Effett Ta' Glycosides Ta' Cistanche Fuq L-Espressjoni ta' Proteina Prekursur Mitokondrijali U Keratin Tip II Cytoskeletal 6A f'Mudell tal-Firien Ta' Dimenzja Vaskulari

Aktar informazzjoni jekk jogħġbok ikkuntattja:Joanna.jia@wecistanche.com

Astratt

Introduzzjoni

Vaskularidimenzjahija t-tieni l-aktar tip komuni ta’ dimenzja (Neltner et al., 2014; Sachdev et al., 2014; Tatlisumak et al., 2014; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Reijmer et al., 2016; ). Il-ħsara tal-memorja bla waqfien u irriversibbli li sseħħ f'pazjenti b'dimenzja vaskulari twassal għal deterjorament qawwi fil-kwalità tal-ħajja u tpoġġi piż ekonomiku kbir fuq il-familja tal-pazjent (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Chen et al., 2014; Chen et al. al., 2014; Brandenburg et al., 2016). Il-prevenzjoni u t-trattament tal-marda huma dejjem aktar importanti f'pajjiżi b'popolazzjonijiet li qed jixjieħu. Għalhekk, qed jiżdied l-interess tar-riċerka fit-tfittxija għal mediċini effettivi għat-trattament tad-dimenzja vaskulari.

Cistanchehija pjanta użata bħala nootropiku fit-teorija medika tradizzjonali Ċiniża (Chen et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015). Glycosides taCistanche(GC) huma preparazzjoni estratta minnCistanche. Hemm evidenza konsiderevoli li tappoġġja l-idea li GC jista’ jtejjeb ir-riġenerazzjoni assonali (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg et al., 2016; Gu et al., 2016). Bosta studji fuq l-annimali wrew li GC itejjeb il-funzjoni konjittiva (Procaccio et al., 2014; Talarowska et al., 2014; Fischer and Maier, 2015).

Preċedentement użajna okklużjoni tal-arterja karotide komuni bilaterali biex nistabbilixxu mudelli tal-firienvaskularidimenzja. F'dan il-mudell, it-tagħlim spazjali u l-memorja huma mtejba b'mod sinifikanti wara intervent b'GC (Chen et al., 2015). GC jista 'wkoll jirregola u jtejjebimmunitàiżda huwa magħruf l-aktar bħala toniku tan-nervituri u li jsaħħaħ il-memorja (Chen et al., 2014; Procaccio et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015; Brandenburg et al., 2016).

Madankollu, ftit studji investigaw il-mekkaniżmi molekulari sottostanti l-effetti tal-GC invaskularidimenzja. Hawnhekk, nużaw il-proteomika biex nesploraw ir-relazzjoni bejn il-proteini u d-dimenzja vaskulari, biex niddeterminaw il-mekkaniżmu sottostanti l-effett newroprotettiv tal-GC.

Cistanchedeserticola għandha ħafna effetti, ikklikkja hawn biex tkun taf aktar

Materjali u metodi

Annimali

Firien Wistar maskili adulti ta’ sitt ġimgħat ħielsa minn patoġeni speċifiċi (n=37), li jiżnu 230– 270 g, ġew ipprovduti miċ-Ċentru Sperimentali tal-Annimali, Provinċja ta’ Hubei, iċ-Ċina (numru tal-liċenzja: SYXK (E) { {7}}). L-esperiment segwa l-Linji Gwida Nazzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Laboratorju, u l-Linji Gwida tal-Awtur tal-Kunsens dwar l-Etika u l-Benessri tal-Annimali prodotti mill-Assoċjazzjoni Internazzjonali tal-Edituri Veterinarji. Il-manuskritt ġie ppreparat skont il-linji gwida tar-Riċerka tal-Annimali: Rappurtar ta’ Esperimenti In Vivo (ARRIVE).

Il-firien kienu miżmuma fi gruppi ta’ tlieta għal kull gaġġa f’25 grad b’ċiklu ta’ 12 -siegħa dawl/dlam u aċċess liberu għall-ikel u l-ilma. Il-firien (n=37) ġew assenjati b'mod każwali għal grupp ta' kontroll (n=10), grupp ta' dimenzja vaskulari (n=12), u grupp ta' dimenzja vaskulari flimkien ma' GC (trattat b'GC, n=15).

Stabbiliment ta 'mudelli tal-firien ta' dimenzja vaskulari

Taħt anestesija profonda b'10 fil-mija chloral hydrate, l-arterji karotidi komuni bilaterali tal-firien f'dimenzja vaskulari u gruppi ttrattati b'GC ġew separati bir-reqqa mit-tessuti tal-madwar, imbagħad imqabbda sewwa bl-użu ta' 10-0 ħajt tas-sutura fuq iż-żewġt itruf, u l-karotide komuni arterji ġew maqtugħa. Il-firien fil-grupp ta 'kontroll kienu soġġetti għall-istess proċedura kirurġika ħlief li l-arterji karotidi komuni kienu esposti iżda mhux ligated. Il-labirint tal-ilma Morris sar skont metodi deskritti qabel biex jiġi vverifikat jekk il-mudell tal-annimali kienx ġie stabbilit b'suċċess (Chen et al., 2015).

Trattament farmakoloġiku

Trab Cistanche(Ċertifikat Nru Z20050216, Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, iċ-Ċina) ġie mħallat ma 'ilma ultrapur u estratt minn TF-2000C Ultrasonicator (Tuofen, Shanghai, Ċina) (qawwa 100 fil-mija, 30 grad , 40 minuta). Il-konċentrazzjoni tal-GC kienet imkejla billi jiġu analizzati phenylethanoid glycosides. Wara l-ħsara, il-firien kollha fil-grupp ittrattat b'GC irċevew GC (10 mg/kg/jum, 1 mL, intraperitonealment, darba kuljum) għal 14-il jum konsekuttiv. Il-firien fil-gruppi ta' kontroll u ta' dimenzja vaskulari rċevew salina (1 mL, intraperitonealment).

Immunoistokimika

Wara 14-il jum ta 'amministrazzjoni GC (jew salina), seba' firien minn kull grupp ġew dekapitati u l-imħuħ estratt. Il-kortiċi ċerebrali tneħħew u t-tessut tal-hippocampal ġie mqassam bir-reqqa u maqtugħ f'sezzjonijiet ħoxnin 3-μm bl-użu ta 'mikrotomu tal-iffriżar. Sezzjonijiet ta 'tessut tal-hippocampal ġew iffissati b'4 fil-mija paraformaldehyde għal 30-60 minuta, maħsula b'PBS, u inkubati fi 3 fil-mija H2O2 għal 10 minuti segwiti minn serum tal-mogħoż għal 15-il minuta, kollha f'temperatura tal-kamra.

Sezzjonijiet imbagħad ġew inkubati f'antikorp primarju p-tau fosforilat kontra l-firien tal-fenek

(1:1,000 fil-PBS; Bioworld Technology, Inc., TX, USA) u antikorp primarju tal-fenek anti-far amyloid-beta (A ) (1:1,000; Bioworld Technology, Inc.) f'kaxxa mxarrba f'37 grad għal 2 –3 sigħat, qabel l-inkubazzjoni fl-antikorp sekondarju (mogħoż kontra l-ġurdien IgG; Bioworld Technology, Inc.) għal 15-il minuta f'temperatura ambjentali. Il-kampjuni ġew viżwalizzati bi 3,3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride (Dako, Tokyo, Ġappun). Immaġini nqabdu permezz ta' mikroskopju tad-dawl (Olympus, Tokyo, Ġappun) u pproċessati bl-użu ta' Photoshop (verżjoni 7.0; Adobe, San Jose, CA, USA).

Il-partiċelli immunopożittivi kienu kannella, għalhekk it-tbajja 'kannella fiċ-ċitoplasma ġiet magħżula bħala reazzjoni pożittiva, u s-semikwantifikazzjoni twettqet bl-użu ta' sistema ta 'analiżi tal-immaġni HMIAS-2000 (Qianpin Co., Wuhan, China). F'kull kampjun, ġew magħżula ħames oqsma tal-vista bl-addoċċ u ġew magħżula ħames ċelloli pożittivi f'kull viżjoni u l-valur medju tal-griż ġie mkejjel bħala sett ta 'valuri relattivi.

Cistanchejistgħu jtejbuimmunitàu jipprevjenukardjovaskulariuċerebrovaskularimard

Elettroforeżi tal-ġel bidimensjonali (2-DE)

Wara 14-il jum ta 'amministrazzjoni GC jew salina, tmien firien minn kull grupp ġew anestetizzati u decapitated, u t-tessuti tal-hippocampal ġew maħsuda malajr u immedjatament iffriżati fin-nitroġenu likwidu. It-tessuti kollha ġew omoġenizzati fin-nitroġenu likwidu bl-użu ta 'mehrież u lida u miġbura f'liżi buffer (7 M urea, 2 M thiourea, 2 fil-mija CHAPS, 20 mM Tris). Partiċelli li ma jinħallux tneħħew biċ-ċentrifugazzjoni fi 13,000 × g għal 20 minuta f'4 gradi. L-aċidu nuklejku kkontaminat ġie mfixkel b'oxxillazzjoni sonika intermittenti għal 5 minuti. Il-kampjuni ġew ċentrifugati mill-ġdid taħt l-istess kundizzjonijiet u s-supernatanti ġew miġbura. Il-konċentrazzjoni tal-proteina ġiet imkejla bl-użu tal-assaġġ Bradford (Beyotime Inc., iċ-Ċina) u l-kampjuni ġew maħżuna f'-80 grad sakemm jintużaw.

Biex tinvestiga l-profil tal-espressjoni tal-proteini fl-ippokampus, 2-DE sar skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, USA). Is-soluzzjoni tal-proteina (120 ug/kampjun) ġiet aġġustata b'buffer ta 'riidratazzjoni għal volum finali ta' 350 μL. L-iffukar iżoelettriku sar bl-użu ta 'strixxi IPG (pH 4-7, daqs 22 cm) fuq sistemi Ettan IPG jew II (kollha minn GE Ettan IPGphor3, GE Healthcare). Wara, l-istrixxi ġew ekwilibrati għal 15-il minuta.

{{0}}DE twettqet bl-użu ta' 12.5 fil-mija ta' ġels tal-polyacrylamide tas-sodium dodecyl sulfate (SDS) (24 cm × 19.5 cm × 1.0 mm) b'0.5 fil-mija ta' kolla tas-siġillar tal-agarose f'elettroforeżi Ettan DALTSix sistema (GE, Ettan DALTSix, GE Healthcare).

L-elettroforeżi twettqet f'2 W għal 45 minuta, segwita minn separazzjoni f'17 W għal 4 sigħat sakemm il-blu tal-bromophenol kien kważi laħaq il-qiegħ tal-ġel 2-DE.

Il-ġellijiet ġew imtebba' bl-użu ta' nitrat tal-fidda (Damao Chemical Reagent Factory, Tianjin, iċ-Ċina) u l-immaġini nqabdu fuq 2-sistema ta' skannjar tal-immaġni DE (VT, USA).

Image Master 2D Platinum 5.0 Softwer (GE, Inc., PA, USA) intuża biex tiskennja u tanalizza l-immaġni 2-DE.

informazzjoni nkisbet permezz ta' spettrometru tal-massa 4700 MALDI TOF/TOF (GE, Inc.).

Spettrometrija tal-massa tal-ħin tat-titjira ta' desorbiment/jonizzazzjoni bil-lejżer assistita minn matriċi

Għal marki tas-swaba 'massa peptide u analiżi sussegwenti, ġellijiet ġew imqatta' u soġġetti għal protokoll fil-ġel immodifikat kemmxejn kif deskritt fl-istruzzjonijiet tal-manifattur. Kien hemm metanol (Fisher M/4056/17), aċetonitrile (Fisher A/0626/17), tripsina (Promega V5280), soluzzjoni ta’ trypsin (Promega V530), bikarbonat tal-ammonju (Sigma A6141), C-18 ZipTip (Millipore ZTC18M096), u aċidu trifluoroacetic (GE HealthCare).

Fil-qosor, it-tikek tal-proteini ġew imqabbda b'soluzzjoni ta 'destaining (30 mM K3Fe(CN)6:100 mM NaS2O3=1:1) u deidrati b'100 mm bikarbonat tal-ammonju u aċetonitrile, imnaqqsa bi trichloromethyl phosphate għal 20 minuta f'temperatura tal-kamra, u mbagħad alkylated fl-aċidu jodoacetic għal 30 minuta fid-dlam. Il-ġell ġie inkubat f'50 μL ta 'soluzzjoni ta' trypsin modifikata 12 ng/μL f'25 mM bikarbonat tal-ammonju, pH 8.6, f'37 grad matul il-lejl. Il-peptidi ġew estratti mill-plagg tal-ġel b'1 fil-mija aċidu formiku/2 fil-mija aċetonitrile u kkonċentrati bl-użu ta' C-18 Zip-Tips. Wara, il-kampjuni ġew ippreparati bl-użu ta' mira Prespotted AnchorChip (PAC96) b'matriċi ta' aċidu alfa-cyano-4-hydroxycinnamic għal 96 spot ta' kampjun u 24 spot ta' kalibrazzjoni. L-informazzjoni dwar il-peptidi tal-ispettru tal-massa nkisbet bl-użu ta 'spettrometru tal-massa 4700 MALDI TOF/TOF. Id-dejta li rriżultat ġiet analizzata bl-użu ta 'GPS Explorer (Applied Biosystems Inc., NY, USA), li invokat tfittxija ta' database MASCOT (Matrix Science, Londra, UK) bl-użu ta 'subsett tal-ġurdien tad-database ta' Informazzjoni taċ-Ċentru Nazzjonali għall-Bijoteknoloġija.

Cistanchejista 'jkun antibatteriku u jipprevjenivaskularidimenzja

Assaġġ Western blot

L-ippokampus ġie ppreparat u l-konċentrazzjoni tal-proteina ġiet imkejla kif deskritt hawn fuq. Kampjuni ta 'proteini ġew mgħobbija fuq ġel tal-polyacrylamide SDS, elettroforesizzati, u ttrasferiti għal membrana ta' polyvinylidene difluoride. Il-membrana ġiet maħsula f'salina b'Tris-buffered u Tween 20, imblukkata f'10 fil-mija ħalib mingħajr xaħam, u 0.05 fil-mija Tween f'salina b'buffer bil-fosfat. Il-membrani ġew inkubati matul il-lejl f'4 gradi b'antikorp poliklonali tal-proteina prekursur anti-mitokondrijali tal-fenek (1:2,000; Proteintech Inc., Chicago, IL, USA) u ċitoskeletali tat-tip II tal-fenek kontra l-keratin 6A (KRT6A) antikorp poliklonali (1:1,000; Proteintech Inc.) f'10 fil-mija ħalib bla xaħam. L-antikorp sekondarju, il-fenek tal-mogħoż konjugat bil-perossidażi taż-żwiemel (Google Biotechnology Inc., Wuhan, Provinċja ta’ Hubei, iċ-Ċina) ġie dilwit (1:2,000) f’10 fil-mija ħalib bla xaħam u inkubat f’25 grad għal siegħa. Antikorp monoklonali tal-ġrieden kontra l-firien -actin (1:2,000; Google Biotechnology Inc.) intuża bħala referenza interna. Intużaw sistema ta 'skannjar tal-western blot (V300; EPSON, Nagano-ken, Ġappun), u AlphaEaseFC Adobe PhotoShop (Alpha Innotech, CA, USA) biex jiddeterminaw il-proteina tal-prekursur mitokondrijali u l-livelli ta' espressjoni KRT6A espressi bħala densità ottika integrata normalizzata għal -actin.

Analiżi statistika

Id-dejta kwantitattiva ġiet espressa bħala l-medja ± SD. Is-softwer ImageMaster 2D Platinum 5.0 (GE, Inc.) intuża biex tiskennja u tanalizza l-informazzjoni 2-DE. Twettqet analiżi f'żewġ direzzjonijiet tal-varjanza bl-użu ta' GraphPad Prism 6.0 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA). P < 0.05="" tqieset="" statistikament="">

Riżultati

Effetti tal-GC fuq l-immunoreattività p-tau u A fl-ippokampus tal-mudelli tal-firien tad-dimenzja vaskulari

L-immunoistokimika wriet li l-espressjoni p-tau u A kienet akbar wara 14-il jum ta 'trattament b'GC milli fil-grupp ta' kontroll. Madankollu, l-espressjoni ta 'dawn il-proteini fil-grupp ittrattat bil-GC kienet sinifikament aktar baxxa minn dik fil-grupp tad-dimenzja vaskulari (P <0.05; figura="">

GC irregolat espressjoni ta 'proteina prekursur mitokondrijali u KRT6A fl-ippokampus ta' mudelli tal-firien ta 'dimenzja vaskulari

L-espressjoni taż-żewġ proteini kienet differenti b'mod sinifikanti fil-grupp ittrattat bil-GC milli fil-grupp tad-dimenzja vaskulari: proteina prekursur mitokondrijali (magħrufa wkoll bħala proteina ta 'xokk tas-sħana (HSP) 75 kDa) kienet regolata 'l fuq, u KRT6A kien regolat 'l isfel (Figuri Figuri22, 33). ). L-informazzjoni dwar il-proteini hija elenkata fit-Tabella 1.

Diskussjoni

Id-dimenzja vaskulari hija sindromu kkaratterizzat minn indebolimenti fil-memorja, l-imġieba u l-konjizzjoni, u hija kkawżata prinċipalment minn mard ċerebrovaskulari (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Oliveira et al., 2014; Szalárdy et al., 2015). Il-patoloġija komuni għat-tipi kollha ta’ dimenzja, u responsabbli għall-progressjoni tagħha, hija n-newrodeġenerazzjoni (Foster et al., 2014; Fischer and Maier, 2015; Kalaria et al., 2015;

Cistanchejistgħu jtejbu l-immunità ujipprevjenuvaskularidimenzja

Chen et al., 2016; Pérez -Hernández et al., 2016). Ħafna estratti tal-pjanti għandhom proprjetajiet terapewtiċi. Il-bijoattività ta 'dawn il-komposti kontra n-newrodeġenerazzjoni hija prinċipalment dovuta għall-effetti antiossidanti u anti-amyloidogenic tagħhom (Fischer and Maier, 2015; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016).

Cistanchehija ħaxixa Ċiniża li tintuża bħala nootropiku fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Riċerka emerġenti tindika danCistanchehuwa ta 'benefiċċju fl-amnesja, speċifikament fl-inibizzjoni tal-progressjoni tat-telf tal-memorja (Procaccio et al., 2014; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016). Hemm evidenza konsiderevoli li GC jista 'jippromwovi r-riġenerazzjoni assonali u jaġixxi bħala modulatur tat-tkabbir tan-nervituri (Talarowska et al., 2014; Gu et al., 2016; Xu et al., 2016). Fix-xogħol preċedenti tagħna bl-użu tal-labirint tal-ilma Morris, sibna li l-latency tal-ħarba tal-mudelli tal-firien ta 'dimenzja vaskulari naqset wara t-trattament b'GC, li jindika li GC itejjeb il-kapaċità tat-tagħlim spazjali. Għalkemm il-GC intuża b'mod estensiv għall-effett newroprotettiv tiegħu (Chen et al., 2015), il-mekkaniżmu sottostanti dan l-effett għadu mhux ċar.

Huwa magħruf sew li l-peptidi A u p-tau huma espressi ħafna fi plakek senili u tangles newrofibrillari. Il-proteini A u tau għandhom rwoli ewlenin fil-morfoġenesi tan-newroni, iżda f'ċerti sitwazzjonijiet patoloġiċi, jiġġeneraw aggregati aberranti li huma newrotossiċi (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Wang et al., 2015; Reijmer et al., 2016). Ir-riżultati preżenti tal-immunoistokimika jindikaw li l-espressjoni tal-proteina p-tau u A f'mudelli tal-firien ittrattati b'GC ta 'dimenzja vaskulari kienet akbar b'mod sinifikanti minn dik fil-firien ta' kontroll iżda inqas minn dik fil-firien mudell mhux ittrattati. Għalhekk, l-effett newroprotettiv ta 'GC jista' jseħħ billi titnaqqas it-tossiċità ta 'A u p-tau.

L-istudju proteomiku tagħna fl-ippokampus tal-firien wera differenzi kbar fl-espressjoni tal-proteina prekursur mitokondrijali, keratin, u KRT6A. F'termini ta 'funzjoni, aħna nispekulaw li l-effett newroprotettiv ta' GC jista 'jkun assoċjat mar-rimudellar tal-istruttura tas-sinsla dendritika.

Il-proteina prekursur mitokondrijali tappartjeni għall-familja HSP70 (Rao et al., 2014; Gutiérrez -Aguilar and Baines, 2015; McGeer and McGeer, 2015). HSP75 huwa involut fl-attivazzjoni u l-maturazzjoni tal-chaperone molekulari u jżomm l-istabbiltà u l-funzjoni normali taċ-ċelloli (Booth et al., 2014, 2016; Tavallai et al., 2015).

Il-proteina prekursur mitokondrijali hija maħsuba li għandha rwol importanti fit-trasduzzjoni ta 'xi mogħdijiet ta' sinjalazzjoni (Reid et al., 2014; Booth et al., 2015a, b). Studji reċenti wrew li l-familja HSP90 tirregola l-ambjent operattiv tat-tiwi tal-proteini mitokondrijali (An et al., 2014; Liu and Landgraf, 2015; Roberts et al., 2015; Stary and Giffard, 2015). HSP75 huwa lokalizzat fil-mitokondrija u jinibixxi l-ġenerazzjoni ta 'radikali ħielsa mill-ossiġnu (Radu et al., 2014; Holloway et al., 2016). Ir-riżultati tagħna juru li l-espressjoni ta 'HSP75 fil-grupp ittrattat b'GC żdiedet 2.54-darbiet, li jissuġġerixxi li GC għandu rwol antiossidant, itejjeb il-bilanċ ossidattiv ċellulari, u jdewwem l-apoptożi. Din is-sejba tipprovdi ħjiel interessanti dwar l-interazzjonijiet tal-proteina chaperone mitokondrijali ma 'proteini oħra.

Proteina oħra espressa b'mod differenti kienet KRT6A. Il-keratin, imsejħa wkoll cytokeratins, huma proteini tal-filament intermedji li joħolqu xibka densa li ma tinħallx permezz taċ-ċitoplasma, li tagħti appoġġ strutturali liċ-ċellula epiteljali (Haricharan et al., 2014; Rorke et al., 2015; Szymanski et al., 2015) . Madankollu, iċ-ċitokeratini għandhom ukoll rwol attiv f'diversi proċessi ta 'sopravivenza ċellulari (proliferazzjoni u apoptożi) (Zhu et al., 2013; Schwingshackl et al., 2015; Popov and Komianos, 2016). Dawn il-proteini jistgħu jgħaddu minn fosforilazzjoni u huma wkoll parti mill-kuntatt bejn iċ-ċellula epiteljali u l-mikroambjent tagħha (Lessard et al., 2013; Gil Lorenzo et al., 2014; Zhou et al., 2014; Chakrabarti et al., 2015) . CK6a hija l-isoforma dominanti fil-glandola mammarja (Bramanti et al., 2015a, b, 2016) u hija regolata 'l fuq fil-fejqan tat-truf tal-feriti tal-ġilda, li jindika li ċ-ċitokeratina hija involuta fil-proliferazzjoni u l-migrazzjoni ċellulari. Madankollu, aħna l-ewwel li nuru downregulation ta 'KRT6A fl-hippocampus; L-espressjoni ta' KRT6A naqset 1.58-darbiet fil-grupp ittrattat b'GC meta mqabbel mal-grupp tad-dimenzja vaskulari.

Għalhekk, l-effett newroprotettiv ta 'GC jista' jkun assoċjat ma 'inibizzjoni ta' iperplażja newrogliali waqt iskemija ċerebrovaskulari.

Flimkien, ir-riżultati tal-istudju tagħna jissuġġerixxu li GC jeżerċita l-effetti tiegħu ta’ tagħlim u ta’ promozzjoni tal-memorja f’mudelli ta’ firien ta’ dimenzja vaskulari billi jnaqqas l-espressjoni ta’ A u p-tau, u b’hekk idgħajjef l-akkumulazzjoni ta’ dawn iż-żewġ proteini tossiċi u, min-naħa tiegħu, inaqqas. tossiċità newronali. Barra minn hekk, GC jista 'jirregola l-espressjoni ta' proteina prekursur mitokondrijali u KRT6A, li huma assoċjati mal-morfoġenesi taċ-ċitoskeletru sinaptiku u l-metaboliżmu tal-enerġija mitokondrijali. Għalhekk, id-dejta tagħna tipprovdi ħarsa ġdida dwar il-mekkaniżmi sottostanti tal-GCs, u tenfasizza l-possibbiltà li l-GCs ikollhom miri multipli, li toffri għażla terapewtika ġdida promettenti għat-trattament tad-dimenzja vaskulari.

Noti f'qiegħ il-paġna

Finanzjament:Dan l-istudju kien appoġġjat mill-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina, Nru 30960520; il-Fondazzjoni tax-Xjenza Naturali tar-Reġjun Awtonomu ta 'Inner Mongolia taċ-Ċina, Nru 2016MS0837.

Kunflitti ta' interess: Xejn iddikjarat.

Etika tar-riċerka:Il-protokoll tal-istudju ġie approvat mill-Kumitat tal-Etika tal-Annimali tal-Ewwel Sptar ta 'Wuhan. Il-proċedura sperimentali segwiet il-Gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Laboratorju (Pubblikazzjonijiet NIH Nru 8023, riveduti 1978), u "Linji Gwida tal-Awtur tal-Kunsens dwar l-Etika u l-Benessri tal-Annimali" prodotti mill-Assoċjazzjoni Internazzjonali għall-Edituri Veterinarji (IAVE). ). Saru l-isforzi kollha biex jimminimizzaw in-numru u t-tbatija tal-annimali użati fl-esperimenti. Id-dokument ġie ppreparat skont ir-"Riċerka dwar l-Annimali: Rappurtar ta' Linji Gwida ta' Esperimenti In Vivo" (Linji Gwida ARRIVE).

Ftehim tal-kontributur: Dikjarazzjoni tal-"Ftehim ta' Pubblikazzjoni" ġiet iffirmata minn awtur awtorizzat f'isem l-awturi kollha qabel il-pubblikazzjoni.

Kontroll tal-plaġjariżmu: Din il-karta ġiet iċċekkjata darbtejn bis-software iThenticate għall-iċċekkjar tad-duplikazzjoni.

Reviżjoni mill-pari:Twettaq proċess ta' reviżjoni bejn il-pari double-blind u strett biex tiġi żgurata l-integrità, il-kwalità u s-sinifikat ta' dan id-dokument.

Editjat minn Slone-Murphy J, Franċiż B, Yu J, Li CH, Qiu Y, Song LP, Zhao M

Referenzi

1. J, Haile WB, Wu F, Torre E, Yepes M. Attivatur tal-plażminoġen tat-tip tat-tessuti jimmedja l-akkoppjar newrogliali fis-sistema nervuża ċentrali. Newroxjenza. 2014;257:41–48.

2. Barker R, Ashby EL, Wellington D, Barrow VM, Palmer JC, Kehoe PG, Esiri MM, Love S. Pathophysiology tal-perfużjoni tal-materja bajda fil-marda ta 'Alzheimer u dimenzja vaskulari. Moħħ. 2014;137:1524–1532.

3. Booth L, Roberts JL, Cruickshanks N, Grant S, Poklepovic A, Dent P. Regolament tat-tossiċità OSU-03012 minn proteini ta 'stress ER u drogi li jinduċu stress ER. Mol Cancer Ther. 2014;13:2384–2398.

4. Booth L, Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Chuckalovcak J, Carter J, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012, u t-trattament ta 'Viagra jinibixxi l-attività ta' proteini chaperone multipli u jfixkel il-barriera tad-demm-moħħ : implikazzjonijiet għat-terapiji kontra l-kanċer. J Cell Physiol. 2015a;230:1982–1998.

5. Booth L, Roberts JL, Cash DR, Tavallai S, Jean S, Fidanza A, Cruz-Luna T, Siembiba P, Cycon KA, Cornelissen CN, Dent P. GRP78/BiP/HSPA5/Dna K hija mira terapewtika universali għall-mard tal-bniedem. J Cell Physiol. 2015b;230:1661– 1676.

6. Booth L, Shuch B, Albers T, Roberts JL, Tavallai M, Proniuk S, Zukowski A, Wang D, Chen CS, Bottaro D, Ecroyd H, Lebedyeva IO, Dent P. inibituri multi-kinase jistgħu jassoċjaw ma 'xokk tas-sħana proteini permezz tan-NH2-terminals tagħhom li bihom jrażżnu l-funzjoni ta' chaperone. Oncotarget. 2016;7:12975–12996.

7. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Raciti G, Viola M, Avola R. Modulazzjoni ta 'kinase extraċellulari relatata mas-sinjali, cyclin D1, proteina aċiduża fibrillari glial, u espressjoni ta' vimentin f'kulturi ta 'astroċiti trattati minn qabel b'estradiol trattati b'

kompetenza u fatturi tat-tkabbir tal-progressjoni. J Neurosci Res. 2015a;93:1378– 1387.

8. Bramanti V, Grasso S, Tomassoni D, Traini E, Raciti G, Viola M, Li Volti G, Campisi A, Amenta F, Avola R. Effett tal-fatturi tat-tkabbir u l-ormoni sterojdi fuq l-espressjoni heme oxygenase u cyclin D1 fl-astroglial primarju kulturi taċ-ċelluli. J Neurosci Res. 2015b;93:521–529.

9. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Pappa R, Brundo MV, Tomassoni D, Viola M, Amenta F, Avola R. Molekuli newroattivi u fatturi ta 'tkabbir jimmodulaw l-espressjoni tal-proteina ċitoskeletali waqt il-proliferazzjoni taċ-ċelluli astrogliali u d-divrenzjar fil-kultura. J Neurosci Res. 2016;94:90–98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. Mikroglia residenti aktar milli makrofaġi periferali jippromwovu l-vaskularizzazzjoni fit-tumuri tal-moħħ u huma sors ta 'fatturi pro-anġjoġeniċi alternattivi. Acta Neuropathol. 2016;131:365–378.

11. Burke MJ, Nelson L, Slade JY, Oakley AE, Khundakar AA, Kalaria RN. Morfometrija tal-mikrovaskulatura tal-ippokamp f'dimenzja ta' wara l-puplesija u relatata mal-età. Neuropathol Appl Neurobiol. 2014;40:284–295.

12. Chakrabarti KR, Whipple RA, Boggs AE, Hessler LK, Bhandary L, Vitolo MI, Thompson K, Martin SS. Ir-regolazzjoni farmakoloġika tal-AMPK fil-kanċer tas-sider taffettwa l-proprjetajiet ċitoskeletali involuti fil-formazzjoni u r-ri-

sekwestru. Oncotarget. 2015;6:36292–36307.

13. Chen A, Akinyemi RO, Hase Y, Firbank MJ, Ndung'u MN, Foster V, Craggs LJ, Washida K, Okamoto Y, Thomas AJ, Polvikoski TM, Allan LM, Oakley AE, O'Brien JT, Horsburgh K , Ihara M, Kalaria RN. Iperintensitajiet tal-materja bajda ta 'quddiem, klasmatodendrosis, u anormalitajiet neovaskulari fit-tixjiħ u d-dimenzja ta' wara l-puplesija. Moħħ. 2016;139:242–258.

14. Chen J, Zhou SN, Zhang YM, Feng YL, Wang S. Glycosides ta 'Cistanche itejbu t-tagħlim u l-memorja fil-mudell tal-firien tad-dimenzja vaskulari. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015;19:1234–1240.

15. Chen S, Yin ZJ, Jiang C, Ma ZQ, Fu Q, Qu R, Ma SP. Asiaticoside jnaqqas l-indeboliment tal-memorja indott minn iskemija-riperfużjoni ċerebrali temporanja fil-ġrieden permezz ta' mekkaniżmu anti-infjammatorju. Pharmacol Biochem Behav. 2014;122:7–

16. Fischer R, Maier O. Interrelazzjoni ta 'stress ossidattiv u infjammazzjoni f'mard newrodeġenerattiv: rwol ta' TNF. Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:610813.

17. Foster V, Oakley AE, Slade JY, Hall R, Polvikoski TM, Burke M, Thomas AJ, Khundakar A, Allan LM, Kalaria RN. Newroni piramidali tal-kortiċi prefrontali f'dimenzja ta 'wara l-puplesija, vaskulari u oħrajn relatati mat-tixjiħ. Moħħ. 2014;137:2509– 2521.

18. Gil Lorenzo AF, Bocanegra V, Benardon ME, Cacciamani V, Valles PG. Regolament Hsp70 fuq Nox4/p22phox u l-integrità ċitoskeletali bħala effett ta 'losartan fiċ-ċelloli tal-muskoli lixxi vaskulari. Ċelluli Stress Chaperones. 2014;19:115–134.

19. Gu C, Yang X, Huang L. Cistanches herba: reviżjoni newrofarmakoloġija. Front Pharmacol. 2016;7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. Mekkaniżmi strutturali tal-kontroll dipendenti fuq cyclophilin D tal-pori tat-tranżizzjoni tal-permeabilità mitokondrijali. Biochim Biophys Acta. 2015;1850:2041–2047.

21. Haricharan S, Hein SM, Dong J, Toneff MJ, Aina OH, Rao PH, Cardiff RD, Li Y. Kontribuzzjoni ta 'ċellula alveolari ta' oriġini għall-fenotip malinn ta 'grad għoli ta' kanċer tas-sider assoċjat mat-tqala. Onkoġenu. 2014;33:5729–5739. [

22. Holloway KR, Sinha VC, Bu W, Toneff M, Dong J, Peng Y, Li Y. L-immirar ta 'onkoġeni f'subsett definit ta' ċelluli mammarji juri li l-mutazzjoni onkoġenika tal-bidu tiddefinixxi l-fenotip tat-tumur li jirriżulta. Int J Biol

Sci. 2016;12:381–388.

23. Kalaria RN, Ferrer I, Love S. Mard vaskulari, ipoksja, u kundizzjonijiet relatati. Fi: Love S, Perry A, Ironside J, Budka H, ​​edituri. Newropatoloġija ta' Greenfield. Londra: CRC; 2015.

24. Lessard JC, Pina-Paz S, Rotty JD, Hickerson RP, Kaspar RL, Balmain A, Coulombe PA. Keratin 16 jirregola l-immunità intrinsika bi tweġiba għall-ksur tal-barriera epidermali. Proc Natl Acad Sci US A. 2013;110:19537–19542.

25. Liu W, Landgraf R. Serina 13 fosforilata u mhux fosforilata ta' CDC37 tistabbilizza interazzjonijiet distinti bejn il-klijent tagħha u d-dominji li jorbtu HSP90. Bijokimika. 2015;54:1493–1504.

26. Love S, Chalmers K, Ince P, Esiri M, Attems J, Kalaria R, Jellinger K, Yamada M, McCarron M, Minett T, Matthews F, Greenberg S, Mann D, Kehoe PG. Erratum: Żvilupp, valutazzjoni, validazzjoni, u implimentazzjoni ta 'protokoll ta' kunsens għall-valutazzjoni ta 'anġjopatija amilojde ċerebrali fit-tessut tal-moħħ post-mortem. Am J Neurodegener Dis. 2015;4:49.

27. McGeer PL, McGeer EG. Timmira għall-mikroglia għat-trattament tal-marda ta 'Alzheimer. Espert Opinjoni Ther Miri. 2015;19:497–506.

28. Neltner JH, Abner EL, Baker S, Schmitt FA, Kryscio RJ, Jicha GA, Smith CD, Hammack E, Kukull WA, Brenowitz WD, Van Eldik LJ, Nelson PT. L-arteriolosklerożi li taffettwa reġjuni multipli tal-moħħ hija marbuta mal-isklerożi tal-hippocampal tat-tixjiħ. Moħħ. 2014;137:255–267.

29. Oliveira NR, Marques SO, Luciano TF, Pauli JR, Moura LP, Caperuto E, Pieri BL, Engelmann J, Scaini G, Streck EL, Lira FS, Pinho RA, Ropelle ER, Silva AS, De Souza CT. It-taħriġ tat-treadmill iżid il-livelli tal-proteina alfa SIRT-1 u PGC-1 u l-fosforilazzjoni tal-AMPK fil-quadriceps tal-firien ta' età medja b'mod dipendenti fuq l-intensità. Medjaturi Inflamm. 2014;2014:987017. [Artiklu bla PMC]

30. Pérez -Hernández J, Zaldívar -Machorro VJ, Villanueva-Porras D, Vega-Ávila E, Chavarría A. Alternattiva potenzjali kontra mard newrodeġenerattiv: fitodrogi. Oxid Med Cell Longev. 2016;2016:8378613. [PMC b'xejn

artiklu] [PubMed] [Google Scholar]

31. Popov K, Komianos J. MEDIAN: simulazzjonijiet mekkanikimiċi ta 'kontrazzjoni u allinjament tal-polarità f'netwerks ta' actomyosin. Kompjuter PLoS

Biol. 2016;12:e1004877. [Artiklu bla PMC] [PubMed] [Google Scholar]

32. Procaccio V, Bris C, Chao de la Barca JM, Oca F, Chevallier A, Amati-Bonneau P, Bonneau D, Reynier P. Perspettivi ta 'newroprotezzjoni bbażata fuq id-droga mmirata lejn il-mitokondrija. Rev Neurol (Pariġi) 2014;170:390–400. [PubMed] [Google Scholar]

33. Radu M, Semenova G, Kosoff R, Chernoff J. PAK sinjali matul l-iżvilupp u l-progressjoni tal-kanċer. Nat Rev Cancer. 2014;14:13–25. [Artiklu bla PMC] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK, Carlson EA, Yan SS. Il-pori tat-tranżizzjoni tal-permeabilità mitokondrijali hija mira potenzjali tad-droga għan-newrodeġenerazzjoni. Biochim Biophys Acta. 2014;1842:1267– 1272. [Artiklu PMC ħieles] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP, Shurtleff AC, Costantino JA, Tritsch SR, Retterer C, Spurgers KB, Bavari S. HSPA5 huwa fattur ospitanti essenzjali għall-infezzjoni tal-virus Ebola. Res antivirali. 2014;109:171–174. [PubMed] [Google Scholar]

36. Reijmer YD, van Veluw SJ, Greenberg SM. Korriment iskemiku fil-moħħ f'anġjopatija amilojde ċerebrali. J Cereb Blood Flow Metab. 2016;36:40–54. [Artiklu bla PMC] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K huwa mira għal Nexavar/ stivarga/votrient fit-trattament ta' tumuri malinni umani, infezzjonijiet virali, u mard batterjali. J Cell Physiol. 2015;230:2552–2578. [Artiklu bla PMC] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA, Adhikary G, Young CA, Ross RH, Elias PM, Crumrine D, Meyer J, Blumenberg M, Eckert RL. Bidliet strutturali u bijokimiċi sottostanti fenotip bħal keratoderma fil-ġrieden nieqsa mill-funzjoni tal-fattur ta 'traskrizzjoni AP1 suprabażali. Ċellula Mewt Dis. 2015;6:e1647. [Artiklu bla PMC] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P, Kalaria R, O'Brien J, Skoog I, Alladi S, Black SE, Blacker D, Blazer DG, Chen C, Chui H, Ganguli M, Jellinger K, Jeste DV, Pasquier F, Paulsen J, Prins N, Rockwood K, Roman G, Scheltens P. International Society for Vascular Behavioral and Congnitive Disorders (2014) Kriterji dijanjostiċi għal disturbi konjittivi vaskulari: dikjarazzjoni VASCOG. Alzheimer Dis Assoc Disord. 28:206–218.

40. Sadigh-Eteghad S, Sabermarouf B, Majdi A, Talebi M, Farhoudi M, Mahmoudi J. Amyloid-beta: fattur kruċjali fil-marda ta’ Alzheimer. Med Princ Pract. 2015;24:1–10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. TREK-1 jirregola s-sekrezzjoni taċ-ċitokini minn ċelloli epiteljali alveolari tal-bniedem kultivati ​​indipendentement mir-riarranġamenti taċ-ċitoskeletri. PLoS Wieħed. 2015;10:e0126781.

42. Sinclair LI, Tayler HM, Love S. Livelli ta 'proteina sinaptika mibdula fid-dimenzja vaskulari. Neuropathol Appl Neurobiol. 2015;41:533–543.

43. Stary CM, Giffard RG. Avvanzi f'approċċi mmirati lejn l-astroċiti għat-terapija tal-puplesija: rwol emerġenti għall-mitokondrija u l-mikroRNAs. Neurochem Res. 2015;40:301–307.

44. Szalárdy L, Z ádori D, Klivényi P, Toldi J, Vécsei L. Disturbi tat-trasport tal-elettroni u newrodeġenerazzjoni: mill-Kunċett ta 'Albert Szent-Gyorgyi (Szeged) sa approċċi ġodda biex tingħata spinta lill-bijoenerġija mitokondrijali. Ossidu Med Cell

Longev. 2015;2015:498401.

45. Szymanski WG, Zauber H, Erban A, Gorka M, Wu XN, Schulze WX. Komponenti ċitoskeletali jiddefinixxu l-lokazzjoni tal-proteini għal mikrodominji tal-membrana. Proteomika taċ-Ċellola Mol. 2015;14:2493–2509.

46. ​​Talarowska M, Bobinska K, Zajaczkowska M, Su KP, Maes M, Galecki P. Impatt ta 'stress ossidattiv / nitrosattiv u infjammazzjoni fuq funzjonijiet konjittivi f'pazjenti b'disturbi depressivi rikorrenti. Med Sci Monit. 2014;20:110–115.

47. Tatlisumak T, Putaala J, Debette S. Kawżi inqas komuni ta 'puplesija: dijanjosi u ġestjoni. Fi: Norrving B, editur. Ktieb ta' Test ta' Oxford ta' Puplesija u Mard Ċerebrovaskulari. Oxford: Oxford University Press; 2014. pp. 153–162. [Google Scholar]

48. Tavallai M, Hamed HA, Roberts JL, Cruickshanks N, Chuckalovcak J, Poklepovic A, Booth L, Dent P. Nexavar/Stivarga u viagra jinteraġixxu biex joqtlu ċ-ċelloli tat-tumur. J Cell Physiol. 2015;230:2281–2298. [Artiklu bla PMC] [PubMed] [Google Scholar]

49. Thomas T, Miners S, Love S. Valutazzjoni post-mortem ta 'ipoperfużjoni tal-kortiċi ċerebrali fil-marda ta' Alzheimer u dimenzja vaskulari. Moħħ. 2015;138:1059– 1069. [PubMed] [Google Scholar]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. Espressjoni żejda ta 'Hsp75 mitokondrijali tipproteġi ċelloli staminali newrali kontra newrotossiċità indotta minn fattur solubbli derivat mill-mikroglia billi tirregola l-ftuħ tal-pori ta' transizzjoni tal-permeabilità mitokondrijali in vitro. Int J Mol Med. 2015;36:1487–1496.

51. Xu Q, Fan W, Ye SF, Cong YB, Qin W, Chen SY, Cai J. Cistanche tubulosa Jipproteġi n-Newroni Dopaminerġiċi permezz tar-Regolamentazzjoni ta 'Apoptosis u Fattur Neurotrofiku Derivat miċ-Ċellola Glial: in vivo u in vitro. Front Aging

Newrosci. 2016;8:295.

52. Inti SP, Zhao J, Ma L, Tudimat M, Zhang SL, Liu T. Effetti preventivi ta 'phenylethanol glycosides minn Cistanche tubulosa fuq fibrożi epatika indotta mill-albumina tas-serum bovin fil-firien. Daru. 2015;23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. Ripressjoni tan-neovaskularizzazzjoni korojdali permezz ta 'mogħdijiet taċ-ċitoskeletru ta' l-actin minn microRNA-24. Mol Ther. 2014;22:378–389.

54. Zhu M, Lu C, Li W. Espożizzjoni temporanja għal echinacoside hija biżżejjed biex tattiva s-sinjalar Trk u tipproteġi ċ-ċelloli newronali minn rotenone. J Neurochem. 2013;124:571–580.