Cistanche Glycosides Attenwaw il-Fibrożi Prostatika fl-Iperplażja Beninja tal-Prostata Billi Jirregolaw MiRNA-483-3p
Nov 19, 2025
ASTRATT
Għan:Biex tinvestiga l-effetti ta 'titjib tal-glikożidi ta' cistanche fuq fibrożi tal-prostata f'iperplażja beninna tal-prostata (BPH) u l-mekkaniżmu li jinvolvi r-regolamentazzjoni tal-microRNA (miRNA) -483-3p.
Metodi:Ġrieden maskili ġew assenjati b'mod każwali għal ħames gruppi: kontroll normali, kontroll tal-mudell BPH, finasteride, cistanche glycosides, u cistanche glycosides + antagonist miRNA-483-3p. Il-mudell BPH ġie stabbilit b'orkiektomija bilaterali segwita minn injezzjoni taħt il-ġilda ta 'kuljum ta' propionate ta 'testosterone. Wara 30 jum, id-depożizzjoni tal-kollaġen tal-prostatiku ġiet evalwata bit-tbajja tat-trikromju ta 'Masson u Sirius Red, u tkejjel il-kontenut ta' hydroxyproline (Hyp). Livelli ta' mRNA tal-prostata ta' trasformazzjoni tal-fattur tat-tkabbir- 1 (TGF-1), proteina kinase attivat minn mitoġenu 2 (MK2), u proteina kinase kinase attivata minn mitoġenu 6 (MKK6), kif ukoll livelli ta' miRNA-483-3p, ġew determinati minn PCR kwantitattiv f'ħin reali (qPCR). Il-livelli ta' proteina prostatika ta' TGF-1, MK2, MK2 fosforilata (p-MK2), MKK6, u MKK6 fosforilata (p-MKK6) ġew evalwati permezz ta' Western blotting. L-irbit dirett ta' miRNA-483-3p ma' MK2 ġie eżaminat bl-użu ta' analiżi ta' reporter luciferase.
Riżultati:Relattiv għall-grupp ta 'kontroll normali, il-grupp ta' kontroll tal-mudell BPH wera żieda sinifikanti fid-depożizzjoni tal-collagen prostatiku; livelli elevati ta' mRNA ta' TGF-1, MK2, u MKK6; u livelli ogħla ta 'proteini ta' TGF-1, p-MK2, u p-MKK6 (P kollha <0.01), filwaqt li l-livelli ta 'miRNA-483-3p naqsu b'mod sinifikanti (P <0.01). Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll tal-mudell BPH, il-glikożidi ta' cistanche irregolaw 'l fuq ta' miRNA-483-3p, naqqsu l-livelli ta 'mRNA ta' TGF-1, MK2, u MKK6, naqqsu l-livelli ta 'proteina ta' TGF-1, p-MK2, u p-MKK6, u ttaffi d-depożizzjoni ta 'collagen prostatiku. Notevolment, l-amministrazzjoni konġunta tal-antagomir miRNA-483-3p ma' glikożidi ta' cistanche naqqset b'mod sinifikanti l-miRNA-483-3p, żiedet id-depożizzjoni tal-kollaġen, u livelli elevati ta' mRNA ta' TGF-1, MK2, u MKK6 kif ukoll livelli ta' proteina ta' TGF-1, p-MK2, u p-MK2 u p-glikosidi meta mqabbla ma' P-MKK6 0.01). L-assaġġ tal-luċiferażi wera li miRNA-483-3p jimmira direttament lil MK2.
Konklużjoni: Cistanche glycosides attenwaw il-fibrożi tal-prostata f'BPH billi jirregolaw miRNA-483-3p u jinibixxu s-sinjalar MK2.
Kliem ewlieni: Cistanche glycosides; miRNA-483-3p; prostata;fibrożi; iperplażja beninna tal-prostata
L-ogħla kwalità Cistanche Deserticola
Aktar għarfien dwar il-ħaxix għat-Trattament tal-BPH
Servizz ta 'Appoġġ Ta' Wecistanche-L-akbar esportatur ta' cistanche fiċ-Ċina:
Email:wallence.suen@wecistanche.com
Introduzzjoni
Iperplażja beninna tal-prostata (BPH)hija kundizzjoni komuni fl-irġiel ta' età medja u anzjani, bil-prevalenza tiżdied bl-età. Rapporti jindikaw li l-prevalenza tal-BPH taqbeż il-50% fost l-irġiel ta 'aktar minn 50 sena. BPH u s-sintomi assoċjati tal-apparat urinarju t'isfel (LUTS) jimponu piżijiet sostanzjali fuq il-kwalità tal-ħajja u l-ispejjeż tal-kura tas-saħħa fit-tul. Klinikament, inibituri ta' 5 -reductase u imblokkaturi tar-riċetturi adrenerġiċi huma farmakoterapiji rakkomandati. Madankollu, ‑blockers ma jnaqqsux il-volum tal-prostata, u 25–30% tal-pazjenti ma juru l-ebda titjib fil-LUTS b'inibituri ta' 5 -reductase; barra minn hekk, 5-7% jistgħu saħansitra jmorru għall-agħar. Għalkemm l-innovazzjonijiet kirurġiċi bħall-prostatektomija bil-laser tat-thulium huma dejjem aktar utilizzati meta mqabbla mar-resezzjoni transuretrali tal-prostata, LUTS wara l-operazzjoni xorta jseħħu b'rati li jaqbżu t-23%.
L-evidenza attwali tissuġġerixxi tliet proċessi patobijoloġiċi ewlenin fil-BPH: iperplażja glandulari, kontrazzjoni tal-muskoli lixxi, u fibrożi tal-prostata. Dawn il-proċessi jaġixxu b'mod indipendenti jew b'mod sinerġiku biex imexxu l-progressjoni klinika. BPH komunement (għalkemm mhux dejjem) teżisti flimkien mal-LUTS; fibrożi, ikkaratterizzata minn depożizzjoni eċċessiva ta 'matriċi extraċellulari, tikkomprometti l-flessibbiltà tal-uretra fi ħdan il-prostata u tikkontribwixxi għall-ostruzzjoni tal-awrina. Madankollu, l-għażliet terapewtiċi li jimmiraw speċifikament għall-fibrożi tal-organi għadhom limitati.
Cistanche (Cistanche spp.) hija pjanta tradizzjonali mediċinali u nutrittiva. Il-glikożidi phenylethanoid karatteristiċi tiegħu (imsejħa kollettivament hawn bħala glikożidi cistanche, bħal echinacoside u acteoside) juru bijoattivitajiet wesgħin, inklużi effetti antimikrobiċi, ipolipidemiċi, antiallerġiċi, kardjotoniċi, antidijabetiċi, antitumorali, newroprotettivi, antiossidanti u immunomodulatorji. L-evidenza akkumulata tindika azzjonijiet anti-fibrotiċi ta 'dawn il-glikosidi f'organi bħall-kliewi, il-pulmun, il-qalb u l-fwied. Madankollu, l-effetti tagħhom fuq il-fibrożi tal-prostatika ma ġewx irrappurtati. Dan l-istudju eżamina l-impatt tal-glikożidi cistanche fuq il-fibrożi tal-prostata u esplora l-mekkaniżmi sottostanti, b'enfasi fuq l-assi miRNA-483-3p/MK2 rilevanti għar-rimodelazzjoni tal-matriċi extraċellulari.
L-ogħla kwalità Cistanche Deserticola
Materjali u Metodi
Materjali
miRNA-483-3p antagomir (modifikat kimikament): mixtri minn Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Nru tal-lott: 12953).
Injezzjoni ta 'propionate ta' testosterone: Tianjin Jinyao Pharmaceutical Co., Ltd. (Nru tal-lott: 150822).
Cistanche glycosides: Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd. (purità akbar minn jew ugwali għal 98%, Nru tal-lott: M14062). Nota għall-iżviluppaturi nutraċewtiċi: materjal jikkorrispondi għal frazzjoni standardizzata ta 'phenylethanoid glycoside; tiżgura speċifikazzjoni mill-kontenut HPLC (eż., PEGLs totali, echinacoside/acteoside).
Pilloli Finasteride: MSD (Hangzhou) Pharmaceutical Co., Ltd. (Nru tal-lott: U011856; 5 mg/pillola).
Kit tal-assaġġ tar-reporter Luciferase (Nru tal-lott: E2920) u vettur psiCHECK-2 (Nru tal-lott: C8021): Promega (USA).
Kit ta 'detezzjoni tal-qPCR: KAPA Biosystems (Nru tal-lott: KM4101).
Hydroxyproline (Hyp) assay kit: Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nru tal-lott: 20190626).
Primers għal TGF-1, MK2, u MKK6 ġew sintetizzati minn Wuhan Tianyi Huiyuan Biotechnology Co., Ltd.
L-ogħla kwalità Cistanche Deserticola
Annimali
Ġrieden maskili C57BL / 6 ta’ seba’ ġimgħat ta’ seba’ ġimgħat (SPF) (22–24 g) inkisbu mill-Università Agrikola ta’ Huazhong (Nru tal-Liċenzja tal-Produzzjoni: SCXK Hubei 2015-0019). L-annimali kienu miżmuma fi 23 ± 2 grad, 50 ± 5% umdità, taħt ċiklu ta '12-il siegħa dawl/12-il siegħa dlam.
Tagħmir
Sistema PCR f'ħin reali StepOnePlus (Applied Biosystems, USA).
Luminometru tal-mikroplate Luminoskan 5200110 (Thermo Fisher Scientific, USA).
Disinn Sperimentali u Mudell BPH
Wara ġimgħa ta 'akklimatizzazzjoni, ġrieden ġew allokati b'mod każwali (tabella tan-numri każwali) f'ħames gruppi (n=6 għal kull grupp): kontroll normali, kontroll tal-mudell BPH, finasteride, cistanche glycosides, u cistanche glycosides + miRNA-483-3p antagomir. Il-mudell BPH kien indott minn kastrazzjoni kirurġika flimkien ma 'injezzjoni taħt il-ġilda kuljum ta' propionate ta 'testosterone f'7.5 mg·kg⁻¹ għal 30 jum. Il-grupp finasteride irċieva finasteride orali 1 mg·kg⁻¹ kuljum (maħlul f'0.5% CMC-Na). Il-grupp ta' cistanche glycosides irċieva glycosides orali ta' cistanche 100 mg·kg⁻¹ kuljum. Il-grupp kombinat irċieva glikosidi cistanche orali 100 mg·kg⁻¹ kuljum flimkien ma' injezzjoni tal-vini tad-denb ta' miRNA-483-3p antagomir f'10 mg·kg⁻¹ kull 5 ijiem wara l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Gruppi ta 'kontroll tal-mudell normali u BPH irċevew volum ugwali ta' 0.5% CMC-Na oralment.
Wara 30 jum, il-ġrieden ġew anestetizzati permezz ta 'injezzjoni intraperitoneali ta' sodium pentobarbital (80 mg·kg⁻¹) u ewtanizzati permezz ta 'dislokazzjoni ċervikali. Il-prostati tneħħew; porzjonijiet ġew iffissati u inkorporati għat-tbajja 'Masson's trichrome u Sirius Red, u tessuti friski ġew ipproċessati għal qPCR, Western blotting, u analiżi bijokimiċi. Il-proċeduri tal-annimali kkonformaw mar-Regolamenti Provinċjali ta 'Hubei dwar il-Ġestjoni tal-Annimali tal-Laboratorju (Nru ta' Kwalifikazzjoni tal-Operatur: TY20190784).
L-ogħla kwalità Cistanche Deserticola
Valutazzjoni tal-Fibrożi tal-Prostatika
Id-depożizzjoni tal-kollaġen ġiet evalwata permezz tat-tbajja’ trikromju ta’ Sirius Red u Masson. Il-kontenut ta 'hyp fit-tessut tal-prostata ġie kkwantifikat għal kull struzzjonijiet tal-kit. Għal kull slide, tliet oqsma każwali ġew analizzati bl-użu ta 'Image-Pro Plus 6.0 biex jiġi kkalkulat il-perċentwal ta' żona mtebbgħin pożittiva.
Evalwazzjoni tal-Attività tal-Pathway MK2
qPCR: Ġew imkejla l-livelli ta' mRNA prostatiku ta' MK2, TGF-1, u MKK6. Sekwenzi tal-primer:
MK2 (264 bp) quddiem 5'-GGAAGTGCCTGCTGAT-3', lura 5'-AGTTGTGACTGGTGGTTT-3';
TGF- 1 (153 bp) 'il quddiem 5'-AGGAGACGGAATACAGGG-3', lura 5'-ATGAGGGAGCAGGAAGGG-3';
MKK6 (146 bp) quddiem 5'-CCTCAGACCAGTTCCAC-3', lura 5'-CGCATCTTCTCCCACCA-3'.
Western blot: Il-livelli ta' proteina ta' TGF-1, MK2, p-MK2, MKK6, u p-MKK6 ġew determinati wara protokolli stabbiliti qabel.
Kejl ta' miRNA-483-3p
miRNA-483-3p primers: quddiem 5'-GGGTCACTCCTCCCCT-3', reverse 5'-AACTGGTGTCGTGGGAGTCGGC-3'; RT primer 5'-CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGAAGACGGG-3'. qPCR sar skont l-istruzzjonijiet tal-kit.
Luciferase Reporter Assay
L-MK2 3'UTR ġie kklonat fil-vettur psiCHECK-2 biex jinbnew plasmidi reporter tat-tip selvaġġ (WT) u mutanti (MUT). Iċ-ċelloli HEK-293T ġew ko-trasfettati ma 'miRNA-483-3p u l-plażmidi reporter bl-użu ta' Lipofectamine 3000; ċelloli ta' kontroll irċevew vettur vojt. Wara 24 siegħa, l-attività tal-luċiferażi ġiet imkejla skont il-protokoll tal-kit.
Analiżi Statistika
Id-dejta ġiet analizzata bl-użu tal-SPSS 17.0. ANOVA f'direzzjoni waħda ġiet applikata wara konferma tan-normalità u l-omoġeneità tal-varjanza. Ir-riżultati huma espressi bħala medja ± SD. Testijiet post hoc tal-LSD intużaw għal paraguni multipli. Id-differenzi kienu kkunsidrati statistikament sinifikanti f'P <0.05.
Riżultati
Meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll normali, il-grupp ta' kontroll tal-mudell BPH wera żidiet notevoli fid-depożizzjoni tal-kollaġen tal-prostata; espressjonijiet mRNA elevati ta' TGF-1, MK2, u MKK6; u livelli ogħla ta' proteina ta' TGF-1, p-MK2, u p-MKK6 (P kollha <0.01). Il-livelli ta 'miRNA-483-3p tnaqqsu b'mod sinifikanti (P <0.01).
Relativ għall-kontroll tal-mudell BPH, il-glikożidi cistanche irregolaw b'mod sinifikanti l-miRNA-483-3p, naqqsu l-livelli ta 'mRNA ta' TGF-1, MK2, u MKK6, naqqsu l-livelli ta 'proteini ta' TGF-1, p-MK2, u p-MKK6, u ttaffi d-depożizzjoni tal-collagen prostatiku.
Meta mqabbla mal-glikożidi cistanche waħedhom, il-kombinazzjoni ta 'glikożidi cistanche mal-antagomir miRNA-483-3p naqqset b'mod sinifikanti l-miRNA-483-3p u żiedet id-depożizzjoni tal-kollaġen, flimkien mal-livelli tal-mRNA ta' TGF-1, MK2, u MKK6, kif ukoll il-livelli tal-proteini ta 'TGF-K2, u p-M L-assaġġ tar-reporter luciferase ikkonferma li miRNA-483-3p jimmira direttament lil MK2. Għall-iżvilupp tas-supplimenti tad-dieta, il-kunsiderazzjonijiet jinkludu: Standardizzazzjoni: tiddefinixxi phenylethanoid glycosides totali u komposti markaturi (eż., echinacoside akbar minn jew ugwali għal 20%, acteoside akbar minn jew ugwali għal 10% mill-HPLC). Traduzzjoni tad-doża: 100 mg·kg⁻¹ fil-ġrieden japprossimaw 8–12 mg·kg⁻¹ doża ekwivalenti umana (HED) bl-użu ta' skalar tal-erja tas-superfiċje tal-ġisem, bejn wieħed u ieħor 500–800 mg/jum għal adult ta' 60–70 kg; validazzjoni klinika hija meħtieġa. Kwalità u sikurezza: tiżgura l-identità (sors botaniku, kontaminanti, metalli tqal, pestiċidi), u tivvaluta l-interazzjonijiet potenzjali ma '-blockers jew inibituri 5-reductase. Pretensjonijiet: talbiet ta' struttura/funzjoni għandhom jiffokaw fuq "l-appoġġ tal-fluss urinarju u l-bilanċ tat-tessut tal-prostata" u jevitaw il-lingwaġġ tat-trattament tal-mard mingħajr evidenza klinika. Informazzjoni tal-AwturDiskussjoni (qosor, iffukata fuq in-nutraċewtika)
Dan l-istudju jindika li glycosides cistanche attenwaw il-fibrożi tal-prostatika f'mudell BPH indott minn kastrazzjoni/testosterone billi jirregolaw il-miRNA-483-3p u jrażżnu l-attività tal-mogħdija MK2 'l isfel mis-sinjalar TGF. Minħabba l-limitazzjonijiet tal-farmakoterapiji attwali tal-BPH fl-indirizzar tal-remodeling fibrotiku, il-glikożidi cistanche jistgħu jirrappreżentaw strateġija nutraċewtika komplementari mmirata lejn il-bilanċ tal-matriċi extraċellulari.Konklużjonijiet
Cistanche glycosidesittaffi l-fibrożi tal-prostata fil-BPH billi tirregola miRNA-483-3p u tinibixxi s-sinjalar MK2. Dawn is-sejbiet jappoġġaw aktar riċerka translazzjonali dwar estratti standardizzati ta' cistanche bħala nutraċewtiċi aġġuntivi għas-saħħa tal-prostata.Rikonoxximenti
Dan ix-xogħol kien appoġġjat mill-Fondazzjoni Nazzjonali tax-Xjenza Naturali taċ-Ċina (Għotja Nru. 81703594).
Yang Chuhao (1991–), mara, Wuhan, Hubei, spiżjar kliniku, MS; qasam ewlieni tar-riċerka: spiżerija klinika. ORCID: 0000-0002-8921-5758; Tel: +86-27-82440854.
