Effett tat-tagħbija nutrizzjonali tal-kalċju u l-fosfat fuq il-kinetika tal-partiċelli tal-kalċiproteina f'adulti b'funzjoni normali u indebolita tal-kliewi

Astratt

Il-plażma toqrob lejn il-metastabbiltà li tikkonċerna l-kontenut ta 'kalċju u fosfat tagħha, b'perturbazzjonijiet minuri biss fl-attività jonika meħtieġa biex isostnu t-tkabbir tal-kristall ladarba tkun innukleata. Fiżjoloġikament, il-kalċju u l-fosfat jiġu assorbiti b'mod intermittenti mid-dieta kuljum, iżda l-konċentrazzjonijiet fil-plażma ta 'dawn il-jonji jiddevjaw minimament wara l-pranzu. Dan jimplika l-eżistenza ta' sistema buffer minerali li tinġarr mid-demm biex tissekwestra l-fosfati tal-kalċju u timminimizza r-riskju ta' depożizzjoni fit-tessuti rotob. Partiċelli tal-kalċiproteina (CPP), kollojdi endoġeni tal-proteini minerali li fihom il-proteina tal-plażma fetuin-A, jistgħu jissodisfaw din il-funzjoni iżda hija nieqsa evidenza definittiva li tgħaqqad it-tagħbija minerali tad-dieta mal-formazzjoni tagħhom. Hawnhekk aħna nuru li CPP huwa ffurmat bħala rispons fiżjoloġiku normali għall-għalf f'adulti b'saħħithom u li dan iseħħ minkejja bidla minima fil-markaturi minerali tas-serum konvenzjonali. Barra minn hekk, f'individwi b'Mard Kronika tal-Kliewi (CKD), li fihom l-immaniġġjar tal-minerali huwa indebolit, nuru li kemm il-livelli tas-sawm kif ukoll dawk ta 'wara l-ikel tal-prekursuri tas-CPP huma miżjuda b'mod notevoli u korrelatati b'mod invers qawwi mal-funzjoni tal-kliewi. Dan l-istudju jenfasizza l-kontribut importanti, iżda spiss traskurat, tal-bijokimika kollojdali għall-omeostażi minerali u jipprovdi għarfien ġdid dwar id-disregolazzjoni tal-metaboliżmu minerali fis-CKD.

Ikklikkja hawn biex tixtri prodotti Cistanche

Introduzzjoni

Il-kalċju u l-fosfat jiffurmaw melħ li ma jinħallx ħafna f'soluzzjoni milwiema u filwaqt li l-metaboliżmu fl-organiżmi ħajjin kollha jiddependi fuq dawn in-nutrijenti essenzjali, il-koeżistenza tagħhom fi fluwidi bijoloġiċi toħloq riskju inerenti ta' mineralizzazzjoni u l-ħtieġa għal regolamentazzjoni stretta1. Il-biċċa l-kbira tal-fluwidi extraċellulari bħall-plażma, huma kkunsidrati metastabbli jew li joqorbu lejn il-metastabbiltà rigward l-attivitajiet joniċi tagħhom tal-kalċju u tal-fosfat2, li jsostnu faċilment it-tkabbir tal-kristall jekk innukleati. Din it-tendenza għall-kalċju u l-fosfat li jippreċipitaw ġiet sfruttata mill-vertebrati għall-proprjetajiet bijomekkaniċi uniċi tagħhom matul l-evoluzzjoni tat-tessuti skeletriċi u dentali. Madankollu, fl-istess ħin, dan ordna mekkaniżmi ta’ mobilizzazzjoni rapida u trasport bl-ingrossa effiċjenti ta’ prekursuri minerali biex jissodisfaw it-talbiet ta’ tkabbir u tiswija ta’ dawn it-tessuti iebsin, kif ukoll strateġiji ta’ restrizzjoni tal-mineralizzazzjoni għal dawn is-siti u prevenzjoni ta’ kalċifikazzjoni mhux mixtieqa fit-tessuti rotob3 . Tabilħaqq, anke elevazzjonijiet modesti fil-konċentrazzjonijiet tal-kalċju u tal-fosfat fil-plażma huma assoċjati ma 'riskju akbar ta' kalċifikazzjoni patoloġika tal-arterji u t-tessuti4. Peress li l-kalċju u l-fosfat żejjed jitneħħew kważi esklussivament mill-kliewi, dan ir-riskju, flimkien mas-sekwelle kardjovaskulari assoċjati tiegħu, huwa sostanzjalment ogħla f'dawk b'Mard Kronika tal-Kliewi (CKD), fejn disturbi fil-metaboliżmu minerali jsiru evidenti bi tnaqqis relattivament żgħir fil-filtrazzjoni glomerulari. rata (GFR)5,6. Minħabba l-abbundanza ta 'kalċju u fosfat fid-dieta li għaliha l-mammiferi huma esposti b'mod intermittenti, wieħed jista' jissuspetta li r-riskju ta 'mineralizzazzjoni ektopika jkun l-ogħla wara ikla minħabba ż-żieda antiċipata ta' joni minerali assorbiti mill-imsaren. Madankollu, kuntrarjament għal din l-aspettattiva, il-konċentrazzjonijiet tal-kalċju u tal-fosfat fil-plażma jinbidlu minimament fil-perjodu ta’ wara l-pranzu u filwaqt li żieda fl-eskrezzjoni urinarja tgħin biex tinżamm l-omeostasi7, dan ir-rispons mhuwiex istantanju u jibqa’ lura b’xi sigħat wara l-inġestjoni ta’ ammonti millimolari ta’ kalċju u fosfat8. Bħala soluzzjoni għal din l-isfida fiżjoloġika, sistema li tinġarr mid-demm għall-buffering u t-trasport tal-minerali ilha żmien twil suspettata9, u l-attenzjoni reċenti daret lejn kumplessi kollojdali minerali-proteini li jistgħu jissodisfaw din il-funzjoni u b'mod sikur chaperone l-fux intermittenti tal-minerali permezz tal-extraċellulari. fluwidu għal siti ta' utilizzazzjoni jew rimi10.

Fil-plażma, ir-regolatur tal-mineralizzazzjoni tal-proteini l-aktar qawwi u abbundanti huwa l-glycoprotein fetuin-A11 derivat mill-fwied, li jinteraġixxi ma 'kumplessi minerali-proteini kollojdali naxxenti biex jiffurmaw partiċelli calciprotein (CPP)12,13. B'mod analogu għal kif l-apolipoproteini solubilizzaw il-merkanzija tal-lipidi tagħhom għat-trasport, fetuinA jistabbilizza fosfati tal-kalċju li ma tantx jinħallu, jipprevjeni t-tkabbir u l-preċipitazzjoni tal-kristalli, filwaqt li jiffaċilita l-assorbiment tagħhom fit-tessuti għall-utilizzazzjoni jew it-tneħħija14-16. Inkapaċità li tagħmel jew tistabbilizza biżżejjed CPP, kif jidher fil-ġrieden knockout fetuin-A, tirriżulta f'wieħed mill-aktar fenotipi severi ta 'kalċifikazzjoni ektopika magħrufa17, fejn kumplessi li fihom minerali jippreċipitaw direttament fil-lumen tal-mikrovaskulatura li jwasslu għal okklużjoni, iskemija, nekrożi, u fbrożi18. CPP huwa ġġenerat permezz ta 'serje ta' passi ordnati, inizjalment bl-irbit ta 'raggruppamenti ffurmati spontanjament ta' joni tal-kalċju u fosfat għal fetuin-A, li jiffurmaw monomeri calciprotein (CPM)19, li mbagħad iservu bħala l-blokki tal-bini għal strutturi polimeriċi akbar; l-ewwel, li jgħaqqdu biex jiffurmaw CPP primarju sferiku (CPP-I) li jkun fih fosfat tal-kalċju amorfu, qabel ma jinbidel f'CPP sekondarju ellissoidali akbar u dens (CPP-II) li fih hydroxyapatite12 kristallin.

Lil hinn mir-rwol fiżjoloġiku allegat tal-formazzjoni tas-CPP fis-sekwestru u t-tixrid ta 'minerali żejda, livelli elevati huma osservati wkoll fi stati ta' metaboliżmu minerali indebolit, inkluż f'CKD20. F'dan l-ambjent, livelli ogħla fis-serum ta 'CPM u CPP ġew marbuta ma' riskju akbar ta 'avvenimenti kardjovaskulari21-25 u mortalità22. Studji pre-kliniċi jissuġġerixxu li CPP jista 'jinduċi direttament il-kalċifikazzjoni taċ-ċelluli vaskulari tal-muskoli lixxi26,27, attivazzjoni ta' mogħdijiet infjammatorji u ċitotossiċi ċellulari28,29, kif ukoll leżjonijiet luminali u endoteljali vaskulari30. Meħuda flimkien, ġie propost li espożizzjoni fit-tul għal livelli kronikament elevati ta 'CPP fis-serum tista' tgħin biex tispjega r-rabtiet bejn minerali tad-dieta żejda u riżultati ħżiena tal-pazjent f'CKD14,31. B'mod intriganti, dejta reċenti tissuġġerixxi wkoll li s-CPM li jiċċirkola jiġi ffiltrat fil-glomerulus29, li jimplika li l-indeboliment tal-kliewi jista 'jaffettwa l-metaboliżmu tas-CPP permezz ta' mekkaniżmi multipli.

Avvanzi metodoloġiċi reċenti jippermettu kwantifikazzjoni diretta ta 'CPM32, CPP-I, u CPP-II33, b'dawn l-analiżi issa applikati f'diversi studji kliniċi ta' osservazzjoni u intervent24,25,34-39. Metodu ieħor komplimentari ġdid għall-valutazzjoni ta' din is-sistema huwa t-test T50, valutazzjoni funzjonali tal-kapaċità tas-serum li jirreżisti l-formazzjoni ex vivo ta' CPP-II meta jkun sfidat b'ammonti supersaturating ta' kalċju u fosfat40. T50 aktar baxx ġie assoċjat b'mod konsistenti ma 'riskju akbar ta' patoloġija vaskulari u mortalità f'individwi b'funzjoni normali tal-kliewi41, kif ukoll f'diversi koorti CKD, inklużi kemm CKD mhux dijalisi22,42,43 kif ukoll CKD44 dipendenti fuq id-dijalisi. Minbarra l-kinetika tal-formazzjoni tas-CPP-II, id-daqs (raġġ idrodinamiku) tal-molekuli CPP-II iġġenerati fl-assaġġ T50 jista 'jitkejjel ukoll40,45, u jista' jipprovdi informazzjoni pronjostika addizzjonali dwar ir-riskju vaskulari46,47.

Il-kunċett ta 'oriġini tad-dieta ta' CPP huwa sostnut b'mod qawwi mill-osservazzjoni li t-tmigħ b'ħafna fosfati huwa assoċjat ma 'livelli ambjentali miżjuda ta' CPM48 u CPP33 fi studji fuq l-annimali, u t-tnaqqis fis-serum CPM34 u CPP37 f'pazjenti bl-emodijalisi kkurati b'sustanzi li jgħaqqdu l-fosfat intestinali. Madankollu, l-osservazzjoni definittiva tal-effett tat-teħid ta 'minerali nutrizzjonali fuq il-kinetika akuta tas-CPP fil-bnedmin hija nieqsa. Barra minn hekk, l-impatt ta 'CKD fuq il-metaboliżmu CPP post-prandjali għad irid jiġi dokumentat. Biex nindirizzaw dawn in-nuqqasijiet fl-evidenza ewlenin, għamilna studju kkontrollat ​​tal-effett tat-teħid ta 'ikel standardizzat fuq id-daqs tas-CPM, CPP-I, CPP-II, T50 u CPP-II tas-serum, f'adulti sajmin b'funzjoni tal-kliewi normali jew indebolita.

Estratt ta' Cistanche

Metodoloġija

1. Studju tal-popolazzjoni.

Studjajna 14-il individwu b'CKD u 16-il kontroll b'saħħithom imqabbla skont l-età u s-sess. Kull parteċipant kellu jkollu mill-inqas 18-il sena biex ikun eliġibbli. Il-parteċipanti ġew esklużi jekk: (i) kellhom storja ta' mard minerali jew tal-għadam, minbarra dak relatat ma' CKD; (ii) kienu qed jiġu ttrattati b'binder tal-fosfat intestinali jew calcitriol; jew (iii) kellhom disturb gastrointestinali, storja ta' intolleranza għall-lattożju jew ma kinux lesti li jikkunsmaw l-ikla tal-istudju. Għall-grupp CKD, ingaġġajna seba' individwi b'rata ta' filtrazzjoni glomerulari stmata (eGFR) bejn 30 u 60 mL/min/1.73 m2 u sebgħa b'eGFR<30 mL/min/1.73 m2, excluding participants who required dialysis or with a previous kidney transplant. Healthy controls had no history of chronic medical conditions and had normal kidney function (eGFR>60 mL/min/1.73 m2). L-istudju sar mid-Dikjarazzjoni ta' Ħelsinki.

L-individwi kollha pprovdew kunsens infurmat bil-miktub, u l-istudju ġie approvat mill-kumitat tal-etika lokali (Kumitat tal-Etika tar-Riċerka tal-Bniedem tas-Saħħa ta 'Melbourne MH2018.363).

2. Proċedura.

Kull parteċipant ġie studjat wara sawm matul il-lejl u l-ġbir tal-kampjuni beda bejn is-7.30 u d-9.30 am. Fil-bidu tal-perjodu ta' studju ddaħħlet kannula ġol-vini. Qabel ma nġabar kull kampjun tad-demm, ġibda inizjali ta' 5 mL mill-kannula ġiet mormija. Żewġ kampjuni inizjali tad-demm tas-sawm ittieħdu 30 minuta 'l bogħod minn xulxin biex titqies il-varjazzjoni tal-linja bażi. Il-valuri medji ta' dawn il-punti ta' żewġ ħinijiet intużaw bħala "ħin 0". Immedjatament wara l-ġbir tat-tieni kampjun tas-sawm, il-parteċipanti kkunsmaw ikla standardizzata (Sanitarium Up&Go kolazzjon likwidu; 250 mL, togħma tal-vanilla) li fiha 815 kJ enerġija, 300 mg kalċju, u 188 mg fosfat (Tabella 1). Il-parteċipanti ngħataw struzzjonijiet biex jikkunsmaw ix-xarba kollha fi żmien 5 min. Inġabru kampjuni tad-demm serjali f'ħames punti ta' ħin wara l-ikel (30, 60, 120, 180, u 240 min) mill-bidu tal-ikla. Matul il-perjodu ta 'studju, il-parteċipanti tħallew jixorbu l-ilma iżda ma tħallewx jikkunsmaw xi ikel jew xorb ieħor.

3. Miżuri tar-riżultat.

Inġabar id-demm għal kejl ripetut ta' markaturi ġodda tal-metaboliżmu minerali (CPM, CPP-I, CPP-II, T50, u daqs CPP-II) f'kull punt ta' ħin. Fetuin-A tkejjel f'kull punt ta 'żmien, minħabba r-rwol tiegħu bħala l-proteina prinċipali li torbot il-minerali preżenti fis-CPM u CPP. Aħna kejlu wkoll il-fosfat tas-serum, il-kalċju totali, il-manjeżju, l-albumina u l-bikarbonat f’kull punt ta’ ħin, u l-ormon tal-paratirojde intatt fis-serum (PTH) u l-fattur tat-tkabbir tal-fibroblasti intatt-23 (iFGF23) fi tliet ħinijiet ({{12 }}, 120, u 240 min). Iċ-ċitrat tas-serum tkejjel f'0, 30, u 60 min. L-urea fis-serum, il-krejatinina, u 1,25 dihydroxy vitamina D ġew imkejla darba fil-linja bażi tas-sawm (0 min). Kampjuni tad-demm għal markaturi ġodda ta 'metaboliżmu minerali, PTH, iFGF23, 1,25 dihydroxy vitamina D, u ċitrat tas-serum, tħallew jagħqad għal 30 min qabel iċ-ċentrifugazzjoni, u mbagħad alikwoti tas-serum ġew maħżuna f'-80 grad sal-analiżi tal-lott. Il-kejl bijokimiku l-ieħor kollu twettaq fil-ħin tal-ġbir tal-kampjun bl-użu ta 'metodi standard tal-laboratorju.

4. Ġel-fltration u assaġġi ċitometriċi tal-fow għal CPM u CPP.

Aħna impjegajna żewġ analiżi komplementari biex nikkwantifikaw frazzjonijiet differenti tal-grupp CPP li jiċċirkola49. Iż-żewġ analiżi jużaw id-derivattiv tal-bisfosfonat ittikkettat b'mod fluworexxenti, OsteoSense 680EX (Perkin Elmer), li jingħaqad speċifikament mal-fosfat tal-kalċju ta' fażi solida u preferenzjali ma' fażijiet kristallini (eż. hydroxyapatite). Il-metodu ta' 'gel-fltration' ta' Miura et al.32 intuża biex ikejjel iż-żgħir (<50 nm diameter), low-density mineral-laden fetuin-A colloids. Briefly, frozen serum samples were thawed for 24 h at 25 °C to induce aggregation of CPM and phase transition to crystalline calcium phosphate. Samples were then centrifuged for 30,000g for 2 h at 4 °C to remove larger CPP-I and CPP-II, leaving less dense crystal-laden fetuin-A monomer and multimers for staining with OsteoSense (0.5 µM) in HEPES-buffered DMEM (pH 8.0). Unbound dye was subsequently removed by gel filtration (Micro Bio-Spin® Columns with Bio-Gel® P-30, Bio-Rad) and the resultant fluorescence was measured using an infrared scanner (Odyssey CLx, LI-COR; EX 685 nm, EM 700 nm). Miura and colleagues32 referred to the mineral detected as low-density (L)-CPP, however, here we refer to them as CPM to reflect the origin of this mineral fraction in vivo. In our hands, the mean interassay analytical coefficient of variation (CVA) for the CPM assay was 4.9%.

Għall-analiżi ċitometrika tal-fluss, alikwoti tas-serum iffriżat ġew ipproċessati bl-użu tal-proċeduri standardizzati deskritti qabel50. CPP-I u CPP-II tkejlu kif deskritt qabel bl-użu ta' setup ta' ċitometru tal-fluss BD FACSVerse biex isolvu partiċelli<200 nm from the background and operate with fluorescence triggering on OsteoSense-positive events33,37. In this assay, CPP is distinguished from membrane-delimited mineral-containing extracellular vesicles using phosphatidyl serine–binding cadherin-FITC (Haematologic Technologies Inc., Essex Junction, VT). CPP-I and CPP-II were distinguished by differences in side scatter (SSC) intensity (related to particle size) and OsteoSense fluorescence intensity. Interassay CVA for CPP-I and CPP-II were<15% and<10%, respectively.

5. Markers minerali oħra.

Serum T50 tkejjel minn Calciscon AG, Biel, l-Isvizzera, kif deskritt qabel bl-użu ta 'nephelometer Nephelostar (BMG Labtech, Ortenberg, il-Ġermanja)40. Il-medja tas-CVA interassay għal T50 kienet 3.4 fil-mija. Ir-raġġ idrodinamiku CPP-II tkejjel permezz ta 'tifrix tad-dawl dinamiku bl-użu ta' DynaPro Plate Reader II (Wyatt Technology, Santa Barbara, CA, USA) kif deskritt minn Chen et al.47 Te interassay CVA għad-daqs CPP-II kien 4 fil-mija. Intużaw immunoassays kummerċjali biex ikejlu iFGF23 (Kainos Laboratories, Tokyo, Japan), 1,25 dihydroxy vitamina D Immunodiagnostic Systems, Boldon, UK), u fetuin-A (R&D Systems, Minneapolis, USA) skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. CVA interassay medja kienu 3.8 fil-mija, 5.5 fil-mija, u 3.2 fil-mija, rispettivament. Iċ-ċitrat tas-serum tkejjel bl-użu ta 'assaġġ kolorimetriku (Sigma-Aldrich, Darmstadt, il-Ġermanja) b'CVA interassay medju ta' 3.5 fil-mija.

6. Analiżi statistika.

Using GLIMPSE, a validated linear mixed model power and sample size calculator51, we estimated that 10 participants would provide>90 fil-mija ta' qawwa biex tiskopri l-irduppjar tas-CPP fil-perjodu ta' wara l-pranzu b'rata ta' żball tat-tip I ta' 0.05. L-istudju ma kienx imħaddem biex jikxef differenza bejn il-gruppi.

Dejta bijokimika demografika u tas-sawm tqabbel bejn il-gruppi bl-użu ta 'test t mhux imqabbad jew test Kruskal-Wallis għal varjabbli kontinwi normali u distorti rispettivament, u test chi-squared għal varjabbli kategoriċi.

Aħna immiraw li niddeskrivu r-rispons post-prandjali fi ħdan u bejn il-grupp għal kull parametru ripetut. Biex nagħmlu dan, għamilna mudelli lineari b'effetti mħallta (LMM) għal kull parametru, bl-użu ta' approċċ ta' probabbiltà massima ristretta u b'matriċi ta' kovarjanza mhux strutturata52. Għal kull LMM immudellajna grupp, ħin kategoriku, u interazzjoni grupp b'ħin bħala effetti fissi, u interċettazzjoni każwali ġiet inkluża għal kull parteċipant biex tagħti kont tal-korrelazzjoni ta 'miżuri ripetuti. Il-grupp ta' kontroll u l-ħin '0' intużaw bħala l-valuri ta' referenza għall-grupp u l-ħin, rispettivament. Stimi tal-koeffiċjenti għal termini ta 'interazzjoni grupp b'ħin intużaw biex jiġu ttestjati għal differenzi fir-rispons post-prandjali bejn is-CKD u l-gruppi ta' kontroll. Wara li twaħħlu kull LMM, wettaqna wkoll paraguni post hoc f'pari biex nittestjaw għal differenzi fil-valuri medji bejn il-gruppi f'kull punt ta 'żmien, u biex nittestjaw għal devjazzjoni mil-linja bażi tas-sawm f'kull grupp. Għal dawn il-paraguni f'pari, użajna l-metodu ta 'korrezzjoni Bonferroni biex naġġustaw għal paraguni multipli. CPM, CPP-I, CPP-II, CPP-II daqs, PTH, u iFGF23 ġew trasformati b'mod naturali log qabel ma twaħħlu LMMs biex jiżguraw distribuzzjoni normali tar-residwi. Għal faċilità ta 'interpretazzjoni, stimi tal-koeffiċjenti għal termini ta' interazzjoni minn dawn il-mudelli mbagħad ġew esponenzjati biex jiġu derivati ​​stimi tal-bidla perċentwali. Għall-LMM ta 'CPM, termini ta' interazzjoni grupp b'ħin issuġġerew differenza sinifikanti fir-rispons post-prandjali bejn il-gruppi. Biex tesplora aktar l-effett tal-funzjoni tal-kliewi fuq il-livelli post-prandjali ta 'CPM aħna kkalkulajna wkoll l-erja taħt il-kurva (AUC) għal CPM bl-użu tal-metodu spline kubiku (ħin 0 sa 240 min) u eżaminajna r-relazzjoni bejn eGFR , AUC, u l-konċentrazzjoni massima ta 'CPM (bl-użu ta' korrelazzjoni ta 'rank Spearman) kif ukoll bejn CKD u l-ħin tal-konċentrazzjoni massima ta' CPM (bl-użu tat-test chi-squared).

Diversi kampjuni kellhom livelli li ma jistgħux jinstabu ta 'CPP-I (2 kampjuni fil-grupp ta' kontroll, u 6 fil-grupp CKD) jew CPP-II (5 fil-grupp ta 'kontroll u 10 fil-grupp CKD). Għall-analiżi prinċipali, il-limitu aktar baxx ta 'kwantifikazzjoni għall-assaġġ (133 partiċelli/mL) intuża għal dawn il-valuri ċensurati lef. Biex nevalwaw il-preġudizzju potenzjali minn dan l-approċċ, għamilna analiżi tas-sensittività fejn LMMs għal CPP-I u CPP-II ġew imwaħħla mill-ġdid wara li imputaw valuri lefcensored bl-użu ta 'rigressjoni Tobit f'ħafna livelli, fejn il-ħin u l-grupp ġew imdaħħla bħala varjabbli indipendenti 53.

Valuri p b'żewġ denbu<0.05 were considered significant. All data were analyzed using Stata MP version 17.0 (StataCorp, College Station, USA) and figures were produced using GraphPad Prism version 9.2.0 (GraphPad Sofware, San Diego, USA).

Herba Cistanche

Diskussjoni

Sa fejn nafu tagħna, dan huwa l-ewwel studju li jirrapporta effett sinifikanti wara l-ikel tat-teħid nutrittiv fuq il-livelli tas-serum ta 'CPM, CPP-I, u CPP-II fil-bnedmin. Dawn l-effetti kienu komuni għal individwi b'funzjoni normali u indebolita tal-kliewi; madankollu, l-eskursjoni wara l-pranzu tas-CPM tas-serum kienet ħafna aktar evidenti fil-parteċipanti CKD. Sibna wkoll effett bikri u temporanju wara l-pranzu fuq T50, li kien preżenti irrispettivament mill-funzjoni tal-kliewi u akkumpanjat minn żieda konkomitanti fil-fetuin-A fis-serum.

Is-sejbiet tagħna huma konsistenti mal-kunċett li l-assorbiment intestinali ta 'tagħbija minerali tad-dieta jista' jwassal direttament għall-formazzjoni ta 'CPM, CPP-I u CPP-II li jiċċirkolaw. Dan ġie propost qabel10,15,16 iżda huwa bbażat fil-biċċa l-kbira fuq data dwar l-annimali33,48. B'kuntrast, l-evidenza fil-bnedmin kienet indiretta, ġejja minn studji ta 'sustanzi li jgħaqqdu l-fosfat intestinali f'pazjenti CKD dipendenti fuq l-emodijalisi34,37,55. Studju żgħir minn Yamada et al. ssuġġeriet varjazzjoni matul il-ġurnata fis-CPP fis-serum b'qċaċet wara l-pranzu, madankollu, dan l-istudju uża teknika ta 'assaġġ eqdem li ma setgħetx tikkwantifika separatament is-sottospeċi CPM u CPP, u l-parteċipanti kienu kollha rikoverati fl-isptar għall-ġestjoni ta' dijabete instabbli56. B'kuntrast, il-parteċipanti kollha f'dan l-istudju kienu klinikament stabbli, u sa fejn nafu, għall-ewwel darba, urejna li eskursjonijiet wara l-ikel jidhru mhux biss f'individwi b'CKD iżda wkoll f'adulti b'saħħithom, li jissostanzjaw ir-rwol. tal-formazzjoni tas-CPM u CPP fir-rispons fiżjoloġiku normali għall-inġestjoni tal-ikel.

Żiediet fis-serum CPM u CPP dehru anke wara tagħbijiet minerali nutrittivi relattivament modesti, u fiżjoloġikament rilevanti (Tabella 1). B'kuntrast, kien hemm varjazzjoni minima wara l-ikel fil-markaturi aktar konvenzjonali tal-metaboliżmu minerali. Studji preċedenti wrew bl-istess mod devjazzjoni limitata post-prandjali fil-fosfat7,57, ħlief meta s-suġġetti jiġu sfidati b'tagħbijiet farmakoloġiċi kbar58,59. Fis-saħħa, il-fosfat totali tal-ġisem huwa regolat, b'tali mod li l-assorbiment intestinali nett ikun imqabbel minn eskrezzjoni urinarja8. Madankollu, dan ir-rispons mhuwiex istantanju, u jista 'jidher dewmien ta' diversi sigħat qabel ma sseħħ żieda fl-eskrezzjoni tal-fosfat fl-awrina, anke meta t-tagħbija tal-fosfat tingħata ġol-vina8. Minflok, mudelli ta 'annimali wrew li mekkaniżmi oħra, mhux renali, iservu biex iżommu konċentrazzjonijiet joniċi fis-serum b'mod aktar akut, permezz ta' distribuzzjoni għall-għadam u tessuti oħra59-61. Huwa plawsibbli li l-formazzjoni ta 'CPM u CPP tista' tkun depożitu temporanju importanti addizzjonali ta 'fosfat (u kalċju), li jista' jtaffu b'mod akut tagħbijiet minerali lokali, bħal mis-sistema gastrointestinali14. Il-proprjetajiet fiżikokimiċi ta 'CPM u CPP ifissru li kwantitajiet potenzjalment kbar ta' minerali li ma jinħallux mod ieħor jistgħu jeżistu fiċ-ċirkolazzjoni mingħajr riskju ta 'preċipitazzjoni, li apparentement jiffaċilita l-minerali biex jiġu ttrasportati b'mod sikur bl-ingrossa lejn siti ta' użu jew tneħħija.

Aħna osservajna żieda temporanja fis-serum fetuin-A fil-grupp CKD. B'kuntrast, fetuin-A deher stabbli fil-kontrolli, madankollu, meta t-tqabbil f'pari ġew ripetuti mingħajr korrezzjoni għal paraguni multipli, kien hemm żidiet sinifikanti f'30 u 60 min fil-kontrolli (Tabella Supplimentari S8), li jindika li seta' kellna s-setgħa baxxa biex niskopru effett sottostanti. Lil hinn mill-fatt li huwa reattiv tal-fażi akuta negattiva, b'livelli mrażżna b'mod qawwi b'reazzjoni għal infammazzjoni akuta u kronika62, ftit huwa magħruf dwar mekkaniżmi oħra li jirregolaw direttament is-sintesi epatika u t-tnixxija tal-fetuin-A, u hemm nuqqas ta 'dejta preċedenti dwar il-ġurnata, jew varjazzjoni akuta wara l-pranzu fi kwalunkwe speċi. Minħabba ż-żieda osservata fil-fetuin-A fis-serum wara l-għalf, speċjalment fil-grupp CKD, u r-rwol meħtieġ ta 'fetuin-A fil-formazzjoni ta' CPM u CPP, huwa intriganti li jiġi kkunsidrat jekk it-tmigħ jistax jiġi "intus" permezz ta 'mekkaniżmu għadu mhux magħruf, li jwassal għar-rilaxx epatiku ta 'fetuinA biex jikkoinċidi ma' influss ta 'minerali mill-imsaren. Tabilħaqq, Uedono et al. reċentement issuġġerixxa li s-CPP innifsu jista 'jkun grillu għall-espressjoni tal-fetuin-A f'epatoċiti kkultivati63. Għalhekk, il-mekkaniżmi li jikkontrollaw ir-rilaxx tal-fetuin-A u r-rispons tagħhom għat-tagħbija tal-minerali jeħtieġu aktar investigazzjoni.

T50 hija valutazzjoni funzjonali tal-kapaċità tas-serum li jirreżisti l-formazzjoni ex vivo CPP-II, li tirrappreżenta kompost ta 'diversi fatturi ta' kalċifikazzjoni ta 'potenzar (inkluż kalċju u fosfat) u inibizzjoni (inklużi fetuin-A, albumina, manjesju, ċitrat u bikarbonat)40. Osservajna żieda bikrija iżda temporanja f'T50. Dan deher fiż-żewġ gruppi, iżda fil-grupp CKD, il-quċċata kienet koinċidenti ma 'żidiet fis-serum fetuin-A. Barra minn hekk, fost il-parteċipanti kollha, il-bidla f'T50 mil-linja bażi kienet korrelata mill-qrib ħafna mal-bidla fis-serum fetuin-A (Figura Supplimentari S2), li tissuġġerixxi li fetuin-A jista 'jkun il-fattur ewlieni sottostanti għall-bidliet osservati f'T50. Tabilħaqq, ma sibniex bidliet bikrin korrispondenti wara l-pranzu f’modulaturi magħrufa oħra ta’ T50 (fosfat tas-serum, kalċju, bikarbonat, manjesju, jew albumina), għalkemm dan ma jeskludix bidliet aktar sottili f’wieħed, jew taħlita, ta’ dawn il-fatturi. . Pereżempju, interazzjoni pożittiva grupp b'ħin kienet preżenti għall-bikarbonat tas-serum fil-grupp CKD f'120 min, li koinċidiet maż-żieda f'T50. Fir-rigward tal-fetuin-A, kien hemm ukoll korrelazzjoni bejn il-bidla fil-bikarbonat u T50 mil-linja bażi (Figura Supplimentari S4), għalkemm din kienet relattivament dgħajfa meta mqabbla mal-korrelazzjoni ma 'l-ewwel (r=0.385 vs. r=0.839). Madankollu, il-"marea alkalina" post-prandjali hija fenomenu rikonoxxut, u huwa plawsibbli li fatturi multipli kkontribwew għall-bidliet osservati wara l-pranzu f'T5064. L-ikla tal-istudju kien fiha wkoll ammont sorprendenti ta 'ċitrat (~ 16 mM), inibitur qawwi magħruf tal-formazzjoni ta' CPP, madankollu, għalkemm kien hemm żieda żgħira fiċ-ċitrat tas-serum fil-grupp CKD, din il-bidla ma kinitx tikkoinċidi mal-bidliet osservati f' T50, lanqas ma kien hemm xi korrelazzjoni ġenerali bejn il-bidla fit-T50 u ċ-ċitrat tas-serum fiż-żewġ gruppi. Modulaturi oħra deskritti qabel ta 'T50, bħal pirofosfat u żingu, ma tkejlux f'dan l-istudju. Għalkemm dawn, jew fatturi oħra li għadhom mhux magħrufa, setgħu wkoll ikkontribwew għaż-żieda osservata wara l-ikel f'T50, aħna ninnotaw li bidliet pjuttost sostanzjali fil-konċentrazzjoni ta 'dawn il-molekuli inorganiċi żgħar huma ġeneralment meħtieġa li jkollhom impatt sinifikanti fuq T5065. B'kuntrast ma 'l-effetti ta' wara l-pranzu fuq T50, ir-raġġ idrodinamiku ta 'CPP-II baqa' apparentement mhux mibdul fiż-żewġ gruppi.

Kapsuli Cistanche

Filwaqt li eskursjonijiet ta 'CPM wara l-pranzu ġew osservati fiż-żewġ gruppi, il-livelli ta' CPM kienu ogħla b'mod konsistenti fil-grupp CKD f'kull wieħed mill-punti tal-ħin, u termini ta 'interazzjoni grupp b'ħin indikaw li l-kobor tar-rispons post-prandjali kien akbar b'mod sinifikanti. fil-parteċipanti CKD milli fil-kontrolli. Għaldaqstant, f'analiżi esploratorja, kien hemm korrelazzjoni qawwija bejn eGFR u CPM AUC u konċentrazzjoni massima. L-ogħla livelli ta 'CPM kellhom ukoll it-tendenza li jseħħu aktar tard fil-grupp CKD. Teoretikament, dawn id-differenzi jistgħu jindikaw żieda fil-produzzjoni ta 'CPM wara teħid nutrittiv u/jew kapaċità indebolita biex tneħħi CPM f'dawk b'CKD. Dan tal-aħħar huwa sostnut minn dejta reċenti minn Koeppert et al., li użaw mikroskopija b'żewġ fotoni ħajjin biex juru li s-CPM li jiċċirkola huwa prinċipalment imnaddaf permezz ta 'filtrazzjoni glomerulari fil-ġrieden29. Tbassir raġonevoli, għalhekk, jista 'jkun li l-kapaċità li tikklerja s-CPM issir indebolita hekk kif il-GFR jonqos. Madankollu, alterazzjonijiet f'aspetti oħra tal-omeostażi minerali, inkluż it-tibdil tal-għadam66, u eskrezzjoni renali mdewma ta 'tagħbijiet akuti ta' fosfat7,59 jidhru wkoll b'mod komuni f'CKD u setgħu kkontribwew għal elevazzjonijiet fil-livelli post-prandjali. Evidenza reċenti ddubitat l-idea li ilha li CKD taffettwa l-assorbiment nett tal-fosfat intestinali57,67,68. Madankollu nnutaw li sitta mill-14-il individwu fil-grupp CKD kienu qed jieħdu cholecalciferol. Meta wieħed iqis il-potenzjal għal effetti stimulatorji tal-vitamina D fuq l-assorbiment tal-minerali intestinali, għamilna analiżi esploratorja ad hoc biex nittestjaw jekk l-użu ta 'vitamina D nutrizzjonali kellux impatt fuq ir-rispons akut ta' CPM, CPP-I, u CPP-II għall-għalf (Tabelli Supplimentari S9–S11). Apparti minn interazzjoni waħda pożittiva grupp b'ħin għal CPP-I fi 30 minuta f'dawk li jieħdu cholecalciferol, it-termini ta' interazzjoni l-oħra kollha u l-paraguni post hoc f'pari għal CPM, CPP-I, u CPP-II ma kinux sinifikanti, li jissuġġerixxu li cholecalciferol. l-użu ma kienx probabbli li kellu effett sostanzjali fuq il-kinetika CPM/CPP ta' wara l-pranzu. Filwaqt li d-daqs żgħir tal-kampjun u l-potenzjal għal konfużjoni jistgħu jipprekludu konklużjonijiet definittivi, in-nuqqas ta 'effett jista' wkoll jirrifletti l-predominanza tal-assorbiment tal-fosfat permezz tal-mogħdija paraċellulari meta l-minerali huwa abbundanti, li mhux regolat b'mod attiv mill-assi tal-vitamina D69.

B'kuntrast ma' CPM, aħna ma osservajnax effett qawwi fuq il-funzjoni tal-kliewi jew f'CPP-I jew CPP-II. B'differenza CPM, CPP li jiċċirkola huwa primarjament imneħħi miċ-ċirkolazzjoni minn mekkaniżmi mhux renali. Mudelli ta' annimali u in vitro ssuġġerew tneħħija rapida ta' CPP-I prinċipalment minn ċelluli endoteljali sinusojdali tal-fwied28, u ta' CPP-II minn makrofaġi residenti tal-fwied u tal-milsa70. Huwa plawsibbli li filwaqt li l-parteċipanti fil-grupp CKD tagħna wrew evidenza ta 'metaboliżmu tas-CPM mibdul, li dawn il-mogħdijiet diskreti ta' tneħħija tas-CPP kienu biżżejjed biex iżommu profili normali tas-CPP post-prandjali. Konna antiċipajna li l-grupp CKD ikollu livelli ta 'CPP b'mod għaqli ogħla meta mqabbel ma' kontrolli bbażati fuq studji preċedenti, għalkemm dawn l-istudji rreġistraw pazjenti b'CKD aktar avvanzati li kienu dipendenti fuq id-dijalisi33, jew użaw il-metodu anzjan u indirett ta 'kejl tas-CPP20,23. Individwi b'CKD aktar avvanzata minn dawk studjati hawn jistgħu juru differenzi akbar fil-livelli tas-CPP tas-sawm u wara l-pranzu. In-nuqqas ta 'separazzjoni għas-CPP bejn is-CKD tagħna u l-grupp ta' kontroll jista 'jkun dovut ukoll għan-numri limitati ta' parteċipanti tagħna, li llimitaw ukoll il-kapaċità tagħna li nittestjaw formalment għal effett tal-istadju CKD (Figura Supplimentari S6). Tabilħaqq, l-istudju tagħna kien ibbażat fuq l-eżaminazzjoni tar-risponsi wara l-ikel aktar milli d-differenzi bejn il-gruppi. Ta 'min jinnota, CPP-I deher li jerġa' lura għal-livelli ta 'sawm aktar kmieni fil-kontrolli minn parteċipanti CKD, u kien hemm interazzjoni pożittiva grupp b'ħin għal CPP-II f'parteċipanti CKD f'120 min. Iż-żewġ sejbiet potenzjalment jindikaw li nistgħu osservajna effetti aktar evidenti bejn il-gruppi f'koorti akbar. Impreċiżjoni analitika ogħla għall-kejl tas-CPP ibbażat fuq iċ-ċitometrija tal-fluss setgħet ukoll ikkontribwiet għas-sejbiet nulli.

Minbarra li jipprovdi għarfien ġdid dwar il-fiżjoloġija tal-metaboliżmu tas-CPM u CPP, l-istudju tagħna għandu wkoll rilevanza diretta għall-ottimizzazzjoni tal-użu ta 'dawn il-markaturi ġodda tal-metaboliżmu minerali fi studji futuri. Filwaqt li kull wieħed minn dawn l-analiżijiet ġodda wera wegħda fil-ħidma klinika bikrija, ftit studji rrappurtaw43 jew ikkontrollaw għal status ta 'sawm/assorbiment46,56. F'dan l-istudju, bosta individwi kellhom livelli li ma jistgħux jinstabu ta 'CPP-I jew CPP-II fil-perjodu ta' sawm u kmieni wara l-pranzu, u dan l-effett profond tas-sawm fuq is-CPP tas-serum huwa fih innifsu finanzjament notevoli u mhux irrappurtat qabel. B'kuntrast, il-livelli ta 'CPM tas-sawm kienu kejlu u ogħla b'mod sinifikanti fil-grupp CKD milli fil-kontrolli, li jissuġġerixxi li elevazzjonijiet sostnuti fis-CPM jistgħu mhux neċessarjament jimmanifestaw f'livelli elevati ta' CPP f'dawk b'CKD mhux dipendenti fuq id-dijaliżi.

Studji epidemjoloġiċi preċedenti ssuġġerew rabtiet bejn livelli elevati ta 'CPM u CPP ma' firxa ta 'markaturi surrogati ta' mard vaskulari21,23,24, kif ukoll ma 'avvenimenti kardjovaskulari25 u mortalità għal kull kawża22. Barra minn hekk, studji bbażati fil-laboratorju pprovdew mekkaniżmi plawżibbli li bihom is-CPP jista 'jmedja dawn ir-riżultati vaskulari patoloġiċi26-28. Madankollu, filwaqt li studji in vitro ssuġġerew li ħafna minn dawn it-tossiċitajiet huma indotti b'mod dipendenti fuq id-doża jekk is-CPP ikollu rwol fiżjoloġiku normali fis-saħħa, allura mhuwiex ċar f'liema punt dawn il-partiċelli jistgħu jsiru dannużi. L-għarfien tal-effett tal-konsum nutrittiv fuq il-kinetika tas-CPP kif żvelat hawn jista 'jkun kruċjali għal aktar fehim ta' dan il-proċess. Konċentrazzjoni ta' limitu għall-bidu ta' effetti patoloġiċi ta' CPM u CPP tista' (għall-inqas inizjalment) tintlaħaq biss fl-istat post-prandjali in vivo. Jekk iva, l-ittestjar dinamiku tar-rispons post-prandjali jista 'jipprovdi opportunitajiet addizzjonali biex jevalwaw manifestazzjonijiet preċedenti ta' metaboliżmu minerali disregolat, kif ukoll ir-riskju ta 'mard vaskulari assoċjat. Possibbiltà oħra importanti hija li l-kompożizzjoni u għalhekk it-tossiċità intrinsika ta 'CPP-I u CPP-II tvarja fost is-saħħa u CKD45.

Suppliment Cistanche

Limitazzjonijiet

Aħna nirrikonoxxu li dan l-istudju għandu diversi limitazzjonijiet, inklużi numri limitati ta 'pazjenti, kif diġà diskuss. Notevolment, użajna wkoll ikla standardizzata mogħtija wara sawm matul il-lejl, għalhekk ma nistgħux nikkummentaw dwar l-effett ta 'kompożizzjoni ta' ikla li tvarja jew l-effett ta 'ikliet sussegwenti mogħtija matul il-bqija tal-ġurnata. Aħna għażilna l-ikla abbażi tad-disponibbiltà kummerċjali tagħha, li tippermetti standardizzazzjoni bejn il-parteċipanti, u minħabba li kienet tirrappreżenta tagħbijiet nutrizzjonali fiżjoloġikament rilevanti (Tabella 1). Huwa madankollu possibbli li kieku l-parteċipanti kienu sfidati b'tagħbijiet minerali akbar, aktar separazzjoni bejn dawk b'funzjoni tal-kliewi normali u indebolita setgħet kienet tidher. Bl-istess mod, peress li osservajna individwi biss għal erba 'sigħat wara l-ikel, huwa konċepibbli li l-effett kumulattiv ta' ikliet sussegwenti jista 'jkun ukoll iddistingwi gruppi aktar.

Aħna ma rkuprawx ħmieġ jew awrina u għalhekk ma nistgħux nikkummentaw dwar il-minerali totali assorbiti jew eliminati matul l-istudju. Aħna nassumu li l-bidliet f'kull miżura li dehru wara t-tmigħ huma direttament relatati mal-konsum nutrittiv. Din is-suppożizzjoni hija sostnuta indirettament minn studji dettaljati ta’ immaġini li juru fux ta’ joni tal-kalċju u fosfat wara t-teħid ta’ ikel57, kif ukoll evidenza diretta minn studji fuq l-annimali li juru li gavage orali akut ta’ ġrieden b’soluzzjoni ta’ fosfat buffered jirriżulta fi spikes fis-serum f’CPM/CPP48. Madankollu, aħna ma osservajnax parteċipanti fuq kundizzjonijiet ta 'sawm estiżi, u għalhekk ma nistgħux nikkunsidraw b'mod konklużiv varjazzjonijiet ta' matul il-ġurnata mhux relatati mad-dieta f'xi wieħed mill-parametri studjati. Madankollu kellna żewġ kampjuni tas-sawm, li l-medja tagħhom intużat bħala "ħin 0", u l-varjabbiltà bejn dawn il-kampjuni tas-sawm kienet trivjali meta mqabbla mal-kobor tal-bidliet li dehru fil-perjodu ta 'wara l-pranzu.

Aħna użajna l-metodu Bonferroni biex nikkunsidraw il-paraguni multipli post hoc bejn u fi gruppi għal kull parametru. Dan huwa bla dubju approċċ konservattiv, u sa fejn nafu tagħna mhux wieħed adottat mill-ebda studji oħra ta 'għalf simili tal-metaboliżmu minerali post-prandjali. Għażilna dan l-approċċ minħabba n-numru kbir ta 'punti ta' żmien u paraguni li saru u rraġunajna li kien preferibbli li niffukaw fuq is-sinjali l-aktar robusti u sinifikanti. Madankollu, bħala riżultat, nistgħu tlifna effetti iżgħar, iżda potenzjalment rilevanti. Aħna ma kkoreġijniex għal testijiet multipli fuq parametri minerali differenti minħabba l-probabbiltà ta 'bidliet interdipendenti marbuta fiżjoloġikament.

Cistanche tubulosa

Konklużjoni

L-istudju tagħna żvela għall-ewwel darba li t-teħid ta 'minerali nutrizzjonali jwassal għall-formazzjoni ta' CPM u CPP fid-demm bħala rispons fiżjoloġiku normali għall-għalf. Dawn is-sejbiet jikkorroboraw l-ipoteżi li l-formazzjoni tas-CPM/CPP tgħin biex jinbnew tagħbijiet minerali post-prandjali, li jiffunzjonaw bħala maħżen temporanju li jiċċirkola ta’ fosfati tal-kalċju bl-ingrossa finalment destinati għall-utilizzazzjoni/ħażna (eż., prekursur minerali għall-mineralizzazzjoni tal-għadam) jew eliminazzjoni. Aħna osservajna wkoll livelli ogħla ta 'sawm ta' CPM fis-serum u rispons akbar wara l-pranzu f'dawk b'funzjoni tal-kliewi indebolita, li jissuġġerixxi li l-metaboliżmu tas-CPM huwa mibdul b'mod ċar f'CKD. Analiżi tal-immaniġġjar ta 'CPM/CPP wara l-pranzu tista' tipprovdi għarfien ġdid dwar il-mekkaniżmi li jorbtu t-teħid eċċessiv ta 'kalċju u fosfat tad-dieta ma' riskji akbar ta 'mard kardjovaskulari f'pazjenti b'eskrezzjoni minerali indebolita. B'mod aktar wiesa ', dawn is-sejbiet ġodda jenfasizzaw il-kontribut importanti, iżda ħafna drabi traskurat, tal-bijokimika kollojdali għall-omeostażi minerali.

Referenzi

1. Magalhães, MCF, Marques, PAAP & Correia, RN Biomineralization—Medical Aspects of Solubility (eds. Königsberger, E. & Königsberger, L.). 71–123. (Wiley, 2006).

2. Holt, C., Lenton, S., Nylander, T., Sorensen, ES & Teixeira, SC Mineralizzazzjoni ta 'tessuti rotob u iebes u l-istabbiltà tal-bijofluwidi. J. Strut. Biol. 185, 383–396 (2014).

3. Reznikov, N., Steele, JAM, Fratzl, P. & Stevens, MM Viżjoni tax-xjenza tal-materjali tal-mineralizzazzjoni tal-matriċi extraċellulari. Nat. Dun Mater. 1, 16041 (2016).

4. Smith, ER Kalċifikazzjoni vaskulari fl-uremija: Kunċetti ta 'età ġdida dwar problema tax-xjuħija. Metodi Mol. Biol. 1397, 175–208 (2016).

5. Chen, J. et al. Kalċifikazzjoni ta 'l-arterja koronarja u riskju ta' mard kardjovaskulari u mewt fost pazjenti b'mard kroniku tal-kliewi. JAMA Cardiol. 2, 635–643 (2017).

6. Kestenbaum, BR et al. Inċidenza u progressjoni tal-kalċifikazzjoni koronarja f'mard kroniku tal-kliewi: L-Istudju Multi-Etniku tal-Aterosklerożi. Kidney Int. 76, 991–998 (2009).

7. Isakova, T. et al. Metaboliżmu minerali wara l-ikel u iperparatirojdiżmu sekondarju f'CKD bikrija. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 615–623 (2008).

8. Scanni, R., vonRotz, M., Jehle, S., Hunter, HN & Krapf, R. Te rispons uman għal tagħbijiet ta 'fosfat enterali u parenterali akuti. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 2730–2739 (2014).

9. Pasch, A., Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Phosphate, kalċifikazzjoni fid-demm, u stress minerali: Is-sistema fiżjoloġika ta 'buffering minerali tad-demm u l-assoċjazzjoni tagħha ma' riskju kardjovaskulari. Int. J. Nephrol. 2018, 9182078 (2018).

10. Jahnen-Dechent, W. et al. It-tajn fid-demm: Ir-rwol ta 'kumplessi proteina-minerali u vesicles extraċellulari fil-bijomineralizzazzjoni u l-kalċifikazzjoni. J. Strut. Biol. 212, 107577 (2020).

11. Schinke, T. et al. Il-proteina tas-serum alpha2-HS glycoprotein/fetuin jinibixxi l-formazzjoni ta 'apatite in vitro u ċelluli calvaria mineralizing. Rwol possibbli fil-mineralizzazzjoni u l-omeostasi tal-kalċju. J. Biol. Chem. 271, 20789–20796 (1996).

12. Heiss, A. et al. Bażi strutturali tal-inibizzjoni tal-kalċifikazzjoni mill-glikoproteina alpha 2-HS/fetuina-A. Formazzjoni ta 'partiċelli ta' calciprotein kollojdali. J. Biol. Chem. 278, 13333–13341 (2003).

13. Cai, MM, Smith, ER & Holt, SG Ir-rwol tal-fetuin-A fit-traffikar u d-depożizzjoni tal-minerali. Bonekey Rep 4, 672 (2015).

14. Smith, ER, Hewitson, TD & Jahnen-Dechent, W. Partiċelli tal-kalċiproteina: Minerali li jġibu ruħhom ħażin? Curr. Opinja. Nephrol. Ipertens. 29, 378–386 (2020).

15. Jahnen-Dechent, W., Schäfer, C., Ketteler, M. & McKee, MD Chaperones minerali: Rwol għal fetuin-A u osteopontin fl-inibizzjoni u r-rigressjoni tal-kalċifikazzjoni patoloġika. J. Mol. Med. (Berl.) 86, 379–389 (2008).

16. Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Rimedju tan-natura għall-gwaj tal-fosfat: Il-partiċelli tal-kalċiproteina jirregolaw il-metaboliżmu minerali sistemiku. Kidney Int. 97, 648–651 (2020).

17. Schafer, C. et al. Il-proteina tas-serum alfa 2-Heremans-Schmid glycoprotein/fetuin-A hija inibitur sistemikament ta' kalċifikazzjoni ektopika. J. Clin. Invest. 112, 357–366 (2003).

18. Herrmann, M. et al. Kalċifikazzjoni lumenali u mikro vaskulopatija fil-ġrieden defiċjenti ta 'fetuin-A jwasslu għal morbidità ta' organi multipli. PLoS ONE 15, e0228503 (2020).

19. Heiss, A., Pipich, V., Jahnen-Dechent, W. & Schwahn, D. Fetuin-A hija proteina trasportatur minerali: It-tifrix tan-newtroni ta 'angolu żgħir jipprovdi għarfien ġdid dwar l-inibizzjoni tal-kalċifikazzjoni kkontrollata ta' Fetuin-A. Biophys. J. 99, 3986–3995 (2010).

20. Smith, ER et al. Konċentrazzjoni ta 'fetuin-A fis-serum u partiċelli ta' calciprotein li fihom fetuin-A f'pazjenti b'mard infjammatorju kroniku u insuffiċjenza renali. Nefroloġija (Carlton) 18, 215–221 (2013).

21. Smith, ER et al. Partiċelli ta 'calciprotein li fihom fetuin-A fosforilati huma assoċjati ma' ebusija aortika u milieu proċikliku f'pazjenti b'CKD qabel id-dijalisi. Nephrol. Ċempel. Trapjant. 27, 1957–1966 (2012).

22. Smith, ER et al. Il-propensità għall-kalċifikazzjoni tas-serum tbassar mortalità għal kull kawża f'CKD ta' qabel id-dijalisi. J. Am. Soc. Nephrol. 25, 339–348 (2014).

23. Hamano, T. et al. Il-kumpless fetuin-minerali jirrifletti stress ta 'kalċifikazzjoni extraosseous f'CKD. J. Am. Soc. Nephrol. 21, 1998–2007 (2010).

24. Nakazato, J. et al. Assoċjazzjoni ta 'partiċelli ta' calciprotein imkejla b'metodu ġdid ma 'plakka tal-arterja koronarja f'pazjenti b'mard tal-arterja koronarja: Studju trasversali. J. Cardiol. 74, 428–435 (2019).

25. Gatate, Y. et al. Valur ta 'tbassir ta' nofs it-terminu ta 'partiċelli ta' calciprotein f'pazjenti ta 'manteniment tal-emodijalisi ibbażat fuq assaġġ ta' filtrazzjoni tal-ġel. Aterosklerożi 303, 46–52 (2020).

26. Cai, MMX, Smith, ER, Tan, SJ, Hewitson, TD & Holt, SG Te rwol ta 'partiċelli ta' calciprotein sekondarji fil-paradoss tal-mineralizzazzjoni ta 'mard kroniku tal-kliewi. Calcif. Tessut. Int. 101, 570–580 (2017).

27. Aghagolzadeh, P. et al. Il-kalċifikazzjoni taċ-ċelluli tal-muskoli lixxi vaskulari hija indotta minn partiċelli ta 'calciprotein sekondarji u msaħħa bil-fattur alfa tan-nekrożi tat-tumur. Aterosklerożi 251, 404-414 (2016).

28. Koppert, S. et al. It-tneħħija ċellulari u l-attività bijoloġika tal-partiċelli tal-kalċiproteina jiddependu fuq l-istat ta 'maturazzjoni u l-kristallinità tagħhom. Quddiem. Immunol. 9, 1991 (2018).

29. Koeppert, S. et al. Immaġini ħajjin tat-tneħħija tal-partiċelli tal-calciprotein u l-assorbiment medjat mir-riċetturi: ir-rwol tal-monomeri tal-kalċiproteini. Quddiem. Ċellula. Dev. Biol. 9, 633925 (2021).

30. Shishkova, D. et al. Il-bijoni tal-fosfat tal-kalċju jikkawżaw iperplażja intima f'aorti intatti ta' firien normolipidemiċi permezz ta' ħsara endoteljali. Int. J. Mol. Sci. 20, 5728 (2019).

31. Kuro-o, M. Paradigma ċċentrata fuq il-fosfat għall-patofiżjoloġija u t-terapija ta 'mard kroniku tal-kliewi. Kidney Int. Suppl. 2011(3), 420–426 (2013).

32. Miura, Y. et al. Identifikazzjoni u kwantifikazzjoni ta 'partiċelli ta' calciprotein fil-plażma bi proprjetajiet fiżiċi distinti f'pazjenti b'mard kroniku tal-kliewi. Sci. Rep 8, 1256 (2018).

33. Smith, ER et al. Assaġġ ċitometriku tal-fluss ġdid ibbażat fuq sonda fluworexxenti għal nanopartiċelli li fihom minerali fis-serum. Sci. Rep 7, 5686 (2017).

34. Nakamura, K. et al. L-effett tal-karbonat tal-lantanu fuq il-partiċelli tal-kalċiproteina f'pazjenti bl-emodijalisi. Clin. Exp. Nephrol. 24, 323–329 (2020).

35. Tiong, MK et al. Effett ta 'qtugħ medju tad-dijalizzatur fuq tossini uremiċi marbuta mal-proteini u markaturi tal-metaboliżmu minerali f'pazjenti fuq l-emodijalisi. Emodjali. Int. https://doi.org/10.1111/hdi.12924 (2021).

36. Tiong, MK, Smith, ER, Toussaint, ND, Al-Khayyat, HF & Holt, SG Tnaqqis ta 'partiċelli ta' calciprotein f'adulti li qed jirċievu infliximab għal mard infjammatorju kroniku. JBMR Plus 5, e10497 (2021).

37. Smith, ER, Pan, FFM, Hewitson, TD, Toussaint, ND & Holt, SG Effett ta 'sevelamer fuq partiċelli ta' calciprotein f'pazjenti bl-emodijalisi: Te sevelamer versus kalċju biex jitnaqqsu partiċelli ta 'calcprotein fid-dijalisi li fihom fetuin-A (SCaRF) randomised prova kkontrollata. Kidney Int. Rep 5, 1432–1447 (2020).

38. Ruderman, I., Smith, ER, Toussaint, ND, Hewitson, TD & Holt, SG Bidliet lonġitudinali fl-għadam u l-metaboliżmu minerali wara l-waqfien ta 'cinacalcet f'pazjenti bid-dijalisi b'iperparatirojdiżmu sekondarju. BMC Nephrol. 19, 113 (2018).

39. Bressendorf, I. et al. L-effett taż-żieda tal-manjeżju tad-dijalisat fuq partiċelli tal-kalċiproteina, infjammazzjoni u markaturi tal-għadam: Analiżi post hoc minn prova klinika kkontrollata randomised. Nephrol. Ċempel. Trapjant. 36, 713–721 (2021).

40. Pasch, A. et al. It-test ibbażat fuq nanopartiċelli jkejjel il-propensità ġenerali għall-kalċifikazzjoni fis-serum. J. Am. Soc. Nephrol. 23, 1744–1752 (2012).

41. Eelderink, C. et al. Propensità għall-kalċifikazzjoni fis-serum u r-riskju ta 'mortalità kardjovaskulari u għal kull kawża fil-popolazzjoni ġenerali: L-Istudju PREVENT. Arterioscler. Tromb. Vasc. Biol. 40, 1942–1951 (2020).

42. Bundy, JD et al. Propensità għall-kalċifikazzjoni tas-serum u kalċifikazzjoni ta 'l-arterja koronarja fost pazjenti b'CKD: Studju Te CRIC (Koorti ta' Insuffiċjenza Kliewi Kronika). Em. J. Kliewi. Dis. 73, 806–814 (2019).

43. Bundy, JD et al. Propensità għall-kalċifikazzjoni tas-serum u avvenimenti kliniċi f'CKD. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 14, 1562–1571 (2019).

44. Pasch, A. et al. Propensità għall-kalċifikazzjoni tad-demm, avvenimenti kardjovaskulari, u sopravivenza f'pazjenti li qed jirċievu emodijalisi fil-prova EVOLVE. Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 12, 315–322 (2017).

45. Smith, ER, Hewitson, TD, Hanssen, E. & Holt, SG Trasformazzjoni bijokimika ta 'partiċelli ta' calciprotein fl-uremija. Għadam 110, 355–367 (2018).

46. ​​Chen, W. et al. Assoċjazzjonijiet tad-daqs tal-partiċelli tal-calciprotein tas-serum u l-ħin tat-trasformazzjoni b'kalċifikazzjoni arterjali, ebusija arterjali, u mortalità f'pazjenti bl-emodijalisi inċidentali. Em. J. Kidney Dis. 77, 346–354 (2021).

47. Chen, W. et al. Pazjenti b'mard tal-kliewi kroniku avvanzat u kalċifikazzjoni vaskulari għandhom raġġ idrodinamiku kbir ta 'partiċelli ta' calciprotein sekondarji. Nephrol. Ċempel. Trapjant. 34, 992–1000 (2019).

48. Akiyama, KI et al. Partiċelli tal-kalċiproteina jirregolaw l-espressjoni tal-fattur ta' tkabbir tal-fibroblast-23 fl-osteoblasti. Kidney Int. 97, 702–712 (2020).

49. Smith, ER Partiċelli tal-kalċiproteina: bijomarkatur minerali li jeħtieġ kejl aħjar. Aterosklerożi 303, 43–45 (2020).

50. Smith, ER Te iżolament u kwantifikazzjoni ta 'partiċelli calciprotein li fihom fetuin-A minn fluwidi bijoloġiċi. Metodi Mol. Biol. 1397, 221–240 (2016).

51. Guo, Y., Logan, HL, Glueck, DH & Muller, KE Għażla ta' daqs tal-kampjun għal studji b'miżuri ripetuti. BMC Med. Res. Metodu. 13, 100 (2013).

52. Liu, C., Cripe, TP & Kim, MO Kwistjonijiet statistiċi fl-analiżi tad-dejta lonġitudinali għal studji dwar l-effikaċja tat-trattament fix-xjenzi bijomediċi. Mol. Ter. 18, 1724–1730 (2010).

53. Tobin, J. Stima tar-relazzjonijiet għal varjabbli dipendenti limitati. Econometrica 26, 24–36 (1958).

54. Ter Meulen, KJ et al. Dijalisat tal-aċidu ċitriku jtejjeb il-propensità għall-kalċifikazzjoni tal-pazjenti tal-emodijalisi: Prova cross-over randomised prospettiva multiċentrika. PLoS ONE 14, e0225824 (2019).

55. Tiem, U. et al. L-effett tat-terapija li jgħaqqad il-fosfat b'ossidrossidu sucroferric fuq il-propensità għall-kalċifikazzjoni f'pazjenti b'emodijalisi kronika: prova randomizzata, ikkontrollata, crossover. Clin. Kidney J. 14, 631–638 (2021).

56. Yamada, H. et al. Varjabilità ta 'kuljum fil-livelli tas-serum ta' partiċelli ta 'calciprotein u l-assoċjazzjoni tagħhom ma' parametri tal-metaboliżmu minerali: Studju pilota trasversali. Nefroloġija (Carlton) 23, 226–230 (2018).

57. Stremke, ER et al. L-assorbiment tal-fosfru intestinali f'CKD moderata u adulti b'saħħithom ġie determinat bl-użu ta 'tracer radjuisotopiku. J. Am. Soc. Nephrol. 32, 2057–2069 (2021).

58. Volk, C. et al. Effetti akuti ta 'addittiv tal-fosfru inorganiku fuq il-metaboliżmu minerali u fatturi ta' riskju kardjometaboliċi f'suġġetti b'saħħithom. J. Clin. Endokrinol. Metab. 107, e852–e864 (2022).

59. Turner, ME et al. Tolleranza indebolita tal-fosfat ġiet żvelata bi sfida orali akuta. J. Minatur tal-għadam. Res. 33, 113–122 (2018).

60. Tomas, L. et al. L-adattament akut għal fosfat orali jew ġol-vini jeħtieġ ormon tal-paratirojde. J. Am. Soc. Nephrol. 28, 903–914 (2017).

61. Zelt, JG et al. Depożizzjoni minerali akuta tat-tessut bi tweġiba għal polz ta' fosfat f'CKD sperimentali. J. Minatur tal-għadam. Res. 34, 270–281 (2019).

62. Lebreton, JP et al. Il-konċentrazzjoni tas-serum tal-glikoproteina umana alfa 2 HS matul il-proċess infjammatorju: evidenza li l-glikoproteina alfa 2 HS hija reactant negattiv tal-fażi akuta. J. Clin. Invest. 64, 1118–1129 (1979).

63. Uedono, H. et al. Effetti ta 'partiċelli calciprotein li fihom fetuin-A fuq modifiki ta' wara t-traduzzjoni ta 'fetuin-A fiċ-ċelloli HepG2. Sci. Rep 11, 7486 (2021).

64. Niv, Y. & Fraser, GM Te fenomenu tal-marea alkalina. J. Clin. Gastroenterol. 35, 5–8 (2002).

65. Smith, ER, Hewitson, TD & Holt, SG Testijiet dijanjostiċi għall-kalċifikazzjoni vaskulari. Adv. Dis kroniku tal-kliewi. 26, 445–463 (2019).

66. Sprague, SM et al. Preċiżjoni dijanjostika tal-markers tat-tibdil tal-għadam u l-istoloġija tal-għadam f'pazjenti b'CKD kkurati bid-dijalisi. Em. J. Kidney Dis. 67, 559–566 (2016).

67. Vorland, CJ et al. Il-progressjoni tal-mard tal-kliewi ma tnaqqasx l-assorbiment tal-fosfru intestinali f'mudell tal-firien ta 'mard kroniku tal-kliewi-disturb tal-għadam minerali. J. Minatur tal-għadam. Res. 35, 333–342 (2020).

68. Marks, J. et al. Assorbiment tal-fosfat intestinali f'mudell ta 'insuffiċjenza renali kronika. Kidney Int. 72, 166–173 (2007).

69. Hill Gallant, KM & Vorland, CJ Assorbiment tal-fosfru intestinali: Sejbiet riċenti fir-riċerka translazzjonali u klinika. Curr. Opinja. Nephrol. Ipertens. 30, 404–410 (2021).

70. Herrmann, M. et al. It-tneħħija tal-partiċelli calciprotein li fihom fetuin-A hija medjata minn scavenger receptor-A. Ċirk. Res. 111, 575–584 (2012).

71. Sanitarium Health Food Company. UP&GO™ Togħma tas-Silġ tal-Vanilla. https://www.sanitarium.com.au/products/up-and-go/up-and-go/vanilla-ice-favor (2021).

72. Kunsill Nazzjonali tas-Saħħa u r-Riċerka Medika tal-Gvern Awstraljan. Valuri ta' Referenza tan-Nutrijent għall-Awstralja u New Zealand. https://www.nrv.gov.au/nutrients (2021).

Mark K.Tiong1,2, Michael MX Cai1 , Nigel D.Toussaint1,2, Sven‑JeanTan1,2, Andreas Pasch3,4,5 & Edward R. Smith1,2

1 Dipartiment tan-Nefroloġija, The Royal Melbourne Hospital, Grattan Street, Parkville, VIC 3052, l-Awstralja.

2 Dipartiment tal-Mediċina (RMH), Università ta' Melbourne, Parkville, l-Awstralja.

3 Calciscon AG, Biel, l-Isvizzera.

4 Lindenhofspital Bern, Bern, l-Isvizzera.

5 Dipartiment tal-Fiżjoloġija u l-Patofiżjoloġija, Johannes Kepler University, Linz, l-Awstrija.