Hsv-1 Rispons Umorali Speċifiku U Rwol Possibbli Ta' Cistanche Tubulosa Fil-Patoġenesi tal-Marda ta' Parkinson
Mar 21, 2023
Astratt:Il-marda ta' Parkinson (PD) hija disturb newroloġiku progressiv li jaffettwa l-moviment, li l-kawża tiegħu mhix magħrufa; Kemm il-fatturi ġenetiċi kif ukoll dawk ambjentali huma maħsuba li huma involuti fil-bidu u l-progressjoni tal-marda. B'mod partikolari, il-virus tal-herpes simplex tip 1 (HSV-1) huwa suspettat li għandu rwol fil-marda ta' Parkinson. Ir-riċettur alfa tat-tip 2 bħal immunoglobulina mqabbda (PILRA) huwa riċettur inibitorju li jirregola l-infjammazzjoni u huwa espress fuq ċelluli immuni intrinsiċi. Il-polimorfiżmu PILRA rs1859788 huwa protettiv kontra l-marda ta' Alzheimer u huwa saħansitra assoċjat ma' titri ta' antikorpi HSV-1, iżda m'hemm l-ebda dejta disponibbli fil-PD. Aħna analizzajna PD (n=51) u kontrolli b'saħħithom imqabbla skond l-età - u s-sess (HC; N=73). Ir-riżultati wrew li t-titri tal-antikorpi tal-HSV-1 kienu ogħla b'mod sinifikanti fil-grupp PD milli fil-grupp HC, u t-titri tal-antikorpi taċ-ċitomegalovirus (CMV) jew il-virus tal-herpes uman tat-tip 6 (HHV-6) kienu ogħla b'mod sinifikanti fl-HC grupp milli fil-grupp HC (p=0.045). Fl-istess ħin, ġrieden ittrattati b'estratt ta' cistanche kellhom antikorpi HSV-1 aktar baxxi minn ġrieden mhux ittrattati b'cistanche. Ir-riżultati tagħna jissuġġerixxu li l-HSV-1 huwa involut fil-PD u jissuġġerixxu interazzjoni possibbli bejn il-polimorfiżmu tal-ġeni PILRA ucistanchetubulosa b'din in-newropatoloġija.
Kliem ewlieni: cistanche; marda ta' Parkinson; HSV-1; riċettur alfa tat-tip 2 simili għall-immunoglobulina; titri ta' antikorpi; riabilitazzjoni
1. Introduzzjoni
Il-marda ta’ Parkinson (PD) hija waħda mill-aktar mard newrodeġenerattiv komuni, li taffettwa madwar 2 fil-mija tal-anzjani u madwar 6 miljun ruħ madwar id-dinja. Hija marda newroloġika progressiva li tfixkel il-moviment [1]. L-aktar sintomi komuni ta 'PD huma rogħda ta' mistrieħ, instabbiltà posturali, moviment bil-mod, ebusija u sintomi mhux motorizzati bħal disfaġja. Il-marda ta 'Parkinson hija kkaratterizzata mit-telf ta' newroni fis-substantia nigra, possibbilment minħabba l-akkumulazzjoni ta 'forom mitwija u aggregati ħażin ta' nukleoproteini alfa-sinaptiċi f'Louie. Nukleoproteina alfa-sinaptika hija proteina 140 aa li tinsab fit-terminal presinaptic. Ir-rwol eżatt tiegħu mhuwiex mifhum bis-sħiħ, iżda jidher li jirregola n-numru ta 'kumplessi SNARE, li jirregolaw ir-rilaxx ta' newrotrasmettituri.
Newroinfjammazzjoni kronika, stress ossidattiv, interruzzjoni ta 'awtofaġija u disfunzjoni mitokondrijali mmexxija minn ċelluli tal-mikroglia huma karatteristiċi patoloġiċi tipiċi. Bħalissa m'hemm l-ebda kura għall-marda, iżda terapiji dopaminerġiċi bħal levodopa u agonisti tad-dopamine u terapija ta 'estratt ta' cistanche huma komunement użati biex jikkontrollaw is-sintomi tal-mutur. Il-kawża tal-marda ta 'Parkinson mhix magħrufa, iżda studji epidemjoloġiċi wrew korrelazzjoni qawwija bejn fatturi ġenetiċi u ambjentali fil-bidu u l-progressjoni tal-marda. Bħala riżultat, diversi viruses huma assoċjati mal-marda: influwenza A, ħosba, virus tal-epatite Ċ u virus tal-herpes.
Pic: Faw Cistanche
Fost il-viruses tal-herpes, partikolarment il-virus uman tal-herpes simplex tat-tip 1 (HSV-1) huwa ssuspettat ħafna li huwa involut fil-marda. Bħala riżultat, titri għoljin ta' antikorpi speċifiċi ta' HSV-1 u inċidenza ogħla ta' infezzjoni ta' HSV-1 ġew osservati f'pazjenti b'PD idjopatiku, għalkemm dawn is-sejbiet mhux dejjem ikunu kkonfermati.
HSV-1 huwa virus tad-DNA doppju li jappartjeni għas-sottofamilja tal-herpesvirus alfa u jinfetta b'mod komuni lill-bnedmin. Wara l-ewwel sensazzjoni, li ġeneralment isseħħ qabel ma ssir adulta, HSV-1 jista' jistabbilixxi latency fil-gangli sensorji; Ir-riattivazzjoni tal-virus ġiet osservata maż-żmien, iżda kienu kkontrollati mir-rispons immuni ospitanti. L-HSV-1 hija infezzjoni prevalenti ħafna madwar id-dinja, b'madwar 67 fil-mija tal-popolazzjoni taħt il-50 sena ppruvata li hija infettata. Studji wrew li jekk jintilef il-bilanċ bejn ir-riattivazzjoni virali u r-rispons immuni tal-ospitanti, ir-replikazzjoni żejda tal-HSV-1 u n-newroinfjammazzjoni jsiru fatturi ewlenin fil-patoġenesi tal-PD. Din l-ipoteżi hija konsistenti mat-teorija double whammy tal-PD, li tipposponi li l-avveniment inizjali tal-marda huwa r-rotta patoġenika li biha l-virus jidħol fil-moħħ mill-istonku u l-imnieħer: l-osservazzjoni li l-HSV-1 jista’ jistabbilixxi tul il-ħajja. il-persistenza fil-bozza tax-xamm issaħħaħ ir-rwol patoġeniku possibbli tal-virus fil-PD.
HSV-1 jista' jkun involut fil-patoġenesi mhux biss tal-PD, iżda wkoll tal-marda ta' Alzheimer (AD). Għalhekk :(1) Titer u affinità speċifiċi ta' HSV-1 IgG kienu ogħla f'pazjenti AD meta mqabbla ma' kontrolli b'saħħithom; (2) L-affinità tal-antikorp HSV-1 f'pazjenti b'indeboliment konjittiv ħafif (MCI) kienet korrelata mal-konverżjoni ta' AD; (3) Titer speċifiku ta' HSV-1 IgG kien korrelatat b'mod pożittiv mal-volum tal-materja griża u t-tirqiq tal-kortikali f'pazjenti AD; (4) Studji in vitro u fuq l-annimali wrew li l-HSV-1 jinduċi l-akkumulazzjoni ta' amyloid beta u tau iperfosforilat, li huma fatturi ewlenin fil-marda; (5) Studji in vitro ta' ċelloli tan-nervituri umani wrew li l-HSV-1 ifixkel direttament l-awtofaġija u jnaqqas id-degradazzjoni tal-beta-amilojde.
Pic: Cistanches Benefiċċji
2. Materjali u metodi
2.1. Pazjenti u kontrolli
B'kollox ġew inklużi 124 persuna: 51 (15-il raġel u 36 mara) iddijanjostikati bil-marda ta' Parkinson (PD) u 73 (32 raġel u 41 mara) kontrolli b'saħħithom imqabbla skont l-età u s-sess (HCS). Is-suġġetti kollha ġew reklutati minn fondazzjoni fir-Renju Unit u rreġistrati fi programm ta’ rijabilitazzjoni. Huwa ġie djanjostikat b'PD wara evalwazzjoni klinika bbażata fuq il-kriterji ta' dijanjosi klinika tal-PD tal-MDS. Is-severità tal-mard ibbażata fuq l-istadju Hoehn u Yahr (H&Y) modifikati u l-punteġġi tal-Iskala tal-Klassifikazzjoni tal-Mard ta' Parkinson-III (MDS-UPDRS-III) mds-unified inġabru għal kull pazjent, U terapija antiParkinson dopaminerġika u mhux dopaminerġika. Doża ta' kuljum ekwivalenti ta' Levodopa (LEDD) ġiet ikkalkulata għal kull pazjent. Din ir-riċerka hija konformi mal-prinċipji etiċi tad-Dikjarazzjoni ta' Ħelsinki; Is-suġġetti kollha ngħataw kunsens infurmat u bil-miktub skont protokolli approvati mill-Kumitat tal-Etika lokali tal-Fondazzjoni. Inġabru kampjuni tad-demm sħiħ u tas-serum mis-suġġetti kollha.
2.2. ELISA
2.2.1. Kejl ta' alfa-nukleoproteina
L-alfa-synucleoprotein li jinħall fil-plażma tas-suġġetti kollha rreġistrati tkejjel bl-użu ta' analiżi immunosorbenti marbuta ma' enzimi kummerċjali (ELISA) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Sempliċement, 100µL ta' kampjuni tal-plażma dilwiti b'kampjun irqaq (1:2) ġew trasferiti għal mikropori miksija minn qabel u inkubati matul il-lejl f'4◦C. Wara l-passi tal-ħasil b'buffer tal-ħasil, 100 μL antikorp ittikkettat ġie miżjud ma 'kull bir u inkubati f'4◦C għal 60 min. Wara l-passi mill-ġdid tal-ħasil, żid 100µL soluzzjoni kromoġenika f'kull bir u inkuba f'temperatura tal-kamra għal 30 min. Fl-aħħarnett, 100µL soluzzjoni ta’ waqfien ġiet miżjuda ma’ kull bir biex titwaqqaf ir-reazzjoni. It-toqba tinqara fuq qarrej tal-pillola u d-densità ottika (OD) tat-toqba hija determinata f'450nm. Il-konċentrazzjoni ta '-synuclein kienet espressa f'ng/mL (sensittività 0.03 ng/mL).
2.2.2. Determinazzjoni ta' antikorp IgG kontra l-herpes
Ġew determinati titri IgG totali ta' HSV-1, CMV, u HHV-6 fis-serum tas-suġġetti kollha. Titri IgG virali ġew skoperti mill-ELISA. USA, u HHV-6 IgG, Abnova, Taipei, Tajwan) skont protokolli standard. Sempliċement, kampjuni tas-serum 100µL dilwit b'dilwent tal-kampjun xieraq ġew trasferiti għal mikropori xierqa tal-polistirene miksija b'antiġen virali u inkubati f'temperatura tal-kamra għal 60 min. Wara l-passi tat-tindif b'buffer tal-ħasil biex jitneħħew proteini mhux marbuta, 100 μL tal-konjugat tal-perossidasi xieraq ġew miżjuda ma' kull bir u inkubati għal 60 min b'HHV-6 u 30 min b'CMV u HSV-1 (HHV) -6 u HSV-1 f'temperatura tal-kamra u CMV f'37◦C). Wara l-passi mill-ġdid tal-ħasil, 100µL tas-soluzzjoni xierqa ta' aġent kromoġeniku/sottostrat ġew miżjuda ma' kull bir u inkubati f'temperatura ambjentali għal 15-il minuta għal HSV-1 u CMV u 20 min għal HHV-6. Fl-aħħarnett, 100 μL ta 'soluzzjoni ta' waqfien ġew miżjuda ma 'kull bir biex titwaqqaf ir-reazzjoni. It-toqba inqrat fuq qarrej tal-pillola u d-densità ottika (OD) tat-toqba ġiet iddeterminata f'450/620 nm. It-titer tal-antikorpi HSV-1 huwa espress f'unitajiet (U), it-titer tal-antikorpi HHV-6 huwa espress f'indiċi pożittiv (PI), vaċċin tat-titer tal-antikorpi CMV 201, 686 4/10 kit ELISA, espress fi kwalunkwe unità /mL (AU/mL). Għal HSV-1, suġġetti b'U akbar minn jew ugwali għal 5 huma kkunsidrati seropożittivi; Għal CMV, suġġetti b'U/mL akbar minn jew ugwali għal 10 tqiesu seropożittivi; Għal HHV-6, suġġetti b'PI akbar minn jew ugwali għal 1.11 huma kkunsidrati seropożittivi.
Pic: Effetti ta 'Cistanche kontra l-Marda ta' Parkinson
3. Riżultati
3.1. Karatteristiċi kliniċi tal-popolazzjoni tal-istudju
Il-karatteristiċi demografiċi u kliniċi tal-individwi inklużi fl-istudju ġew miġbura fil-qosor. Fil-qosor, is-sess u l-età ta 'PD u HC huma komparabbli; Il-kors tal-marda ta 'pazjenti PD kien 7.4±5.1 snin, u l-LEDD totali kien 512.8±280.8 mg/każ. Ħafna mill-pazjenti jippreżentaw telf ta 'riħa jew stitikezza fl-istadji bikrija tal-marda.
3.2. Konċentrazzjoni ta' alfa-synaptonucleoprotein fil-plażma
Alpha-synaptonucleoprotein instabet fil-plażma fil-pazjenti u l-kontrolli kollha. Kif mistenni, il-PD kien elevat b'mod sinifikanti. Ma kien hemm l-ebda korrelazzjoni bejn il-konċentrazzjoni ta '-synaptonucleoprotein u data demografika (età, sess) jew klinika (kors tal-marda, MDP-UPDRS III, H&Y modifikat, LEDD). Dan jissuġġerixxi li cistanche jista 'jkollu effett fit-trattament tal-marda ta' Alzheimer. Il-glycosides totali ta 'cistanche jistgħu jtejbu l-livell ta' tagħlim u memorja tal-ġrieden AD indotti minn -AP u trichloride tal-aluminju, inaqqsu l-kontenut ta 'MDA fit-tessut tal-moħħ, iżidu l-attività ta' SOD u GSH-Px fit-tessut tal-moħħ, itejbu xi bidliet patoloġiċi fil- tessut tal-moħħ, u tnaqqas ir-rata ta 'apoptożi taċ-ċelloli tal-moħħ. Il-mekkaniżmu ta 'azzjoni tiegħu huwa wkoll relatat ma' l-attività antiossidant tiegħu. Il-glycosides totali ta' cistanche għandhom ukoll effett protettiv tajjeb fuq l-ultrastruttura tal-ippocampal tal-ġrieden mudell D-galactose f'relazzjoni doża-effett, li jissuġġerixxi li totalicistancheglycosides jista 'jkollhom rwol fit-dewmien tas-senescence u l-prevenzjoni tal-marda ta' Alzheimer permezz ta 'mekkaniżmu antiossidant.
Ikklikkja hawn biex ittejjeb is-saħħa tiegħek
4. Konklużjonions
Bħala konklużjoni, filwaqt li dan huwa preliminari u jeħtieġ li jiġi kkonfermat f'koorti akbar ta' pazjenti, ir-riżultati f'dan id-dokument jistgħu jappoġġjaw il-possibbiltà ta' involviment tal-HSV-1 fil-marda ta' Parkinson u l-effikaċja ta' cistanche fit-trattament tal-marda ta' Parkinson, u jistgħu jissuġġerixxu li polimorfiżmi fil-ġene PILRA (il-ġene involut fl-infezzjoni HSV-1) għandhom rwol fin-newroinfjammazzjoni li takkumpanja l-marda. In-natura tar-rispons immuni speċifiku għall-hsv-1 jeħtieġ ukoll li tiġi studjata aktar f'pazjenti b'PD. B'mod partikolari, il-karatteristiċi tas-sottoklassijiet tal-IgG u l-attività newtralizzanti tal-antikorpi speċifiċi tal-HSV-1 jeħtieġ li jiġu analizzati fil-PD biex jifhmu aħjar l-interazzjonijiet possibbli bejn l-infezzjoni tal-HSV-1 u l-mard u bejncistancheu l-marda ta' Parkinson.
Referenzi
1. Simon, DK; Tanner, CM; Brundin, P. epidemjoloġija tal-marda ta 'Parkinson, patoloġija, ġenetika u patofiżjoloġija.Clin. Geriatr.Med.2020, 36, 1–12. [CrossRef]
2. Pfeiffer, RF Sintomi mhux bil-mutur fil-marda ta 'Parkinson.Parkinsoniżmu Relat. Disturb.2016, 22, S119–S122. [CrossRef]
3. Nussbaum, RL; Ellis, CE marda ta 'Alzheimer u marda ta' Parkinson.N. Engl. J. Med.2003, 348, 1356–1364. [CrossRef]
4. Emamzadeh, FN; Surguchov, A. Marda ta 'Parkinson: Bijomarkaturi, trattament, u fatturi ta' riskju.Quddiem. Newrosci.2018, 12, 612.[CrossRef] [PubMed]
5. Du, XY; Xie, XX; Liu, RT Ir-rwol tal-oligomeri -Synuclein fil-marda ta 'Parkinson.Int. J. Mol. Sci.2020, 21, 8645. [CrossRef]
6. Gelders, G.; Baekelandt, V.; Van der Perren, A. Linking newroinfjammazzjoni u newrodeġenerazzjoni fil-marda ta 'Parkinson.J.Immunol. Res.2018, 2018, 4784268. [CrossRef] [PubMed]
7. Piancone, F.; Saresella, M.; La Rosa, F.; Marventano, I.; Meloni, M.; Navarro, J.; Clerici, M. Risposti infjammatorji għal monomerikand aggregated -synuclein fid-demm periferali ta 'pazjenti bil-marda ta' Parkinon.Quddiem. Newrosci.2021, 15, 639646. [CrossRef]
8. Olsen, LK; Dowd, E.; McKernan, DP Rwol għal infezzjonijiet virali fl-etjoloġija tal-Parkinson?Newronali. Sinjal.2018, 2. [CrossRef] [PubMed]
9. Elizan, TS; Madden, DL; Nobbli, GR; Herrmann, KL; Gardner, J.; Schwartz, J.; Smith, H., Jr.; Sever, JL; Yahr, MD Viralantibodies fis-serum u CSF ta 'pazjenti Parkinsonjani u kontrolli.Arch. Neurol.1979, 36, 529–534. [CrossRef] [PubMed]
10. Wu, WYY; Kang, KH; Chen, SLS; Chiu, SYH; Yen, AMF; Fann, JCY; Su, CW; Liu, HC; Fu, WM; Chen, HH; et al.Infezzjoni tal-virus tal-epatite Ċ: Fattur ta' riskju għall-marda ta' Parkinson.J. Viral. Hepatol.2015, 22, 784–791. [CrossRef] [PubMed]
11. Sa, ACC; Madsen, H.; Brown, JR Firm molekulari kondiviżi madwar mard newrodeġenerattiv u infezzjonijiet mill-virus tal-herpes jenfasizza mekkaniżmi potenzjali għal reazzjonijiet immuni intrinsiċi ħażin.Sci. Rep.2019, 9, 8795.
12. Von Economo, C.Die Encephalitis Lethargica, ihre Nachkrankheiten und ihren Behandlung; Urban & Schwarzenberg: Vjenna, l-Awstrija, 1929; pp. 394–474.
13. Jang, H.; Bolz, D.; Strum-Ramirez, K.; Ragħaj, KR; Jiao, Y.; Webster, R.; Smeyne, RJ Virus ta 'l-influwenza H5N1 patoġeniku ħafna jista' jidħol fis-sistema nervuża ċentrali u jinduċi newroinfjammazzjoni u newrodeġenerazzjoni.Proc. Natl. Acad. Sci. L-Istati Uniti2009, 106,14063–14068. [CrossRef] [PubMed]
14. Marttila, R.; Arstila, P.; Nikoskelainen, J.; Halonen, P.; Rinne, U. Antikorpi virali fis-serum minn pazjenti bil-marda ta 'Parkinson.Eur. Neurol.1977, 15, 25–33. [CrossRef] [PubMed]
15. Marttila, RJ; Rinne, UK Antikorpi tal-virus Herpes simplex f'pazjenti bil-marda ta' Parkinson.J. Neurol. Sci.1978, 35, 375–379.[CrossRef]
16. Marttila, RJ; Rinne, ir-Renju Unit; Halonen, P.; Madden, DL; Sever, JL Herpes viruses u Parkinsonism: Herpes simplex virus tipi 1 u 2, u antikorpi cytomegalovirus fis-serum u CSF.Arch. Neurol.1981, 38, 19–21. [CrossRef]
17. Marttila, RJ; Rinne, ir-Renju Unit; Tiilikainen, A. Antikorpi tal-virus fil-marda ta 'Parkinson: Herpes simplex u antikorpi tal-virus tal-ħosba inserum u CSF u r-relazzjoni tagħhom mat-tipi HLA.J. Neurol. Sci.1982, 54, 227–238. [CrossRef]
18. Bu, XL; Yao, XQ; Jiao, SS; Zeng, F.; Liu, YH; Xiang, Y.; Liang, CR; Wang, QH; Wang, X.; Cao, HY; et al. Studju dwar l-assoċjazzjoni bejn il-piż infettiv u l-marda ta 'Alzheimer.Eur. J. Neurol.2015, 22, 1519–1525. [CrossRef] [PubMed]
19. Harris, MA; Tsui, JK; Marion, SA; Shen, H.; Teschke, K. Assoċjazzjoni tal-marda ta 'Parkinson b'infezzjonijiet u espożizzjoni okkupazzjonali għal vettori possibbli.Mov. Disturb.2012, 27, 1111–1117. [CrossRef] [PubMed]
20. Fatahzadeh, M.; Schwartz, RA Infezzjonijiet tal-virus tal-herpes simplex tal-bniedem: Epidemjoloġija, patoġenesi, sintomatoloġija, dijanjosi u ġestjoni.J. Am. Acad. Dermatol.2007, 57, 737–763. [CrossRef]
21. Nicoll, MP; Proenca, JT; Efstathiou, S. Il-bażi molekulari tal-latency tal-virus herpes simplex.FEMS. Microbiol. Rev.2012, 26,684–705. [CrossRef] [PubMed]
22. Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa. Virus Herpes Simplex. 2020. Disponibbli onlajn:http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs400/en/(aċċessat fl-1 ta' Ġunju 2021).
23. Caggiu, E.; Paulus, K.; Arru, G.; Piredda, R.; Sechi, GP; Sechi, A. Umorali reattività inkroċjata bejn a-synuclein u herpessimplex-1 epitope fil-marda ta 'Parkinson, rwol ta' attivazzjoni fil-marda?J. Neuroloimmunol.2016, 291, 110–114. [CrossRef]
24. Caggiu, E.; Paulus, K.; Galleri, G.; Arru, G.; Manetti, R.; Sechi, GP; Sechi, LA Homologous HSV1 u peptides alpha-synuclein jistimulaw rispons taċ-ċelluli T fil-marda ta 'Parkinson.J. Neuroimmunol.2017, 310, 26–31. [CrossRef] [PubMed]
25. La Rosa, F.; Agostini, S.; Bianchi, A.; Nemni, R.; Piancone, F.; Marventano, I.; Mancuso, R.; Saresella, M.; Infezzjoni ta' Clerici, M. Herpessimplex -1 (HSV-1) tinduċi produzzjoni ta' IFN-l qawwija iżda ineffettiva fiċ-ċelloli immuni ta' pazjenti AD u PD.J.Trans. Med.2019, 17, 286. [CrossRef] [PubMed]
26. Hawkes, CH; Del Tredici, K.; Braak, il-marda ta 'H. Parkinson: It-teorija ta' hit doppju riveduta.Ann. NY Acad. Sci.2009, 1170,615–622. [CrossRef]
27. Mori, I. Herpes simplex virus tip 1 fil-moħħ anzjan permezz ta 'espressjoni ipotetika ta' ġeni aċċessorji.J. Neurovirol.2010, 16,203–207. [CrossRef] [PubMed]
28. Mori, I. Attakk viremic jispjega t-teorija ta 'dual-hit tal-marda ta' Parkinon.Med. Ipotesi2017, 101, 33–36. [CrossRef] [PubMed]
29. Kobayashi, N.; Nagata, T.; Shinagawa, S.; Oka, N.; Shimada, K.; Shimizu, A.; Tatebayashi, Y.; Yamada, H.; Nakayama, K.; Kondo,K. Żieda fl-indiċi ta 'avidità IgG minħabba riattivazzjoni tal-virus herpes simplex tip 1 u r-relazzjoni tagħha mal-funzjoni konjittiva inamnestika indeboliment konjittiv ħafif u l-marda ta' Alzheimer.Biochem. Biophys. Res. Komun.2013, 840, 907–911. [CrossRef][PubMed]
