Żvilupp tat-Tilqim kontra l-Ilsien u d-Dwiefer U Sfidi fl-Induzzjoni ta' Immunità dejjiema: Xejriet U Perspettivi Kurrenti

Astratt:

Il-marda tal-ilsien u d-dwiefer (FMD) hija marda virali estremament kontaġjuża tal-bhejjem ikkawżata mill-ġeneru tal-virus tal-marda tal-ilsien u l-ġrieden: Aphthovirus, li tikkawża impatt ekonomiku serju kemm fuq il-bdiewa individwali kif ukoll fuq l-ekonomija nazzjonali. Ħafna tentattivi biex javvanzaw vaċċin għall-FMD naqsu milli jinduċu immunità sterili. Il-metodi klassiċi tal-produzzjoni tal-vaċċin kienu dovuti għall-akkumulazzjoni selettiva ta’ mutazzjonijiet madwar is-siti antiġeniċi u tat-twaħħil. Riverżjoni ta 'l-aġent permezz ta' għażla pożittiva u kważi speċi swarm, l-użu ta 'dan il-metodu huwa inapplikabbli għall-użu f'żoni mhux endemiċi. L-attenwazzjoni kimika bl-użu ta 'etilenimina binarja (BEI) ipproteġiet l-integrità tal-kapsid u pproduċiet immunità qawwija kontra r-razza ta' sfida.

Il-marda tal-ilsien u d-dwiefer hija marda virali li taffettwa s-sistema immuni tal-annimal. Il-virus tal-marda ta 'l-ilsien u d-dwiefer jista' jinvadi ċ-ċelloli ta 'l-annimali, jeqred il-membrani taċ-ċelluli u l-organi interni, ifixkel il-funzjoni immuni ta' l-annimali, u jagħmilha suxxettibbli għal infezzjoni minn patoġeni oħra.

Fl-istess ħin, it-tilqim tal-vaċċin tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer jista 'jtejjeb l-immunità tal-annimali u jagħmilhom immuni għall-virus. Wara li t-tilqim jirnexxi, l-annimal jipproduċi antikorpi, u meta jerġa 'jkun espost għall-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer, ikun jista 'jipproduċi malajr rispons immuni, li jipprevjeni b'mod effettiv il-virus minn aktar infezzjoni u jikkawża l-marda. li jseħħu.

Għalhekk, it-titjib tal-immunità tal-annimali, speċjalment permezz tat-tilqim kontra l-FMD, huwa mezz importanti għall-prevenzjoni tal-FMD. Fl-istess ħin, il-ġestjoni xjentifika ta 'l-għalf u s-sanità, u miżuri ta' prevenzjoni ta 'epidemija jistgħu wkoll jgħinu biex inaqqsu t-tixrid tal-virus u l-okkorrenza tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer. Minn dan il-lat, għandna bżonn nirriflettu dwar jekk il-ġisem tal-bniedem jeħtieġx li jagħti attenzjoni lit-titjib tal-immunità. Cistanche jista 'jtejjeb b'mod sinifikanti l-immunità tal-bniedem. Cistanche għandu wkoll effetti kontra l-virus u kontra l-kanċer, li jistgħu jsaħħu l-abbiltà tas-sistema immunitarja biex tiġġieled u ttejjeb l-immunità tal-ġisem.

Ikklikkja benefiċċji cistanche tubulosa

Antiġeni virali li ġew sintetizzati kimikament jew espressi f'viruses, plasmidi, jew pjanti ġew ippruvati fit-tilqim tal-annimali. Vaċċini tad-DNA li jesprimu antiġeni tal-proteini strutturali jew mhux strutturali ġew ippruvati biex jimmunizzaw l-annimali. L-użu tal-interleukins bħala adjuvant ġenetiku għal vaċċini tad-DNA għandu effett promettenti. Filwaqt li l-isfidi tal-induzzjoni tal-immunità sterili jinsabu fil-proteini mhux strutturali (NS) tal-FMDV li huma responsabbli għall-apoptosi taċ-ċelloli dendritiċi u għandhom effetti negattivi fuq risponsi limfoproliferattivi li jwasslu għal immunosoppressjoni temporanja. Barra minn hekk, il-qerda tat-traffikar tal-proteini ospitanti minn proteini mhux strutturali soppressa l-proliferazzjoni taċ-ċelluli T CD8 flimkien. Din ir-reviżjoni ppruvat tindirizza approċċi multipli għall-provi tal-iżvilupp tal-vaċċini u l-ostakli tal-produzzjoni tal-immunità sterili.

Kliem ewlieni:

Vaċċin FMD, immunità fit-tul, immunità sterili.

Sfond

Il-marda ta 'l-ilsien u d-dwiefer (FMD) hija infezzjoni virali estremament li tittieħed tal-bhejjem ikkawżata mill-virus tal-marda ta' l-ilsien u l-ġrieden, ġeneru: Aphthovirus, u l-familja Picornaviridae; li jikkaġuna telf ekonomiku serju.1,2 Ungulati domestiċi u selvaġġi huma affettwati ħafna mill-FMD.3–5 Il-protomeri 5S huma prodotti spontanjament minn proteini maturi individwali; VP1, VP3, u VP0, ħamsa minnhom jingħaqdu f'pentamer 12S. Filwaqt li l-kapsid virali 75S huwa ffurmat mill-assemblaġġ tat-12-il pentamer,6,7 l-antiġen 146S sħiħ tal-virus tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer (FMDV) ġie rrappurtat li għandu speċifiċità tal-antiġen simili ħafna għall-kapsid virali. - virus tal-mard tal-ħalq għandu firxa wiesgħa ospitanti, rata għolja ta 'varjazzjoni ġenetika, u differenzi antiġeniċi kbar, u għandu seba' serotipi (A, O, C, Asia1, SAT1, SAT2, u SAT3) u aktar minn 100 serosubtypes.10 Minħabba l-kważi speċi swarm, ħafna varjanti ġodda jidhru wkoll kull sena. M'hemm l-ebda cross-immunity indotta mis-seba' serotipi. Hemm ukoll cross-immunity parzjali biss bejn is-sottotipi varji tal-istess serotip.11 Il-varjabbiltà fi u l-polimorfiżmu tal-FMDV għamlu l-prevenzjoni u l-kontroll tal-FMD diffiċli ħafna.10 L-FMDV rikombinanti tal-adenovirus li jesprimi proteini P12A u 3C ta’ serotipi differenti għandhom wera effett protettiv.12–14

Vaċċini klassiċi inattivati ​​għandhom ħafna nuqqasijiet, inkluż instabbiltà termali, immunità għal ħajja qasira, spiża għolja, riskju ta 'rikombinazzjoni ma' razez selvaġġi, u riverżjoni tal-patoġeniċità.11,15,16.

Minkejja 90 sena ta 'riċerka, m'hemm l-ebda vaċċin effettiv li jipproduċi immunità sterili u solida għall-FMD, iżda l-marda tibqa' enzootika f'żoni kbar tad-dinja. Ħafna tentattivi biex tiġi żviluppata vaċċin kontra l-FMD naqsu milli jinduċu immunità sterili, bi ftit protezzjoni cross-serotype, u tul ta’ żmien inadegwat tal-immunità.17 Il-metodi klassiċi tal-produzzjoni tal-vaċċin, bħall-passaġġ serjali tal-virus fuq il-kultura taċ-ċelluli,18 f’nonpermissive. annimali, u l-ospitanti naturali tiegħu setgħu jnaqqsu l-virus. Dan huwa dovut għall-akkumulazzjoni selettiva ta’ mutazzjonijiet madwar siti antiġeniċi u ta’ rbit.19–21 Madankollu, l-użu tar-riverżjoni tal-aġent b’għażla pożittiva u metodu ta’ swarm ta’ kważi speċi mhuwiex applikabbli għall-użu f’żoni mhux endemiċi.22 DNA u it-teknoloġiji tal-proteini tejbu r-riċerka billi mmodifikaw ir-riċetturi tal-integrin,23 bl-użu ta’ peptidi sintetiċi li jistgħu jkunu kapaċi jinduċu rispons immuni espliċitu fl-annimal.24 Epitopi taċ-ċelluli T-helper intrinsiċi għar-reġjun tal-linja G–H huma epitopi potenti taċ-ċelluli B li jinduċi immunità umorali.25 L-użu ta' interferon rikombinanti (IFN) u interleukin bovina 18 (IL-18) bħala adjuvant tejjeb l-immunità fit-tul f'annimali tal-laboratorju.26,27.

Riċentement, vaċċini rikombinanti tad-DNA tal-vettur ħaj huma indutturi qawwija ta’ limfoċiti T ċitotossiċi (CTL),28,29 Biex tippronunzja dan l-effett fl-FMD huwa meħtieġ adjuvant xieraq.30 Biex jingħeleb dan l-effett, ir-rikombinazzjoni tas-superfamilja Ig ospitanti u l-epitopi tal-FMD tejbet l-umorali. u r-rispons immuni ċellulari tal-annimal.

Il-problema ta' konġestjoni fl-induzzjoni ta' immunità sterili u fit-tul hija mxekkla mill-qerda tat-traffikar tal-proteini ospitanti minn proteini mhux strutturali (NS), speċjalment 3A, għalhekk ma tqanqalx rispons taċ-ċelluli T ta' differenzjazzjoni ta' cluster 8 pożittiv (CD8 plus ) minħabba CTL dgħajjef u l-virus jippersisti fl-annimal.31 Ir-riċetturi tal-integrin li medjaw l-apoptosi taċ-ċelluli dendritiċi derivati ​​mill-mudullun (DC) fixklu l-immunità intrinsika tal-host.32 Guzman et al33 u Joshi et al34 analizzaw risponsi surrogati għall-qtil CTL bħall-proliferazzjoni jew produzzjoni ta 'IFN minn ċelluli li jesprimu CD8, iżda ħafna limfoċiti li jesprimu CD8 plus li mhumiex CTLs jipproduċu IFN, inklużi ċelluli naturali killer (NK) u sottogruppi ta' ċelluli T gamma delta (δ). 35–37

Skont Oh et al,38 ir-rispons tal-IFN jista’ jiġi stimulat mill-ġdid f’baqar imlaqqma li wrew livell għoli ta’ titer ta’ antikorp li jinnewtralizza l-virus fiċ-ċirkolazzjoni fil-jum tal-isfida, li għandu relazzjoni diretta mal-protezzjoni indotta mill-vaċċin b’IFN. - u antikorp newtralizzanti. Barra minn hekk, iċ-ċelluli CD4 plus T huma l-fenotip ewlieni li jiffjorixxi u ċ-ċelloli li jipproduċu l-IFN. Madankollu, f'infezzjoni naturali, kien hemm limfopenja, li koinċidiet mal-ogħla viremja u rispons IFN fis-serum filwaqt li n-numri in vivo tal-plażmoċiti DC (pDC) u in vitro pDC IFN-sekrezzjoni naqsu fil-qosor fi żmien jumejn mill-infezzjoni.39 Produzzjoni ta 'IFN- minn DCs derivati ​​minn monoċiti (MoDCs) u DCs derivati ​​mill-ġilda (DCs tal-ġilda) huwa inibit fil-fażi akuta ta 'infezzjoni tal-ħnieżer. billi tingħata spinta lill-produzzjoni tal-antikorpi u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli T, inkisbu livelli ogħla ta’ attività CTL u espressjoni ta’ IFN fiċ-ċelluli T CD8 permezz ta’ oligonukleotidi sintetiċi bħala aġġuvanti tal-vaċċin tal-mukuża. sfidi biex tinduċi immunità sterili u fit-tul.

Vaċċin Attenwat u Inattivat

Kien hemm ħafna tentattivi biex jittejbu vaċċini tal-FMD ħajjin attenwati b'metodi konvenzjonali bħal passaġġ serjali f'annimali mhux permissivi jew kultura taċ-ċelluli. L-attenwazzjoni nkisbet billi tgħaddi fi speċi mhux suxxettibbli, bħal ġrieden, fniek, u bajd embrijonat sakemm tilfet il-virulenza fil-baqar. Passaġġi serjali ta 'FMDV C-S8c1 f'multipliċità għolja ta' infezzjoni fil-kultura taċ-ċelluli rriżultaw f'ġenoma difettuż (C-S8p260), li kien kompletament protettiv għall-ġrieden kontra sfida letali b'FMDV C-S8c1 u sigur għall-ħnieżer wara tilqim b'doża waħda ta’ C-S8p260.42 Indotta wkoll titri għoljin ta’ antikorpi newtralizzanti u attivat ċelluli T fil-ħnieżer.42

It-trasmissjoni ta 'kuntatt serjali ta' l-iżolat ta 'O Taiwan 97 patoġeniku ħafna, adattat għall-majjal fil-ħnieżer tnaqqas b'mod sinifikanti l-virulenza wara l-14-il passaġġ tal-ħanżir u abolitha wara s-16-il passaġġ. (1D) kienu tranżitorji. L-iżvilupp ta' vaċċin tal-FMD f'ospiti mhux permissivi jista' jwassal lill-aġent biex juża riċetturi ċellulari oħra minbarra Arg-GlyAsp (RGD), test tal-plakka fit-test BHK 21 jista' juri negattiv waqt li l-virus ikun intatt.43 Sostituzzjoni tal-aċidu amminiku. ktajjen tal-ġenb li jinsabu ħdejn l-intersubunit tal-kapsid minn aċidu amminiku ieħor jistgħu jistabbilixxu rabtiet disulfide ġodda jew interazzjonijiet elettrostatiċi bejn l-interfaces tas-subunità u huma jew ipproġettati jew mibdija li jistgħu jintefqu għall-infezzjoni billi tiżdied it-tolleranza tas-sħana tar-razez vaċċinali,44 bl-użu ta’ proċeduri attwali, tal-vaċċini tal-FMD li huma inqas dipendenti fuq katina tal-kesħa ideali. Ir-razez FMDV C-S8p260 huma segmentati kif ukoll kompetenti għar-replikazzjoni li jistgħu jipprovdu l-bażi ta’ attenwazzjoni tal-vaċċini b’żewġ barrieri ta’ sigurtà.45

Il-biċċa l-kbira tar-riċerka turi li l-inattivazzjoni tal-FMDV tal-mudell tal-annimali bl-użu ta’ sostituzzjoni tal-aċidu amminiku f’2C ma kinitx skoperta f’C-S8c1 iżda kienet preżenti fi proporzjon baxx tal-FMDV adattat għall-fniek tal-Indi. l-introduzzjoni mill-ġdid tal-virus adattat għall-fniek tal-Indi fil-ħnieżer. Dawn is-sejbiet juru kif l-introduzzjoni ta’ viruses varjanti ta’ minoranza f’ospitanti artifiċjali tista’ titla’ għad-dominanza tagħhom meta l-ispeċi ospitanti oriġinali tiġi infettata mill-ġdid.47 Minbarra din l-għażla pożittiva u l-għaqda ta’ kważi-speċi, ir-razza vaċċinata tista’ jaqleb għal razza patoġenika. 22

L-inattivazzjoni tal-virus bl-użu ta’ formalin u endonuclease tonqos milli tinattiva l-virus u tiddegrada s-siti antiġeniċi, rispettivament.48 Binary ethyleneimine (BEI) intuża wkoll għall-attenwazzjoni tal-virus filwaqt li tinżamm l-integrità tal-kapsid.15,49 BEI- riċetturi ċellulari inattivati ​​tal-FMD, integrini, jintużaw għat-twaħħil u l-internalizzazzjoni f'ċelluli kkultivati, l-interazzjoni hija medjata minn residwu ta 'aċidu amminiku li jinsab fil-linja GH tal-proteina kapsid VP1.49 Antikorpi monoklonali speċifiċi għall-FMDV jew peptide sintetiku wrew rabta ta' BEI- FMD inattivat ġew internalizzati mill-ko-lokalizzazzjoni tagħhom mal-proteina markatur f'BHK-21, medjata mill-motiv RGD li torbot l-integrin.50 Barra minn hekk, l-inattivazzjoni tal-BEI ma taffettwax l-antiġeniċità tal-linja GH.20,51 L-inattivazzjoni tal-BEI, l-arkitettura tal-virion ippreservata, u r-riċetturi ffavorew l-internalizzazzjoni tal-virus f’ċelloli kkultivati, kif ukoll in vivo, hija medjata mir-rikonoxximent tal-integrin,47,52,53 madankollu, il-kwantifikazzjoni tal-virus kollu turi riżultat minimu meta mqabbel ma’ dak tal-formalina inattivazzjoni (65-71.6 fil-mija), filwaqt li l-inattivazzjoni tal-BEI hija 44.2 fil-mija .49

Passaġġ sekwenzjali tal-FMDV tat-tip C mill-ħnieżer u l-fniek tal-Indi, u miżmum fil-ħnieżer u l-ġrieden li jreddgħu, jirriżulta f'sostituzzjonijiet ta' aċidi amminiċi (I2483T f'2C, Q443R f'3A, u L1473P f'VP1). L-aċidu amminiku mibdul (L1473P), ħdejn il-motiv RGD li jgħaqqad l-integrin, neħħa t-tkabbir tal-virus f'linji ta 'ċelluli differenti u bidel l-antiġeniċità tiegħu.47 Studju ieħor imwettaq minn Burman et al20 wera li bidla waħda ta' aċidu amminiku fl-RGD. plus 1 u RGD plus 4 siti jinibixxu t-twaħħil tal-virus u l-infezzjoni ffaċilitata minn v 6 jew v 8, iżda l-virus juża v 3 għat-twaħħil taċ-ċelluli. Sostituzzjonijiet b'methionine jew arginine fis-sit tat-twaħħil huma inibituri effettivi għal v 6. Żewġ residwi tal-lewċina f'spots RGD plus 1 u RGD plus 4 stabbilizzaw ir-rabta dipendenti fuq l-istruttura immedjatament C terminali għall-RGD.20,54 EDTA-reżistenti irbit ma ' v 6 huwa karatteristika, u l-kumpless stabbli bir-riċettur ċellulari tiegħu kien antiċipat li jipproduċi infettività għolja konsiderevoli tal-FMDV.21

Is-sostituzzjoni ta’ l-alanina b’lewċini fl-ewwel u r-raba’ pożizzjonijiet fl-RGD flimkien ma’ 1 u RGD flimkien ma’ 4 siti tirriżulta fl-inibizzjoni tat-twaħħil tal-virus u t-twaħħil tal-virus ma’ v 6 jew v 8. Madankollu, il-virus juża v 3 għad-dħul taċ-ċelluli.20 Billi razez adattati għall-kultura taċ-ċelluli jużaw l-heparan sulfate proteoglycans (HSPG) bħala riċettur alternattiv. Il-konferma tal-ectodomains tagħhom u l-istat li jgħaqqad il-ligand tal-integrini hija fattur importanti għat-tropiżmu għall-viruses.54

Viruses li jgħaqqdu l-heparan sulfate internalizzaw DC b'mod effettiv iżda ma ppreżentawx antiġen għal-limfoċiti, li jinduċu rispons IgG speċifiku għall-FMDV. rekwiżit esklussiv.

Il-pressjoni selettiva eżerċitata mir-rispons immuni umorali ospitanti għandha rwol importanti kemm fl-għażla kif ukoll fl-istabbilizzazzjoni tal-varjanti antiġeniċi tal-FMDV, li tirriżulta f'alterazzjoni fit-tropiżmu taċ-ċelluli. In vitro, testijiet wrew li passaġġ parallel ta 'FMDV fil-preżenza ta' serum omologu sub-newtralizzanti rriżulta fiż-żamma ta 'mutanti. , il-virus kiber ħażin fiċ-ċelloli BHK-21 u s-sekwenza nżammet b'mod stabbli waqt il-propagazzjoni f'ċelloli BHK-21 li jesprimu l-integrina V 6 bovina (BHK3 V 6), kif ukoll f'baqar inokulati b'mod sperimentali u f'kuntatt. .56

Minn żewġ ktajjen ta' trażmissjoni indipendenti fil-baqar, hemm bidliet ġenomiċi minħabba passaġġ sekwenzjali fuq ir-razza BHK-21-adattata għaċ-ċelluli (li torbot l-heparan sulfate) tal-FMDV. Varjant tat-tip selvaġġ b'mutazzjoni ta' aċidu amminiku f'VP1 356 intgħażel malajr għal replikazzjoni virali in vivo.57

Il-ġeni tat-tħassir jikkodifikaw il-proteina NS li mhix kruċjali għar-replikazzjoni tal-virus in vitro hija teknika alternattiva biex tiġġenera vaċċini ħajjin attenwati. Madankollu, biex ikun utli bħala vaċċin, dan il-virus tat-tħassir xorta jrid ikun jista' jirreplika f'annimali suxxettibbli. Il-vantaġġ ta 'dan l-approċċ, meta mqabbel mal-metodu klassiku ta' attenwazzjoni, li ġeneralment jintroduċi mutazzjonijiet f'numru limitat ta 'siti, huwa li r-riskju ta' riverżjoni għall-virulenza jitnaqqas b'mod sinifikanti58, u l-proteini NS huma epitopi potenti taċ-ċelluli T.59

L-effett intwera f’razez tal-vaċċin tal-FMDV ġenetikament modifikati b’xi sostituzzjoni ta’ aċidi amminiċi fuq is-siti antiġeniċi, bi proprjetajiet ta’ tkabbir simili għall-virus selvaġġ ippruvat li jipproteġi bis-sħiħ lill-annimal minn sfida iżda bil-kapaċità li jirreplika in vitro.60

Il-vaċċin tal-FMD biż-żejt doppju ta' emerġenza wera tnaqqis fil- viremja u l-isfumatura tal-virus u ma wera l-ebda sinjali kliniċi. Kien hemm skoperta konsistenti ta' IL-6, IL-8, u IL-12 f'annimali mlaqqma.61 Filwaqt li ċitokini oħra IL-1, IL-2, TNF , TGF, u interferoni ma ġewx skoperti; dan juri li l-vaċċin ma wassalx rispons infjammatorju sistemiku kif ukoll elevazzjoni sistemika tal-attività tal-limfoċiti T, li hija relatata ma 'protezzjoni ta' ħajja qasira kontra l-FMD.61

IL-2 uman rikombinanti huwa induttur immuni umorali qawwi fil-vaċċin tal-FMD murini mudell.62 Annimali mlaqqma jibqgħu seroconvert pożittivi għal 7-8 xhur u livelli sistemiċi taċ-ċitokini (IL-6, IL{{5 }}, u IL-12) żdiedu wara t-tilqim.63

Kapsidi Viral vojta

Kapsids virali vojta, magħrufa wkoll bħala partiċelli li jixbħu lill-virus (VLP), jinkludu r-repertorju kollu ta’ siti immunoġeniċi misjuba fuq viruses intatti iżda m’għandhomx aċidi nuklejċi infettivi u jinvolvu l-klonazzjoni tal-ġenoma virali essenzjali għas-sintesi, l-ipproċessar u l-assemblaġġ ta’ virus virali. proteini strutturali f’kapsidi virali vojta (ġeni li jikkodifikaw P1-2A u 3Cpro; Figura 1).64 Il-kapsidi vojta huma prodotti b’mod naturali in vitro f’kultura taċ-ċelluli, huma simili antiġenikament, u huma immunoġeniċi.65

L-użu tal-vaċċin tal-kapsid vojt huwa kandidat promettenti peress li jevita l-użu tal-virus fil-produzzjoni tal-vaċċin u jikkonserva l-konformazzjoni tal-epitopi.45 Barra minn hekk, m'hemm l-ebda riskju ta 'riverżjoni tal-virus u rikombinazzjoni mar-razez selvaġġi. Ċelluli mammiferi li jikbru b’sospensjoni ħielsa mis-serum intużaw għall-espressjoni tal-ġene transitorja (TGE) ta’ kapsidi vojta rikombinanti tal-FMDV.66 L-identifikazzjoni ta’ annimali mlaqqma minn annimali infettati jew konvalexxenti hija faċli bl-użu tat-teknoloġija disponibbli bħalissa.67–69.

Vaċċin tas-Subunità

Vaċċin subunità fih antiġeni virali maħsuda permezz ta 'estrazzjoni kimika jew bijo-espressjoni ta' ammont minimu ta 'antiġeni mhux virali f'mezz ta' kultura. , u avvanzi reċenti fil-viroloġija strutturali.71

L-inġinerija ġenetika ntużat biex tbiddel partijiet tal-ġenoma jew tabolixxi reġjun li jikkodifika l-proteini ta 'VP1 f'tentattivi riċenti biex jinħolqu vaċċini attenwati. Bl-użu tad-DNA rikombinanti, inbena virus bis-sit li jgħaqqad ir-riċettur RGD fuq VP1 imneħħi FMDV.72 Fi 7- għal 10-ġrieden jew ħnieżer ta’ ġurnata, dan il-virus ma kienx kapaċi jaderixxi maċ-ċelloli u ma kienx jinduċu infezzjoni.73

Il-proteina tal-kapsid VP1 ta 'FMDV u r-reġjun karbossi-terminali ta' VP1 għandha linja G-H li hija immunoġenika ħafna, li tikkorrispondi għall-epitopi taċ-ċelluli B. Peptide sintetizzat kimikament li jikkonsisti f’reġjuni (residwi 141 sa 158) ta’ proteina tal-kisi tal-virus (VP1) mis-serotip O tal-FMDV ipprovoka livelli għoljin ta’ antikorp newtralizzanti u pproteġi l-baqar kontra t-tilqim intradermolingwali ta’ virus infettiv,24 li jissuġġerixxi l-importanza tal-G. –H loop biex jinduċi rispons immuni umorali. Il-VP1 fih ukoll ir-reġjun ipervarjabbli u s-sit immunoġeniku; l-isfruttament tas-sit ikun il-bażi għal immunoġeniċità wiesgħa.74

L-inkorporazzjoni ta' IFN bħala aġġuvant ġenetiku rriżultat f'dewmien fil-bidu ta' sinjali kliniċi u bidu ta' viremja.75 Baculovirus rikombinanti tad-dud tal-ħarir, li jikkodifika l-protease P1-2A u 3C ta' FMDV Asia 1, kien kapaċi jipproduċi antikorpi speċifiċi. f’annimali mlaqqma u protetti wara sfida b’virus virulenti omologu, u s-sinjali kliniċi ttaffu u ttardjaw.64

Doża waħda ta’ adenovirus difettuż 5 (Ad5) li kien fih il-P1 u r-reġjun ta’ kodifikazzjoni 3C tas-serotip A FMDV (Ad5A24) ġiet indotta, innewtralizza l-antikorpi u tipproteġi l-ħnieżer kontra sfida omologa.76 Madankollu, l-effett fuq il-fergħa immuni ċellulari ma kienx investigat .

Kemm għall-virus vaccinia kif ukoll għall-espressjoni mmexxija minn baculovirus ta 'capsids A-serotype vojta; li kien fih mutazzjonijiet iddisinjati b’mod razzjonali, l-istabbiltà tjiebet fiċ-ċelloli ewkarjotiċi.77 Dan il-metodu biex jiġi prodott l-antiġen tal-vaċċin għandu diversi benefiċċji prospettivi fuq it-teknoloġiji attwali f’termini ta’ spejjeż ta’ produzzjoni, riskju ta’ infezzjoni, u vaċċin termotolleranti.45

Vettur tal-adenovirus uman tat-tip 5 li jesprimi proteina tal-kapsid (P1-2A u protease virali 3C mutata) jagħtu immunità umorali, ċellulari, u mukosali sinifikanti suscitata fil-ġrieden BALB/c. It-tilqim tal-fniek tal-Indi wassal għal antikorpi newtralizzanti sostanzjali u antikorpi immunoglobulina A (IgA) kontra l-FMDV bi protezzjoni ta’ 100 fil-mija tal-fniek tal-Indi kontra l-isfida.78

Adenovirus tal-klieb rikombinanti tat-tip 2 (CAV2) li jesprimi proteini tal-kapsid (P1/3C) (Figura 1) kien kapaċi jikkawża rispons immuni umorali qawwi fil-fniek tal-Indi. Madankollu, il-proteina VP1 li tesprimi l-adenovirus tal-klieb tat-tip 2 (CAV2) ma qanqletx rispons ta’ antikorpi ta’ sostenn fil-fniek tal-Indi jew fil-ġrieden.79

Ħnieżer imlaqqma b'Adenovirus 5 b'kodifikazzjoni ta' cytomegalovirus enhancer A24-2B (Ad5-CI-{24-2BC) stabbilixxew l-ogħla rispons ta' antikorpi newtralizzanti b'7-14 dpv u wasslu għal produzzjoni ogħla ta' IgM f' 7 dpi.14 Promotur modifikat taċ-ċitomegalovirus saħħaħ l-effikaċja tal-vettur u avvanza biex iżid l-infezzjoni taċ-ċelluli fil-kultura taċ-ċelluli, il-grupp li rċieva l-vaċċin kien kompletament protett wara l-isfida.14

Inokulazzjoni intramuskolari ta 'ġrieden b'rikombinanti, proteina tal-kapsid rikombinanti ta' FMDV baculovirus ikklonata b'cytomegalovirus li jsaħħaħ bikri immedjat bħala promotur (CMV-IE), u reġjun ta 'kodifikazzjoni ta' immunoġenu taċ-ċelluli T b'epitopi taċ-ċelluli T, kienu effettivament indotti antikorpi newtralizzanti u interferon gamma ( IFN- ).80 P1- 2A u 3C kodifikazzjoni reġjuni FMD serotip A espress fil-pupae tad-dud tal-ħarir (Bombyx mori) kienu kapaċi jinduċu titers għoljin ta 'antikorpi speċifiċi u kompletament protetti kontra l-isfida virulenti virus omologu.81

Is-sistema ta 'peptidi antiġeniċi multipli hija immunoġenika ħafna meta mqabbla mal-peptide lineari wieħed ta' antiġeni vaċċinali FMD. għal sit antiġeniku ta 'ċelluli T eterotipiċi mill-proteina mhux strutturali 3A [3A (21-35)], intwera li jipproteġi l-ħnieżer kontra sfida virali.83 Dendrimer peptide li jirriproduċi l-FMDV eterotipiku u kkonservat ħafna (21-35) L-epitopi taċ-ċelluli T tejjeb ukoll ir-risponsi newtralizzanti tal-antikorpi u tal-IFN.84 F'70 fil-mija tal-ħnieżer imlaqqma b'B2T, protezzjoni sħiħa - l-ebda sinjali kliniċi ta' mard - kienet osservata mal-isfida tal-virus fil-25 jum wara l-immunizzazzjoni.84

Vaċċini tad-DNA

Is-sit ta’ dħul intern tar-ribosomi (IRES) tal-virus Encephalomyocarditis (EMCV) tħassar u l-ġene L, li huwa involut fl-għeluq taċ-ċelluli permezz tal-proteolysis ta’ eIF46,85 tneħħa u l-EMCV IRES, li ntwera li jżid l-effiċjenza tal-espressjoni, ġie mneħħi. ġew imdaħħla 'l fuq mis-sekwenzi P1.86 Vaċċin tad-DNA li jikkodifika P1-2A u GM-CSF bħala antikorp robust speċifiku u newtralizzanti għall-FMDV indott minn adjuvant, kif ukoll ċitokini ta' approvazzjoni IL-8 u l-produzzjoni tal-IFN fil-majjali.87

Vaċċini tad-DNA bbażati fuq mini ġeni virali li jikkorrispondu għal tliet epitopi ewlenin tal-FMDV taċ-ċelluli B u T ta’ VP1 (sekwenza ta’ aċidi amminiċi 133–156)-3A (sekwenza ta’ aċidi amminiċi 11–40) u VP4 (20–34) jipproteġu ġrieden, fin-nuqqas ta 'antikorpi speċifiċi fil-ħin tal-isfida.88

Amministrazzjoni intranasali tal-vaċċin tad-DNA tal-FMDV; bl-użu ta' chitosan bħala mezz ta' kunsinna u IL-15 bħala l-adjuvant molekulari, indotta rispons immuni mukosali u sistemiku b'immunità msaħħa medjata minn ċelluli (CMI), kif muri mill-livell ogħla ta' proliferazzjoni taċ-ċelluli T, rispons CTL, u espressjoni ta' IFN- kemm f'ċelluli T CD4 plus kif ukoll CD8 plus. 73

Ġrieden imlaqqma bil-plasmid li jesprimu VP1 u IL9 bħala adjuvant ġenetiku u bil-mekkaniżmu kontra l-apoptożi attivat, żviluppaw rispons umorali qawwi, livell għoli ta 'IFN- u perforin fiċ-ċelluli T CD8 flimkien, iżda mhux b'IL{{6} } f'dawn iċ-ċelluli T. IL-9 irregola l-espressjonijiet tal-ġene Beclin u ppreveniet l-apoptosi taċ-ċelluli T.89

Studju ieħor wera li l-vaċċin tad-DNA VP1 li jesprimi interleukin-6 u IFN- użati bħala adjuvants molekulari tejbu risponsi medjati taċ-ċelluli speċifiċi għall-antiġen. Indotta wkoll titer għoli ta’ IgG2a/IgG1, IFN-, IL-4, u maturazzjoni taċ-ċelluli dendritiċi.90

Bl-użu ta' IL-2 bħala aġġuvant ġenetiku fil-kodifikazzjoni tal-vaċċin tad-DNA, żewġ epitopi tal-FMDV VP1 (residwi ta' aċidi amminiċi 141– 160 u 200–213) li jinkludu epitopi multipli għandhom iġibu kemm il-proliferazzjoni taċ-ċelluli T kif ukoll antikorp newtralizzanti kontra l-FMD fil-ħnieżer. bl-użu ta’ IL-2 bħala adjuvant ġenetiku.91,92

Ħnieżer immunizzati bil-plasmid tal-vaċċin tad-DNA kontra l-FMDV li jikkodifika P1-2A3C3D u plasmid li jesprimi 'fattur attivatur taċ-ċelluli B tal-majjal li jappartjeni għall-familja TNF' (BAFF) ippromwova l-attivazzjoni tal-maturazzjoni taċ-ċelluli B u l-bidla tal-klassi tal-immunoglobulina.93

Vaċċin tad-DNA bbażat fuq repliki b’tisħiħ regolari offra strateġija ta’ vaċċin effiċjenti kontra l-FMDV.94 L-inkorporazzjoni ta’ miri antiġeniċi differenti fil-vaċċini tad-DNA hija mod perfett biex isir cocktail ta’ antiġen f’formulazzjoni waħda ta’ vaċċin. Ġrieden immunizzati bi tliet plasmidi li jikkodifikaw l-antiġen tal-virus tal-marda ta’ l-ilsien u d-dwiefer (FMDV), il-virus tal-psewdorabija (PRV), u l-virus tad-deni klassiku tal-ħnieżer (CSFV) wrew riżultati promettenti.95

Inokulazzjoni intramuskolari ta 'fniek ta' l-Indi bi plasmidi tad-DNA li jesprimu FMDV li fihom sekwenza tas-sinjali tal-ġene IgG tal-ħnieżer imlaqqma wriet rispons ta 'antikorpi newtralizzanti u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-milsa żdiedet wara t-tisħiħ, iżda l-annimali ma kinux protetti minn sfida virali.96

Il-vaċċin tad-DNA li jikkodifika l-epitopi taċ-ċelluli T u l-epitopi taċ-ċelluli B mis-siti 135–167 ta’ VP1 u s-sit 1 jinkludi r-reġjun 141–160 (linja G–H) u t-tarf karbossiliku ta’ VP1 ta’ FMDV tip O qanqlu rispons immuni ċellulari qawwi kif osservat bl-użu tat-test tal-proliferazzjoni taċ-ċelluli T.97

It-twassil intranasali tal-vaċċin tad-DNA tal-FMDV li jikkodifika l-proteina tal-kapsid, il-PLGA katjoniku (poly(lactide-co-glycolide) bħala vettura, u l-IL-6 bovina bħala aġġuvant ġenetiku wrew risponsi immuni mukosali u sistemiċi mtejba f’annimali mlaqqma.98

Vaċċin tad-DNA li jesprimi proteina tal-kapsid (P1-2A, 3C, u 3D) ipprajmata b'pGM-CSF u msaħħa b'antiġenu FMDV inattivat wera livell sostanzjali ta' reattività ta' cross-serotype fil-ħnieżer imlaqqma. Livell sinifikanti ta’ reattività ta’ cross-serotype kien irrappurtat kontra A, C, u Asia1 fit-testijiet tan-newtralizzazzjoni tal-virus u tal-ELISA.99 Madankollu, vaċċin tad-DNA li jesprimi proteina VP1 u li jipproduċi RNA antisens immirat lejn il-5ʹUTR tal-FMDV indotta rispons immuni speċifiku f’imlaqqma. ġrieden.72

Vaċċin tad-DNA li jesprimi VP1 flimkien ma’ IL-15 (adjuvant molekulari) saħħaħ l-IgA mnixxija mill-mukuża u l-IgG fis-serum u l-immunità medjata minn ċelluli (CMI), kif ippruvat minn livelli ogħla ta’ proliferazzjoni taċ-ċelluli T speċifiċi għall-antiġen, limfoċiti T ċitotossiċi (CTL), u espressjoni ogħla ta’ IFN- kemm f’ċelluli T CD4 plus kif ukoll CD8 plus li jinformaw is-siti tal-milsa u tal-mukuża.73

Vaċċini rikombinanti huma magħmula billi r-rikombinazzjoni tas-superfamilja Ig ospitanti u l-epitopi virali tejbu r-rispons immuni umorali u ċellulari ta 'annimali mlaqqma. Vaċċini RNA huma swiċċijiet qawwija tal-klassi IgG, minbarra dan, titer għoli ta 'IgM ġie osservat ukoll fil-ġrieden imlaqqma.

Sfidi fl-Induzzjoni ta' Immunità dejjiema

Hemm alterazzjoni sinifikanti tas-sottopopolazzjonijiet tal-limfoċiti T, kompetenza funzjonali, u abbundanza wara infezzjoni b'serotipi differenti ta 'FMDV.102 Hemm regolamentazzjoni 'l isfel ta' boCD4 plus u boCD8 plus T-cells sa 48 siegħa wara l-infezzjoni (pi). Madankollu, down-regulation ta 'boWC1 plus T-cells hija osservata sa 48 hp b'FMDV serotip O. Limfoċiti minn annimali mlaqqma wrew up-regulation sinifikanti ta' boCD4 plus , boCD8 plus , u boWC1 plus T-cells wara espożizzjoni għal FMDV. 102

Wara infezzjoni naturali, hemm żieda sinifikanti fl-espressjoni tal-proteina 3A-NS f'limfoċiti differenti f'korsijiet differenti tal-marda li twassal għal immunosoppressjoni temporanja taċ-ċelluli T CD4 plus u CD8 plus. 34

Il-qerda tat-traffikar tal-proteini ospitanti mill-proteini NS, speċjalment 3A, tfixkel kompletament, u għalhekk ma tqanqalx rispons taċ-ċelluli T CD8 plus,31 Minħabba CTL dgħajjef il-virus baqa' jippersisti fl-annimal. Ir-riċetturi ta' l-integrini jimmedjaw l-apoptosi DC derivata mill-mudullun, li jfixklu l-immunità intrinsika ta 'l-ospitant.32 Fenomenu ieħor importanti li jinterferixxi ma' l-immunità ta 'l-ospitant huwa Lbpro, dominju konservat ħafna li għandu rwol importanti billi jinibixxi l-ubiquitination ta' molekuli ta 'sinjalazzjoni ewlenin fl-attivazzjoni tat-tip. I Rispons ta' IFN bħall-ġene I li jinduċi bl-aċidu retinojku (RIG-I), TANK-binding kinase 1 (TBK1), fattur 6 assoċjat mar-riċettur TNF (TRAF6), u TRAF3.103 Dan inaqqas il-livell ta' bidu immedjat u bikri ta' IFN Prodotti tal-ġeni stimulati mRNA u IFN.102 Barra minn hekk, 3Cpro jimblokka t-trasport intra-Golgi billi jiddegrada l-proteina meħtieġa għat-trasport intra-Golgi.

Guzman et al33 u Joshi et al34 analizzaw risponsi surrogati għall-qtil CTL, bħall-proliferazzjoni jew il-produzzjoni ta' IFN minn ċelluli li jesprimu CD8 li kienu rrappurtati iżda ħafna limfoċiti li jesprimu CD8 plus li mhumiex CTLs li jipproduċu IFN, inklużi ċelluli NK u sottogruppi ta' δ T -ċelloli. 35–37,39,104

L-attività ta' CTL evalwata 10 ijiem wara l-isfida b'Ad5-FMDV-3C indikat żieda sinifikanti fl-attività CTL 10 ijiem wara l-isfida meta mqabbla mal-livelli ta' spinta, iżda reġgħet lura għal-livelli bażi bi 17-il jum wara l-isfida.17 Madankollu, tentattiv biex tiġi evalwata l-attività CTL f'jum 4 naqas milli jikseb biżżejjed ċelluli. Dan kien dovut għal limfopenja u immunopatoloġija kkaġunata mill-FMDV. Hemm assoċjazzjoni pożittiva bejn ir-rispons għall-IFN u l-protezzjoni indotta mill-vaċċin minbarra tnaqqis fil-persistenza fit-tul tal-virus tal-FMD.38

Skont Oh et al, 38 CD4 flimkien ma 'ċelluli T huma l-fenotip multiplikatur maġġuri u ċelluli li jipproduċu IFN.

Irrispettivament mis-serotip tal-FMDV, l-IFN fis-serum laħaq il-quċċata 2-3 ijiem wara l-infezzjoni, il-limfopenija kienet tikkorrispondi mal-ogħla viremija u r-rispons tal-IFN fis-serum, u l-għadd taċ-ċelluli dendritiċi tal-plażmoċiti li jiċċirkolaw (pDC) u l-produzzjoni in vitro tal-pDC IFN naqset b'mod temporanju wara 48 siegħa. Irrispettivament mis-serotip tal-FMDV injettat jew l-età tal-annimal affettwat, l-infezzjoni tal-limfoċiti jew tal-pDCs qatt ma nstabet.39

Il-ġenerazzjoni ta 'IFN- minn DCs derivati ​​minn monoċiti (MoDCs) u DCs derivati ​​mill-ġilda (DCs tal-ġilda) hija mrażżna matul il-fażi akuta ta' infezzjoni tal-ħnieżer. Dan l-impatt iseħħ flimkien ma 'titri virali miżjuda fid-demm, iżda dawn iċ-ċelloli mhumiex infettati b'mod produttiv. Interessanti, il-kapaċità ta’ dawn id-DCs li jieħdu partiċelli u jipproċessaw l-antiġeni ma tbiddilx, li juri li l-antiġeni ma jaffettwawx il-kapaċità tagħhom li jieħdu partiċelli u jipproċessaw l-antiġeni.35

Konklużjoni

Ibbażat fuq il-letteratura ta 'hawn fuq u d-distakk fir-riċerka, tibgħat ir-rakkomandazzjonijiet li ġejjin. L-internalizzazzjoni ċellulari, il-mudell ta 'glycosylation, il-preżentazzjoni ta' l-antiġenu, u l-mekkaniżmi ta 'għażla pożittiva (żvilupp tar-razza patoġenika) tal-vaċċini tradizzjonali għandhom jiġu studjati. CD8 indott mit-tilqim flimkien ma 'T CMI isaħħaħ ir-rispons immuni fit-tul u l-protezzjoni inkroċjata. Hemm rwol ta 'riċetturi taċ-ċelluli δ T fil-patoġenesi immuni, il-persistenza, u l-produzzjoni CTL, li għandhom jiġu studjati b'mod estensiv. Proteina rikombinanti, taħt l-użu ta 'ċitometru tal-fluss, u ELISpot ELISA għall-analiżi tal-internalizzazzjoni tal-partiċelli tal-vaċċin, il-preżentazzjoni tal-antiġen, u l-valutazzjoni taċ-ċelluli li jippreżentaw l-antiġenu cross-talk.

Għandhom jiġu żviluppati għodod ġodda bbażati fuq il-web li juru l-effetti tal-ktajjen tal-ġenb fuq l-epitopi taċ-ċelluli B jew T. L-użu ta' infezzjoni ta' mudell ta' annimali u żvilupp ta' vaċċini u testijiet ta' effikaċja għandhom ikunu mfittxija b'mod ċar minħabba li hemm differenza notevoli fir-riċettur ta' l-integrin fl-annimali tal-laboratorju, u l-ħnieżer u r-ruminanti qegħdin hemm. Stima komputazzjonali ta 'epitopi CTL madwar il-ġenoma billi jintegraw għodod ta' konġettura ta 'epitopi fil-komputazzjoni ta' numru kbir ta 'sekwenzi virali u evalwazzjoni sussegwenti in vivo għandhom vantaġġ kbir biex jipproduċu vaċċini b'protezzjoni fit-tul u kapaċità ta' protezzjoni inkroċjata.

Abbrevjazzjonijiet

3A, Proteina mhux strutturali; Ad5, Adenovirus 5 Vector; 3Cpro, 3C protease (Proteina mhux strutturali); BEI, Ethylenemines Binarji; Ċellula BHK, Ċellula tal-kliewi tal-ħamster Baby; CD4 plus , Fattur ta' differenzjazzjoni ta' cluster erba' pożittivi; CD8 plus , Fattur ta' differenzjazzjoni tal-cluster tmien pożittiv; cDNA, DNA Kumplimentari; CTL, Ċelloli T Ċitotossiċi; DC, Ċellula dendritika; ELISA, Assaġġ Immunosorbent marbut ma' Enżimi; FMD, Marda ta' l-ilsien u d-dwiefer; FMDV, Virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer; Fattur li jistimula GM-CSF, Granuloċiti u Monoċiti; IFN-, Interferon alfa; IFN-, Interferon gamma; Ig, Immunoglobulina; IL, Interleukin; LTR, Ripetizzjoni tat-terminal twila; Ċelloli NK, Ċelloli naturali killer; Proteina NS, proteina mhux strutturali; P1-2A, Ġene għall-prekursur tal-proteini strutturali; P1-2A3C3D, Prekursur tal-proteina strutturali virali P1–2A u l-proteini mhux strutturali 3C u 3D; PBMC, Demm periferali mononukleat; RT- PCR, Reazzjoni b'katina ta' polimerażi ta' traskrizzjoni inversa; SAT, Tip Afrika t'Isfel; TGE, Espressjoni tal-ġene transitorja; TGF, Fattur tat-tkabbir tat-tumur; TNF, Fattur tan-nekrożi tat-tumur; Ċelloli Th, ċelluli T helper; VP1, Proteina virali 1; Ċelloli δ T, ċelluli T Gamma delta.

Dikjarazzjoni dwar il-Kondiviżjoni tad-Data

Id-dejta użata f'din ir-reviżjoni hija sekondarja u hija inkluża fl-artiklu.

Rikonoxximent

Jiena grat ħafna lejn l-uffiċċju tal-viċi president tas-Servizz tar-Riċerka u l-Komunità tal-Università ta’ Gondar talli pprovdi materjali u appoġġ finanzjarju. Nirringrazzja wkoll lill-Kulleġġ tal-Mediċina Veterinarja u x-Xjenzi tal-Annimali, l-Università ta’ Gondar, għall-appoġġ addizzjonali tal-faċilità.

Finanzjament

L-awtur jirringrazzja lill-uffiċċju tal-viċi president tal-Università ta’ Gondar, ir-Riċerka u s-Servizz tal-Komunità.

Żvelar

L-awtur jiddikjara li m'hemm l-ebda kunflitt ta' interess f'dan ix-xogħol.

Referenzi

1. Kitching P, Hammond J, Jeggo M, et al. Kontroll globali tal-FMD — hija għażla? Vaċċin. 2007;25(30):5660–5664. doi:10.1016/j. vaċċin.2006.10.052

2. Raza S, Siddique K, Rabbani M, et al. Patoġenesi mikrobjali fl-analiżi silico ta 'erba' proteini strutturali ta 'serotipi ta' aphthovirus żvelat epitopi sinifikanti taċ-ċelluli B u T. Mikrob Pathog. 2019;128 (Awwissu 2018):254–262. doi:10.1016/j.micpath.2019.01.007

3. Arzt J, Belsham GJ. Trażmissjoni tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer minn baqar trasportatur infettati b'mod persistenti għal baqar naive permezz ta' trasferiment ta' fluwidu orofarinġeali. Dinja tal-Vet. 2018;3:318. doi:10.1128/ mSphere.00365-318

4. Arzt J, Pacheco JM, Stenfeldt C. Patoġenesi tal-virus tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer virulenti u attenwat fil-baqar. Dinja tal-Vet. 2017;14:89. doi:10.1186/s12985-017-0758-759

5. Sobhy NM, Bayoumi YH, Mor SK, El-Zahar HI, Goyal SM. Tifqigħat tal-marda ta 'l-ilsien u d-dwiefer fl-Eġittu: epidemjoloġija molekulari, evoluzzjoni, u sinifikat pronjostiku tal-bijomarkaturi tal-qalb. Int J Vet Sci Med. 2018;6(1):22–30. doi:10.1016/j. biss.2018.02.001

6. Senthilkumaran C, Yang M, Bittner H, et al. Sejbien ta 'ġenoma, antiġen, u antikorpi fi fluwidi orali minn ħnieżer infettati bil-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer. Can J Vet Res. 2017;81:82–90.

7. Palinski RM, Bertram MR. L-ewwel sekwenza tal-ġenoma tal-virus tal-marda ta 'l-ilsien u d-dwiefer tas-serotip O sublineage Ind2001e min-Nofsinhar tal-Vjetnam. Ir-Riżors Microbiol Jħabbar. 2019;8: e01424–18. doi:10.1128/mra.01424-1418

8. Pulido MR, Sobrino F, Borrego B, et al. L-RNA attenwat tal-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer li jġorr tħassir fir-reġjun 3′ mhux kodifikat jista' jqanqal immunità fil-ħnieżer. J Virol. 2009;83(8):3475–85. doi:10.1128/JVI.01836-08

9. Saravanan P, Iqbal Z, Selvaraj DPR, Aparna M, Umapathi V. Tqabbil ta 'metodi ta' estrazzjoni kimika għad-determinazzjoni tal-kontenut ta '146S fil-vaċċin aġġuvant biż-żejt tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer. J Appl Microbiol. 2019;1(Rueckert 1985):1–9. doi:10.1111/jam.14465

10. Jamal SM, Belsham GJ. Il-marda tal-ilsien u d-dwiefer: passat, preżenti u futur. Vet Res. 2013;44(1):1–14. doi:10.1186/1297-9716- 44-116

11. Robinson L, Knight-Jones TJ, Charleston B, et al. Aġġornament globali tar-riċerka dwar il-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer u analiżi tad-distakk: 7 - patoġenesi u bijoloġija molekulari. Transbound Emerg Dis. 2016;63(1):63–71. doi:10.1111/tbed.12520

12. Sreenivasa BP, Mohapatra JK, Pauszek SJ, et al. Adenovirus uman rikombinanti-5 li jesprimi proteini tal-kapsid ta' razez ta' vaċċini Indjani tal-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer iwassal għal rispons effettiv ta' antikorpi fil-baqar. Vet Microbiol. 2017;203:196–201. doi:10.1016/ j.vetmic.2017.03.019

13. Neilan JG, Schutta C, Barrera J, et al. Effikaċja ta' serotipi tal-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer vettur minn adenovirus Vaċċin ta' subunità fil-baqar bl-użu ta' mudell ta' trażmissjoni ta' kuntatt dirett. BMC Vet Res. 2018;14(1):1–9. doi:10.1186/s12917-018- 1582-1

14. Pena L, Pires M, Koster M, et al. Il-kunsinna ta 'virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer antiġen tas-subunità tal-kapsid vojta bi proteina mhux strutturali 2B ittejjeb il-protezzjoni tal-ħnieżer. Vaċċin. 2008;26 (45):5689–5699. doi:10.1016/j.vaccine.2008.08.022

15. Barteling SJ, Cassim NI. Inattivazzjoni mgħaġġla ħafna (u sigura) tal-virus tal-marda ta 'l-ilsien u d-dwiefer u enteroviruses b'kombinazzjoni ta' etilenimina binarja u formaldehyde. Dev Biol (Basel). 2004;119:449–455

16. Rweyemamu MM, Umehara O, Giorgi W, Medeiros R, Neto DL, Baltazar M. Effett tal-formaldehyde u binary ethyleneimine (BEI) fuq l-integrità tal-kapsid tal-virus tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer. Rev Sci Tech. 1989;8(3):747–764. doi:10.20506/rst.8.3.425

17. Garża JR, Kenney M, Pacheco JM, Grubman MJ, Golde WT. Karatterizzazzjoni tal-funzjoni tal-limfoċiti T ċitotossiċi wara l-infezzjoni tal-virus tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer u t-tilqim. Immunol virali. 2013;26(4):239–249. doi:10.1089/vim.2013.0011

18. Rodriguez-Calvo T, Ojosnegros S, Sanz-Ramos M, Garcia-Arriaza J, Escarmis C, Domingo E, Sevilla N. Disinn ġdid ta 'vaċċin ibbażat fuq ġenomi difettużi li jgħaqqdu karatteristiċi ta' vaċċini attenwati u inattivati. PLoS Wieħed. 2010;5(4):1–11. doi:10.1371/ journal.pone.0010414

19. Núñez JI, Baranowski E, Molina N, et al. Is-sostituzzjoni ta 'l-aċidu fil-proteina mhux strutturali 3A tista' timmedja l-adattament tal-virus tal-marda ta 'l-ilsien u d-dwiefer għall-ħanek tal-Guinea. J Virol. 2001. doi:10.1128/JVI.75.8.3977-3983.2001

20. Burman A, Clark S, Abrescia NGA, et al. Speċifiċità tal-linja VP1 GH tal-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer għal integrini v 6. J Virol. 2006;80(19):9798–9810. doi:10.1128/JVI.00577-06

21. Dicara D, Burman A, Clark S, et al. Il-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer jifforma kumpless stabbli ħafna, reżistenti għall-EDTA bir-riċettur prinċipali tiegħu, integrin v 6: implikazzjonijiet għall-infettività. J Virol. 2008;82(3):1537–1546. doi:10.1128/JVI.01480-07

22. Domingo E, Sheldon J, Perales C, et al. Evoluzzjoni tal-kważispeċi virali. Microbiol Mol Biol Rev 2012;76(2):159–216. doi:10.1128/MMBR.05023-11

23. Mckenna TS, Lubroth J, Rieder E, et al. Il-virus tal-marda ta' l-ilsien u d-dwiefer (FMD) li jorbot ir-riċetturi jipproteġi l-baqar mill-FMD. J Virol. 1995;69(9):5787–5790. doi:10.1128/ jvi.69.9.5787-5790.1995

24. Dimarchi R, Brooke G, Gale C, Cracknell V, Doel T, Mowat N. Protezzjoni tal-baqar kontra l-marda tal-ilsien u d-dwiefer permezz ta’ peptide sintetiku. Xjenza. 1986; 232:639–641. doi:10.1126/science.3008333

25. Gómez N, Salinas J, Escribano JM, et al. Rispons immuni protettiv għall-virus tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer b'VP1 espress f'pjanti transġeniċi rispons immuni protettiv għall-virus tal-marda tal-ilsien u d-dwiefer b'VP1 espress f'pjanti transġeniċi. J Virol. 1998;72:2–5.

For more information:1950477648nn@gmail.com