Effetti Ta' Glycosides Cistanche Fuq Il-Funzjoni Immuni tal-Ġrieden Mudell li Tixjiħ Indott mid-D-galactose

Kuntatt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:audrey.hu@wecistanche.com

〔Astratt〕 Għan:

Biex tistudja l-mekkaniżmu immunoloġiku tal-effett kontra t-tixjiħ ta 'Cistanche glycosides fuq ġrieden li qed jixjieħu indotti minn D-galactose.Metodi: Il-metodu ta 'inkorporazzjoni 3 H-TdR intuża biex jiddetermina l-abbiltà tat-trasformazzjoni tal-limfoċiti, it-test aħmar newtrali intuża biex jiddetermina l-funzjoni fagoċitika tal-makrofaġi peritoneali tal-ġurdien, il-metodu ta' immunofluworexxenza ntuża biex jinstabu sottosettijiet ta 'limfoċiti, u r-radjuimmunoassay intuża biex jiddetermina il-livell ta' IL-2 fid-demm periferali. , Metodu ta 'rilaxx ta' enzima Trace NAG biex titkejjel l-attività taċ-ċelluli NK.Riżultati: Il-funzjoni immuni tal-ġrieden li qed tixjieħ indotti minn D-galactose naqset b'mod sinifikanti, li kien manifestat fil-kapaċità ta 'trasformazzjoni tal-limfoċiti, kontenut IL-2 tad-demm periferali, ċellula CD4 plus T, u kontenut ta' ċelluli CD8 flimkien T, fagoċitiku funzjoni tal-makrofaġi peritoneali, u attività taċ-ċelluli NK. Tnaqqas (P<>il-cistanche ta 'glycosidejista 'jtejjeb il-kapaċità tat-trasformazzjoni tal-limfoċiti, kontenut ta' IL-2 tad-demm periferali, funzjoni fagoċitika tal-makrofaġi peritoneali, attività taċ-ċelluli NK, CD4 plus T u CD8 plus T cell content (P<0.05). 0.="" 05).="">Konklużjoni: il-cistanche tal-glycoside jista 'jtejjeb b'mod sinifikanti l-funzjoni immuni tal-ġrieden li qed jixjieħu indotti minn D-galactose, jirrestawraw jew javviċinaw l-istat tal-ġrieden żgħar, u għandhom l-effett li jdewmu t-tixjiħ.

[Kliem ewlenin]: Cistanche glycosides totali; D-galattożju; mudell tax-xjuħija; immunità

Cistanche ta' glycoside:kontra t-tixjiħ

Cistanchehija l-mediċina l-aktar użata ta 'spiss fil-formuli kontra t-tixjiħ u l-lonġevità. Cistanche totali glycosides (GCS) huwa t-terminu ġenerali għal klassi ta 'phenylethanoid glycosides f'cistanche u hija l-attività bijoloġika ewlenija estratta mill-cistanche li tipproduċi l-melħ fit-Tramuntana ta' Xinjiang Komponent [1], GCS ġie ppruvat li għandu anti-lipidu effett perossidazzjoni [2], iżda hemm ftit rapporti ta 'riċerka dwar tagħhamekkaniżmu immuni kontra t-tixjiħ.

1. Materjali u Metodi

1. 1 Grupp ta' annimali u mediċina

60 ġrieden Kunming, irġiel u mara, 3 xhur, li jiżnu 18-21 g, ipprovduti mill-Kamra tal-Annimali tal-Istitut tal-Prodotti Bijoloġiċi, Ministeru tas-Saħħa. Il-ġrieden f'kull grupp kienu miżmuma fl-istess kamra f'gaġeġ separati, u kienu ħielsa li jieklu u jixorbu. L-annimali kienu maqsuma b'mod każwali fi tliet gruppi: il-grupp ta 'kontroll taż-żgħażagħ, il-grupp tal-mudell tat-tixjiħ, u l-grupp ta' amministrazzjoni mudell, b'20 annimal f'kull grupp. GCS ġie estratt u identifikat mid-Dipartiment tal-Fitokimika, l-Iskola tal-Farmaċija, l-Università Jiamusi skont il-letteratura [1].

Ittejjeb l-ImmunitàSuppliment Cistanche

1.2 Metodu

Il-grupp żagħżugħ ġie injettat b'salina normali taħt il-ġilda fl-għonq għal 30 jum kuljum u ngħata ilma sħun għal 15-il jum mill-15-il jum. Il-ġrieden fil-grupp tal-mudell li qed tixjieħ ġew injettati b'D-galactose (awtoklavi) 100 mg/kg taħt il-ġilda fuq wara tal-għonq kuljum. Piż tal-ġisem għal 30 jum konsekuttiv. Fil-grupp ta' amministrazzjoni mudell, D-galactose 100 mg/kg piż tal-ġisem ġie injettat taħt il-ġilda fuq wara tal-għonq kuljum, u GCS 125 mg·kg-1·d{-1 ġie amministrat fl-istess ħin mill-15-il jum, u l-amministrazzjoni kienet kontinwament amministrata għal 15-il jum. L-annimali kollha ġew sagrifikati fl-istess ħin fit-30 jum, u ġew determinati diversi indiċi ta 'osservazzjoni.

1. 2. 1 Esperiment tat-trasformazzjoni tal-limfoċiti

Is-sospensjoni taċ-ċelluli tal-milsa tal-ġurdien ġiet aġġustata għal konċentrazzjoni taċ-ċelluli ta '2 × 106, u Con A intuża bħala stimulu biex jiġi kkultivat in vitro għal 5 ijiem, u l-kapaċità ta' trasformazzjoni tagħha ġiet ittestjata bil-metodu ta 'inkorporazzjoni 3 H-Td R. Ir-riżultati huma espressi bħala l-indiċi ta' stimolu SI (grupp ta' stimulazzjoni SI=ConA/grupp ta' kontroll).

1. 2. 2 Funzjoni fagoċitika tal-makrofagi peritoneali tal-ġurdien (test aħmar newtrali [3])

Iġbor il-fluwidu peritoneali tal-ġurdienmakrofagisospensjoni b'mod asettiku. Wara ċ-ċentrifugazzjoni, poġġi f'wiċċ l-ilma l-preċipitat fil-medju tal-kultura taċ-ċelluli. Uża emoċitometru biex tgħodd u aġġusta l-konċentrazzjoni taċ-ċelluli tas-soluzzjoni għal 2×106. Poġġiha f'inkubatur ta' 37 grad għal sagħtejn. , Armi ċ-ċelluli supernatant u mhux aderenti. Ħu l-makrofaġi tal-ħajt u żid 0.1 fil-mija salin fiżjoloġiku aħmar newtrali sa 37 grad u kompli l-kultura għal 30 min, armi l-aħmar newtrali u aħsel ripetutament il-makrofaġi b'37 grad PBS, iddilwa b'50 fil-mija aċidu aċetiku u 50 fil-mija etanol, issettja 722 Spettrofotometru kolorimetriku f'wavelength ta' 540 nm, assorbenza mkejla valur A.

1. 2. 3 Sejbien ta' sottogruppi ta' limfoċiti

Ħu 0.1 ml ta' 1×107/mlsospensjoni tal-limfoċiti, żid 10 ul ġurdien kontra l-ġurdien CD3, CD4, u CD8 antikorpi monoklonali rispettivament, ħawwad sew, inkuba fi 4 gradi għal 30 min, 1 fil-mija FC S f'PBS (0. 2M, pH7.4) Aħsel 3 darbiet, sejbien taċ-ċitometrija tal-fluss: ċitometru tal-fluss tal-laser (FACScan, kumpanija BD tal-Istati Uniti), laser argon, tul ta 'mewġ ta' eċċitazzjoni 488 nm, spettru ta 'skoperta FITC 480-630 nm, għadd 800/ s ċelluli, 200,000 ċelluli b'kollox. Ir-riżultati ġew analizzati u rreġistrati b'kompjuter HP340 u softwer professjonali LYSI SⅡ.

1. 2. 4 Determinazzjoni ta' IL-2 fid-demm periferali permezz ta' analiżi radjoimmunoloġika

Ħu 1 ml demm mill-boċċi tal-għajnejn tal-ġurdien f'test tube. Wara l-koagulazzjoni, is-serum huwa separat. Skont l-operazzjoni tal-kit, in-numru tas-CPM jitkejjel fuq il-counter.

1. 2. 5 Attività taċ-ċelluli NK

Ħu demm tal-għajnejn tal-ġurdien b'mod asettiku u żid eparina għall-antikoagulazzjoni. Irreferi għal-letteratura [4] għad-dettalji. 1.3 Ipproċessar statistiku Id-dejta sperimentali hija espressa bħala x±s, ipproċessata mis-softwer S AS, u analizzata b'analiżi tal-varjanza, test F, u test t.

benefiċċju ta 'cistanche: Ittejjeb l-Immunità

2. riżultati

2.1 L-effetti ta 'GCS fuq il-kapaċità ta' trasformazzjoni ta 'limfoċiti u sottogruppi ta' ċelluli T f'kull grupp ta 'ġrieden huma murija fit-Tabella 1.

Tabella 1. L-effett tal-GCS fuq il-kapaċità tat-trasformazzjoni tal-limfoċiti u s-sottosettijiet taċ-ċelluli T f'kull grupp ta' ġrieden (n= 16,x±s)

Meta mqabbel ma' Ⅰ: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">

2.2 L-effetti tal-GCs fuq il-funzjoni fagoċitika, il-kontenut IL-2, u l-attività taċ-ċelluli NK tal-makrofaġi peritoneali f'kull grupp ta 'ġrieden huma murija fit-Tabella 2.

Tabella 2. L-effett tal-GCS fuq il-funzjoni fagoċitika, l-attività taċ-ċelluli NK u l-kontenut IL-2 tal-makrofaġi peritoneali f'kull grupp ta 'ġrieden (n= 16,x±s)

3. Diskussjoni

F'dan l-esperiment, il-funzjoni fagoċitika tal-makrofaġi peritoneali u l-attività taċ-ċelluli NK tal-ġrieden mudell li qed tixjieħ tnaqqsu (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">ittejjeb l-immunità ċellulari mhux speċifika tal-ġisem u l-funzjonijiet ta 'regolazzjoni immuni, uittejjeb Anti-tumur u kontra l-infezzjonital-ġisem li qed jixjieħ huwa wieħed mill-modi biex tittardja t-tixjiħ [4]. IL-2 huwa ċitokin indispensabbli għall-proliferazzjoni u d-divrenzjar ta 'limfoċiti T, u jista' jirregola l-funzjonijiet ta 'limfoċiti, monoċiti-makrofaġi, u ċelluli NK. IL-2 jista 'jippromwovi l-proliferazzjoni u d-divrenzjar ta' limfoċiti T, jirregola l-rispons immuni, jinduċu attività Tc, u jippromwovu l-produzzjoni ta 'antikorpi u interferon- .Huwa għandu rwol importanti fis-sistema immuni. F'dan l-esperiment, il-kontenut IL-2 tal-ġrieden mudell li qed jixjieħu naqas (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">ittejjeb il-funzjoni immuni ċellulari speċifika tal-ġrieden.

Ittejjeb l-immunità suppliment cistanche

4. Referenzi

1. Du Niansheng, Wang Hong. Iżolament u identifikazzjoni ta' phenoxyethanol glycosides minn Cistanche [J]. Riċerka u Żvilupp ta' Prodotti Naturali, 1993; 5(4): 7-8.

2. Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Perossidazzjoni kontra l-lipidi u effetti kontra r-radjazzjoni tal-glikosidi totali ta 'Cistanche 〔J〕. Ġurnal Ċiniż ta 'Materia Medica Ċiniż, 1997; 22(6): 364-367.

3. Xu Shuyun, Bian Rulian. Metodoloġija Sperimentali tal-Farmakoloġija [M]. It-2 Edizzjoni. Beijing: People's Health Publishing House, 1994: 1221.

4. Liu Xiongbo, Liu Caiyu, Yang Xiuyun, et al. Sejbien ta' attività taċ-ċelluli NK bil-metodu ta' rilaxx ta' mikro-NAG [J]. Ġurnal tax-Xjenza tal-Laboratorju Kliniku, 1996; 14(2): 66-67.