Il-Kapsuli Ibbażati fuq Cistanche Jtaffu l-Prostatite Kronika Mhux Batterika fil-Firien Billi jimmodulaw il-Mikrobijota tal-Imsaren, il-Metaboliti tas-Serum, U l-Mogħdija tas-Sinjali SPHK1/S1P1/PI3K/Akt

3.5 Analiżi tal-Metabolomika tas-Serum tas-CBC fil-Firien EAP

3.5.1 Analiżi Statistika Multivarjata tal-Metabolomika Fekali

L-analiżi tal-komponent prinċipali (PCA) żvelat separazzjonijiet ċari tal-grupp taħt il-modalità tal-jone pożittiv fost il-gruppi CBC normali, mudell, u b'doża għolja, bil-Grupp CBC raggruppament eqreb lejn il-grupp normaliu aktar 'il bogħod mill-grupp mudell. Taħt il-mod ta 'jone negattiv, ġiet osservata koinċidenza parzjali bejn il-gruppi normali u mudell, filwaqt li kampjuni ttrattati b'CBC għadhom juru diskriminazzjoni tajba (Figura 5).

L-analiżi parzjali diskriminanti tal-inqas kwadri (PLS-DA) ikkonfermat effett ta 'klassifikazzjoni qawwi fit-tliet gruppi kollha taħt iż-żewġ modi ta' jonizzazzjoni. Il-Test ta 'permutazzjoni ta' 200 darbavvalidat l-affidabbiltà tal-mudell, b'aQ² interċettat taħt 0.05, li jindika l-ebda twaħħil żejjed. Xejra 'l isfel fiValuri R² u Q²tul l-assi X ikkonfermat aktar l-istabbiltà tal-mudell (Figura 6).

TE FORMULA BBAŻATI FUQ ĊISTANĊI

Ixtri Issa

 

 

 

 

 

3.5.2 Identifikazzjoni ta' Metaboliti Differenzjali Affettwati minn CBC

Metaboliti tas-serum differenzjali ġew iffiltrati bbażati fuqVIP > 1minn PLS-DA,bidla tat-tinja Akbar minn jew ugwali għal 1, up < 0.05. Wara li jiġu esklużi komposti eżoġeni,10 metaboliti endoġeni sinifikantiġew identifikati (Tabella 9).

 

3.5.3 Analiżi ta' Arrikkiment tal-Pathway KEGG

Analiżi ta 'arrikkiment KEGG tal-metaboliti differenzjali indikat liIt-trattament CBC jista’ jimmodula mogħdijiet metaboliċi ewlenininvoluti fi prostatite kronika. Il-mogħdijiet arrikkit kienu jinkludu:

Metaboliżmu ta' l-isfingolipidi

Metaboliżmu tar-retinol

Metaboliżmu tal-gliċina, tas-serina u tat-treonina

Metaboliżmu tal-glicerofosfolipidi

Metaboliżmu tal-aċidu arakidoniku(Figura 7)

Dawn il-mogħdijiet huma magħrufa li għandhom rwoli importanti fihomregolazzjoni immuni, stress ossidattiv, u infjammazzjoni.

3.5.4 Korrelazzjoni Bejn Metaboliti Differenzjali u Mikrobijota tal-Imsaren

Analiżi ta' korrelazzjoni ta' Spearman saret bejn l-10 metaboliti differenzjali u taxa batterjali mibdula b'mod sinifikanti. Korrelazzjonijiet notevoli kienu jinkludu:

PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): korrelata b'mod pożittiv ma 'LactobacillusuRomboutsia ilealis, negattivament maNeglectibacter timonensis

SM[d16:2/20:4-2OH]: korrelata b'mod pożittiv ma 'Paraprevotella clarauRomboutsia ilealis

PS[18:1/20:0]: korrelata b'mod pożittiv ma 'Romboutsia ilealis, negattivament maOscillospiraceae

lysoPA(0:0/18:0): korrelata b'mod negattiv ma'LactobacillusuRomboutsia ilealis, pożittivament maNeglectibacter timonensis

Aċidu Ureidoisobutyric: korrelata b'mod negattiv ma'Paraprevotella clara

16(R)-HETEu(2R,3R)-2-aminooctadecane-1,3-diol: korrelata b'mod pożittiv ma 'Neglectibacter timonensis

Sphingosine: korrelata b'mod negattiv ma'Romboutsia ilealis, pożittivament maNeglectibacter timonensis

lysoPA(18:0/0:0)uRetinoyl -glucuronide: korrelata b'mod negattiv ma'Bifidobacterium animalisuRomboutsia ilealis(Figura 8)

Dawn il-korrelazzjonijiet jissuġġerixxurabta qawwija bejn il-bidliet metabolomiċi indotti minn CBC u l-modulazzjoni tal-mikrobijota tal-musrana.

 

3.6 Regolament tal-Pathway SPHK1/S1P1/PI3K/Akt minn CBC

Analiżi Western blot wriet liL-espressjonijiet tal-proteini SPHK1 u S1P1 kienu elevati b'mod sinifikanti fil-grupp mudellmeta mqabbla mal-grupp normali. CBC (doża għolja) b'mod sinifikantilivelli ta' proteini SPHK1 u S1P1 irregolati. L-ebda differenza sinifikanti ma ġiet osservata fl-espressjoni SPHK2 fost il-gruppi (Figura 9, Tabella 10).

Barra minn hekk,PI3K u Aktlivelli ta 'espressjoni tnaqqsu b'mod sinifikanti fil-grupp mudell, filwaqt lip-PI3K u p-Aktlivelli żdiedu b'mod sinifikanti, li jindika attivazzjoni tal-mogħdija. Trattament CBCrestawrati livelli PI3K u Aktuinibixxu l-fosforilazzjoni tagħhom, tnaqqas il-Proporzjonijiet p-Akt/Akt u p-PI3K/PI3K.

Dawn ir-riżultati jissuġġerixxu liCBC jinibixxi l-mogħdija tas-sinjalar SPHK1/S1P1/PI3K/Akt, jikkontribwixxi għall-effett anti-infjammatorju tiegħu.

4. Diskussjoni

Prostatite kronika mhux batterika (CNP) tammonta għal aktar minn90% tad-dijanjosi kollha tal-prostatiteu hija assoċjata ma’ etjoloġija kumplessa, inklużinfezzjoni mikrobjali patoġenika, stress ossidattiv, disregolazzjoni immuni, u risponsi awtoimmuni [20–21].

Evidenza riċenti tissuġġerixxi liinfjammazzjoni u awtoimmunitàhuma ċentrali għall-patoġenesi tas-CNP [22-24]. Il-Mudell sperimentali tal-far tal-prostatite awtoimmuni (EAP)., li jimita CNP uman fl-istopatoloġija u r-rispons immuni, għalhekk intgħażlet [25].

Fl-istudji preċedenti tagħna dwar il-farmakokimika tas-serum, instabu komponenti CBC fiabbundanza ogħla fil-ħmieġ milli fis-serum, li jimplikainterazzjoni intestinali bħala rotta primarja ta 'azzjoni(ara Materjali ta' Pubblikazzjoni Mtejba tas-CNKI).

CBC Ittejjeb il-Patoloġija tal-Prostata u l-Indiċi Infjammatorji

It-tbajja 'HE wera li CBC ttaffiinfiltrazzjoni tal-limfoċiti, restawratastruttura aċinar, u żdiedsekrezzjonijiet glandulari. CBC b'mod sinifikantigħadd imnaqqas ta' lewkoċitifl-omoġenati tal-prostata u restawratidensità tal-ġisem tal-leċitina-iż-żewġ markaturi dijanjostiċi tas-CNP ewlenin [26-28]. L-infjammazzjoni twassal għal ħsara epiteljali u tnaqqis fis-sekrezzjoni tal-leċitina, filwaqt li l-makrofagi attivati ​​jaħarqu l-korpi tal-leċitina [29]. CBC effettivament reġġa' lura dawn il-bidliet patoloġiċi.

CBC ukollċitokini pro-infjammatorji mnaqqsa(TNF- , IL-1 , IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) uanti-infjammatorji elevati IL-10, li jappoġġja l-azzjoni anti-infjammatorja qawwija tiegħu.

 

CBC Jirregola Gut Microbiota Dysbiosis

Is-CNP huwa marbut mill-qrib ma'żbilanċ fil-mikrobijota tal-musrana, li jistgħu jnaqqsuaċidi grassi b'katina qasira (SCFAs)u tikkomprometti l-barriera intestinali, li tippermettiTraslokazzjoni LPSu tiskatta infjammazzjoni tal-prostata permezzmudelli molekulari assoċjati mal-mikrobi (MAMPs) [30].

Studji juru liCistanche polyphenolsittejjeb l-iżbilanċ tal-mikrobijota u timmodula taxa ewlenin involutimard infjammatorju tal-musrana (IBD)[31]. F'dan l-istudju,Lactobacillus u Bifidobacterium animaliskienu eżawriti fil-firien EAP iżda rkuprati wara trattament CBC. Dawn il-probijotiċi huma magħrufa li jtaffu l-infjammazzjoni uroġenitali [32-33]. B'kuntrast,Veillonella, spiss arrikkit f'kundizzjonijiet awtoimmuni [34], kien elevat fil-firien EAP u mnaqqas wara l-amministrazzjoni tas-CBC. Bl-istess mod,Prevotellaceae, assoċjat mal-kanċer tal-prostata [35], ġie arrikkit fil-grupp EAP u mnaqqas minn CBC.

 

CBC Jimmodula Mogħdijiet Metaboliċi Ewlenin

Metabolomics żvelatelevazzjoni sphingosinefil-firien EAP, imnaqqsa b'mod sinifikanti minn CBC, li jissuġġerixxi involviment fimetaboliżmu sphingolipid. L-isfingolipidi huma molekuli strutturali u ta' sinjalar ewlenin involuti fihomtkabbir taċ-ċelluli, apoptożi, u regolazzjoni immuni [36].

Sphingosine-1-fosfat (S1P), sintetizzat minnSPHK1/2, huwa medjatur qawwi tal-lipidi li jingħaqad ma'Riċetturi S1P (S1PRs)biex jirregola t-traffikar taċ-ċelluli immuni u huwa implikat fimard infjammatorju u awtoimmuni[37–39]. Il-modulatur S1PRFTY720 (fingolimod)intwera li jnaqqas l-infjammazzjoni u l-ħsara fit-tessuti f'mudelli EAP [40].

S1P jattiva wkoll mogħdijiet downstream similiPI3K/Akt, li huma assoċjati ma 'infjammazzjoni kronika. Fl-istudju tagħna, CBCSPHK1 u S1P1 irregolati 'l isfel, u inibitPI3K u fosforilazzjoni Akt, li jissuġġerixxi effett regolatorju fuq dan l-assi kritiku.

 

Konklużjoni

Dan l-istudju, jintegrasekwenzar tal-mikrobijota tal-musrana u metabolomika mhux immirata, juri liKapsuli Ibbażati fuq Cistanche (CBC)b'mod effettiv:

Ittejjebħsara fit-tessut tal-prostata

Jrażżnuċitokini infjammatorji

Irrestawraflora tal-imsaren ta 'benefiċċju

Irregolametaboliżmu sphingolipid

InibixxiSPHK1/S1P1/PI3K/Akt sinjalazzjoni

Dawn is-sejbiet jipprovduevidenza konvinċentigħall-potenzjal ta' CBC bħala aterapija erbali multi-mira għal prostatite kronika mhux batterika, u joffru abażi xjentifika għall-applikazzjoni klinika estiża tagħha.