Sfidi u diffikultajiet li ltaqgħu magħhom fl-applikazzjoni tat-terapija taċ-ċelluli CAR-T

Kuntatt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

L-immunoterapija taċ-ċellula T tar-riċettur tal-antiġen kimeriku (ċellola T tar-riċettur tal-antiġen kimeriku, CAR-T) hija li tfassal ġenetikament ċelluli T iżolati minn pazjenti jew donaturi alloġeniċi biex jesprimu riċettur tal-antiġen kimeriku (riċettur tal-antiġenu kimeriku). riċettur, CAR), terapija taċ-ċelluli adottivi li speċifikament tagħraf u toqtol iċ-ċelloli tat-tumur. CAR-T hija waħda mill-avvanzi ewlenin fil-qasam tal-immunoterapija tal-kanċer f'dawn l-aħħar snin. Għandu vantaġġi kbar fit-trattament ta 'tumuri malinni ematoloġiċi u għandu prospetti wesgħin ta' żvilupp. Fil-preżent, it-terapija taċ-ċelluli CAR-T tiffaċċja wkoll sfidi kbar. Il-kontenut li ġej se jieħu inti tifhem l-isfidi li jiffaċċjaw it-terapija taċ-ċelluli CAR-T, tidentifika l-mekkaniżmi li jwasslu għal limitazzjonijiet u jegħlbu dawn l-ostakli, sabiex iċ-ċelluli CAR-T ikunu jistgħu jeżerċitaw aħjar il-potenzjal tagħhom, Itejb l-istrateġiji ta 'trattament u jtejbu r-riżultati tal-pazjenti. Diversi fatturi ewlenin li nstabu li jaffettwaw l-effikaċja tat-terapija taċ-ċelluli CAR-T jinkludu l-manifattura ta 'ċelluli CAR-T, il-ġestjoni ta' effetti sekondarji tossiċi, u r-rikorrenza tar-reżistenza għall-mediċina.

Ħwawar kontra t-tumur:Prodotti erbali Cistanche &Ċellula T tar-riċettur tal-antiġen kimeriku

1 Problema fil-Manifattura taċ-Ċelloli CAR-T

L-isfidi li jiffaċċjaw il-manifattura taċ-ċelluli CAR-T jinvolvu rabtiet multipli bħall-akkwist taċ-ċelluli T, iżolament u screening, transduzzjoni, espansjoni tal-kultura, u għażla inizjali tal-fenotip taċ-ċelluli T. Permezz tal-ottimizzazzjoni tal-metodi f'kull rabta, il-prodotti taċ-ċelluli CAR-T jistgħu jiġu realizzati b'effikaċja klinika Ogħla u effetti sekondarji inqas tossiċi. Fil-preżent, iċ-ċelloli CAR-T approvati mill-FDA huma kollha awtologi, u m'hemm l-ebda riskju ta 'rifjut alloġeniku u marda ta' tilqim kontra ospitanti (GVHD), iżda huwa diffiċli li tinkiseb, u l-kwalità taċ-ċellula ħafna drabi mhix disponibbli . Tassigura. L-użu ta 'ċelluli minn donaturi b'saħħithom biex jipproduċu prodotti CAR-T hija soluzzjoni waħda għall-problema ta' sorsi ta 'ċelluli CAR-T ta' kwalità baxxa. Studji kliniċi bikrija wrew il-fattibbiltà li jintużaw ċelluli CAR-T derivati ​​minn donatur f'pazjenti b'rikaduta tal-marda wara trapjant alloġeniku b'riskju aktar baxx ta' GVHD. Barra minn hekk, iċ-ċelluli T derivati ​​mid-donaturi jiffaċilitaw l-iżvilupp ta 'prodotti universali CAR-T, li huwa ta' sinifikat kbir biex jingħelbu l-problemi eżistenti ta 'sorsi insuffiċjenti ta' ċelluli CAR-T, kwalità fqira, u ċikli ta 'produzzjoni twal, iżda huma meħtieġa modifiki ġenetiċi addizzjonali. biex jitnaqqas ir-riskju ta’ rifjut immuni u GVHD. Barra minn hekk, l-istrutturi CAR ħafna drabi jkun fihom sekwenzi eżoġeni. Minħabba d-diffikultà tal-preparazzjoni, ħafna scFvs taċ-ċelluli CAR-T huma ta 'oriġini murina u huma immunoġeniċi. Antikorpi umani kontra l-ġrieden kontra scFv ġew skoperti f'pazjenti kkurati.

Studji wrew li l-fenotip inizjali taċ-ċelluli T tal-prodotti taċ-ċelluli CAR-T għandu rwol importanti fir-risponsi kliniċi sussegwenti. Fenotipi speċifiċi taċ-ċelluli T, bħal ċelluli T tal-memorja ċentrali, ċelluli T tal-memorja bħal staminali, u ċelluli T prekursuri, jistgħu jtejbu l-kapaċità ta 'espansjoni u l-persistenza taċ-ċelluli CAR-T. Studju ta' CD19-terapija mmirata taċ-ċelluli CAR-T f'pazjenti CLL sab li l-popolazzjoni taċ-ċelluli CAR-T ta' dawk li rrispondew kellha espressjoni tal-ġeni abbundanti ta' memorja relatata maċ-ċelluli T meta mqabbla ma' dawk li ma rrispondewx. Tim ieħor ta’ riċerka wassal lill-proteina CAR biex tidħol fi stat ta’ kwiet billi ġġiegħel ir-regolazzjoni 'l isfel tal-proteina CAR permezz ta' sistema regolatorja tad-droga jew dasatinib, u b'hekk kiseb fenotip simili għall-memorja, u b'suċċess ireġġa' lura l-fenotip u l-karatteristiċi tat-traskrizzjoni taċ-ċelluli CAR-T eżawriti. , u mbagħad tirrestawra l-funzjoni Antitumor taċ-ċelloli CAR-T.

Barra minn hekk, iż-żmien tal-infużjoni taċ-ċelluli CAR-T għandu wkoll impatt importanti fuq ir-rispons tat-trattament. Billi jitqassar iċ-ċiklu tal-produzzjoni taċ-ċelloli CAR-T permezz ta 'ottimizzazzjoni teknoloġika, huwa mistenni li jitnaqqas id-dewmien tal-mard tal-pazjenti u jkun ta' benefiċċju għal aktar pazjenti. Barra minn hekk, il-ġeni li jikkodifikaw l-istrutturi CAR huma ġeneralment trasdotti f'ċelluli T permezz ta 'retrovirus jew lentivirus, iżda bl-iżvilupp ta' sistemi ta 'transposon, huwa aktar ekonomiku li jintużaw transposons minflok vettori virali għall-produzzjoni taċ-ċelluli CAR-T. Fil-preżent, is-sistema tat-trasposon Sleeping Beauty ġiet applikata għall-manifattura ta' ċelluli CAR-T immirati CD19-.

Kontra t-tumur: Terapija taċ-ċelluli CAR-T &cistanche tubulosa

2 Effetti tossiċi u sekondarji tat-terapija taċ-ċelluli CAR-T

Kważi l-pazjenti kollha kkurati b'ċelluli CAR-T immirati CD19-żviluppaw effetti sekondarji tossiċi ta' gradi differenti, inkluż is-sindromu tar-rilaxx taċ-ċitokini (CRS) u s-sindromu ta' newrotossiċità assoċjata mal-effettituri immuni, ICANS), eċċ., dan tal-aħħar magħruf ukoll bħala newrotossiku effetti sekondarji. Is-Soċjetà Amerikana għat-Trapjant u Terapija Ċellulari (ASTCT) żviluppat u ppubblikat rakkomandazzjonijiet ta 'gradazzjoni standardizzati għal CRS u ICANS, li għandhom sinifikat ta' gwida għall-ġestjoni u t-trattament tat-tossiċità CAR-T.

Is-sintomi kliniċi tas-CRS spiss jibdew bid-deni, u każijiet severi jistgħu jwasslu għal rispons infjammatorju sistemiku, pressjoni baxxa, ipoksja, u insuffiċjenza tal-organi. ICANS huwa manifestat prinċipalment bħala enċefalopatija tossika, każijiet severi jistgħu jwasslu għal aċċessjonijiet, edema ċerebrali u koma. Ħafna mill-pazjenti b'ICANS kellhom storja ta' CRS, li jissuġġerixxi li CRS jista' jaġixxi bħala fattur ta' bidu jew fattur ta' promozzjoni għal ICANS. Jekk is-sintomi bikrija tas-CRS u l-ICANS jistgħu jiġu skoperti u intervenuti b'mod effettiv, il-kors kliniku tat-tnejn huwa riversibbli, iżda CRS u ICANS severi jistgħu jkunu fatali. Il-fehim tal-mekkaniżmi patofiżjoloġiċi tas-CRS u l-ICANS huwa ta 'għajnuna għall-iżvilupp ta' mediċini mmirati biex irażżan it-tossiċità taċ-ċelloli CAR-T fuq il-bażi li tinżamm l-attività kontra t-tumur taċ-ċelloli CAR-T kemm jista 'jkun. Is-CRS hija assoċjata ma' livelli elevati ta' diversi ċitokini, fosthom IL-6 hija molekula immuni importanti li timmedja CRS. Tocilizumab, li jimblokka r-riċettur IL-6, bħalissa huwa t-trattament ewlieni għas-CRS. Provi prekliniċi wrew li s-CRS hija attivata minn netwerk multiċellulari ta 'ċelluli CAR-T u ċelluli ospitanti, bis-sistema tal-monocyte-makrofaġi għandha rwol ċentrali fil-proċess ta' attivazzjoni. IL-1 huwa wieħed mill-prodotti taċ-ċitokini ewlenin tas-sistema tal-monoċiti-makrofagi, u jista 'jkun involut fir-rabta tas-sewqan tas-CRS, u l-imblukkar ta' din il-mira huwa effettiv biex itaffi s-CRS. TNF, interferon- (IFN- ), fattur li jistimula l-kolonji tal-granuloċiti/makrofagi (GM-CSF) u ċitokini pro-infjammatorji oħra huma wkoll involuti fil-proċess ta 'CRS, li jista' jkun il-mira tal-potenzjal. Bħalissa, CRS ta 'grad baxx huwa ttrattat prinċipalment b'trattament antipiretiku u ta' appoġġ, u kumplikazzjonijiet oħra li jistgħu jwasslu għal deni, bħal infezzjoni, huma prevenuti b'mod attiv. Għal CRS moderata għal severa, tocilizumab ġeneralment jintuża, u l-isterojdi jintużaw b'mod selettiv bħala terapija awżiljarja skont il-kundizzjoni tal-pazjent, u l-effett huwa aktar sinifikanti. Għal pazjenti CRS severi, sterojdi huma ġeneralment użati biex jinibixxu l-proliferazzjoni u t-tnixxija taċ-ċitokini ta 'ċelluli CAR-T u ċelluli oħra "fil-qrib". Għandu jiġi nnutat li l-isterojdi ma jistgħux jintużaw f'dożi kbar, u l-effett inibitorju tagħhom fuq is-sistema immuni se jwassal għal tnaqqis fl-effikaċja ta 'CAR-T. Xi inibituri ta 'molekula żgħar bħal ruxolitinib u ibrutinib jistgħu jinibixxu b'mod estensiv il-produzzjoni u t-trasduzzjoni tas-sinjal ta' diversi ċitokini u jistgħu jorbtu ma 'miri multipli, u b'hekk jirregolaw il-funzjoni immuni taċ-ċelloli CAR-T u jnaqqsu l-effetti sekondarji.

Il-mekkaniżmu ta 'ICANS jista' jkun relatat ma 'l-akkumulazzjoni ta' ċelluli CAR-T u ċitokini pro-infjammatorji fis-sistema nervuża ċentrali. Studji prekliniċi osservaw korrelazzjoni bejn in-numru ta 'ċelluli CAR-T fil-fluwidu ċerebrospinali u l-livell ta' ċitokini u s-severità ta 'ICANS. L-inċidenza ta' ICANS fit-terapija CAR-T immirata għal CD19-hija ogħla minn dik fit-terapija taċ-ċelluli CAR-T immirata fuq CD{22-, li jista' jkun minħabba li CD19 huwa espress fiċ-ċelloli parietali medjali tal-moħħ tal-bniedem. Il-metodu ta 'trattament kliniku għall-pazjenti ICANS huwa li jagħti sterojdi, u d-dożaġġ għandu jkun l-aktar baxx biex jiġi evitat l-impatt fuq l-effikaċja ta' CAR-T u immunosoppressjoni serja. Tocilizumab kiseb riżultati tajbin fit-trattament tas-CRS, iżda l-effett tiegħu fuq ICANS huwa limitat ħafna, li jista 'jkun relatat mad-diffikultà tiegħu biex jgħaddi mill-barriera tad-demm-moħħ.

Effetti sekondarji tossiċi bħalissa huma fattur importanti li jillimitaw l-effikaċja ta 'CAR-T, li jfixklu t-titjib tal-effett kontra t-tumur taċ-ċelluli CAR-T billi jżidu d-doża ta' ċelluli CAR-T jew itejbu l-attività effettur. Piż għoli ta 'tumur, età avvanzata, u prekondizzjonament ta' limfodeplezzjoni ta 'intensità għolja huma maħsuba li huma assoċjati ma' l-okkorrenza ta 'effetti sekondarji immunotossiċi. Biż-żieda ta 'każijiet ta' trattament u l-estensjoni tal-ħin ta 'segwitu, dehru aktar effetti tossiċi u sekondarji, bħal limfohistiocytosis emofagoċitiku / tossiċità bħal sindromu ta' attivazzjoni tal-makrofagi, disfunzjoni immuni relatata mal-anemija aplastika taċ-ċelluli B Stat bil-ħsara kkumplikat minn infezzjoni fatali, fatali edema ċerebrali, eċċ. Studji eżistenti sabu li ż-żieda ta' ġeni suwiċida, bħal caspase inducible-9 jew herpes simplex virus thymidine kinase, ma' CAR huwa mod possibbli biex jitnaqqsu l-effetti sekondarji ċitotossiċi ta' CAR-T, iżda se tikkawża tneħħija irriversibbli taċ-ċelluli CAR-T u tnaqqas ir-reżistenza. Effikaċja tat-tumur.

Effetti ta 'terapija taċ-ċelluli CAR-T u supplimenti ta' cistanche: trattament tal-kanċer u tumur

3 Rikaduta tar-reżistenza għall-mediċina wara terapija taċ-ċelluli CAR-T

Għalkemm iċ-ċelluli CAR-T għamlu skoperti kbar fit-trattament ta' tumuri malinni ematoloġiċi, fost pazjenti li qed jirċievu terapija taċ-ċelluli CAR-T immirata CD19-, ir-rata ta' rikaduta tar-reżistenza għall-mediċina hija għolja daqs 30 fil-mija sa 50 fil-mija, u l-biċċa l-kbira tar-rikaditi jseħħu 12-il sena wara t-trattament. fi żmien xahar. Madankollu, dan it-tip ta 'rikaduta mhuwiex biss għall-mira CD19, u studji relatati dwar miri oħra bħal CD22 u BCMA wrew ukoll li rikaduta reżistenti għall-mediċina hija sfida kbira komunement iffaċċjata mit-terapija taċ-ċelluli CAR-T. Fil-preżent, l-avvenimenti ta 'rikaduta huma ġeneralment maqsuma f'rikaduta negattiva għall-antiġen u rikaduta pożittiva għall-antiġen.

Il-mekkaniżmu primarju ta' rikaduta negattiva għall-antiġenu huwa t-telf tal-antiġenu. Mekkaniżmi rikonoxxuti bħalissa ta 'telf ta' antiġen jinkludu mutazzjonijiet ta 'splicing, epitope cryptic, u bidliet ta' nisel taċ-ċelluli minħabba telf ta 'epitopi fil-mira. Madankollu, anki jekk l-antiġen ma jintilefx kompletament, espressjoni jew densità tal-antiġen imnaqqsa permezz tal-immunomodulazzjoni hija biżżejjed biex tippermetti li ċ-ċelloli tat-tumur jaħarbu. Fi prova klinika bl-użu ta' ċelluli CAR-T immirati CD22- biex jikkuraw pazjenti bil-lewkimja, instab li pazjenti bil-lewkimja b'antiġeni pożittivi rkadew, li jissuġġerixxi li ż-żamma tal-attività taċ-ċelluli CAR-T jeħtieġ li tilħaq il-limitu minimu tal-espressjoni tal-antiġenu . Ċelloli CAR-T immirati multi-molekulari kombinatorji huma mistennija li jegħlbu l-ħarba taċ-ċelluli tat-tumur minn telf ta 'antiġen jew mekkaniżmi ta' downregulation. Għal pazjenti li jirkadu wara t-terapija taċ-ċelluli CRA-T immirata għal CD19-, CD22 huwa mira ideali għaliex il-biċċa l-kbira tal-pazjenti CD19-negattivi jibqgħu pożittivi għall-espressjoni ta' CD22. Fi provi kliniċi, iċ-ċelluli CAR-T li jimmiraw lejn CD22 kienu effettivi fit-trattament ta' pazjenti b'limfoma taċ-ċelluli B CD19-negattivi u lewkimja rikaduta, iżda fil-proċess ta' immunoterapija sekwenzjali, rikaduta tar-reżistenza għall-mediċina kkawżata minn regolazzjoni baxxa ta' Instabet ukoll espressjoni ta' CD22 minn ċelluli tat-tumur. Għalhekk, l-iżvilupp ta 'ċelluli CAR-T li simultanjament jimmiraw CD19 u CD22 jista' jkollu potenzjal akbar biex jegħlbu r-reżistenza għall-mediċina. Minbarra l-għażla ta 'antiġeni fil-mira, huwa wkoll meħtieġ li tingħata attenzjoni lill-mekkaniżmu preċiż ta' CAR-T fil-formazzjoni ta 'sinapsi immuni u l-qtil ta' ċelloli fil-mira. TCRs naturali jistgħu jirrikonoxxu antiġeni f'livelli ta 'densità baxxa, u huwa spekulat li differenzi strutturali bejn CARs u TCRs naturali jistgħu jwasslu għal differenzi fir-rekwiżiti għad-densità ta' rikonoxximent tal-antiġeni.

Ta 'min jinnota li mhux il-pazjenti kollha li rkadew huma CD19 negattivi, li juri wkoll li minbarra t-telf tal-antiġen u l-ħarba taċ-ċelluli tat-tumur, hemm fatturi oħra li jwasslu għal reżistenza CAR-T. Il-kawża ewlenija ta 'rikaduta pożittiva għall-antiġenu hija l-eżawriment taċ-ċelluli CAR-T, li jwassal għal tnaqqis tal-awtofunzjoni minħabba espożizzjoni fit-tul għal livelli għoljin ta' antiġen. Ġeneralment huwa maħsub li t-transduzzjoni tas-sinjal indipendenti mill-antiġen taċ-ċelloli CAR-T hija relatata mill-qrib mal-eżawriment taċ-ċelluli, u l-piż għoli tat-tumur huwa wkoll fattur importanti li jwassal għal eżawriment. It-teknoloġija tal-imblokk tal-punt ta 'kontroll immuni flimkien ma' ċelluli CAR-T għandha wegħda biex tegħleb l-eżawriment u ttejjeb l-effettitur u l-persistenza taċ-ċelluli CAR-T. Il-koespressjoni tar-riċettur IL-7 ma' CAR tista' tevita l-istimulazzjoni ta' ċelluli "fil-qrib" u ttejjeb il-kapaċità proliferattiva, l-attività kontra t-tumur u l-persistenza taċ-ċelluli CAR-T. L-istruttura CAR taċ-ċelluli CAR-T fiha komponenti mhux awtonomi, li huma immunoġeniċi u jistgħu jinduċu immunità umorali u ċellulari anti-CAR, u b'hekk tillimita l-effikaċja u taffettwa l-kapaċità proliferattiva u l-persistenza taċ-ċelluli CAR-T. Studji wrew li 5 fil-mija tal-pazjenti DLBCL u 36.7 fil-mija tal-pazjenti B-ALL għandhom livelli miżjuda ta 'antikorpi anti-CAR wara infużjoni ta' ċelluli CAR-T. It-trattament minn qabel ta 'cyclophosphamide jew fludarabine huwa meqjus bħala fattur importanti fit-tnaqqis tal-grad ta' immunità ċellulari anti-CAR. L-iżvilupp ta 'prodotti CAR-T umanizzati huwa mezz effettiv biex issolvi din il-problema, li wriet effikaċja dejjiema f'B-ALL rekaduta/refrattarja fi provi kliniċi. Id-dominju ko-stimulatorju fl-istruttura CAR jaffettwa wkoll il-persistenza taċ-ċelluli CAR-T. Ġeneralment huwa maħsub li meta mqabbla mad-dominju ta' 4-1BB costimulatory, CD28-CAS derivati ​​huma inqas durabbli u aktar suxxettibbli għall-eżawriment; billi ċ-ċelluli CAR-T li fihom il-{31}}dominju kostimulattiv BB għandhom livelli ogħla ta' proteini anti-apoptotiċi BCL-2 u BCL-XL, u jista' jkun hemm mekkaniżmu li jippromwovi l-formazzjoni ta' ċelluli T tal-fenotip tal-memorja. Titjib bħalissa fi provi kliniċi jinkludu l-użu ta 'ċelluli artifiċjali li jippreżentaw l-antiġeni biex jattivaw ċelluli CAR-T, regolazzjoni ta' fenotipi CAR-T, u inibizzjoni magħquda ta 'molekuli ta' checkpoint immuni. Ir-riżultati ta’ min jistenna bil-ħerqa.

Cistanche jista 'jipprevjeni b'mod effettiv it-tumur u l-kanċer