Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol Isalva d-defiċits AD billi timmodula l-attivazzjoni tal-mikroglia Iżda mhux l-istress ossidattiv

Astratt: Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol (EK100) kien iżolat mill-fungus mediċinali speċifiku għat-Tajwan Antrodia camphorate, li huwa magħruf għall-promozzjoni tas-saħħa tiegħu u kontra l- effetti tax-xjuħija fil-mediċina folkloristika. Il-marda ta' Alzheimer (AD) hija marda ewlenija assoċjata mat-tixjiħ. Aħna investigajna l-effikaċja u l-mekkaniżmu potenzjali ta' ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol għal sintomi ta' AD. Drosophila bl-espressjoni żejda pan-neuronali ta 'amyloid-(A) uman intuża bħala l-mudell AD. Aħna qabblu l-ħajja, il-funzjoni tal-mutur, it-tagħlim, il-memorja, l-istress ossidattiv, u l-bijomarkaturi tal-attivazzjoni tal-mikroglia u l-infjammazzjoni tal-ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol- grupp ittrattat għal dawk tal-kontroll mhux ittrattat. Ergosta-7,9(11), it-trattament 22-trien{-3 -ol tejbet b'mod effettiv il-ħajja, il-funzjoni tal-mutur, it-tagħlim, u l-memorja tal-mudell AD meta mqabbel mal-kontroll mhux ittrattat. Il-bijomarkaturi tal-attivazzjoni u l-infjammazzjoni tal-mikroglia tnaqqsu, filwaqt li l-perossidazzjoni tal-lipidi kullimkien, l-attività tal-catalase u l-attività tas-superoxide dismutase baqgħu ma nbidlux. Bħala konklużjoni, ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol isalva d-defiċits tal-AD billi jimmodula l-attivazzjoni tal-mikroglia iżda mhux l-istress ossidattiv.

Glycoside ta 'cistanche jista' wkoll iżid l-attività ta 'SOD fit-tessuti tal-qalb u tal-fwied, u jnaqqas b'mod sinifikanti l-kontenut ta' lipofuscin u MDA f'kull tessut, li jneħħi b'mod effettiv diversi radikali reattivi tal-ossiġnu (OH-, H₂O₂, eċċ.) u jipproteġi kontra ħsara fid-DNA kkawżata. minn OH-radikali. Cistanche phenylethanoid glycosides għandhom kapaċità qawwija ta 'scavenging ta' radikali ħielsa, kapaċità ta 'tnaqqis ogħla minn vitamina C, itejbu l-attività ta' SOD fis-sospensjoni ta 'l-isperma, inaqqsu l-kontenut ta' MDA, u għandhom ċertu effett protettiv fuq il-funzjoni tal-membrana ta 'l-isperma. Cistanche polysaccharides jistgħu jtejbu l-attività ta 'SOD u GSH-Px fl-eritroċiti u tessuti tal-pulmun ta' ġrieden senescent sperimentali kkawżati minn D-galactose, kif ukoll inaqqsu l-kontenut ta 'MDA u kollaġen fil-pulmun u fil-plażma, u jżidu l-kontenut ta' elastin, għandhom effett tajjeb għat-tħaffir fuq DPPH, itawwal iż-żmien ta 'ipoksja fil-ġrieden senescent, itejjeb l-attività ta' SOD fis-serum, u jdewwem id-deġenerazzjoni fiżjoloġika tal-pulmun fi ġrieden senescent b'mod sperimentali B'deġenerazzjoni morfoloġika ċellulari, esperimenti wrew li Cistanche għandu l-abbiltà antiossidant tajba u għandu l-potenzjal li jkun mediċina biex jipprevjeni u jikkura mard tal-ġilda li qed tixjieħ. Fl-istess ħin, echinacoside f'Cistanche għandu kapaċità sinifikanti li jneħħi r-radikali ħielsa DPPH u għandu l-abbiltà li jneħħi speċijiet ta 'ossiġnu reattiv u jipprevjeni d-degradazzjoni tal-kollaġen indotta minn radikali ħielsa, u għandu wkoll effett tajjeb ta' tiswija fuq il-ħsara ta 'anjoni radikali ħielsa tat-timina.

Ikklikkja Fuq il-Benefiċċji tal-Pilloli Cistanche

【Għal aktar informazzjoni:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Kliem ewlieni: Il-marda ta' Alzheimer; Drosophila; EK100; ergosta-7,9(11),22-ppruvat-3 -ol

1. Introduzzjoni

Antrodia camphorata huwa fungus mediċinali uniku għat-Tajwan u kien wiċċ ekonomiku importanti għall-kummerċ barrani tat-Tajwan fis-seklu 19 [1]. L-ewwel ktieb tal-istorja tat-Tajwan, Tâi-uân Thong-sú (litteralment l-Istorja Ġenerali tat-Tajwan), irreġistra l-użi mediċi indiġeni tal-kanforat Antrodia, inkluż l-eliminazzjoni tal-patoġeni, "titjib tas-saħħa", "tisħiħ tad-demm", "ditossifikazzjoni tal-alkoħol", " jipproteġu l-fwied", u "anti-aging" [2–4]. Peress li qed niffaċċjaw sfida globali tas-saħħa tal-popolazzjoni minħabba t-tixjiħ [5], l-istudju xjentifiku tal-mediċina indiġena biex jiġi sfruttat l-għarfien kontra t-tixjiħ huwa kruċjali.

Fost il-mard maġġuri assoċjat mat-tixjiħ, bħalma huma d-deġenerazzjoni makulari, l-aterosklerożi, il-kanċer u l-puplesija, il-marda ta 'Alzheimer (AD) hija ġewż iebes biex jinqasam minħabba l-mekkaniżmu patoloġiku elużiv tiegħu. Trattament effettiv li jimmodifika l-mard għall-AD għadu mhux disponibbli [6]. Ipotesi patoloġiċi attwali ta 'AD jinkludu iżda mhumiex ristretti għal, tnaqqis fil-kolin acetyltransferase, eċċitotossiċità tal-glutamate, aggregazzjoni ta' beta amilojde (A), fosforilazzjoni tau, reżistenza għall-insulina tal-moħħ [7], u alterazzjonijiet tal-mikrobijoma tal-musrana [8]. Madankollu, irrispettivament mit-tip ta 'kawżi li jibdew l-AD involuti, l-istress ossidattiv u l-attivazzjoni tal-mikroglia infjammatorja huma s-sinjali komuni li jakkumpanjaw in-newrodeġenerazzjoni tal-AD [9,10]. Interessanti, in-newroinfjammazzjoni u l-istress ossidattiv huma avvenimenti interrelatati li huma kemm osservati fl-AD kif ukoll ipoteżiti fil-patoloġija tal-AD. Min-naħa waħda, plakek senili ta 'depożizzjoni A jikkawżaw reazzjonijiet infjammatorji, attivazzjoni tal-mikroglia, rilaxx ta' ċitokini, u astroċitosi, li jwasslu għal konsegwenzi mhux mixtieqa bħal korriment newronali progressiv u, finalment, disfunzjonijiet konjittivi. L-attivazzjoni ta 'risponsi immuni tista' inizjalment tiġġieled il-patoġeni li jinvaduh b'A jew telimina depożiti A eċċessivi; madankollu, il-proċess inevitabbilment jipproduċi speċi ta 'ossiġnu reattiv (ROS), li jistgħu jikkawżaw ħsara newronali fil-mikroambjent. Min-naħa l-oħra, A jista 'jikkawża ROS b'mod indipendenti mill-infjammazzjoni. Pereżempju, A nstab fil-membrani mitokondrijali ta 'AD postmortem u seta' jidħol fil-mitokondrija, li jikkawża tfixkil tal-katina tat-trasport tal-elettroni (ETC) u jirriżulta fil-ġenerazzjoni ROS. ROS elevati jistgħu, imbagħad, iqanqlu rilaxx ta 'ċitokini u jibdew infjammazzjoni [7,9,10]. Għalhekk, molekuli anti-ossidattivi u anti-infjammatorji jistgħu jkunu terapewtiċi potenzjali għall-AD.

Antrodia camphorate, speċjalment wieħed mill-komposti mgħaddsa tiegħu iżolati fil-brodu sħiħ ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol (magħruf ukoll bħala EK100), wera antiossidattivi u anti-ossidanti profondi. -attivitajiet infjammatorji [11-13]. Barra minn hekk, Chang et al. [14] wrew li antroquinonol, kompost ieħor iżolat mill-miċelju iffermentat ta 'Antrodia camphorate, itejjeb it-tagħlim u l-memorja f'mudell ta' ġrieden AD b'astrogliosis mnaqqsa u stress ossidattiv. Madankollu, ir-relazzjonijiet kawżali bejn l-astrogliosis mnaqqsa u l-istress ossidattiv fuq it-trattament b'antroquinonol ma setgħux jiġu kkonfermati, u t-tnaqqis tal-istress ossidattiv ġie postulat bħala l-fattur ta 'medjazzjoni [14]. Is-sigurtà ta' EK100 ġiet ittestjata qabel wara l-Linja Gwida 407 ta' l-Organizzazzjoni għall-Kooperazzjoni u l-Iżvilupp Ekonomiku (OECD) f'mudell ta' ġrieden ta' 10 u 20 mg/kg-ġurnata [15]. Għalhekk, f'dan l-istudju adottajna konċentrazzjonijiet bejn wieħed u ieħor ekwivalenti ta 'għalf b'xejn għad-dubbien tal-frott.

Il-mudell tad-dubbiena tal-frott (Drosophila melanogaster) ta 'espressjoni żejda A 42 huwa mudell ta' annimal AD stabbilit sew [16], b'sintomi AD karatteristiċi inklużi ħajja mnaqqsa, defiċits fit-tagħlim u fil-mutur [17], stress ossidattiv [18], u attivazzjoni mikrogliali. [19]. L-isfidi tal-mudellar tal-AD f'Drosophila melanogaster jinkludu l-ebda attività BACE f'Drosophila u differenzi bejn is-sessi, li juru sintomi aktar severi f'fajls maskili. Dawn mhumiex osservati fl-AD tal-bniedem [20]. Għalhekk, aħna adottajna l-peptide uman A 42 li jesprimi dubbien għall-mudell AD, fejn il-produzzjoni A 42 ma teħtieġ l-ebda attività BACE. F'dan l-istudju, aħna ttestjajna jekk EK100 itejjeb is-sintomi ta 'AD, u aktar importanti, jekk iż-żewġ modulazzjonijiet ta' stress ossidattiv u astrogliosis humiex essenzjali biex itejbu l-AD.

2. Riżultati

2.1. Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol Salvata Sopravivenza u Tixbit ta' AD Drosophila

Id-dijanjosi ta' l-AD hija assoċjata ma' tnaqqis fil-medjan tal-ħajja [21], u kważi nofs il-pazjenti AD jsofru minn disturbi fl-attività [22]. Għalhekk, aħna ttestjajna jekk l-estratt ta' Antrodia camphorata ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol (EK1{00) itejjebx is-sopravivenza u l-kapaċità tat-tixbit ta' Mudell AD Drosophila. Sibna li t-trattament b'125 jew 250 µg/mL ta' ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol tejbet is-sopravivenza ta' AD Drosophila b'mod sinifikanti (p < 0.01) (Figura 1A u Tabella Supplimentari S1), iżda li doża għolja biss (250 µg/mL) tejbet it-tixbit ta 'AD Drosophila (Figura 1B). Peress li l-defiċits tas-sopravivenza u l-mobilità huma sintomi kliniċi ta’ AD, il-konċentrazzjoni ta’ 250 µg/mL, li tejbet iż-żewġ sintomi, intużat fl-investigazzjonijiet li ġejjin.

2.2. Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol Tagħlim Salvat u Memorja ta' Siegħa ta' AD Drosophila

Sussegwentement, ittestjajna jekk it-trattament tal-ergosta{{0}},9(11),22-trien-3 -ol itejjebx id-difetti fit-tagħlim u l-memorja, sintomu distintiv tal-AD. Id-dubbien AD ġew ittrattati b'ergosta- 7,9(11),22-trien-3 -ol f'250 ug/mL għal 14-il jum u soġġetti għal testijiet ta' tagħlim u memorja b' T-labirint. Kif muri fil-Figura 2A, meta mqabbel mal-kontroll tat-tip selvaġġ (AD(-)/EK(-)), il-kapaċità tat-tagħlim tal-kontroll AD (AD( plus )/EK(-)) naqset b'mod sinifikanti (p <0.01), filwaqt li It-trattament ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol tejbet b'mod sinifikanti l-abbiltà tat-tagħlim tal-AD (p < 0.05). Barra minn hekk, ergosta-7,9(11), it-trattament 22-trien{-3 -ol tejbet ukoll it-tnaqqis tal-memorja ta' siegħa ta' AD (Figura 2B).

2.3. Ergosta-7,9(11),22-ppruvat-3 -ol Attivazzjoni Mikrogliali Modulata f'AD Drosophila

Sussegwentement, ittestjajna jekk it-trattament ta' ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol inaqqasx l-attivazzjoni tal-mikroglia fl-AD. Fl-AD, mikroglia attivata huma akkumpanjati minn fagoċitosi u newrodeġenerazzjoni [23]. F'Drosophila, il-markatur tal-ingaġġ taċ-ċelluli tal-mikroglia, u għalhekk il-markatur tal-attivazzjoni tal-mikroglia, huwa l-espressjoni ta 'draper (Drpr) u s-CED downstream [24]. Wara t-trattament ta' ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol, id-dubbien AD inqatlu, u l-RNA ġie estratt mir-ras tad-dubbien għal RT-qPCR. Kif muri fil-Figura 3A, iż-żewġ Drpr kienu rregolati b'mod sinifikanti 'l isfel f'ergosta-7,9(11),22-trien-3 -AD Drosophila trattat b'mod meta mqabbel mal-AD mhux ittrattat. Dan jimplika li ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol naqqas l-attivazzjoni mikrogliali f'AD Drosophila. Barra minn hekk, ergosta-7,9(11), it-trattament 22-trien{-3 -ol naqqas ukoll l-infjammazzjoni tas-CNS, kif żvelat fir-regolazzjoni 'l isfel tal-ġeni relatati mal-infjammazzjoni (Figura 3B) .

2.4. Ergosta-7,9(11),22-ppruvat-3 -ol Ma Immodulax Stress Ossidattiv kullimkien f'AD Drosophila

Sussegwentement, aħna ttestjajna jekk il-modulazzjoni tal-istress ossidattiv kullimkien—jiġifieri, ġisem kollu—hijiex meħtieġa għal ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol biex isalva l-AD. It-trattament ta' Ergosta-7,9(11),22-ppruvat- 3 -ol ma biddilx il-perossidazzjoni tal-lipidi (Figura 4A), l-attività tal-catalase (Figura 4B), l-attività tas-superoxide dismutase (Figura 4C) , jew l-espressjoni ta 'ġeni relatati mal-istress ossidattiv (Figura

3. Diskussjoni

Dan l-istudju jirrapporta l-effikaċja u l-mekkaniżmu sottostanti possibbli ta’ ergosta-7,9(11),22- tries-3 -ol, estratt minn Antrodia camphorate, għall-modifika tas-sintomi ta’ AD bl-użu tad-Drosophila mudell b'espressjoni żejda umana-A. Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol tejbet b'mod effettiv it-tagħlim u l-memorja u estendiet il-ħajja tal-pazjenti bl-AD. Barra minn hekk, il-bijomarkaturi tal-attivazzjoni u l-infjammazzjoni tal-mikroglia tnaqqsu, filwaqt li l-istress ossidattiv kullimkien ma nbidilx.

Hemm ħafna sorsi ta 'stress ossidattiv fl-AD, inklużi iżda mhux limitati għall-attivazzjoni tal-immunità intrinsika-per eżempju, A akkumulazzjoni, it-tfixkil tal-mitokondrija minn A , tau iperfosforilat, u malmetaboliżmu tal-metall huma wkoll sorsi [25]. Għalkemm l-infjammazzjoni u l-istress ossidattiv jistgħu jinduċu lil xulxin b'mod reċiproku, nistgħu nassumu li l-bidliet sinkroniċi tagħhom iseħħu biss taħt ċirkostanzi li fihom sorsi oħra ta 'stress ossidattiv jibqgħu kostanti. Madankollu, dan mhuwiex il-każ f'dan l-istudju. Tnaqqis fl-immunità intrinsika, speċjalment l-attivazzjoni tal-mikroglia, fl-istess ħin, jnaqqas il-kontribut tiegħu għat-tneħħija ta 'A , li jista' jirriżulta f'akkumulazzjoni A. B'mod intriganti, Akkumulazzjoni nnifisha tixpruna l-produzzjoni ta 'stress ossidattiv f'diversi modi. Għalhekk, EK1000 s li jonqsu l-attivazzjoni tal-mikroglia u r-risponsi infjammatorji jistgħu parzjalment jipproteġu n-newroni minn attakki immuni mhux fil-mira iżda se jħallsu l-prezz tal-attenwazzjoni ta 'A clearance. Għalhekk, ir-riżultat ta 'dan l-istudju jista' jirrifletti l-limitazzjoni tal-istrateġija tal-mira tal-mikroglia, għall-inqas fil-mudell AD Drosophila.

Is-sistema immuni innata medjata mill-mikroglia hija deskritta bħala xabla b'żewġ truf f'mard newrodeġenerattiv, speċjalment AD [26,27]. Il-mikroglia attivata tipprova tneħħi patoġeni tossiċi bħal A, iżda inevitabbilment tikkawża ħsara newronali fil-mikroambjent. Is-superjorità ta '250 µg/mL EK100 fi żmien 35 jum tista' timplika li l-istrateġija li titnaqqas l-attivazzjoni tal-mikroglia hija limitata għall-istadju patoloġiku, għall-inqas fil-każ tal-mudell AD tad-dubbiena tal-frott. Barra minn hekk, it-tnaqqis sinifikanti tal-bijomarkaturi għall-attivazzjoni tal-mikroglia u r-rispons infjammatorju naqas milli jissarraf f'titjib sinifikanti simili fis-sopravivenza, u l-funzjoni tas-CNS tista 'tiġi parzjalment spjegata mill-karatteristika ta' xabla b'żewġ xfar tal-mikroglia. Dan jimplika li l-attivazzjoni tal-mikroglia la hija l-uniku u lanqas dominanti tal-progress tal-AD. Attivazzjoni mikrogliali mnaqqsa timplika wkoll li d-degradazzjoni tal-A overespressed kienet parzjalment mitfija fil-mudell tad-dubbiena tal-frott, li jista 'jispjega wkoll il-mortalità ogħla għall-konċentrazzjoni ogħla ta' EK100 bejn l-etajiet ta '35 u 52 jum.

Antroquinonol, estratt ieħor minn Antrodia camphorate, ġie rrappurtat għall-effikaċja tiegħu fit-trattament tal-ġrieden AD, li għalih it-tnaqqis tal-istress ossidattiv ġie postulat bħala l-fattur ta 'medjazzjoni [14]. Għalhekk, dan jista' jimplika li antroquinonol u ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol itejbu s-sintomi tal-AD permezz ta' mogħdijiet indipendenti, li jimmedjaw stress ossidattiv jew le, rispettivament. Għalhekk, ikun interessanti li jiġi ttestjat jekk il-ko-trattament b'antroquinonol u ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol ikollux effett sinerġetiku fuq it-titjib tal-AD.

Għall-istadju bikri tal-AD, il-fokus ewlieni tad-disinn tal-mediċina huwa l-eliminazzjoni tad-depożizzjoni A, (bħal fl-antikorp monoklonali aducanumab approvat reċentement [28], minkejja l-kontroversja tiegħu ta 'benefiċċji kliniċi minimi u ineffettività f'waħda miż-żewġ provi kliniċi tal-fażi III. [29]), jew tentattivi biex iżidu l-assorbiment mikrogliali ta 'A [30-32]. Madankollu, għal stadji moderati jew avvanzati ta 'AD, l-attivazzjoni żejda tal-mikroglia għall-kuntrarju taggrava n-newrodeġenerazzjoni [33], u għalhekk huma meħtieġa strateġiji terapewtiċi alternattivi.

4. Materjali u Metodi

4.1. Fly Stock Manutenzjoni u Kejl tal-Ħajja

Ir-razza transġenika ta' Drosophila A H29.3/CyO inkisbet minn [16] u ġiet imqabbda ma' w(CS10) għal sitt ġenerazzjonijiet. Il-linja tas-sewwieq pan-neurali elav-GAL4c155 kienet inkroċjata b'w(CS10) għal sitt ġenerazzjonijiet. Il-linja bajda w1118 tal-għajnejn (Bloomington Drosophila Stock Center #3605) inkroċjata mal-linja Canton S (Bloomington Drosophila Stock Center # 64349) 10 darbiet (w (CS10)) intużat bħala l-istokk standard. Il-linja tas-sewwieq pan-neural elav-GAL4c155 inkisbet miċ-Ċentru tal-Ħażna ta 'Bloomington Drosophila (#458). Il-ġenotip tad-dubbien sperimentali—jiġifieri, il-mudell AD—kien [elav; H29.3/ plus ], li ntgħażlet mill-frieħ F1 mingħajr il-markatur CyO. Id-dubbien inżammu f'midja standard tal-qamħirrum f'25 ◦C taħt ċiklu ta 'dawl-dlam ta' 12-il siegħa. Għal T-labirint, l-emerġenti [elav; H29.3/ plus ] dubbien inġabru (iż-żewġ sessi mħallta u mhux verġni) u kkultivati ​​bi jew mingħajr trattament EK100 sa d14 wara l-emerġenza. Għas-sopravivenza, tixbit, u RT-qPCR, intużaw biss id-dubbien maskili. Kampjuni ta 'RNA inġabru f'd30 wara l-emerġenza meta kemm il-ħajja kif ukoll il-kurvi tat-tixbit wrew separazzjoni sinifikanti meta mqabbla mal-mudell AD mhux ittrattat.

F'analiżi tal-ħajja, għoxrin sa tletin dubbien tkabbru f'kunjett tal-ikel bi jew mingħajr CS; mill-inqas erba' kunjetti ġew ippreparati għal kull trattament. Il-kunjetti tal-ikel ġew sostitwiti kull jumejn sa 3 ijiem, u d-dubbien mejta ġew magħduda f'dak iż-żmien. Mill-inqas tliet repliki saru għal kull prova. Il-perċentwal ta' sopravivenza huwa definit bħala n-numru ta' dubbien ħajjin diviż bin-numru totali ta' dubbien fil-bidu tat-test.

4.2. Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol (Ek100)

Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol ġie estratt mir-rigal ġentili minn Antrodia camphorata, kif deskritt qabel [34]. Ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol jifforma trab ta' kulur isfar ċar f'temperatura ambjentali. Is-soluzzjoni tal-istokk ġiet ippreparata f'konċentrazzjoni ta '6.25 mg/mL f'EtOH dritt qabel l-użu. Għall-analiżi tal-ħajja u l-anti-geotaxis, il-konċentrazzjonijiet finali kienu 125 u 250 µg/mL. Għat-tagħlim tal-memorja u l-analiżi tal-espressjoni tal-ġeni, il-konċentrazzjoni finali kienet 250 µg/mL. Il-piż molekulari ta 'EK100 huwa 396.65. Allura l-konċentrazzjonijiet molari korrispondenti huma 315 jew 630 µM, rispettivament. Id-dubbien ġew ittrattati b'żewġ dożi ta' EK100 bil-konċentrazzjonijiet finali ta' 125 u 250 µg/mL mħallta fl-ikel permezz ta' tmigħ Ad libitum. L-ikel ta 'kontroll kien fih l-istess ammont ta' solvent EtOH bħall-gruppi ta 'esperimenti bil-konċentrazzjoni finali ta' EtOH ta '3 fil-mija v/v. It-trattament beda mill-emerġenza sal-punt tal-ħin tal-ġbir tad-dejta ta 'kull assaġġ. Għas-sopravivenza u l-assaġġ tat-tixbit, it-trattament ingħata tul il-ħajja kollha. In-numru ta' dubbien għal kull replikazzjoni kien deskritt fit-taqsima tal-metodu ta' kull assaġġ. Aħna ttestjajna wkoll analiżi tal-ħajja b'dubbien tat-tip selvaġġ ittrattati/mhux ittrattati biex niżguraw is-sikurezza tal-ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol f'mudelli ta' titjir (Figura Supplimentari S1 ).

4.3. Assays Antigeotaxis

Il-protokoll preżenti huwa bbażat fuq metodu ppubblikat qabel [35], b'xi modifiki. Fil-qosor, kunjett tal-plastik ċilindriku trasparenti b'dijametru ta '2.5 ċm u għoli ta' 9.5 ċm (itwal se jkun multa, iżda se jkun aktar diffiċli biex jimmaniġġa) intuża bħala l-apparat tal-ġeotaxis. Il-qiegħ tal-kunjett kien miksi b'saff wieħed ta' ikel tat-titjir bħala kuxxin. Marka ta' 5 ċm 'il fuq mill-kuxxin kienet imwaħħla mal-wiċċ ta' barra tal-kunjett. It-tarf l-ieħor tal-kunjett kien miftuħ, u d-dubbien kienu mgħobbija minn hemm. Peress li l-assaġġ kien imwettaq fl-istess ħin mal-assaġġ tas-sopravivenza, in-numru ta 'dubbien mgħobbija kien identiku għal dawk superstiti f'dak il-mument. Id-dubbien kienu mgħobbija fil-kunjett; il-parti ta’ fuq kienet issiġillata b’tapp u l-qiegħ tal-kunjett kien ripetutament (għal żewġ sekondi) mħabbat mal-wiċċ iebes li fuqu kien wieqfa (bank tal-laboratorju f’dan il-każ). L-iħabbtu kien qawwi biżżejjed biex iħawwad lid-dubbien u jġiegħelhom jitilgħu tul il-ħitan tal-kunjett, iżda mhux daqshekk qawwi li jagħmlilhom ħsara fiżikament. Il-proċess kollu ġie rreġistrat bil-vidjo għal 18-il sekonda, bin-numru ta 'dubbien jitilgħu 'l fuq mill-marka ta' 5 ċm innutat u espress bħala perċentwali għal kull grupp. Ġie magħdud in-numru ta’ dubbien li telgħu fuq il-marka tal-5 ċm. Saru erba' repliki għal kull grupp. Il-perċentwal tal-ħila tat-tixbit huwa definit bħala n-numru ta 'dubbien li jitilgħu diviż bin-numru totali ta' dubbien fil-bidu tat-test. Il-ħila tat-tixbit ġiet ittestjata wkoll f'dubbien tat-tip selvaġġ ittrattati/mhux ittrattati biex tiġi żgurata s-sigurtà ta' ergosta-7, 9 (11), 22-trien-3 -ol f'mudelli ta' titjir (Figura Supplimentari S2) .

4.4. Pjattaforma ta' Tagħlim u Memorja tad-Drosophila (T-Maze)

Biex tosserva t-tagħlim u l-memorja ta 'Drosophila, madwar 100 dubbien tpoġġew l-ewwel fil-kamra ta' fuq tar-razza, li tista 'tiġi fornuta b'vultaġġ elettriku u tagħti xokk elettriku lit-dubbien. Id-dubbien l-ewwel ġew ikkunsinnati f'riħa 1 (MCH) flimkien ma 'mewġ ta' xokk elettriku. Imbagħad id-dubbien ġew mogħtija riħa 2 (OCT) mingħajr mewġ ta 'xokk elettriku. Wara t-taħriġ, id-dubbien tmexxew lejn l-ispazju ta 'taħt, li fih żewġ naħat miftuħa ġew fornuti jew b'riħa 1 jew riħa 2, rispettivament. Billi tosserva d-direzzjoni taċ-ċaqliq tad-dubbien, il-preġudizzju tar-riħa 2 fuq ir-riħa 1 jista 'jiġi stmat bl-Indiċi tal-Prestazzjoni (PI), definit bħala d-differenza fin-numru ta' dubbien bejn żewġ irwejjaħ diviż bin-numru totali ta 'dubbien. L-Indiċi tal-Prestazzjoni jirrappreżenta l-abbiltà tat-tagħlim u l-memorja tad-Drosophila [36]. Grupp ieħor ta 'dubbien kien ikkundizzjonat bil-parir ta' riħa maqluba b'tali mod li kull riħa serviet darba waħda bħala xokk elettriku flimkien ma 'darba bħala xokk elettriku -. Il-PIs ta' dawn iż-żewġ testijiet ġew medjati bħala l-PI finali ta' replika waħda. "1 h-memorja" ġiet ittestjata wara spazjar ta 'siegħa għat-taħriġ, filwaqt li "tagħlim" kien, b'kuntrast, ittestjat wara spazjar ta' 1.5 min għat-taħriġ. Ittestjajna wkoll l-evitar tal-MCH u l-OCT tad-dubbien AD bi jew mingħajr trattament EK100 biex niżguraw li t-trattament jikkawża preġudizzju kontra l-irwejjaħ avversivi (Figura Supplimentari S3).

4.5. PCR kwantitattiv

L-irjus u l-korpi ġew separati qabel l-estrazzjoni tal-RNA. Għal replika waħda, id-dubbien ġew anestetizzati b'CO2; miġbura, 100 kull darba, f'tubi Eppendorf; u mbagħad mgħaddas fin-nitroġenu likwidu għal 1 min biex tagħmel il-korpi fraġli. Il-kadavri ffriżati li rriżultaw imbagħad ġew mgħobbija fuq munzelli ta 'seve shakers (Bunsekifurui, Nru 40 u Nru 25) u aġitat. Il-korpi tkissru u ġew magħżula skont id-daqs tal-malji tal-għarbiel f'żewġ frazzjonijiet separati: "irjus" u "korpi". L-RNA totali ġie estratt bil-kit RNeasy Mini (Qiagen, Düsseldorf, il-Ġermanja), u mbagħad użat għas-sintetizzazzjoni tal-cDNA b'VersoTM cDNA Synthesis Kit (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Il-livelli tal-espressjoni tal-RNA tal-ġeni investigati ġew ikkwantifikati b'PCR f'ħin reali (Applied Biosystems 7700, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) bil-Maxima SYBR Green qPCR Master Mix (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Ir-riżultati ġew normalizzati għall-ammont relattiv ta 'Gapdh jew Rpl32. Il-primers użati huma elenkati hawn taħt. Gapdh: 50 -GAAAAAGCGGCAGTCGTAAT-30 u 50 -AATTCCGATCTTCGACATGG-30 ; Drpr: 50 -TGTGATCATGGTTACGGAGGAC-30 u 50 -CAGCCGGGTGGGCAA-30 ; CED: 50 - CGTTTACAAGGAGCGACT-30 u 50 -TTCCAGATTGAAGAGCAGG-30 ; Qtates: 50 -TGACT ACAAAAACTCCCAAACG-30 u 50 -TTGATTCCAATGGGTGCTC-30 ; PHGPx: 50 -TGACA TCGGCGAGGTGT-30 u 50 -CGGTCTGCTTGGCCTTTA-30 ; Cnc: 50 -GCCAACTATGGTGG TGGAGT-30 u 50 -ACGCTGCGATTCAGACG-30 ; SOD1: 50 -GTCGACGAGAATCGTCAC CT-30 u 50 -GGAGTCGGTGATGTTGACCT-30 ; SOD2: 50 -AAATTTCGCAAACTGCAAGG- 3 0 u 50 -GGTCGCCATTTGTTGCTATT-30 ; SOD3: 50 -TCAGCATGGGTGCTCACTAT-30 u 50 -TAATGCCCGTGGAGTTGG-30 ; mkk3: 50 -CCGCTACCCATACGACAAT-30 u 5 0 -GAATTCCGGGCGAAAATGT-30 ; mekk1: 50 -TTTAACGGCAGTGGAACTGT-30 u 50 - TGCATCTGCAACTGCTCAC-30 ; imd: 50 -AGATCGACCAGGCCATAATC-30 u 50 -AATCC ACTGGAGCAACAGC-30 ; rac1: 50 -CCGTGTTCGACAACTACTCG-30 u 50 -AGTCGGTCG TAGTCCTCCTG-30 ; relish: 50 -GCCATACTCCCTTGGAATTG-30 u 50 -TCTCCCTTCTCCG GATACAC-30 ; Rpl32: 50 -CGATCGATATGCTTAAGCTGT-30 u 50 -CGACGCACTCTGTTG TCG-3.

4.6. Assays ta' Stress Ossidattiv

Tliet repliki tal-perossidazzjoni tal-lipidi, l-attività tal-catalase, u l-attività tas-superoxide dismutase ġew imkejla minn BIOXYTECH LPO-586 (OxisResearch, OXIS International, Beverly Hills, CA, USA), il-Catalase Assay Kit (Cayman Chemical, Ann Arbor, MI , USA), u s-Superoxide Dismutase Assay Kit (Cayman), rispettivament, wara l-istruzzjonijiet tal-manifatturi. Fil-qosor, l-attività SOD ġiet evalwata billi tkejjel id-dismutazzjoni ta 'radikali superossidi ġġenerati minn xanthine oxidase fornut mill-kit u ġiet skoperta billi tbiddel il-melħ tat-tetrazolium f'żebgħa formazan, imbagħad ikkwantifikata b'assorbiment f'440-460 nm. L-attività tal-CAT ġiet ivvalutata billi tkejjel il-formazzjoni tal-formaldehyde mill-metanol fil-preżenza ta' H2O2 kkatalizzat minn CAT, misjuba mill-4-amino-3- hydrazino-5-mercapto-1 kromoġeniku fornut mill-kit. ,2,4-triazole, imbagħad ikkwantifikat bl-assorbenza f'540 nm. L-attività tal-perossidazzjoni tal-lipidi ġiet evalwata billi tkejjel id-dekompożizzjoni tal-perossidi tal-aċidu xaħmi polyunsaturated f'malonaldehyde (MDA) u 4-hydroxyalkenals, misjuba mill-N-methyl-2-phenylindole kromoġeniku fornut mill-kit, imbagħad ikkwantifikat b'assorbiment f'586 nm. Għall-analiżi SOD, Cat, u LPO, in-numru ta 'dubbien omoġenizzati sħaħ ta' kull replika kien 50, 50, u 100, rispettivament.

4.7. Analiżi tal-Istatistika

Is-sinifikat tad-differenza bejn il-kurvi tas-sopravivenza u l-kurvi tat-tixbit ta' ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol trattati u gruppi ta' kontroll ġew iġġudikati bil-log-rank (Mantel– Cox) u testijiet Gehan–Breslow–Wilcoxon. Is-sinifikat tad-differenza bejn l-indiċi tal-prestazzjoni tal-memorja tat-tagħlim ta' ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol ittrattat, u gruppi ta' kontroll ġiet iġġudikata mit-test t ta' Student.

5. Konklużjonijiet

Aħna vverifikajna li ergosta-7,9(11),22-trien-3 -ol (EK100) minn Antrodia camphorate itejjeb is-sopravivenza, it-tagħlim, u l-memorja f'mudell ta' Drosophila ta' AD, b'bijomarkaturi mnaqqsa ta 'attivazzjoni u infjammazzjoni tal-mikroglia. Barra minn hekk, il-modifika tas-sintomi ma seħħitx permezz tat-tnaqqis tal-istress ossidattiv kullimkien, li jfisser li ergosta-7,9(11), u 22-trien-3 -ol itejbu s-sintomi tal-AD permezz ta’ mogħdijiet differenti għal ieħor Estratt tal-kanforat Antrodia, antroquinonol. EK100 naqqas b'mod effettiv l-attivazzjoni u l-infjammazzjoni tal-mikroglia, li jistgħu jgħinu biex ireġġgħu lura defiċits konjittivi tipiċi assoċjati mal-AD, bħal defiċits ta 'tagħlim u memorja.

Materjali Supplimentari:Dawn li ġejjin huma disponibbli online. Figura S1: Sopravivenza ta' dubbien tat-tip selvaġġ ittrattati b'EK100; Figura S2: Tixbit ta' dubbien tat-tip selvaġġ ittrattati b'EK100; Figura S3: Evitar tar-riħa avversiva tad-dubbien AD ittrattati b'EK100; Tabella S1: Statistika tal-kurvi tas-sopravivenza.

Kontribuzzjonijiet tal-Awtur:H.-PL, Y.-HK, u W.-YL iddisinjaw l-esperimenti. Y.-HK ikkontribwixxa għall-preparazzjoni ta 'EK100. JC, L.-ZC, M.-SC, L.-WS, u T.-NC wettqu l-esperimenti. L-awturi kollha pparteċipaw fil-preparazzjoni tal-manuskritt. L-awturi kollha qraw u qablu mal-verżjoni ppubblikata tal-manuskritt.

Finanzjament: Dan ix-xogħol kien appoġġjat minn għotjiet mill-Ministeru tax-Xjenza u t-Teknoloġija fit-Tajwan (L-AĦĦAR 108-2320-B-039-031-MY3, L-AKTAR 109-2314-B{-039-030, L-AKTAR 110-2314- B-039-009), China Medical University & Hospital (CMU109-MF-85, CMU108-MF-68, CMU108-MF{{12 }}, CMU109- AWARD-02, u DMR-109-150), u mill-Programm taċ-Ċentru tar-Riċerka tal-Oqsma Dehru fil-qafas tal-Proġett Sprout tal-Edukazzjoni Għolja mill-Ministeru tal-Edukazzjoni (MOE) fit-Tajwan (CMRC-CHM-2-1).

Dikjarazzjoni tal-Bord ta' Reviżjoni Istituzzjonali:Ma japplikax.

Dikjarazzjoni ta' Kunsens Informat:Ma japplikax.

Dikjarazzjoni tad-Disponibbiltà tad-Data:Id-dejta użata biex tappoġġja s-sejbiet ta 'dan l-istudju hija inkluża fl-artiklu.

Kunflitti ta' Interess:Y.-HK huwa wieħed mill-inventuri iżda mhux iċ-ċessjonarju tal-privattiva US-9757393-B2 intitolata "Derivatives of ergostatrien-3- -ol from aniridia camphorate and anti glycemic, antihyperlipidemic and decreasing hepatic fat use of thereof". Awturi oħra jiddikjaraw li m'għandhom l-ebda interessi li jikkompetu. Il-finanzjaturi ma kellhom l-ebda rwol fit-tfassil tal-istudju; fil-ġbir, analiżi, jew interpretazzjoni tad-data; fil-kitba tal-manuskritt, jew fid-deċiżjoni li jiġu ppubblikati r-riżultati.

Disponibbiltà tal-Kampjun:Kampjuni tal-komposti huma disponibbli mill-awturi.

Referenzi

1. Davidson, JW Il-Gżira ta’ Formosa, Passat u Preżent: Storja, Nies, Riżorsi, u Prospetti Kummerċjali. Te, Ganfor, Zokkor, Deheb, Faħam, Kubrit, Pjanti Ekonomiċi, u Produzzjonijiet Oħra; Macmillan & Company: New York, NY, USA, 1903.

2. Tsai, Z.; Liaw, S. L-Użu u l-Effett tal-Ganoderma; Sheng-Yun Publishers, Inc.: Taichung, Tajwan, 1985; pp. 116–117.

3. Chen, C.-J. Studju dwar il-kultivazzjoni solida u l-bijoattività ta 'Antrodia camphorata. Fung. Sci. 2001, 16, 65–72.

4. Geethangili, M.; Tzeng, Y.-M. Reviżjoni ta 'effetti farmakoloġiċi ta' Antrodia camphorate u l-komposti bijoattivi tiegħu. Evid.-Komplement Ibbażat. Alternattiv. Med. 2011, 2011, 212641. [CrossRef] [PubMed]

5. Ogura, S.; Jakovljevic, MM Popolazzjoni globali li qed tixjieħ-kura tas-saħħa, konsegwenzi soċjali u ekonomiċi. Quddiem. Saħħa Pubblika 2018, 6, 335. [CrossRef] [PubMed]

6. Cummings, J.; Lee, G.; Ritter, A.; Zhong, K. Pipeline ta 'żvilupp tad-droga tal-marda ta' Alzheimer: 2018. Dement ta 'Alzheimer. Transl. Res. Clin. Interv. 2018, 4, 195–214. [CrossRef] [PubMed]

7. Sharma, P.; Srivastava, P.; Seth, A.; Tripathi, PN; Banerjee, AG; Shrivastava, SK Reviżjoni komprensiva ta 'mekkaniżmi ta' patoġenesi involuti fil-marda ta 'Alzheimer u strateġiji terapewtiċi potenzjali. Prog. Neurobiol. 2019, 174, 53–89. [CrossRef] [PubMed]

8. Sochocka, M.; Donskow-Łysoniewska, K.; Diniz, BS; Kurpas, D.; Brzozowska, E.; Leszek, J. L-alterazzjonijiet tal-mikrobijoma tal-musrana u l-patoġenesi mmexxija mill-infjammazzjoni tal-marda ta 'Alzheimer-Reviżjoni kritika. Mol. Neurobiol. 2019, 56, 1841–1851. [CrossRef]

9. Agostinho, P.; A Cunha, R.; Oliveira, C. Neuroinflammation, stress ossidattiv u l-patoġenesi tal-marda ta 'Alzheimer. Curr. Pharm. Des. 2010, 16, 2766–2778. [CrossRef]

10. Galasko, D.; Montine, TJ Biomarkers ta 'ħsara ossidattiva u infjammazzjoni fil-marda ta' Alzheimer. Bijomarka. Med. 2010, 4, 27–36. [CrossRef]

11. Kuo, Y.-H.; Lin, T.-Y.; Inti, Y.-J.; Wen, K.-C.; Sung, P.-J.; Chiang, H.-M. Effetti antiinfjammatorji u kontra l-ħsara tal-fotografija ta' ergostatrien-3 -ol, iżolati minn Antrodia camphorata, fuq il-ġilda tal-ġrieden bla pil. Molekuli 2016, 21, 1213. [CrossRef]

12. Chao, T.-Y.; Hsieh, C.-C.; Hsu, S.-M.; Wan, C.-H.; Lian, G.-T.; Tseng, Y.-H.; Kuo, Y.-H.; Hsieh, S.-C. Ergostatrien-3 -ol (EK100) minn Antrodia camphorata Jattenwa Stress Ossidattiv, Infjammazzjoni, u Korriment fil-Fwied In Vitro u In Vivo. Prev. Nutr. Ikel Sci. 2021, 26, 58. [CrossRef]

13. Tsai, T.-C.; Tung, Y.-T.; Kuo, Y.-H.; Liao, J.-W.; Tsai, H.-C.; Chong, K.-Y.; Chen, H.-L.; Chen, C.-M. Effetti Anti-Infjammatorji ta' Antrodia camphorata u l-Kompon Attiv tagħha, Ergostatrien-3 -ol, f'Mudell ta' Iskemija tal-Ġilda tal-Ġurdien. FASEB J. 2015, 29, LB444.

14. Chang, W.-H.; Chen, MC; Cheng, IH Antroquinonol inaqqas il-livelli tal-amyloid tal-moħħ u jtejjeb it-tagħlim spazjali u l-memorja f'mudell ta 'ġrieden transġeniku tal-marda ta' Alzheimer. Sci. Rep 2015, 5, 1–12. [CrossRef] [PubMed]

15. Chen, Y.-M.; Sung, H.-C.; Kuo, Y.-H.; Hsu, Y.-J.; Huang, C.-C.; Liang, H.-L. L-Effetti ta' Ergosta-7, 9 (11), 22-trien-3 -ol minn Antrodia camphorate fuq il-Profil Bijokimiku u l-Prestazzjoni tal-Eżerċizzju tal-Ġrieden. Molekuli 2019, 24, 1225. [CrossRef]

16. Finelli, A.; Kelkar, A.; Kanzunetta, H.-J.; Yang, H.; Konsolaki, M. Mudell għall-istudju tat-tossiċità tal-Alzheimer A 42-indotta f'Drosophila melanogaster. Mol. Ċellula. Newrosci. 2004, 26, 365–375. [CrossRef] [PubMed]

17. Ping, Y.; Hahm, E.-T.; Waro, G.; Kanzunetta, Q.; Vo-Ba, D.-A.; Licursi, A.; Bao, H.; Ganoe, L.; Finch, K.; Tsunoda, S. Ir-rabta ta' 42-ipereċċitabbiltà indotta ma' newrodeġenerazzjoni, tagħlim u defiċits tal-mutur, u ħajja iqsar f'mudell ta' Alzheimer. PLoS Genet. 2015, 11, e1005025. [CrossRef] [PubMed]

18. Rival, T.; Paġna, RM; Chandraratna, DS; Sendall, TJ; Ryder, E.; Liu, B.; Lewis, H.; Rosahl, T.; Hider, R.; Il-kimika ta 'Camargo, L. Fenton u l-istress ossidattiv jimmedjaw it-tossiċità tal-peptide -amyloid f'mudell ta' Drosophila tal-marda ta 'Alzheimer. Eur. J. Neurosci. 2009, 29, 1335–1347. [CrossRef]

19. Ray, A.; Speese, SD; Logan, MA Glial draper isalva Tossiċità f'mudell ta 'Drosophila tal-marda ta' Alzheimer. J. Neurosci. 2017, 37, 11881–11893. [CrossRef]

20. Jeibmann, A.; Paulus, W. Drosophila melanogaster bħala organiżmu mudell ta 'mard tal-moħħ. Int. J. Mol. Sci. 2009, 10, 407–440. [CrossRef] [PubMed]

21. Brookmeyer, R.; Corrada, MM; Curriero, FC; Kawas, C. Sopravivenza wara dijanjosi tal-marda ta 'Alzheimer. Arch. Neurol. 2002, 59, 1764–1767. [CrossRef]

22. Lam, LC; Tang, W.; Leung, V.; Chiu, HF Profil tal-imġieba tal-marda ta 'Alzheimer fl-anzjani Ċiniżi–studju ta' validazzjoni tal-verżjoni Ċiniża tal-iskala tal-klassifikazzjoni tal-patoloġija tal-imġieba tal-marda ta 'Alzheimer. Int. J. Geriatr. Psych. 2001, 16, 368–373. [CrossRef] [PubMed]

23. Schwab, C.; McGeer, PL Aspetti infjammatorji tal-marda ta 'Alzheimer u disturbi newrodeġenerattivi oħra. J. Alzheimer's Dis. 2008, 13, 359–369. [CrossRef] [PubMed]

24. MacDonald, JM; Bajja, MG; Porpiglia, E.; Sheehan, AE; Watts, RJ; Freeman, MR Ir-riċettur tal-ingaġġ tal-katavri taċ-ċelluli tad-Drosophila Draper jimmedja t-tneħħija glial ta 'axons maqtugħin. Neuron 2006, 50, 869–881. [CrossRef]

25. Chen, Z.; Zhong, C. Stress ossidattiv fil-marda ta 'Alzheimer. Newrosci. Bull. 2014, 30, 271–281. [CrossRef]

26. Stankovic, ND; Teodorczyk, M.; Ploen, R.; Zipp, F.; Schmidt, MH Interazzjonijiet Microglia-vini tad-demm: Xabla b'żewġ truf fil-patoloġiji tal-moħħ. Acta Neuropathol. 2016, 131, 347–363. [CrossRef]

27. Konishi, H.; Kiyama, H. Microglial TREM2/DAP12 sinjalazzjoni: Xabla b'żewġ truf fil-mard newrali. Quddiem. Ċellula. Newrosci. 2018, 12, 206. [CrossRef] [PubMed]

28. Sevigny, J.; Chiao, P.; Bussière, T.; Weinreb, PH; Williams, L.; Maier, M.; Dunstan, R.; Salloway, S.; Chen, T.; Ling, Y. L-antikorp aducanumab inaqqas il-plakki A fil-marda ta 'Alzheimer. Natura 2016, 537, 50–56. [CrossRef]

29. Lalli, G.; Schott, JM; Hardy, J.; De Strooper, B. Aducanumab: Fażi ġdida fl-iżvilupp terapewtiku għall-marda ta 'Alzheimer? EMBO Mol. Med. 2021, 13, e14781.

30. Takata, K.; Kitamura, Y.; Saeki, M.; Terada, M.; Kagitani, S.; Kitamura, R.; Fujikawa, Y.; Maelicke, A.; Tomimoto, H.; Taniguchi, T. It-tneħħija tal-amilojde indotta minn Galantamine medjata permezz tal-istimulazzjoni tar-riċetturi tal-acetylcholine nikotiniċi mikrogliali. J. Biol. Chem. 2010, 285, 40180–40191. [CrossRef] [PubMed]

31. Mandrekar-Colucci, S.; Karlu, JC; Landreth, GE Mekkaniżmi sottostanti tar-riċettur attivat mill-proliferatur tal-peroxisome rapidu- -medjat it-tneħħija tal-amilojde u t-treġġigħ lura ta 'defiċits konjittivi f'mudell murini tal-marda ta' Alzheimer. J. Neurosci. 2012, 32, 10117–10128. [CrossRef]

32. McGeer, PL; McGeer, EG Timmira għall-mikroglia għat-trattament tal-marda ta 'Alzheimer. Opinjoni esperta. Ther. Miri 2015, 19, 497–506. [CrossRef] [PubMed]

33. Kanzunetta, WM; Colonna, M. L-identità u l-funzjoni tal-mikroglia fin-newrodeġenerazzjoni. Nat. Immunol. 2018, 19, 1048–1058. [CrossRef] [PubMed]

34. Kuo, Y.-H.; Lin, C.-H.; Shih, C.-C. Ergostatrien-3 -ol minn Antrodia camphorata jinibixxi d-dijabete u l-iperlipidemija fi ġrieden ittrattati b'dieta b'ħafna xaħam permezz tar-regolazzjoni ta 'ġeni relatati mal-fwied, trasportatur tal-glukożju 4, u fosforilazzjoni ta' protein kinase attivata bl-AMP. J. Agri. Ikel Chem. 2015, 63, 2479–2489. [CrossRef] [PubMed]

35. Le Bourg, E.; Lints, FA Ipergravità u tixjiħ f'Drosophila melanogaster. 4. Attività tat-tixbit. Gerontology 1992, 38, 59–64. [CrossRef]

36. Waddell, S.; Quinn, WG Dubbien, ġeni, u tagħlim. Ann. Dun Neurosci. 2001, 24, 1283–1309. [CrossRef] [PubMed]

【Għal aktar informazzjoni:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】