Cistanche Polysaccharides Jappoġġaw il-Gut Barrier, Kalm NLRP3, U Jippromwovu Tixjiħ b'Saħħtu

Riżultati

 

3.1 Effett ta' polisakkaridi ta' Cistanche deserticola fuq l-attività intestinali tas-SA- -gal

It-tbajja’ ta’ SA- -gal uriet li, meta mqabbla mal-grupp ta’ kontroll żagħżugħ, il-livell ta’ ċelluli SA- -gal-pożittivi żdied fl-ileum tal-ġrieden li qed jixjieħu naturali. Meta mqabbel mal-grupp ta 'tixjiħ naturali, kemm gruppi ta' CDP b'doża baxxa kif ukoll b'doża għolja wrew pożittività SA- -gal imnaqqsa (ara Figura 1). Dawn ir-riżultati jindikaw li CDPs jantagonizzaw it-tixjiħ fit-tessut ileali.

Fig.1 Impatt tas-CDPs fuq l-Attività tas-SA- -gal intestinali (SA- -al tbajja, × 20)

 

Tabella 2. L-Effett tas-CDPs fuq SASP fit-Tessut tal-Kolon tal-Ġrieden li qed Tixjieħ

(x̄ ± s, n = 10)

Grupp	CXCL-1	IL-6	MMP-2	NF-κB	p16	TNF-
Kontroll Żgħażagħ	1.00 ± 0.09	1.02 ± 0.22	1.15 ± 0.19	1.15 ± 0.73	1.10 ± 0.56	1.11 ± 0.53
Tixjiħ Naturali	3.18 ± 1.00¹)	3.63 ± 1.52¹)	4.73 ± 0.79¹)	7.51 ± 1.39¹)	3.63 ± 0.42¹)	4.94 ± 1.23¹)
CDPs Doża Baxxa	2.24 ± 0.67	2.48 ± 0.37³)	2.48 ± 0.97³)	3.11 ± 2.08³)	1.42 ± 1.27⁴)	3.57 ± 0.11⁴)
CDPs Doża Għolja	1.39 ± 0.12²)	1.38 ± 0.13³)	1.17 ± 0.48⁴)	2.24 ± 1.50⁴)	1.26 ± 0.42⁴)	1.37 ± 0.30⁴)
-Nikotinamide Mononucleotide	2.21 ± 0.06	2.00 ± 1.05³)	2.05 ± 0.29⁴)	3.71 ± 2.17³)	2.66 ± 0.18⁴)	2.16 ± 0.64⁴)

Noti:
¹) P< 0.01 vs Kontroll Żgħażagħ;
²) P< 0.05 vs Kontroll Żgħażagħ;
³) P< 0.05 vs Tixjiħ Naturali;
⁴) P< 0.01 vs Tixjiħ Naturali.

 

 

Likur Orali Cistanche u Supplimenti għal Problemi ta 'Tixjiħ tal-Imsaren

 

3.2 Effett tal-polisakkaridi Cistanche deserticola fuq SASP

Meta mqabbla mal-grupp ta 'kontroll żgħażagħ, livelli ta' mRNA ta 'CXCL-1, IL-6, MMP-2, NF-κB, p16, u TNF- kienu elevati fil-grupp ta' tixjiħ naturali (P < 0.05, P < 0.01). Relattiv għall-grupp ta 'tixjiħ naturali, il-gruppi CDP b'doża baxxa u għolja urew gradi differenti ta' tnaqqis fl-espressjoni tal-mRNA tal-markaturi SASP ta 'hawn fuq (P <0.05, P <0.01). Dawn is-sejbiet jissuġġerixxu li s-CDP jrażżnu s-sekrezzjoni tal-fattur SASP (ara Tabella 2).

Fig. 2 Impatt tas-CDPs fuq il-Funzjoni ta' Ostakolu intestinali(×20)

 

Tabella 3. Impatt tas-CDPs fuq il-Funzjoni tal-Ostakolu intestinali, il-Proliferazzjoni taċ-Ċelloli, u d-Differenzjazzjoni

Grupp	ZO-1	Ki67	Lgr5
Kontroll Żgħażagħ	4	0	0
Tixjiħ Naturali	1	0	0
CDPs Doża Baxxa	4	0	0
CDPs Doża Għolja	4	0	0
-Nikotinamide Mononucleotide	3	0	0

 

3.3 Effett tal-polisakkaridi Cistanche deserticola fuq il-funzjoni tal-barriera intestinali

Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll żagħżugħ, l-espressjoni tal-proteina ZO-1 tnaqqset fl-ileum ta' ġrieden li qed jixjieħu naturali, li jindika funzjoni ta 'barriera indebolita (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp ta 'tixjiħ naturali, l-espressjoni ZO-1 żdiedet kemm f'gruppi ta' CDP b'doża baxxa kif ukoll f'doża għolja (P <0.01) (Figura 2, Tabella 3), li tissuġġerixxi effett protettiv ta 'CDPs fuq il-funzjoni tal-barriera intestinali.

Fig. 3 Impatt tas-CDPs fuq il-Proliferazzjoni u d-Differenzjazzjoni taċ-Ċelloli Imsaren (×200)

3.4 Effett tal-polisakkaridi Cistanche deserticola fuq il-proliferazzjoni u d-divrenzjar taċ-ċelluli intestinali

Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll żgħażagħ, il-proliferazzjoni taċ-ċelluli intestinali naqset u l-espressjoni ta' Ki67 tnaqqset fil-grupp ta 'tixjiħ naturali; il-markatur Lgr5 taċ-ċelluli staminali intestinali (ISC) kien ukoll irregolat (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp ta 'tixjiħ naturali, iż-żewġ dożi ta' CDP tejbu b'mod notevoli l-proliferazzjoni taċ-ċelluli intestinali, u l-livelli ta 'Lgr5 kellhom it-tendenza li jinnormalizzaw (P <0.01) (Figura 3, Tabella 3). Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu li CDPs jistgħu jipparteċipaw fil-proċessi ta 'proliferazzjoni u differenzjazzjoni taċ-ċelluli intestinali.

Fig. 4 Impatt tas-CDPs fuq Rispons Infjammatorju Medjat mill-Inflammasome

3.5 Effett ta' polisakkaridi Cistanche deserticola fuq infjammazzjoni medjata minn inflammasome

Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll żgħażagħ, il-livelli ta' LPS żdiedu b'mod sinifikanti fil-grupp ta 'tixjiħ naturali (P <0.01). Relattiv għall-grupp ta 'tixjiħ naturali, il-livelli ta' LPS naqsu b'mod sinifikanti kemm fil-gruppi ta 'CDP b'doża baxxa kif ukoll f'doża għolja (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll żagħżugħ, l-espressjoni ta' proteini relatati mal-inflammasome NLRP3 (NLRP3, ASC, u Caspase-1) kienet regolata 'l fuq fil-grupp ta' tixjiħ naturali; b'kuntrast, il-livelli tal-proteini kienu regolati 'l isfel fiż-żewġ gruppi ta' doża CDP (ara Figura 4). PCR f'ħin reali kkonfermat aktar li, kontra kontrolli żgħar, iċ-ċitokini assoċjati mal-piroptożi IL-18 u IL-1 żdiedu b'mod sinifikanti fil-grupp ta 'tixjiħ naturali (P < 0.01), filwaqt li t-tnejn tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-gruppi ta' CDP b'doża baxxa u għolja meta mqabbla mal-grupp ta 'tixjiħ naturali (P < 0.01) (see Tabella).

Tabella 4. L-Effett tas-CDPs fuq l-LPS tas-Serum u l-Espressjoni ta' IL-18 u IL-1 mRNA fl-Ileum tal-Ġrieden li qed Tixjieħ

(x̄ ± s, n = 10)

Grupp	LPS	IL-18	IL-1
Kontroll Żgħażagħ	1.38 ± 0.32	1.01 ± 0.16	1.37 ± 1.34
Tixjiħ Naturali	6.26 ± 0.73¹)	5.53 ± 0.23¹)	9.90 ± 0.43¹)
CDPs Doża Baxxa	3.23 ± 0.58⁴)	2.04 ± 1.49⁴)	4.57 ± 3.76³)
CDPs Doża Għolja	1.82 ± 0.35⁴)	1.76 ± 0.55⁴)	3.32 ± 1.36³)
-Nikotinamide Mononucleotide	3.63 ± 1.33⁴)	3.67 ± 1.48	4.84 ± 3.18

Noti:
¹) P< 0.01 vs Kontroll Żgħażagħ;
³⁴) P< 0.05 jewP< 0.01 vs Tixjiħ Naturali.

Cistanche polysaccharides jinibixxu l-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3 u jtejbu t-tixjiħ intestinali

Diskussjoni

 

Il-mediċina tradizzjonali Ċiniża (TCM) ssostni li "l-kilwa hija l-għerq tal-ħajja," u li l-qi robust tal-kliewi huwa assoċjat mal-lonġevità, filwaqt li t-tnaqqis fil-qi tal-kliewi jqassar il-ħajja (Yu Chuan, Trażmissjoni Medika Ortodossa). Sa mill-1980, l-Akkademiku Chen Keji ippropona li juża metodi ta 'tonifikazzjoni tal-kliewi biex jittardja t-tixjiħ [18]. L-Akkademiku Shen Ziyin wettaq riċerka fil-fond dwar ir-relazzjoni bejn il-yang tal-kliewi u t-tixjiħ [19], filwaqt li nnota li d-defiċjenza tal-yang tal-kliewi hija rabta ewlenija fit-tixjiħ. Essenzjalment, taħt influwenzi esterni fit-tul, yang tal-kliewi ssir insuffiċjenti biex issaħħan u tappoġġja l-vixxri, li jwassal għal tixjiħ maż-żmien [20]-tixjiħ intestinali inkluż. Il-kliewi u l-musrana ż-żgħira jaqsmu l-berner t'isfel fit-teorija tat-TCM; funzjonijiet intestinali ta 'riċeviment u trasformazzjoni jiddependu fuq l-azzjoni ta' tisħin u vaporizzanti tal-yang tal-kliewi. Kif kiteb Xu Shuwei f'Puji Benshifang, "Meta l-qi tal-kliewi tkun dgħajfa u l-qi primordjali jonqos, id-diġestjoni b'mod naturali tbati." Meta l-yang tal-kliewi huwa defiċjenti, il-forzi tas-sewqan u tat-tisħin huma inadegwati, u jonqsu milli jappoġġjaw il-yang tal-milsa. Hekk kif it-trasport u t-trasformazzjoni tal-milsa jiddgħajfu, il-ġenerazzjoni ta 'essenza mill-ikel tonqos, li mbagħad tfixkel l-essenza ta' wara t-twelid, tfixkel id-distribuzzjoni u l-eskrezzjoni, u tipproduċi phlegm, umdità, turbidità, u prodotti patoloġiċi ta 'stasis li jippromwovu tixjiħ intestinali. Għalhekk, id-defiċjenza ta 'yang tal-kliewi hija pathomechanism importanti tat-tixjiħ intestinali u tipprovdi bażi teoretika għall-użu ta' aġenti li jsaħħnu l-kliewi biex jintervjenu.

Cistanche deserticola hija ħaxixa ewlenija li tissaħħan il-kliewi li taqbel mal-pathomechanism ewlieni tat-tixjiħ intestinali. Elenkat fost il-ħxejjex aromatiċi ta '"grad ogħla" fil-Classic ta' Materia Medica ta 'Shennong u mfaħħar bħala l-"ġinseng tad-deżert," Cistanche hija magħrufa għall-effetti toniċi tagħha, li tqiegħed pedament għall-effikaċja tiegħu kontra t-tixjiħ [21]. Il-polisakkaridi huma polimeri ta' piż molekulari għoli ffurmati minn 10 monosakkaridi jew aktar marbuta permezz ta' rabtiet glikosidiċi [22]. F'dawn l-aħħar snin, ir-riċerka dwar il-polisakkaridi naturali avvanzat b'rata mgħaġġla, u enfasizzat tużżana jew aktar attivitajiet farmakoloġiċi, inkluż l-anti-aging [23]. Cistanche polysaccharides huma kostitwenti attivi ewlenin ta 'Cistanche [21]. Studji preċedenti juru li CDPs jistgħu jimmodulaw id-disbiożi, itejbu l-omeostasi tal-barriera tal-mukuża, u jreġġgħu lura l-atrofija tal-villus indotta mit-tixjiħ [11]. Madankollu, l-effetti sistemiċi u l-mekkaniżmi tagħhom fit-titjib tat-tixjiħ intestinali baqgħu biex jiġu ċċarati.

F'dan l-istudju, bl-użu ta 'polisakkaridi derivati ​​mill-estratt ta' Cistanche f'mudell ta 'ġurdien li qed tixjieħ naturali, aħna vverifikajna li l-intervent CDP modula livelli SA- -gal, markaturi tal-barriera intestinali, u attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3, u b'hekk ikkonfermaw l-effikaċja u l-mekkaniżmu fit-taffija tat-tixjiħ intestinali. SA- -gal huwa idrolażi liżosomali; b'senescence ċellulari, il-bijoġenesi liżosomali u t-traffikar isiru indeboliti, u jgħollu l-kontenut u l-attività ta' SA- -gal [24-25]. Is-CDPs naqqsu b'mod sinifikanti l-pożittività SA- -gal fl-ileum tal-ġrieden (Figura 1), naqqsu b'mod effettiv it-tixjiħ ileali. Fil-livell tal-espressjoni tal-ġeni, CDPs irregolaw fatturi ewlenin SASP bħal p16, TNF- u NF-κB (Tabella 2), li jissuġġerixxu mitigazzjoni tal-mikroambjent infjammatorju kroniku permezz ta 'modulazzjoni SASP [26-27], konsistenti mal-effetti immunometaboliċi magħrufa ta' polisakkaridi [28-30]. L-integrità tal-barriera intestinali hija kruċjali għall-manutenzjoni tal-omeostażi. Hawnhekk, CDPs irregolaw il-proteina tight junction ZO-1 (Figura 2, Tabella 3), allinjament ma 'rapporti li permeabilità mtejba tista' ttaffi l-fenotipi li qed tixjieħ [31-33]. Mekkanikament, dan x'aktarx jirrelata ma 'livelli mnaqqsa ta' LPS (Tabella 4) u soppressjoni konsegwenti tal-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3 [34-35]. Dan il-loop ta' feedback pożittiv ta' "tiswija tal-barriera-inibizzjoni tal-infjammazzjoni" joffri miri doppji għall-intervent fit-tixjiħ intestinali.

Importanti, is-CDPs mhux biss jirregolaw mogħdijiet relatati mat-tixjiħ iżda wkoll itejbu l-funzjoni taċ-ċelluli staminali intestinali. Żidiet fiċ-ċelluli pożittivi Ki67 u Lgr5 (Figura 3, Tabella 3) jindikaw attivazzjoni ta 'programmi ta' proliferazzjoni u differenzjazzjoni ISC [36-37], potenzjalment marbuta mal-inibizzjoni ta 'IL-1 /IL-18 rilaxx medjat minn NLRP3 [38-39] u b'hekk jipproteġu l-funzjoni taċ-ċelloli staminali minn mikroambjent infjammatorju. Meta mqabbla ma 'inibituri NLRP3 ta' molekula żgħira b'mira waħda [40], CDPs jipprovdu intervent multidimensjonali: tnaqqis ta 'LPS upstream biex jimblokka l-attivazzjoni tal-inflammasome, promozzjoni ta' ZO-1 biex tissaħħaħ il-funzjoni tal-barriera, u modulazzjoni ta 'SASP u attività taċ-ċelluli staminali li toffri regolamentazzjoni usa' fil-livell tas-sistemi.

 

Dan l-istudju jgħaqqad ukoll it-teorija tat-TCM ta '"defiċjenza ta' yang tal-kliewi" ma 'karatteristiċi patofiżjoloġiċi moderni tat-tixjiħ intestinali. Il-mekkaniżmu ewlieni-defiċjenza ta 'yang tal-kliewi-mapep sew fuq fenotipi li qed tixjieħ bħal disfunzjoni tal-barriera, infjammazzjoni kronika ta' grad baxx, u disbiosis. Fuq livell mekkanistiku, il-kunċett tat-TCM ta '"restrizzjoni tal-kesħa interna" mit-tnaqqis tal-yang tal-kliewi jista' jitqies bħala trigger għall-attivazzjoni ta 'NLRP3 u kaskati infjammatorji downstream. F'livell ta 'mira molekulari, is-sejbiet tagħna jenfasizzaw l-assi NLRP3/Caspase-1/ASC bħala ċentru ċentrali li jgħaqqad "yang decline" ma' "korriment intestinali", jippromwovi r-rilaxx taċ-ċitokini u l-ħsara fil-barriera u b'hekk jaggravaw it-tixjiħ intestinali. Bħala komponent attiv rappreżentattiv konsistenti mal-metodu ta 'tisħin tal-kliewi, CDPs effettivament jinibixxu l-attivazzjoni NLRP3, jimblokkaw il-qsim ta' Caspase-1 u l-maturazzjoni ASC, u b'hekk ireġġgħu lura l-proċess patoloġiku ta '"tixjiħ ikkawżat minn defiċjenza ta' yang," li jipprovdu appoġġ xjentifiku għall-prevenzjoni u t-trattament tat-tixjiħ intestinali minn perspettiva ta 'tisħin tal-kliewi.

Fil-qosor, dan l-istudju juri li s-CDPs itejbu t-tixjiħ intestinali billi jinibixxu l-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3, li jipprovdu evidenza ġdida għall-bażi farmakodinamika ta 'Cistanche u raġuni teoretika għall-iżvilupp ta' strateġiji kontra t-tixjiħ b'ħafna mira. Il-limitazzjonijiet jibqgħu: (1) il-mira molekulari preċiża li biha CDPs jinibixxu t-twaħħil dirett ta 'NLRP3 ma' NLRP3 kontra l-modulazzjoni ta 'riċetturi ta' rikonoxximent tal-mudell upstream - teħtieġ kjarifika; (2) jekk is-CDPs jirregolawx NLRP3 indirettament permezz ta' assi mikrobijota-metabolit tal-musrana jeħtieġx validazzjoni ulterjuri. Studji futuri li jintegraw is-sekwenzjar ta 'ċellula waħda u t-trapjant tal-mikrobijota jistgħu jiċċaraw in-netwerks regolatorji bejn l-organi CDP u javvanzaw it-traduzzjoni klinika.

 

Referenzi

 

[1] Gavrilov LA, Gavrilova NS. It-tixjiħ huwa marda? Il-perspettiva tal-bijodemografi. Adv Gerontol. 2017;30(6):841–842.
[2] Zhang X, Zhang F, Li Y, et al. L-imblokk tal-mogħdija tas-sinjalar PI3K/AKT minn Astragaloside IV itaffu l-kolite ulċerattiva permezz tat-titjib tal-barriera epiteljali intestinali. J Transl Med. 2024;22(1):406.
[3] Rybina OY, Symonenko AV, Pasyukova EG. Kombinazzjonijiet komposti li jimmiraw il-lonġevità: Sfidi u perspettivi. Aging Res Rev. 2023;85:101851.
[4] Liao G, Xie Y, Peng H, et al. Avvanzi fil-bijoterapija NMN u aġġornamenti tar-riċerka fil-qasam tal-mard tas-sistema diġestiva. J Transl Med. 2024;22(1):805.
[5] Nadeeshani H, Li J, Ying T, et al. Nicotinamide mononucleotide (NMN) bħala prodott tas-saħħa kontra t-tixjiħ-Wegħdiet u tħassib dwar is-sigurtà. J Adv Res. 2022;37:267–278. doi:10.1016/j.jare.2021.08.003
[6] 刘峰, 庄万欣, 杨媛, 等. NLRP3炎性小体激活的调控机制研究进展. 生物医学转化. 2024;5(02):2–11. Titolu Ingliż: Liu F, Zhuang W, Yang Y, et al. Avvanzi tar-riċerka fil-mekkaniżmi regolatorji tal-attivazzjoni tal-inflammasome NLRP3. Trasformazzjoni Bijomedika. 2024;5(02):2–11.
[7] Liu Y, Xu X, Lei W, et al. L-inflammasome NLRP3 fil-fibrożi u t-tixjiħ: Il-mhux magħrufa. Aging Res Rev. 2022;79:101638. doi:10.1016/j.arr.2022.101638
[8] Chen H, Zhang X, Liao N, et al. Identifikazzjoni ta 'ipometilazzjoni tal-promotur tal-ġeni relatat mal-infjammazzjoni NLRP3 fir-retinopatija dijabetika. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2020;61(13):12.

Noti prattiċi għall-qarrejja u għall-iżviluppaturi tal-prodotti

Implikazzjonijiet funzjonali: CDPs jistgħu jgħinu biex itaffu l-istitikezza billi "jxarrbu l-imsaren," filwaqt li dejta moderna tissuġġerixxi appoġġ tal-barriera (↑ZO-1), piż imnaqqas tal-endotossina (↓LPS), u attività inflammasome imnaqqsa (↓NLRP3/ASC/Caspase-1; ↓IL-18} /IL-18).

Divrenzjar għall-prodotti: Pożizzjonament bħala barriera tal-musrana-appoġġ u appoġġ għat-tixjiħ b'saħħtu. Ikkunsidra l-kontenut CDP standardizzat u l-ittestjar tal-identità.

Konsiderazzjonijiet traslazzjonali: Is-sejbiet tal-ġrieden jiggwidaw l-ipoteżi; id-dożaġġ uman għandu jsegwi s-sigurtà, il-kwalità u l-validazzjoni klinika. Sinerġija potenzjali ma 'probijotiċi jew prebijotiċi li jbaxxu t-tagħbija LPS.

Markaturi tar-riżultat għall-provi: Frekwenza/konsistenza tal-ippurgar, LPS tas-serum/ippurgar, zonulin tal-ippurgar jew claudins tas-serum, ċitokini infjammatorji, u analiżi tal-permeabilità intestinali.