Effetti Ta' Cistanche Fuq Il-Bidliet Ta' ATPase fil-Mitokondrija tal-Fwied Ta' Firien Settiċemija

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Astratt: Għan:Biex tistudja l-bidla taAttività ATPase tal-mitokondrija tal-fwied f'sepsisu l-effett taCistanchefuqha.Metodi:40 firien SD ġew mqassma b'mod każwali fi grupp ta' operazzjoni finta, 12-grupp ta' kontroll ta' siegħa, 12-grupp ta' amministrazzjoni ta 'siegħa, 16-grupp ta' kontroll ta 'siegħa, u 16-grupp ta' amministrazzjoni ta 'siegħa. Il-sepsismudell ġie replikat permezz ta 'ligazzjoni u perforazzjoni taċ-ċekali (C LP) u mqabbla. Ir-rata ta 'sopravivenza tal-grupp, pressjoni arterjali medja (MAP), fwiedmitokondrijali ATPasebidliet fl-attività.Riżultati:Wara li l-firien irreplikaw il-mudell tas-sepsis, il-ATPaseattività tal-fwiedmitokondrijanaqas, u r-rata ta' sopravivenza ta' 24-siegħa naqset b'mod sinifikanti. Il-ATPaseattività tal-mitokondrija tal-fwied wara l-għoti taCistanchetjiebet b'mod sinifikanti meta mqabbla mal-grupp ta' kontroll (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">Konklużjoni:Tnaqqis mitokondrijaliAttività ATPase fis-sepsis, tagħbija żejda tal-kalċju taċ-ċelluli, u edema u nekrożi huma l-kawżi diretti tal-mewt flfirien settiċi. Cistanche isaħħaħ l-attività ATPasehuwa mekkaniżmu importanti għat-trattament tasepsis.

Kliem ewlieni: Cistanche, cistanche sepsis mitokondrija enzima ATP

Sepsishija marda klinikament kritika. Għalkemm l-antibijotiċi ġew aġġornati fl-aħħar 30 sena, ir-rata tal-mortalità tas-sepsis ma naqsetx b'mod sinifikanti u għadha għolja sa 50 fil-mija [1]. Trattament antibatteriku tal-Punent "li jelimina l-ħażen" waħdu ma jtejjebx il-pronjosi ta 'sepsis.Fil-patoġenesi tat-TCM, is-sepsis tappartjeni għall-"tjieba tad-defiċjenza u l-ħażen", it-trattament għandu jkun ibbażat fuq il-prinċipju ta '"tisħiħ tal-ġisem" u "eliminazzjoni tal-ħażen". Il-mediċina tradizzjonali Ċiniża wriet potenzjal kbir fit-trattament tas-sepsis.Sepsisikkumplikat minn falliment ta 'organi multipli huwa l-kawża ewlenija tar-rata għolja ta' mortalità, u l-ħsara fl-istruttura taċ-ċelluli hija l-bażi patoloġika mikroskopika ta 'falliment ta' organi multipli [2]. Cistanche hija mediċina tradizzjonali Ċiniża għal toniku, studji farmakoloġiċi moderni wrew liCistanchegħandu l-effett li jirreżisti l-perossidazzjoni tal-ester tal-membrana u jipproteġi l-funzjoni taċ-ċellula [3]. Il-funzjoni ta 'enerġija mitokondrijalimetaboliżmu hija waħda mill-funzjonijiet bażiċi taċ-ċelloli, u l-attività taATPasehuwa indikatur importanti biex titkejjel il-funzjoni ta 'enerġija mitokondrijalimetaboliżmu. F'dan l-esperiment, osservajna l-bidliet ta 'ATPaseattività taċ-ċelluli tal-fwied fifirien settiċiu r-relazzjoni bejn l-effetti taCistanchefuqha u l-mortalità tal-firien u mmirat li jipprovdi bażi teoretika u esplorazzjoni effettiva għat-trattament kliniku ta' "tisħiħ" ta'sepsis.

Cistanche

1. Materjali u metodi

1.1 Reaġenti

Cistancheinxtara minn Xinjiang (identifikat mill-Professur Tan Defu tal-Iskola tal-Mediċina tal-Università Three Gorges). 200g ta 'Cistanche imnixxef ittieħdu u decocted darbtejn f'ilma distillat. Il-filtrat ġie evaporat u kkonċentrat għal konċentrazzjoni ta '1g/ml. Sodium Pentobarbital (001104), Grupp Farmaċewtiku Nazzjonali taċ-Ċina Shanghai ChemicalReaġentKumpanija;Reaġent ATPase(20030108), Nanjing Jiancheng Bioengineering Research Institute.

1.2 Mudell u grupp ta' annimali sperimentali

40 firien SD maskili (mixtrija miċ-Ċentru tal-Annimali Sperimentali tal-Kulleġġ Mediku ta 'Tongji, l-Università tax-Xjenza u t-Teknoloġija ta' Huazhong), ġew maqsuma b'mod każwali f'5 gruppi: grupp ta 'operazzjoni finta (n=8), 12-kontroll ta' siegħa grupp (n=8), 12-siegħa grupp ta' amministrazzjoni (n=8), 16-siegħa grupp ta' kontroll (n{=8), 16-siegħa grupp ta' amministrazzjoni (n=8). Il-grupp ta 'operazzjoni finta u l-grupp ta' kontroll ingħataw salina normali permezz ta 'gavage, u l-grupp ta' amministrazzjoni kien gavage b'1 g/ml Cistanche, darbtejn kuljum, sa 15-il jum. Il-mudell sepsiskien replikat permezz ta 'ligazzjoni taċ-ċekali u perforazzjoni [4]. Qabel l-operazzjoni, l-annimali kienu ħielsa li jixorbu l-ilma u sawmu għal 12-il siegħa.

1.3 Determinazzjoni tal-pressjoni arterjali medja

Il-vina ġugulari ġiet imdaħħla b'labra tal-qorriegħa, l-eparina ntużat għall-antikoagulazzjoni, l-arterja karotide komuni tax-xellug ġiet ikkanulata mal-arkata aortika, u l-kateter magħmul minnu nnifsu kien imqabbad mal-istrument bijoloġiku b'ħafna kanali, u l-medjapressjoni arterjali(MAP) ġiet irreġistrata. Esperiment wara li l-MAP jistabbilizza.

1.4 Determinazzjoni tal-attività tal-ATPażi mitokondrijali

Ħu 6g fwied tal-firien u malajr poġġih f'medja ta' separazzjoni ta' 0 grad [250mmol ta' sukrożju, 2mmol ta' etoxy-ethyl piperazine 2-ethyl sulfonic acid, 0.1mmol ta' ethylenediaminetetraacetic acid, pH7.4], iftaħ u aħsel l-impuritajiet, Issepara s-sospensjoni medja (1: 10), omoġenizza b'omoġenizzatur elettriku tat-Teflon (1200r/min), ċentrifuga f'2000r/min għal 10 minuti, żomm is-supernatant, ċentrifuga f'10000r /min għal 15-il minuta, armi s-supernatant, Ħu l-preċipitat u ssospendih f'2ml ta' mezz ta' separazzjoni biex tiksebsospensjoni mitokondrijali. Il-proċess kollu jitwettaq fi 0 sa 4 gradi . Il-metodu tad-determinazzjoni tal-fosfru [5] intuża biex jitkejjelAttività ATPase(il-kit inxtara minn Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.5 Ipproċessar statistiku

Id-dejta sperimentali hija kollha espressa bħala medja ± devjazzjoni standard (X ± S), u s-softwer SPSS iwettaq analiżi one-way ta 'varjanza u analiżi ta' korrelazzjoni.

Estratt ta' Cistanche

2. riżultati

2.1 L-effett ta' Cistanche fuq il-pressjoni arterjali medja u l-mortalità tal-firien 24-siegħa

Il-pressjoni tad-demm tal-grupp ta 'kontroll naqset b'mod sinifikanti fi 12-il siegħa wara l-ligazzjoni taċ-ċekali u l-perforazzjoni, u saret aktar ovvja f'16-il siegħa. Meta mqabbel mal-grupp ta 'operazzjoni finta, kien hemm differenza sinifikanti. Il-pressjoni tad-demm tal-Trattament ta' Cistanchegrupp ġie mtejjeb. Ir-rata tal-mewt tal-grupp ta 'kontroll kienet ogħla b'mod sinifikanti minn dik tal-grupp ta' operazzjoni finta, u r-rata ta 'mewt tal-grupp ta' amministrazzjoni kienet sinifikament aktar baxxa minn dik tal-grupp ta 'kontroll korrispondenti.

2.2 L-effett ta 'Cistanche fuq l-attività ATPase mitokondrijali

L-attivitajiet ta'ATPase tas-sodju-potassju, ATPase tal-kalċju, ATPażi tal-manjeżju, u ATPażi tal-kalċju-manjeżjufil-grupp ta 'amministrazzjoni kienu ogħla b'mod sinifikanti minn dawk tal-grupp ta' kontroll korrispondenti, li laħqu l-livell tal-grupp ta 'operazzjoni finta, li kien korrelatat b'mod pożittiv b'mod sinifikanti mat-tnaqqis ta'mortalità tal-firien (r=0.834) ).

Cistanche

3. Diskussjoni

Na plus -K flimkien ma -ATPase, magħrufa wkoll bħala pompa tas-sodju-potassju, għandha rwol fiżjoloġiku importanti fiż-żamma ta 'attivitajiet fiżjoloġiċi taċ-ċelluli, temperatura tal-ġisem, u metaboliżmu normali, u tirregola l-bilanċ tal-joni ġewwa u barra ċ-ċellula.F'sepsis, hemm disfunzjoni severa tal-pompa tas-sodju fil-membrana mitokondrijali ta 'ġewwa, li tikkawżamitokondrijaliedema. Il-Na plus -K plus -ATPenzima hija bil-ħsara, l-iżbilanċ tamitokondrijaliil-konċentrazzjoni tal-jone tiżdied, l-attività tal-enzima tal-metaboliżmu tal-enerġija tiġi inibita, il-provvista tal-enerġija taċ-ċelluli titnaqqas, u tiġi kkawżata edema ċitotossika. Fl-istess ħin, il-permeabilità tal-membrana tiżdied, li finalment twassal għall-mewt taċ-ċelluli. Fl-esperiment, sibna li l-mitokondrijaliNa plus -K flimkien ma -ATPasel-attività tal-epatoċiti settiċi tnaqqset b'mod sinifikanti (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na plus -K flimkien ma -ATPaseattività ta'mitokondrija tal-fwiedżdiedet b’mod sinifikanti (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">firien settiċikien imnaqqas b'mod sinifikanti. Ir-riżultati sperimentali jissuġġerixxu li t-tnaqqis ta 'Na plus -K flimkien ma -ATPase attivitàhija sinifikament korrelatata b'mod pożittiv mal-iżvilupp tasepsis fil-firien. L-inibizzjoni taNa plus -K flimkien ma -ATPase attività, edema taċ-ċelluli, u mewt li twassal għal falliment ta 'organi multipli jistgħu jkunu l-iżvilupp mgħaġġel ta' sepsis. Wieħed mill-mekkaniżmi importanti. Fis-snin riċenti, kien hemm ħafna rapporti dwarNa plus -K flimkien ma -ATPaseu ħafna mard, li ġibdu l-attenzjoni tal-ħaddiema kliniċi u bażiċi. Huwa ta 'sinifikat kbir li tistudja l-liġi tal-bidliet fl-attività ta'Na plus -K flimkien ma -ATPaseu r-regolament tiegħu [6]. Ftit huwa magħruf dwar il-mekkaniżmu speċifiku ta 'Na plus -K flimkien ma -ATPasefl-iżvilupp u r-riżultat tasepsis,u hija meħtieġa aktar riċerka.

L-istabbiltà tal-kalċju u l-manjeżju intraċellulari hija l-bażi materjali meħtieġa għaż-żamma tar-rispons ta 'rilaxx intraċellulari u t-trażmissjoni ta' informazzjoni [7]. Fl-esperiment, it-tnaqqis taAttività ta' Ca2 flimkien ma' -ATPasefil-grupp ta 'kontroll jaffettwa direttament l-attività tal-pompa tal-kalċju, u t-tnaqqis tal-attività tal-pompa tal-kalċju jdgħajjef ir-rwol ta'mitokondrijalipompa tal-kalċju biex tneħħi Ca2 plus 'il barra miċ-ċellula, u Ca2 plus tagħbija żejda ġewwamitokondrija. It-tagħbija żejda tal-kalċju fil-mitokondrija hija kawża importanti ta 'mitokondrijalidisturb ta 'fosforilazzjoni ossidattiva, ħsara strutturali, u nekrożi taċ-ċelluli [8, 9]. Ca2 plus tagħbija żejda tnaqqas il-potenzjal tal-membrana mitokondrijali u l-kontenut ta 'ATP tat-tessut [10], u l-utilizzazzjoni tal-enerġija taċ-ċelloli tat-tessut hija indebolita. Ca2 plus jistgħu jattivaw il-fosfolipasi fuq il-mitokondrija, jikkawżaw ħsara lill-membrana mitokondrijali, jeqirdu l-funzjoni normali ta 'sinteżi ATP tal-mitokondrija, u jfixklu l-produzzjoni tal-enerġija mitokondrijali [11]. Disturbi ta'metaboliżmu tal-kalċju mitokondrijalijistgħu jaffettwaw direttamentfunzjoni respiratorja mitokondrijali, tikkawżaossiġnu mitokondrijalidisturbi fl-assorbiment u l-ossidazzjoni tal-protoni fil-katina tat-trasport tal-elettroni [12]. Fl-istess ħin, iż-żieda ta 'Ca2 plus tista' taggrava l-ħsara tal-perossidazzjoni tal-ester lill-mitokondrija [13]. Dawn kollha direttament jew indirettament iwasslu għall-falliment tal-provvista tal-enerġija taċ-ċelluli u l-mewt ta 'tessuti u organi u jaċċelleraw l-iżvilupp ta' bidliet patoloġiċi fis-sepsis. Fl-esperiment, sibna wkoll li l-attivitajiet ta 'M g2 plus -ATPase u Ca2 flimkien ma -M g2 flimkien ma -ATPase fil-firien settiċinaqsu wkoll b'mod sinifikanti.Mg2 plus -ATPase u Ca2 flimkien ma -M g2 flimkien ma -ATPasehuma sustanzi importanti biex iżommu l-bilanċ intraċellulari tal-kalċju u tal-manjeżju. Widner irrapporta li t-tnaqqis tal-jonji tal-manjeżju intraċellulari huwa l-fattur li jinduċi ħsara taċ-ċelluli irriversibbli, u l-proporzjon ta 'Mg 2 plus /Ca2 plus huwa Indikatur importanti li jirrifletti l-ħsara irriversibbli taċ-ċelloli [14]. Il-Mg2 plus -ATPase u Ca2 flimkien ma -M g2 flimkien ma -ATPaseattivitajiet tal-Cistanche-grupp amministrat kienu msaħħa, A TPase huwa sulfhydrylase, uCistanchegħandu effett ta 'perossidazzjoni ta' l-ester anti-membrana, li jista 'jkun dovut għat-titjib ta'ATPaseattività minn Cistanche Bażi tal-Kimika u Bażi tal-Farmakoloġija [15].

Fis-sepsis, mitokondrijalidisturb tal-metaboliżmu tal-enerġija, naqasAttività tal-enzima ATP, edema mitokondrijali, tagħbija żejda ta 'kalċju intraċellulari, u disturb tal-bilanċ tal-kalċju-manjeżju huma l-kawżi diretti ta' mewt taċ-ċelluli sepsis u falliment ta 'organi multipli.Cistancheantagonizza l-perossidazzjoni tal-ester tal-membrana, isaħħaħ l-attività tal-ATPase, iżżomm l-omeostażi intraċellulari tal-kalċju u l-manjeżju, u tipproteġi t-tħaddim normali tal-funzjonijiet taċ-ċelluli.Cistanchehuwa mekkaniżmu importanti biex titnaqqas il-mortalità tafirien settiċi. Dan juri l-prospetti tajbin ta 'Cistanche fit-trattament ta 'sepsis