Effetti tad-decoction Jianpi Bushen Yiqi fuq il-funzjoni immuni u l-junctions newromuskolari fil-ġrieden EAMG

2.3 Tqabbil istomorfoloġiku ta' Thymus u Lymph Nodes f'Kull Grupp ta' Ġrieden

Kif muri fiFigura 1, il-kortiċi timiċi u medulla fil-grupp ta' kontroll vojtġrieden kienu demarkati b'mod ċar, b'ċelloli rranġati b'mod ordnat. B'kuntrast, il-grupp ta' kontroll tal-mudellurew konfini kortikali-medullari mhux ċari u distribuzzjoni skarsa taċ-ċelluli. Meta mqabbel mal-grupp mudell, ġrieden fil-grupp ta' prednisoneuGruppi ta 'decoction Jianpi Bushen Yiqi ta' doża baxxa, medja u għoljawera konfini kortikali-medullari relattivament ċari u ċelluli densi u organizzati tajjeb.

Figura 2juri li ċ-ċelloli tal-lymph node fil-grupp ta 'kontroll vojt urew struttura sħiħa u arranġament ordnat. Follikuli limfoid primarji kienu viżibbli fil-kortiċi, mingħajr follikuli sekondarji jew ċentri ġerminali. Fil-grupp mudell, l-istruttura ċellulari kienet diżorganizzata, b'follikuli primarji proliferati u follikuli sekondarji viżibbli u ċentri ġerminali. Il-gruppi ta 'prednisone u Jianpi Bushen Yiqi urew iperplażja tal-follikulu limfojde mnaqqsa.

Tabella 3juri li, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll vojt, il-grupp mudell kellu proporzjon imnaqqas tal-kortiċi għal żona medulla fit-timus u ċentri ġerminali miżjuda fil-lymph nodes (P < 0.05 jew P < 0.01). Meta mqabbel mal-grupp mudell, ilprednisoneudoża għolja Jianpi

 

 

 

Figura 1 Tqabbil tal-morfoloġija istopatoloġika tat-tessut tat-timu fost gruppi differenti ta 'ġrieden (tebgħa HE)

 

Tabella 3. Tqabbil tal-proporzjon taż-żona kortikali-medullari timiku u n-numru ta 'ċentri ġerminali tal-lymph node f'kull grupp ta' ġrieden

Unità: (x̄ ± s)

Grupp	n	Proporzjon taż-Żona tal-Cortex/Medulla timiku	Numru taċ-Ċentru Ġerminali (għal kull LN)
Kontroll Blank	3	3.62 ± 0.18	0.00 ± 0.00
Kontroll tal-Mudell	3	1.74 ± 0.11 ᵃ	6.47 ± 1.51 ᵃ
Prednisone	3	4.62 ± 1.41 ᵇ ᶜ	3.52 ± 0.35 ᵇ ᶜ
Decoction Doża Baxxa	3	2.91 ± 0.42 ᶜ	5.77 ± 0.66 ᶜ
Decoction Doża Medju	3	3.41 ± 1.05 ᶜ	4.12 ± 0.25 ᶜ
Decoction Doża Għolja	3	4.60 ± 0.55 ᵇ ᶜ	3.00 ± 0.71 ᶜ

Noti:

ᵃ: P < 0.01 vs Kontroll Blank

ᵇ: P <0.05 vs Kontroll tal-Mudell

ᶜ: P <0.01 vs Kontroll tal-Mudell

Bushen Yiqigruppi wrew proporzjon ogħla taż-żona tal-kortiċi għall-medulla. Il-gruppi kollha ta’ intervent, inklużi prednisone u t-tliet dożi tad-decoction, naqqsu b’mod sinifikanti n-numru ta’ ċentri ġerminali (P < 0.01). Meta mqabbel mal-grupp tal-prednisone, id-decoctiongruppi ta' doża baxxa u medjaxorta wera ftit aktar ċentri ġerminali, filwaqt li l-grupp b'doża għoljama kellu l-ebda differenza sinifikanti.

Nota: Il-vleġeġ suwed jindikaw follikuli limfatiċi, u l-vleġeġ ħomor jindikaw ċentri ġerminali.

Figura 2 Tqabbil tal-morfoloġija istopatoloġika tat-tessuti tal-lymph node fost gruppi differenti ta' ġrieden (tebgħa HE)

 

 

 

 

2.4 Tqabbil tal-perċentwali taċ-ċelluli Th1, Th2, Th17, Treg, u Tfh f'Sospensjonijiet taċ-Ċelloli tal-Msa

Kif muri fiTabella 4, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll vojt, ilgrupp mudellwera perċentwali miżjuda taċ-ċelluli Th1, Th2, Th17, u Tfh, u perċentwal Treg imnaqqas (P < 0.05 jew P < 0.01). Meta mqabbel mal-grupp mudell, ilgruppi ta 'decoction ta' doża medja u għoljakien naqqas il-perċentwali Th1 u żied il-perċentwali Treg; it-tliet gruppi tad-decoction kollha wrew perċentwali Th17 u Tfh imnaqqsa. Notevolment, il-grupp ta' prednisonenaqqas il-perċentwali Treg, u qajjem tħassib dwar il-potenzjal tiegħu li jfixkel l-omeostażi immuni.

Meta mqabbel mal-grupp tal-prednisone, il-gruppi kollha tad-decoction wrew tnaqqis fiċ-ċelloli Th2, Th17, u Tfh. Il-gruppi ta' doża medja u għoljanaqqas aktar Th1 u żied iċ-ċelluli Treg (P < 0.05 jew P < 0.01), li jindika immunoregolazzjoni aktar bilanċjata.

 

 

 

Nota: NMJ, junction newromuskolari; AChR, riċettur tal-aċetilkolina.

Figura 3 Tqabbil tal-morfoloġija AChR fil-junctions newromuskolari ta 'gruppi ta' muskoli fost gruppi differenti ta 'ġrieden
(tbajja ta' immunofluworexxenza, ×100)

 

Tabella 4. Tqabbil tal-perċentwali taċ-ċelluli Th1, Th2, Th17, Treg, u Tfh f'sospensjonijiet taċ-ċelluli tal-milsa fost gruppi differenti ta' ġrieden

Unità: (% , x̄ ± s)

Grupp	n	Th1	Th2	Th17	Treg	Tfh
Kontroll Blank	6	0.05 ± 0.04	0.03 ± 0.02	0.11 ± 0.06	16.42 ± 2.59	9.45 ± 3.29
Kontroll tal-Mudell	7	3.43 ± 1.11 ᵃ	0.82 ± 0.22 ᵃ	1.64 ± 0.65 ᵇ	7.99 ± 3.26 ᵃ	18.27 ± 4.21 ᵃ
Prednisone	7	1.84 ± 0.26	0.84 ± 0.47	1.03 ± 0.71	5.02 ± 1.58 ᵃ	15.32 ± 3.84
Decoction Doża Baxxa	7	1.42 ± 0.59 ᶜ ᵉ	0.60 ± 0.16 ᶜ ᶠ	0.73 ± 0.24 ᶜ ᶠ	14.97 ± 2.11 ᶠ	10.35 ± 3.72 ᶜ ᶠ
Decoction Doża Medju	7	1.08 ± 0.59 ᶜ ᵉ	0.47 ± 0.14 ᶜ ᶠ	0.45 ± 0.20 ᶜ ᶠ	13.82 ± 2.21 ᶠ	9.87 ± 3.65 ᶜ ᶠ
Decoction Doża Għolja	7	1.23 ± 0.62 ᶜ ᵉ	0.32 ± 0.14 ᶠ	0.34 ± 0.22 ᶜ ᶠ	13.50 ± 2.47 ᶠ	7.97 ± 3.60 ᶜ ᶠ

Noti:

ᵃ: P < 0.01 vs Kontroll Blank

ᵇ: P < 0.05 vs Kontroll Blank

ᶜ: P <0.01 vs Kontroll tal-Mudell

ᵈ: P <0.05 vs Kontroll tal-Mudell

ᵉ: P < 0.05 vs Prednisone

ᶠ: P < 0.01 vs Prednisone

 

 

2.5 Tqabbil tal-Morfoloġija AChR fl-NMJ f'Kull Grupp tal-Muskoli

Figura 3juri li l-NMJ AChRs fil-grupp ta 'kontroll vojt kienu strutturalment intatti u dehru bħala formazzjonijiet kompatti, bħal pretzel. Fil-grupp tal-mudell, NMJs fil-muskoli anterjuri okulari, sternocleidomastoid, deltojdi u tibialis dehru frammentati u deformati, filwaqt li l-muskoli masticatorji, interkostali u tad-dijaframma wrew strutturi mħarbta ħafna. Il-gruppi kollha ta 'intervent urew gradi differenti ta' titjib fil-morfoloġija AChR.

Kif muri fiTabella 5, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll vojt, il-grupp mudell kien naqqas b'mod sinifikanti l-proporzjonijiet taż-żona AChR f'muskoli multipli (P < 0.05 jew P < 0.01). Meta mqabbel mal-grupp mudell, ilprednisoneudecoction b'doża medjagruppi wrew żieda fl-erja AChR fil-muskoli tal-għajnejn. Il-grupp ta 'decoction b'doża baxxażoni AChR imtejba fid-deltojde u tibialis anterior. Il-grupp b'doża għoljażoni AChR imtejba fil-muskoli anterjuri okulari, sternocleidomastoid, deltojdi u tibialis.

Meta mqabbel mal-prednisone, il-grupp b'doża baxxaŻoni AChR imtejba fil-muskoli okulari u masticatorji; ilgrupp ta' doża medjafil-muskolu masticatorju; u l-grupp b'doża għoljafi sternocleidomastoid u tibialis anterior (P < 0.05 jew P < 0.01).

Tabella 5. Tqabbil taż-żona AChR fil-junction newromuskolari f'kull grupp ta 'gruppi ta' muskoli tal-ġrieden

Unità: (% , x̄ ± s)

Grupp	n	Muskolu okulari	Muskolu masticatorju	Sternocleidomastoid	Muskolu Deltojde	Muskolu Intercostal	Dijaframma	Tibialis Anterior
Kontroll Blank	3	3.83 ± 0.28	4.28 ± 0.29	4.48 ± 0.77	3.79 ± 0.12	3.78 ± 0.22	4.80 ± 0.26	3.60 ± 0.32
Kontroll tal-Mudell	3	2.58 ± 0.34 ᵃ	2.55 ± 0.45 ᵃ	2.15 ± 0.31 ᵇ	2.33 ± 0.15	2.55 ± 0.33	2.98 ± 0.34ᵇ	2.95 ± 0.49
Prednisone	3	3.33 ± 0.49ᶜ	2.67 ± 0.55	3.83 ± 0.54	3.49 ± 0.38	3.60 ± 0.16	3.45 ± 0.67	3.02 ± 0.40
Decoction Doża Baxxa	3	2.76 ± 0.49ᵉ	3.05 ± 0.37ᵉ	3.77 ± 0.64	2.77 ± 0.44ᶜ	3.03 ± 0.25	3.33 ± 0.33	3.44 ± 0.71ᶜ
Decoction Doża Medju	3	3.32 ± 0.40ᶜ	3.27 ± 0.75ᵉ	3.98 ± 0.43	3.27 ± 0.65	3.50 ± 0.28	3.85 ± 0.42	3.56 ± 0.52
Decoction Doża Għolja	3	3.46 ± 0.37ᶜ	3.34 ± 0.23ᵉ	4.54 ± 0.67ᶜ	3.69 ± 0.39	3.75 ± 0.36	3.75 ± 0.35	3.84 ± 0.52ᶜ

Noti:

ᵃ: P < 0.05 vs Kontroll Blank

ᵇ: P < 0.01 vs Kontroll Blank

ᶜ: P <0.05 vs Kontroll tal-Mudell

ᵈ: P <0.01 vs Kontroll tal-Mudell

ᵉ: P < 0.05 vs Prednisone

 

Tabella 6. Tqabbil tal-livelli fis-serum ta' AChR-Ab, IL-6, u TNF- fost gruppi differenti ta' ġrieden

Unità: (x̄ ± s)

Grupp	n	AChR-Ab (P⁻¹)	IL-6 (pg·ml⁻¹)	TNF- (pg·ml⁻¹)
Kontroll Blank	12	1.00 ± 0.13	110.66 ± 30.75	25.84 ± 9.71
Kontroll tal-Mudell	12	3.13 ± 0.97 ᵃ	327.91 ± 38.71 ᵃ	124.15 ± 37.61 ᵃ
Prednisone	11	2.05 ± 0.29 ᵇ ᶜ	487.21 ± 124.09 ᵇ	78.76 ± 22.35 ᵇ ᶜ
Decoction Doża Baxxa	13	2.50 ± 0.49ᵉ	306.42 ± 93.91ᶜ	89.14 ± 25.90 ᶜ
Decoction Doża Medju	13	1.98 ± 0.34 ᶜ	278.60 ± 63.97ᶜ	80.36 ± 21.95ᶜ
Decoction Doża Għolja	13	1.42 ± 0.33 ᶜ	224.43 ± 49.03ᶜ	84.26 ± 36.60ᶜ

Noti:

ᵃ: P < 0.01 vs Kontroll Blank

ᵇ: P < 0.01 vs Kontroll tal-Mudell

ᶜ: P <0.01 vs Kontroll tal-Mudell

ᵈ: P < 0.05 vs Prednisone

ᵉ: P < 0.01 vs Prednisone

2.6 Tqabbil tal-Livelli ta' AChR-Ab, IL-6, u TNF-Serum

Tabella 6juri li, meta mqabbel mal-grupp ta' kontroll vojt, il-grupp mudellkellhom livelli elevati b'mod sinifikanti ta' AChR-Ab, IL-6, u TNF- (P < 0.01). Meta mqabbel mal-grupp mudell, ilprednisoneugruppi ta 'decoction ta' doża medja u għoljanaqqas b'mod sinifikanti l-AChR-Ab. Madankollu,prednisone miżjuda IL-6, filwaqt li l-grupp ta' decoction b'doża għolja naqas IL-6. Kemm il-prednisone kif ukoll il-gruppi ta' doża medja u għoljaTNF imnaqqas- (P < 0.05 jew P < 0.01).

Meta mqabbel mal-prednisone, il-grupp ta 'decoction b'doża baxxakellu livell ogħla ta’ AChR-Ab, iżdail-gruppi kollha tad-decoctiontitnaqqas IL-6, filwaqt li jiġu evitati l-effetti pro-infjammatorji tal-prednisone.

3. Diskussjoni

Klinikament, MG hija kategorizzata f'myasthenia gravis okulari (oMG) u MG ġeneralizzata (gMG). oMG jimmanifesta primarjament bħala ptosi u diplopja, u jista 'javvanza għal gMG, ikkaratterizzat minn dgħjufija sistemika tal-muskoli skeletriċi [1]. It-teorija tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża (TCM) tattribwixxi l-patoġenesi tal-MG għal disfunzjonijiet fil-milsa u kliewi. Il-milsa tirregola l-muskoli u r-riġlejn, billi hija l-għerq wara t-twelid u s-sors tal-Qi u d-demm. Il-kliewi jaħżnu l-essenza u jirregolaw l-għadam u l-mudullun. Defiċjenza fiż-żewġ twassal għal dgħjufija fil-muskoli, kif jidher f'MG [15-16].

Ibbażat fuq il-prinċipju TCM ta '"trattament tal-għerq,"tonifikazzjoni tal-milsa u l-kliewiisir ċentrali. Il-Jianpi Bushen Yiqi Decoctionjinkorpora dan l-approċċ. L-ingredjent ewlieni tiegħu,Astragalus membranaceus, isaħħaħ il-Qi tal-milsa u jgħolli lil Yang.Kolla tal-qoxra tal-fekrunaukolla tal-antler taċ-ċrievjarrikkixxu l-essenza tal-kliewi u yang, it-tisħiħ tal-muskoli u l-għadam.Codonopsis, Angelica sinensis, Bupleurum, Cimicifuga, ulicorice moqli bl-għaseltaħdem b'mod sinerġiku biex ssostni d-demm, tgħolli lil Yang, u tarmonizza l-formula.

Żieda ewlenija għal din il-formulazzjoni hijaCistanche deserticola, herb rinomata għalit-tonifikazzjoni tal-yang tal-kliewi u l-mili tal-essenza vitali. Cistanche intwera li jtejjeb il-modulazzjoni immuni u jtejjeb ir-reżistenza għall-għeja, li jagħmilha ideali għal kundizzjonijiet bħal MG. Skond XJCistanche, Cistanche estratt jappoġġjavitalità tan-nervituri u tal-muskoli, jippromwovibilanċ tan-newrotrasmettitur, u titjiebomeostażi immuni-mekkaniżmi direttament rilevanti għall-patofiżjoloġija MG.

Dan l-istudju uża mudell tal-ġurdien EAMG biex jevalwa l-effetti tad-decoction f'dimensjonijiet strutturali tal-imġieba, immuni u NMJ. Ir-riżultati wrew liprednisonesaħħa tal-qabda mtejba u punteġġi Lennon iżda kkawża sinifikantitelf ta 'piż, konsistenti ma 'effetti sekondarji tal-glukokortikojdi magħrufa [19]. B'kuntrast, id-dożi kollha tad-decoctionżieda fil-piż tal-ġisem, li jindika sigurtà aħjar.

L-effikaċja terapewtika kienetdipendenti mid-doża, bil-grupp b'doża għoljakisba ta 'titjib komparabbli fis-saħħa tal-qabda u l-punteġġ Lennon għal prednisone li joffri t-tnejneffikaċja u sigurtà.

L-indiċi tal-organi immuni wrew li l-prednisone naqqas l-indiċi tat-timu u kkawża atrofija kortikali-medullari, li xxekkel it-tolleranza ċentrali [20]. Id-decoction, madankollu, ippreservat jew tejbet l-istruttura timika, speċjalment f'dożi għoljin. L-indiċi tal-milsa segwew amudell ta' regolamentazzjoni bifażika, b'dożi baxxi u medji li jrażżnu l-proliferazzjoni immuni anormali, filwaqt li d-doża għolja żammet bilanċ.

Il-gruppi kollha tad-decoction naqqsu l-iperplażja tal-follikuli tal-lymph node, għalkemm biss id-doża għolja qabbel prednisone fit-trażżin taċ-ċentru ġerminali, li jissuġġerixxi r-regolamentazzjoni superjuri ta 'doża għolja kemm tal-immunità ċentrali kif ukoll tal-periferali.

Peress li l-iżbilanċ taċ-ċelluli T CD4⁺ huwa l-bażi tal-EAMG [4], il-kapaċità tad-decoction lijibbilanċjaw mill-ġdid Th1/Th2/Th17/Tfh u Tregċelluli hija kruċjali. B'differenza minn prednisone, li naqqas Treg, id-decoction (speċjalment dożi medji u għoljin)Treg imsaħħaħu sottogruppi pro-infjammatorji mrażżna. Danmodulazzjoni immuni, minflok soppressjoni immuni, jallinja aħjar mal-ħtiġijiet ta 'mard awtoimmuni bħal MG.

Għall-integrità NMJ, id-decoction weratiswija ta’ AChR multi-muskoli, jaqbeż lil prednisone f'diversi gruppi ta 'muskoli. Barra minn hekk, naqqset b'mod effettivAChR-Ab, IL-6, u TNF-, b'doża għolja li turi l-aktar effett anti-infjammatorju komprensiv-mingħajr l-elevazzjoni ta' IL-6 prednisone.

 

Konklużjoni

Il-Jianpi Bushen Yiqi Decoction, arrikkit biCistanche deserticola, jeżerċita effetti terapewtiċi multi-mira fil-ġrieden EAMG. Huwa:

Jibbilanċja mill-ġdid l-assi Th/Treg u jrażżan l-attivazzjoni taċ-ċelluli B medjata minn Tfh

Inaqqas l-antikorpi patoġeniċi u ċ-ċitokini infjammatorji

Tiswija strutturi NMJ u tirrestawra l-funzjoni tal-muskoli

Meta mqabbel mal-prednisone, joffri superjurisigurtà, restawr immuni, uimmirar multi-muskoli, li tenfasizza l-potenzjal tagħha bħala aalternattiva klinikajewterapija miżjudagħal MG.

Studji futuri għandhom jesploraw tagħhakomposti bijoattivi, mogħdijiet metaboliċi, umiri molekulari, possibilment permezzfarmakoloġija tan-netwerkuproteomika, biex tħaffef l-iżvilupp tagħha bħala terapewtika ġdida bbażata fuq it-TCM.