Cistanche Tubulosa Induċi Apoptożi medjata mill-Ispeċi tal-Ossiġenu Reattiv taċ-Ċelloli Primarji U Metastatiċi tal-Kanċer tal-Kolon Uman

Afnan Saleh Al-Menhali, Safia Ali Jameela, Aishah A. Latiff, Mohamed A. Elrayess, Mohammed Alsayrafi, Morana Jaganjac

Anti Doping Lab Qatar, Tossikoloġija u Multipurpose, Doha, Qatar.

Anti Doping Lab Qatar, Riċerka tax-Xjenza tal-Ħajja, Doha, Qatar.

Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com

ASTRATT

Il-kanċer tal-kolon huwa t-tielet l-aktar kanċer komuni madwar id-dinja. It-terapiji konvenzjonali wrew effikaċja moderata b'effetti avversi severi, għalhekk hemm ħtieġa urġenti għal alternattivi aktar sikuri. F'dan l-istudju,Cistanchetubulosa, isem lokali Thanoon, kien meqjus bħala strateġija fitoterapewtika potenzjali minħabba l-potenzjal terapewtiku għoli magħruf tiegħu fil-mediċina tradizzjonali u abbundanza wiesgħa fir-reġjun tal-Lvant Nofsani. Komposti bijoattivi ġew estratti minn trabCistanchetubulosau ttestjati għall-proprjetajiet kontra l-kanċer tagħhom kontra erba 'kolonkanċerlinji taċ-ċelluli inklużi tnejn derivati ​​mit-tumur primarju (CaCo2 u HCT116) u tnejn derivati ​​mis-sit metastatiku (LoVo u SW620). L-effett ta 'Cistanchetubulosadwar l-induzzjoni ta 'apoptożi u omeostażi redox ċellulari ġiet investigata wkoll.Cistanchetubulosawera konċentrazzjoni u inibizzjoni dipendenti fuq il-ħin tal-proliferazzjoni tal-linji taċ-ċelluli tal-kanċer ittestjati kollha b'aktar minn 60 fil-mija fuq 72 siegħa ta 'trattament b'1 mg/mL ta' estratt mhux raffinat. L-inibizzjoni tal-proliferazzjoni kienet immarkata minn induzzjoni ta 'apoptożi, produzzjoni ta' speċi ta 'ossiġnu reattiv intraċellulari, u superossidi mitokondrijali. Din id-dejta tissuġġerixxi li Cistanche tubulosa hija kandidat promettenti għal terapija addittiva kontra l-kanċer tal-kolon. Dan huwa l-ewwel studju li juri l-bijoattività kontra l-kanċer ta’ Cistanche tubulosa kontra ċ-ċelloli tal-kanċer tal-kolon.

L-ingredjent attiv ta 'Cistanchegħandhakontra l-kanċereffett

Abbrevjazzjonijiet:

7-AAD, 7-Amino-Actinomycin D;

CTE,Cistancheestratt ta' tubulosa;

EMEM, il-Medju Essenzjali Minimu tal-Ajkla;

FBS, serum bovin tal-fetu; DCF, 2,7-diklorofluworexxeina;

DCFH-DA, 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate;

DMEM, Dulbecco's Modified Eagle's Medium;

DMSO, dimethylsulfoxide; MTT, 3-[4,5-dimethylthiazol-2-il]-2,5-diphenyltetrazolium;

PE, Phycoerythrin; RFU, unitajiet ta' fluworexxenza relattiva;

ROS, speċi ta' ossiġnu reattiv

INTRODUZZJONI

Il-kanċer tal-kolorektum huwa wieħed mill-aktar kanċers komuni madwar id-dinja (Brenner et al., 2014), u l-inċidenza tiegħu qed tiżdied b'mod kostanti b'madwar 2.4 miljun każ fl-2035, minħabba dieta u stil ta 'ħajja moderni, flimkien ma' attività fiżika mnaqqsa. L-isforzi attwali mhumiex biżżejjed biex tiġi miġġielda l-epidemija preżenti tal-kanċer tal-kolorektum u għalhekk huma meħtieġa approċċi ġodda għall-prevenzjoni u t-trattament effettivi inklużi bidliet fl-istil tal-ħajja flimkien ma’ interventi alternattivi aktar sikuri bħall-Fitoterapewtiċi (Weidner et al., 2015). Il-fitoterapija, l-użu ta 'pjanti mediċinali għall-kura tal-mard, kienet parti inevitabbli mill-istorja tal-bniedem antika. Pjanti mediċinali ilhom jintużaw bħala sorsi ta 'trattament alternattivi għall-kanċer, li jirrappreżentaw aktar minn sittin fil-mija ta' aġenti kontra l-kanċer użati fil-mediċina konvenzjonali (Balunas u Kinghorn, 2005; Saibu et al., 2015). Uħud mill-eżempji l-aktar magħrufa jinkludu estratti minn Catharanthus roseus G. Don. (Apocynaceae), Taxus baccata L. (Taxaceae) u Camptotheca acuminate Decne (Nyssaceae) (Cragg u Newman, 2005; da Rocha et al., 2001). Diversi estratti tal-ħxejjex u fitokimiċi intwerew li jeżerċitaw effetti antitumorali fil-kanċer tal-kolorektum attribwiti għall-induzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) u apoptosi assoċjata ta 'ċelluli tal-kanċer bħala l-każ ta' estratti minn Melissa officinalis (Weidner et al., 2015).

Cistanchedeserticola għandu l-effett li jinibixxiċellulaapoptożi

Fost il-kandidati fitoterapewtiċi,Cistanchetubulosa, pjanta parassitika tad-deżert Orobanchaceae (Jiang et al., 2009) li hija mqassma b'mod wiesa 'f'reġjuni aridi u semi-aridi tal-Afrika, l-Asja, u r-reġjun tal-Mediterran, intwera li għandha proprjetajiet mediċinali siewja.Cistanchetubulosa intużat b'mod estensiv fil-mediċina tradizzjonali u ssuġġerit li jkollu effetti kurattivi f'defiċjenza tal-kliewi, lewkorrea morbosa, metrorraġija, infertilità femminili, u stitikezza senile (Jiang et al., 2009). Minbarra l-użi mediċinali tradizzjonali tagħha, proprjetajiet mediċinali importanti ta ' Cistanche Tubulosa ġew studjati b'mod intensiv matul l-aħħar għaxar snin inkluż vasorelaxant (Yoshikawa et al., 2006), epatoprotective (Morikawa et al, 2010), effetti anti-ipergliċemiċi u ipolipidemiċi (Xiong et al., 2013). Cistanche Tubulosawas huwa ssuġġerit ukoll bħala tisħiħ qawwi tas-sistema immuni, promotur tal-formazzjoni tal-għadam, u aġent kontra t-tixjiħ u kontra l-għeja (Xu et al., 2014). Barra minn hekk, l-estratt ta 'Cistanche tubulosa intwera li jimblokka d-depożizzjoni ta' amilojde fil-mudell tal-marda ta 'Alzheimer (Wu et al., 2015). Minkejja l-użi terapewtiċi varji tiegħu, l-effett ta 'Cistanche Tubulosa bħala aġent potenzjali kontra l-kanċer għadu ma ġiex studjat.

Fix-xogħol preżenti, investigajna l-effett kontra l-kanċer taCistancheTubulosa fuq żewġ linji taċ-ċelluli primarji u żewġ metastatiċi tal-kanċer tal-kolon u l-mekkaniżmi potenzjali sottostanti dan l-effett.

MATERJALI U METODI

Ġbir u preparazzjoni ta 'estratt tal-pjanti

Il-kampjuni taCistanchetubulosa inġabru miż-żoni tad-deżert fil-Qatar matul l-2014 u l-awtentiċità tal-pjanta ġiet ikkonfermata minn herpetologist. Kampjuni ta’ vawċers huma arkivjati fid-Dipartiment tat-Tossikoloġija u Multipurpose fl-ADLQ. Il-kampjuni tal-pjanti mnixxfa fix-xemx ġew mitħun b'Retsch Knife Mill Grindomix GM300 fi trab fin. Għoxrin gramma ta 'trab ġew estratti b'200 mL ilma ultrapur matul il-lejl f'37 grad fuq shaker li jdur f'200 pm. Il mhux raffinatCistancheestratti tubulosa (CTE) ġew ċentrifugati għal 30 min f'8000 rpm għal gerbub ta 'komposti li ma jinħallux, supernatant miġbura, u mnixxfa bil-friża bl-użu ta' Labconco Freezone 6 plus Freeze dryer. L-estratt imnixxef ġie rikostitwit f'Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, SIGMA, il-Ġermanja) għal konċentrazzjoni ta '20 mg/mL u sterili ffiltrat permezz ta' filtru tal-membrana ta '0.2-mikron.

Linji taċ-ċelluli u manutenzjoni taċ-ċelluli

Linji taċ-ċelluli tal-karċinoma tal-kolon tal-bniedem CaCo2, SW620, u LoVo nkisbu minn Cell Lines Service (CLS, Eppelheim, il-Ġermanja) filwaqt li l-linja taċ-ċelluli HCT 116 kienet rigal tip mix-Xjenzi Bijoloġiċi u Ambjentali, Dipartiment fl-Università tal-Qatar. CaCo2 u HCT11 ġew derivati ​​mis-sit primarju tal-karċinoma tal-kolon filwaqt li SW620 u LoVo ġew derivati ​​mis-sit metastatiku. Iċ-ċelloli SW620, HCT116 u LoVo ġew ikkultivati ​​u miżmuma f'DME Medium filwaqt li ċ-ċelloli CaCo2 inżammu fil-Medju Essenzjali Minimu ta' Eagle (EMEM, SIGMA, il-Ġermanja). Iċ-ċelloli tkabbru bħala monosaff ikkultivat f'37 grad f'medju rispettiv supplimentat b'10 fil-mija serum bovin tal-fetu (FBS, SIGMA, Ġermanja) u 1 fil-mija Peniċillina/Streptomycin (SIGMA, Ġermanja) f'atmosfera umidifikata li fiha 5 fil-mija dijossidu tal-karbonju.

Assaġġ tal-vijabbiltà taċ-ċelluli

L-assaġġ {{0}}[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,{5-diphenyltetrazolium (MTT) intuża biex jevalwa l-attività ċitotossika ta' CTE bl-istess mod kif deskritt qabel (Jaganjac et al., 2010). Id-densità taż-żrigħ taċ-ċelluli CaCo2, HCT116, SW620, u LoVo kkultivati ​​fi 96-pjanċi bir-bir kienet 104ċelluli kull bir. Iċ-ċelloli ġew ibbanjati f'medju rispettiv supplimentat b'10 fil-mija FBS 24 siegħa qabel it-trattament. Wara 24 siegħa, il-medju tneħħa u ċ-ċelloli ġew ittrattati b'0, 0.25, 0.5, 1, u 2 mg/mL ta 'CTE għal 24, 48, u 72 siegħa f'37 grad f'atmosfera umidifikata li fiha 5 fil-mija CO2. Mat-trattament CTE, il-medju tneħħa u 40 µL ta 'soluzzjoni MTT (0.5 mg/mL) ġew miżjuda ma' kull bir.

Wara 3 sigħat ta 'inkubazzjoni, soluzzjoni MTT tneħħiet, il-prodott formazan maħlul f'dimethylsulfoxide (DMSO, SIGMA, il-Ġermanja), u l-assorbiment tkejjel f'590 nm b'qarrej tal-mikroplate (Infinite 200 PRO NanoQuant, Tecan Trading AG, Iżvizzera).

Assaġġ tal-apoptożi

L-apoptożi fiċ-ċelloli CaCo2, HCT116, SW620, u LoVo ġiet skoperta bl-użu tal-PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I b'7-Amino-Actinomycin D (7-AAD) bħala żebgħa vitali (Becton Dickinson International, il-Belġju) skond l-istruzzjoni tal-manifattur. Fil-qosor, iċ-ċelloli ġew miżrugħa fi 24-pjanċi bir-bir f'densità ta '5 × 104 ċelluli/bir f'midja rispettiva supplimentata b'10 fil-mija FBS għal 24 siegħa qabel iż-żieda ta' CTE (0, 0.5, jew 1 mg/mL). Wara l-inkubazzjoni ta '24 CTE, iċ-ċelluli ġew maħsuda, maħsula darbtejn b'salina kiesħa b'buffer bil-fosfat, u mtebbgħin b'Phycoerythrin (PE) Annexin V u 7-AAD għal 15-il minuta f'temperatura ambjentali fid-dlam. Iċ-ċelloli mtebbgħin ġew analizzati fi żmien siegħa permezz ta 'ċitometrija tal-fluss bl-użu ta' FACS. Ċitometru tal-fluss Aria III u softwer FACSDiva (Becton Dickinson) b'rata ta 'fluss baxxa b'minimu ta' 104ċelluli. Trattament taċ-ċelloli għal 4 sigħat b'6 µM camptothecin (SIGMA) intuża bħala kontroll pożittiv għall-assaġġ.

Produzzjoni ta' ROS intraċellulari

Il-produzzjoni intraċellulari ta' ROS ġiet eżaminata bl-użu ta' 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA, SIGMA, il-Ġermanja). DCFH-DA hija sonda mhux fluworexxenti, li hija ossidizzata b'ROS intraċellulari għall-kompost fluworexxenti 2,7-dichlorofluorescein (DCF) (Poljak-Blazi et al., 2011). L-assaġġ DCFH DA sar bl-istess mod kif iddeskrivejna qabel (Cindric et al, 2013; Poljak-Blazi et al., 2011). Fil-qosor, id-densità taż-żrigħ taċ-ċelloli CaCo2, HCT116, SW620 u LoVo kkultivati ​​fi 96-pjanċi sewda sew kienet 104ċelluli kull bir. Iċ-ċelloli ġew ibbanjati f'medju rispettiv supplimentat b'10 fil-mija FBS għal 24 siegħa. Qabel ma ċ-ċelloli tat-trattament ġew inkubati b'10 µM DCFH-DA f'37 grad għal 30 min f'5 fil-mija CO2/ 95 fil-mija arja. Iċ-ċelloli mbagħad ġew maħsula u ttrattati b'0, 0.5, u 1 mg/mL ta 'CTE fil-medja w/o phenol red. Il-formazzjoni ta 'ROS intraċellulari ġiet immonitorjata kontinwament matul 25 siegħa f'37 grad u 5 fil-mija CO2 bl-użu ta' qarrej ta 'mikroplate b'modulu ta' kontroll tal-fluworexxenza ta 'fuq u tal-gass (Infinite 200 PRO, Tecan Trading AG, Iżvizzera). L-intensità tal-fluworexxenza kienet imkejla b'tul ta 'mewġ ta' eċċitazzjoni ta '500 nm u skoperta ta' emissjoni f'529 nm. L-unitajiet arbitrarji, unitajiet ta 'fluworexxenza relattiva (RFU), kienu bbażati direttament fuq l-intensità tal-fluworexxenza.

Ġenerazzjoni ta' superossidu mitokondrijali

Il-kapaċità ta 'CTE li jinduċi ġenerazzjoni ta' superossidu mill-mitokondrija ġiet stmata bl-użu ta 'sonda MitoSOX Red MitoSOX (Life Technologies) u Hoechst 33342 permeabbli għaċ-ċelluli, immirata lejn il-mitokondrija u Hoechst 33342 għal tbajja nukleari (Life Technologies). Iċ-ċelluli CaCo2, HCT116, SW620, u LoVo ġew miżrugħa fi 96-pjanċi ta 'bir b'densità ta' 104 ċelluli għal kull bir f'medju rispettiv supplimentat b'10 fil-mija FBS għal 24 siegħa. Iċ-ċelloli mbagħad ġew mgħobbija b'4 µM ta 'MitoSOX u 2 µM ta' Hoechst 33342 għal 20 min, żebgħa żejda maħsula, u bjar ittrattati b'0, 0.5, u 1 mg/mL ta 'CTE għal 24 siegħa f'37 grad u 5 fil-mija CO2. L-intensità tal-fluworexxenza kienet imkejla b'tul ta 'mewġ ta' eċċitazzjoni ta '510 nm u skoperta ta' emissjoni f'580 nm għal MitoSOX u tul ta 'mewġ ta' eċċitazzjoni ta '350 nm u skoperta ta' emissjoni f'461 nm għal Hoechst 33342 bl-użu ta 'qarrej ta' microplate bl-aqwa fluworexxenza PRO, AG, l-Isvizzera).

Analiżi statistika

L-istatistika deskrittiva ntweriet bħala l-medja plus /- SD. Is-sinifikat tad-differenzi bejn il-gruppi ġie vvalutat bl-użu tat-test t Student u t-test Chi-square. Meta tqabblu aktar minn żewġ gruppi, użajna ANOVA fuq naħa waħda b'ittestjar post hoc xieraq. Intuża l-SPSS 11.01 għall-Mircosoft Windows. Differenzi b'P inqas minn 0.05 tqiesu statistikament sinifikanti.

Cistanchegħandhakontra l-kanċerproprjetajiet u jtejjebimmunità

RIŻULTATI

L-effett ta 'CTE fuq il-proliferazzjoni ta' linji taċ-ċelluli tal-kanċer tal-kolon uman huwa muri fil-Figura 1. Il-konċentrazzjonijiet CTE kollha ttestjati wrew effett inibitorju qawwi fuq il-linja taċ-ċelluli CaCo2 b'mod dipendenti fuq il-konċentrazzjoni u l-ħin (Figura 1A). Tnejn u sebgħin siegħa ta’ trattament CTE inibixxi t-tkabbir taċ-ċelloli CaCo2 b’aktar minn 60 fil-mija meta mqabbel mal-kontroll (p <0.05 għall-konċentrazzjonijiet="" kollha).="" l-impatt="" sinifikanti="" tat-trattament="" cte="" fuq="" it-tkabbir="" taċ-ċelluli="" hct116="" ġie="" skopert="" ukoll="" fil-punti="" ta’="" kull="" żmien="" fl-ogħla="" żewġ="" konċentrazzjonijiet="" (1="" mg/ml="" u="" 2="" mg/ml),="" li="" laħaq="" tnaqqis="" akbar="" minn="" 70="" fil-mija="" f’dawn="" tal-aħħar.="" konċentrazzjoni="" (figura="" 1b,="" p=""><0.05). għalkemm="" iż-żewġ="" konċentrazzjonijiet="" ta'="" cte="" aktar="" baxxi="" (0.25="" u="" 0.5="" mg/ml)="" naqqsu="" b'mod="" sinifikanti="" t-tkabbir="" taċ-ċelloli="" hct116="" wara="" 24="" siegħa=""><0.05), they="" had="" no="" significant="" effect="" following="" 72="" hours="" treatment="" compared="" to="" control="" (p="">{{0}}.{{10}}5). L-inibizzjoni tal-proliferazzjoni dipendenti fuq iż-żmien u l-konċentrazzjoni b'CTE ġiet ikkonfermata aktar fiċ-ċelloli LoVo b'aktar minn 60 fil-mija fl-ogħla konċentrazzjoni (p <0.05) (figura="" 1c)="" ,="" u="" l-erba="" 'konċentrazzjonijiet="" cte="" ttestjati="" naqqsu="" t-tkabbir="" taċ-ċelloli="" sw620="" wara="" 48="" siegħa="" (figura="" 1d,="" p=""><0.05 għal="" kulħadd).="" wara="" 72="" siegħa="" ta'="" kura="" l-istess="" effett="" kien="" osservat="" biss="" għall-ogħla="" żewġ="" konċentrazzjonijiet="" (p="">< 0.05)="" filwaqt="" li="" konċentrazzjonijiet="" ta'="" 0.25="" u="" 0.5="" mg/ml="" ma="" wrew="" l-ebda="" effett="" sinifikanti="" meta="" mqabbla="" mal-kontroll="" (p=""> 0.05). L-impatt ta 'trattament CTE ta' 0.5 u 1 mg/mL fuq l-induzzjoni ta 'apoptożi ġie ttestjat aktar fl-erba' linji taċ-ċelluli kollha (Figura 2). Żieda fin-numru ta’ ċelluli fl-apoptosi bikrija ġiet skoperta f’HCT116 u LoVo wara trattament ta’ 24 siegħa b’0.5 mg/mL (p<0.05, figure="" 2b="" and="" 2c)="" and="" in="" all="" cell="" lines="" at="" 1="" mg/ml=""><0.05). a="" significant="" increase="" in="" necrotic="" or="" late="" apoptotic="" cell="" number="" was="" further="" observed="" in="" caco2="" and="" sw620="" cell="" lines=""><0.05, figure="" 2a="" and="" 2d).="" the="" ability="" of="" cte="" to="" induce="" intracellular="" ros="" production="" is="" demonstrated="" in="" figure="" 3.="" three="" hours="" following="" cte="" treatment="" there="" was="" a="" strong="" increase="" in="" intracellular="" ros="" production="" in="" all="" cell="" lines=""><0.05). the="" intracellular="" ros="" production="" increased="" progressively="" throughout="" the="" 25="" hours="" of="" treatment="" in="" a="" time="" and="" concentration-dependent="" manner.="" furthermore,="" staining="" of="" cells="" with="" mitochondria-targeted="" probe="" revealed="" a="" strong="" impact="" of="" cte="" on="" mitochondrial="" superoxide="" production="" in="" a="" concentration-dependent="" manner="" (figure="" 4).="" the="" highest="" increase="" in="" superoxide="" production="" by="" mitochondria="" was="" observed="" in="" hct116="" (69%,="" figure="" 4b)="" and="" lovo="" cells="" (82%,="" figure="" 4c)="" following="" 24="" hours="" of="" treatment="" with="" 1="" mg/ml="" of="">

DISKUSSJONI

Għalkemm studji preċedenti rrappurtaw bosta proprjetajiet mediċinali ta 'Cistanchetubulosa, dan huwa l-ewwel rapport tal-effett anti-proliferattiv tiegħu fiċ-ċelloli malinni. Komposti bijoattivi ta 'Cistanchetubulosa estratti bl-ilma, solvent polari ħafna, urew bijoattività qawwija kontra l-kanċer. Qabel qabbilna l-effiċjenza ta 'Cistanchetubulosa solubilizzata fl-ilma kontra solventi oħra bħal metanol u aċetat etiliku, iżda estratti tal-ilma wrew l-aktar attivitajiet promettenti kontra l-kanċer (dejta mhux murija).

Aħna wrejna l-kapaċità ta 'CTE f'1 mg/mL u 2 mg/mL li jinibixxi 60 fil-mija tat-tkabbir ta' kemm linji taċ-ċelluli tal-kanċer tal-kolon primarju kif ukoll metastatiku, li jiżvelaw rwol potenzjalment importanti ta 'Cistanche tubulosa bħala trattament tal-kanċer tal-kolon. Meta mqabbla maċ-ċelloli normali, iċ-ċelloli tal-kanċer huma ġeneralment ikkaratterizzati minn disturb fl-omeostażi redox u strateġija komuni tat-terapiji attwali kontra l-kanċer hija li żżid l-istress ossidattiv ċellulari (Yang et al, 2013). Għalkemm livelli fiżjoloġikament baxxi ta 'ROS għandhom rwol importanti bħala molekuli ta' sinjalazzjoni, produzzjoni eċċessiva ta 'ROS tista' tikkontribwixxi għall-instabilità tal-kanċer u l-malinn (Liou and Storz, 2010). Paradossalment, dan l-iżbilanċ fl-omeostażi redox ċellulari jirrendi ċ-ċelloli tal-kanċer aktar vulnerabbli għall-mewt taċ-ċelluli indotta minn ROS (Jaganjac et al., 2008; Nogueira and Hay, 2013). L-effett anti-proliferattiv ta 'CTE irrappurtat f'dan l-istudju jista' jiġi medjat minn diversi mekkaniżmi extra- u intraċellulari ta 'komposti magħrufa u mhux magħrufa fi ħdan l-estratt, li jimmiraw mogħdijiet multipli li għandhom rwoli essenzjali fl-apoptosi. Biex niddifferenzjaw bejn modi differenti ta 'mewt taċ-ċelluli, investigajna l-mekkaniżmu potenzjali responsabbli għaċ-ċitotossiċità osservata kkawżata mis-CTE.

Id-dejta tagħna tindika li CTE żżid il-produzzjoni ta 'ROS intraċellulari u konsegwentement mewt taċ-ċelluli indotta minn ROS. L-istat Redox taċ-ċellula għandu wkoll rwol kruċjali fir-regolazzjoni tal-apoptożi u l-katina tat-trasport tal-elettroni mitokondrijali hija waħda mis-siti ewlenin tal-ġenerazzjoni ROS ċellulari (Trachootham et al., 2008). Barra minn hekk, l-ROS intraċellulari jista 'jikkawża apoptożi ċellulari kemm permezz ta' mogħdijiet dipendenti mill-mitokondrija kif ukoll indipendenti (Sinha et al., 2013). Tabilħaqq, id-dejta tagħna tindika wkoll li l-esternalizzazzjoni tal-fosfatidilserina indotta minn CTE, effett komuni fl-apoptożi, kemm fil-linji taċ-ċelluli tal-kanċer primarji kif ukoll metastatiċi, li tissuġġerixxi li l-mekkaniżmu tal-mewt indotta minn CTE huwa medjat minn apoptożi aktar milli minn nekrożi. L-attivazzjoni tal-apoptożi fiċ-ċelloli tal-kanċer hija strateġija korrettiva u ħafna mediċini kontra l-kanċer jistgħu jeżerċitaw effetti apoptotiċi fiċ-ċelloli tal-kanċer.

Komposti jew estratti b'attivitajiet pro-apoptotiċi fiċ-ċelloli tal-kanċer huma għalhekk potenzjalment utli fir-riċerka tad-droga kontra l-kanċer (Wong, 2011). Biex niddeterminaw jekk l-effett pro-apoptotiku indott minn CTE huwiex medjat mill-mekkaniżmu ROS indott mill-mitokondrija, kejlna l-produzzjoni tas-superossidu bl-użu tas-sonda fluworexxenti mmirata lejn il-mitokondrija f'ċelloli ttrattati b'CTE. Id-dejta tagħna turi b'mod ċar li CTE jistimula l-produzzjoni ta 'superossidu mitokondrijali li jissuġġerixxi li l-attività kontra l-kanċer ta' Cistanche tubulosa hija mill-inqas parzjalment medjata permezz tal-mekkaniżmu ROS indott mill-mitokondrija.

Cistanchegħandhakontra l-kanċerufwiedprotezzjonieffetti

KONKLUŻJONIJIET

Bħala konklużjoni, id-dejta tagħna tissuġġerixxi li l-estratt tal-ilma tal-pjanta tad-deżert Cistanche tubulosa jista 'jirrappreżenta kandidat promettenti għal approċċ kontra l-kanċer flimkien ma' terapiji konvenzjonali oħra għall-prevenzjoni u t-trattament tal-kanċer tal-kolon. Aħna nuru wkoll li t-tossiċità tal-estratt tal-pjanti kontra ċ-ċelluli tal-kanċer hija medjata minn żieda fil-produzzjoni ta 'ROS intraċellulari u, għall-inqas parzjalment, minn apoptosi dipendenti mill-mitokondrija. Għaddejjin aktar studji biex jiġu iżolati u kkaratterizzati l-kostitwenti bijoloġikament attivi individwali responsabbli għall-attività kontra l-kanċer.

Hemm bżonn ta 'aktar riċerka biex jiġi evalwat l-użu potenzjali ta' dan l-estratt bħala aġent kimopreventtiv effettiv u biex jifhmu l-mekkaniżmi ta 'azzjoni fuq iċ-ċelloli tal-kanċer tal-kolon fil-livell molekulari. Jinħtieġu wkoll aktar studji prekliniċi u kliniċi biex jikkonfermaw l-effetti ta 'benefiċċju għas-saħħa osservati ta' Cistanche tubulosa għall-prevenzjoni tal-kanċer.

RIKONOXXIMENTI

Appoġġ finanzjarju u sponsorizzazzjoni

Dan l-istudju kien appoġġjat mill-Anti-Doping Lab Qatar.

Kunflitt ta' Interessi:

L-awturi ma jiddikjaraw l-ebda kunflitt ta' interess.

REFERENZI

Balunas MJ, Kinghorn, AD. Skoperta tad-droga minn pjanti mediċinali. Ħajja Sci. 2005;78:431-41.

Brenner H, Kloor M, Pox CP. Kanċer tal-kolorektum. Lancet 2014;383,1490-502.

Cindric M, Cipak A, Zapletal E, Jaganjac M, Milkovic L, Waeg G, Stolc S, Zarkovic N, Suzana Borovic S. Stobadine attenwa l-indeboliment ta 'mudell ta' barriera intestinali kkawżata minn 4-hydroxynonenal. Toxicol In Vitro. 2013;27:426-32.

Cragg GM, Newman DJ. Pjanti bħala sors ta' aġenti kontra l-kanċer.J Ethnopharmacol. 2005;100:72-9.da

Rocha AB, Lopes RM, Schwartsmann G. Prodotti naturali fit-terapija kontra l-kanċer. CurrOpinPharmacol. 2001;1:364-9.

Jaganjac M, Matijevic T, Cindric M, Cipak A, Mrakovcic L, Gubisch W, Zarkovic N. Induzzjoni tal-promotur CMV-1 minn 4-hydroxy-2-nominali fiċ-ċelloli tal-kliewi tal-embrijuni tal-bniedem. Acta Biochim Pol. 2010;57:179-83.

Jaganjac M, Poljak-Blazi M, Zarkovic K, Schaur RJ, Zarkovic N. L-involviment tal-granuloċiti f'rigressjoni spontanja tal-karċinoma Walker 256. Kanċer Lett. 2008;260:180-6.

Jiang Y, Tu PF. Analiżi ta 'kostitwenti kimiċi fl-ispeċi Cistanche.... J Chromatogr A. 2009;1216:1970-9.Liou GY, Storz P. Speċi ta 'ossiġnu reattiv fil-kanċer. Free Radic Res. 2010;44:479-96.

Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O. Acylated phenylethanoid oligoglycosides b'attività epatoprotective mill-pjanta tad-deżert Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem. 2010;18:1882-90.

Nogueira V, Hay N. Mogħdijiet molekulari: omeostażi ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv fiċ-ċelloli tal-kanċer u implikazzjonijiet għat-terapija tal-kanċer. Clin Cancer Res. 2013;19:4309-14.

Poljak-Blazi M, Jaganjac M, Sabol I, Mihaljevic B, Matovina M, Grace M. Effett ta 'joni ferriku fuq il-formazzjoni ta' speċi ta 'ossiġnu reattiv, tkabbir ta' linji taċ-ċelluli tal-kanċer ċervikali u espressjoni ta 'onkoġen E6/E7. Toxicol In Vitro. 2011;25:160-6.

Saibu GM, Katerere DR, Rees DJG, Meyer M. Effetti ċitotossiċi u pro-apoptotiċi in vitro ta 'estratti ta' ilma ta 'weraq u basal ta' Tulbaghia violacea. J Ethnopharmacol. 2015;164:203-9.

Sinha K, Das J, Pal PB, Sil PC. Stress ossidattiv: il-mogħdijiet ta 'apoptożi dipendenti mill-mitokondrija u indipendenti mill-mitokondrija. Arch Toxicol.2013; 87:1157-80.

Trachootham D, Lu W, Ogasawara MA, Nilsa RD, Huang P. Regolament Redox tas-sopravivenza taċ-ċelluli. Sinjal Antioxid Redox. 2008;10:1343-74.

Weidner C, Rousseau M, Plauth A, Wowro SJ, Fischer C, Abdel-Aziz H, Sauer S. Melissa officinalis estratt jinduċi apoptożi u jinibixxi proliferazzjoni fiċ-ċelloli tal-kanċer tal-kolon permezz tal-formazzjoni ta 'speċi ossiġnu reattivi. Fitomediċina. 2015;22:262-70.

Wong RS. Apoptożi fil-kanċer: mill-patoġenesi għat-trattament. J Exp Clin Cancer Res. 2011;30:87.

Wu SH, Chou FP, Chyau CC, Chen JH, Tu SF, Lin HH. Effetti kontra l-kanċer tal-estratt ta' Wasabia japonica fiċ-ċelloli tal-kanċer tal-fwied Hep3B permezz ta' akkumulazzjoni ta' ROS, ħsara fid-DNA, u apoptożi p73-medjata. J Funct Ikel. 2015;14:445-55.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX, Liu X. Effetti antihyperglycemic u ipolipidemiċi ta 'Cistanche tubulosa fil-ġrieden DB/DB dijabetiċi tat-tip 2. J Ethnopharmacol. 2013;150:935-45

Xu R, Sun S, Zhu W, Xu C, Liu Y, Shen L, Shi Y, Chen J. Karatteristiċi ta 'makro-marki tas-swaba' infra-aħmar f'diversi stadji ta 'estratti ta' etanol minn speċi Cistanche differenti fiċ-Ċina flimkien ma 'marki tas-swaba' HPLC. J Mol Struct. 2014;1069:236-244.

Yang Y, Karakhanova S, Werner J, Bazhin AV. Speċi ta 'ossiġnu reattiv fil-bijoloġija tal-kanċer u terapija kontra l-kanċer. Curr Med Chem. 2013;20:3677-92.

Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Phenylethanoid oligoglycosides u acylated oligosugars b'attività vasorelaxant minn Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem. 2006;14:7468-75.