Astratt

L-istress ossidattiv indott minn radikali ħielsa eċċessivi huwa wieħed mill-muturi ewlenin għat-tixjiħ ċellulari tal-bniedem, infjammazzjoni kronika u disturbi deġenerattivi metaboliċi multipli. Ingredjenti nutraċewtiċi derivati ​​mill-pjanti minn riżorsi omoloġi tal-mediċina tal-ikel kisbu attenzjoni globali estensiva bħala alternattivi antiossidanti naturali għal addittivi antiossidanti sintetiċi.Lycium ruthenicum, magħrufa wkoll bħala berry goji iswed, uCistanche deserticola(ġemgħa tad-deżert) huma riżorsi rappreżentattivi ta’ pjanti mediċinali li jittieklu li joriġinaw mill-Kuritur Hexi fil-Majjistral taċ-Ċina. Fihom kostitwenti fitokimiċi karatteristiċi abbundanti inklużi anthocyanins, polyphenols, polysaccharides bijoattivi kif ukoll phenylethanoid glycosides. Anke jekk attivitajiet bijoloġiċi individwali ta 'dawn iż-żewġ materja prima ġew dokumentati fi studji eżistenti multipli, riċerka limitata ffokat fuq kif il-kundizzjonijiet tad-diġestjoni gastrointestinali tal-bniedem jibdlu l-bijoaċċessibbiltà u l-potenzjal antiossidant reali tat-trab imħallat kompost tagħhom. F'din ir-riċerka, trab b'komponent wieħed u tliet gruppi ta 'trab imħallat bi proporzjonijiet ta' massa differenti (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola= 1:2, 1:1, 2:1) ġew ippreparati. Ġie implimentat mudell statiku ta’ diġestjoni gastrointestinali in-vitro f’żewġ stadji, li jikkonsisti f’diġestjoni gastrika simulata ta’ sagħtejn taħt pH 2.0 b’pepsin segwit minn diġestjoni intestinali simulata ta’ sagħtejn taħt pH 7.0 supplimentat bi trypsin. It-teħid ta' kampjuni dinamiku sar f'intervalli ta' ħin multipli waqt l-inkubazzjoni tad-diġestjoni. Aħna ddeterminajna b'mod kwantitattiv kontenut solubbli ta 'polifenoli totali, polysaccharides, anthocyanins u phenylethanoid glycosides, flimkien mal-kapaċità ta' tneħħija tar-radikali ħielsa DPPH u ABTS. Twettqet analiżi ta 'korrelazzjoni ta' Pearson biex tiżvela relazzjonijiet ta 'ġewwa bejn il-konċentrazzjonijiet ta' kompost bijoattiv u indikaturi antiossidanti. Riżultati sperimentali wrew li d-diġestjoni gastrika tejbet b'mod sinifikanti s-solubilità ta 'erba' fitokimiċi funzjonali ewlenin, li komplew tejbu kemm DPPH kif ukoll il-prestazzjoni ta 'scavenging radikali ABTS. Matul il-fażi ta 'diġestjoni intestinali sussegwenti, is-solubilità tal-polifenoli u l-glikożidi tal-feniletanojdi baqgħet tiżdied, filwaqt li l-kontenuti li jistgħu jitkejlu ta' polisakkaridi u anthocyanins naqsu b'mod sinifikanti. Id-diġestjoni intestinali eżerċitat effetti ta 'promozzjoni fuq l-attività ta' scavenging radikali ABTS, iżda ma ġġenerat l-ebda titjib pożittiv fuq ir-rata ta 'eliminazzjoni tar-radikali ħielsa tad-DPPH. Polyphenols, anthocyanins u phenylethanoid glycosides wrew korrelazzjonijiet lineari statistikament sinifikanti mal-parametri tal-kapaċità antiossidanti (P < 0.05). Among all three blending formulations, the mixing ratio of 2:1 (Lycium ruthenicumbiexCistanche deserticola) urew kapaċità antiossidant komprensiva superjuri wara simulazzjoni sħiħa tad-diġestjoni gastrointestinali. Dan l-istudju eluċidata regoli ta 'varjazzjoni ta' sustanzi bijoattivi taħt ambjent simulat gastrointestinali għal goji berry iswed wieħed u kombinat u trab broomrape tad-deżert. Ir-riżultati tagħna jipprovdu appoġġ sperimentali solidu għall-iżvilupp ta 'supplimenti tad-dieta funzjonali ġodda li jutilizzaw materjali tal-pjanti tad-deżert Hexi-Corridor.

Kliem ewlieni: Lycium ruthenicum; Cistanche deserticola; diġestjoni gastrointestinali in-vitro; bijoaċċessibbiltà; polifenoli; glikożidi feniletanojdi; antoċjanin; attività antiossidanti; omoloġija ikel-mediċina

1. Introduzzjoni

It-tixjiħ tal-popolazzjoni u l-insegwiment pubbliku li qed jikber ta’ intervent sub-saħħa għamlu r-riċerka dwar in-nutrizzjoni kontra t-tixjiħ punt sħun fi ħdan l-ikel funzjonali globali u l-industriji nutraċewtiċi. L-ipoteżi tat-tixjiħ tar-radikali ħielsa ġiet aċċettata b'mod wiesa 'biex tinterpreta l-mekkaniżmu tas-senescenza tal-organiżmu. L-akkumulazzjoni kontinwa ta 'speċi ta' ossiġnu reattivi ġewwa l-ġisem tal-bniedem se tagħti bidu għall-perossidazzjoni tal-lipidi, tagħmel ħsara lill-istruttura tad-DNA u lill-funzjoni tal-proteini, taċċellera s-senescenza taċ-ċelluli, u żżid ir-riskju ta 'morbożità ta' aterosklerożi, mard infjammatorju kroniku u sintomi deġenerattivi relatati mal-età. It-teħid fid-dieta ta 'antiossidanti fitokimiċi naturali huwa meqjus bħala strateġija ta' nutrizzjoni ġentili u sigura biex itaffi l-istress ossidattiv meta mqabbel ma 'interventi farmaċewtiċi. Antiossidanti sintetiċi bħall-BHT u l-BHA gradwalment qed jiffaċċjaw skrutinju regolatorju aktar strett f'ħafna swieq reġjonali, li jkompli jsaħħaħ id-domanda tas-suq għal materja prima antiossidanti naturali ta' oriġini tal-pjanti.

Riżorsi veġetali tradizzjonali mis-sistema omologa tal-ikel-mediċina tal-Asja tal-Lvant qajmu interess dejjem jikber fost ir-riċerkaturi tan-nutrizzjoni tal-Punent u l-manifatturi tas-supplimenti.Lycium ruthenicumMurr., speċi ta 'arbuxxell perenni tal-familja Solanaceae, iqassam f'żoni aridi u semi-aridi tal-Majjistral taċ-Ċina. Il-frott vjola skur tiegħu jaqla' r-reputazzjoni ta' "king of anthocyanins", minħabba konċentrazzjoni eċċezzjonalment għolja ta' derivattivi ta' anthocyanin acylated li rarament jidhru fil-frott komuni. Minbarra l-anthocyanins, il-frott iswed tal-goji berry huwa wkoll għani f'taħlitiet kumplessi ta' polifenoli, polisakkaridi li jinħall fl-ilma, komposti flavonojdi u diversi oligoelementi minerali. Esperimenti ta' qabel in-vitro u ta' kultura taċ-ċelluli vvalidaw il-bijoattivitajiet qawwija tiegħu ta' tneħħija radikali, anti-infjammatorji u immunomodulatorji. Ħafna pubblikazzjonijiet eżistenti dwarLycium ruthenicumtiffoka fuq l-identifikazzjoni tal-komponenti tal-materja prima, l-ottimizzazzjoni tal-proċess tal-estrazzjoni u l-valutazzjoni tal-antiossidanti tal-estratt mhux raffinat.

Cistanche deserticola, komunement imsejħa deżert broomrape, hija pjanta oloparassita obbligatorja li tappartjeni għall-familja Orobanchaceae. Għal eluf ta 'snin, dan l-impjant intuża bħala materjal veġetali toniku fil-prattika tal-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Il-komponenti bijoattivi ewlenin tiegħu huma phenylethanoid glycosides inklużi echinacoside u acteoside, flimkien ma 'frazzjonijiet speċifiċi ta' polysaccharide solubbli fl-ilma. Investigazzjonijiet farmakoloġiċi moderni juru li phenylethanoid glycosides minnCistanche deserticolajippossjedu effetti antiossidanti, newroprotettivi u ta 'immunoregolazzjoni, filwaqt li l-frazzjonijiet tal-polisakkaridi tiegħu jistgħu jimmodulaw ir-rispons immuni tal-makrofagi. Il-materja prima hija kkonċentrata ġeografikament f'żoni oasi tad-deżert tal-Kuritur Gansu Hexi u ż-żona tad-deżert tal-Mongolja ta 'ġewwa.

Mill-perspettiva industrijali lokali, iż-żewġ speċi ta 'pjanti huma uċuħ tar-raba' ekonomiċi karatteristiċi f'Gansu Hexi Corridor. Intrapriżi agrikoli lokali qed jesploraw prodotti tal-ikel funzjonali b'valur miżjud ibbażati fuq dawn iż-żewġ pjanti tad-deżert. It-teorija klassika tal-kompatibilità tal-ħxejjex Ċiniża tissuġġerixxi li t-tqabbilLycium ruthenicumuCistanche deserticolajistgħu jipproduċu effetti toniċi sinerġistiċi. Fil-preżent, il-biċċa l-kbira tad-dokumenti ppubblikati jevalwaw biss kull pjanta separatament. Dejta sperimentali limitata ħafna hija disponibbli għall-formula komposta tagħhom.

Huwa kritiku li wieħed jinnota li l-kontenut fitokimiku totali misjub fi trab mhux maħdum ma jistax jirrappreżenta direttament l-effett antiossidant attwali fil-passaġġ gastrointestinali tal-bniedem. Ladarba t-trab tal-pjanti jiġi kkunsmat mill-ħalq, molekuli bijoattivi jgħaddu minn bidliet ambjentali drastiċi: kundizzjoni gastrika aċiduża qawwija b'idroliżi tal-protease, segwita minn ambjent intestinali ż-żgħir newtrali-alkalin b'katalisi tal-enżimi pankreatiċi. Ħafna sustanzi fenoliċi, anthocyanins u polysaccharides huma sensittivi għall-pH; jistgħu jdubu, jittrasformaw, jiddegradaw jew jikkonjugaw waqt il-proċedura tad-diġestjoni. Il-frazzjoni bijoaċċessibbli reali, minflok il-kontenut totali oriġinali, tiddetermina l-funzjoni fiżjoloġika.

L-assaġġ statiku ta 'diġestjoni gastrointestinali simulat in-vitro huwa għodda standardizzata ta' riċerka preliminari adottata b'mod wiesa 'fix-xjenza tal-ikel. Din is-sistema ta 'simulazzjoni tal-laboratorju tista' timita l-varjazzjoni tal-pH u l-kundizzjonijiet tal-idroliżi tal-protease tal-istonku tal-bniedem u l-musrana ż-żgħira. Ir-riċerkaturi jistgħu jsegwu bidliet dinamiċi ta' fitokimiċi bijoaċċessibbli mingħajr provi ta' għalf ta' l-annimali bi prezz għoli jew testijiet ta' intervent minn voluntiera umana. Dan il-metodu huwa applikat b'mod wiesa 'biex jevalwa frott, ħxejjex, trab tal-ħxejjex u materja prima nutraċewtika.

S'issa, l-ebda rapport pubbliku ma ddeskriva l-karatteristiċi tad-diġestjoni gastrointestinali in-vitro għal trab kompost imħallat ta'Lycium ruthenicumflimkien ma 'Cistanche deserticola. Għalhekk, l-istudju preżenti wettaq esperimenti statiċi ta' diġestjoni gastrointestinali simulati fuq trab wieħed ta' materja prima u tliet gruppi ta' trab imħallat b'varjanti proporzjonali. Aħna mmonitorjajna kontinwament bidliet dinamiċi ta 'polifenoli solubbli, polisakkaridi, anthocyanins, phenylethanoid glycosides, kif ukoll il-kapaċità ta' tneħħija radikali DPPH u ABTS f'diversi punti ta 'ħin ta' diġestjoni. Twettqet analiżi tal-korrelazzjoni statistika bejn il-konċentrazzjoni tal-komponent bijoattiv u l-indiċi antiossidanti. L-għanijiet tagħna jinkludu: (1) niċċaraw kif l-ambjent simulat bl-istonku u l-imsaren simulat jaffettwa s-solubilità u l-istabbiltà tas-sustanzi funzjonali ewlenin minn goji berry iswed u broomrape tad-deżert; (2) qabbel il-prestazzjoni antiossidanti ta 'proporzjonijiet ta' taħlit differenti wara d-diġestjoni; (3) screen out proporzjon ottimali ta 'taħlit għal trab funzjonali kompost. Is-sejbiet ta’ dan ix-xogħol jistgħu jipprovdu evidenza sperimentali bażika għall-iżvilupp ta’ ikel funzjonali antiossidant ta’ ġenerazzjoni ġdida u prodotti ta’ supplimenti tad-dieta derivati ​​mir-riżorsi lokali tal-pjanti Hexi-Corridor.

2. Materjali u Metodi

2.1 Materja prima tal-pjanti

Frott matur taLycium ruthenicuminħasdu minn foresti ta 'pjantaġġuni artifiċjali fil-Belt ta' Huahai, Belt Yumen, Provinċja ta 'Gansu, iċ-Ċina, fis-sena tal-2022. Frott miġbur fl-għalqa għadda minn proċess ta' tnixxif ta 'dell naturali taħt temperatura ambjentali ventilata. Frott bil-ħsara, pedicelli tal-frott u debris ta 'impurità tneħħew manwalment. Frott imnixxef nadif ġie polverizzat u mgħarbel permezz ta 'skrin ta' 50 malja biex jinkiseb trab tal-berry goji iswed omoġenju għal esperimenti ta 'diġestjoni.

Zkuk imlaħħam friski taCistanche deserticolainġabru f'Mejju 2022 minn imlaqqma artifiċjalmentHaloxylon ammodendronforesta tad-duni li tinsab fil-Kontea ta' Gaotai, Provinċja ta' Gansu. It-tessuti friski ġew maħsula sewwa biex tiġi eliminata l-kontaminazzjoni tar-ramel tal-wiċċ, maqtugħin fi flieli irqaq, u immedjatament mgħaddsa f'soluzzjoni li tipproteġi l-kulur biex tiġi evitata reazzjoni fenolika tal-kannella. Flieli pproċessati minn qabel ġew imnixxfa bil-friża taħt kundizzjoni ta' vakwu. Is-solidu mnixxef bil-friża ġie mgħaffeġ u għadda minn għarbiel ta' 50 malja biex jippreparaCistanche deserticolakampjun ta' trab imnixxef bil-friża.

Tliet gruppi ta' trab imħallat ġew ippreparati permezz ta' taħlitLycium ruthenicumtrab uCistanche deserticolatrab imnixxef bil-friża bi proporzjonijiet ta' massa differenti:

Grupp A: proporzjon tal-massa 1 : 2 (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola)

Grupp B: proporzjon tal-massa 1: 1 (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola)

Grupp Ċ: proporzjon tal-massa 2 : 1 (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola)

Il-massa totali tal-kampjun għal kull sistema ta 'reazzjoni tad-diġestjoni ġiet iffissata bħala 0.75 g, il-proporzjon solidu-likwidu ġie kkontrollat ​​f'1: 40 (w/v).

2.2 Reaġenti kimiċi

Pepsin (attività 3 000 U/g), trypsin (attività 250 U/mg), sustanza standard tal-aċidu galliku, reaġent Folin-Ciocalteu, DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl), ABTS (2,2′-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-chemical acid from Macklbenzothiazoline), xiri kimiku minn Mack-6-sulfonic. Iċ-Ċina. L-aċidu idrokloriku, il-bikarbonat tas-sodju, il-karbonat tas-sodju, il-fenol, l-aċidu sulfuriku kkonċentrat u aġenti kimiċi inorganiċi oħra kienu reaġenti kummerċjali domestiċi ta 'grad analitiku.

2.3 Tagħmir u strumenti tal-laboratorju

DK-98-Ⅱ banju ta' l-ilma diġitali b'temperatura kostanti (Taist Instrument Co., Ltd., Tianjin, iċ-Ċina); Bilanċ analitiku elettroniku QUINTIX‑224 (Sartorius, il-Ġermanja); Ċentrifuga refriġerata b'veloċità għolja tad-desktop GL-12B (Hunan Hexi Instrument Equipment Co., Ltd., iċ-Ċina); Spettrofotometru ultravjola-viżibbli DR6000 (Hach Company, l-Istati Uniti); Inkubatur tal-banju tal-ilma li jħawwad termostatiku serje SPH-110X (Shanghai Shiping Instrument Co., Ltd., Ċina).

2.4 Protokoll statiku ta' diġestjoni gastrointestinali in-vitro

Il-proċedura ta 'diġestjoni f'żewġ fażijiet ġiet modifikata u ottimizzata b'referenza għal protokolli statiċi ta' diġestjoni gastrointestinali ppubblikati qabel għall-matriċi tal-ikel tal-pjanti. Kull test tad-diġestjoni sar bi tliet repliki bijoloġiċi paralleli.

Fażi tad-diġestjoni gastrika (GD, ħin totali ta' inkubazzjoni=2 h):Aħna iżenna b'mod preċiż 0.75 g kampjun ta 'trab u ttrasferijnah f'tubu ċentrifugu tal-polypropylene ta' 50 mL. Volum xieraq ta 'ilma dejonizzat ġie miżjud biex inxarrab kompletament il-matriċi tat-trab solidu. Il-valur tal-pH tas-sospensjoni tal-kampjun ġie aġġustat bir-reqqa għal pH 2.0 bl-użu ta 'soluzzjoni milwiema ta' aċidu idrokloriku 1 mol/L. Wara, 4 mL fluwidu gastriku simulat ippreparat minn qabel ġie supplimentat; fluwidu gastriku simulat kien fih 3 g pepsin maħlul f'50 mL 0.01 mol/L soluzzjoni HCl. Tubi taċ-ċentrifuga tqiegħdu f'inkubatur termostatiku li tħawwad, it-temperatura ta 'inkubazzjoni miżmuma f'37 grad biex timita t-temperatura tal-ġisem fiżjoloġiku tal-bniedem, il-veloċità tar-rotazzjoni tat-tħawwid ġiet issettjata bħala 100 r/min. F'punti ta' ħin ta' teħid ta' kampjuni skedati (0 h, 0.5 h, 1.0 h, 1.5 h, 2.0 h), ittieħdet taħlita ta' reazzjoni parzjali. L-attività ta' l-enzima ġiet mitmuma permezz ta' tisħin bil-banju ta' l-ilma jagħli għal 10 min. It-taħlita ttrattata ġiet ċentrifugata taħt 4 gradi, b'veloċità li ddur 6 000 r/min għal 15-il minuta. Likwidu supernatant ċar inġabar u ppreservat għal kwantifikazzjoni fitokimika sussegwenti u analiżi ta 'attività antiossidanti.

Fażi tad-diġestjoni intestinali (ID, ħin totali ta' inkubazzjoni=2 h):Wara li tlestiet inkubazzjoni tad-diġestjoni gastrika ta' sagħtejn, il-valur tal-pH tad-digesta ġie aġġustat minn pH 2.0 sa pH newtrali 7.0 billi qatra żżid 1.0 mol/L soluzzjoni ta' bikarbonat tas-sodju. Soluzzjoni tax-xogħol ta 'Trypsin imbagħad ġiet miżjuda fis-sistema tad-diġestjoni; din is-soluzzjoni tax-xogħol ġiet ippreparata billi tħoll 0.3 g trab tat-tripsin f'50 mL 0.01 mol/L soluzzjoni tal-karbonat tas-sodju. Il-kundizzjoni ta 'inkubazzjoni tal-fażi intestinali tinżamm konsistenti: temperatura 37 grad, veloċità ta' tħawwad 100 r/min. Il-punti tal-ħin tat-teħid tal-kampjuni għad-diġestjoni intestinali ġew stabbiliti bħala 0 h, 0.5 h, 1.0 h, 1.5 h u 2.0 h. Wara t-teħid tal-kampjuni, id-diżattivazzjoni tal-enżimi, iċ-ċentrifugazzjoni mkessħa u l-passi tal-ġbir tas-supernatant kienu identiċi għall-operazzjonijiet tal-fażi gastrika.

2.5 Determinazzjoni ta' komponenti funzjonali bijoattivi

Il-kontenut totali ta' polifenol solubbli ġie ttestjat permezz tal-metodu kolorimetriku Folin-Ciocalteu, ir-riżultati tal-kalkolu ġew espressi bħala milligramma ekwivalenti ta' aċidu galliku għal kull gramma kampjun (mg GAE/g). Il-kontenut totali ta' polysaccharide solubbli tkejjel bl-użu ta' metodu kwantitattiv kolorimetriku ta' phenol-sulfuric acid. Il-kontenut totali ta' anthocyanin ġie skopert bi spettrofotometrija differenzjali tal-pH. Il-kontenut totali ta 'phenylethanoid glycoside ġie kkwantifikat permezz ta' metodu ta 'determinazzjoni spettrofotometrika ultravjola. Kull kampjun supernatant tkejjel fi tliet kopji tekniċi biex titnaqqas id-devjazzjoni tal-ittestjar.

2.6 Kejl tal-kapaċità antiossidant

2.6.1 Assaġġ ta' tneħħija tar-radikali ħielsa tad-DPPH

Il-perċentwal ta' tneħħija radikali ta' DPPH ġie kkalkulat skond il-Formula (1): \\(\\text{Rata ta' tneħħija ta' DPPH (\\%)}= \\left(1-\\frac{A_1-A_2}{A_0}\\right)\\times 100 \\tag{1}\\) Fejn:A₁jirrappreżenta l-qari ta' l-assorbiment ta' soluzzjoni mħallta li jkun fiha kampjun supernatant u soluzzjoni ta' ħidma DPPH;A₂tirrappreżenta l-assorbiment ta' kampjun supernatant imħallat ma' kampjun ta' ilma dejonizzat blank;A₀tirrappreżenta l-assorbiment tas-soluzzjoni tax-xogħol DPPH mħallta ma 'grupp ta' kontroll ta 'ilma dejonizzat pur.

2.6.2 Assaġġ ta' tneħħija tar-radikali ħielsa ABTS

Ir-rata ta' tneħħija ta' katjoni radikali ABTS ġiet ikkalkulata wara l-Formula (2): \\(\\text{Rata ta' tneħħija ta' ABTS (\\%)}= \\left(1-\\frac{A_1-A_2}{A_0}\\right)\\times 100 \\tag{2}\\) Definizzjonijiet tal-parametru ta' assorbimentA₁, A₂, A₀iżommu loġika konsistenti bħala kalkolu DPPH.

2.7 Ipproċessar ta' data statistika

L-esperimenti kollha tad-diġestjoni ġew ripetuti għal tliet repliki bijoloġiċi indipendenti. Il-pakkett tas-software statistiku SPSS 22.0 ġie adottat għal analiżi tal-varjanza f'direzzjoni waħda (ANOVA), test tas-sinifikat u kalkolu tal-koeffiċjent ta' korrelazzjoni Pearson. Is-softwer Origin 2018 ġie applikat għat-tpinġija taċ-ċifri sperimentali. Il-limitu ta' sinifikat statistiku ġie definit bħalaP < 0.05; P < 0.01 was judged as extremely significant difference. Different lowercase letters marked on chart bars indicate significant statistical difference between different treatment groups.

3. Riżultati

3.1 Bidliet ta' sustanzi bijoattivi u kapaċità antiossidanti għal wieħedLycium ruthenicumtrab

F'ambjent simulat ta 'diġestjoni gastrika, il-kontenut ta' polifenol solubbli ta 'trab iswed ta' goji berry żdied b'mod notevoli fl-ewwel 1.5 sigħat ta 'inkubazzjoni u wera tnaqqis żgħir fl-istadju aktar tard tad-diġestjoni gastrika. Il-kundizzjoni aċiduża gastrika ppromwoviet ħafna x-xoljiment tal-molekuli tal-polisakkarid u l-komponenti tal-antoċjanin (P < 0.05). Once the digesta transferred to intestinal digestion alkaline environment, detected soluble polysaccharide and anthocyanin contents showed obvious decreasing tendency. Experimental observation confirmed that alkaline pH value of simulated intestinal fluid constituted the primary driving factor for anthocyanin molecular degradation.

Mill-perspettiva tal-attività antiossidanti, kemm il-perċentwali ta' tneħħija radikali tad-DPPH kif ukoll tal-ABTS telgħu kontinwament matul l-inkubazzjoni tad-diġestjoni gastrika. Meta d-diġestjoni daħlet fil-fażi intestinali, il-kapaċità tat-tneħħija tar-radikali tad-DPPH naqset drastikament.

Ir-riżultati tal-kalkolu tal-korrelazzjoni ta 'Pearson indikaw li taħt il-kundizzjoni tad-diġestjoni gastrika, il-kontenut tal-polifenol kellu korrelazzjoni pożittiva sinifikanti mar-rata ta' tneħħija ta 'DPPH. Il-polifenol u l-antoċjanin wrew korrelazzjoni pożittiva estremament sinifikanti mal-prestazzjoni ta' tneħħija radikali tal-ABTS (P < 0.01). In intestinal digestion environment, polyphenol concentration presented significant negative correlation with antioxidant indexes. This phenomenon suggested partial degradation and structural transformation of phenolic compounds under intestinal‑simulated condition. Meanwhile, polysaccharide and anthocyanin still maintained positive correlation with radical‑scavenging capability throughout intestinal digestion process.

3.2 Bidliet ta' sustanzi bijoattivi u kapaċità antiossidanti għal wieħedCistanche deserticolatrab

Għal imnixxef bil-friżaCistanche deserticolatrab, il-konċentrazzjoni tal-polifenol solubbli laħqet il-valur massimu f'1.5 siegħa taħt inkubazzjoni tal-fażi gastrika, segwita minn xejra dixxendenti. Matul id-diġestjoni intestinali, il-kontenut tal-polifenol żdied malajr fi żmien 0.5 sigħat inizjali, waqa 'wara u reġa' żdied lejn it-tmiem tal-inkubazzjoni intestinali ta' sagħtejn. Il-kontenut tal-polisakkarid solubbli wera tendenza ġenerali 'l isfel kemm fl-istadji ta' diġestjoni gastrika kif ukoll intestinali. Il-konċentrazzjoni ta 'phenylethanoid glycoside solubbli żammet tkabbir kontinwu matul il-proċedura kollha ta' diġestjoni gastrika ta' sagħtejn.

F'termini ta 'prestazzjoni antiossidanti, id-diġestjoni gastrika tejbet ir-rata ta' tneħħija radikali tad-DPPH fl-ewwel 1.5 siegħa u mbagħad il-valur antiossidant naqas. Wara li qalbet għall-ambjent tad-diġestjoni intestinali, ir-rata tat-tkessiħ tad-DPPH l-ewwel naqset u mbagħad irkuprat gradwalment. Ir-rata ta' tkessiħ radikali tal-ABTS wriet il-mudell tat-tnaqqis inizjali u l-elevazzjoni sussegwenti matul il-kors sħiħ tal-ħin tad-diġestjoni.

L-outputs statistiċi ta’ korrelazzjoni wrew li l-polifenoli u l-glikożidi feniletanojdi kellhom korrelazzjoni pożittiva estremament sinifikanti mal-kapaċità ta’ tneħħija tar-radikali tad-DPPH taħt diġestjoni gastrika (P < 0.01). In intestinal digestion environment, phenylethanoid glycoside concentration showed significant correlation with both DPPH and ABTS scavenging indicators. This result strongly proved phenylethanoid glycosides act as the dominant antioxidant‑active constituents for Cistanche deserticolamaterja prima.

3.3 Komposti bijoattivi u prestazzjoni antiossidanti ta 'trab imħallat taħt diġestjoni gastrika simulata

Tliet formulazzjonijiet ta' trab imħallat (Grupp A 1:2, Grupp B 1:1, Grupp C 2:1) ippreżentaw xejriet ta' fluttwazzjoni ta' komponent distingwibbli taħt simulazzjoni tad-diġestjoni gastrika. Għall-polifenol solubbli: Grupp A u Grupp B esperjenzaw tnaqqis inizjali segwit minn elevazzjoni tal-kontenut hekk kif il-ħin tad-diġestjoni estiż. Grupp C wera xejra dixxendenti sostnuta ta 'polifenol solubbli matul inkubazzjoni gastrika. Il-kontenuti solubbli ta' polysaccharide, anthocyanin u phenylethanoid glycoside urew karatteristiċi ta' fluttwazzjoni dipendenti mill-proporzjon. B'mod ġenerali, l-ambjent gastriku aċiduż iffaċilita x-xoljiment ta 'dawn l-erba' klassijiet ta 'fitokimiċi bijoattivi minn matriċi tal-pjanti ta' trab imħallat.

Ir-riżultati tat-test antiossidanti wrew li l-perċentwali ta’ tneħħija radikali ta’ DPPH u ABTS tat-tliet gruppi mħallta kollha żdiedu b’mod sinifikanti b’ħin ta’ diġestjoni gastrika fit-tul (P < 0.05). Comparative analysis among three formula groups demonstrated that Group C (2:1 ratio, higher proportion of Lycium ruthenicum) kisbu valuri ta' tneħħija radikali relattivament ogħla wara diġestjoni fil-fażi gastrika.

3.4 Komposti bijoattivi u prestazzjoni antiossidanti ta 'trab imħallat taħt diġestjoni intestinali simulata

Wara li tidħol fl-istadju tad-diġestjoni intestinali, is-solubilità tal-polyphenol u phenylethanoid glycoside ta 'trab imħallat jistgħu jżommu tendenza li tiżdied aktar. Madankollu, il-kontenuti ta' polysaccharide solubbli u anthocyanin li jistgħu jinnutaw ġeneralment sofrew telf ta' sustanza. Ir-rata ta' tneħħija radikali tad-DPPH naqset fil-punt ta' żmien ta' diġestjoni intestinali bikrija u rkuprat fil-perjodu ta' inkubazzjoni aktar tard. Ir-rata ta’ tkessiħ radikali tal-ABTS ppreżentat xejra dixxendenti statistikament sinifikanti għat-tliet gruppi mħallta kollha fl-inkubazzjoni tad-diġestjoni intestinali kollha (P < 0.05).

Tqabbil komprensiv li jqis il-livell ta' żamma tas-sustanza bijoattiva kif ukoll il-kapaċità antiossidanti integrata wara diġestjoni sekwenzjali gastrika u intestinali kompleta wera li Grupp Ċ bi proporzjon ta' taħlit 2: 1 (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola) ta prestazzjoni antiossidant ġenerali superjuri, meta mqabbla mal-Grupp A u l-Grupp B.

4. Diskussjoni

Ir-riżultati sperimentali tad-diġestjoni in-vitro tagħna juru biċ-ċar li l-ambjent gastriku aċiduż huwa favorevoli għar-rilaxx ta’ polifenoli solubbli, polisakkaridi, anthocyanins u phenylethanoid glycosides mit-tnejn.Lycium ruthenicumuCistanche deserticolamatriċi tat-trab tal-pjanti. Effetti kkombinati ta 'idroliżi aċiduża b'pH baxx, inkubazzjoni ta' tħawwad mekkaniku u pepsin protease jistgħu jfixklu l-istruttura parzjali tal-ħajt taċ-ċelluli tal-pjanti, li taċċellera d-dissoluzzjoni fitokimika intraċellulari f'supernatant tad-diġestjoni milwiema. Tali titjib ta 'dissoluzzjoni jtejjeb direttament il-konċentrazzjoni tas-sustanza antiossidanti bijoaċċessibbli u l-kapaċità ta' tneħħija radikali.

Ladarba s-sistema tad-diġestjoni tittrasferixxi għal ambjent intestinali newtrali-alkalin, kategoriji fitokimiċi differenti jġibu ruħhom karatteristiċi ta 'stabbiltà distinti. Anthocyanins li joriġinaw minn goji berry iswed huma molekuli magħrufa sew sensittivi għall-pH. Il-kundizzjoni intestinali alkalina taċċellera d-degradazzjoni tal-istruttura taċ-ċirku tal-anthocyanin, li twassal għal tnaqqis tal-kontenut li jista' jitkejjel fis-supernatant. Din l-osservazzjoni hija konsistenti mal-konklużjonijiet ta 'riċerka preċedenti miksuba minn materjali oħra ta' berry b'ħafna anthocyanin. Il-molekuli parzjali tal-polisakkarid jistgħu jsofru qsim idrolitiku taħt l-influwenza magħquda tal-pH intestinali u l-azzjoni katalitika tat-tripsin, li jikkawżaw tnaqqis fil-konċentrazzjoni tal-polisakkarid solubbli misjuba. Għall-kuntrarju, partijiet tal-komposti tal-polifenoli u l-glikożidi tal-feniletanojdi xorta jistgħu jibqgħu jinħall mill-matriċi residwa tal-pjanti anke taħt inkubazzjoni simulata bl-intestini.

Teżisti differenza notevoli bejn ir-riżultati tal-assaġġ DPPH u l-assaġġ ABTS. Is-sistema ta 'reazzjoni DPPH topera f'ċirkustanza ta' solvent imħallat organiku-akweju parzjali u turi sensittività ogħla lejn molekuli fenoliċi lipofiliċi. Is-sistema ta 'assaġġ ABTS tista' tiskopri kemm komposti antiossidanti idrofiliċi kif ukoll lipofiliċi fl-istess ħin. Din id-differenza metodoloġika tipprovdi spjegazzjoni parzjali għall-fenomenu tagħna: id-diġestjoni intestinali tejbet il-prestazzjoni ta 'tneħħija radikali ta' ABTS iżda naqset milli tippromwovi r-rata ta 'eliminazzjoni ta' DPPH. Xi molekuli fitokimiċi oriġinali huma degradati waqt inkubazzjoni simulata bl-intestini, u jipproduċu metaboliti sekondarji b'qawwa antiossidant mibdula. Dawk il-prodotti ta' dekompożizzjoni li għadhom kif ġew iġġenerati se jsawru mill-ġdid ir-riżultati finali tat-test ta' tneħħija radikali.

L-analiżi statistika ta 'korrelazzjoni tikkonferma li l-antoċjani jservu bħala kontributuri antiossidanti primarji għalLycium ruthenicum, billi phenylethanoid glycosides jiddominaw attività antiossidanti ta 'Cistanche deserticola. Wara t-taħlit fiżiku ta 'dawn iż-żewġ trabijiet ta' materja prima, dawn iż-żewġ settijiet ta 'ingredjenti bijoattivi ta' firma jikkoeżistu fi ħdan is-supernatant tad-diġestjoni u jiddeterminaw b'mod kollaborattiv il-kapaċità antiossidant totali tat-trab imħallat kompost. L-iskrinjar komparattiv fost tliet proporzjonijiet tat-taħlit jidentifika 2: 1 (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola) bħala l-aħjar formula għall-massimizzazzjoni tal-kapaċità antiossidanti in-vitro wara simulazzjoni sħiħa tad-diġestjoni gastrointestinali.

Huwa essenzjali li jiġu diskussi l-limitazzjonijiet intrinsiċi li jappartjenu għal dan il-mudell statiku ta' diġestjoni in-vitro b'mod lott. Din is-simulazzjoni tal-laboratorju ma tistax tirriproduċi bis-sħiħ proċessi fiżjoloġiċi dinamiċi kkumplikati tal-passaġġ gastrointestinali uman reali. Fatturi bħall-moviment tal-peristalsi gastrointestinali, it-tnixxija kontinwa ta' meraq diġestiv, il-parteċipazzjoni tal-melħ tal-bili u l-proċess ta' fermentazzjoni tal-mikrobijota tal-musrana mhumiex inklużi fis-sistema sperimentali attwali. Barra minn hekk, il-pass tad-diżattivazzjoni tal-enżimi tal-banju tal-ilma jagħli applikat fil-protokoll tagħna jista 'jikkaġuna telf żgħir ta' kostitwenti fitokimiċi labili għas-sħana. Trab oħxon mhux maħdum minflok estratti purifikati ġie adottat bħala kampjun tal-ittestjar f'dan l-istudju. Għalhekk, l-outputs sperimentali tagħna jistgħu jaġixxu bħala dejta ta 'referenza preliminari, iżda ma jistgħux jikkorrispondu għal kollox mal-bijodisponibilità reali tas-sustanza ġewwa l-ġisem tal-bniedem. Provi ta' segwitu dwar l-għalf ta' l-annimali jew studji ta' intervent tad-dieta umana huma meħtieġa biex jivvalidaw aktar l-effetti fiżjoloġiċi prattiċi ta' din il-formula ta' trab kompost.

Mill-perspettiva tal-iżvilupp tal-prodott industrijali, din ir-riċerka toffri referenza teoretika għall-produzzjoni ta’ supplimenti ta’ trab tal-ikel funzjonali kompost bl-użu ta’ materja prima tal-goji iswed u tal-broomrape tad-deżert miġbura minn reġjuni li jipproduċu Hexi-Corridor. Matul id-disinn tal-formulazzjoni tal-prodott u l-valutazzjoni tal-ħażna tal-ħajja fuq l-ixkaffa, il-manifatturi għandhom jagħtu attenzjoni kbira lill-proprjetà tal-istabbiltà kimika li tiddependi mill-pH tal-komponenti tal-anthocyanin u phenylethanoid-glycoside. Għandhom jiġu adottati aġġustament raġonevoli tal-formulazzjoni u kontroll tal-kundizzjoni tal-ħażna biex tiġi minimizzata d-degradazzjoni tal-ingredjenti bijoattivi matul il-ħajja fuq l-ixkaffa tal-prodott kummerċjali.

5. Konklużjonijiet

Diġestjoni gastrika simulata ttejjeb b'mod sinifikanti s-solubilità tal-polifenoli, polisakkaridi, anthocyanins u phenylethanoid glycosides għat-tnejnLycium ruthenicumtrab uCistanche deserticolatrab, u fl-istess ħin isaħħaħ id-DPPH kif ukoll l-attività ta’ tneħħija tar-radikali ħielsa ABTS.

F'ambjent simulat ta 'diġestjoni intestinali, is-solubilità tal-polifenoli u l-glikożidi tal-feniletanojdi tkompli tiżdied, filwaqt li l-kontenuti li jistgħu jinstabu ta' polisakkaridi u anthocyanins jonqsu. Id-diġestjoni intestinali tippromwovi l-kapaċità ta' tkessiħ radikali tal-ABTS iżda ma turi l-ebda effett pożittiv ta' promozzjoni għar-rata ta' tkessiħ radikali tad-DPPH. Polyphenols, anthocyanins u phenylethanoid glycosides jippreżentaw korrelazzjoni lineari sinifikanti ma 'indikaturi antiossidanti. Anthocyanins u phenylethanoid glycosides jagħtu kontribut dominanti għall-prestazzjoni antiossidanti ta 'dawn iż-żewġ materjali tal-pjanti tad-deżert.

Fost tliet proporzjonijiet tat-taħlit ittestjati, il-proporzjon tat-taħlit2 : 1 (Lycium ruthenicum : Cistanche deserticola) jikseb l-ogħla kapaċità antiossidant komprensiva wara proċedura kompleta ta 'diġestjoni gastrointestinali simulata.

Din ir-riċerka tipprovdi bażi sperimentali fundamentali għall-iżvilupp ta' prodotti tal-ikel funzjonali innovattivi bl-użu tal-karatteristikaLycium ruthenicumuCistanche deserticolariżorsi tal-pjanti fil-Majjistral taċ-Ċina.

Rikonoxximenti

Dan ix-xogħol irċieva appoġġ finanzjarju mill-Proġett ta' Appoġġ għall-Industrija tal-Università Provinċjali ta' Gansu (Għotja Nru. 2021CYZC-56).

Kunflitti ta' Interess

L-awturi jiddikjaraw li m'hemm l-ebda kunflitt ta' interess.

Referenzi

[1] Sun XK, Zhang YY, Zhang XY. Progress tar-riċerka dwar il-mekkaniżmu tat-tixjiħ u t-terapija kontra t-tixjiħ. Ikel u Droga. 2022;24(1):74-80.

[2] Yan YM, Dai GL, Ran LW. Analiżi tal-kompożizzjoni tal-polifenolLycium ruthenicumfrott minn ħabitats selvaġġi differenti. Scientia Agricultura Sinica. 2014;47(12):2450‑2460.

[3] Gao Y, Tao P, Wang YJ. Studju tal-mekkaniżmu molekulari dwar l-attività antiossidanti tal-glikożidi feniletanojdi minnCistanche deserticolaibbażat fuq il-farmakoloġija tan-netwerk. Ġurnal Ċiniż tal-Ispiżerija Applikata Moderna. 2022;39(17):2204-2215.

[4] Bouayed J, Hoffmann L, Bohn T. Fenoliċi totali, flavonoids, anthocyanins u attività antiossidanti wara diġestjoni gastro-intestinali simulata u dijaliżi ta' varjetajiet ta' tuffieħ: bijoaċċessibbiltà u assorbiment potenzjali. Kimika tal-Ikel. 2011;128(1):14-21.

[5] Mihailović V, Kreft S, Benković ET. Profil kimiku, attività antiossidanti u stabbiltà f'sistema stimulata tal-mudell tal-passaġġ gastrointestinali ta 'tlietaVerbascumspeċi. Uċuħ u Prodotti Industrijali. 2016;89:141-151.

[6] Liu YX, Wu YP, Ji BP. Bidliet fil-komponenti u l-attività antiossidanti tal-polifenoli tal-blueberry waqt id-diġestjoni gastrointestinali simulata. Ġurnal tal-Istitut Ċiniż tax-Xjenza u t-Teknoloġija tal-Ikel. 2016;16 (10):87-95.

[7] Ryan L, Prescott SL. Stabbiltà tal-kapaċità antiossidant ta' ħamsa u għoxrin meraq tal-frott disponibbli kummerċjalment soġġett għal diġestjoni in-vitro. Ġurnal Internazzjonali tax-Xjenza u t-Teknoloġija tal-Ikel. 2010;45 (6):1191-1197.

[8] 那吉 N, Zhang HF, Yang FY. Id-diġestjoni gastrointestinali simulata in-vitro tinfluwenza l-komponenti antiossidanti u l-attività tar-ross imsajjar tal-qamħ saraċin tartari. Ikel Modern. 2022;28 (2):219-223.

[9] Bermúdez‑Soto MJ, Tomás‑Barberán FA, García‑Conesa MT. Stabbiltà tal-polifenoli fiċ-chokeberry soġġetti għal diġestjoni gastrika u pankreatika in-vitro. Kimika tal-Ikel. 2007;102 (3):865-874.

[10] O Sánchez‑Velázquez, Mulero M, Cuevas‑Rodríguez EO. Impatt tad-diġestjoni gastrointestinali in-vitro fuq l-istabbiltà, il-bijoaċċessibbiltà u l-attività antiossidanti tal-polifenoli minn tut selvaġġ u kummerċjali. Ikel u Funzjoni. 2021;12 (4):1-21.