Identifikazzjoni ta 'ESTs li Jirrispondu għall-Perossidu tal-Idroġenu Involuti fil-Bijosintesi tal-Glycoside Phenylethanoid fil-Kultura taċ-Ċelloli tas-Salsa ta' Cistanche

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

J. CHEN et al

Astratt
Il-perossidu ta 'l-idroġenu huwa elicitor abijotiku effettiv li jista' jinduċi bijosintesi tal-metaboliti sekondarji fil-pjanti. Aħna nuru li fil-kultura ta 'sospensjoni taċ-ċelluli ta' pjanta mediċinali tolleranti għall-melħCistancheSalsa, il-produzzjoni ta 'komponenti bijoattiviphenylethanoidglikosidi(PeGs) żdiedu wara trattament H2O2. Biex jiġu identifikati ġeni relatati mal-PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi affettwata minn H2O2, bnejna librerija ta’ ibridizzazzjoni sottrattiva ta’ soppressjoni ta’ ġeni li jirrispondu għall-H2O2 bl-użu ta’CistancheSalsalinja taċ-ċelluli u identifikati 105 tikketti ta 'sekwenza espressa (ESTs) u 85 ġene. L-annotazzjoni funzjonali tal-librerija EST u l-analiżi tal-ontoloġija tal-ġeni wrew ġeni relatati ma 'diversi reazzjonijiet ta' stress, bijosintesi ta 'metaboliti sekondarji, u regolazzjoni tat-traskrizzjoni. Fosthom, identifikajna żewġ ġeni relatati mal-PeGs(phenylethanoidglikosidi)mogħdija tal-bijosintesi (4-coumarate coenzyme A ligase u cinnamate 4-hydroxylase), u żewġ fatturi ta' traskrizzjoni tat-tip WRKY. L-espressjonijiet ta 'ġeni magħżula wara t-trattament H2O2 ġew analizzati permezz ta' RT-qPCR. Traskrizzjoni miżjuda bikrija ta 'PeG(phenylethanoidglikosidi)ġeni tal-mogħdija tal-bijosintesi wara t-trattament urew li l-H2O2 indott PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi permezz ta' regolazzjoni 'l fuq tal-ġeni ewlenin tagħha.
Kliem prinċipali addizzjonali: cinnamate-4-hydroxylase, 4-coumarate coenzyme A ligase, soppressjoni ibridizzazzjoni sottrattiva.CistancheSalsa. phenylethanoidglikosidi.

Introduzzjoni

CistancheSalsahija parassita tal-pjanti perenni fuq l-għerq ta 'Haloxylos ammodendrun, u tikber fiż-żona tad-deżert tal-punent taċ-Ċina. Għal sekli sħaħ,Cistanchespeċi ntużat bħala mediċina tal-ħxejjex tradizzjonali (Wang et al. 2012). Komponenti bijoattivi humaphenylethanoidglikosidi(PeGs) li għandhom effett notevoli fuq it-tneħħija tal-ispeċijiet tal-ossiġnu reattiv (ROS), il-protezzjoni mir-radjazzjoni, it-titjib tal-immunità u l-anti-aging (Nan et al. 2013). PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi fiCistanchejinbeda mill-phenylalanine (Fig. 1 Suppl.) u l-aċidu caffeic sintetizzat jiġi glikosilat aktar biex jifforma diversi PeGs(phenylethanoidglikosidi)(Wang et al. 2012). Tliet PeGs ewlenin(phenylethanoidglikosidi), echinacoside, acteoside, u 2'-acetylatteoside, huma meqjusa bħala l-aktar komponenti attivi fiCistanche(Kobayashi et al. 1984). Sabiex itejbu l-kontenut tagħhom fiCistanchekultura taċ-ċelluli, ġew ittestjati diversi elicitors inklużi chitosan, putrescine, Ag plus , u stress osmotiku (Ouyang et al. 2005a,b, Cheng et al. 2005, 2006, Liu et al. 2007, Liu and Cheng 2008). Madankollu, ġeni involuti fil-PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi fiCistanche, prinċipalment ġeni tal-mogħdija tal-metaboliżmu tal-fenilalanina, rarament ġew identifikati. Ġene biss li jikkodifika phenylalanine ammonja-lyase (PAL) reċentement ġie identifikat f'Cistanche deserticola (Hu et al. 2011). Ġeni oħra li jikkodifikaw, pereżempju, cinnamate-4-hydroxylase (C4H), li jista' jikkatalizza l-konverżjoni ta' cinnamate għal cumaric acid, u 4-coumarate coenzyme A ligase (4CL), ġene essenzjali għal-lignin u flavonojdi bijosinteżi, ma nstabux fiCistanche.
Aħna użajna l-kultura taċ-ċelluli taCistancheSalsabiex tistudja PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi u espressjoni tal-ġeni relatati. Aħna investigajna wkoll l-effett ta 'elicitor H2O2 effettiv fuq PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi. Barra minn hekk, biex issib ġeni li jirrispondu kmieni involuti fil-PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi, wettaqna soppressjoni ibridizzazzjoni sottrattiva (SSH) biex nibnu librerija ta' cDNA ta' ġeni li jirrispondu H2O2-.

Fig. 1. Espressjoni tal-ġeni relattiva determinata minn RT-qPCR wara trattament H2O2. Fattur ta' traskrizzjoni CsWRKY1 - WRKY (Contig07), CsC4H1 - cinnamate 4-hydroxylase (Contig09), Cs4CL1 - 4-kumarat: ligase (Contig03), CsHSP1 - proteina ta' xokk tas-sħana 70 kDa (Contig 01), u CsSOD1 - superoxide dismutase (Contig16). Iċ-ċelloli ġew ittrattati b'80 ug dm-3 H2O2 f'mezz likwidu għal 2 sigħat u l-espressjonijiet ġew imqabbla ma' kontroll ittrattat bl-ilma. Mezzi flimkien - SD ta 'tliet repetizzjonijiet bijoloġiċi; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>

materjali u metodi

Il-linja taċ-ċelluli CS2001 ġiet stabbilita minn petali ta 'CistancheSalsa(CA Mey.) Beck miġbura fil-provinċja ta 'Neimenggu u subcultured. Il-metodu tal-kultura kien simili għal protokoll ippubblikat qabel (Liu et al. 2007). Ġeneralment, mezz solidu Murashige u Skoog (1962; MS) intuża għas-sottokultura u medium likwidu għal PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi (kien il-mezz MS modifikat supplimentat bi 30 g dm-3 glukożju u 2.0 mg dm-3 indol-3-aċidu aċetiku). Għat-trattament ta' H2O2, 5.0 ± 0.2 g ta' ċelluli f'perjodu ta' tkabbir mgħaġġel, ġeneralment 20 sa 30 d wara li ġew sottokultivati ​​fil-medju solidu, ġew imlaqqma f'mezz likwidu ta' 50 cm3 f'kunjett Erlenmeyer ta' 250 cm3. u kkultivati ​​fid-dlam bi jew mingħajr konċentrazzjonijiet differenti ta' H2O2. Il-PeGs(phenylethanoidglikosidi)kontenut wara induzzjoni ta '10 d minn H2O2 ġie analizzat skond metodu ppubblikat qabel (Liu et al. 2007) ibbażat fuq kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja b'fażi inversa b'eluzzjoni tal-gradjent tal-metanol.

Iċ-ċelloli 2 sigħat wara t-trattament H2O2 inġabru mill-medju b'karta tal-filtru bl-użu ta 'lembut Büchner, u mbagħad ġew iffriżati fin-nitroġenu likwidu u mitħun fi trab. Kull 2 ​​g ta’ trab taċ-ċelluli ġew lysed bl-użu ta’ taħlita ta’ 1 cm3 ta’ 2-mercaptoethanol, 1 cm3 ta’ 200 g dm{{10}} sarcosyl, u 8 cm3 ta 'buffer GTC (5 M guanidinium isothiocyanate, 62.5 mM Tris-HCl, pH 8.0, 6.25 mM EDTA, pH 8.0, 5 mM thiourea, u 10 mM dithiothreitol). Iċ-ċelloli mbagħad ġew inkubati fuq is-silġ għal 15-il minuta, imbagħad 1/3 volum ta '8.5 M CH3COOK, pH 6.0, ġie miżjud, u ċ-ċelloli ġew inkubati fuq is-silġ għal 15-il minuta u mbagħad ċentrifugati fi 15 000 g għal 15-il minuta. . Is-supernatant ġie miżjud ma 'volum ugwali ta' isopropanol biex jippreċipita RNA totali. L-RNA totali kien ippurifikat aktar minn kit RNeasy mini (Qiagen, Hilden, USA) skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Messenger RNA kien iżolat mill-RNA totali bl-użu ta ' Oligotex mRNA midi kit (Qiagen).

phenylethanoidglikosidifiCistancheSalsa

Ġiet ġġenerata librerija SSH mill-kontroll u 30 fil-mija H2O2-elicit kampjuni taċ-ċelluli 2 sigħat wara l-elicitation permezz ta 'kit ta' tnaqqis ta 'cDNA PCR-select (Clontech, Mountain View, USA). Għall-kostruzzjoni tal-librerija, il-prodotti ġew ippurifikati separatament bl-użu ta 'kit ta' purifikazzjoni tal-ġel (Qiagen) u kklonati f'vettur pGEM bl-użu ta 'kit ta' klonazzjoni TA (Tiangen, Beijing, Ċina). Plażmidi minn kloni indipendenti ġew iżolati u sekwenzati bl-użu T7 primer. Is-sekwenzi kollha tat-tikketta tas-sekwenza espressa (EST) mil-librerija (bis-sekwenzi tal-vettur imneħħija) intużaw għall-assemblaġġ contig mal-CAP3 (http://doua.prabi.fr/software/cap3). L-ESTs ġew miġbura f'kontigs u singletons; intużaw għat-tfittxija tal-omoloġija bl-użu tal-programm BLASTx fl-NCBI (http://blast.ncbi. nlm.nih.gov). Imbagħad is-sekwenzi ġew annotati, analizzati u kklassifikati skont it-termini tal-ontoloġija tal-ġeni (GO) bl-użu ta' Blast2GO (http://www.blast2go.com).
Reazzjoni tal-katina tal-polimerażi kwantitattiva f'ħin reali (RT-qPCR) saret skont Bustin et al. (2009). Il-kampjuni ta 'cDNA ġew sintetizzati bl-użu ta' kit ta 'reaġent PrimeScript RT (Takara, Dalian, iċ-Ċina) minn 0.5 ug ta' RNA totali. RT-qPCR twettqet bl-użu ta 'kits SYBR Premix Ex Taq II u ROX plus (Takara) fuq sistema ABI 7300 PCR f'ħin reali (Applied Biosystems, Foster City, USA) bi tliet repliki tekniċi. Primers ġew iddisinjati bl-użu tas-softwer online Primer3 skond l-istruzzjoni pprovduta minn Takara; primers użati f'dan l-istudju huma elenkati fit-Tabella 1 Suppl. L-espressjonijiet tal-ġeni ġew normalizzati għal 18S RNA, li l-espressjoni tiegħu kienet stabbli fil-kampjuni kollha.

Ir-riżultati ġew analizzati bl-użu tal-verżjoni R 3.1.1, is-sinifikat tad-differenzi ġie vverifikat bit-test t tal-Istudent.

Riżultati

Il-bijosintesi tat-tliet PeGs ewlenin indotta mill-perossidu tal-idroġenu(phenylethanoidglikosidi)fiCistancheSalsaċelluli ta 'sospensjoni (Tabella 1) iżda bl-ebda effett ovvju fuq it-tkabbir taċ-ċelluli (Fig. S2). Il-kontenut ta' echinacoside żdied diġà wara t-trattament ta' 10 ug dm-3 H2O2 (P <0.05), żieda="" ogħla="" ġiet="" irreġistrata="" wara="" l-20="" ug="" dm="" -3="" trattament="" ta'="" h2o2="" (p="">< 0.01),="" u="" l-ogħla="" żieda="" kienet="" wara="" t-trattamenti="" ta'="" 40,="" 80,="" u="" 160="" ug="" dm-3="" h2o2.="" riżultati="" simili="" jintwerew="" għall-acteoside,="" iżda="" l-kontenut="" tiegħu="" laħaq="" il-quċċata="" wara="" t-trattament="" ta'="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2.="" il-bijosintesi="" ta'="" 2'-acetylatteoside="" kienet="" inqas="" sensittiva="" għat-trattament="" ta'="" h2o2;="" żieda="" sinifikanti="" tal-kontenut="" tagħha="" (p="">< 0.05)="" kienet="" f'konċentrazzjonijiet="" ta'="" h2o2="" aktar="" minn="" 40="" ug="" dm-3.="" wara="" t-trattament="" ta'="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2,="" l-ammont="" tat-tliet="" pegs="" ewlenin="">(phenylethanoidglikosidi)żdied b'mod sinifikanti (P ​​< 0.01)="" fuq="" il-kontroll.="" għalhekk,="" din="" il-konċentrazzjoni="" ntużat="" f'esperimenti="">
Biex niġġenera librerija arrikkita għal ġeni li jirrispondu bikrija li huma regolati 'l fuq minn H2O2, użajna cDNA minnCistancheSalsaċelluli ta' sospensjoni ttrattati b'80 ug dm-3 H2O2 għal sagħtejn. Sekwenzar b'pass wieħed 129 kloni rikombinanti fil-librerija SSH ta 105 ESTs nadif wara l-esklużjoni tas-sekwenza tal-vettur. Dawn l-ESTs ċari ntużaw għall-assemblaġġ minn CAP3, u ġew iġġenerati 18-il kontig u 67 singleton (Tabella 2). Għalhekk, 85 ġeni ġew iżolati f'din il-librerija. It-tul medju tal-105 ESTs nodfa kien 527 bp, li huwa adegwat għal klassifikazzjoni funzjonali bbażata fuq is-similarità tas-sekwenza.

phenylethanoidglikosidifiCistancheSalsa

Il-ġeni 85 kollha miksuba fil-librerija ġew irkuprati minn BLASTx kontra d-database tal-proteini mhux redundant GenBank għal xebh ta 'sekwenza (Valur E Inqas minn jew ugwali għal 0.001). Wieħed u għoxrin ġeni ma wrew l-ebda hits fid-database, jistgħu jkunu speċifiċi għalihomCistancheSalsa. Ir-riżultati bil-BLASThits ġew importati fis-softwer Blast2GO għal aktar analiżi tal-arrikkiment tal-mogħdijiet GO u KEGG. Mill-64 ġeni b'suċċessi BLAST, 50 ġew annotati skont id-deskrizzjoni ta 'ġeni omoloġi minn speċi oħra. Il-ġeni annotati ġew imsemmija skont id-deskrizzjoni tal-hits BLAST. L-analiżi GO (Fig. 3 Suppl.) turi li fost dawn il-ġeni 50, kien hemm 14-il ġeni involuti f'reazzjonijiet għal stimuli, u aktar minn 30 ġene relatati ma 'proċessi metaboliċi (Tabelli 1 u 2). Fost dawn il-ġeni, żewġ omologi tal-ġeni tal-mogħdija tal-bijosintesi PeG ġew iżolati kif mistenni: 4-coumarate coenzyme A ligase (imsemmi Cs4CL1: Contig03) u cinnamate 4-hydroxylase (imsemmi CsC4H1: Contig14). Barra minn hekk, RT-qPCR twettaq biex tikkonferma espressjonijiet indotti ta 'ġeni mil-librerija wara t-trattament H2O2.

Biex tikkonferma li l-ġeni essenzjali identifikati mil-librerija SSH kienu risponsivi għat-trattament H2O2, l-espressjonijiet ta 'żewġ PeGs(phenylethanoidglikosidi)Ġeni relatati mal-mogħdija tal-bijosintesi (Cs4CL1, CsC4H1), żewġ ġeni indotti minn ROS (CsSOD1: Contig 16, CsHSP1: CISTH099), u ġene wieħed simili għal fattur ta' traskrizzjoni tal-familja WRKY (CsWRKY1: Contig 07) ġew imkejla bit-trattament RT-qPCR b'H2O2 (Fig. 1). L-espressjonijiet CsC4H1, Cs4CL1, CsSOD1, u CsWRKY1 kienu regolati 'l fuq aktar minn 15-darbiet, 3-darbiet, 45-darbiet, u 4-darbiet, rispettivament sagħtejn wara l-H2O2 trattament. L-espressjoni ta 'CsHSP1 ġiet mibdula biss 1.8 darbiet wara t-trattament H2O2.
Il-kors tal-ħin tal-espressjonijiet ta 'CsWRKY1, CsC4H1, u Cs4CL1 wara t-trattament H2O2 ġie analizzat aktar permezz ta' RT-qPCR (Fig. 2). L-espressjonijiet CsC4H1 u Cs4CL1 żdiedu ħafna (aktar minn 80-darbiet u 50-darbiet, rispettivament) wara t-trattament 16-h u mbagħad irregolati 'l isfel wara 32 siegħa. L-espressjoni ta 'CsWRKY1 kienet regolata 'l fuq aktar minn 20- darbiet f'4 sigħat u mbagħad naqset minn 8 sigħat wara (Fig. 2).

Fig. 2. L-espressjoni relattiva ta' CsWRKY1 (A), CsC4H1 (B), u Cs4CL1 (C) f'ħinijiet differenti wara t-trattament bi 80 ug dm-3 H2O2. L-espressjonijiet ġew normalizzati għal kontroll; (trattat bl-ilma). Mezzi flimkien - SD ta 'tliet repetizzjonijiet bijoloġiċi; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>

Diskussjoni

Il-perossidu tal-idroġenu huwa elicitor tal-pjanti magħruf li juri diversi effetti fuq il-pjanti. Bħal ROS, jista 'jikkaġuna s-sistema ta' scavenging ROS magħmula minn superoxide dismutase, catalase, peroxidases, eċċ., U sservi bħala s-sinjal downstream ta 'melħ, osmotiku u deidrazzjoni.

jenfasizza (Wi et al. 2006, Kar 2011, Furlan et al. 2013, Sathiyaraj et al. 2014). Ġie ssuġġerit li l-ġenerazzjoni ta’ H2O2 fil-pjanti hija akkumpanjata minn bijosintesi ta’ metaboliti sekondarji indotti fil-CistancheSalsakultura taċ-ċelluli. Kif mistenni, ir-riżultati tagħna jiżvelaw li PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi fil-Salsa Cistanchekultura taċ-ċelluli ġiet indotta wara t-trattament H2O2 (Tabella 1). Il-kontenut ta 'tliet PeGs ewlenin(phenylethanoidglikosidi)żdied wara t-trattament H2O2 li jindika r-rwol ċentrali tiegħu fil-bijosintesi tal-PeGs. Ġeni arrikkit fil-librerija SSH aktar issuġġerixxa l-effett tagħha fuq PeGs(phenylethanoidglikosidi)induzzjoni tal-bijosintesi fiSalsa Cistanche.

Ħafna ġeni magħrufa H2O2-responsivi, bħal ascorbate peroxidase (CISTH069, Karyotou and Donaldson 2005), h-quinone oxidoreductase (CISTH125, Bello, et al. 2001), CsSOD1, CsHSP1 (Baruah et al. 2014), u ġeni ta 'rispons tar-reżistenza għall-mard (Contig10, Nanda, et al. 2010), ġew arrikkit fil-librerija SSH (Tabella 3, Tabella 2 Suppl.). Xi wħud minn dawn il-ġeni tipiċi li jirrispondu għal ROS b'espressjoni indotta wara t-trattament H2O2 ġew ikkonfermati aktar minn RT-qPCR (Figuri 1 u 2) li jindikaw li nbniet librerija SSH kwalifikata hawn. Żewġ ġeni tal-mogħdija tal-bijosintesi tal-PeG, CsC4H1 u Cs4CL1, instabu wkoll f'din il-librerija u dawn iż-żewġ espressjonijiet tal-ġeni ġew indotti mit-trattament H2O2 b'mod li jiddependi mill-ħin (Fig. 2). Jissuġġerixxi li t-trattament H2O2 indott PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi fil-livell ġenetiku permezz tar-regolamentazzjoni tal-ġeni tal-mogħdija PAL. Madankollu, PAL u ġeni oħra tal-bijosintesi PeGs downstream (Wang et al. 2012) ma ġewx identifikati fil-librerija SSH; jista 'jkun minħabba li l-librerija ma ġietx sekwenzata biżżejjed. Relazzjoni bejn espressjonijiet indotti minn CsC4H1 u Cs4CL1 u bijosintesi ta' PeGs miżjuda wara t-trattament H2O2 għandha tiġi ċċarata b'analiżi ulterjuri.

Minbarra l-ġeni tal-mogħdija PAL indotti mit-trattament H2O2, instabu żewġ fatturi ta 'traskrizzjoni tal-familja WRKY (CsWRKY1, CsWRKY2) fil-librerija SSH (Tabella 3 u Tabella 2 Suppl.), u espressjoni indotta CsWRKY1 ġiet ikkonfermata minn RT-qPCR . L-espressjoni tagħha kienet tirrispondi għat-trattament H2O2 aktar kmieni mill-espressjoni ta 'żewġ ġeni tal-mogħdija PAL, Cs4CL1 u CsC4H1 (Fig. 2). Minn studji preċedenti, il-ko-espressjoni ta 'xi fatturi ta' traskrizzjoni WRKY u ġeni tal-mogħdija PAL ġiet osservata fir-ross (Gupta et al. 2012). Barra minn hekk, l-espressjoni tal-ġeni PAL hija regolata 'l fuq f'mutant ta' espressjoni żejda OsWRKY03 (Liu et al. 2005). Iż-żewġ fatturi ta 'traskrizzjoni tal-familja WRKY imsemmija hawn fuq jistgħu jkunu involuti wkoll f'PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi fiCistancheSalsa. Interessanti, instabu ESTs relatati mad-deidrazzjoni (CISTH067, CISTH064) fil-librerija SSH, li jistgħu jissuġġerixxu li t-trattament H2O2 kien relatat mal-espressjoni tal-ġeni li jirrispondu għad-deidrazzjoni f'CistancheSalsakif osservat f'pjanti oħra (Schmidt et al. 2013, Zhou et al. 2013). Ġene wieħed relatat mas-sinjalar tal-gibberellin (GA), ir-riċettur tal-gibberellin gid1b-like (CISTH092), ġie identifikat fil-librerija SSH li timplika l-konnessjoni tas-sinjalar GA u t-trattament H2O2 f'CistancheSalsa, li kien irrappurtat ukoll fix-xgħir (Bahin et al. 2011). Madankollu, huma meħtieġa aktar studji biex jikkonfermaw jekk dawn il-ġeni humiex relatati mal-PeGs(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi. Minbarra l-ġeni msemmija hawn fuq, il-librerija SSH mibnija hawn tippreżenta wkoll ġeni bi jew mingħajr hits BLAST. Ittejjeb il-fehim tagħna tal-effett H2O2 fuq C. salsa u l-ewwelnett tipprovdi l-informazzjoni tal-ġeni tagħha involuti fil-bijosintesi tal-PeGs.

Bħala konklużjoni, ivvalutajna l-effett ta 'H2O2 fuq PeGs(phenylethanoidglikosidi)induzzjoni fil-CistancheSalsakultura taċ-ċelluli. Il-librerija SSH inbniet wara t-trattament H2O2, u l-espressjoni ta 'ġeni magħżula ġiet ikkonfermata minn RT-qPCR. Ġew identifikati żewġ ġeni relatati mal-mogħdija tal-bijosintesi tal-PeG u ġeni oħra li jirrispondu għall-H2O2-. Dawn is-sejbiet se jestendu l-fehim tagħna tal-PeGs indotti mill-H2O2-(phenylethanoidglikosidi)bijosintesi fiCistancheSalsagħal-livell molekulari, li jipprovdi l-informazzjoni għall-manipulazzjoni tal-ġeni taCistancheSalsakulturi taċ-ċelluli biex itejbu PeGs(phenylethanoidglikosidi)produzzjoni.

Minn: 'Identifikazzjoni ta' ESTs li jirrispondu għall-perossidu ta' l-idroġenu involuti fil-bijosintesi ta' phenylethanoid glycoside fil-kultura taċ-ċelluli tas-salsa ta' Cistanche' minnJ. CHEN et al.

--- BIOLOGIA PLANTARUM 59 (4): 695-700, 2015 J. CHEN et al. DOI: 10.1007/s10535-015-0541-y

Referenzi

Bahin, E., Bailly, C., Sotta, B., Kranner, I., Corbineau, F., Leymarie, J.: Crosstalk bejn speċi ta 'ossiġnu reattiv u mogħdijiet ta' sinjalazzjoni ormonali tirregola r-rqad tal-qamħ fix-xgħir. - Ċellula tal-Pjanti Environ. 34: 980-993, 2011.
Baruah, K., Norouzitallab, P., Linayati, L., Sorgeloos, P., Bossie,r P.: Speċi ta' ossiġnu reattivi ġġenerati minn prodott li jinduċi proteina ta' xokk tas-sħana (Hsp) tikkontribwixxi għall-produzzjoni ta' Hsp70 u Hsp{{1} }immunità protettiva medjata f'Artemia franciscana kontra vibrios patoġeniċi. - Dev. Komp. Immunol. 46: 470-479, 2014.
Bello, RI, Gomez-Diaz, C., Navarro, F., Alcain, FJ, Villalba, JM: Espressjoni ta 'NAD(P)H: quinone oxidoreductase 1 fiċ-ċelloli HeLa  rwol tal-perossidu tal-idroġenu u l-fażi tat-tkabbir. - J. biol. Chem. 276: 44379-44384, 2001.
Bustin, SA, Vandesompele, J., Pfaffl, MW: Standardizzazzjoni ta 'qPCR u RT-qPCR. - Genet. Inġ. Bijoteknoloġija. Aħbarijiet 29: 40-43, 2009.
Cheng, XY, Wei, T., Guo, B., N, I W., Liu, CZ:Cistanchekulturi ta' sospensjoni taċ-ċelluli deserticola:phenylethanoidglikosidibijosintesi u attività antiossidanti. - Proċess Biochem. 40: 3119-3124, 2005.
Cheng, XY, Zhou, HY, Cui, X., Ni, W., Liu, CZ Titjib ta'phenylethanoidglikosidibijosintesi fiCistanchekulturi ta' sospensjoni ta' ċelluli deserticola minn chitosan elicitor. - J. Biotechnol. 121: 253-260, 2006.
Furlan, A., Llanes, A., Luna, V., Castro, S.: L-aċidu absċisiku jimmedja l-produzzjoni tal-perossidu tal-idroġenu fil-karawett indott minn stress tal-ilma. - Biol. Pjanta. 57: 555-558, 2013.
Gupta, SK, Ra,i AK, Kanwar, SS, Chand, D., Singh, NK, Sharma, TR: Il-ġene funzjonali uniku tar-reżistenza għall-blast Pi54 jattiva mekkaniżmu ta 'difiża kumpless fir-ross. - J. exp. Bot. 63: 757-772, 2012.
Hu, GS, Jia, JM, Hur, YJ, Chung, YS, Lee, JH, Yun, DJ, Chung, WS, Yi, GH, Kim, TH, Kim, DH: Karatterizzazzjoni molekulari tal-ġene phenylalanine ammonja-lyase minnCistanchedeserticola. - Mol. Biol. Rep 38: 3741-3750, 2011.
Kar, RK: Reazzjonijiet tal-pjanti għall-istress tal-ilma: ir-rwol tal-ispeċijiet tal-ossiġnu reattivi. - Imġieba tas-Sinjal tal-Pjanti 6: 1741-1745, 2011.
Karyotou, K., Donaldson, RP: Ascorbate peroxidase, kennies tal-perossidu tal-idroġenu f'membrani glyoxysomal. - Ark h. Biochem. Biophys. 434: 248-257, 2005.
Kobayashi, H., Karasawa, H., Miyase, T., Fukushima, S.: Studji dwar il-kostitwenti ta'cistanchehija herba. 4. Iżolament u strutturi ta '2 phenylpropanoid glycosides ġodda, cistanoside-C, u cistanoside-D. - Chem. Pharm. Bull. 32: 3880-3885, 1984.

Liu, CZ, Cheng, XY: Titjib ta 'phenylethanoidglikosidibijosintesi fil-kulturi taċ-ċelluli taCistanchedeserticola minn stress osmotiku. - Rep. Cell Plant 27: 357-362, 2008.
Liu, JY, Guo, ZG, Zeng, ZL: Akkumulazzjoni mtejba ta 'phenylethanoidglikosidiminn għalf prekursur għal kultura ta 'sospensjoni ta'CistancheSalsa. - Bijokimika. Inġ. J. 33: 88-93, 2007.
Liu, XQ, Bai, XQ, Qian, Q., Wang, XJ, Chen, MS, Chu, CC: OsWRKY03, attivatur tat-traskrizzjoni tar-ross li jiffunzjona fil-mogħdija tas-sinjalar tad-difiża 'l fuq minn OsNPR1. - Ċellula Res. 15: 593-603, 2005.
Murashige, T., Skoog, F.: Medju rivedut għal tkabbir rapidu u bijoassaġġi b'kulturi tat-tessuti tat-tabakk. - Physiol. Pjanta. 15: 473-497, 1962.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF:Phenylethanoidglikosidib'attivitajiet anti-infjammatorji mill-zkuk taCistanchedeserticola kkultivata fid-deżert ta’ Tarim. - Fitoterapia 89: 167-174, 2013.
Nanda, AK, Andrio, E., Marino, D., Pauly, N., Dunand, C.: Speċi ta 'ossiġnu reattiv waqt interazzjonijiet bikrija tal-pjanti-mikroorganiżmu. - J. Integr. Bijol tal-Pjanti. 52: 195-204, 2010.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Produzzjoni mtejba ta 'phenylethanoid glikosidiminn għalf prekursur għall-kultura taċ-ċelluli taCistanchedeserticola. - Proċess Biochem. 40: 3480-3484, 2005a.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Produzzjoni mtejba ta 'phenylethanoidglikosidiminnCistancheċelluli deserticola kkultivati ​​f'bijoreattur tal-airlift loop intern b'riser sifter. - Enżima Microbiol. Tech. 36: 982-988, 2005b.
Salcedo-Morales, G., Jimenez-Aparicio, AR, Cruz-Sosa, F., Trejo-Tapia, G.: Karatterizzazzjoni anatomika u istokimika ta 'haustorium in vitro minn għeruq ta' Castilleja tenuiflora. - Biol. Pjanta. 58: 164-168, 2014.
Sathiyaraj, G., Srinivasan, S., Kim, YJ, Lee, OR, Parvin, S., Balusamy, SR, Khorolragchaa, A., Yang, DC: L-akklimazzjoni tal-perossidu tal-idroġenu ttejjeb it-tolleranza tal-melħ billi tattiva proteini relatati mad-difiża f' Panax ginseng CA Meyer. - Mol. Biol. Rep 41: 3761-3771, 2014.
Schmidt, R., Mieulet, D., Hubberten, HM, Obata, T., Hoefgen, R., Fernie, AR, Fisahn, J., Segundo, BS, Guiderdoni, E., Schippers, JHM, Mueller-Roeber, B.: SALTRESPONSIVE ERF1 jirregola s-sinjalar reattiv dipendenti mill-ispeċi tal-ossiġnu matul ir-rispons inizjali għall-istress tal-melħ
fir-ross. - Ċellula tal-Pjanti 25: 2115-2131, 2013.
Wang, T., Zhang, XY, Xie, WY:Cistanchedeserticola YC Ma, "Desert Ginseng": reviżjoni. - Amer. J. geddum. Med. 40: 1123-1141, 2012.
Wi, SG, Chung, BY, Kim, JH, Lee, KS, Kim, JS Mudell ta 'depożizzjoni ta' perossidu ta 'l-idroġenu fil-kisi tal-weraq tar-ross taħt stress tal-melħ. - Biol. Pjanta. 50: 469-472, 2006.
Zhou, XF, Jin, YH, Yoo, CY, Lin, XL, Kim, WY, Yun, DJ, Bressan, RA, Hasegawa, PM, Jin, JB: CYCLIN H1 jirregola r-risponsi għall-istress tan-nixfa u l-ftuħ stomatiku indott mid-dawl blu minn jinibixxi l-akkumulazzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv f'Arabidopsis. - Physiol tal-Pjanti. 162: 1030-1041, 2013.