Il-polysaccharides ta 'Cistanche DesertIcola tnaqqas in-nefropatija dijabetika fil-ġrieden billi taffettwa l-flora intestinali u tinibixxi r-riċettur tat-toll 4 / il-mogħdija ta' sinjalazzjoni tal-fattur nukleari-κB ⅱb ⅱ

2.5 Effett tas-CDPs fuq il-patoloġija tal-kolon fil-ġrieden C57BL / 6J

Cistanche Deserticola estratt trab minn materja prima ta 'kwalità għolja

Ikklikkja biex tikseb aktar dettalji

Kif muri fil-Figura 2, it-tebgħa ta 'H&E żvelat li l-istruttura tat-tessut tal-kolon ta' ġrieden normali kienet normali, il-kripta kienu rranġati sewwa u sewwa, in-numru kien kbir, u ċ-ċelloli epiteljali ma kellhom l-ebda deġenerazzjoni u t-twaqqigħ ovvji. B'kuntrast, il-ġrieden DN urew twaqqigħ ovvju ta 'ċelloli epiteljali tal-kolon, infiltrazzjoni ta' ċelloli infjammatorji, ħsara fuq ċelloli tal-kripta, għajbien ta 'struttura glandulari intestinali, u żieda fil-permeabilità. Wara 4 ġimgħat ta 'intervent ta' CDPS, il-kundizzjonijiet patoloġiċi ta 'hawn fuq irkupraw fi gradi differenti.

Ir-riżultati tat-tebgħa tal-AB-PAS urew li meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, in-numru ta' ċelloli tal-goblet mhux imħassba fil-kolon tal-ġrieden tal-grupp mudell tnaqqas b'mod sinifikanti, u s-sekrezzjoni tal-proteina tal-mukus aċiduż żdiedet b'mod sinifikanti; In-numru ta 'ċelloli tal-goblet mhux imħassba fil-kolon tal-grupp ta' kontroll kien l-akbar; Meta mqabbel mal-grupp tal-mudell, is-sekrezzjoni tal-proteina tal-mukus aċiduż koloniku fil-grupp CDPS-H tnaqqset.

Fig. 2 Effett ta 'CDPs fuq bidliet istopatoloġiċi koloniċi fil-ġrieden DN kif eżaminat minn H&E u AB-PAS

2.6 Effett ta 'CDPs fuq il-flora intestinali ta' ġrieden C57BL / 6J

L-effetti ta 'CDPs fuq indikaturi bijokimiċi u r-riżultati patoloġiċi tal-ġrieden DN ġew analizzati b'mod komprensiv, u l-kontenut tal-kolon tal-ġrieden fil-grupp CDPS-H bl-aħjar effikaċja ġenerali ġew magħżula għar-riċerka tal-flora intestinali.

2.6.1 Varjant tas-Sekwenza Amplicon (ASV) Distribuzzjoni tad-Dijagramma Venn Kif muri fil-Figura 3, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, l-abbundanza relattiva ta' speċi ta 'flora intestinali fil-grupp ta' ġrieden tal-grupp naqset, u l-abbundanza relattiva tjiebet wara t-trattament CDPS.

Cistanche

2.6.2 Analiżi tad-Diversità Alpha Kif muri fit-Tabella 6, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, l-indiċi ChaO1 tal-flora intestinali tal-ġrieden tal-grupp mudell naqas. Wara l-intervent tas-CDPs, l-indiċi CHAO1 żdied, iżda ma kien hemm l-ebda sinifikat statistiku, li jindika li CDPs jista 'jbiddel l-istruttura tal-flora intestinali billi jżid in-numru totali ta' speċi. L-indiċi tal-kopertura huwa qrib 1, li jindika li r-riżultati tas-sekwenzar jistgħu bażikament jirriflettu s-sitwazzjoni vera tal-kampjun. Ma kien hemm l-ebda differenza statistikament sinifikanti f'Shannon, Simpson, kopertura, u pielou _ E indiċi fost il-gruppi, li jindika li r-rikkezza tal-ispeċi u d-diversità tal-komunitajiet ambjentali f'kull grupp kienu tajbin, u l-kopertura tal-kolonja kienet konsistenti u mqassma b'mod uniformi.

Fig. 3 Venn Dijagramma tad-Distribuzzjoni tal-ASV

Tabella 6 Indiċi tad-Diversità Alfa ta 'Mikrobiota Intestinali fil-Ġrieden fil-Gruppi ta' Kontroll, Mudell u CDPS (N=6)

2.6.3 Analiżi tad-Diversità Beta

Kif muri fil-Figura 4, permezz ta 'analiżi tad-diversità beta, l-analiżi tal-komponenti prinċipali (PCA) tista' tiddistingwi tliet gruppi ta 'kampjuni fi spazju tridimensjonali, li jindikaw li hemm differenzi sinifikanti fil-flora intestinali ta' dawn it-tliet gruppi ta 'kampjuni. Il-grupp mudell u l-grupp ta 'kontroll huma separati tul l-assi PC2, u l-grupp CDPS-H huwa bejn il-grupp mudell u l-grupp ta' kontroll, viċin il-grupp ta 'kontroll.

Fig. 4 Beta diversità tal-flora intestinali fil-ġrieden fil-gruppi ta 'kontroll, mudell u cdps (n=6)

2.6.4 Effetti ta 'CDPs fuq il-flora intestinali ta' ġrieden C57BL / 6J

2.6.4.1 Livell ta 'Phylum

Kif muri fil-Figura 5, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, l-abbundanza relattiva ta' firmicutes fil-grupp tal-mudell żdiedet b'mod sinifikanti, l-abbundanza relattiva ta 'batteroidota u verrukomikrobia naqset b'mod sinifikanti, u l-proporzjon ta' abbundanza relattiva (b / f) ta 'bacteroides ma' firmicutes naqas. Meta mqabbel mal-grupp tal-mudell, CDPs żiedu b'mod sinifikanti l-abbundanza relattiva ta 'batterojdi u verrukomikrobia, naqsu l-abbundanza relattiva ta' firmicutes, u żied il-valur B / F, li kien eqreb lejn il-valur B / F tal-grupp ta 'kontroll.

Fig. 5 bar chart tal-abbundanza relattiva ta 'flora intestinali fil-livell tal-phylum (n=6)

2.6.4.2 Livell tal-Ġeneru

L-istogramma tal-kompożizzjoni tal-abbundanza tal-ispeċi fil-livelli tal-aqwa 30 ġeneru (Figura 6) turi li hemm differenzi fil-flora intestinali tal-ġrieden fil-grupp tal-mudell u l-grupp CDPS-H. Hemm 16-il ġeneru batteriku differenti bejn il-grupp mudell u l-grupp ta 'kontroll; Hemm 8 ġeneri batteriċi differenti bejn il-grupp CDPS-H u l-grupp mudell; 5 Ġeneri batteriċi fiż-żona li jikkoinċidu jistgħu jkunu l-ġeneri tal-batterja li s-CDPs jistgħu jtejbu n-nefropatija dijabetika (Figura 7). Kif jidher mit-Tabella 7, fil-livell tal-ġeneru fil-flora intestinali tal-ġurdien, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, l-abbundanza relattiva ta' allobaculum fil-grupp tal-mudell tnaqqset b'mod sinifikanti, u l-abbundanza relattiva ta 'roseBuria, Romboutsia, Ruminococcus {_ torques _ grupp u rf39 (p<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

Fig. 6 bar chart tal-abbundanza relattiva ta 'flora intestinali fil-livell tal-ġeneru (n=6)

Fig. 7 Venn dijagramma tal-flora intestinali fil-livell tal-ġeneru (n=6)

Tabella 7 Effetti ta 'CDPs fuq l-abbundanza relattiva ta' ġeneri mikrobjali tal-musrana differenzjali bejn il-gruppi ta 'kontroll, mudell u cdps (n=6)

2.6.4.3 Effett ta 'CDPs fuq l-espressjoni ta' Colonic Zo -1 u occludin

Kif muri fil-Figura 8 u t-Tabella 8, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, il-livelli ta' espressjoni relattiva ta 'proteini zo -1 u occludin fit-tessut tal-kolon tal-ġrieden fil-grupp tal-mudell tnaqqsu b'mod sinifikanti (p <{0}. 01); Meta mqabbel mal-grupp tal-mudell, l-intervent tas-CDPs f'kull doża jista 'l-livelli ta' espressjoni relattiva ta 'zo -1 u l-proteini occludin fit-tessut tal-kolon żdiedu b'mod sinifikanti (p<0.01).

Fig. 8 Espressjoni ta 'zo -1 u occludin fit-tessut tal-kolon ta' ġrieden minn kull grupp (n=3)

Tabella 8 livelli ta 'espressjoni relattiva ta' zo -1 u occludin fit-tessut tal-kolon ta 'ġrieden minn kull grupp (n {= 3)

Materja prima Cistanche

2.7 Effett ta 'CDPs fuq il-kliewi TLR4 / NF-κB Espressjoni tal-proteina

Kif muri fil-Figura 9 u t-Tabella 9, meta mqabbel mal-grupp ta 'kontroll, l-espressjoni relattiva tal-proteina TLR4 fit-tessut tal-kliewi tal-ġrieden fil-grupp tal-mudell u l-proporzjonijiet ta' P-NF-κBP65 / NF-κB P65 u PI κBα / I κBα kienu miżjuda b'mod sinifikanti. Għoli (p<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

Fig. 9 Analiżi tal-Western blot tal-espressjoni tal-proteina relatata mal-mogħdija ta 'sinjalazzjoni TLR4 / NF-κB fit-tessut tal-kliewi tal-ġrieden minn kull grupp (n {= 3)

Tabella 9 Livelli ta 'espressjoni relattiva ta' proteini relatati mal-mogħdija ta 'sinjalazzjoni TLR4 / NF-κB fit-tessut tal-kliewi tal-ġrieden minn kull grupp (n {= 3)