Identifikazzjoni Komprensiva U Analiżi Kimika Ta' Cistanche Senegalensis Selvaġġ fil-Kenja: Morfoloġija, Barcoding tad-DNA, U Fitokimika

2. Identifikazzjoni Molekulari permezz tal-Barcoding tad-DNA

Identifikazzjoni molekulari tas-selvaġġKampjuni ta' Cistanche mill-Kenjau l-pjanti ospitanti tagħhom twettqu bl-użu ta 'żewġ pari ta' primers, ITS2F/ITS3R u psbA-trnH [11]. Iż-żewġ kampjuni ta' Cistanche selvaġġi Kenjan ġew imqabbla b'suċċess bħalaCistanche tubulosafis-sistema tal-barcode tad-DNA tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża, b'xebh ta 'sekwenza ta' 96.7%. Fid-database GenBank, is-sekwenzi qabblu speċi multipli, li juru xebh ta '100% ma'Cistanche senegalensis u aktar minn 98% xebh ma 'Cistanche tubulosa. L-impjant ospitanti ma qabbel l-ebda rekord fis-sistema tal-barcode tad-DNA tal-Mediċina Tradizzjonali Ċiniża iżda wriet xebh għoli (97.55%) mal-ispeċi AmaranthaceaeSericocomopsis hildebrandtiifil-GenBank.

Biex tiċċara aktar ir-relazzjoni, l-aktar similiCistanche senegalensisIs-sekwenza psbA-trnH (Adeżjoni: LT715293) u s-sekwenza ITS2 (Adeżjoni: LT715483) ġew imniżżla minn GenBank, flimkien mas-sekwenzi ITS2 u psbA ta 'erba' speċi Ċiniżi Cistanche. Is-siġar filoġenetiċi nbnew bl-użu tas-softwer MEGA X (ara l-Figura 3). Kif muri fil-Figura 3, il-kampjuni tal-Cistanche selvaġġi tal-Kenja (K1, K2) jinġabru fl-istess fergħa bħalCistanche senegalensis, b'distanza ġenetika ta '0-0.0016, li jissuġġerixxi li jistgħu jappartjenu għall-istess speċi. B'kuntrast, jaqgħu f'fergħat differenti mill-erba' speċijiet Ċiniżi Cistanche, li jindikaw differenzi sinifikanti bejn l-ispeċi. Komparattivament, id-distanza filoġenetika bejn K1, K2 uCistanche tubulosahuwa relattivament qrib (0.0089–0.0098), filwaqt li d-distanza għalCistanche deserticolahija ħafna akbar (0.1193–0.2961). Dan jissuġġerixxi li Cistanche selvaġġ Kenjan huwa aktar relatat mill-qribCistanche tubulosa, li jimplika antenati kondiviż iżda diverġenza sussegwenti minħabba pressjonijiet ambjentali differenti u proċessi evoluzzjonarji.

 

 

Cistanche tubulosa

3. Determinazzjoni tal-Kontenut ta 'Ingredjenti Attivi u Analiżi tal-Marki tas-Swaba' f'Kampjuni Cistanche differenti

Il-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) intużat biex tiddetermina simultanjament il-kontenut ta' ħames phenylethanoid glycosides u ħames saccharide alkoħols f'żewġ kampjuni ta' Cistanche selvaġġi Kenjan, kif ukoll ĊiniżiCistanche tubulosauCistanche deserticola(ara t-Tabelli 1 u 2).

Rigward phenylethanoid glycosides, echinacoside u acteoside instabu f'livelli għoljin b'mod konsistenti fil-kampjuni kollha ta 'Cistanche, li jsostnu r-raġuni għall-għażla tagħhom bħala komposti markaturi fil-Farmakopea Ċiniża. Notevolment,Cistanche senegalensismill-Kenja esibit kontenut ogħla b'mod sinifikanti ta 'tubuloside A, li jiddistingwih mill-ispeċi Ċiniża Cistanche u jista' jservi bħala karatteristika karatteristika ta 'Cistanche Kenjan.

F'termini tal-kontenut totali ta 'alkoħol sakkaridi,Cistanche deserticolawrew livelli ferm ogħla mit-tnejnCistanche tubulosauCistanche senegalensis. Betaine ma nstabitx fiCistanche tubulosa, għalkemm il-kontenut tal-fruttożju, mannitol, u glukożju kienu simili għal dawk fiCistanche deserticola, ħlief għal kontenut ta' sukrożju ħafna aktar baxx. B'kuntrast,Cistanche senegalensiskien fihom betaine li jista 'jinxtara iżda l-ebda glukożju, u l-livelli ta' alkoħols saccharide oħra wkoll kienu differenti b'mod konsiderevoli mill-ispeċi Ċiniża Cistanche.

Cistanche tubulosa Għerq Frisk

Ikkuntattja issa ssir taf lill-bdiewa cistanche fiċ-Ċina

 

 

 

Tabella 1 Kontenut ta 'ħames phenylethanoid glycosides fil-pjanti Cistanche (%, n=3, medja ± SD). GH: C. tubulosa; HM: C. deserticola; "-" tindika li ma nstabx

ID tal-kampjun	Oriġini	Forma ta 'tkabbir	Data tal-ġbir	Echinacoside	Tubuloside A	Acteoside	Isoacteoside	2'-Acetylatteoside	Total
GH1	Yutian, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	9.47 ± 0.070	0.63 ± 0.003	4.34 ± 0.032	1.43 ± 0.007	0.11 ± 0.001	15.98
GH2	Yutian, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	13.31 ± 0.347	0.64 ± 0.012	4.34 ± 0.032	1.33 ± 0.07	0.17 ± 0.001	19.52
GH3	Yutian, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	24.64 ± 0.043	0.84 ± 0.014	5.75 ± 0.091	2.06 ± 0.038	0.06 ± 0.003	33.35
HM1	Turpan, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	1.93 ± 0.094	0.04 ± 0.003	0.15 ± 0.026	0.03 ± 0.006	0.02 ± 0.001	2.17
HM2	Turpan, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	2.76 ± 0.140	0.05 ± 0.003	0.16 ± 0.018	0.03 ± 0.004	0.03 ± 0.001	3.05
HM3	Turpan, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	2.44 ± 0.174	0.06 ± 0.004	0.15 ± 0.008	0.03 ± 0.002	0.02 ± 0.001	2.69
K1	Kenja	Selvaġġ	2023.08	3.83 ± 0.027	2.69 ± 0.034	2.70 ± 0.27	0.27 ± 0.003	0.74 ± 0.001	10.23
K2	Kenja	Selvaġġ	2023.08	1.46 ± 0.018	1.51 ± 0.001	0.15 ± 0.001	0.08 ± 0.001	0.03 ± 0.001	3.23

---

Tabella 2 Kontenut ta' alkoħol taz-zokkor u betaine fil-pjanti Cistanche (%, n=3, medja ± SD)

ID tal-kampjun	Oriġini	Forma ta 'tkabbir	Data tal-ġbir	Betaine	Fruttożju	Mannitol	Glukożju	Sukrożju	Total
GH1	Yutian, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	-	11.66 ± 0.084	5.56 ± 0.112	5.45 ± 0.054	2.29 ± 0.042	24.96
GH2	Yutian, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	-	8.75 ± 0.061	4.94 ± 0.159	3.34 ± 0.081	1.70 ± 0.092	18.73
GH3	Yutian, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	-	9.44 ± 0.107	5.09 ± 0.089	4.31 ± 0.455	1.80 ± 0.149	20.29
HM1	Turpan, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	6.62 ± 0.136	7.60 ± 0.119	3.22 ± 0.049	3.55 ± 0.150	23.18 ± 0.425	44.16
HM2	Turpan, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	6.46 ± 0.105	7.82 ± 0.104	4.82 ± 0.038	4.98 ± 0.104	28.57 ± 0.449	52.65
HM3	Turpan, Xinjiang	Ikkultivati	2023.11	6.65 ± 0.148	8.29 ± 0.159	3.90 ± 0.084	4.88 ± 0.009	26.90 ± 0.629	50.62
K1	Kenja	Selvaġġ	2023.08	9.41 ± 0.021	5.31 ± 0.333	7.06 ± 0.045	-	8.44 ± 0.102	30.22
K2	Kenja	Selvaġġ	2023.08	6.29 ± 0.034	-	-	-	-	6.29

---

Nota:
"-" tindika li ma nstabx.
GH =Cistanche tubulosa, HM =Cistanche deserticola, K=Kenja selvaġġCistanche.

 

Il-marki tas-swaba 'kromatografiċi ta' kampjuni ta 'Cistanche minn reġjuni differenti huma murija fil-Figura 4, u r-riżultati tal-analiżi tax-xebh tal-marki tas-swaba' huma ppreżentati fit-Tabella 3. Ix-xebh bejn il-kampjun K1 ta 'Cistanche selvaġġ Kenjan u l-kampjuni GH1-GH3 (Cistanche tubulosamiċ-Ċina) varjaw minn 0.785 sa 0.899, filwaqt li x-xebh mal-kampjuni HM1–HM3 (Cistanche deserticolamiċ-Ċina) varjaw minn 0.630 sa 0.745. Għall-kampjun K2 mill-Kenja, ix-xebh mal-kampjuni GH1–GH3 kien 0.840 sa 0.859, u mal-kampjuni HM1–HM3 kien 0.775 sa 0.824. Dawn ir-riżultati jindikaw li l-kompożizzjoni kimika ta 'Cistanche selvaġġ Kenjan hija aktar simili għal dik taċ-ĊiniżCistanche tubulosamilli biexCistanche deserticola.

 

Figura 4 Il-kromatogrammi tal-marki tas-swaba' ta' Cistanche selvaġġ fil-Kenja u C. tubulosa u C. deserticola kkultivati ​​f'Xinjiang

 

Tabella 3 Riżultati ta' evalwazzjoni ta' xebh ta' kampjuni ta' Cistanche

Kampjun	K1	K2	HM1	HM2	HM3	GH1	GH2	GH3	Referenza
K1	1	0.881	0.647	0.745	0.630	0.899	0.834	0.785	0.852
K2	0.881	1	0.783	0.824	0.775	0.859	0.854	0.840	0.875
HM1	0.647	0.783	1	0.988	1	0.887	0.950	0.975	0.945
HM2	0.745	0.824	0.988	1	0.985	0.946	0.986	0.997	0.983
HM3	0.630	0.775	1	0.985	1	0.876	0.942	0.969	0.937
GH1	0.899	0.859	0.887	0.946	0.876	1	0.987	0.967	0.988
GH2	0.834	0.854	0.950	0.986	0.942	0.987	1	0.996	0.999
GH3	0.785	0.840	0.975	0.997	0.969	0.967	0.996	1	0.993
Referenza	0.852	0.875	0.945	0.983	0.937	0.988	0.999	0.993	1

---

Nota: K1, K2: Cistanche selvaġġ Kenjan; HM1–HM3:Cistanche deserticolaminn Turpan, Xinjiang; GH1–GH3: *

 

Diskussjoni

Il-Kenja tiftaħar diversità rikka tal-pjanti u tradizzjoni twila ta 'użu ta' pjanti għal skopijiet mediċinali. Madankollu, ir-riċerka fuq ħafna pjanti Afrikani f'termini ta 'tassonomija, kimika u farmakoloġija għadha limitata, u dan jirriżulta f'ħafna pjanti mediċinali ta' valur li jiġu injorati u riċerkati biżżejjed [9]. Għalkemm hemm rapporti li jissuġġerixxu li Cistanche huwa mqassam ħafna fil-Kenja [15], bħalissa m'hemm l-ebda rekord tal-użu mediċinali tiegħu fil-pajjiż. Biex tiċċara l-istatus u l-valur mediċinali tar-riżorsi ta 'Cistanche fil-Kenja, it-tim ta' riċerka tagħna wettaq stħarriġ fuq il-post u sab liCistanche senegalensishuwa mqassam ħafna fil-Lbiċ tal-Kenja. Il-perjodi tal-fjoritura lokali għal Cistanche huma minn Marzu sa Mejju u minn Ottubru sa Diċembru. Peress li l-istħarriġ tagħna sar f'Awwissu, stajna biss niġbru żewġ kampjuni. Minkejja din il-limitazzjoni, identifikajna l-ispeċi ta 'Cistanche Kenjan selvaġġ permezz ta' analiżi molekulari morfoloġiċi, istoloġiċi u tad-DNA, u ddeterminajna l-kompożizzjoni kimika tagħhom, billi pprovdiet appoġġ għall-konservazzjoni u l-iżvilupp tar-riżorsi ta 'Cistanche fil-Kenja.

Cistanche deserticola

 

Iz-zokk sukkulenti taċ-Cistanche selvaġġ Kenjan huwa ċċattjat u ċilindriku, li jixbahCistanche deserticolafid-dehra, iżda differenti notevolment mill-zokk fusiform taCistanche tubulosa. Is-sezzjoni trasversali taċ-Cistanche selvaġġ Kenjan turi gzuz vaskulari mferrxa, li hija konsistenti ma 'the karatteristiċi taCistanche tubulosa. Madankollu, filwaqt li l-bażi anther taCistanche tubulosahuwa ċatt u tond mingħajr ponta akuta, din il-karatteristika hija nieqsa fis-selvaġġ Kenjan Cistanche [1,7]. Ibbażat fuq l-analiżi tas-sekwenza ITS2 u psbA-trnH, il-Cistanche selvaġġ Kenjan huwa probabbliCistanche senegalensis, u ż-żewġ reġjuni ġenetiċi juru xebh għoli maċ-ĊiniżCistanche tubulosa. Rapporti preċedenti jindikaw liC. senegalensishuwa mqassam prinċipalment mis-Senegal fil-Grigal tal-Afrika lejn in-nofsinhar lejn il-Kenja u partijiet oħra tax-Xlokk tal-Afrika [15]. L-istudju filoġenetiku l-aktar riċenti u komprensiv tal-ġeneru Cistanche jaqsamha f'erba 'kladi ewlenin: l-Asja tal-Lvant, il-Majjistral tal-Afrika, il-Lbiċ tal-Asja, u clade mifruxa. Minħabba l-ibridizzazzjoni bejn l-ispeċijiet jew il-bidliet ġeografiċi, il-clade mifrux huwa kkaratterizzat minn riżoluzzjoni filoġenetika baxxa, li jagħmilha diffiċli biex tiddistingwi speċijiet ibbażati fuq il-morfoloġija u s-sekwenzi tad-DNA. It-tnejnC. tubulosauC. senegalensisjaqgħu f'dan clade mifruxa, u erba 'kampjuni identifikati bħalaC. tubulosainstabu fi ħdan il-C. senegalensisfergħa fl-istudju, li jagħmilha diffiċli li ssir distinzjoni bejn it-tnejn anke fil-livell tas-sekwenzi nukleari ITS2 u chloroplast psbA-trnH [8].

Skond ir-riċerka [15], hosts taC. senegalensisjinkludu diversi speċi, bħalSuaeda monoica(Amaranthaceae),Salvadora persica(Salvadoraceae),Zygophyllumspeċi (Zygophyllaceae), uVachellia tortilis(Fabaceae). F'dan l-istudju, l-ospitanti ta 'Cistanche selvaġġ Kenjan ġie identifikat bħalaSericocomopsis hildebrandtii(Amaranthaceae), subshrub jew arbuxxell li l-għeruq tiegħu jintużaw lokalment bħala etnomediċina għat-trattament tal-malarja, uġigħ fl-istonku, epatite, stitikezza, u mard ieħor [16,17]. Fiċ-Ċina, l-ospiti taCistanche deserticolajinkluduHaloxylon ammodendron, H. persicum(kemm Amaranthaceae), uAtriplex canescens(Chenopodiaceae) [18]; filwaqt li l-ospiti taċ-ĊiniżiCistanche tubulosahuma speċi varji taTamarix(Tamaricaceae). Meta mqabbel mal-firxa ospitanti relattivament limitata ta 'speċi Ċiniżi Cistanche,C. senegalensisfil-Kenja tutilizza varjetà usa 'ta' ospitanti minn ġeneri differenti, li jissuġġerixxi adattabilità ekoloġika usa '.

Iż-żewġ kampjuni taC. senegalensismiġbura f'dan l-istudju kien fihom il-ħames phenylethanoid glycosides, għalkemm il-livelli varjaw ħafna, possibbilment minħabba differenzi fl-istadju tal-fjoritura. Il-kampjun K1 inġabar qabel ma l-impjant ħareġ mill-art, bi zokk iżgħar u riżervi ta 'nutrijenti mhux ikkonsmati, li jirriżulta f'kontenut ogħla ta' ingredjent attiv; kampjun K2 inġabar matul il-perjodu tal-fjoritura, meta n-nutrijenti kienu eżawriti, li rriżulta f'kontenut aktar baxx ta 'ingredjent attiv, konsistenti ma' studji preċedenti [19]. Il-kontenut totali tal-ħames phenylethanoid glycosides f'K1 kien ogħla minn dak fiċ-ĊiniżCistanche deserticolaiżda inqas milli fiċ-ĊiniżCistanche tubulosa. Barra minn hekk, il-kontenut totali ta 'l-erba' alkoħol taz-zokkor u betaine f'K1 kien ogħla milli f'Cistanche tubulosaiżda aktar baxx minn fiCistanche deserticola. Notevolment, kemm il-kampjuni K1 kif ukoll K2 kien fihom livelli relattivament għoljin ta 'betaine, li qatt ma nstabet fiċ-Ċiniż.Cistanche tubulosaiżda huwa magħruf li huwa preżenti f'ammonti għoljin fiċ-ĊiniżCistanche deserticola[6]. Differenza sinifikanti oħra hija li la K1 u lanqas K2 ma kien fihom glukożju, iżda minħabba d-daqs żgħir tal-kampjun, mhuwiex ċar jekk din hijiex karatteristika ta’C. senegalensisjew sempliċiment varjazzjoni individwali-din se teħtieġ aktar verifika b'aktar kampjuni fil-futur.

Fil-qosor, permezz ta’ investigazzjoni u riċerka fuq il-post, dan l-istudju identifika d-distribuzzjoni ta’ Cistanche selvaġġ fil-Kenja, iċċara l-ispeċi tiegħu bħalaCistanche senegalensis, u sabet kemm xebh kif ukoll differenzi maċ-ĊiniżCistanche deserticolauCistanche tubulosa. Dawn id-differenzi jistgħu jiġu influwenzati minn metodi ta 'kultivazzjoni, ambjent ekoloġiku, u fatturi oħra, u jiġġustifikaw aktar riċerka u monitoraġġ.

 

Referenzi

[1] Kummissjoni tal-Farmakopea Ċiniża. Farmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina (中华 人民共和国药典) [S]. Vol 1. 2025 Ed. Beijing: China Medical Science Press, 2025: 319-320.

[2] Tu PF, Jiang Y. Aġġorna r-riċerka tal-letteratura klassika dwar Cistanches Herba [J]. China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2022, 47: 5670-5679.

[3] Fu Z, Fan X, Wang X, et al. Cistanches Herba: ħarsa ġenerali lejn il-kimika, il-farmakoloġija,

[4] Xu CH, Tuerdimaimaiti N, Wang YX, et al. Progress fil-bijoattività ta' phenylethanoid glycosides f'Cistanches [J]. Food Drug (食品与药品), 2023, 25: 261-266.

[5] Kanzunetta ZH, Lei L,Tu PF. Avvanzi fir-riċerka ta' attività farmakoloġika fil-pjanti ta' Cistanche Hoffing et Link [J]. Chin Tradit Herb Drogi (中草药), 2003, 34: 113-115.

[6] Gao YJ, Jiang Y, Dai F, et al. Studju dwar kostitwenti lassattivi f'Cistanche deserticola YC Ma [J]. Mod Chin Med (中国现代中药), 2015, 17: 307-310, 314.

[7] Il-Kumitat Editorjali ta' Flora Reipublicae Popularis Sinicae, Akkademja tax-Xjenzi Ċiniża. Flora of China (中国植物志) [M]: Vol 69. Beijing: Science Press, 1999: 86.

[8] Ataei N, Schneeweiss GM, García MA, et al. Filoġenija multilocus tal-pjanta parassitika nonphotosynthetic Cistanche (Orobanchaceae) tirrifjuta t-tassonomija attwali u tidentifika erba 'clades morfoloġikament distinti ewlenin [J]. Mol Phylogenet Evol, 2020, 151: 106898.

[9] Nankaya J, Gichuki N, Lukhoba C, et al. Pjanti mediċinali tal-maasai tal-Kenja: reviżjoni [J]. Pjanti, 2020, 9: 44