Effett Inibitorju Ta 'Estratt ta' Gastrodia Elata Blume Fuq Melanogenesis Indotta mill-Ormoni li Jistimula l-Alfa-melanocyte fil-Melanoma Murine B16F10
May 17, 2023
SFOND/GĦANIJIET:Gastrodia elata Blume (GEB), mediċina veġetali tradizzjonali, intużat biex jikkura firxa wiesgħa ta 'disturbi newroloġiċi (eż., paraliżi u puplesija) u problemi tal-ġilda (eż., dermatite atopika u ekżema) fil-mediċina orjentali. Dan l-istudju kien iddisinjat biex jinvestiga jekk l-estratt GEB jinibixxix l-attività tal-melanoġenesi fil-melanoma murina B16F10.
Skont studji rilevanti, cistanche hija ħaxixa komuni li hija magħrufa bħala "l-ħaxix miraklu li jtawwal il-ħajja". Il-komponent ewlieni tiegħu huwa cistanoside, li għandu diversi effetti bħall-promozzjoni tal-funzjoni anti-ossidanti, anti-infjammatorji u immuni. Il-mekkaniżmu bejn cistanche u jbajdu l-ġilda jinsab fl-effett antiossidant tal-glikosidi cistanche. Melanin fil-ġilda tal-bniedem hija prodotta mill-ossidazzjoni tat-tyrosine katalizzata minn tyrosinase, u r-reazzjoni ta 'ossidazzjoni teħtieġ il-parteċipazzjoni ta' ossiġnu, sabiex ir-radikali ħielsa mill-ossiġnu fil-ġisem isiru fattur importanti li jaffettwa l-produzzjoni tal-melanin. Cistanche fih cistanoside, li huwa antiossidant u jista 'jnaqqas il-ġenerazzjoni ta' radikali ħielsa fil-ġisem, u b'hekk jinibixxi l-produzzjoni tal-melanin.
Ikklikkja fuq is-Suppliment Cistanche Tubulosa
Għal aktar informazzjoni:
david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
INTRODUZZJONI
Il-kulur tal-ġilda tal-bniedem huwa affettwat mill-ġenetika u ħafna fatturi, prinċipalment minn ammonti u tipi ta 'melanin. Il-melanina hija prodotta fil-melanoċiti tal-melanoċiti u ttrasferita minn melanoċiti għal keratinoċiti fis-saff bażali tal-epidermide bi tweġiba għall-espożizzjoni tal-ġilda għad-dawl tax-xemx, stress, u fatturi li jistimulaw il-melanin [eż., ormon li jistimula l-alfa-melanocyte (-MSH) , nitric oxide, u endothelin-1] [1,2]. Pereżempju, -MSH jippromwovi l-melanoġenesi permezz tal-induzzjoni tal-fattur tat-traskrizzjoni assoċjat mal-mikroftalmija (MITF), li huwa induttur qawwi tal-enzimi speċifiċi għall-melanoċiti bħal tyrosinase, proteina relatata mat-tyrosinase (Trp)1, u Trp2 [1]. Il-produzzjoni tal-melanin hija primarjament irregolata minn tyrosinase, l-enzima tar-rata tal-ġir għall-melanoġenesi, li tikkatalizza l-idrossilazzjoni tat-tyrosine għal 3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) minn mycophenolate u l-ossidazzjoni ta 'L-DOPA għal dopaquinone permezz tad-diphenolase, li huwa pass komuni kemm għall-bijosintesi tal-eumelanin kif ukoll tal-pheomelanin. Il-passi sussegwenti huma involuti żewġ enzimi addizzjonali speċifiċi għall-melanoċiti, Trp1 u Trp2 (magħrufa wkoll bħala dopachrome tautomerase), biex jipproduċu eumelanin (pigment kannella/iswed) u l-pass mhux enżimatiku assoċjat ma’ cysteine/glutathione biex jipproduċi pheomelanin (aħmar/isfar). pigment), rispettivament. Inibituri tat-tyrosinase bħal hydroquinone [3,4], kojic acid [5], aċidu askorbiku [6], u arbutin [7] intużaw biex jikkuraw disturbi tal-iperpigmentazzjoni iżda reċentement ġew irrappurtati dwar diversi effetti sekondarji fil-bnedmin [1, 2]. Konsegwentement, tingħata ħafna attenzjoni biex jinstabu inibituri melanoġeniċi aktar sikuri u effettivi minn sorsi naturali li jistgħu jinduċu depigmentazzjoni mingħajr effetti sekondarji.
Gastrodia elata Blume (GEB), pjanta tal-orkidej nieqsa mill-klorofilla, teħtieġ il-fungi simbjotiċi, Mycena osmundicola u Armillaria mellea għall-ġerminazzjoni u t-tkabbir/maturazzjoni tagħha, rispettivament [8,9]. GEB intuża bħala rimedju mediċinali orjentali biex jikkura disturbi newrodeġenerattivi (eż., paraliżi, vertigo, puplesija, epilessija u dimenzja) [9,10]. Varjetà ta' komposti bijoattivi ġew iżolati minn GEB, l-aktar importanti huma l-komposti fenoliċi bħal gastrodin, 4-hydroxybenzyl alcohol, 4-hydroxybenzaldehyde, vanillin, vanillyl alcohol, u vanillic acid [{{6 }}]. Ġie rrappurtat reċentement li l-komposti bijoattivi ta' GEB għandhom qawwa inibitorja għall-attività tyrosinase [13-16]. Barra minn hekk, studji reċenti identifikaw ergothioneine (Ergo) [8,11] u diosgenin [17] f'GEB. Ergo jinsab prinċipalment fil-faqqiegħ [18,19], filwaqt li diosgenin jinsab fil-jam selvaġġ [20]. It-tnejn li huma ġew elenkati fl-aqwa 10 ingredjenti botaniċi preżenti fil-kremi kontra t-tixjiħ fl-2010 minħabba l-attività antiossidant qawwija tagħhom [21], li jissuġġerixxi li GEB jista 'jintuża bħala aġent kożmetiku funzjonali kif ukoll fl-ikel mediċinali.
Għalkemm hemm rapporti dwar il-kompożizzjoni tal-GEB imnixxef bil-friża u mnixxef bil-fwar [22], il-kostitwenti kimiċi tiegħu [11,12,23], u l-effetti antiossidanti [12], anti-plejtlits u anti-trombotiċi [24], ftit huwa magħruf dwar l-effetti inibitorji tal-estratt GEB fuq is-sintesi tal-melanin u l-enzimi rilevanti tiegħu fil-melanoma B16F10. Peress li GEB intuża bħala rimedju tradizzjonali għal disturbi newroloġiċi u problemi tal-ġilda minħabba l-komposti bijoattivi u l-proprjetajiet antiossidanti tiegħu, analizzajna l-kontenut ta 'melanin u l-attività tyrosinase kif ukoll il-livelli molekulari ta' fatturi ta 'traskrizzjoni u enzimi regolatorji fil-melanoma murina B16F10.
MATERJALI U METODI
Preparazzjoni tal-estratt ta' Gastrodia elata Blume (GEB).
Kultura taċ-ċelluli
Assaġġ tal-vijabbiltà taċ-ċelluli
Iċ-ċelloli B16F10 ġew ibbanjati f'densità ta' 4 × 104 ċelluli/bir fi 24-platt tal-bir. Iċ-ċelloli konfluwenti ta '100 fil-mija ġew ittrattati minn qabel b'0-25 mg/mL ta' estratt GEB għal 24 siegħa wara t-trattament bi/mingħajr 200 nM -MSH (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA). Il-medju ġie mibdul bi 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide (MTT; Amresco, Solon, OH, USA) ) soluzzjoni taż-żebgħa [5 mg/mL f'salina buffered bil-fosfat (PBS)] f'37 grad għal 3 sigħat. Is-supernatant ġie mferra u l-melħ tal-formazan ġew maħlula f'500 μL isopropanol. L-assorbiment tkejjel f'570 nm bl-użu ta 'spettrofotometru (Gen5.2; Biotek, Winooski, VT, USA).
Analiżi tal-kontenut tal-melanin
Iċ-ċelloli B16F10 ġew ittrattati b'0-5 mg/mL ta' estratt GEB jew 400 ug/mL arbutin (kontroll pożittiv; Sigma-Aldrich) għal 72 siegħa wara t-trattament bi/mingħajr 200 nM -MSH għal 24 siegħa. Iċ-ċelloli ġew maħsula darbtejn b'1X PBS, segwiti minn liżi f'assaġġ ta 'radjuimmunoprecipitation (RIPA) liżi buffer (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA) u ċentrifugazzjoni f'14,000 rpm għal 10 min f'25 grad. Il-pellet (bejn wieħed u ieħor 105 ċelluli) ġie solubilizzat f'1 mL ta '1N NaOH b'10 fil-mija dimethyl sulfoxide għal 2 sigħat f'80 grad. L-assorbiment tas-supernatant tkejjel f'470 nm. Il-konċentrazzjoni tal-melanin fil-kampjuni kienet derivata minn kurva standard tal-melanin sintetiku (Sigma-Aldrich). Kull kampjun kien normalizzat għal kontenut totali ta 'proteina ċellulari bl-użu tal-metodu Pierce® BCA (Thermo Scientific).
Kejl ta 'attività tyrosinase
Iċ-ċelloli B16F10 ġew ittrattati b'0-5 mg/mL ta' estratt GEB jew 400 ug/mL arbutin (kontroll pożittiv) għal 72 siegħa wara t-trattament bi/mingħajr 200 nM -MSH għal 24 siegħa. Iċ-ċelloli ġew maħsula darbtejn b'1X PBS, segwiti b'liżi f'RIPA lysis buffer (Thermo Scientific) u ċentrifugazzjoni f'15,000 rpm għal 20 min f'4 gradi. Is-supernatant (100 μL) tpoġġa fi 96-platt tajjeb u mħallat ma '100 μL ta' 5 mM L-DOPA u inkubat f'37 grad għal 2 sigħat. L-assorbiment tkejjel f'420 nm. Kull kampjun kien normalizzat għal kontenut totali ta 'proteina ċellulari bl-użu tal-metodu Pierce® BCA (Thermo Scientific).
Analiżi tar-reazzjoni fil-katina tal-polimerażi f'ħin reali (PCR f'ħin reali)
Iċ-ċelloli B16F10 ġew ittrattati b'0-5 mg/mL ta' estratt GEB jew 400 ug/mL arbutin (kontroll pożittiv) għal 72 siegħa wara t-trattament bi/mingħajr 200 nM -MSH għal 24 siegħa. L-RNA totali taċ-ċelloli ġie iżolat bl-użu ta 'reaġent Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) u kit ta' estrazzjoni RNA (kit RNase Mini; Qiagen, Hilden, il-Ġermanja). L-RNA totali (2 ug) ġie traskritt b'lura bl-użu ta' taħlita prinċipali ta' traskrizzjoni inversa (ELPIS, Daejeon, Korea). Real time-PCR (LightCycler 96; Roche, Indianapolis, IN, USA) twettqet bl-użu tal-primers: murine MITF quddiem 5'-GGCCAAGGCAGAGCAACTT-3', backward 5'-GCCCATGGTGGCAAGCT-3'; tyrosinase quddiem 5′-ATAGGTGCATTGGCTTCTGG-3′, lura 5′-CCAACGATCCCATTTTTCTT-3′; Trp1 quddiem 5′-GAGTGACATCCTGTGGCTCA-3′, lura 5′-CGATACCCTGGGAACACTTT-3′; Trp2 quddiem 5′-GCATCTGTGGAAGGGTTGTT-3′, lura 5′-ACTCCTTCCTGAATGGGACC-3′; glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) quddiem 5′-TCAATGAAGGGGTCGTTGAT-3′, lura 5′-CGTCCCGTAGACAAAATGGT-3′. Il-livelli ta 'espressjoni ġew normalizzati għal dak ta' GAPDH.
Analiżi Western blot
Analiżi statistika
RIŻULTATI
Effetti ta 'Gastrodia elata Blume (GEB) fuq il-vijabbiltà taċ-ċelluli fiċ-ċelloli B16F10
Biex neżaminaw it-tossiċità potenzjali ta 'estratt GEB, l-ewwel evalwajna ċ-ċitotossiċità GEB billi inkubaw ċelluli B16F10 b'diversi konċentrazzjonijiet (0-25 mg/mL) ta' estratt GEB wara trattament bi/mingħajr 200 nM -MSH għal 24 h. Irrispettivament mill-istimulazzjoni -MSH, il-vijabbiltà taċ-ċelluli ma kinitx inibita minn konċentrazzjonijiet baxxi ta' GEB (0.5-5 mg/mL), filwaqt li konċentrazzjonijiet ogħla (10-25 mg/mL) indoxxew b'mod sinifikanti tossiċità (Fig. 1). Il-vijabbiltà taċ-ċelluli f'10 u 25 mg/mL ta 'GEB kienet 85.9 fil-mija u 68.7 fil-mija tal-kontroll mhux ittrattat, rispettivament. Il-vijabbiltà taċ-ċelluli f'10 u 25 mg/mL ta 'GEB wara stimulazzjoni -MSH kienet 89.9 fil-mija u 65.3 fil-mija tal-kontroll mhux ittrattat, rispettivament. Għalhekk, konċentrazzjoni ta' 0-5 mg/mL intużat f'aktar esperimenti.
Effett ta' Gastrodia elata Blume (GEB) fuq is-sintesi tal-melanin u l-attività tyrosinase fiċ-Ċelloli B16F10
Biex nevalwaw l-attività tal-melanoġenesi tal-estratt GEB, kejlna l-kontenut ta 'melanin kemm f'ċelluli B16F10 ittrattati -MSH-MSH kif ukoll ittrattati -MSH. Iċ-ċelloli ġew ittrattati minn qabel bi/mingħajr -MSH għal 24 siegħa, segwiti minn trattament b'estratt GEB f'dożi ta '0-5 mg/mL jew 400 ug/mL arbutin għal 72 siegħa. It-trattament b'GEB naqqas b'mod sinifikanti l-kontenut ta' melanin ċellulari b'mod dipendenti mid-doża f'dożi ogħla (2-5 mg/mL) fil-gruppi ttrattati b'-MSH u l-gruppi kollha mhux ittrattati b'-MSH. -MSH waħdu żied il-kontenut ta 'melanin b'180 fil-mija meta mqabbel mal-kontroll, u t-trattament ta' GEB inibixxi b'mod notevoli s-sinteżi tal-melanin fl-istat ta 'iperpigmentazzjoni indotta minn -MSH b'mod dipendenti fuq id-doża meta mqabbla ma' gruppi -MSH-mhux ittrattati (Fig. 2).
Peress li tyrosinase hija l-enzima li tillimita r-rata tas-sintesi tal-melanin, iddeterminajna l-effett inibitorju tal-estratt GEB fuq l-attività ċellulari tat-tyrosinase fiċ-ċelloli B16F10. -MSH indotta attività tyrosinase b'171.2 fil-mija fiċ-ċelloli B16F10. Irrispettivament mit-trattament -MSH, l-estratt GEB inibixxi b'mod sinifikanti l-attività ta 'tyrosinase. L-arbutin huwa magħruf sew bħala inibitur tas-sinteżi tal-melanin permezz tal-mogħdija tat-tyrosinase [7], li kienet inibita b'mod sinifikanti minn 35-40 fil-mija meta mqabbla mal-kontroll mhux trattat kemm fil-gruppi -MSH-mhux ittrattat kif ukoll -MSH-trattat (Fig. 3) . Il-kontenut ta 'melanin u l-attivitajiet ta' tyrosinase ta 'estratt GEB f'2 u 5 mg / mL kienu simili għal dawk ta' 400 ug / mL arbutin, li jissuġġerixxu li GEB juri attività kontra l-melanogenesis dipendenti mid-doża għal-livell ta 'kontroll pożittiv u li din l-inibizzjoni tal-melanogenesis. mill-estratt GEB huwa relatat ma 'attività tyrosinase ċellulari mnaqqsa (Fig. 3).
Effetti ta' Gastrodia elata Blume (GEB) fuq livelli ta' mRNA u espressjoni ta' proteini ta' MITF, tyrosinase, Trp1, u Trp2 fiċ-ċelloli B16F10
Biex tiddetermina jekk l-inibizzjoni tas-sintesi tal-melanin mill-estratt GEB kinitx assoċjata ma 'espressjoni tal-ġeni relatata mal-melanoġenesi, wettaqna PCR f'ħin reali biex neżaminaw il-livelli tal-mRNA ta' MITF, tyrosinase, Trp1 u Trp2. Il-livelli ta 'mRNA ta' dawn il-ġeni kollha kellhom it-tendenza li jonqsu mill-estratt GEB b'mod dipendenti fuq id-doża kemm fil-gruppi -MSH-mhux ittrattati kif ukoll -MSH-trattati, iżda kienu negliġibbli fiċ-ċelloli -MSH-mhux ittrattati. Livelli molekulari ta' MITF, tyrosinase, Trp1, u Trp2 ġew inibiti f'konċentrazzjonijiet baxxi ta' GEB (0.5-1 mg/mL) u kienu inibiti b'mod notevoli iżda mhux sinifikanti f'konċentrazzjonijiet ogħla (2-5 mg) /mL) f'ċelluli mhux ittrattati -MSH. -MSH indotta b'mod notevoli l-livelli ta 'mRNA ta' dawn il-ġeni iżda l-estratt GEB naqqasha. Anke f'ċelloli ttrattati b'-MSH, dożi aktar baxxi ta 'estratt GEB kellhom it-tendenza li jnaqqsu l-livelli ta' mRNA MITF, tyrosinase, Trp1, u Trp2, filwaqt li dożi ogħla ta 'estratt GEB inibixxu b'mod sinifikanti l-livelli ta' mRNA ta 'dawn il-ġeni kollha. Il-livelli ta 'inibizzjoni ta' estratt GEB f'dożi ogħla kienu simili għal arbutin, li huwa ingredjent magħruf li jbajdu l-ġilda fil-kożmetiċi (Fig. 4).
Barra minn hekk, aħna evalwajna l-espressjoni tal-proteini ta 'dan il-fattur ta' traskrizzjoni u l-enzimi melanoġeniċi permezz ta 'analiżi tal-western blot. -Trattament MSH indotta b'mod sinifikanti espressjoni ta 'proteini kif ukoll livelli ta' mRNA ta 'dawn il-ġeni kollha, li ġew irkuprati b'mod dipendenti fuq id-doża. Filwaqt li dożi aktar baxxi ta 'estratt GEB kellhom it-tendenza li jnaqqsu l-espressjoni tal-proteina indotta minn -MSH ta' MITF, tyrosinase, Trp1, u Trp2, dożi ogħla inibixxu b'mod sinifikanti dawn il-markaturi kollha f'ċelluli B16F10 ittrattati b'MSH b'mod dipendenti fuq id-doża. Il-livelli ta 'inibizzjoni ta' estratt GEB f'dożi ogħla kienu effettivi daqs l-arbutin (Fig. 5).
DISKUSSJONI
F'dan l-istudju, sibna li l-estratt GEB għandu attività inibitorja kontra l-melanoġenesi u l-attività u l-espressjoni molekulari tal-enzimi rilevanti tiegħu bħal MITF, tyrosinase, Trp1, u Trp2 fiċ-ċelluli tal-melanoma murini B16F10. L-estratt ta' GEB f'dożi ta' 0.5-5 mg/mL inibixxi markaturi relatati mal-melanoġenesi b'mod dipendenti mid-doża. Filwaqt li dożi aktar baxxi (0.5-1 mg/mL) ta' estratt GEB kellhom it-tendenza li jnaqqsu l-melanoġenesi, l-attività ta' tyrosinase, il-livelli ta' mRNA, u l-espressjoni tal-proteini ta' MITF, tyrosinase, Trp1, u Trp2, filwaqt li dożi ogħla ({{12} } mg/mL) ta 'estratt ta' GEB inibixxi b'mod sinifikanti dawn iċ-ċelluli markaturi kollha b'mod dipendenti fuq id-doża kemm fil-B16F10 trattat b'MSH-MSH kif ukoll f'MSH. Dawn l-effetti inibitorji ta 'estratt GEB f'konċentrazzjonijiet ogħla kienu simili għal dawk ta' 400 ug/mL arbutin.
Il-melanin hija ffurmata minn L-tyrosine fil-melanosomes u tiddetermina l-kulur karatteristiku tal-ġilda, ix-xagħar u l-għajnejn [1]. Għalkemm il-melanin għandu rwol protettiv kontra d-dawl ultravjola (UV) u l-istress, il-produzzjoni żejda u l-akkumulazzjoni tal-pigment tal-melanin jirriżultaw f'iperpigmentazzjoni u diversi problemi tal-ġilda bħal freckles, spots tal-età, u melasma fil-mammiferi [25]. Għalhekk, l-inibizzjoni tal-melanoġenesi kienet kwistjoni ta 'tħassib għal trattamenti mediċinali u kosmetiċi ta' depigmentazzjoni u tħaffif tal-ġilda. L-irbit ta' -MSH mar-riċettur tal-melanocortin-1 (MC1R) iżid l-adenosine monofosfat ċikliku (cAMP) u sussegwentement jattiva l-MITF. MIFT jirregola b'mod effettiv l-espressjoni ta' enzimi melanoġeniċi, inklużi tyrosinase, Trp1, u Trp2, li strutturalment jaqsmu identità simili ta' 40-45 fil-mija [1,2]. Fuq kollox, l-inibizzjoni tat-tyrosinase hija l-aktar approċċ komuni biex tinkiseb l-ipopigmentazzjoni tal-ġilda minħabba li din l-enzima tikkatalizza l-pass li jillimita r-rata tal-pigmentazzjoni. Kemm Trp1 kif ukoll Trp2 huma involuti fil-bijosintesi konsegwenti tal-melanin [1,2].
Lee et al. [26] skrinja 100 estratt tal-pjanti għall-użu kosmetiku billi kejjel l-attivitajiet inibitorji ta 'tyrosinase u awto-ossidazzjoni DOPA u rrapporta li ħafna estratti tal-pjanti bħal Gastrodia elata, Chaenomeles speciosa, Dryopteris crassirrhizoma, Glycyrrhizaglabra, Morusalba, Myristicafragrans, Rheumhoraphoramatum japonica wera inibizzjoni ta 'attività tyrosinase tal-faqqiegħ. Chen et al. [2] skrinja wkoll 78 pjanta veġetali mediċinali u sab li r-riżoma ta 'GEB għandu l-potenzjal li jinibixxi l-attività ta' tyrosinase. Għalkemm GEB intuża bħala rimedju mediċinali orjentali biex jikkura disturbi newrodeġenerattivi, hemm possibbiltà kbira li jintuża GEB bħala inibitur tat-tyrosinase minn dawn l-istudji ta 'screening.
Studju reċenti [9] irrapporta 64 komponent GEB li juża diversi tekniki ta' kromatografija. Fosthom, l-aktar komposti fenoliċi importanti huma gastrodin [4-( -d-glucopyranosyloxy) benzyl alcohol], 4-hydroxy benzyl alcohol (4-HBA), 4-hydroxy- benzaldehyde, vanillin (4-idrossi-3-methoxybenzaldehyde), alkoħol tal-vanilil (4-(idrossimetil)-2-metossifenil), u aċidu vaniliku (4-idrossi{{14 }}aċidu methoxybenzoic) [8-12]. Reċentement instabu komposti naturali ġodda f'GEB; bis (4- hydroxyphenyl) sulfide [2], Ergo [8], u diosgenin [17]. L-istruttura ta 'hydroquinone u komposti fenoliċi ewlenin ta' GEB huma pjuttost simili [27]. Il-grupp Hydroxyl (-OH) ta' hydroquinone huwa sostitwit bi grupp hydroxymethyl (-CH2OH) f'4-HBA [27] u grupp karbonil (-CHO) f'4-hydroxybenzaldehyde. Grupp methoxy (-OCH3) huwa miżjud ma 'hydroquinone biex jifforma alkoħol vanillyl u ma' 4-hydroxybenzaldehyde biex jifforma vanillin, rispettivament. L-aċidu vaniliku huwa forma ossidizzata ta 'vanillina.
Studji reċenti rrappurtaw li ħafna minn dawn il-komposti jeżerċitaw attività inibitorja kontra tyrosinase tal-faqqiegħ u melanoġenesi f'ċelluli B16 [14,28] u HM3KO melanoma [13], fibroblasti normali tal-prepuzju tal-bniedem [29], u mudelli ta 'zebrafish in vivo [2,29]. Pereżempju, il-frazzjoni fenolika iżolata minn GEB estratt bil-butanol [14] eżerċitat effetti inibitorji fuq il-melanoġenesi billi naqqset l-attività ta 'tyrosinase, Trp1, u Trp2 kif ukoll l-espressjoni ta' mRNA u proteina ta 'dawn l-enzimi. Gastrodin [15] u 4-HBA [16] irażżnu l-melanoġenesi billi inibixxu l-attività tat-tyrosinase fiċ-ċelloli tal-melanoma B16. Il-gruppi hydroxyl ta' gastrodin u 4-HBA interaġixxew primarjament mar-residwi ta' histidine fis-sit attiv ta' tyrosinase, li wassal għall-inibizzjoni tal-attività tyrosinase [30]. L-ossiġnu mill-OH fenoliku ta' 4-HBA jaffettwa l-attività katalitika ta' tyrosinase b'attakk nukleofiliku [31]. Gruppi idrossi u methoxy ta’ aċidu vaniliku u alkoħol vanilliku jaġixxu bħala inibituri ta’ l-attività tad-diphenenolase ta’ tyrosinase [32] u speċjalment il-konverżjoni ta’ CH2OH fl-alkoħol vanilliku għal -COOH (aċidu vaniliku), li jwassal għal żieda notevoli fl-inibizzjoni tat-tyrosinase [32] ]. L-aċidu vaniliku iżolat minn Origanum vulgare naqqas l-attività tat-tirosinażi ċellulari, DOPA oxidase, u l-kontenut ta 'melanin, kif ukoll irregola l-espressjoni ta' MC1R, MITF, Trp1, u Trp2 f'ċelloli B16F10 stimulati b'-MSH. Il-vanillina ma esprimietx inibizzjoni tal-attività tyrosinase [29]. Riċentement, prodott naturali iżolat minn GEB, bis(4-hydroxy benzyl)sulfide, aġixxa bħala inibitur kompetittiv qawwi ta' tyrosinase biex jimblokka s-sintesi tal-melanin f'melanoċiti epidermali umani u mudelli ta' zebrafish billi wera li jikkoordina l-atomu tal-kubrit ta' bis ({{ 33}}hydroxy benzyl) sulfide b'jonji tar-ram fis-sit attiv ta 'tyrosinase permezz ta' mudellar molekulari komputazzjonali [2]. Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li varjetà ta 'komposti fenoliċi ta' GEB jistgħu jaġixxu bħala inibituri ta 'tyrosinase billi jinteraġixxu ma' jonji tar-ram u/jew residwi ta 'histidine fis-sit attiv ta' tyrosinase.
Ergo u diosgenin intgħażlu bħala wieħed mill-aqwa 10 ingredjenti botaniċi fil-kremi kontra t-tixjiħ tal-2010 [21]. Ergo huwa thiol amino acid naturali li jinħall fl-ilma [18,19], li nstab reċentement f'GEB [8]. F'pH fiżjoloġiku, Ergo jeżisti prinċipalment fil-forma thione (= S) aktar milli fil-forma thiol (-SH) [19]. Id-degradazzjoni bil-mod tagħha, ir-reżistenza għall-formazzjoni tad-disulfide, u l-awto-ossidazzjoni jagħmluha aktar stabbli minn glutathione [18,19]. Il-preżenza taċ-ċirku imidazole sostitwit bil-kubrit f'Ergo inibbet l-attività tat-tyrosinase tal-faqqiegħ b'mod dipendenti fuq id-doża [33]. Kompost ieħor, diosgenin mill-estratt tal-yam selvaġġ (Dioscorea villosa) għandu effett depigmentanti u għalhekk jista 'jintuża fil-melasma, melanodermatitis, u sun lentigo [34]. Studju li sar fuq ċelluli tal-melanoma wera li l-effett tad-depigmentazzjoni huwa relatat mal-attivazzjoni tal-mogħdija ċellulari phosphatidylinositol- 4,5-bisphosphate 3-kinase, li tissuġġerixxi li diosgenin jista' jkun inibitur effettiv ta' iperpigmentazzjoni [34]. Barra minn hekk, għandu proprjetajiet anti-infjammatorji u anti-aging billi jinduċi attività anti-collagenase [35].
Hemm mill-inqas tliet mogħdijiet ta 'sinjali possibbli involuti fir-regolazzjoni tal-melanoġenesi; Mogħdijiet ta' sinjalazzjoni kinase regolati mis-sinjali li jiddependu fuq cAMP, Wnt, u extraċellulari [1]. Dawn il-mogħdijiet tas-sinjali kollha jirregolaw l-enzimi relatati mal-melanoġenesi, jiġifieri, tyrosinase, Trp1, u Trp2 permezz tal-espressjoni u/jew l-attività MITF [1]. L-involviment potenzjali ta 'dawn il-mogħdijiet tas-sinjali fis-soppressjoni tal-melanoġenesi minn GEB għad irid jiġi investigat fil-futur.
KONFLITT TA' INTERESS
REFERENZI
Għal aktar informazzjoni: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
