Cistanche:Echinacoside Jrażżan it-Tkabbir taċ-Ċelloli tal-Adenokarċinoma tal-Frexa Billi Jinduċi Apoptożi Permezz tal-Pathway tal-Protein Kinase attivat mill-Mitogen

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

WEI WANG, JINBIN LUO, YINGHUI LIANG u XINFENG LI

Astratt.

L-applikazzjoni klinika ta 'prodotti naturali derivati ​​mill-mediċina tradizzjonali Ċiniża kisbet attenzjoni fil-kimoterapewtiċi tal-kanċer.Echinacoside(ECH), wieħed mill-phenylethanoids, iżolati miż-zkuk ta 'Cistanche(mediċina tal-ħxejjex Ċiniża) għandha effetti protettivi tat-tessuti u anti-apoptotiċi fuq is-sistema nervuża ċentrali. Madankollu, jibqa' fil-biċċa l-kbira elużiv jekk l-ECH jippossjedix attività ta' trażżin tat-tumur. Fl-istudju preżenti, intwera li l-ECH jista 'jinibixxi b'mod notevoli l-proliferazzjoni ta' ċelluli tal-adenokarċinoma tal-frixa billi jinduċi l-produzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv u t-tfixkil tal-potenzjal tal-membrana mitokondrijali u b'hekk tiskatta l-apoptożi. Barra minn hekk, kien iċċarat li ECH(Echinacoside)trażżan it-tkabbir taċ-ċelluli tat-tumur permezz tal-modulazzjoni tal-attività MAPK. Bħala konklużjoni, dan l-istudju jiżvela funzjoni ġdida tal-ECH(Echinacoside) fil-prevenzjoni tal-iżvilupp tal-kanċer, u jimplika li l-użu tal-ECH jista' jkun strateġija kimoterapewtika potenzjali għall-kanċer.

Introduzzjoni

Il-mogħdija tas-soppressor tat-tumur p53 permezz tal-induzzjoni tas-soppressor tat-tumur, ARF itaffi d-degradazzjoni p53 medjata mill-minuta doppja tal-ġurdien E3-ligase onkoġenika (MDM)2-(3). Dan huwa mekkaniżmu awto-regolat u awto-protettiv li jipprevjeni liċ-ċelloli mit-trasformazzjoni malinna. Notevolment, p53 jista' jrażżan l-attività ta' Myc billi jattiva b'mod traskrizzjoni, pereżempju, miR-145 li jimmiraMycmRNA għas-sajlenser tat-traduzzjoni (4,5), u b'hekk jifforma loop regolatorju ta' feedback negattiv.

L-aktar strateġija sempliċi u effettiva biex tikkura l-kanċer hija li joqtlu ċ-ċelloli tal-kanċer. Il-mediċini kontra l-kanċer użati b'mod komuni, bħal cisplatin (6), actinomicin D (7), u adriamycin (8) huma murija li jinibixxu t-tkabbir tat-tumur billi jippromwovu l-apoptożi. Riċentement, evidenza dejjem tikber wriet li għadd ta' prodotti naturali u derivattivi minn pjanti, partikolarment minn pjanti mediċinali użati fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM), juru funzjoni ta' trażżin tat-tumur billi jinduċu l-apoptosi taċ-ċelluli tal-kanċer u għandhom il-potenzjal għal applikazzjoni klinika. fit-terapija tal-kanċer (9). Pereżempju, l-emodin anthraquinone naturali huwa iżolat minn bosta tipi ta 'ċelluli tal-kanċer (10,11). Camptothecin, derivat mis-'siġra kuntenta' Ċiniża,Camptotheca acuminat, huwa prodott naturali siewi li jinibixxi l-ligazzjoni tad-DNA wara waqfiet ta 'strand medjati minn topo I (12). Fi studju retrospettiv ieħor ta 'koorti bbażat fuq il-popolazzjoni ta' total ta '729 pazjent b'kanċer tas-sider avvanzat, ġie ssuġġerit li t-terapija TCM tista' tikkontribwixxi għat-trattament tal-kanċer. Minn din il-koorti, 115-il pazjent kienu utenti tat-TCM filwaqt li 614-il pazjent ma użawx it-TCM. L-analiżi multivarjata wriet li, meta mqabbla ma 'dawk li ma jużawx, l-użu tat-TCM kien assoċjat ma' riskju mnaqqas b'mod sinifikanti ta 'mortalità mill-kawżi kollha (13). Is-sejbiet kollha msemmija hawn fuq indikaw li TCM hija mediċina komplementari u alternattiva importanti li tista 'tintuża fit-trattament tal-kanċer.

ġrieden bi ħsara akuta fil-pulmun (16,17). Ukoll, ECH(Echinacoside)intwera li għandu effetti protettivi fuq it-tessut tan-nervituri u jtejjeb id-disturbi fl-imġieba f'mudelli murini tal-marda ta' Parkinson (18). Notevolment, instab li l-ECH jippromwovi l-proliferazzjoni taċ-ċelluli u jinibixxi l-apoptosi fiċ-ċelluli MODE-K epiteljali intestinali tal-ġurdien (19). S'issa, madankollu, ingħatat inqas attenzjoni lir-rwol potenzjali tal-ECH fil-prevenzjoni tal-kanċer.

F'dan l-istudju, ġie esplorat jekk it-trattament ECH jaffettwax it-tkabbir u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli tat-tumur u jekk l-ECH(Echinacoside)jinduċi apoptożi, jgħolli l-produzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) u jnaqqas il-potenzjal tal-membrana mitokondrijali (MMP), u konsegwentement irażżan it-tkabbir taċ-ċelluli tat-tumur. Barra minn hekk, l-istudju preżenti kellu l-għan li jidentifika l-mekkaniżmi molekulari responsabbli għall-inibizzjoni tat-tkabbir taċ-ċelluli medjata mill-ECH.

Materjali u metodi

Ċellula linja, reaġent, u antikorpi.Ċelloli tal-adenokarċinoma tal-frixa SW1990 (ATCC, Manassas, VA, USA) ġew ikkultivati ​​fil-medium Eagle modifikat ta' Dulbecco supplimentat b'10 fil-mija serum bovin tal-fetu, 50 U/ml peniċillina u 0.1 mg/ml streptomycin f'temperatura ta' 37˚C f' 5 fil-mija CO2 atmosfera umidifikata. ECH(Echinacoside)inxtara minn Jrdun Biotechnology Corp. (Shanghai, iċ-Ċina). Antikorpi kontra AKT, P-AKT, ERK, P-ERK, JNK, p-JNK, P38, p-P38, u GAPDH inxtraw minn Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA); anti-Bax u anti-Bcl-2 inxtraw minn Santa Cruz Biotechnology Inc. (Santa Cruz, CA, USA); u anti-Caspase-3 inxtara mingħand Abcam (Shanghai, iċ-Ċina).

Ċellula vijabbiltàassaġġ. Biex tiġi vvalutata r-rata tat-tkabbir taċ-ċelluli tat-tumur, intuża l-kit tal-Għadd taċ-Ċelluli{{0}} (CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Is-sospensjonijiet taċ-ċelluli ġew miżrugħa b'5,000 ċelluli għal kull bir bi trattament ECH għal 0, 12, 24, 48 jew 72 siegħa fi 96 -pjanċi tal-kultivazzjoni tal-bir. L-inibizzjoni tat-tkabbir taċ-ċelluli ġiet iddeterminata billi żżid reaġent WST-8 mill-kit CCK-8 f'konċentrazzjoni finali ta '10 fil-mija għal kull bir, u l-assorbiment tal-kampjuni tkejjel f'450 nm bl-użu ta' qarrej tal-mikroplate (Multiskan MK3; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA).

Hoechst 33342 tbajja’.Iċ-ċelloli (60 fil-mija konfluwenza) ġew ittrattati b'Hoechst 33342 (Beyotime Institute of Biotechnology, Haimen, iċ-Ċina) f'konċentrazzjoni finali ta' 1µg/ml, inkubati f'inkubatur ta' 37˚C għal 15-il minuta, maħsula b'salina buffered bil-fosfat darbtejn, iffissat f'4 fil-mija paraformaldehyde għal 30 min f'temperatura tal-kamra, u mmuntat fuq slides. Il-bidliet morfoloġiċi tan-nuklei taċ-ċelluli ġew osservati taħt mikroskopju fluworexxenti (Olympus BX51, Melville, NY, USA). In-nuklei normali kienu tondi u mtebbgħin blu ċar, filwaqt li n-nuklei apoptotiċi kienu miċħuda u mtebbgħin blu qawwi.

Attivat bil-fluworexxenza ċellula issortjar (FACS) analiżi.Għall-valutazzjoni tal-apoptożi, intuża l-kit ta 'Sejbien tal-Apoptożi tal-Fluworescein isothiocyanate (FITC)-Annexin V (BD Biosciences, Shanghai, iċ-Ċina) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Fil-qosor, 5x104 ċelluli ġew maħsula b'PBS kiesaħ bis-silġ, sospiżi mill-ġdid f'0.1 ml buffer li torbot (Beyotime Institute of Biotechnology), u mtebbgħin b'10 ml ta' Annexin V konjugat bil-FITC (10 mg/ml) u 10 ml propidju jodur (PI) (50 mg/ml). Wara l-inkubazzjoni għal 15-il minuta f'temperatura tal-kamra fid-dlam u ż-żieda ta '400 ml buffer li torbot, iċ-ċelloli ġew analizzati b'ċitometru tal-fluss (C6; BD Biosciences, Shanghai, iċ-Ċina).

Kejl ta reattiv ossiġnu speċi (ROS).Biex tiġi evalwata l-produzzjoni ta 'ROS, intuża l-kit tal-Analiżi tal-Ispeċi ta' l-Ossiġenu Reattiv (Bijoteknoloġija vigoruża, Beijing, iċ-Ċina) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Fil-qosor, iċ-ċelloli (80 fil-mija ta 'konfluwenza) ġew maħsuda u maħsula bil-PBS qabel it-tbajja' bis-soluzzjoni dihydroethidium (DHE) (Beyotime Institute of Biotechnology). Iċ-ċelloli mbagħad ġew analizzati b'analiżi ċitometrika tal-fluss.

Kejl ta mitokondrijali membrana potenzjal (MMP).

Kitt tal-Assaġġi tetramethylrhodamine methyl ester (TMRM) (ImmunoChemistry Technologies, Bloomington, MN, USA) intuża biex jinstab il-bidliet fl-MMP. Fil-qosor, iċ-ċelloli (80 fil-mija ta 'konfluwenza) ġew maħsuda, maħsula b'PBS u mtebbgħin b'TMRM għal 15-20 min f'inkubatur ta' 37˚C. Iċ-ċelloli mbagħad inħaslu darba b'PBS u ġew soġġetti għal analiżi ċitometrika tal-fluss.

Immunoblottinganaliżi. Iċ-ċelloli (80 fil-mija konfluwenza) ġew maħsuda u lysed f'RIPA buffer (Jrdun Biotechnology) li jikkonsisti minn 50 mM Tris-HCl, pH 7.4; 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 fil-mija NP-40, 1 fil-mija sodium deoxycholic acid u 0.1 fil-mija SDS u inibituri tal-proteasome miżjuda friski. Intużaw kwantitajiet ugwali ta' lisat taċ-ċelluli ċari għall-analiżi ta' immunoblotting kif deskritt qabel (20).

Statistika analiżi.Data kwantitattiva hija espressa bħala l-medja ± devjazzjoni standard. Id-differenzi statistiċi ġew evalwati permezz tat-test t ta' Student mhux imqabbad bl-użu ta' softwer statistiku SPSS 15.0. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Riżultati

ECH (Echinacoside)irażżan tumur ċellulatkabbir. Għalkemm ġie rrappurtat li ECH(Echinacoside)juri rwol protettiv billi jinibixxi l-apoptożi u s-sinjali infjammatorji f'ċelloli somatiċi, bħal ċelloli epiteljali newronali u intestinali (16-19), jibqa' elużiv jekk ECH tikkontrollax it-tkabbir u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli kanċeroġeni. Biex jiġi ttestjat dan, sar analiżi tas-sopravivenza taċ-ċelluli billi ġew trattati ċelluli SW1990, derivati ​​minn adenokarċinoma tal-frixa ta' grad II, b'dożi titrati ta' ECH kif muri fil-Fig. -mod dipendenti matul perjodu ta' kultura ta' 5-jum (Fig. 1).ECH iqanqalapoptożi. Peress li t-telf ta 'apoptożi huwa wieħed mill-mekkaniżmi kawżattivi ewlenin sottostanti l-proliferazzjoni mhux ikkontrollata ta' ċelluli tal-kanċer tal-frixa (21), l-istudju preżenti wettaq sett ta 'esperimenti biex jiddetermina jekk ECH iqajjem apoptożi. L-ewwelnett, billi tbajja n-nuklei taċ-ċelluli tat-tumur b'Hoechst 33342, intwera li l-ECH jirriżulta f'apoptożi b'mod dipendenti mid-doża (Fig. 2A). Barra minn hekk, l-analiżi FACS twettqet bl-użu ta 'tbajja' ta' Annexin V/PI biex tikkonferma aktar l-effett apoptotiku ta 'ty ECH (Fig. 2B). Il-persentaġġ medju ta 'ċelluli apoptotic kien 1.1 fil-mija taħt kundizzjonijiet ta' kultura normali, filwaqt li dan il-perċentwali żdied b'mod sinifikanti għal 10.6, 21.4 u 51.3 fil-mija bi tweġiba għal trattament ECH b'mod dipendenti fuq id-doża (Fig. 2C). Dawn ir-riżultati, flimkien mal-assaġġ tal-vijabbiltà taċ-ċelluli muri fil-Fig. 1, juru li t-trattament ECH jrażżan il-proliferazzjoni taċ-ċelluli tat-tumur billi tiskatta l-apoptożi.

jiġġeneraw ethidium li jinterkalizza mad-DNA, intuża f'dan l-istudju biex jevalwa l-produzzjoni ROS. Instab li, bħal mediċini oħra kontra l-kanċer, l-ECH jistimula wkoll il-produzzjoni ta' ROS b'mod dipendenti fuq id-doża kif muri mill-intensità għolja tal-fluworexxenza mat-trattament bl-ECH (Fig. 3).

ECH (Echinacoside)inaqqas MMP.Intwera li disfunzjoni mitokondrijali hija implikata fl-induzzjoni ta 'apoptożi. Il-ftuħ tal-pori tat-tranżizzjoni tal-permeabilità mitokondrijali ġie muri li jinduċi d-depolarizzazzjoni tal-potenzjal transmembrana u r-rilaxx ta 'fatturi pro-apoptotiċi (23). Għalhekk, ġie ttestjat jekk l-ECH jistax jinduċi telf ta 'MMP fiċ-ċelloli tat-tumur billi jwettaq assaġġ TMRM, li huwa approċċ stabbilit sew, peress li l-intensità tal-fluworexxenza TMRM hija proporzjonali għall-potenzjal tal-membrana. Intwera li t-trattament ECH inaqqas b'mod sinifikanti l-MMP b'mod dipendenti mid-doża (Fig. 4).ECH kontrolli tumur ċellula tkabbir via proteina attivata mill-mitoġenuil-bażi molekulari tal-mewt taċ-ċelluli tat-tumur medjata mill-ECH, l-attività ta 'bosta mogħdijiet ta' sinjalazzjoni vitali, bħal MAPK u AKT (24,25), li jikkontrollaw is-sopravivenza taċ-ċelluli u l-mewt ġiet eżaminata. Il-MAPKs huma kkonservati b'mod evoluttiv, proline diretti Ser/Thr protein kinases, inklużi kinases extraċellulari regolati minn sinjal (ERKs), c-Jun NH2-terminal kinase (JNKs) u l-membri tal-familja p38 li huma attivati ​​permezz ta 'tliet- kaskati ta' sinjalazzjoni ta' saff kinase (26,27). F'dan l-istudju, l-espressjoni ta 'MAPKs u AKT, kif ukoll il-forom fosforilati attivati ​​tagħhom, ġiet ivvalutata u ġie żvelat li ECH irażżan b'mod notevoli l-attività JNK u ERK1 / 2, iżda ttejjeb l-attività p38 (Fig. 5). Notevolment, intwera li l-attività AKT, li hija wkoll importanti b'mod kritiku għall-proliferazzjoni taċ-ċelluli, mhix affettwata mit-trattament ECH (Fig. 5). Barra minn hekk, intwera li t-trattament ECH jgħolli l-espressjoni ta' Bax u Caspase-3 filwaqt li jnaqqas l-espressjoni ta' Bcl-2 (Fig. 5), li hija konsistenti ma' Fig. 2. Għalhekk, ir-riżultati jindikaw li L-ECH iqanqal l-apoptosi taċ-ċelluli tat-tumur permezz tal-mogħdija MAPK.

Diskussjoni

Sa fejn nafu tagħna, dan huwa l-ewwel studju li juri li l-ECH għandu funzjoni li jrażżan it-tumur billi jikkawża apoptożi (Fig. 2), jippromwovi l-produzzjoni ta 'ROS (Fig. 3) u jinduċi depolarizzazzjoni potenzjali tal-membrana mitokondrijali (Fig. 4) , konsegwentement iwassal għal inibizzjoni tat-tkabbir taċ-ċelluli tat-tumur (Fig. 1). Barra minn hekk, il-bażi molekulari tal-mewt taċ-ċelluli tat-tumur medjata mill-ECH intweriet li sseħħ billi tirregola mogħdijiet ta 'sinjalazzjoni MAPK (Fig. 5). Dawn is-sejbiet juru funzjoni ġdida tal-ECH fil-prevenzjoni tat-tumuriġenesi u għalhekk jissuġġerixxu li jista 'jkun aġent kandidat għat-terapija tal-kanċer.

Il-maġġoranza tal-mediċini kontra l-kanċer jistgħu jinduċu apoptożi taċ-ċelluli tat-tumur, senescence u/jew arrest taċ-ċiklu taċ-ċelluli, li jwassal għall-inibizzjoni tat-tkabbir u l-proliferazzjoni taċ-ċelluli tat-tumur. L-arrest taċ-ċiklu taċ-ċelluli huwa rispons ċellulari għal sinjali ta’ stress ħafif li jippermettu liċ-ċelloli jsewwu d-DNA bil-ħsara qabel ma jibdew is-sinteżi jew il-mitosi tad-DNA replikattiva, filwaqt li l-apoptosi u s-senescenza (arrest permanenti taċ-ċiklu taċ-ċelluli) iseħħu b’reazzjoni għal sinjali ta’ stress li jeliminaw ċelloli irreparabbli jew malinni ( 28,29). Għalhekk, l-effett apoptotiku tal-ECH fuq iċ-ċelloli tat-tumur biss ġie vvalutat f'dan l-istudju, peress li l-qtil taċ-ċelloli tal-kanċer huwa kriterju ewlieni għall-evalwazzjoni tal-qawwa ta 'aġent kontra l-kanċer. Notevolment, intwera li ECH jinduċi l-espressjoni taBax(Fig. 5), ġene pro-apoptotic, attivat b'mod transkrizzjonali mis-soppressor tat-tumur p53 (30). Għalhekk, huwa utli li jiġi ttestjat jekk ECH jistax jattiva l-mogħdija ta 'sinjalazzjoni p53. Jekk iva, l-ECH jista' wkoll ikun kapaċi jqanqal arrest taċ-ċiklu taċ-ċelluli p53-dipendenti, senescence, apoptożi jew awtofaġija. F'dan l-istudju, il-funzjoni tat-tumur-soppressiva ta 'ECH fil-linja taċ-ċelluli tal-adenokarċinoma tal-frixa SW1990 ġiet eluċidata. Madankollu, aktar studji li josservaw aktar linji taċ-ċelluli tal-kanċer tal-frixa, huma meħtieġa. Intwera li mutazzjonijiet fil-proteina onkoġenika RAS u s-soppressor tat-tumur p53 huma assoċjati mal-iżvilupp tal-kanċer tal-frixa (31); madankollu, il-linja taċ-ċelluli SW1990 ma għandha l-ebda mutazzjoni p53, skont id-database p53 tal-IARC (http://p53.iarc.fr/CellLines.aspx). Għalhekk, huwa importanti li jiġi investigat jekk ECH jistax jaffettwa t-tkabbir u l-proliferazzjoni ta 'linji oħra ta' ċelluli tal-kanċer tal-frixa b'mutazzjonijiet p53 differenti. Barra minn hekk, ikun interessanti li jiġi ddeterminat jekk ECH huwiex kapaċi jippromwovi l-apoptożi u jinibixxi t-tkabbir ta 'tipi oħra ta' tumuri.

L-elevazzjoni tal-ROS u t-tnaqqis tal-MMP, li kienu kkawżati minn trattament ECH, intwerew li huma essenzjali fl-induzzjoni tal-apoptożi (22). Barra minn hekk, instab li ROS jista 'jikkaġuna l-ossidazzjoni tal-pori mitokondrijali li jikkontribwixxu għar-rilaxx taċ-ċitokromuc, intermedju fl-apoptożi, minħabba tfixkil tal-MMP (22). Għalhekk, għad irid jiġi determinat jekk l-ECH tfixkelx l-MMP indirettament permezz tal-induzzjoni ta 'ROS. Barra minn hekk, l-istress ossidattiv ikkawżat mir-ROS intwera wkoll li huwa involut fil-modulazzjoni ta 'numru kbir ta' sinjali li jikkontrollaw it-tkabbir taċ-ċelluli, inklużi p53, NF-κB, HIFs u PI3K (32). Għad irid jiġi determinat jekk u, jekk iva, kif l-ECH tirregola dawn il-mogħdijiet ta' sinjalar importanti. Notevolment, l-istress ossidattiv jikkawża diversi mard newrodeġenerattiv minħabba l-konsum għoli ta 'ossiġnu, sistemi antiossidattivi dgħajfa u karatteristiċi ta' differenzjazzjoni terminali tas-sistema nervuża ċentrali (33). Madankollu, bosta studji wrew li l-ECH għandu effetti protettivi u anti-apoptotiċi fuq it-tessut nervuż. F'dan ir-rigward, huwa raġonevoli li wieħed ipotetizza li l-ECH jista 'jnaqqas il-produzzjoni ta' ROS fiċ-ċelloli newrali differenzjati terminali. Għalhekk, għad irid jiġi determinat ukoll jekk ir-regolamentazzjoni tal-produzzjoni ROS minn ECH hijiex dipendenti fuq l-istatus tad-divrenzjar taċ-ċelluli. Għalhekk, ir-riżultati preżenti flimkien ma 'studji oħra juru li ECH, it-TCM użat ħafna, jista' jkun strateġija kimoterapewtika importanti mhux biss għat-trattament ta 'mard newrodeġenerattiv iżda wkoll karċinomi malinni.

Riċentement, l-użu tat-TCM fit-terapija tal-kanċer kiseb dejjem aktar attenzjoni. Il-potenzjal tal-prodotti naturali minn pjanti mediċinali użati fit-TCM ġie rikonoxxut mill-komunità xjentifika anke fid-dinja tal-Punent (9). Jinħtieġu sforzi biex jiġu eluċidati l-mekkaniżmi ta' azzjoni sottostanti ta' dawn il-prodotti naturali, li eventwalment jistgħu jwasslu għall-iżvilupp ta' mediċini effiċjenti u sikuri għat-terapija tal-kanċer.

Bħala konklużjoni, l-istudju preżenti wera l-funzjoni inibitorja tat-tumur tal-ECH u jelabora wkoll il-bażi molekulari tas-soppressjoni tat-tumur medjata mill-ECH, u b'hekk tissuġġerixxi l-applikazzjoni klinika potenzjali tal-ECH fit-terapija tal-kanċer.

Rikonoxximenti

Dan l-istudju kien iffinanzjat u appoġġjat mill-Programm Ewlieni ta 'Riċerka Xjentifika ta' FMU (għotja nru 09ZD014). L-awturi jixtiequ jirringrazzjaw lil Biomedworld (Shanghai, iċ-Ċina) għall-għajnuna fl-editjar tal-manuskritt.

Referenzi

1. Hanahan D u Weinberg RA: Marki tal-kanċer: Il-ġenerazzjoni li jmiss. Ċellula 144: 646-674, 2011.

2. Alderton GK: Traskrizzjoni: L-effetti tat-traskrizzjoni tal-MYC. Nat Rev Cancer 14: 513, 2014.

3. Zindy F, Eischen CM, Randle DH, Kamijo T, Cleveland JL, Sherr CJ u Roussel MF: Is-sinjalar Myc permezz tas-soppressor tat-tumur ARF jirregola l-apoptosi u l-immortalizzazzjoni dipendenti p53-. Ġeni Dev 12: 2424-2433, 1998.

4. Sachdeva M, Zhu S, Wu F, Wu H, Walia V, Kumar S, Elble R, Watabe K u Mo YY: p53 irażżan c-Myc permezz ta 'induzzjoni tas-soppressor tat-tumur miR -145. Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212, 2009.

5. Liao JM, Cao B, Zhou X u Lu H: għarfien ġdid dwar il-funzjonijiet p53 permezz tal-microRNAs fil-mira tiegħu. J Mol Cell Biol 6: 206-213, 2014.

6. Zamble DB u Lippard SJ: Cisplatin u tiswija tad-DNA fil-kimoterapija tal-kanċer. Xejriet Biochem Sci 20: 435-439, 1995.

7. Kleeff J, Kornmann M, Sawhney H u Korc M: Actinomycin D jinduċi apoptożi u jinibixxi t-tkabbir taċ-ċelluli tal-kanċer tal-frixa. Int J Kanċer 86: 399-407, 2000.

8. Tacar O, Sriamornsak P u Dass CR: Doxorubicin: Aġġornament dwar l-azzjoni molekulari kontra l-kanċer, it-tossiċità u sistemi ġodda ta' twassil tad-droga. J Pharm Pharmacol 65: 157-170, 2013.

9. Efferth T, Li PC, Konkimalla VS u Kaina B: Mill-mediċina tradizzjonali Ċiniża għal terapija razzjonali tal-kanċer. Xejriet Mol Med 13: 353-361, 2007.