Varjanti Ġenetiċi tad-Donatur fir-Riċettur Interleukin-6 U Interleukin-6 Assoċjati Ma' Riġezzjoni ppruvata minn Bijopsija Wara Trapjant tal-Kliewi
Feb 26, 2022
Mill-ewwel suċċesstrapjant tal-kliewifl-1954,trapjant tal-kliewisar it-trattament tal-għażla għall-pazjenti bi stadju finalimard tal-kliewi(ESKD) 1 . Lil hinn mill-avvanzi kirurġiċi fit-twettiqkliewitrapjant, kien iż-żieda ta 'mediċini immunosoppressivi wara t-trapjant li tejbet is-sopravivenza ta'allografts tal-kliewiminn xhur sa snin. Ir-riċevituri tat-trapjant, madankollu, dejjem isiru sensittivi għat-trapjant tagħhom, li jwassal għal sopravivenza fqira fit-tul ta'allografts tal-kliewi2,3 . Filwaqt li l-immunosoppressanti konvenzjonali huma effettivi biex jabolixxu r-risponsi immuni akuti, huma jindirizzaw biss parzjalment l-allosensitization—b'hekk jippermettu li l-immunità umorali tifforma u tippreċipita falliment tal-allograft fit-tul. Biex tevita ċ-ċaħda ta'trapjanti tal-kliewigħalhekk huwa meħtieġ li jiġu żviluppati terapiji ġodda li jistgħu jimpedixxu l-formazzjoni ta' allosensitization 4 . Permezz tal-isforzi xjentifiċi tal-aħħar ħamsin sena, ġie stabbilit li r-rifjut akut u kroniku tal-allograft jiġi attivat minn sett kumpless u dinamiku ta 'risponsi alloimmuni. Proteini immunomodulatorji magħrufa bħala ċitokini huma partikolarment importanti biex jirregolaw kemm il-fergħat pro- u anti-infjammatorji tal-immunità. Fost is-superfamilji kollha taċ-ċitokini, l-interleukin 6 (IL-6) u l-membri tal-familja tagħha bla dubju juru l-akbar grad ta’ plejotropija funzjonali taċ-ċitokini (azzjonijiet bijoloġiċi multipli) u redundancy taċ-ċitokini (azzjonijiet bijoloġiċi kondiviżi), bi rwoli fiżjoloġiċi u patoloġiċi li jvarjaw minn B. u d-divrenzjar taċ-ċelluli T u l-immunità tal-fażi akuta, għall-ematopoiesis u l-onkoġenesi, remodeling u riġenerazzjoni tat-tessuti u tal-għadam, u anke żvilupp bikri ta 'sistemi newronali u kardjovaskulari 5-8. Bħala tali, attività aberranti ta' IL-6 hija implikata f'mard inkluż is-sindromu ta' rispons infjammatorju sistemiku, disturbi immuni kroniċi bħal glomerulonefrite crescentic, rifjut ta' trapjant, u mard tal-graft-versus-host, mard rewmatiku inkluż artrite rewmatika u artrite idjopatika tal-ġuvenili, u kundizzjonijiet limfoproliferattivi bħall-marda ta' Castleman 4,
CISTANCHE SE TTEJB IL-FUNZZJONI TAL-KLIEI/RENALI
Data emerġenti identifikat rwol ewlieni għal IL-6 fir-rifjut waratrapjant tal-kliewi4 . Sabiex japprezza r-rwol tal-IL-6 sinjalazzjoni filallograft renalirifjut, huwa ta 'valur li l-ewwel tiġi kkuntestwalizzata l-kaskata tas-sinjalar peress li IL-6 jista' jagħmel sinjal permezz ta 'tliet mogħdijiet separati u jikkmanda effetti li jvarjaw skond il-kuntest u l-mogħdija fil-logħob (Fig. 1) 5,6,10. L-ewwel mod ta' sinjalar huwa magħruf bħala sinjalazzjoni klassika (Fig. 1A), li fiha IL-6 jeħel mar-riċettur IL-6 marbut mal-membrana (mIL-6R) segwit minn formazzjoni kumplessa b' glikoproteina 130 marbuta mal-membrana (gp130) biex tiskatta t-trasduzzjoni tas-sinjali downstream u l-espressjoni tal-ġeni. Is-sinjalar trans (Fig. 1B) minflok iseħħ meta l-IL-6R jinqasam mill-membrana taċ-ċellula 10 , u l-IL-6R (sIL-6R) solubbli rilaxxat jaqbad IL{{ 18}}, jifforma kumpless b'gp130 marbut mal-membrana, u fosforila transducers tas-sinjali intraċellulari. Peress li gp130 marbut mal-membrana huwa espress b'mod kullimkien iżda mIL-6R mhuwiex, is-sinjalar trans jista' jiffaċilita r-responsibilità ta' IL-6 fiċ-ċelloli li normalment ma jirrispondux għal IL-6 permezz ta' IL{{26} }/sIL-6R kumplessi, li jestendu l-funzjonijiet fiżjoloġiċi u patoloġiċi ta' IL-6 7 . Importanti, forma li tinħall ta' gp130 teżisti b'mod naturali fiċ-ċirkolazzjoni b'affinità simili għall-kumpless IL-6/sIL{-6R bħal gp130 marbut mal-membrana u tista' taġixxi bħala inibitur speċifiku tal-mogħdija tas-sinjalar trans ( Fig. 1B) 11 . It-tielet u l-aħħar forma ta' sinjalazzjoni IL-6 hija trans-preżentazzjoni fejn mIL-6R fuq ċellula waħda jaqbad IL-6 u tingħaqad ma' gp130 marbut mal-membrana fuq ċellula oħra (Fig. 1C). F'dawn il-modi kollha ta' sinjalazzjoni, il-fosforilazzjoni ta' messaġġiera sekondarja ta' partikolarment il-familji Janus kinase (JAK) u transducer u attivatur tas-sinjali tat-traskrizzjoni (STAT) huma kritiċi għall-promulgazzjoni ta' effetti dipendenti fuq IL-6-9,1
Hawnhekk, użajna l-ġenetika umana biex ninvestigaw jekk l-imblokk tal-interazzjoni IL-6/IL-6R jistax jagħti benefiċċju terapewtiku fil-trapjant tal-kliewi. Il-polimorfiżmi nukleotidi singoli (SNPs) relatati mal-IL-6-li studjajna hawn huma l-polimorfiżmu A > C f'IL6R (rs2228145; Fig. 1D) u l-polimorfiżmu G > C f'IL6 (rs1800795; Fig. 1E). L-IL6R SNP jikkawża polimorfiżmu missense li jwassal għal żieda fil-konċentrazzjonijiet ta' sIL-6R fiċ-ċirkolazzjoni (li jinibixxi l-passaġġ ta' sinjalazzjoni trans), filwaqt li l-IL6 SNP jikkawża livelli elevati ta' espressjoni ta' IL{-6 minħabba l-lokalità tiegħu f' reġjun promotur (li jippromwovi sinjalazzjoni IL-6 permezz tat-tliet mogħdijiet kollha) 12 . Studji oħra preċedentement evalwaw ir-rwol ta 'dan il-varjanti IL6 fitrapjant tal-kliewi,is-sejba ta' assoċjazzjonijiet bejn il-varjanti ta' IL6 u r-riżultat tat-trapjant 13,14. Dawn l-istudji, madankollu, huma fil-biċċa l-kbira retrospettivi, limitati fil-metodi statistiċi tagħhom, taħt saħħa u għalhekk inkonklussivi minħabba n-numru limitat ta 'kampjuni ta' pazjenti inklużi fl-analiżi. Fl-istudju preżenti, aħna nipprovdu tweġiba deċiżiva dwar l-impatt ta 'dawn l-SNPs fit-trapjant tal-kliewi.
Kliem ewlieni:trapjant tal-kliewi; mard tal-kliewi; allografts tal-kliewi; renali; mard tal-kliewi
Riżultati
Determinanti tar-rifjut ippruvat mill-bijopsija wara trapjant tal-kliewi.Total ta’ 1271trapjant tal-kliewiPari donatur-riċevitur ġew inklużi f'dan l-istudju bil-karatteristiċi tad-donatur u r-riċevitur elenkati fit-Tabella. Is-segwitu medju wara t-trapjant kien ta' 5.2 snin ± 5.0 b'perjodu massimu ta' segwitu ta' 16.7 snin. Matul is-segwitu, 33.8 fil-mija tar-riċevituri żviluppaw rifjut ippruvat mill-bijopsija. Fl-ewwel sena, 390 riċevitur żviluppaw rifjut akut ippruvat mill-bijopsija, filwaqt li 40 riċevitur ippreżentaw rifjut ippruvat mill-bijopsija minn hemm 'il quddiem. Mill-karatteristiċi kollha vvalutati, dawn li ġejjin kienu assoċjati b'mod sinifikanti ma 'rifjut ippruvat mill-bijopsija (Tabella 1); L-età tar-riċevitur, is-sess tar-riċevitur, il-ħin ta 'iskemija sħuna, in-numru totali ta' diskrepanzi HLA, u l-okkorrenza ta 'funzjoni ta' tilqim imdewma (DGF).
Varjant ġenetiku komuni fir-riċettur tal-interleukin-6 jipproteġi kontra r-rifjut tal-allograft renali.Biex tidentifika l-bijomarkaturi ġenetiċi rilevanti fil-kuntest tar-rifjut, esplorajna jekk il-varjant Asp358Ala f'IL6R (rs2228145 A > C, qabel rs8192284) assoċjatx ma 'rifjut ippruvat mill-bijopsija. Il-frekwenzi tal-ġenotip osservati fir-riċevituri (n=1270; AA, 34.3 fil-mija; AC, 51.4 fil-mija; CC, 14.2 fil-mija) u donaturi (n=1269; AA, 35.6 fil-mija; AC, 5{{23} }}.6 fil-mija; CC, 13.6 fil-mija) kienu komparabbli (P=0.75). Madankollu, il-frekwenzi tal-polimorfiżmu IL6R kemm fir-riċevituri kif ukoll fid-donaturi kienu ogħla b'mod sinifikanti minn dawk irrappurtati mill-proġett tal-ġenomi 1000 (P <0.0001), iżda="" mhux="" meta="" mqabbla="" mal-proġett="" tagħhom.="" koorti="" ewropea="" (p="0.09)" 15="" .="" analiżi="" ta="" 'sopravivenza="" kaplan-meier="" wrew="" li="" l-polimorfiżmu="" il6r="" fid-donatur="" kien="" assoċjat="" b'mod="" sinifikanti="" ma'="" riskju="" mnaqqas="" għal="" rifjut="" akut="" matul="" is-segwitu="" (fig.="" 2a;="" log-rank="" p="0.003)." wara="" s-segwitu="" sħiħ,="" l-inċidenza="" ta="" 'rifjut="" ippruvat="" mill-bijopsija="" kienet="" 38.9="" fil-mija="" fil-grupp="" ta'="" ġenotip="" aa="" ta="" 'referenza,="" 32.8="" fil-mija="" fil-grupp="" tal-ġenotip="" ac="" eterozigoti,="" u="" 24.9="" fil-mija="" fil-grupp="" tal-ġenotip="" cc="" homozy-gous,="" rispettivament.="" f'analiżi="" univarjata,="" l-il6r="" snp="" fid-donatur="" kien="" assoċjat="" ma="" 'proporzjon="" ta'="" periklu="" ta="" '0.78="" għal="" kull="" c-allele="" (95="" fil-mija="" -ci="" 0.67–0.90;="" p="0.001)" għal="" rifjut="" ippruvat="" minn="" bijopsija.="" l-analiżi="" tas-sopravivenza="" kaplan-meier="" għall-polimorfiżmu="" il6r="" fid-donatur="" ġew="" stmati="" mill-ġdid="" għal="" pazjenti="" trapjantati="" fis-snin="" 90="" u="" 2000="" peress="" li="" l-immunosoppressjoni="" evolviet="" matul="" iż-żmien="" u="" dan="" jista="" 'jkollha="" impatt="" fuq="" ir-riskju="" ta'="" rifjut.="" f'dawn="" is-sottogruppi,="" is-sinifikat="" inżamm="" f'pazjenti="" trapjantati="" fis-snin="" 90="" (figura="" s1;="" p="0.016)," filwaqt="">
Figura 1. Illustrazzjoni tal-mogħdijiet tas-sinjalar IL-6 u SNPs relatati mal-IL-6-eżaminati. Is-sinjalar IL-6 jista' jseħħ fi tliet modi distinti. (Għal skopijiet skematiċi, jintwera wieħed biss minn kull riċettur IL-6 u molekula gp130.) (A) Is-sinjalar IL-6 klassiku sseħħ meta IL-6 jinteraġixxi direttament mal-IL marbut mal-membrana -6R (mIL-6R) u gp130 marbuta mal-membrana (mgp130) għal fosforilati intraċitoplasmiċi, gp130-messaġġiera sekondarji speċifiċi. (B) Is-sinjalar IL-6 trans minflok isseħħ meta IL-6R (sIL-6R) solubilizzat jaqbad IL-6 u jifforma kumpless b'mgp130 biex jippreċipita sinjali sekondarji intraċitoplasmiċi. Notevolment, dan il-mod ta' sinjalar jista' jiġi inibit minn gp130 solubilizzat (sgp130), li għandu biss affinità għall-kumpless IL-6/sIL{-6R u jinnewtralizzah billi jipprevjeni l-irbit tiegħu ma' mgp130. (C) Fl-aħħarnett, il-preżentazzjoni tal-IL-6 trans isseħħ meta ċellula sekondarja li jkollha mIL-6R taqbad IL{-6 u tippreżentaha lil mgp130 fuq ċellula fil-mira biex tixpruna sinjali sekondarji intraċitoplasmiċi fil- ċellula fil-mira. Biex tapprezza r-rwol potenzjali tal-SNPs relatati mal-IL-6-fitrapjant tal-kliewiriċevituri u trapjant tad-donaturikliewi,aħna vvalutajna l-assoċjazzjoni bejn ir-riżultati tas-sopravivenza tat-trapjant u (D) l-IL6R SNP rs2228145 A > C u (E) l-IL6 SNP rs1800795 G > C, rispettivament. L-IL6R SNP jikkawża mutazzjoni missense fl-IL-6R, filwaqt li l-IL6 SNP jinsab fir-reġjun promotur u jikkawża varjant introniku.
it-tendenza dehret f'pazjenti trapjantati fis-snin 2000 (Figura S1; P=0.067). Madankollu, skont ir-riżultati preċedenti tagħna, l-allele C tal-IL6R SNP fid-donatur baqa' protettiv kontra r-rifjut ippruvat mill-bijopsija. Fir-riċevituri, l-analiżi tas-sopravivenza Kaplan-Meier ma wrew l-ebda assoċjazzjoni bejn l-IL6R SNP u r-rifjut waqt is-segwitu (Fig. 2B; log-rank P=0.15). L-analiżi tas-sottogrupp għas-sess tar-riċevitur jew it-tip ta' donatur ma bidlitx dawn ir-riżultati. Biex jiġi evalwat jekk id-diskrepanza bejn donatur u riċevitur għall-IL6R SNP iżidx ir-riskju ta’ rifjut ippruvat bil-bijopsija,trapjant tal-kliewipari kienu maqsuma f'erba 'gruppi skond il-preżenza jew in-nuqqas ta' l-allele C fid-donatur u r-riċevitur. Għalkemm l-analiżi tas-sopravivenza Kaplan-Meier wrew differenza sinifikanti fis-sopravivenza tat-tilqim fost l-erba 'gruppi, l-allele C tal-IL6R SNP fid-donatur baqa' assoċjat ma' riskju aktar baxx għal BPAR (Figura S2, P=0.004) . Madankollu, l-effett tas-C-allele fid-donatur kien akbar f'riċevituri li ma kellhomx huma stess dan l-allel.
Twettqet analiżi multivarjabbli biex taġġusta għal konfużjoni potenzjali (Tabella 2), inklużi karatteristiċi tad-donatur (mudell 2), karatteristiċi tar-riċevitur (mudell 3), u varjabbli tat-trapjant (mudell 4). Fl-analiżi ta 'rigressjoni ta' Cox, l-IL6R SNP fid-donatur baqa 'assoċjat b'mod sinifikanti ma' rifjut ippruvat minn bijopsija indipendenti minn konfużjoni potenzjali. Fl-aħħarnett, għamilna analiżi multivarjabbli bi proċedura ta 'għażla bil-pass 'il quddiem bl-użu tal-varjabbli kollha assoċjati ma' rifjut f'analiżi univarjabbli (Tabella 3). Fil-mudell finali, l-IL6R SNP fid-donatur, l-età tar-riċevitur u s-sess, in-numru totali ta 'nuqqas ta' tqabbil HLA, u DGF ġew inklużi. Wara l-aġġustament, l-IL6R SNP fid-donatur kien assoċjat ma' rifjut bi proporzjon ta' periklu ta' 0.73 għal kull C-allele (95 fil-mija -CI 0.62–0.{{. 17}}, P < 0.001).="" għalhekk,="" b’kollox="" dawn="" ir-riżultati="" juru="" li="" varjant="" funzjonali="" komuni="" fil-ġene="" il6r="" fid-donatur="" jassoċja="" ma’="" inċidenza="" aktar="" baxxa="" ta’="" rifjut="" akut="" ippruvat="" minn="" bijopsija="">trapjant tal-kliewi.
Varjant ġenetiku komuni f'interleukin-6 huwa fattur ta' riskju għar-rifjut ta' allograft renali.Sussegwentement, esplorajna jekk l-IL6 SNP fil-pożizzjoni -174 fil-promotur (rs1800795 G > C) taffettwax l-inċidenza tal-bijopsija-
Figura 3. Kurvi Kaplan–Meier għal sopravivenza mingħajr rifjut ta'allografts tal-kliewiskond il-preżenza tal-varjant ġenetiku interleukin-6 fid-donatur jew ir-riċevitur. Sopravivenza bla rifjut kumulattiva taallografts tal-kliewiskond il-preżenza tal-interleukin-6 polimorfiżmu (IL6) fil-pożizzjoni-174 fil-promotur (rs1800795 G > C) f'(A) id-donatur u (B) ir-riċevitur. Saret analiżi tas-sottogrupp għas-sess tad-donatur u s-sopravivenza kumulattiva mingħajr rifjut intweriet skont il-preżenza tal-IL6 SNP f'donaturi (C) irġiel u (D) donaturi nisa. Intuża test tal-log-rank biex titqabbel l-inċidenza ta 'rifjut ippruvat minn bijopsija bejn il-gruppi.
Figura 4. Dijagramma Venn tal-istatus ġenetiku IL6 u IL6R tad-donatur, ir-riċevitur u l-pari. 1271 donatur- riċeviturtrapjant tal-kliewipari ġew analizzati għall-preżenza ta' polimorfiżmu fl-interleukin-6 (IL6) f'pożizzjoni-174 fil-promotur (rs1800795 G > C) u varjant Asp358Ala fir-riċettur IL-6 (IL6R, rs2228145 A > C, qabel rs8192284). Id-dijagramma Venn turi n-numru tatrapjant tal-kliewipari bbażati fuq il-ġenotip IL6R tagħhom (A) jew il-ġenotip IL6 (B). Barra minn hekk, il-ġenotip magħqud ta 'IL6 u IL6R huma murija f'(C) id-donatur u (D) ir-riċevitur.rifjut ippruvat. Il-frekwenzi tal-ġenotip osservati fir-riċevituri (n {{0}}: GG, 37.8 fil-mija; GC, 47.0 fil-mija; CC, 14.9 fil-mija) u donaturi (n {= 1260: GG, 33.1 fil-mija; AC; , 49.3 fil-mija; CC, 16.8 fil-mija) kienu differenti b'mod sinifikanti (P = 0.049). B'mod aktar speċifiku, il-C-allele tal-IL6 SNP deher li kien aktar prevalenti fil-kliewidonaturi. Il-frekwenzi tal-IL6 SNP kemm fir-riċevituri kif ukoll fid-donaturi ma kinux differenti b'mod sinifikanti minn dawk irrappurtati mill-koorti Ewropea tal-proġett 1000 ġenoma (P=0.09 u P=0.19, rispettivament) 15 . L-analiżi Kaplan-Meier uriet li la l-IL6 SNP fid-donatur ma affettwa r-riskju ta’ rifjut (Fig. 3A, P=0.58) u lanqas l-IL6 SNP fir-riċevitur (Fig. 3B, P=0 .70). F'analiżi addizzjonali, l-IL6 SNP fir-riċevitur lanqas ma kien marbut mar-riskju ta 'rifjut ippruvat minn bijopsija fl-ewwel sena (P=0.19). Barra minn hekk, ivvalutajna jekk in-nuqqas ta' qbil bejn donatur u riċevitur għall-polimorfiżmu IL6 kellux impatt fuq ir-riskju ta' BPAR.Trapjant tal-kliewipari kienu maqsuma f'erba 'gruppi skond il-preżenza jew in-nuqqas ta' l-allele C ta 'IL6 SNP fid-donatur u r-riċevitur. L-analiżi tas-sopravivenza Kaplan-Meier ma wrew l-ebda differenza sinifikanti fis-sopravivenza mingħajr rifjut ta 'allografts tal-kliewifost l-erba’ gruppi (Figura S2; P=0.24). Imbagħad għamilna analiżi tas-sottogrupp għas-sess, peress li s-sess huwa magħruf li jaffettwa l-immunità,mard tal-kliewikif ukoll ir-riżultat tat-trapjant 16,17. Il-kurvi Kaplan-Meier wrew assoċjazzjoni sinifikanti bejn l-IL6 SNP u r-rifjut fid-donaturi maskili (Fig. 3C, P=0.015). Wara s-segwitu sħiħ, l-inċidenza ta 'rifjut ippruvat bil-bijopsija kienet 27.1 fil-mija fil-grupp ta' ġenotip GG ta 'referenza, 37.3 fil-mija fil-grupp tal-ġenotip GC eterozigoti, u 40.7 fil-mija fil-grupp tal-ġenotip CC omozigoti, rispettivament. L-ebda assoċjazzjoni ma dehret bejn l-IL6 SNP u r-rifjut f'donaturi nisa (Fig. 3D, P=0.33).Analiżi univarjata wriet li l-IL6 SNP fid-donaturi maskili kien assoċjat ma 'proporzjon ta' periklu ta '1.31 għal kull C-allele (95 fil-mija -CI 1.08–1.58; P=0.006) għal rifjut ippruvat minn bijopsija. Twettqet analiżi multivarjabbli biex taġġusta għal fatturi ta’ konfużjoni potenzjali (Tabella 2), inklużi l-karatteristiċi tad-donatur (mudell 2), il-karatteristiċi tar-riċevitur
Figura 5. Proporzjonijiet ta' periklu għall-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R fost is-sottogruppi. Plott tal-foresta tas-sotto-analiżi tal-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL-6/IL{-6R, li juri li l-proporzjonijiet tal-periklu għar-rifjut ippruvat mill-bijopsija kienukonsistenti f'sottogruppi differenti. L-unika eċċezzjoni kienet l-oriġini tad-donaturi tal-allografts tal-kliewi.L-assoċjazzjoni bejn il-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R u r-rifjut ma dehritx f'trapjanti tal-kliewiminn donaturi ħajjin. Ma dehret l-ebda interazzjoni sinifikanti bejn il-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R u l-varjabbli kliniċi differenti tas-sottogruppi. (mudell 3), u varjabbli tat-trapjant (mudell 4). Fl-analiżi tar-rigressjoni ta 'Cox, l-IL6 SNP f'donaturi rġiel baqa' assoċjat b'mod sinifikanti ma' rifjut ippruvat mill-bijopsija indipendenti minn fatturi ta' konfużjoni potenzjali. Għalhekk, jidher li varjant funzjonali f'IL6 f'donaturi maskili huwa marbut ma' inċidenza ogħla ta' rifjut ippruvat minn bijopsija waratrapjant tal-kliewi.
Tbassir ta' rifjut ippruvat mill-bijopsija.Il-preżenza magħquda tal-IL6 u IL6R SNP kienet komuni (Fig. 4A, B), kif ukoll il-preżenza tal-istess SNP fid-donatur u r-riċevitur ta 'par trapjant (Fig. 4C, D). Aħna, għalhekk, spekulajna li l-valutazzjoni tal-preżenza magħquda ta 'polimorfiżmi multipli, f'punteġġ ta' riskju ġenetiku, fil-pari donatur-riċevitur tista 'tagħti aktar informazzjoni milli teżamina l-polimorfiżmi individwalment. Biex tesplora l-kombinazzjoni ta 'IL6 u IL6R SNPs bħala tbassir ta' rifjut ippruvat mill-bijopsija, ħloqna punteġġ ta 'riskju ġenetiku taż-żewġ varjanti kemm fid-donaturi kif ukoll fir-riċevituri. Piż ġie miżjud ma 'kull SNP skond il-proporzjon ta' periklu tagħhom, u ħoloq punteġġ negattiv għal polimorfiżmi protettivi u punteġġ pożittiv għal dawk perikolużi. B'mod ġenerali, punteġġ ta' riskju ġenetiku 'l fuq minn żero jindika l-preżenza ta' SNPs aktar perikolużi f'donatur-riċevitur
punteġġi ta 'par u riskju ġenetiku taħt iż-żero jindikaw il-preżenza ta' SNPs aktar protettivi f'par donatur-riċevitur. Biex nevalwaw l-applikazzjonijiet kliniċi tal-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R, studjajna l-valur ta' tbassir ta' dan il-profil ġenetiku f'aktar dettall. Il-punteġġ tar-riskju ġenetiku kien assoċjat b'mod sinifikanti ma' rifjut ippruvat minn bijopsija kemm fil-mudell mhux raffinat (HR, 1.24; 95 fil-mija -CI 1.12–1.36; P <0.001 għal="" kull="" żieda="" sd)="" kif="" ukoll="" wara="" aġġustament="" għall-karatteristiċi="" tad-donatur,="" karatteristiċi="" tar-riċevitur,="" u="" varjabbli="" tat-trapjant="" (tabella="">
Barra minn hekk, il-proporzjon tal-periklu tal-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{{0}}/IL-6R kien konsistenti fl-analiżi tas-sottogruppi u baqa' sinifikanti (Fig. 5), ħlief f'donaturi ħajjin wara stratifikazzjoni għad-donatur tip (P=0.22). L-intervalli ta' kunfidenza tas-sottogruppi kollha wrew koinċidenza sostanzjali mal-proporzjon ta' periklu ġenerali fil-quċċata, li juru l-konsistenza tas-sejbiet bejn is-sottogruppi. Sussegwentement, ittestjajna jekk il-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R kienx tbassir aħjar għar-rifjut mill-IL6R SNP fid-donatur permezz ta' rigressjoni multivarjabbli b'għażla pass 'il quddiem (Tabella 5). Fil-mudell finali, il-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{{10}}/IL-6R ġie inkluż filwaqt li l-IL6R SNP fid-donatur ma kienx. Wara l-aġġustament, il-punteġġ tar-riskju ġenetiku fid-donatur kien assoċjat ma 'ċaħda ppruvata mill-bijopsija b'proporzjon ta' periklu ta '1.27 għal kull żieda SD (Fig. 6, 95 fil-mija -CI 1.14–1.42; P <0.{{34} }}01).="" il-prestazzjoni="" tal-punteġġ="" tar-riskju="" ġenetiku="" il-6/il-6r="" għat-tbassir="" tar-rifjut="" ġie="" vvalutat="" ukoll="" (tabella="" 6).="" il-punteġġ="" tar-riskju="" ġenetiku="" waħdu="" kellu="" harrell's="" c="" ta'="" 0.57="" (95="" fil-mija="" -ci="" 0.54–0.60).="" barra="" minn="" hekk,="" meta="" miżjuda="" ma'="" mudell="" tal-il6r="" snp="" fid-donatur="" (c-statistika,="" 0.51;="" 95="" fil-mija="" -ci="" 0.488–0.539),="" l-il-6/il{-6="" il-punteġġ="" tar-riskju="" ġenetiku="" r="" żied="" b'mod="" sinifikanti="" l-valuri="" c="" ta'="" harrell="" (żieda="" fl-istatistika="" ċ,="" 0.054;="" 95="" fil-mija="" -ci="" 0.023–0.086;="" p="0.001)." sussegwentement,="" ġew="" inklużi="" varjabbli="" addizzjonali="" u="" l-eżattezza="" diskriminattiva="" biex="" ibassar="" it-telf="" tat-tilqim="" tal-mudell="" tjiebet.="" is-c="" harrell="" tal-mudelli="" bil-karatteristiċi="" tad-donatur="" u="" l-varjabbli="" tat-trapjant="" tjiebu="" b'mod="" sinifikanti="" biż-żieda="" tal-punteġġ="" tar-riskju="" ġenetiku,="" filwaqt="" li="" dehret="" biss="" tendenza="" fil-mudell="" b'karatteristiċi="" tar-riċevitur.="" barra="" minn="" hekk,="" il-punteġġ="" tar-riskju="" ġenetiku="" il{-6/il-6r="" tejbet="" b'mod="" sinifikanti="" l-valur="" ta'="" tbassir="" tal-mudelli="" skont="" l-indiċi="" tat-titjib="" tad-diskriminazzjoni="" integrata="" (idi).="" anke="" fil-mudelli="" aġġustati="" bis-sħiħ,="" il-valur="" idi="" kien=""> 1 fil-mija, li jindika li l-IL-6/IL{{-6R tejbet sostanzjalment il-previżjoni tar-riskju għar-rifjut notevolment lil hinn mill-markaturi kliniċi użati bħalissa.
Diskussjoni
Ċaħda waratrapjant tal-kliewitibqa 'kawża importanti ta' falliment ta 'allograft li taffettwa ħafna l-morbidità 18-20. L-użu ta 'terapiji ġodda biex titnaqqas l-allosensitization huwa vitali, iżda żvilupp ġdid ta' mediċina għalkliewiit-trapjant huwa limitat 21 , u jeħtieġ l-użu mill-ġdid ta' mediċini anti-infjammatorji eżistenti approvati għal indikazzjonijiet oħra. Fost dawn hemm terapiji li jimblokkaw IL-6-, li diġà ġew approvati għat-trattament ta' mard awto-immuni 22 . Il-ġenetika umana toffri opportunità għall-validazzjoni tal-mira. Barra minn hekk, il-miri tad-droga infurmati minn evidenza ġenetika umana huma aktar minn darbtejn aktar probabbli li jwasslu għal terapewtiċi approvati 23,24. Is-sejba ewlenija tal-istudju tagħna hija assoċjazzjoni sinifikanti bejn polimorfiżmi funzjonali komuni IL6 u IL6R fid-donatur u r-riskju ta’ rifjut ippruvat mill-bijopsija waratrapjant tal-kliewi.L-estensjoni ta 'dawn is-sejbiet, punteġġ ta' riskju ġenetiku bbażat fuq iż-żewġ SNPs fid-donatur u r-riċevitur intwera li huwa determinant ewlieni ta 'rifjut ippruvat mill-bijopsija. Barra minn hekk, dan il-punteġġ tar-riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R tejjeb b'mod sinifikanti t-tbassir tar-riskju għar-rifjut lil hinn mill-fatturi ta' riskju kliniku użati bħalissa. Bħala konklużjoni, l-istudju tagħna jipprovdi evidenza ġenetika għall-effikaċja potenzjali tal-mira tal-mogħdija IL-6 fitrapjant tal-kliewiu jinkoraġġixxi l-istudju ta' inibituri tar-riċetturi IL-6 fikliewidonaturi fi provi kkontrollati randomised.
Sa fejn nafu tagħna, l-istudju tagħna huwa l-ewwel wieħed li juri li l-polimorfiżmi IL6R fid-donatur jaffettwaw ir-riskju ta’ rifjut waratrapjant tal-kliewi. Fil-qosor, sibna li għal kull kopja tal-allele C fid-donatur ir-riskju relattiv ta 'rifjut akut ippruvat minn bijopsija naqas b'27 fil-mija (90 fil-mija -CI 14-38 fil-mija). Skont ir-riżultati tagħna, l-istess allele (rs2228145-C) ġie assoċjat ma' riskji mnaqqsa ta' artrite rewmatojde u mard tal-qalb koronarju 25,26. Studju reċenti minn Bovijn u kollegi sab li dan il-varjant IL6R kien assoċjat ukoll ma' riskju aktar baxx ta' infezzjoni SARS-CoV-2, kif ukoll riskju aktar baxx ta' dħul fl-isptar għal COVID-19 27 . Studji dwar il-konsegwenzi funzjonali ta 'dan il-varjant għenu biex jifhmu l-mekkaniżmi molekulari li permezz tagħhom dan il-ġenotip IL6R jipproteġi kontra spettru wiesa' ta 'mard 28-30. Dan il-polimorfiżmu mhux sinonimu jammonta għal aktar minn 50 fil-mija tal-varjanza totali fil-livelli sIL-6R u kull kopja tal-allele C iżżid il-livelli fil-plażma ta' sIL- 6R. Għalkemm dawn l-effetti ta' dan il-varjant IL6R fuq il-livelli sIL-6R jistgħu jidhru kontradittorji, aktar investigazzjoni wriet li l-allele C simultanjament inaqqas IL-6R marbut mal-membrana fuq monoċiti u ċelluli CD4 flimkien ma' T (sa 28 fil-mija tnaqqis għal kull C-allele) 30 . Importanti, espressjoni mnaqqsa tal-wiċċ ta' IL-6R fuq il-lewkoċiti rriżultat f'riċettività ta' IL-6 imnaqqsa, kif osservat minn tnaqqis fil-fosforilazzjoni tal-fatturi ewlenin ta' traskrizzjoni STAT1 u STAT3 wara stimulazzjoni b'IL-6 30 . Evidenza addizzjonali in vivo tal-effetti anti-infjammatorji ta 'dan il-varjant IL6R intweriet bl-assoċjazzjoni ma' livelli aktar baxxi ta 'proteina C-reattiva, fibrinoġen, IL-8, u TNF- f'diversi studji 26-28,31. L-analiżi tagħna turi b'mod konvinċenti li l-varjant IL6R huwa assoċjat ma 'riskju aktar baxx ta'allograft renalirifjut. Aħna nippopolaw li dan it-tnaqqis fir-rata ta' rifjut huwa dovut għall-amplifikazzjoni ta' sIL-6R flimkien ma' gp130 li jiċċirkola, endoġenu u solubbli li jaġixxi bħala buffer biex jinnewtralizza IL-6 (Fig. 1B), u b'hekk trażżan l-infjammazzjoni kif ukoll inaqqas l-allosensitization, invarjabbilment inaqqas ir-riskju ta 'rifjut ta' allograft.
CISTANCHE SE TTEJJEB INSUFFIRIMENT TAL-KLIEI/RENALI
L-impatt tal-polimorfiżmu IL6 ~ 174G/C (rs1800795) fuq ir-riskju ta 'rifjut fost pazjenti bi trapjant ġie investigat qabel minn diversi studji 13,32-36. Metaanaliżi reċenti ta' seba' studji li jinkludu 369 każ u 679 kontroll ikkonkludiet li l-ġenotip IL6 tar-riċevitur ma kienx assoċjat b'mod sinifikanti ma' rifjut, filwaqt li dehret xejra għall-ġenotipi IL6 tad-donatur 14 . Fil-koorti tagħna ta' trapjant ta' 1271 pazjent lanqas ma sibna assoċjazzjoni bħal din mal-ġenotip IL6 tar-riċevitur. Madankollu, meta għamilna analiżi tas-sottogrupp għas-sess tad-donatur, osservajna assoċjazzjoni sinifikanti bejn l-IL6 SNP u r-rifjut f'donaturi maskili. Din id-differenza relatata mas-sess tista 'wkoll tispjega r-riżultati konfliġġenti minn studji preċedenti. Simili għall-osservazzjonijiet tagħna, oħrajn irrappurtaw dimorfiżmu tas-sess ċar fl-assoċjazzjoni ta 'dan il-polimorfiżmu IL6 mal-vulnerabbiltà għall-mard 37-39. B'mod ġenerali, l-assoċjazzjonijiet ma 'dan il-varjant IL6 kienu aktar b'saħħithom u predominantement misjuba fl-irġiel. L-istudju tagħna, għalhekk, jenfasizza li s-sess għandu jitqies fit-trapjant kif ukoll għat-terapiji mmirati lejn iċ-ċitokini. Barra minn hekk, f'konformità mar-riżultati tagħna, l-allele C ta 'dan IL6 SNP ġie assoċjat ukoll ma' riskji akbar ta 'artrite rewmatojde u mard kardjovaskulari f'meta-analiżi reċenti 40-42. Għal rs1800795, l-allele G inizjalment intqal li jżid il-livelli ta' IL-6, madankollu, xogħol reċenti żvela li l-allele C ta' dan l-SNP iwassal għal espressjoni ogħla ta' IL-6 fil-fibroblasti iżda mhux fil-lewkoċiti 43 . Brullet al. sabet profili kinetiċi differenti għal żieda ta' IL-6 wara kirurġija bbażata fuq ġenotipi IL6, li jistgħu jispjegaw riżultati konfliġġenti preċedenti 44 . Madankollu, iż-żieda ġenerali fl-IL-6 kienet aktar profonda fl-omozigoti CC. Aktar evidenza in vivo tal-effetti pro-infjammatorji tal-allele C hija murija mill-assoċjazzjoni ma 'livelli ogħla fis-serum ta' IL-6, proteina C-reattiva, u fibrinoġen fi studji multipli 45-47. B’kollox, l-istudju tagħna jżid ma’ korp dejjem jikber ta’ evidenza li jgħaqqad il-produzzjoni lokali ta’ IL-6 mal-allosensitization tar-riċevituri għalallografts tal-kliewi48,49
Tocilizumab, antikorp monoklonali umanizzat li jimmira lejn l-IL-6R, ġie vvalutat għat-trattament ta’ rifjut akut, ABMR kronika, u glomerulopatija ta’ trapjant waratrapjant tal-kliewi50–52 . Inizjalment, saret prova ta 'fażi I/II f'10 pazjenti qabeltrapjant tal-kliewili ma rrispondewx għal desensibilizzazzjoni b'Ig ġol-vini u rituximab 50 . Tocilizumab, flimkien ma' Ig ġol-vini, wassal għal tnaqqis sinifikanti fil-livelli ta' DSA u deher sikur. Ħames pazjenti ġew trapjantati u bijopsiji ta' protokoll ta' sitt xhur ma wrew l-ebda rifjut akut jew glomerulopatija ta' trapjant. Sussegwentement, saret prova open-label b'ċentru wieħed f'36 pazjent b'ABMR kroniku li ma kinux risponsivi għal Ig ġol-vini u rituximab 51 . Pazjent uallograft renaliis-sopravivenza kienet 91 fil-mija u 80 fil-mija f'6 snin, rispettivament, u dan instab li kien superjuri għall-kontrolli storiċi. Barra minn hekk, l-istabbilizzazzjoni tafunzjoni renalideher wara sentejn. Fl-aħħarnett, tocilizumab ġie investigat għat-trattament ta’ rifjut akut fi studju ta’ osservazzjoni ta’ 7trapjant tal-kliewiriċevituri 52 .Funzjoni renalistabbilizza jew tjieb fil-pazjenti kollha, iżda pazjent wieħed kellu reazzjoni potenzjali ta' sensittività eċċessiva, u pazjent ieħor żviluppa esofaġite taċ-ċitomegalovirus. Bħalissa għaddejja prova ta' kontroll randomised multiċentriku 53 . Meta wieħed iqis l-inibituri tal-IL-6 diġà qed jiġu ttestjati fi provi kliniċi, x'inhu, allura, ir-rwol tal-istudji ġenetiċi hawn? Ir-riżultati mill-istudju tagħna jipprovdu kunsiderazzjonijiet importanti għad-disinn ta’ dawn il-provi kliniċi billi jidentifikaw il-kwistjonijiet ewlenin li ġejjin biex jiġi mmirat IL-6 f’renalitrapjant: (1) Sit ta' azzjoni; (2) Differenzi tas-sess; u, (3) Għażla tal-pazjent. Sibna li l-polimorfiżmi ġenetiċi tal-mogħdija tas-sinjalar IL-6 fid-donaturi, iżda mhux ir-riċevituri, kienu assoċjati mar-riskju ta’ rifjut ippruvat minn bijopsija waratrapjant tal-kliewi. Dawn ir-riżultati jindikaw li mhux qed jiċċirkola IL-6 fir-riċevitur iżda l-espressjoni IL-6R lokali u l-produzzjoni IL-6 mid-donaturkliewihuma muturi ewlenin tal-alloimmunità għat-trapjant tal-kliewi. Dan potenzjalment jissuġġerixxi li terapiji mmirati biex jimblukkaw l-interazzjonijiet IL-6/IL-6R għandhom jiffokaw fuq id-donaturkliewibħala s-sit ta' azzjoni. Fl-aħħarnett, f'dan l-istudju, bnejna punteġġ ta' riskju ġenetiku IL{-6/IL{-6R ibbażat fuq żewġ SNPs fid-donatur u r-riċevitur. Minn perspettiva pronjostika, punteġġ ta 'riskju ġenetiku jista' jkun ta 'interess biex jiġu identifikati pazjenti f'riskju ta' rifjut ta 'allograft. Barra minn hekk, punteġġ ta' riskju ġenetiku jista' jkun ta' interess li jiġi identifikattrapjant tal-kliewipari li jibbenefikaw minn trattament kontra l-IL-6. Madankollu, meta wieħed iqis il-prestazzjoni diskriminattiva tal-mudell ta 'tbassir tagħna, fatturi addizzjonali (bħal aplotipi IL6 u IL6R) għandhom jiżdiedu biex tiżdied il-prestazzjoni ta' tbassir qabel ma tkun tista 'tintuża fil-prattika klinika.
CISTANCHE SE TTEJJEB IL-MARD TAL-KLIEWA/KLIEWA
Diversi limitazzjonijiet tal-istudju tagħna jeħtieġu konsiderazzjoni. L-ewwel, l-assoċjazzjonijiet misjuba f'dan l-istudju huma mistennija li jkunu kawżali. Madankollu, peress li l-istudju tagħna huwa prospettiv, iżda ta 'natura ta' osservazzjoni, ma jistax jiġi ppruvat mir-riżultati tagħna. It-tieni, għamilna biss analiżi ta 'SNPs funzjonali individwali u mhux għall-aplotipi IL6 u IL6R. It-tielet, kejl ta' IL-6 u sIL-6R ma sarux fil-koorti tagħna minħabba n-nuqqas ta' kampjuni tas-serum, u għalhekk il-ġenotipi ma setgħux jiġu korrelatati ma' livelli sistemiċi. Ir-raba ', ma stajniex ninvestigaw jekk l-assoċjazzjoni bejn il-varjanti IL6 u IL6R kinitx differenti għal TCR jew ABMR, minħabba n-nuqqas ta' analiżi standardizzata matul is-snin għad-determinazzjoni ta 'DSA. Fl-aħħar nett, il-klassifikazzjoni Banff 2007 intużat għad-dijanjosi istopatoloġiċi, li hija verżjoni eqdem. Il-klassifikazzjoni ta' Banff għaddiet minn diversi reviżjonijiet mill-2007, prinċipalment relatati mal-kriterji għall-ABMR. L-introduzzjoni ta' ABMR C4d-negattiv fil-klassifikazzjoni ta' Banff 2013 kellha impatt sinifikanti fuq in-numru ta' dijanjosi ABMR b'mod ġenerali 54 . Għaldaqstant, il-koorti tagħna m'għandhiex każijiet C4d-negattivi ta 'ABMR. Min-naħa l-oħra, is-saħħiet ewlenin tal-istudju tagħna huma d-daqs kbir tal-kampjun, analiżi statistika robusta (inkl. analiżi tas-sottogrupp), u l-endpoint iebes u klinikament rilevanti, jiġifieri r-rifjut ippruvat bil-bijopsija. Bħala konklużjoni, sibna li l-varjanti IL6 u IL6R fid-donatur jassoċjaw mar-riskju li tiżviluppa rifjut ippruvat mill-bijopsija waratrapjant tal-kliewi.Dawn is-sejbiet jimplikaw effikaċja potenzjali li timmira s-sinjalar IL-6 ġewwatrapjant tal-kliewi. Provi kkontrollati randomised kontinwi b'inibituri IL-6 jew IL-6R huma meħtieġa biex jiġu identifikati l-aħjar settings, inkluż iż-żmien tal-intervent u l-għażla tal-pazjent, li fihom dawn l-aġenti jistgħu jkunu effettivi.
