Cistanche Deserticola Polysaccharides itaffu t-tnaqqis konjittiv fil-ġrieden mudell li qed jixjieħu billi jirrestawraw l-assi tal-mikrobijota-moħħ tal-musrana

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Yuan Gao 1,*, Bing Li 1,*, Hong Liu 1, Yajuan Tian 2, Chao Gu 1, Xiaoli Du 1, Ren Bu 1, Jie Gao 1, Yang Liu 1, Gang Li 1

ASTRATT

Evidenza reċenti tissuġġerixxi alterazzjonijiet fl-assi tal-mikrobijota tal-imsaren-moħħ jistgħu jmexxu indeboliment konjittiv mat-tixjiħ. Fl-istudju preżenti, osservajna li l-amministrazzjoni fit-tul ta 'D-galactose lill-ġrieden indotta tnaqqis konjittiv, dysbiosis mikrobjali tal-musrana, infjammazzjoni periferali, u stress ossidattiv. F'dan il-mudell ta' tnaqqis konjittiv relatat mal-età,Cistanche deserticola polysaccharides(CDPS) tejbet il-funzjoni konjittiva fil-ġrieden ittrattati b'D-galactose billi rrestawra l-omeostasi mikrobjali tal-musrana, u b'hekk tnaqqas l-istress ossidattiv u l-infjammazzjoni periferali. L-effetti ta 'benefiċċju ta' CDPS f'dawn il-ġrieden mudell li qed jixjieħu tneħħew permezz tal-ablazzjoni tal-mikrobijota tal-musrana b'antibijotiċi jew immunosoppressjoni b'cyclophosphamide. Profiling metabolomic tas-serum wera li l-livelli ta 'krejatinina, valine, L-methionine, o-Toluidine, N-ethylaniline, aċidu uriku u proline kienu kollha mibdula fil-ġrieden mudell li qed jixjieħu, iżda ġew restawrati minn CDPS. Dawn is-sejbiet urew li CDPS itejjeb il-funzjoni konjittiva f'mudell ta 'tixjiħ indott mid-D-galactose fil-ġrieden billi jirrestawra l-omeostażi tal-assi mikrobijota-imsaren tal-moħħ, li ttaffi żbilanċ ta' aċidu amminiku, infjammazzjoni periferali u stress ossidattiv. CDPS għalhekk juri potenzjal terapewtiku għal pazjenti b'disturbi tal-memorja u tat-tagħlim, speċjalment dawk relatati mad-disbijożi mikrobjali tal-musrana.

Cistanche deserticolapolisakkaridi

INTRODUZZJONI

L-amministrazzjoni fit-tul ta 'D-galactose (D-gal) u melħ tal-berillju jinduċu tixjiħ f'mudelli sperimentali ta' annimali u kulturi ta 'ċelluli primarji in vitro u tintuża biex jiġu identifikati mekkaniżmi sottostanti l-proċess ta' tixjiħ naturali [1-4]. Studji preċedenti juru li t-tnaqqis konjittiv fil-ġrieden mudell ta’ tixjiħ indott mid-D-galactose huwa relatat ma’ livelli ta’ proteina mnaqqsa tal-fattur tat-tkabbir tan-nervituri (NGF) u żieda fl-ispeċi tal-ossiġnu reattiv (ROS) fil-moħħ, li t-tnejn jikkawżaw deġenerazzjoni tan-newroni tal-hippocampal u jnaqqsu. newroġenesi [3, 4]. Studji reċenti wrew ukoll li l-kompożizzjoni u n-numru ta 'mikrobijota tal-musrana umana jinbidlu b'mod sinifikanti matul il-proċess tat-tixjiħ [5].

Cistanche deserticolahija ħaxixa li tikber prinċipalment fir-reġjun tad-deżert tal-Majjistral taċ-Ċina u tintuża fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża. Huwa komunement magħruf bħala "ġinseng tad-deżert." L-estratti ta 'Cistanche deserticola fihom diversi komposti farmakoloġikament attivi, inklużi phenylethanoid glycosides, iridojdi, lignose, oligosaccharides, polysaccharides, u amino acids; dawn il-komposti huma assoċjati ma 'proprjetajiet anti-infjammatorji, anti-ossidattivi, anti-senescent, newroprotettivi u immunomodulatorji [6, 7]. Pereżempju, polisakkaridi estratti minn Cistanche deserticola intużaw fil-mediċina tradizzjonali Ċiniża biex jikkuraw il-kanċer tal-kolorektum [8]. Firxa wiesgħa ta 'polisakkaridi dgħajjef tossiċi b'bijoattivitajiet utli ġiet iżolata minn diversi organiżmi, bħal Chuanqiong polysaccharide, Ganoderma lucidum polysaccharide, u Lycium barbarum polysaccharide [9-11]. CDA-

0.05 huwa galactoglucan iżolat minn Cistanche deserticola li jippromwovi t-tkabbir ta 'diversi batterji intestinali ta' benefiċċju, inklużi diversi speċi ta 'Bacteroides u Lactobacillus [12].

Il-mekkaniżmi sottostanti tal-proċess normali tat-tixjiħ huma implikati wkoll f'diversi mard tal-bniedem bħal disturbi newrodeġenerattivi, aterosklerożi koronarja, dijabete tat-tip 2 (T2DM) u pressjoni għolja [13, 14]. Studji reċenti wrew li l-bidliet fil-flora intestinali għandhom rwol sinifikanti fit-tixjiħ tal-bniedem [15]. Diversi studji wrew li l-għoti fit-tul ta 'D-galactose fil-ġrieden u l-firien sperimentali jimita l-proċess normali ta' tixjiħ u huwa mudell utli biex jiġu studjati fenotipi relatati mat-tixjiħ bħat-tnaqqis tal-konjizzjoni [16]. Barra minn hekk, ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott mid-D-galactose juru bidliet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana [17]. Għalhekk, aħna ipoteżijna li bidliet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana jistgħu jikkawżaw tnaqqis konjittiv fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-galactose, u investigajna jekk Cistanche deserticola polysaccharides (CDPS) jistgħux itaffu t-tnaqqis konjittiv billi jirrestawraw id-disbiożi tal-mikrobijota tal-musrana.

Cistanche deserticola

RIŻULTATI

Ġrieden mudell ta’ tixjiħ ikkawżat mid-D-galactose juru tnaqqis konjittiv u diżbijożi mikrobjali tal-musrana

Aħna analizzajna l-prestazzjoni tal-imġieba ta 'ġrieden tat-tip selvaġġ (WT) u dawk ittrattati b'150 mg D-gal għal kull Kg piż tal-ġisem għal 2 xhur (mudell jew Mod) bl-użu ta' rikonoxximent ta 'oġġett ġdid u testijiet tal-labirint tal-ilma Morris (MWM). Il-valuri preferenzjali tal-indiċi fit-test tar-rikonoxximent tal-oġġett ġdid tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-ġrieden tal-grupp Mod meta mqabbla mal-ġrieden tal-grupp WT (Figura 1A, 1B). Ir-riżultati tat-test MWM wrew li l-ħin ta 'latenza tal-ħarba wara s-sitt jum żdied b'mod sinifikanti fil-grupp Mod meta mqabbel mal-grupp WT (Figura 1C, 1D). Barra minn hekk, il-qsim tal-pjattaforma fil-mira u l-ħinijiet tal-għawm fil-kwadrant fil-mira tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-grupp Mod meta mqabbel mal-grupp WT (Figura 1E, 1F). Dawn ir-riżultati wrew tnaqqis sinifikanti fil-kapaċitajiet tat-tagħlim u l-memorja tal-ġrieden mudell li qed jixjieħu indotti minn D-gal.

Imbagħad analizzajna d-differenzi fl-abbundanza u l-kompożizzjoni tal-phyla mikrobjali tal-imsaren, il-ġeneri u l-ispeċi fil-kampjuni tal-ħmieġ tal-gruppi tal-ġrieden Mod u WT bl-użu ta 'dejta ta' sekwenzar 16S ribosomal RNA (rRNA) minn kampjuni tal-ħmieġ. Il-flora intestinali predominanti fil-ġrieden tal-grupp WT u Mod kienu Firmicutes u Bacteroides. Madankollu, l-abbundanza ta 'Bacteroides tnaqqset b'mod sinifikanti u l-abbundanza ta' Firmicutes żdiedet b'mod sinifikanti fil-grupp Mod meta mqabbel mal-grupp WT (Figura 2A). Sussegwentement, għamilna analiżi diskriminanti lineari (LDA) biex niddeterminaw il-punteġġi tad-daqs tal-effett LDA (LEfSe) segwiti minn testijiet Kruskal-Wallis u Wilcoxon biex tevalwa l-abbundanza relattiva ta 'taxa differenti fil-ġrieden tal-grupp WT u Mod. Ir-riżultati LDA huma murija fil-Figura 2B. Barra minn hekk, bnejna cladograms li juru arrikkiment differenzjali ta 'ġeneri u speċi varji li jappartjenu għall-phyla Bacteriodes u Firmicutes fil-gruppi WT u mudell (Figura 2C). B'mod ġenerali, ir-riżultati tagħna wrew ħila konjittiva indebolita u dysbiosis mikrobjali tal-musrana fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott mid-D-galactose.

It-trattament CDPS itejjeb il-kapaċità konjittiva fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal

Aħna analizzajna jekk it-trattament CDPS itaffix it-tnaqqis konjittiv fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal. Matul il-

Xahrejn ta' amministrazzjoni, il-piż tal-ġisem kien imkejjel kull ġurnata oħra. Il-piżijiet tal-ġisem tal-mudell u l-gruppi CDPS ta 'ġrieden kienu simili (Figura 3A). Wettaq esperimenti ta 'mġieba wara l-aħħar doża. Rikonoxximent ta 'oġġett ġdid u riżultati tat-test tal-labirint tal-ilma Morris wrew li l-memorja għal żmien qasir kienet ogħla b'mod sinifikanti fil-gruppi CDPS ta' ġrieden meta mqabbla mal-grupp mudell ta 'ġrieden; memorja fit-tul fil-grupp CDPS ta 'ġrieden kienet ogħla iżda statistikament insinifikanti meta mqabbla mal-grupp mudell ta' ġrieden (Figura 3B, 3C). Dan issuġġerixxa li t-trattament CDPS ħassar it-telf ta 'memorja ta' rikonoxximent ta 'oġġett għal żmien qasir fil-ġrieden ittrattati D-gal.

It-tagħlim spazjali u l-memorja ta 'dawn il-ġrieden ġew evalwati permezz tat-test tal-labirint tal-ilma Morris, u r-riżultati wrew li l-ħinijiet ta' latency tal-ħarba tal-grupp tal-ġrieden CDPS kienu komparabbli mal-grupp tal-ġrieden WT u iqsar b'mod sinifikanti mill-ġrieden tal-grupp Mod (Figura 3D ). Barra minn hekk, il-ħinijiet ta 'latenza tal-ħarba kienu sinifikament aktar baxxi fis-sitt jum wara l-amministrazzjoni tas-CDPS meta mqabbla mal-grupp mudell (Figura 3E). Il-ħin tal-għawm fil-kwadrant fil-mira kien ogħla b'mod sinifikanti fil-gruppi CH u CM meta mqabbel mal-grupp mudell. Il-grupp CL huwa ogħla mill-grupp mudell iżda l-ebda sinifikat statistiku (Figura 3F). Barra minn hekk, in-numru ta 'qsim tal-pjattaforma kien ogħla b'mod sinifikanti fil-gruppi CM u CL meta mqabbel mal-grupp mudell. Madankollu, il-grupp CH huwa ogħla mill-grupp mudell u l-ebda sinifikat statistiku (Figura 3G). Dawn ir-riżultati wrew li t-trattament CDPS tejbet it-tagħlim spazjali u l-memorja fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal.

It-trattament CDPS jirrestawra l-omeostażi tal-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana fil-ġrieden mudell ta’ D-galactose-aging

Monosaccharides u polysaccharides huma n-nutrijenti essenzjali meħtieġa għat-tkabbir tal-batterji [18-21]. Huwa rrappurtat ukoll li CDPS jirregola l-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana [22]. Għalhekk, analizzajna jekk it-trattamenti CDPS naqqsux id-disbiożi mikrobjali tal-imsaren fil-ġrieden tal-grupp tal-mudell billi evalwaw id-dejta tas-sekwenzjar tal-rRNA 16S ta 'kampjuni tal-ħmieġ mill-gruppi ta' ġrieden WT, mudell u CDPS.

L-ewwel, aħna kkalkulajna indiċijiet tad-diversità alfa biex nevalwaw ir-rikkezza ġenerali tal-mikrobijota ippurgar u d-differenza strutturali fost dawn il-gruppi. Aħna analizzajna l-indiċi tad-diversità alfa (-diversità) bħal speċi osservati, valuri tal-indiċi Shannon, Chao 1, ACE, u Simpson biex niddeterminaw bidliet fil-kompożizzjoni ta 'diversi speċi batterjali fil-kampjuni tal-ħmieġ ta' gruppi murini differenti. L-indiċijiet -diversità (speċi osservati, Shannon, Chao 1, ACE, u Simpson indiċi) kienu ogħla fil-gruppi WT u CDPS ta 'ġrieden meta mqabbla mal-grupp mudell, iżda sinifikat statistiku kien osservat biss għall-valuri indiċi Chao 1 bejn is-CM grupp u grupp Mod. Indika li l-amministrazzjoni ma 'CDPS iżżid ir-rikkezza tal-mikrobijoma (Figura 4A-4E). Sussegwentement, analizzajna l-indiċi tad-diversità biex nidentifikaw differenzi fl-ispeċi mikrobjali tal-imsaren bejn il-gruppi tal-ġrieden WT, mudell, u CDPS bl-użu ta 'Scalar Multidimensjonali mhux metriku (NMDS), Analiżi tal-Koordinati Prinċipali (PCoA), u Analiżi tal-Komponent Prinċipali ( PCA). Il-PCA wera varjazzjonijiet fil-kompożizzjoni mikrobjali tal-imsaren tal-ġrieden tal-grupp mudell matul il-proċess tat-tixjiħ, inkluż it-tnaqqis fid-dimensjoni u l-manutenzjoni ta 'mudelli u xejriet (Figura 4F). Id-differenzi fil-mikrobijota tal-ippurgar bejn il-gruppi WT, mudell u CDPS ġew identifikati abbażi tal-PCoA tad-distanzi UniFrac mhux peżati għall-ġeni 16S rRNA (Figura 4G). L-analiżi ta 'clustering wriet differenzi sinifikanti fl-NMDS bejn il-grupp tal-mudell u l-gruppi WT u CDPS (Figura 4H).

Aħna evalwajna l-aqwa 10 phyla tal-mikrobijota tal-musrana u sibna li l-abbundanza tal-phyla Bacteroides kienet ogħla b'mod sinifikanti fil-grupp CH, CM, u CL meta mqabbla mal-grupp mudell (Figura 4I). Dan issuġġerixxa li CDPS restawra l-omeostażi tal-mikrobijota tal-musrana fil-ġrieden ittrattati b'D-gal. Il-kladogrammi wrew arrikkiment differenzjali ta 'ġeneri u speċi varji li jappartjenu għal Bacteriodes u Firmicutes phyla fil-gruppi WT, mudell, u CDPS (Figura 4J). Kif muri fil-mapep tas-sħana, it-trattamenti CDPS naqqsu l-abbundenzi relattivi ta 'Thermoplasmata, Bacilli, Actinobacteria mhux identifikati, Fusobacteriia, u Elusimicrobia mhux identifikati u żiedu l-abbundenzi relattivi ta' Methanobacteria, Spirochaetia, Deltaproteobacteria, _Deferribacteres, Mollisosphaeria mhux identifikati,, Anatrolineacutes, , Erisipelotrikja, u _Ċjanobatterji mhux identifikati meta mqabbla mal-grupp mudell (Figura 4K). Dawn ir-riżultati wrew li t-trattament CDPS irrestawra b'mod sinifikanti l-omeostażi tal-mikrobijota tal-musrana fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal.

It-trattament CDPS itaffi n-newrodeġenerazzjoni fil-ġrieden mudell ta’ tixjiħ indott minn D-gal billi jnaqqas l-istress ossidattiv

Imbagħad analizzajna l-effetti tas-CDPS fuq l-infjammazzjoni billi analizzajna l-livelli tas-serum ta’ ċitokini pro-infjammatorji (IL-2 u TNF- ), u ċitokini anti-infjammatorji (IL-4 u IL{-10 ) fi gruppi differenti ta' ġrieden. Il-livelli tas-serum ta' IL-2 u TNF- kienu aktar baxxi b'mod sinifikanti u l-livelli tas-serum ta' IL-4 u IL-10 kienu ogħla b'mod sinifikanti fil-grupp CH, CM, u CL meta mqabbla mal-mudell grupp. Jintwera li CDPS għandu effetti anti-infjammatorji (Figura 5A-5D).

L-istress ossidattiv huwa kkawżat minn żieda fil-produzzjoni ta 'speċi ta' ossiġnu reattiv (ROS) u huwa wieħed mill-fatturi ewlenin li jippromwovu t-tixjiħ [23]. Għalhekk, analiznajna l-effetti ta 'CDPS fuq stress ossidattiv fil-mudell tal-ġurdien li qed tixjieħ indott minn D-gal billi evalwaw il-livelli tas-serum tal-enzima antiossidant, SOD, u l-prodott tal-perossidazzjoni tal-lipidi, malondialdehyde (MDA). Il-livelli tas-serum ta 'MDA kienu ogħla b'mod sinifikanti u l-livelli tas-serum ta' SOD tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-grupp Mod meta mqabbla mal-grupp WT, iżda, it-trattament CDPS qaleb dawn l-effetti (Figura 5E, 5F). Dawn ir-riżultati wrew li l-istress ossidattiv kien elevat fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal, iżda kien imnaqqas bit-trattament CDPS.

Barra minn hekk, ivvalutajna l-livelli ta’ stress ossidattiv fit-tessuti tal-moħħ billi analizzajna l-livelli tal-prodott avvanzat tal-proteina ossidizzata (AOPP), il-perossidazzjoni diretta tal-lipidi (LPO) u l-MDA kif ukoll l-attivitajiet ta’ enzimi antiossidanti bħal glutathione peroxidase (GSH-Px). ) u superoxide dismutase (SOD) fl-omoġenati tat-tessut tal-moħħ. L-imħuħ tal-ġrieden tal-grupp Mod urew attivitajiet imnaqqsa b'mod sinifikanti ta 'SOD u GSH-PX u żdiedu b'mod sinifikanti l-livelli ta' AOPP, LPO u MDA meta mqabbla mal-grupp WT, iżda dawn l-effetti ġew maqluba fil-grupp CH, CM, u CL (Figura 6A- 6E).

Barra minn hekk, wettaqna tbajja istoloġika tas-sezzjoni tal-moħħ bi tbajja 'H&E u Nissl biex nevalwaw l-effetti protettivi ta' CDPS fuq l-imħuħ ta 'ġrieden mudell li qed jixjieħu indotti minn D-gal. Il-ġrieden tal-grupp Mod urew tnaqqis sinifikanti fin-numri u l-volum newronali, żieda fid-distakk bejn in-newroni, arranġament irregolari tan-newroni, u piknosi nukleari fir-reġjun tal-hippocampus CA1 meta mqabbel mal-grupp WT, iżda dawn il-bidliet patoloġiċi tnaqqsu b'mod sinifikanti permezz ta 'trattamenti CDPS ( Figura 6F). Dawn ir-riżultati wrew li t-trattamenti CDPS naqqsu b'mod sinifikanti l-istress ossidattiv u l-patoloġija tal-moħħ fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal.

It-trattament CDPS inaqqas l-infjammazzjoni periferali u l-istress ossidattiv billi jżomm l-omeostasi mikrobjali tal-imsaren fil-ġrieden mudell indotti minn D-gal

Sussegwentement, analizzajna jekk il-bidliet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana kinux assoċjati ma 'żieda fl-infjammazzjoni periferali u stress ossidattiv waqt it-tixjiħ. Lejn dan, użajna cocktail triplu-antibijotiku (grupp ABX) jew cyclophosphamide (grupp Cy; ara wkoll Materjali u metodi) biex inaqqas il-mikrobijota tal-musrana jew jinduċi immunosoppressjoni fil-ġrieden mudell li qed jixjieħu ttrattati b'CDPS. It-trattament antibijotiku ħassar l-effetti ta 'benefiċċju tat-trattament CDPS fil-ġrieden mudell li qed jixjieħu. Aħna osservajna indeboliment fit-tagħlim u l-memorja (Figura 7A), u alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana (Figura 7B, 7C) fil-ġrieden tal-grupp ABX meta mqabbla mal-grupp ittrattat b'CDPS. Ir-riżultati ta 'hawn fuq jindikaw li anke l-amministrazzjoni ta' CDPS ma tistax iżid il-kapaċità tat-tagħlim u l-memorja tal-ġrieden wara li tbiddel il-flora intestinali. Barra minn hekk, osservajna żieda fil-livelli ta 'ċitokini pro-infjammatorji fil-moħħ u s-serum tal-ġrieden tal-grupp ABX meta mqabbla mal-grupp CDPS (Figura 7D-7N). Ir-riżultati tal-grupp ABX u l-grupp CY wrew li wara li l-flora intestinali u l-funzjoni immuni ġew meqruda, anke l-amministrazzjoni ta 'CDPS ma setgħetx ittejjeb il-kapaċità tat-tagħlim u l-memorja tal-ġrieden. Dawn ir-riżultati ssuġġerew li t-trattament CDPS naqqas l-infjammazzjoni periferali, l-istress ossidattiv u t-tnaqqis konjittiv fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal billi jipprevjeni d-disbijożi tal-musrana.

Imbagħad użajna l-mediċina immunosoppressiva, cyclophosphamide [24] biex niddeterminaw ir-rwol tal-infjammazzjoni fl-effetti ta 'benefiċċju ta' CDPS. Ġrieden CDPS ittrattati b'cyclophosphamide (grupp Cy) wrew kapaċità ta 'tagħlim u memorja indebolita, alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana, u livelli aberranti ta' ċitokini pro- u anti-infjammatorji fil-moħħ u fis-serum meta mqabbla mal-ġrieden tat-tip selvaġġ u tal-grupp CDPS. Madankollu, m'hemm l-ebda sinifikat meta mqabbel mal-mudell u l-grupp ABX. (Figura 7A– 7N). Din id-dejta turi li l-alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-imsaren iżidu l-infjammazzjoni periferali fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal.

CDPS jipprevjeni t-tixjiħ indott minn D-gal billi jirregola l-metaboliżmu tal-aċidu amminiku

Is-sistema immuni tal-host hija influwenzata minn metaboliti ġġenerati mill-mikrobijota tal-musrana [25]. Il-metaboliti tal-ħmieġ jirrappreżentaw qari funzjonali tal-metaboliżmu tal-mikrobi tal-musrana u l-kompożizzjoni tal-mikrobi tal-musrana [26]. Barra minn hekk, il-metaboliti tal-mikrobijota tal-musrana jidħlu fiċ-ċirkolazzjoni tad-demm u għandhom impatt fuq il-metaboliżmu u s-saħħa tal-ospitanti [26, 27]. Total ta '1058 metabolit ġew identifikati f'kampjuni tas-serum minn ġrieden fWT, Mod, u CDPS. Imbagħad, analizzajna dawn il-metaboliti bl-użu ta 'BioCyc, Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG), u Human Metabolome Database (HMDB) u sibna li 65 metaboliti kienu espressi b'mod differenzjali fil-grupp Mod meta mqabbel mal-grupp WT. Barra minn hekk, sibna li l-livelli ta’ 8 metaboliti (kreatinina, valina, L-(-)-Methionine, o-Toluidine, N-Ethylaniline, aċidu uriku, proline u fenilalanina) kienu differenti b’mod sinifikanti fost il-gruppi WT, Mod, u CDPS. . L-analiżi tal-arrikkiment tal-mogħdija ta 'dawn it-8 metaboliti bl-użu ta' MetaboAnalyst [28, 29] wriet li dawn il-metaboliti kienu relatati mal-metaboliżmu ta 'arginine, histidine, arginine, proline u purine (Figura 8A, 8B). 7 metaboliti differenti ta 'grupp MOD u grupp CDPS fil-grupp WT.

Imbagħad analizzajna jekk il-bidliet fil-metaboliżmu tal-aċidu amminiku kinux relatati ma 'alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana. Aħna osservajna li 7 metaboliti differenti ta 'gruppi WT, Mod, u CDPS (krejatinina, valine, L-(-)- Methionine, o-Toluidine, N-Ethylaniline, aċidu uriku, u proline) naqsu b'mod sinifikanti fl-ABX, Cy, u gruppi Mod meta mqabbla mal-gruppi WT u CDPS. Barra minn hekk, m'hemm l-ebda sinifikat bejn il-gruppi ABX u Cy (Figura 8C). Fl-aħħarnett, sabiex tiġi esplorata hemm korrelazzjoni bejn il-metaboliżmu differenzjali u mard ieħor relatat mat-tixjiħ. Aħna analizzajna l-korrelazzjoni bejn dawn is-seba 'metaboliti espressi b'mod differenzjat u l-mard tal-bniedem bl-użu tad-database MetaboAnalyst u sibna li dawn il-metaboliti kienu assoċjati mal-marda ta' Alzheimer (p=0.00173; Figura 8D, 8E). B'mod ġenerali, din id-dejta ssuġġeriet li CDPS jipproteġi kontra t-tixjiħ indott minn D-gal billi jirregola l-metaboliżmu tal-aċidu amminiku.

DISKUSSJONI

Tnaqqis progressiv fil-funzjoni konjittiva huwa karatteristika tat-tixjiħ. Studji preċedenti wrew li t-trattament CDPS tejbet b'mod sinifikanti t-tagħlim u l-memorja fil-ġrieden mudell li qed jixjieħu [30-33]. F'dan l-istudju, aħna wrejna li t-trattament CDPS tejjeb il-funzjoni konjittiva billi jinibixxi l-infjammazzjoni periferali u l-istress ossidattiv permezz tar-restawr tal-omeostasi mikrobjali tal-musrana fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal (Figura 9). Il-firien Sprague-Dawley mitmugħa b'polisakkaridi Cistanche wrew żieda fit-tkabbir ta 'batterji tal-musrana ta' benefiċċju u diversità tal-mikrobi tal-musrana mtejba [34]. CDA-0.05, polisakkarid newtrali ta' Cistanche, tejbet it-tkabbir ta' Lactobacilli probijotiċi [22]. Din id-dejta ssuġġeriet li Cistanche polysaccharides tejbu l-omeostasi tal-batterji tal-musrana.

F'dan l-istudju, aħna wrejna li CDPS għandu effetti anti-infjammatorji u jtejjeb il-kapaċità konjittiva tal-ġrieden mudell li qed jixjieħu billi jimmodula l-abbundanza ta 'ġeneri batterjali tal-musrana bħal Bacteroidetes, Firmicutes u Proteobacteria. Għalhekk, is-CDPs jistgħu jkunu terapewtikament ta 'benefiċċju għal mard relatat mat-tixjiħ billi tissawwar mill-ġdid il-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana [35, 36]. Barra minn hekk, studji preċedenti wrew li l-livelli ta 'ċitokini infjammatorji fis-serum u l-kolon huma assoċjati mal-abbundanza relattiva ta' ġeneri batterjali bħal Bacteroidetes, Firmicutes u Proteobacteria [37, 38]. Barra minn hekk, il-kompożizzjoni tal-mikrobi tal-musrana tirregola l-funzjoni tal-moħħ billi timmodula livelli ta 'ċirkolazzjoni ta' diversi ċitokini [39-43]. Ir-riżultati tagħna wrew li t-trattament CDPS naqqas l-abbundanza relattiva ta’ Thermoplasmata, Bacilli, Actinobacteria mhux identifikati, Fusobacteriia, u Elusimicrobia mhux identifikati, u żiedet l-abbundanza relattiva ta’ Methanobacteria, Spirochaetia, Deltaproteobacteria, Deferribacteres mhux identifikati, Mollicutes, Nitrososphaeria, Nitrolineae. Erisipelatrikja, u _Ċjanobatterji mhux identifikati.

Il-metaboliti tal-mikrobi tal-imsaren huma rilaxxati fid-demm u jirregolaw is-saħħa u l-metaboliżmu tal-ospitanti [26, 27]. Il-metaboliti mikrobjali tal-imsaren jistgħu jiġu stmati billi tiġi evalwata l-kompożizzjoni tal-metaboliti tal-ippurgar, li tinbidel b'alterazzjonijiet fil-kompożizzjoni tal-mikrobi tal-imsaren [44]. Studji reċenti wrew li l-livelli fil-plażma ta 'citrulline, proline, arginine, asparagine, phenylalanine u threonine huma assoċjati ma' disturbi newrodeġenerattivi inkluż il-marda ta 'Alzheimer [45, 46]. L-istudju tagħna wera li l-livelli tas-serum ta 'krejatinina, valine, L-methionine, o-Toluidine, N-ethylaniline, uric acid, u proline kienu assoċjati ma' tixjiħ indott minn D-gal fil-ġrieden.

Id-dirgħajn intrinsika u adattivi tas-sistema immuni għandhom rwol sinifikanti fiż-żamma tal-omeostażi tal-mikrobi tal-ospitanti fil-wiċċ luminali intestinali [47]. Il-mikrobijota intestinali għandha wkoll rwol sinifikanti fir-regolazzjoni tas-sistema nervuża ċentrali (CNS) u l-immunità billi tirrilaxxa ċitokini u metaboliti fid-demm [48, 49]. Iċ-ċitokini pro-infjammatorji għandhom rwol ewlieni f'diversi mard newrodeġenerattiv [50-52]. Pereżempju, id-deġenerazzjoni makulari relatata mal-età (AMD) u l-glawkoma huma assoċjati ma 'akkumulazzjoni extraċellulari ta' amyloid (A) u depożizzjoni intraċellulari ta 'tau iper-fosforilat (p-tau) u ħadid fiċ-ċelloli ganglion tar-retina (RGC) [44]. Barra minn hekk, l-infjammazzjoni għandha rwol sinifikanti fil-patoġenesi assoċjata mal-glawkoma [53]. Indeboliment tal-vista huwa sintomu bikri tal-marda ta 'Alzheimer (AD) u huwa manifestat qabel il-bidu tat-tnaqqis konjittiv [54]. L-istudju tagħna wera li s-CDPS jipproteġi kontra t-tnaqqis konjittiv u l-infjammazzjoni periferali billi jżomm l-omeostasi tal-mikrobijota tal-musrana.

Hemm diversi limitazzjonijiet għal dan l-istudju. L-ewwelnett, ir-relazzjoni bejn il-metaboliżmu tal-aċidu amminiku u l-kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana mhix magħrufa sew. It-tieni nett, il-kompożizzjoni u l-istruttura molekulari ta 'CDPS mhumiex magħrufa. Għalhekk, studji futuri huma meħtieġa biex jesploraw aktar ir-rwol regolatorju tas-CDPS biex itaffi l-AD permezz tal-assi tas-sinjalar tal-mikrobijota tal-musrana-moħħ.

Bħala konklużjoni, l-istudju tagħna wera li s-CDPS tejbet il-kapaċità konjittiva fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-gal billi restawra l-omeostasi tal-mikrobijota tal-musrana, u b'hekk irrestawra l-iżbilanċ ta' l-aċidu amminiku, infjammazzjoni periferali u stress ossidattiv. Dawn is-sejbiet jissuġġerixxu li s-CDPS huwa terapewtiku potenzjali għal pazjenti b'disturbi fit-tagħlim u l-memorja, speċjalment dawk assoċjati mad-disbijożi tal-musrana.

MATERJALI U METODI

Preparazzjoni tas-CDPS

Madwar 1.0 Kg ta 'Cistanche deserticola mnaddfa kien imnixxef bl-arja fil-forn f'40 grad C u polverizzat fi trab mhux raffinat. It-trab ġie estratt f'etanol sħun għal 3 sigħat. Ir-residwu ġie ffiltrat permezz tal-garża biex tneħħi l-filtrat u mbagħad dilwit bl-ilma (8X) u refluxed sekwenzjali għal 2 h, 1.5 h, u 1 h f'90 grad C. F'kull punt ta 'ħin, is-soluzzjoni ġiet ċentrifugata biex tissepara s-supernatant. u magħquda mal-filtrat kannella-aħmar. Imbagħad, il-filtrat kien ikkonċentrat taħt pressjoni mnaqqsa, imkessaħ għat-temperatura tal-kamra, miżjud bil-mod ma '95 fil-mija etanol (3X), u jitħalla joqgħod f'4 gradi C għal 24 siegħa. Imbagħad, is-soluzzjoni ġiet ċentrifugata f'6000 r/min għal 20 min f'4 gradi C. Il-preċipitat inġabar wara li tirrepeti l-estrazzjoni tal-ilma u l-preċipitazzjoni tal-alkoħol tliet darbiet. Il-preċipitat ġie rikostitwit fl-ilma, deproteinized, dialyzed, u freeze-dried biex tikseb Cistanche deserticola polysaccharide (CDPs) mhux raffinat. Il-kontenut tal-polisakkarid kien aktar minn 90 fil-mija kif evalwat mill-ispettrofotometrija ultravjola.

Raggruppament ta' annimali u trattamenti

Ġrieden Kunming maskili ta' tmien ġimgħat (Liċenzja SCXK Nru.2019-0010) inxtraw minn SPF Biotechnology Co. Ltd (Beijing, iċ-Ċina), miżmuma f'kamra ħafifa u kkontrollata b'temperatura, u mitmugħa bl-ikel u bl-ilma. L-esperimenti kollha fuq l-annimali twettqu skont protokolli approvati mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Università Medika ta 'Inner Mongolia. L-esperimenti twettqu skont il-Gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa (NIH) għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-Laboratorju.

Wara adattament ta 'ġimgħa għall-inħawi l-ġdid, 120 ġrieden ġew maqsuma fis-7 gruppi li ġejjin: (1) kontroll tat-tip selvaġġ (WT); grupp mudell (150 mg/Kg/jum D-gal; Mod); (3) CH: D-gal flimkien ma' 100 mg/kg CDPS; (4) CM: D-gal flimkien ma '50 mg/kg CDPS; (5) CL: D-gal flimkien ma' 25 mg/kg CDPS; (6) Grupp ABX: antibijotiċi flimkien ma 'D-gal flimkien ma' 50 mg/Kg CDPS; (7) Grupp Cy: cyclophosphamide flimkien ma 'D-gal flimkien ma' 50mg/kg CDPS.

Il-ġrieden mill-gruppi tal-mudell, ABX, Cy, u CDPS irċevew injezzjonijiet taħt il-ġilda ta 'melħ maħlul.

150 mg/kg D-gal kuljum għal xahrejn. Il-grupp WT ġie injettat taħt il-ġilda b'volum ugwali ta 'salina għal xahrejn. Il-ġrieden tal-grupp CDPS ingħataw ukoll kuljum b'injezzjonijiet intragastriċi li kien fihom 1{{10}}0 mg/kg, 50 mg/Kg jew 25 mg/Kg CDPS għal xahrejn . Il-ġrieden tal-grupp ABX irċevew ilma tax-xorb b'0.1 mg/mL ampicillin u 0.5 mg/mL streptomycin għal 2 xhur minbarra injezzjonijiet D-gal u CDPS. Qabel ma amministraw D-gal, il-ġrieden irċevew injezzjonijiet li kien fihom 0.1 mg/mL ampicillin, 0.5 mg/mL streptomycin, u 0.1 mg/mL colistin għal 7 ijiem fil-grupp ABX. Il-ġrieden tal-grupp Cy rċevew injezzjonijiet intraperitoneali ta '20 mg/Kg cyclophosphamide kull jum ieħor (qod) għal 2 xhur flimkien ma' injezzjonijiet ta 'kuljum ta' D-gal u CDPS.

Test ġdid ta 'rikonoxximent ta' oġġett

Wettaq esperimenti ta 'mġieba wara l-aħħar doża. It-test tar-rikonoxximent tal-oġġett kien jinvolvi stadji ta 'familjarizzazzjoni, taħriġ u ttestjar. Matul l-istadju tal-familjarizzazzjoni, il-ġrieden ġew abitjati f'kamra tal-ittestjar vojta għal 10 minuti għal jumejn. Imbagħad, fit-tielet jum (jum tat-taħriġ), żewġ oġġetti tal-istess daqs, forma u kulur (A1 u A2) tqiegħdu fuq truf opposti tal-kamra. Kull ġurdien imbagħad ingħata 10 minuti biex jesplora ż-żewġ oġġetti simili. Wara 1-siegħa (fit-tielet jum) u 24-siegħa (fir-raba' jum) intervalli ta' taħriġ għall-ittestjar, wieħed mill-oġġetti simili (A1 jew A2) ġie sostitwit b'B jew Ċ oġġett li huwa differenti fid-daqs, kulur u forma fil-jum tat-test. Matul l-istadju tal-ittestjar, kull ġurdien ġie ttestjat għal 5 minuti u l-indiċi preferenzjali ġie kkalkulat biex tiddetermina l-memorja tar-rikonoxximent tal-oġġett ġdid (B jew Ċ) bl-użu tal-formula li ġejja: Indiċi preferenzjali=Ħin fuq l-oġġett B jew C/( Ħin fuq l-oġġett B jew C flimkien mal-Ħin fuq l-oġġett A)×100 fil-mija .

Test tal-labirint tal-ilma Morris

It-test tal-labirint tal-ilma Morris sar f'pool tond li kien 45 ċm fil-fond u 90 ċm fid-dijametru. Il-protokoll deskritt minn Ruediger S, et al. (2011) [55] u Wood RA, et al. (2018) [56] kien impjegat hawn. Il-fond ta 'l-ilma fil-pool kien ta' 30 ċm, u t-temperatura ta 'l-ilma kienet 20±1 grad C. Il-pjattaforma kienet 6 ċm fid-dijametru u 1cm taħt l-ilma. Il-ħin għat-taħriġ u l-ittestjar kien ta '60 s kull wieħed. Għat-taħriġ, għamilna erba 'provi ta' 60 s kull wieħed bi pjattaforma moħbija kuljum għal ħamest ijiem kontinwi. Jekk il-pjattaforma ma ġietx skoperta mill-ġrieden f'60 s, ġew iggwidati lejn il-pjattaforma u mqiegħda fuq il-pjattaforma għal 5 s. Matul l-istadju tal-ittestjar, il-latency biex tintlaħaq il-pjattaforma moħbija f'sessjonijiet ta 'taħriġ u prova tas-sonda, in-numru ta' qsim fuq il-post tal-pjattaforma mneħħija, u l-ħin mgħoddi fil-kwadrant fil-mira (pjattaforma) ġew irreġistrati u analizzati

analiżi ELISA

Il-livelli fis-serum ta’ ċitokini pro-infjammatorji bħal IL-2(), IL-4, IL-10, u TNF- ġew analizzati għal kull grupp ta’ ġrieden bl-użu ta’ kits ELISA mixtrija minn Shanghai Yi Li Biological Technology Co., Ltd (Shanghai, iċ-Ċina) skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. L-attività ta 'enzima antiossidant, superoxide dismutase (SOD), u livelli ta' prodott ta 'perossidazzjoni tal-lipidi, malondialdehyde (MDA), fis-serum ta' kull grupp ta 'ġrieden ġiet analizzata minn kits ta' analiżi mixtrija mill-Istitut tal-Bijoinġinerija Nanjing Jiancheng (Nanjing, iċ-Ċina) . Il-livelli ta 'prodotti ta' proteina ta 'ossidazzjoni avvanzata (AOPP) fil-kampjuni ta' hippocampus murina ġew stmati bl-użu ta 'kit ELISA minn Shanghai Yi Li Biological Technology Co. Ltd. (Shanghai, iċ-Ċina) skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

Stima ta 'stress ossidattiv fl-imħuħ murini

Aħna omoġenizzajna 100 mg tessut tal-hippocampus b'0.9 ml salin imkessaħ bis-silġ u l-omoġenat ġie ċentrifugat f'12000 rpm għal 30 min f'4 gradi C. Il-kontenut tal-proteina fis-supernatant ġie analizzat bl-użu tal-BCA Protein Assay Kit ( Beyotime Biotechnology, Shanghai, iċ-Ċina). Il-livelli ta 'perossidazzjoni tal-lipidi (LPO) u malondialdehyde (MDA), u l-attivitajiet ta' GSH-Px u SOD fil-kampjuni tal-hippocampus ġew analizzati bil-kolorometrija bl-użu ta 'kits mill-Istitut tal-Bijoinġinerija Nanjing Jiancheng (Nanjing, iċ-Ċina) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

Kompożizzjoni tal-mikrobijota tal-musrana

Inġabru kampjuni tal-ħmieġ mill-ġrieden kollha u immedjatament maħżuna fi -80 grad Ċ. Ir-reġjun V3 flimkien ma' V4 tal-ġene 16S rRNA ġie sekwenzat bl-użu ta' Illumina MiSeq (Beijing Novogene Co. Ltd., Beijing, iċ-Ċina) u analizzat bl-użu tal- QIIME pjattaforma miftuħa biex tiddetermina l-profili tal-mikrobijota tal-musrana.

Analiżi LC/MS tal-metaboliti tas-serum

Kampjuni tas-serum ġew inkubati għal 10 minuta b'metanol imkessaħ minn qabel fi proporzjon ta' 1: 3 biex jippreċipita l-proteini. Il-kampjuni ġew ċentrifugati f'12000r/min għal 15-il minuta f'4 gradi C. Is-supernatanti ġew analizzati minn Thermo Scientific Dionex UltiMate3000 Rapid Resolution Liquid Chromatography u QExactive spettru tal-massa. Il-kundizzjonijiet kromatografiċi huma murija fit-Tabella 1. L-analiti ġew separati f'kolonna kromatografika XBridge BEH Amide (2.1 × 100 mm; Waters Co., Milford, MA, USA) bl-użu ta '0.1 fil-mija aċidu formiku u aċetonitrile bħala fażijiet mobbli A u B, rispettivament. Ir-rata tal-fluss kienet issettjata għal 0.4 ml/min, il-volum tal-injezzjoni kien 5 µl, u t-temperatura tal-kolonna kienet issettjata għal 25 grad C (Tabella 1). Is-sinjali tal-ispettru tal-massa nkisbu bl-użu tal-modi ta 'skanjar tal-jone pożittiv u negattiv. Il-vultaġġ tal-isprej tal-joni u parametri MS speċifiċi oħra huma murija fit-Tabella 2.

Analiżi statistika

Statistical analysis was performed using the SPSS 13.0 software (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). The data plots were generated using GraphPad Prism 8.0.1 (GraphPad Software, La Jolla, California, USA). Partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) of SIMCA-P+13.0 (Umetrics, AB, Umeå, Sweden) and Principal Components Analysis (PCA) were used to assess normalized GC-MS spectral data. Variable Influence on Projection (VIP) values were used to identify significant variables with VIP values >1.0 u p< 0.05.="" these="" significant="" variables="" were="" used="" to="" identify="" the="" spectral="" peaks.="" the="" student's="" t-test="" was="" used="" to="" analyze="" differences="" between="" two="" groups="" of="" data.="" the="" taxonomic="" rank="" differential="" between="" groups="" was="" determined="" using="" student's="" test="" (v3.1.2;="" r="" programming="" language).="" the="" correlation="" between="" genera="" abundance="" and="" mouse="" behavior="" was="" calculated="" using="" spearman="" correlation="" coefficients="" (r="" language).="" p="" <="" 0.05="" was="" considered="" statistically="" significant.="" the="" data="" are="" presented="" as="">

REFERENZI

1. Coates SS, Lehnert BE, Sharma S, Kindell SM, Gary RK. Il-berillju jinduċi senescence prematura fil-fibroblasti umani. J Pharmacol Exp Ther. 2007; 322:70–79. https://doi.org/10.1124/jpet.106.118018 PMID:17395767

2. Shwe T, Pratchayasakul W, Chattipakorn N, Chattipakorn SC. Rwol tat-tixjiħ tal-moħħ ikkaġunat mid-D-galactose u l-potenzjal tiegħu użat għal interventi terapewtiċi. Exp Gerontol. 2018; 101:13–36. https://doi.org/10.1016/j.exger.2017.10.029 PMID:29129736

3. Ho SC, Liu JH, Wu RY. Stabbiliment tal-effett ta 'tixjiħ mimetiku fil-ġrieden ikkawżat minn D-galactose. Bijoġrontoloġija. 2003; 4:15–18. https://doi.org/10.1023/a:1022417102206 PMID:12652185

4.Kanzunetta X, Bao M, Li D, Li YM. Glikazzjoni avvanzata f'mudell ta 'tixjiħ tal-ġrieden indott minn D-galactose. Mech Aging Dev. 1999; 108:239–51.

https://doi.org/10.1016/s0047-6374(99)00022-6 PMID:10405984

5. Yamauchi T, Oi A, Kosakamoto H, Akuzawa-Tokita Y, Murakami T, Mori H, Miura M, Obata F. Speċi Batterjali tal-Imsaren Impatt Distintivment Metaboliti tal-Purini Ospitanti matul ix-Xjuħija f'Drosophila. iScience. 2020; 23:101477. https://doi.org/10.1016/j.isci.2020.101477 PMID:32916085

6. Kummissjoni tal-Farmakopea Ċiniża, Farmakopea tar-Repubblika Popolari taċ-Ċina Ver. 2015. Istampa taċ-Ċina tax-Xjenza u t-Teknoloġija Medika, Beijing, iċ-Ċina. 2015.

7. Wang N, Ji S, Zhang H, Mei S, Qiao L, Jin X.Herba Cistanches: Kontra t-tixjiħ. Tixjiħ Dis. 2017; 8:740–59. https://doi.org/10.14336/AD.2017.0720 PMID:29344414

8. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X.Cistanches Herba: Ħarsa ġenerali lejn il-kimika, il-farmakoloġija u l-proprjetà farmakokinetika tagħha. J Ethnopharmacol. 2018; 219:233–47.

https://doi.org/10.1016/j.jep.2017.10.015 PMID:29054705

9. Zhong C, Liu Z, Zhang X, Pu Y, Yang Z, Bao Y. Proprjetajiet fiżikokimiċi ta 'polisakkaridi minn Ligusticum chuanxiong u analiżi tal-potenzjal tagħhom kontra t-tumur permezz ta' immunoregolazzjoni. Ikel Funct. 2021; 12:1719–31. https://doi.org/10.1039/d0fo02978e

PMID:33502414

10.Shi YJ, Zheng HX, Hong ZP, Wang HB, Wang Y, Li MY, Li ZH. Effetti antitumorali ta 'trab ta' spori ta 'Ganoderma lucidum differenti f'bijoassaġġi bbażati fuq iċ-ċelluli u ż-zebrafish. J Integr Med. 2021; 19:177–84. https://doi.org/10.1016/j.joim.2021.01.004 PMID:33495135

11. Zhang Z, Liu H, Yu B, Tao H, Li J, Wu Z, Liu G, Yuan C, Guo L, Cui B. Lycium barbarum polysaccharide jnaqqas il-ħsara mijokardijaka f'mic mitmugħa b'dieta b'ħafna xaħam permezz tal-manipulazzjoni tal-imsaren mikrobijoma u metaboloma ippurgar. Food Res Int. 2020; 138:109778. https://doi.org/10.1016/j.foodres.2020.109778 PMID:33288164

12. Newgard CB, Sharpless NE. Tisjir tal-età: mutur molekulari tat-tixjiħ u opportunitajiet terapewtiċi. J Clin Invest. 2013; 123:946–50. https://doi.org/10.1172/JCI68833 PMID:23454756

13. Wang H, Dwyer-Lindgren L, Lofgren KT, Rajaratnam JK, Marcus JR, Levin-Rector A, Levitz CE, Lopez AD, Murray CJ. Mortalità speċifika għall-età u speċifika għas-sess f'187 pajjiż, 1970-2010: analiżi sistematika għall-Istudju Globali tal-Piż tal-Mard 2010. Lancet. 2012; 380:2071–94.

https://doi.org/10.1016/S0140-6736(12)61719-X PMID:23245603

14. Qabazard B, Stürzenbaum SR. H2S: Approċċ Ġdid għat-Titjib tal-Ħajja u Tixjiħ f'Saħħtu? Handb Exp Pharmacol. 2015; 230:269–87. https://doi.org/10.1007/978-3-319-18144-8_14 PMID:26162840

15. Walrath T, Dyamenahalli KU, Hulsebus HJ, McCullough RL, Idrovo JP, Boe DM, McMahan RH, Kovacs EJ. Bidliet relatati mal-età fl-immunità intestinali u l-mikrobijoma. J Leukoc Biol. 2020. [Epub qabel l-istampar]. https://doi.org/10.1002/JLB.3RI0620-405RR PMID:33020981

16. Mishra B, Manmode S, Walke G, Chakraborty S, Neralkar M, Hotha S. Sinteżi tal-motiv tetrasaccharide tal-qalba iper-fergħat ta 'chloroviruses. Org Biomol Chem. 2021; 19:1315–28. https://doi.org/10.1039/d0ob02176h PMID:33459320

17. Gao Y, Liu Y, Ma F, Sun M, Song Y, Xu D, Mu G, Tuo Y. Lactobacillus plantarum Y44 itaffi l-istress ossidattiv billi jirregola l-mikrobijota tal-musrana u l-funzjoni tal-barriera tal-kolon fil-ġrieden Balb / C b'd-galactose taħt il-ġilda injezzjoni. Ikel Funct. 2021; 12:373–86. https://doi.org/10.1039/d0fo02794d

PMID:33325942

18. Francisco ÉC, Franco TT, Wagner R, Jacob-Lopes E. Valutazzjoni ta 'karboidrati differenti bħala sors ta' karbonju eżoġenu fil-kultivazzjoni ta 'cyanobacteria. Bioprocess Biosyst Eng. 2014; 37:1497–505. https://doi.org/10.1007/s00449-013-1121-1 PMID:24445336

19. Uhde A, Youn JW, Maeda T, Clermont L, Matano C, Krämer R, Wendisch VF, Seibold GM, Marin K. Glucosamine bħala sors ta' karbonju għal Corynebacterium glutamicum li jipproduċi aċidu amminiku. Appl Microbiol Biotechnol. 2013; 97:1679–87. https://doi.org/10.1007/s00253-012-4313-8 PMID:22854894

1. Ladevèze S, Laville E, Despres J, Mosoni P, Potocki- Véronèse G. Rikonoxximent u degradazzjoni tal-mannoside minn batterji. Biol Rev Camb Philos Soc. 2017; 92:1969–90.

https://doi.org/10.1111/brv.12316 PMID:27995767

2. Limoli DH, Jones CJ, Wozniak DJ. Polisakkaridi Extraċellulari Batterjali fil-Formazzjoni u l-Funzjoni tal-Bijofilm. Microbiol Spectr. 2015; 3:10.1128. https://doi.org/10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014 PMID:26185074

3. Zeng H, Huang L, Zhou L, Wang P, Chen X, Ding K. A galactoglucan iżolat minn ta 'Cistanche deserticola Y.

C. Ma. u l-bijoattività tagħha fuq razez ta 'batterji intestinali. Polim tal-karboidrat. 2019; 223:115038. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115038 PMID:31426978

4. Subramanian V, Rodemoyer B, Shastri V, Rasmussen LJ, Desler C, Schmidt KH. Id-defiċjenza tad-DNA helicase tas-sindromu Bloom hija assoċjata ma 'stress ossidattiv u bidliet fin-netwerk mitokondrijali. Sci Rep 2021; 11:2157.

https://doi.org/10.1038/s41598-021-81075-0 PMID:33495511

5. Mashima K, Oh I, Fujiwara K, Izawa J, Takayama N, Nakano H, Kawasaki Y, Minakata D, Yamasaki R, Morita K, Ashizawa M, Yamamoto C, Hatano K, et al. Tqabbil ta 'alemtuzumab, globulina anti-thymocyte, u cyclophosphamide ta' wara t-trapjant għal marda ta 'graft-versus-host u graft-versus-lewkimja f'mudelli murini. PLoS Wieħed. 2021; 16:e0245232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245232 PMID:33428661

6. Rooks MG, Garrett WS. Mikrobijota tal-musrana, metaboliti u immunità tal-ospitanti. Nat Rev Immunol. 2016; 16:341–52. https://doi.org/10.1038/nri.2016.42 PMID:27231050

7. Zierer J, Jackson MA, Kastenmüller G, Mangino M, Long T, Telenti A, Mohney RP, Small KS, Bell JT, Steves CJ, Valdes AM, Spector TD, Menni C. Il-metaboloma ippurgar bħala qari funzjonali tal- mikrobijoma tal-imsaren. Nat Genet. 2018; 50:790–95. https://doi.org/10.1038/s41588-018-0135-7 PMID:29808030

8. Wilmanski T, Rappaport N, Earls JC, Magis AT, Manor O, Lovejoy J, Omenn GS, Hood L, Gibbons SM, Price ND. Il-metaboloma tad-demm ibassar id-diversità tal-mikrobijoma tal-imsaren fil-bnedmin. Nat Biotechnol. 2019; 37:1217–28.

https://doi.org/10.1038/s41587-019-0233-9 PMID:31477923

9. Chagoyen M, Pazos F. MBRole: analiżi ta 'arrikkiment ta' data metabolomika. Bijoinformatika. 2011; 27:730–31. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr001 PMID:21208985

10. Xia J, Wishart DS. L-użu ta' MetaboAnalyst 3.0 għal Analiżi Komprensiva tad-Dejta tal-Metabolomika. Curr Protoc Bijoinformatika. 2016; 55:14.10. https://doi.org/10.1002/cpbi.11 PMID:27603023

11. Miao X, Zhang H, Wu Y, Liu D, Zhang X, Li G. L-effett protettiv ta 'Cistanche verbascum glycosides fuq il-ħsara taċ-ċelluli tan-nervituri PC12 indotta minn D-galactose. Ġurnal Farmaċewtiku Ċiniż. 2017; 52:2071–78.

12. Wu Y, Zhang H, Bu R, Ma H, Su M, Li G. Riċerka dwar l-effett protettiv ta 'Cistanche deserticola polysaccharide fuq il-mudell ta' tixjiħ akut indott minn D-galactose. Bullettin Pharmacol Ċiniż. 2017; 33:927–33.

13. Yin R, Li G, Yu T, Ma H, Ma T, Guo M. L-effett protettiv tal-polisakkaridi Cistanche cistanche fuq il-plastiċità sinaptika fil-ġrieden b'indeboliment tat-tagħlim u l-memorja indotti mill-skopolamine. Bullettin Pharmacol Ċiniż. 2014; 30:801–07.

14. Ma H, Yin R, Guo M, Bao Y, Cui Z, Li G. L-effett ta 'Cistanche cistanche polysaccharides fuq l-espressjoni ta' CREB fil-ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-galactose. Ġurnal Ċiniż tal-Mediċina Ċiniża E-Tradizzjonali Sperimentali. 2014; 20:137–41.

15. Fu Z, Han L, Zhang P, Mao H, Zhang H, Wang Y, Gao X, Liu E. Cistanche polysaccharides itejbu l-assorbiment ta 'echinacoside in vivo u jaffettwaw il-mikrobijota tal-musrana. Int J Biol Macromol. 2020; 149:732 40.

https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 PMID:31987946

16. Bajaj JS, Gillevet PM, Patel NR, Ahluwalia V, Ridlon JM, Kettenmann B, Schubert CM, Sikaroodi M, Heuman DM, Crossey MM, Bell DE, Hylemon PB, Fatouros PP, Taylor-Robinson SD. Analiżi tal-bijoloġija tas-sistemi lonġitudinali tal-irtirar tal-lactulose fl-enċefalopatija epatika. Metab Brain Dis. 2012; 27:205–15. https://doi.org/10.1007/s11011-012-9303-0 PMID:22527995

17. Qian Y, Yang X, Xu S, Wu C, Song Y, Qin N, Chen SD, Xiao Q. Alterazzjoni tal-mikrobijota ippurgar f'pazjenti Ċiniżi bil-marda ta 'Parkinson. Brain Behav Immun. 2018; 70:194–202. https://doi.org/10.1016/j.bbi.2018.02.016 PMID:29501802

18. Sjögren YM, Tomicic S, Lundberg A, Böttcher MF, Björkstén B, Sverremark-Ekström E, Jenmalm MC. Influwenza tal-mikrobijota tal-musrana bikrija fuq il-maturazzjoni tar-risponsi immuni sistemiċi u mukożi tat-tfulija. Clin Exp Allerġija. 2009; 39:1842–51. https://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2009.03326.x PMID:19735274

19. Uhde A, Youn JW, Maeda T, Clermont L, Matano C, Krämer R, Wendisch VF, Seibold GM, Marin K. Glucosamine bħala sors ta' karbonju għal Corynebacterium glutamicum li jipproduċi aċidu amminiku. Appl Microbiol Biotechnol. 2013; 97:1679–87. https://doi.org/10.1007/s00253-012-4313-8 PMID:22854894

20.Ladevèze S, Laville E, Despres J, Mosoni P, Potocki- Véronèse G. Mannoside rikonoxximent u degradazzjoni mill-batterja. Biol Rev Camb Philos Soc. 2017; 92:1969–90. https://doi.org/10.1111/brv.12316 PMID:27995767

21.Limoli DH, Jones CJ, Wozniak DJ. Polisakkaridi Extraċellulari Batterjali fil-Formazzjoni u l-Funzjoni tal-Bijofilm. Microbiol Spectr. 2015; 3:10.1128. https://doi.org/10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014 PMID:26185074

22. Zeng H, Huang L, Zhou L, Wang P, Chen X, Ding K. A galactoglucan iżolat minn ta 'Cistanche deserticola YC Ma. u l-bijoattività tagħha fuq razez ta 'batterji intestinali. Polim tal-karboidrat. 2019; 223:115038. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115038 PMID:31426978

23.Subramanian V, Rodemoyer B, Shastri V, Rasmussen LJ, Desler C, Schmidt KH. Id-defiċjenza tad-DNA helicase tas-sindromu Bloom hija assoċjata ma 'stress ossidattiv u bidliet fin-netwerk mitokondrijali. Sci Rep 2021; 11:2157.

https://doi.org/10.1038/s41598-021-81075-0 PMID:33495511

24.Mashima K, Oh I, Fujiwara K, Izawa J, Takayama N, Nakano H, Kawasaki Y, Minakata D, Yamasaki R, Morita K, Ashizawa M, Yamamoto C, Hatano K, et al. Tqabbil ta 'alemtuzumab, globulina anti-thymocyte, u cyclophosphamide ta' wara t-trapjant għal marda ta 'graft-versus-host u graft-versus-lewkimja f'mudelli murini. PLoS Wieħed. 2021; 16:e0245232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245232 PMID:33428661

25. Rooks MG, Garrett WS. Mikrobijota tal-musrana, metaboliti u immunità tal-ospitanti. Nat Rev Immunol. 2016; 16:341–52. https://doi.org/10.1038/nri.2016.42 PMID:27231050

26.Zierer J, Jackson MA, Kastenmüller G, Mangino M, Long T, Telenti A, Mohney RP, Small KS, Bell JT, Steves CJ, Valdes AM, Spector TD, Menni C. Il-metaboloma ippurgar bħala qari funzjonali tal- mikrobijoma tal-imsaren. Nat Genet. 2018; 50:790–95. https://doi.org/10.1038/s41588-018-0135-7 PMID:29808030

27. Wilmanski T, Rappaport N, Earls JC, Magis AT, Manor O, Lovejoy J, Omenn GS, Hood L, Gibbons SM, Price ND. Il-metaboloma tad-demm ibassar id-diversità tal-mikrobijoma tal-imsaren fil-bnedmin. Nat Biotechnol. 2019; 37:1217–28.

https://doi.org/10.1038/s41587-019-0233-9 PMID:31477923

28. Chagoyen M, Pazos F. MBRole: analiżi ta 'arrikkiment ta' data metabolomika. Bijoinformatika. 2011; 27:730–31. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr001 PMID:21208985

29. Xia J, Wishart DS. L-użu ta' MetaboAnalyst 3.0 għal Analiżi Komprensiva tad-Dejta tal-Metabolomika. Curr Protoc Bijoinformatika. 2016; 55:14.10. https://doi.org/10.1002/cpbi.11 PMID:27603023

30. Miao X, Zhang H, Wu Y, Liu D, Zhang X, Li G. L-effett protettiv ta 'Cistanche verbascum glycosides fuq il-ħsara taċ-ċelluli tan-nervituri PC12 indotta minn D-galactose. Ġurnal Farmaċewtiku Ċiniż. 2017; 52:2071–78.

31. Wu Y, Zhang H, Bu R, Ma H, Su M, Li G. Riċerka dwar l-effett protettiv ta 'Cistanche deserticola polysaccharide fuq il-mudell ta' tixjiħ akut indott minn D-galactose. Bullettin Pharmacol Ċiniż. 2017; 33:927–33.

32. Yin R, Li G, Yu T, Ma H, Ma T, Guo M. L-effett protettiv tal-polisakkaridi ta 'Cistanche cistanche fuq il-plastiċità sinaptika fil-ġrieden b'indeboliment tat-tagħlim u l-memorja indotti mill-skopolamine. Bullettin Pharmacol Ċiniż. 2014; 30:801–07.

33. Ma H, Yin R, Guo M, Bao Y, Cui Z, Li G. L-effett ta 'Cistanche cistanche polysaccharides fuq l-espressjoni ta' CREB f'ġrieden mudell ta 'tixjiħ indott minn D-galactose. Ġurnal Ċiniż tal-Mediċina Ċiniża E-Tradizzjonali Sperimentali. 2014; 20:137–41.

34. Fu Z, Han L, Zhang P, Mao H, Zhang H, Wang Y, Gao X, Liu E. Cistanche polysaccharides itejbu l-assorbiment ta 'echinacoside in vivo u jaffettwaw il-mikrobijota tal-musrana. Int J Biol Macromol. 2020; 149:732–40. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 PMID:31987946

35.Bajaj JS, Gillevet PM, Patel NR, Ahluwalia V, Ridlon JM, Kettenmann B, Schubert CM, Sikaroodi M, Heuman DM, Crossey MM, Bell DE, Hylemon PB, Fatouros PP, Taylor-Robinson SD. Analiżi tal-bijoloġija tas-sistemi lonġitudinali tal-irtirar tal-lactulose fl-enċefalopatija epatika. Metab Brain Dis. 2012; 27:205–15. https://doi.org/10.1007/s11011-012-9303-0 PMID:22527995

36. Qian Y, Yang X, Xu S, Wu C, Song Y, Qin N, Chen SD, Xiao Q. Alterazzjoni tal-mikrobijota ippurgar f'pazjenti Ċiniżi bil-marda ta 'Parkinson. Brain Behav Immun. 2018; 70:194–202. https://doi.org/10.1016/j.bbi.2018.02.016 PMID:29501802

37.Sjögren YM, Tomicic S, Lundberg A, Böttcher MF, Björkstén B, Sverremark-Ekström E, Jenmalm MC. Influwenza tal-mikrobijota tal-musrana bikrija fuq il-maturazzjoni tar-risponsi immuni sistemiċi u mukożi tat-tfulija. Clin Exp Allerġija. 2009; 39:1842–51. https://doi.org/10.1111/j.1365-2222.2009.03326.x PMID:19735274

38.Rangel I, Ganda Mall JP, Willén R, Sjöberg F, Hultgren- Hörnquist E. Il-grad ta 'kolite jikkorrelata mal-kompożizzjoni tal-mikrobi u r-risponsi taċ-ċitokini fil-kolon u ċ-ċecum ta' ġrieden defiċjenti G i2-. FEMS Microbiol Ecol. 2016; 92:fiw098. https://doi.org/10.1093/femsec/fiw098 PMID:27162181

39. Larbi A, Pawelec G, Witkowski JM, Schipper HM, Derhovanessian E, Goldeck D, Fulop T. Ċaqliq drammatiku fis-sottogruppi taċ-ċelluli CD4 T li jiċċirkolaw iżda mhux CD8 fil-marda ta 'Alzheimer ħafifa. J Alzheimers Dis. 2009; 17:91–103.

https://doi.org/10.3233/JAD-2009-1015 PMID:19494434

40.West CE, Rydén P, Lundin D, Engstrand L, Tulic MK, Prescott SL. Mikrobijoma tal-imsaren u mudelli ta 'rispons immuni intrinsiku f'ekżema assoċjata ma' IgE. Clin Exp Allerġija. 2015; 45:1419–29. https://doi.org/10.1111/cea.12566 PMID:25944283

41. Wong ML, Inserra A, Lewis MD, Mastronardi CA, Leong L, Choo J, Kentish S, Xie P, Morrison M, Wesselingh SL, Rogers GB, Licinio J. Is-sinjalar tal-inflammasome jaffettwa l-imġiba u l-imsaren li jixbħu ansjetà u depressiv. kompożizzjoni tal-mikrobijoma. Mol Psikjatrija. 2016; 21:797–805.

https://doi.org/10.1038/mp.2016.46 PMID:27090302

42. Abildgaard A, Elfving B, Hokland M, Wegener G, Lund S. It-trattament probijotiku jnaqqas imġieba bħal depressiva fil-firien indipendentement mid-dieta. Psikonewroendokrinoloġija. 2017; 79:40–48. https://doi.org/10.1016/j.psyneuen.2017.02.014 PMID:28259042

43.Bercik P, Verdu EF, Foster JA, Macri J, Potter M, Huang X, Malinowski P, Jackson W, Blennerhassett P, Neufeld KA, Lu J, Khan WI, Corthesy-Theulaz I, et al. L-infjammazzjoni gastrointestinali kronika tinduċi mġiba bħal ansjetà u tbiddel il-bijokimika tas-sistema nervuża ċentrali fil-ġrieden. Gastroenteroloġija. 2010; 139:2102–2112.e1. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2010.06.063 PMID:20600016

44.Yoshimoto S, Mitsuyama E, Yoshida K, Odamaki T, Xiao JZ. Metaboliti arrikkit li potenzjalment jippromwovu mard assoċjat ma 'l-età f'suġġetti b'mikrobijota tal-musrana tat-tip anzjani. Mikrobi tal-imsaren. 2021; 13:1–11. https://doi.org/10.1080/19490976.2020.1865705 PMID:33430687

45.Chatterjee P, Cheong YJ, Bhatnagar A, Goozee K, Wu Y, McKay M, Martins IJ, Lim WL, Pedrini S, Tegg M, Villemagne VL, Asih PR, Dave P, et al. Metaboliti tal-plażma assoċjati ma 'evidenza bijomarkatur ta' newrodeġenerazzjoni f'adulti anzjani konjittivament normali. J Neurochem. 2020. [Epub qabel l-istampar]. https://doi.org/10.1111/jnc.15128 PMID:32679614

46. ​​Mahajan UV, Varma VR, Griswold ME, Blackshear CT, An Y, Oommen AM, Varma S, Troncoso JC, Pletnikova O, O'Brien R, Hohman TJ, Legido-Quigley C, Thambisetty M. Disregolazzjoni ta 'netwerks metaboliċi multipli relatata mal-mogħdijiet ta 'transmethylation tal-moħħ u polyamine fil-marda ta' Alzheimer: Metabolomika mmirata u studju transcriptomic. PLoS Med. 2020; 17:e1003012. https://doi.org/10.1371/journal.pmed.1003012 PMID:31978055

47.Duerkop BA, Vaishnava S, Hooper LV. Reazzjonijiet immuni għall-mikrobijota fil-wiċċ tal-mukuża intestinali. Immunità. 2009; 31:368–76. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2009.08.009 PMID:19766080

48. Forsythe P, Bienenstock J. Immunomodulation minn batterji kommensali u probijotiċi. Immunol Invest. 2010; 39:429–48. https://doi.org/10.3109/08820131003667978 PMID:20450286

49. Sternberg EM. Regolazzjoni newrali ta 'immunità intrinsika: rispons ta' ospitanti mhux speċifiku kkoordinat għal patoġeni. Nat Rev Immunol. 2006; 6:318–28. https://doi.org/10.1038/nri1810 PMID:16557263

50.Colonna M, Butovsky O. Funzjoni tal-Mikroglia fis-Sistema Nervuża Ċentrali Waqt is-Saħħa u n-Newrodegeneration. Ann Rev Immunol. 2017; 35:441–68. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-051116- 052358 PMID:28226226

51. El Khoury J. Newrodegeneration u s-sistema newroimmuni. Nat Med. 2010; 16:1369–70. https://doi.org/10.1038/nm1210-1369 PMID:21135838

52. Fu W, Vukojevic V, Patel A, Soudy R, MacTavish D, Westaway D, Kaur K, Goncharuk V, Jhamandas J. Rwol ta 'riċetturi ta' amylin microglial fil-medjazzjoni ta 'infjammazzjoni indotta minn beta amyloid (A). J Newroinfjammazzjoni. 2017; 14:199. https://doi.org/10.1186/s12974-017-0972-9 PMID:28985759

53. Yang X, Zeng Q, Tezel G. Regolament ta 'funzjonijiet distinti ta' caspase- 8 fiċ-ċelluli tal-ganglion tar-retina u astroglia fi glawkoma sperimentali. Neurobiol Dis. 2021; 150:105258. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2021.105258 PMID:33434617

54. Ashok A, Singh N, Chaudhary S, Bellamkonda V, Kritikos AE, Wise AS, Rana N, McDonald D, Ayyagari R. Degeneration Retinal and Alzheimer's Disease: An Evolving Link. Int J Mol Sci. 2020; 21:7290. https://doi.org/10.3390/ijms21197290 PMID:33023198

55. Ruediger S, Vittori C, Bednarek E, Genoud C, Strata P, Sacchetti B, Caroni P. Tkabbir ta 'konnettività inibitorju feedforward relatat mat-tagħlim meħtieġ għall-preċiżjoni tal-memorja. Natura. 2011; 473:514–18. https://doi.org/10.1038/nature09946 PMID:21532590

56. Wood RA, Bauza M, Krupic J, Burton S, Delekate A, Chan D, O'Keefe J. Il-labirint tax-xehda jipprovdi test ġdid biex tistudja n-navigazzjoni spazjali dipendenti mill-hippocampal. Natura. 2018; 554:102–05. https://doi.org/10.1038/nature25433