad-demm arterjali u l-konsum tal-ikel u l-ilma fil-far. J. Endocrinol. Investig. 1978, 1, 125–130. [CrossRef] [PubMed]
29. Pechánová, O.; Zicha, J.; Paulis, L.; Zenebe, W.; Dobesová, Z.; Kojsová, S.; Jendeková, L.; Sládková, M.; Dovinová, I.; Simko, F.;et al. L-effett ta 'N-acetylcysteine u melatonin fi firien adulti b'pressjoni għolja spontanjament bi pressjoni għolja stabbilita. Eur. J.Pharmcol. 2007, 561, 129–136. [CrossRef] [PubMed]
30. Leibowitz, A.; Peleg, E.; Sharabi, Y.; Shabtai, Z.; Shamiss, A.; Grossman, E. Ir-rwol tamelatoninfil-patoġenesi tal-pressjoni għolja fil-firien bis-sindromu metaboliku. Em. J. Hypertens 2008, 21. [CrossRef] [PubMed]
31. De Miguel, C.; Das, S.; Lund, H.; Mattson, DL T limfoċiti medjatur ipertensjoni ukliewiħsara f'sensitiverati tal-melħ Dahl. Em. J. Physiol. Regul. Integer. Komp. Physiol. 2010, 298, R1136–R1142. [CrossRef] [PubMed]
32. Evans, LC; Petrova, G.; Kurth, T.; Yang, C.; Bukowy, JD; Mattson, DL; Cowley, AW Żieda fil-Pressjoni tal-Perfużjoni DrivesRenal T-Cell Infiltrazzjoni fil-Firien Sensittivi għall-Melħ Dahl. Pressjoni għolja 2017, 70, 543–551. [CrossRef]
33. Abais-Battad, JM; Alsheikh, AJ; Pan, X.; Fehrenbach, DJ; Dasinger, JH; Lund, H.; Roberts, ML; Kriegel, AJ; Cowley, AWJ;Kidambi, S.; et al. Effetti tad-dieta fuq Pressjoni għolja sensittiva għall-melħ ta' Dahl, Ħsara fil-kliewi, u t-Transcriptome tal-Limfoċiti T. Hypertens 2019, 74, 854–863. [CrossRef] [PubMed]
34. Fehrenbach, DJ; Dasinger, JH; Lund, H.; Zmaj, J.; Mattson, DL Splenocyte transfer jaggrava pressjoni għolja inrats sensittivi għall-melħ. Exp. Physiol. 2020, 105, 864–875. [CrossRef] [PubMed]
35. Ren, W.; Liu, G.; Chen, S.; Yin, J.; Wang, J.; Tan, B.; Wu, G.; Bazer, FW; Peng, Y.; Li, T.; et al. Is-sinjalar tal-melatonin fiċ-ċelluli T: Funzjonijiet u applikazzjonijiet. J. Pineal Res. 2017, 62. [CrossRef]
36. Álvarez-Sánchez, N.; Cruz-Chamorro, I.; López-González, A.; Utrilla, JC; Fernández-Santos, JM; Martínez-López, A.; Lardone,PJ; Guerrero, JM; Carrillo-Vico, A. Melatonin tikkontrolla l-enċefalomjelite awtoimmuni sperimentali billi tbiddel il-bilanċ T effector/regolatorju. Imġieba tal-moħħ. Immun. 2015, 50, 101–114. [CrossRef]
37. Chen, S.-J.; Huang, S.-H.; Chen, J.-W.; Wang, K.-C.; Yang, Y.-R.; Liu, P.-F.; Lin, G.-J.; Sytwu, H.-K.Melatoninittejjeb l-espressjoni ta 'interleukin 10 u irażżan il-kimotassi biex tinibixxi l-infjammazzjoni in situ u tnaqqas is-severità ta' awtoimmuneencephalomyelitis sperimentali. Int. Immunofarmakol. 2016, 31, 169–177. [CrossRef] [PubMed]
38. Griffith, JW; Sokol, CL; Luster, ADChemokinesu riċetturi tal-kimokini: ċelluli ta 'pożizzjonament għad-difiża u l-immunità tal-ospitanti.Annu. Dun Immunol. 2014, 32, 659–702. [CrossRef] [PubMed]
39. Alsheikh, AJ; Dasinger, JH; Abais-Battad, JM; Fehrenbach, DJ; Yang, C.; Cowley, AWJ; Mattson, DL CCL2 jimmedja l-infiltrazzjoni bikrija tal-lewkoċiti renali waqt pressjoni għolja sensittiva għall-melħ. Em. J. Physiol. Ren. Physiol. 2020, 318, F982–F993. [CrossRef][PubMed]
40. Liu, L.; Callahan, MK; Huang, D.; Ransohoff, RM Chemokine receptor CXCR3: Enigma mhux mistennija. Curr. Fuq. Dev. Biol.2005, 68, 149–181. [CrossRef] [PubMed]
41. Groom, JR; Luster, AD CXCR3 ligands: funzjonijiet żejda, kollaborattivi u antagonistiċi. Immunol. Cell Biol. 2011, 89,207–215. [CrossRef] [PubMed]
42. Van Raemdonck, K.; Van den Steen, PE; Liekens, S.; Van Damme, J.; Struyf, S. CXCR3 ligands fil-mard u t-terapija. CytokineGrowth Factor Rev 2015, 26, 311–327. [CrossRef] [PubMed]
43. Youn, J.-C.; Yu, HT; Lim, BJ; Koh, MJ; Lee, J.; Chang, D.-Y.; Choi, YS; Lee, S.-H.; Kang, S.-M.; Jang, Y.; et al. ImmunosenescentCD8 flimkien ma 'ċelluli T u CXC chemokine riċettur tat-tip 3kimokinihuma miżjuda fl-ipertensjoni umana. Hypertens 2013, 62, 126–133.[CrossRef] [PubMed]
44. Stumpf, C.; Auer, C.; Yilmaz, A.; Lewczuk, P.; Klinghammer, L.; Schneider, M.; Daniel, WG; Schmieder, RE; Garlichs, CDSerum Il-livelli tal-proteina Th1 chemoattractant interferon-gamma-inducible (IP) 10 huma elevati f'pazjenti bi pressjoni għolja essenzjali. Hypertens Res. 2011, 34, 484–488. [CrossRef] [PubMed]
45. Rudemiller, NP; Lund, H.; Priestley, JRC; Endres, BT; Prokop, JW; Jacob, HJ; Geurts, AM; Cohen, PE; Mattson, DL Mutazzjoni ta 'SH2B3 (LNK), kandidat ta' studju ta 'assoċjazzjoni mal-ġenoma kollu għall-ipertensjoni, attenwa l-ipertensjoni sensittiva għall-melħ ta' Dahl permezz ta 'modulazzjoni infjammatorja. Hypertens 2015, 65, 1111–1117. [CrossRef] [PubMed]
46. Wade, B.; Petrova, G.; Mattson, DL Rwol ta 'fatturi immuni fi pressjoni għolja indotta minn angiotensin II u ħsara fil-kliewi fil-firien sensittivi għal Dahlsalt. Em. J. Physiol. Regul. Integer. Komp. Physiol. 2018, 314, R323–R333. [CrossRef] [PubMed]