Influwenza tas-simulazzjoni tad-diġestjoni umana in vitro fuq il-kontenut tal-fenoliċi u l-attivitajiet bijoloġiċi tal-estratti milwiema mill-ispeċi ta' Cistus Tork Parti 1

Jekk jogħġbok ikkuntattjaoscar.xiao@wecistanche.comgħal aktar informazzjoni

Astratt:L-istress ossidattiv huwa wieħed mill-prekursuri sinifikanti ta 'diversi mard metaboliku bħad-dijabete, il-marda ta' Parkinson, mard kardjovaskulari, kanċer, eċċ Diversi rapporti xjentifiċi indikaw li l-metaboliti sekondarji tal-pjanti għandhom rwol importanti fil-prevenzjoni tal-istress ossidattiv u l-effetti ta 'ħsara tiegħu. F'dan ir-rigward, dan l-istudju kien ippjanat biex jinvestiga l-profil fenoliku u l-potenzjali antiossidanti u antidijabetiċi ta 'l-estratti milwiema mill-ispeċi Cistus Tork billi juża metodi in vitro. Proċedura ta' simulazzjoni ta' diġestjoni in vitro ġiet applikata għall-estratti kollha biex tiġi stmata l-bijodisponibilità tal-kontenuti fenoliċi tagħhom. Il-kontenuti totali ta' fenoliċi, flavonojdi, aċidu fenoliku u proanthocyanidin ġew determinati għall-fażijiet kollha tad-diġestjoni. Barra minn hekk, bidliet fil-kwantità tal-flavonoids markaturi assenjati (salidroside, hyperoside, u quercitrin) ġew immonitorjati minn analiżi ta 'Kromatografija ta' Saff Irqiq ta' Prestazzjoni Għolja (TLC). Il-potenzjali tal-attività antiossidanti tal-estratti ġew studjati b'diversi metodi biex jiżvelaw il-profili dettaljati tal-attività tagħhom. Min-naħa l-oħra, l-enzimi a-amylase u a-glucosidase in vitro u l-attivitajiet inibitorji tal-prodott finali ta 'glycation avvanzat (AGE) ta' l-estratti ġew determinati biex jevalwaw il-potenzjali antidijabetiċi ta 'estratti. Ir-riżultati wrew li estratti milwiema miksuba mill-partijiet ta 'l-ajru ta' speċi Cistus Tork għandhom kontenut fenoliku sinjuri u attivitajiet antiossidanti u antidijabetiċi potenzjali; madankollu, il-profili tal-bijoattività tagħhom u l-konċentrazzjonijiet tal-flavonoid marker jistgħu jiġu affettwati b'mod sinifikanti mid-diġestjoni umana. Ir-riżultati wrew li l-kontenut fenoliku totali, l-attivitajiet antiossidanti, u l-inibizzjonijiet tal-enżimi relatati mad-dijabete tal-kampjuni bijodisponibbli kienu inqas minn kampjuni mhux diġeriti fl-estratti kollha.

Kliem ewlieni:Speċi Cistus Tork; attività antiossidanti; simulazzjoni tad-diġestjoni umana; HPTLC; dijabete

Jekk jogħġbok ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

1. Introduzzjoni

Il-familja Cistaceae hija magħmula minn arbuxelli, u pjanti erbaċej annwali jew perenni u l-ġeneru Cistus huwa wieħed mill-membri mqassma b'mod wiesa 'ta' din il-familja. Aktar minn 50 speċi Cistus huma mqassma mad-dinja kollha, u huma komunement imsejħa "rockrose" [1]. Investigazzjonijiet preċedenti in vitro u in vivo wrew li l-ispeċi Cistus għandhom attivitajiet antivirali, antidijabetiċi, antiossidanti, antimikrobiċi u anti-infjammatorji [2,3]. Komposti fenoliċi differenti (aċidi fenoliċi, flavonoids, proanthocyanidins) u terpeni ġew iżolati mill-ispeċi Cistus, u l-benefiċċji terapewtiċi tagħhom huma ġeneralment attribwiti għal dawn il-komponenti[4,5].

Fit-Turkija, ħames speċi ta' Cistus jikbru b'mod naturali, jiġifieri, C. salvifolius L., C. paroiflorus Lam, C.monspeliensis L., C.laurifolius L. u C.creticus L.[6]. Fir-rekords etnobotaniċi tal-mediċina folkloristika Torka, diversi organi ta 'speċi Cistus huma ta' spiss dokumentati bħala rimedju. Infużjonijiet ippreparati mill-fergħat ta 'C. laurifolius, C. salviifolius, u C. creticus jinbelgħu mill-ħalq kontra d-dijabete fid-distrett ta' Edremit (Balikesir) [7]. Id-decoctions ippreparati mill-fjuri ta' C.creticus u C.salvifolius jintużaw internament kontra l-ulċeri peptiċi f'Marmaris (Mugla) [8], filwaqt li decoction tal-blanzuni tal-fjuri mhux miftuħa ta' C. laurifolius tintuża għall-istess għan. Fl-Anatolja tal-Punent, id-decoction tal-weraq C. laurifolius tintuża internament kontra d-deni u l-uġigħ fl-istonku u esternament, permezz tal-għawm, kontra l-uġigħ rewmatiku [9].

Cistanche jista 'jtejjeb l-immunità

Huwa fatt ippruvat tajjeb li l-aggregazzjoni elevata ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) tqajjem stress ossidattiv, li huwa wieħed mill-prekursuri sinifikanti ta 'diversi disturbi metaboliċi bħal kanċer, dijabete, problemi kardjovaskulari, marda ta' Alzheimer, eċċ. [10] Għalhekk, l-utilizzazzjoni tal-antiossidanti saret approċċ olistiku komuni għall-prevenzjoni jew it-trattament ta 'kundizzjonijiet bħal dawn fil-prattika xjentifika attwali. L-attivitajiet antiossidanti tal-estratti tal-pjanti ġew irrappurtati minn għadd kbir ta' riċerkaturi[11-14]. Bħala approċċ komuni, il-potenzjal antiossidant tal-estratti tal-pjanti huwa ġeneralment iddedikat għall-kontenuti fenoliċi tagħhom. Fil-letteratura xjentifika hija disponibbli korp kbir ta 'evidenza li l-ispeċi Cistus huma wkoll sinjuri fi profili fenoliċi u eventwalment għandhom grad konsiderevoli ta' attività antiossidanti. Madankollu, il-kunċett tal-bijodisponibilità ta 'dawn il-fitokimiċi fil-ġisem ma ġiex ikkunsidrat f'ħafna minn dawn l-istudji.

Huwa fatt magħruf li l-kundizzjonijiet tal-passaġġ gastrointestinali jinfluwenzaw il-komposti fenoliċi minħabba kundizzjonijiet differenti tal-pH, azzjonijiet tal-enżimi u mikrobijota. Min-naħa l-oħra, l-istrutturi kimiċi tal-komposti fenoliċi u l-matriċi tal-pjanti huma wkoll fatturi importanti li jaffettwaw il-bijodisponibilità tagħhom [15]. Għalhekk, fl-investigazzjoni preżenti, il-metodu ta 'simulazzjoni tad-diġestjoni in vitro ġie applikat għall-estratti kollha biex tiġi stmata l-bijodisponibilità tal-kontenuti fenoliċi. Sabiex tissorvelja t-tranżizzjonijiet, fenoliċi totali,flavonojdi, aċidu fenoliku, u kontenuti ta 'proanthocyanidin ġew determinati fil-fażijiet kollha tad-diġestjoni. Barra minn hekk, l-attivitajiet antiossidanti tal-estratti ġew studjati b'metodi spettrofotometriċi mekkanikament differenti biex jiżvelaw il-profili komprensivi tal-attività tagħhom. Il-potenzjali anti-ossidanti tal-kampjuni kollha miksuba mill-proċess tad-diġestjoni ġew investigati b'DPPH u DMPD (scavenging radikali ħielsa), FRAP u CUPRAC (potenzjal li jnaqqas il-metall), u TOAC (totalkapaċità antiossidant) assaġġi. Preċedentement, salidroside, hyperoside, uquercitrinġew determinati bħala l-flavonoids markaturi tal-ispeċi Cistus minn Guzelmeric et al. [16]Għalhekk, id-determinazzjoni kwalitattiva u kwantitattiva ta' dawn il-flavonol glycosides twettqet bis-sistema ta' Kromatografija ta' Saff Irqiq ta' Prestazzjoni Għolja u l-indiċi tal-bijodisponibilità tagħhom ġew stmati.

Id-dijabete mellitus (DM) hija disturb metaboliku komuni u hija deskritta minn tnaqqis fis-sekrezzjoni ta' l-insulina miċ-ċelluli tal-frixa jew nuqqas ta' reazzjonijiet tal-ġisem għall-insulina. Hemm żewġ tipi ta' DM: dipendenti fuq l-insulina (Tip I) u mhux dipendenti fuq l-insulina (Tip II) [17]. Waħda mill-istrateġiji ta' trattament għal Tip II DM hija li tikkontrolla l-ipergliċemija wara l-ikel, li hija definita bħala "żieda sinifikanti fil-konċentrazzjoni taz-zokkor fid-demm fid-demm wara ikla". Inibizzjoni tal-enzimi diġestivi ewlenin, inklużi o-amylase ua-glucosidase, hija essenzjali biex tikkontrolla l-ipergliċemija wara l-ikel. Fis-sistema gastrointestinali, o-amylase tiddiġerixxi l-lamtu f'zokkor li jnaqqas bħal maltodextrin, lactose, u maltose, u -glucosidase tkisser dawn iz-zokkor fi glukosju. Għalhekk, l-inibizzjoni tal-enzimi diġestivi hija meqjusa bħala mod possibbli ta’ azzjoni biex tittratta l-ipergliċemija wara l-ikel [18]Min-naħa l-oħra, livelli elevati ta’ glukożju fid-demm jistgħu jikkawżaw il-formazzjoni ta’ AGEs li huma definiti bħala "komposti ffurmati bħala riżultat ta’ reazzjoni ta’ glycation enżimatika. (Maillard)bejn it-tnaqqis taz-zokkor u l-proteini, l-aċidi nuklejċi u l-lipidi". Akkumulazzjoni elevata ta 'AGEs fil-ġisem tista' twassal għal ħafna kumplikazzjonijiet dijabetiċi, inklużi nefropatija, newropatija, retinopatija, eċċ.[19]. Aminoguanidine, immaġina u metformin huma eżempji ta 'inibituri sintetiċi għal AGEs, u acarbose, miglitol, u voglibose huma inibituri sintetiċi għal enżimi diġestivi u ilhom jintużaw għal dawn l-aħħar deċennji [20,21]. Madankollu, provi kliniċi u esperimenti in vivo wrew l-effetti sekondarji ta 'dawn l-inibituri sintetiċi, bħal epatotossiċità, distenzjoni addominali, gass, meteoriżmu, anemija, rimettar, insuffiċjenza tal-qalb, eċċ. [21,22]. Minħabba l-effetti ta' ħsara tal-istach, studji multipli involvew il-potenzjali inibitorji tal-estratti tal-pjanti fuq AGEs [23-25]. Ġie rrappurtat li l-fitokimiċi, partikolarment il-komposti fenoliċi bħal aċidi fenoliċi, flavonoids, uproanthocyanidins, inibixxi b'mod sinifikanti l-formazzjoni ta' AGEs u azzjonijiet ta' enzimi relatati, jiġifieri, -amylase u -glucosidase [26-28].

Peress li l-estrazzjoni tal-ilma (infużjoni jew decoction) hija t-teknika ta 'preparazzjoni komuni fil-mediċina tradizzjonali, dan l-istudju sar fuq l-estratti milwiema minn speċi Cistus Tork qabel u wara s-simulazzjoni in vitro tad-diġestjoni gastrointestinali. F'dan ir-rigward, il-profili fenoliċi u l-potenzjali antiossidanti u antidijabetiċi tal-estratti milwiema u l-metaboliti tad-diġestjoni tagħhom ġew investigati b'mod komparattiv. Skont l-istħarriġ ta 'referenza, attivitajiet inibitorji ta' estratti ta 'Cistus fuq AGEs ġew studjati għall-ewwel darba f'dan l-istudju. Barra minn hekk, l-analiżi kwantitattiva tal-flavonoids markaturi twettqet ukoll permezz ta 'analiżi HPTLC. Teknika ta 'simulazzjoni tad-diġestjoni in vitro ġiet applikata għall-estratti kollha biex timmonitorja l-alterazzjonijiet fil-konċentrazzjonijiet u l-profili ta' attività bijoloġika tal-komposti fenoliċi fil-kundizzjonijiet gastrointestinali.

2. Riżultati

2.1. Stima tal-Kontenuti Fenoliċi tal-Kampjuni

Skont ir-riżultati murija fit-Tabella 1, estratt milwiema ta 'C. saloifolius kellu kontenuti totali ogħla ta' flavonoid, phenolic and phenolic acid minn speċi studjati oħra, filwaqt li kampjuni ND (mhux diġeriti) ta 'C.creticus u C.laurifolius kellhom l-ogħla proanthocyanidin. kontenuti. L-aktar tnaqqis sinifikanti kien skopert fil-kontenut totali ta 'proanthocyanidins ta' l-estratti kollha. L-ammonti ta' proanthocyanidin ta' kampjuni IN (bijodisponibbli) ma setgħux jinstabu fl-estratti akwei kollha. Bħala riżultat, il-kontenuti fenoliċi tal-estratti milwiema ġew affettwati b'mod negattiv mill-proċedura ta 'simulazzjoni ta' diġestjoni umana in vitro.

L-abbrevjazzjonijiet għall-kampjuni huma ND: Mhux diġerit; PG: Postgasttiku; FI: Bijodisponibbli; BAvl: Indiċi tal-bijodisponibilità; Ir-riżultati ġew iddikjarati bħala l-medja ta' triplikati 士 devjazzjoni standard （SD） u bħala mg ekwivalenti ta' aċidu galliku （GAE） f'kampjun ta' 1 g; Ir-riżultati ġew espressi bħala l-medja ta 'triplikati ± devjazzjoni standard (SD) u bħala ekwivalenti ta' mg quercetin (QE) f'kampjun ta '1 g; D Ir-riżultati ġew espressi bħala l-medja ta' triplikati ± devjazzjoni standard (SD) u bħala mg ekwivalenti ta' aċidu kaffejku (CAE) f'kampjun ta' 1g; F Ir-riżultati ġew espressi bħala l-medja ta' triplikati ± devjazzjoni standard (SD) u bħala mg ekwivalenti ta' catechin (CE) f'kampjun ta' 1 g;* Abbrevjazzjonijiet tal-estratti milwiema: CCA għal C. creticus, CLA għal C.laurifolius, CMA għal C .monspeliensis, CPA għal C.parviflorus, CSA għal C.salviifolius.Ittri differenti fl-istess ringiela jindikaw sinifikat (p<>

Kif ippreżentat fit-Tabella 2, il-kontenuti ta 'salidroside u hyperoside fl-estratt milwiema ta' C. salviifolius kienu relattivament ogħla minn dawk tal-ispeċi l-oħra, filwaqt li quercitrin ma nstabx. Min-naħa l-oħra, quercitrin instab fl-ogħla konċentrazzjoni fil-kampjuni kollha ta 'simulazzjoni ta' l-estratt milwiema minn C.creticus, iżda l-konċentrazzjoni tiegħu naqset b'mod sinifikanti fil-kampjuni bijodisponibbli. Barra minn hekk, il-kromatogramma HPTLC u l-ispettri UV overlay tar-referenzi u t-tikek korrispondenti fil-binarji tal-estratti kollha ġew ippreżentati fil-Figura 1.

L-abbrevjazzjonijiet għall-kampjuni huma ND: Mhux diġerit; PG: Postgastriku; FI: Bijodisponibbli; BAvI: Indiċi tal-bijodisponibilità; Ir-riżultati ngħataw bħala mg/g estratt niexef u l-esperimenti saru indipendentement tliet darbiet differenti;* Abbrevjazzjonijiet tal-estratti milwiema: CCA għal CC. creticus, CLA għal C. laurifolius, CMA għal C.monspeliensis, CPA għal C.parviflorus, CSA għal C.salviifolius.Ittri differenti fl-istess ringiela jindikaw sinifikat (p<>

Figura 1. (A) Overlay spettri UV ta 'salidroside u t-tikek korrispondenti fil-binarji tal-estratti kollha. (B) Overlay spettri UV ta 'hyperoside u t-tikek korrispondenti fil-binarji tal-estratti kollha. (C) Overlay spettri UV ta 'quercitrin u t-tikek korrispondenti fil-binarji tal-estratti kollha. (D)Kromatogrammi HPTLC ta':1.CCA ND,2.CCA PG,3.CCA IN,4.CLA ND,5.CLA PG,6.CLA IN,7.Tiliroside （Rf ≈0.65 ）,8.Idrossidu （Rf ≈0.35）,9.Quercitrin （Rf≈0.45）,10.CMA ND,11.CMAPG,12.CMAIN,13.CPAND,14 .CPAPG,15.CPAIN,16.CSAND,17.CSAPG,18.CSAIN.Mobilephase:EtOAc/CHCl2/CHCOOH/HCOOH/H2O(100:25:10:10:10:10):11);Derivatizzazzjoni: NPR reaġent. Viżwalizzazzjoni: 366 nm.

2.2.Stima tal-Attività Antiossidanti tal-Kampjuni

Kif ippreżentat fit-Tabella 3, kampjuni bijodisponibbli ta 'estratti ta' Cistus urew attività antiossidanti ta 'tqaxxir radikali aktar dgħajfa mill-kontropartijiet tagħhom mhux diġeriti u post-gastriċi. Kampjuni ND u PG tal-estratti milwiema kollha wrew attività sinifikanti ta’ tkessiħ DPPHradical u kellhom valuri ECso aktar baxxi mill-kompost ta’ referenza BHT (valur ECso: 5.83±0.2 ug/mL）. Madankollu, l-estratti kollha wrew tneħħija radikali DMPD aktar dgħajfa. attività mill-kompost ta 'referenza Trolox （5.82±0.37ug/mL）. Kampjuni ND, PG, u IN ta' CPA kellhom attività DMPD aħjar meta mqabbla ma 'kampjuni ta' estratti oħra.

L-abbrevjazzjonijiet għall-kampjuni huma ND: Mhux diġerit; PG: Postgastriku; FI: Bijodisponibbli; BAvI: Indiċi tal-bijodisponibilità; Ir-riżultati ġew ippreżentati bħala ECso f'ekwivalenti ug/mL u l-esperimenti saru b'mod indipendenti tliet darbiet differenti. Il-valur ECso tal-kompost ta' referenza "BHT" fl-attività ta' tneħħija tad-DPPH kien iddeterminat bħala 5.83±0.2 ug/mL; C Ir-riżultati ġew ippreżentati bħala EC50f'ekwivalenti ta' ug/mL u l-esperimenti twettqu b'mod indipendenti tliet darbiet differenti. Il-valur ECso tal-kompost ta' referenza Trolox fl-attività ta' tneħħija tad-DMPD kien iddeterminat bħala 5.82±0.37 ug/mL; P Ir-riżultati ġew espressi bħala ekwivalenti ta 'mM FeSO4 f'kampjun ta' 1g u l-esperimenti saru b'mod indipendenti tliet darbiet differenti. L-attività FRAP tal-kompost ta 'referenza "BHT" ġiet skoperta bħala 4.06±0.42mM FeSO4 eq. in1 g kampjun; F Ir-riżultati ngħataw bħala mg ekwivalenti ta 'aċidu askorbiku (AAE) f'kampjun ta' 1 g u l-esperimenti saru indipendentement tliet darbiet differenti; ir-riżultati ngħataw bħala mg ekwivalenti ta' aċidu askorbiku (AAE) f'1 sempliċi u twettqu esperimenti b'mod indipendenti tliet darbiet differenti;* Abbrevjazzjonijiet tal-estratti milwiema: CCA għal C. creticus, CLA għal C. laurifolius, CMA għal C.monspeliensis, CPA għal C.parviflorus, CSA għal C.salviifolius. Ittri differenti fl-istess ringiela jindikaw sinifikat (p<>

Simili għal analiżi ta 'attività ta' scavenging radikali, kampjuni bijodisponibbli ta 'estratti ta' Cistus urew ukoll attivitajiet antiossidanti totali aktar dgħajfa li jnaqqsu l-metall mill-kampjuni mhux diġeriti u post-gastriċi. Il-kampjuni kollha ND tal-estratti wrew attività antiossidant sinifikanti li jnaqqas il-ferrika, li kienet aktar b'saħħitha mill-kompost ta 'referenza BHT (4.06±0.42mM FeSO4 ekwivalenti). Fost kampjuni PG, CSA biss (44±0.16mMFeSO4 ekwivalenti) kellu attività aħjar minn BHT. Fl-assaġġ CUPRAC, kampjuni ND u PG ta 'CSA ġew skoperti bħala l-aktar qawwija fost il-kampjuni ta' speċi oħra. B'mod diskret, IN kampjun ta 'CCA kellu CUPRACattività aħjar minn kampjuni bijodisponibbli ta' estratti milwiema oħra.

2.3.Attività ta 'Inibizzjoni ta' Enżimi Relatati mad-Dijabete

Kif indikat fit-Tabella 4, attività inibitorja ta 'enżimi dipendenti fuq il-konċentrazzjoni dehret fl-estratti milwiema kollha. Filwaqt li kampjuni ND ta' CPA u CSA (75.89 fil-mija ±0.62,80.34 fil-mija ±0.19, rispettivament) urew attività inibitorja ta' -amylase kemmxejn ogħla minn acarbose (75.80 fil-mija ±0.02) fil-konċentrazzjoni 1mg/mL; il-kampjun ND biss ta 'CSA wera attività inibitorja ta' -glucosidase ogħla mill-quercetin kompost ta 'referenza fiż-żewġ konċentrazzjonijiet.

L-abbrevjazzjonijiet għall-kampjuni huma ND: Mhux diġerit; PG: Postgastiic; FI: Bijodisponibbli; BAvl: Indiċi tal-bijodisponibilità; Ir-riżultati ġew iddikjarati bħala l-medja ta' triplikati ± devjazzjoni standard (SD) u acarbose 'kien użat bħala grupp ta' kontroll b'75.8±0.{02 fil-mija inibizzjoni f'1 mg/mL, 65.45±{{{ 10}}.01 fil-mija inibizzjoni f'0.5mg/mL; Ir-riżultati ġew espressi bħala l-medja ta 'triplikati ± devjazzjoni standard (SD) u quercetin intuża bħala grupp ta' kontroll bi 80.4±0.03 fil-mija inibizzjoni f'1 mg/mL, 69.t66±0.05 fil-mija inibizzjoni f'0.5 mg/mL; D Ir-riżultati ġew espressi bħala l-medja ta 'triplikati ± devjazzjoni standard (SD) u quercetin intuża bħala grupp ta' kontroll b'89.33±3.47 fil-mija inibizzjoni f'1mg/mL, 72.03±3.04 fil-mija inibizzjoni f'0.5 mg/mL;* Abbrevjazzjonijiet tal-estratti milwiema: CCA għal C.creticus,CLA għal C.laurifolius,CMA għal C.monspeliensis, CPA għal C.parviflorus,CSA għal C.salviifolius.Ittri differenti fl-istess ringiela jindikaw sinifikat (p<>

Dan l-artikolu huwa estratt minn Molecules 2021, 26, 5322. https://doi.org/10.3390/molecules26175322 https://www.mdpi.com/journal/molecules