Parametri ta 'estrazzjoni u metodi ta' tnixxif ta 'Cistanche Deserticola

Cistanche huwa l-Cistanche deserticola YC Ma jewCistanche tubulosa (Schenk) Wightzokk imlaħħam niexef bil-weraq bil-qoxra tal-pjanta OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. L-ingredjent attiv ewlieni ta' Cistanche deserticola huwa phenylethanol glycosides [2-4]. Studji farmakoloġiċi wrew li għandu l-funzjonijiet taafrodisjaku, it-titjib tal-immunità, uit-titjib tal-memorja[4-9].

F'dawn l-aħħar snin, il-metodoloġija tal-wiċċ tar-rispons intużat ħafna fl-estrazzjoni tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża [{{0}}]. Il-metodu tal-wiċċ ta 'rispons għandu l-vantaġġi inerenti ta' preċiżjoni għolja ta 'skoperta, inqas numru ta' esperimenti meħtieġa, tbassir preċiż ta 'mudelli ta' funzjoni, u kapaċità li jirrifletti r-relazzjoni bejn fatturi u valuri mbassra [15-17]. Għalhekk, dan l-esperiment juża l-punteġġ komprensiv tal-kontenut tal-ħames phenylethanol glycosides bħala l-valur tar-rispons, u juża softwer Design-Expert 8.0.6.1 biex jiddisinja l-esperiment, jottimizza l-proċess ta 'estrazzjoni ta' Cistanche deserticola, u jipprovdi informazzjoni għall-identifikazzjoni u l-istabbiliment ta' standards ta' kwalità ta'Cistanche deserticola.

Bħalissa, l-indiċikomponenti echinaceaside u verbascosidehuma suġġetti ta 'riċerka jaħarqu fit-teknoloġija ta' l-estrazzjoni u l-ipproċessar ta 'Cistanche deserticola. L-edizzjoni tal-2015 tal-Farmakopea Ċiniża tistipula li l-metodu tal-ipproċessar ta 'Cistanche deserticola huwa "neħħi l-impuritajiet, aħsel, xarrab, aqta' fi flieli ħoxnin, u nixxef." [1], m'hemm l-ebda regolamenti ċari dwar il-metodu tat-tnixxif. Għalhekk, dan l-esperiment uża tmien metodi differenti ta 'tnixxif, inkluż tnixxif mix-xemx, tnixxif ta' dell, tnixxif fil-forn (40, 60, 80, 100, 120 grad), u tnixxif bil-friża, biex jipproċessaw Cistanche deserticola [18], li pprovdew bażi teoretika għall- proċess ta 'tnixxif ta' Cistanche deserticola.

Fuq gwida.

ESTRAT TA' CISTANCHE B'30% ECHINCAOSIDE

1 Materjali u strumenti

Cistanche deserticola frisk inħasad f'Ottubru 2018. Il-post tal-oriġini huwa Mitan Township, Kontea ta 'Minqin, Baiyin, Provinċja ta' Gansu. Il-Professur Assoċjat Guo Yehong tal-Università Agrikola ta 'Gansu identifikaha bħala Cistanche deserticola YC Ma, zokk imlaħħam bi weraq tal-iskala. Sustanzi ta' referenza echinaceaside (numru tal-lott 82854-37-3, frazzjoni tal-massa akbar minn jew ugwali għal 98%), cistancheaside A (numru tal-lott 93236-42-1, frazzjoni tal-massa akbar minn jew ugwali għal 95%), verbascoside (numru tal-lott 93236-42-1 {5}}, Frazzjoni tal-massa akbar minn jew ugwali għal 98%), isomurabasin (numru tal-lott 61303-13-7, frazzjoni tal-massa akbar minn jew ugwali għal 98%), 2′-acetyl verbascoside (numru tal-lott 94492-24-7 , frazzjoni tal-massa Akbar minn jew ugwali għal 95%) inxtraw minn Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; l-aċidu formiku u l-metanol huma ta 'grad ta' kromatografija, Merck Company tal-Ġermanja; l-ilma huwa ilma purifikat, u reaġenti oħra huma ta 'grad analitiku.

Ilmijiet Acquity kromatografu likwidu, PDA detector, Empower chromatography workstation u sistema ta 'ġestjoni tas-solvent kwaternarju; KQ-100E cleaner ultrasoniku, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Kumpanija; AL104 bilanċ analitiku, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 freeze dryer, Telstar, Spanja.

2 Metodi u riżultati

2.1 Preparazzjoni ta' soluzzjoni ta' referenza

Preċiżament iżen l-ammonti xierqa taechinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorbascoside, u standards ta' referenza ta' 2'-acetyl verbascoside, u żid 70% metanol biex tagħmel il-konċentrazzjonijiet tal-massa 1.04, 0.61, 0.63, 0.39, u 0.48 mg/ mL ta 'soluzzjoni ta' referenza mħallta.

2.2 Kundizzjonijiet kromatografiċi ta' Cistanche deserticola

Simetrija tal-Ilmijiet C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm); temperatura tal-kolonna 30 grad, fluss tal-volum 1.0 mL/min; fażi mobbli hija metanol -0.1% soluzzjoni milwiema ta 'aċidu formiku, gradjent ta' elużjoni: 0 ~ 12 min, 29% ~ 34% Metanol; 12-40 min, 34%-40% metanol; 30-35 min, 40%-35% metanol; 35-40 min, 30% metanol;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteoside 5-2′-acetylatteoside

Fig. 1 HPLC ta’ referenza mħallta (A) u kampjun ta’ C. deserticola (B)

2.3 Preparazzjoni tas-soluzzjoni tat-test

Iżen preċiżament 1 g ta’ trab imnixxef ta’ Cistanche deserticola ġo flixkun Erlenmeyer (mgħoddi minn għarbiel 65-malja), żid 50 mL ta’ 50% metanol, iżen il-massa, ultrasoniku f’40 kHz f’150 W, kessaħ għat-temperatura tal-kamra , u agħmel il-quddiesa biex tiksebha.

2.4 Investigazzjoni tar-relazzjoni lineari

Ħu {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4, u 8 mL tas-soluzzjoni ta' referenza mħallta hawn fuq f'10 mL flixkun volumetriku, u żid 70% metanol mal-marka. Iġbed b'mod preċiż 10 μL u kejjel skont il-kundizzjonijiet kromatografiċi ta' "2.2". Il-konċentrazzjoni tal-massa hija l-axxissa (X) u l-erja tal-quċċata hija l-ordinata (Y). Wettaq rigressjoni lineari u l-ekwazzjonijiet tar-rigressjoni huma: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, medda lineari 10.4~832.0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, medda lineari 6.3-504.0 ug/mL; Isomurabasin Y＝92 831 Glycoside Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, medda lineari 4.8~384.0 ug/mL.

2.5 Reviżjoni metodoloġika

2.5.1 Spezzjoni ta 'preċiżjoni

Ħu 20 μL tas-soluzzjoni ta' referenza mħallta fil-punt "2.1" u injetta 6 darbiet kontinwament biex tkejjel l-ogħla żoni ta' echinaceaside, cistancheaside A, verbascoside, isorebascoside, u 2'-acetylverbascoside. L-RSDs huma 0.23% rispettivament. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%, li jindika li l-istrument għandu preċiżjoni tajba.

2.5.2 Test tar-ripetibbiltà

Ħu 6 porzjonijiet tal-istess kampjun ta 'Cistanche deserticola, ipprepara s-soluzzjoni tat-test skont il-punt "2.3", injetta l-kampjun taħt il-kundizzjonijiet kromatografiċi tal-oġġett "2.2", u kejjel iż-żona tal-quċċata. Riżultati Il-frazzjonijiet tal-massa medji ta' echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorebascoside, u 2′-acetyl verbascoside kienu 1.83%, 0.21%, 2.34%, 0.13%, u {{15 }}.68% rispettivament, u l-RSDs kienu 1.32 rispettivament. %, 0.83%, 1.24%, 2.19%,

0.78%, li jindika li l-metodu għandu ripetibbiltà tajba.

2.5.3 Test ta' stabbiltà

Iddetermina l-istabbiltà tal-istess soluzzjoni tat-test (ppreparata skond "2.3") fi 0, 2, 4, 8, 12, 24, u 48 siegħa biex tikseb echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, u isolebascoside. , 2′-acetyl verbascoside peak area, RSD kienu 0.58%, 0.21%, 1.58%, 1.46%, 2.19% rispettivament, li jindika li s-soluzzjoni tat-test kienet stabbli fi żmien 48 siegħa.

2.5.4 Test tal-irkupru tal-kampjun

Ħu 1 g ta' 6 kampjuni ta' Cistanche deserticola b'kontenut magħruf, u żid b'mod preċiż ċertu ammont ta' soluzzjoni ta' referenza mħallta (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg /mL, Verbascoside 2.17 mg/mL, Isolebascoside 0.79 mg /mL, 2′-acetyl verbascoside 0.91 mg/mL), żid 70% metanol biex tlaħħaq sa 50 mL, u injetta kampjuni skond il-kondizzjonijiet kromatografiċi ta' "2.2". L-irkupri medji mkejla huma 101.52%, 99.21%, u 102.62% rispettivament. , 98.62%, 97.36%, RSD huma 1.64%, 1.95%, 0.87%, 1.59%, 1.13% rispettivament, u r-rata ta 'rkupru tal-kampjun hija tajba.

Cistanche hija ħaxixa tonika magħrufa li tista' ssostni u tipproteġi l-kliewi. Fit-teorija tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża, Cistanche hija l-aħjar ħwawar għall-kliewi. Cistanche hija rikka f'echinacoside, acteoside, u flavonoids. Dawn l-ingredjenti effettivi f'Cistanche jistgħu jnaqqsu l-apoptosi taċ-ċelluli tal-kliewi u jżidu l-proliferazzjoni taċ-ċelluli tal-kliewi. Għalhekk, Cistanche huwa suppliment naturali tal-kliewi.