Applikazzjoni tat-trab tal-werqa tal-brokkoli fil-ħobż mingħajr glutina: approċċ innovattiv biex ittejjeb il-potenzal bijoattiv u l-kwalità teknoloġika tagħha

Astratt:Meta mqabbel mal-ħobż konvenzjonali, il-ħobż mingħajr glutina (GF) juri ħafna wara l-ħamidifetti u valur nutrittiv u funzjonali aktar baxx. Għalkemm il-weraq tal-brokkoli huma pperċepiti bħalaprodotti ta 'skart, huma kkaratterizzati minn kontenut għoli ta' nutrijenti u komposti bijoattivi.L-istudju preżenti evalwa l-valur nutrittiv,kwalità teknoloġika, proprjetajiet antiossidanti, u attività inibitorjakontra l-formazzjoni ta 'prodotti finali glycation avvanzati (AGEs) ta' GF arrikkitbi trab tal-weraq tal-brokkoli (BLP). Meta mqabbel mal-kontroll, ħobż mingħajr glutina b'BLP (GFB) kienikkaratterizzat b'mod sinifikanti (p < 0.05) higher content of nutrients (proteins and minerals), as well bħala volum speċifiku mtejba u telf bake. Madankollu, dak li jeħtieġ li jiġi enfasizzat huwa li BLPb'mod sinifikanti (p < 0.05) improved thepotenzjal antiossidantuattività kontra l-AGEtal-GFB. Il miksubriżultati jindikaw li BLP jista 'jintuża b'suċċess bħala komponent ta' prodotti moħmija mingħajr glutina. Filkonklużjoni, il-GFB żviluppata ġdida bi proprjetajiet teknoloġiċi u funzjonali mtejba hija anprodott tal-forn b’valur miżjud li jista’ jipprovdi benefiċċji għas-saħħa lis-suġġetti fuq dieta mingħajr glutina.

Kliem ewlieni:Brassica; prodott sekondarju tal-ħxejjex; proprjetajiet teknoloġiċi; Parametri tan-nisġa;antiossidantattività; anti-etajiet; dieta mingħajr glutina; mard coeliac

Ikklikkja Hawnhekk biex tikseb aktar informazzjoni dwar il-proprjetajiet antiossidanti ta 'cistanche

1. Introduzzjoni

Il-ħobż huwa ikel bażiku li huwa volontarjament ikkunsmat mad-dinja kollha kuljum [1]. Madankollu, għal xi individwi li jsofru minn mard coeliac u disturbi oħra relatati mal-glutina(allerġija tal-qamħ u sensittività għall-glutina mhux coeliac), il-konsum ta 'konvenzjonaliħobż tal-qamħ u prodotti oħra li fihom il-glutina huma ta' ħsara [2]. F'dawk il-pazjenti, il-proteini tal-glutina tad-dieta jew, speċifikament, il-frazzjoni gliadin tal-qamħ u l-prolamini minnix-xgħir (hordeins) u s-segala (skalar) jistgħu jwasslu għal riskji u kumplikazzjonijiet ta' ħsara għas-saħħa.Illum il-ġurnata, l-uniku trattament disponibbli għal disturbi relatati mal-glutina huwa l-aderenza ma 'adieta mingħajr glutina.

Il-produzzjoni tal-ħobż mingħajr glutina huwa proċess li jvarja sostanzjalment minn dak konvenzjonalibreadmaking-b'mod partikolari, fl-ingredjenti użati, batter imġieba reoloġika, u ġeneralikwalità tal-prodott finali [3]. Minħabba n-nuqqas tal-kontinwu tridimensjonalinetwerk glutina li huwa responsabbli għall-proprjetajiet reoloġiċi tal-għaġina u l-l-iżvilupp ta' ħobż ta' kwalità għolja, il-produzzjoni tal-ħobż mingħajr glutina hija ta' sfida [4]. Għalhekk,il-produzzjoni tal-ħobż mingħajr glutina (GF) teħtieġ formulazzjonijiet kumplessi, li jikkonsistu minn ataħlita ta 'ingredjenti bażiċi mhux glutina u addittivi varji li jimitaw il-viskoelastikuproprjetajiet tal-glutina [5], kif ukoll soluzzjonijiet teknoloġiċi diversi. Meta mqabbla ma 'ħobż konvenzjonali, GF juri ħafna difetti wara l-ħami, bħal dehra mhux attraenti(wiċċ irregolari tal-qoxra u kulur ċar), sensazzjoni u togħma fqira tal-ħalq, u xkaffa iqsarħajja. Matul l-aħħar għaxar snin, saru avvanzi konsiderevoli biex titjieb it-teknoloġikuu l-kwalità sensorja tal-GF u biex ittawwal il-ħajja fuq l-ixkaffa tagħha [6]. Madankollu, reċentement, qed jikbernumru ta' konsumaturi huma interessati fi prodotti mingħajr glutina kkaratterizzati minn imtejbakwalità nutrittiva u li tippromwovi s-saħħa.

Bosta studji wrew li l-prodotti sekondarji bbażati fuq il-frott u l-ħxejjexfihom ammont sostanzjali ta 'nutrijenti (proteini, vitamini, u minerali), kif ukollkomposti funzjonali (fibra tad-dieta) u bijoattivi (karotenojdi, komposti fenoliċi, uglukosinolati) [7]. Fosthom, il-fitokimiċi juru attivitajiet bijoloġiċi importanti,bħal proprjetajiet anti-ossidanti u antimikrobiċi, u għalhekk jista 'jkollhom rwol fil-prevenzjoniu t-trattament ta' mard uman li ma jitteħidx. L-effetti ta 'benefiċċju tal-polifenoliu l-glukosinolat derivattiv fuq l-organiżmu, inkluża l-prevenzjoni tamard taċ-ċiviltà bħal patoloġiji kardjovaskulari, dijabete tat-tip 2, xi tipi takanċer, u mard newrodeġenerattiv, ġew diskussi ħafna fil-letteratura [8–10]. Għaldik ir-raġuni, in-numru dejjem jikber ta 'riċerka jiffoka fuq l-applikazzjoni ta' prodotti sekondarjifi prodotti mingħajr glutina bħala sorsi bi prezz baxx ta’ nutrijenti u komposti bijoattivi [11–13]. Riċentement, Littardi et al. [14] evalwat l-impatt taż-żieda ta 'parċmina tal-kafè mitħunlil GF u indika li dan il-prodott sekondarju kien kapaċi jtejjeb il-kulur ta’ danprodott tal-forn flimkien ma 'titjib sinifikanti fil-kapaċità antiossidant ustabbiltà ossidattiva.

Il-Brassicaceaefamilja tinkludi ħafna ħxejjex komunement ikkunsmati madwar id-dinja,mhux biss tradizzjonalment għan-nutrizzjoni iżda, aktar importanti, għall-proprjetajiet tagħhom li jippromwovu s-saħħa [15]. Fosthom, brokkoli (Brassica oleraceavar.korsiv) kisbet konsiderevolirilevanza fl-aħħar ftit snin bħala ikel "terapewtiku", peress li fih farmakoloġikamentsustanzi attivi [16,17]. Bosta studji ffukaw fuq florets tal-brokkoli, lijirrappreżentaw biss 15 fil-mija tal-bijomassa totali tal-ajru [18]. Filwaqt li konna interessati fil-brokkoliprodotti sekondarji—b'mod partikolari, weraq—li rari jintużaw għall-ikel. Weraq tal-brokkoli,simili għall-florets, huma kkaratterizzati minn kontenut għoli ta’ nutrijenti (proteini, vitamina Ċ,minerali, u oligoelementi) u komposti bijoattivi (glukosinolati, aċidi fenoliċi,u flavonoids) [19,20]. Għalkemm meqjusa bħala prodott ta' skart, jistgħu jiġu kkunsmatibħala prodott frisk ta' valur jew bħala sorsi ta' fitonutrijenti, li jippermettulhom jiksbu valur miżjudprodotti moħmija [21,22]. Għalhekk, il-valorizzazzjoni tal-prodotti sekondarji tal-brokkoli u l-applikazzjoni tagħhomkif jista' l-ingredjent ta' prodotti tal-forn mingħajr glutina bi proprjetajiet nutraċewtiċi potenzjalitkun waħda mill-istrateġiji alternattivi biex tnaqqas il-ħela tal-ikel [23,24]. L-istudju preżenti investigatl-adegwatezza u l-funzjonalità tat-trab tal-weraq tal-brokkoli (BLP) bħala komponent GFibbażata fuq analiżi tal-valur nutrittiv, il-kwalità teknoloġika, il-proprjetajiet antiossidanti,u attività inibitorja kontra l-formazzjoni ta' prodotti finali ta' glikazzjoni avvanzata (AGEs)tal-ħobż żviluppat mingħajr glutina arrikkit b'BLP (GFB).

2. Materjali u Metodi

2.1. Preparazzjoni ta' Trab tal-werqa tal-brokkoli

Ġie ppreparat BLP kif deskritt qabel [24]. Fil-qosor, weraq bla ħsara ta 'brokkoli matur (Brassica oleraceaL. var.korsiv) mogħtija mill-kumpanija GEMIX (Olsztyn,Polonja) ġew imnaddfa mir-residwi tal-ħamrija, maħsula bl-ilma, imbagħad imbajda ftit (1 min) f'ilma sħun biex jinattiva l-enzimi u jnaqqas it-tagħbija mikrobjali. Wara, petioles umidribs prinċipali tneħħew, u xfafar tal-weraq ġew imnixxfa bil-friża peress li huwa metodu lijippreserva l-valur nutrittiv u bijoloġiku u l-kulur tal-materja prima [25]. Nixxefweraq ġew mitħun u mgħarbel biex jinkiseb trab omoġenju (daqs tal-partiċelliInqas minn jew ugwali għal0.60 mm).Il-BLP miksub ġie ppakkjat f'kaxxa tal-plastik issiġillata u miżmum fi friġġ għal aktaranaliżi u applikazzjoni fil-formulazzjoni GF sperimentali.

2.2. Preparazzjoni ta' Ħobż Sperimentali Ħieles Glutina

F'dan l-istudju, formula GF ottimizzata [26] intuża bħala kontroll (GFC). Lamtu tal-qamħirrum(HORTIMEX, Konin, Polonja), lamtu tal-patata (PPZ "Trzemeszno" Sp. Z oo, Trzemeszno,Polonja), zokkor, ħmira friska (Lesaffre Polska SA, Wołczyn, Polonja), pektin (E 440(i), ZPOWPektowin, Jasło, il-Polonja), żejt tal-kolza "Kujawski" (ZT "Kruszwica" SA, KruszwicaIl-Polonja), il-melħ u l-ilma kienu l-ingredjenti ewlenin tal-GFC (Tabella1). Preċedentement ikkaratterizzatBLP [24] ġiet inkorporata fil-GFB billi ssostitwixxa 5 fil-mija (w/w) tal-lamtu tal-qamħirrum fil-Formula GFC. Dan il-livell ta’ sostituzzjoni kien ibbażat fuq studju preliminari li wera li5 fil-mija kien il-livell ta 'sostituzzjoni aċċettabbli li ma affettwax il-proprjetajiet sensorji tal-ħobż,billi l-GFB b'7 fil-mija BLP kellu togħma qawwija wisq tal-kaboċċi (dejta mhux murija).

2.3. Karatteristiċi tal-Ħobż Sperimentali Ħieles Glutina

2.3.1. Determinazzjoni ta' Kompożizzjoni Kimika Prossimili u Valur ta' Enerġija

Il-kompożizzjoni kimika bażika ġiet iddeterminata f'GFs imnixxfa bil-friża skond il-metodu standard [27]: il-kontenut ta' umdità ġie analizzat bl-użu tal-metodu tat-tnixxif (AOAC925.10), il-kontenut tal-proteini ġie ddeterminat bil-metodu Kjeldahl (N× 6.25 għan-nitroġenugħall-konverżjoni tal-proteini) (AOAC 979.09), u kontenut ta’ xaħam bl-użu ta’ estrazzjoni Soxhlet b’hexane(AOAC 923.03); l-irmied totali ġie determinat bl-użu tal-metodu gravimetriku billi jinħaraqmuffle forn f'550◦C għal 10 sigħat (AOAC 923.03). Il-kontenut totali ta 'karboidrati kienikkalkulat billi jitnaqqsu l-valuri tal-kontenut ta’ umdità, proteina, xaħam u rmied minn 100.Il-valuri tal-enerġija (kJ) ġew ikkalkulati billi n-numru ta 'makronutrijenti jiġi mmultiplikat biil-fatturi ta' konverżjoni korrispondenti (17 kJ/g għall-proteina, 37 kJ/g għax-xaħam, u 17 kJ/g għalkarboidrati) [28]. Il-fattur ta' konverżjoni għall-kalkolu tal-kaloriji huwa 1 kJ=0.239 kcal.

2.3.2. Determinazzjoni tal-Parametri Fiżiċi

Il-piż tal-GFs ġie evalwat bl-użu ta' bilanċ diġitali bi preċiżjoni ta' 0.01-g. Il-il-volum tal-ħobża ġie ddeterminat bl-użu ta’ metodu standard modifikat ta’ spostament taż-żerriegħa tal-kolza, inliema żerriegħa tal-millieġ intużaw minflok iż-żerriegħa tal-kolza. Ġie kkalkulat il-volum speċifiku (SV).bħala volum tal-ħobża diviż bil-piż tiegħu. Id-densità (D) ġiet ikkalkulata bħala piż tal-ħobża diviżbil-volum tagħha. It-telf tal-bake ġie kkalkulat kif indikat fl-Ekwazzjoni (1).

fejn:

a—il-piż inizjali tal-batter qabel il-ħami (g), u

b—il-piż tal-GFs moħmija u mkessħa (g).

Il-kulur tal-qoxra u l-frak tal-GFs ġie evalwat bl-użu ta’ HunterLab ColorFlex(Hunter Associates Laboratory, Inc, Reston, VA, USA). Il-kulur tal-qoxra ġie determinat fil-punt tan-nofs tal-quċċata tal-qoxra tal-ħobża, filwaqt li l-kulur tal-frak ġie analizzat fin-nofspunt tal-porzjon ċentrali 2-ċm. Il-kejl sar permezz ta' dijametru ta' 3-ċmdijaframma li jkun fiha ħġieġ ottiku. Il-kulur kien espress skondis-sistema CIELab, u l-parametri determinati kienu: ħeffa (L* = 0 (iswed) uL* = 100 (abjad) u komponenti kromatiċi:a* (−a* = ħdura u plusa* = ħmura) ub* (−b* = blu u plusb* = isfar). Il-valuri kienu l-medja ta' mill-inqas disa' repliki.

Biex tippreżenta d-dehra ta 'frak u qoxra ta' skans GFC u GFB eżemplari tal-eżempju porzjon ċentrali ta 'kull sperimentali, GF sar bl-użu ta' skaner flatbed (EpsonPerfection V200 Photo) appoġġjat minn Stampi tas-Software Epson Creativity Suite (Figura1). 

Figura 1.Id-dehra viżwali ta 'frak u qoxra ta' kontroll eżemplari tal-ħobż mingħajr glutina (A,C) u ħobż bla glutina bi trab tal-weraq tal-brokkoli (B,D). 

2.3.3. Evalwazzjoni ta' Proprjetajiet Texturali

Il-profil tan-nisġa (test TPA) ta' frisk (2 sigħat) u maħżun (għal 24 u 72 siegħa wara l-ħami)frak ta 'GFs ġew analizzati bl-użu ta' TA.HD Plus Texture Analyzer (Stable Micro SystemsLtd., Godalming, UK) hija mgħammra b'ċellula tat-tagħbija ta' 30-kg. Il-flieli tal-ħobż tan-nofs ta' 25-mmħxuna għaddiet minn ċiklu ta 'kompressjoni doppja sa 40 fil-mija deformazzjoni tal-għoli oriġinali tagħhomb'diska tal-kompressjoni tal-aluminju ta' 35-mm ċatt (sonda P/35). Il magħżulais-settings kienu kif ġej: veloċità ta' qabel it-test/test/wara t-test, 2.0 mm/s, ħin ta' rilassament, 5 s, forza,10 g, u grillu, mod auto. Kull porzjon kienet ikkompressata darbtejn biex tagħti tessut ta 'żewġ gidmakurva tal-profil [29], li minnha nkisbu l-parametri tat-tessut li ġejjin: ebusija,springiness, chewiness, koeżjoni, u reżiljenza, kif ikkalkulat mis-softwer tal-tetrametru. Sitt repliki ġew analizzati għal kull tip ta 'GF frisk u maħżun.

2.4. Evalwazzjoni tal-Kapaċità Antiossidanti ta' BLP u GFs

2.4.1. Determinazzjoni tal-Kontenut Fenoliku Totali

Il-kontenut fenoliku totali (TPC) ġie determinat bl-użu tal-Folin–Ciocalteureaġent ibbażat fuq il-metodu deskritt qabel minn Horszwald u Andlauer [30]. Estratti tal-metanol inkisbu minn 200 mg ta' GF imnixxef bil-friża u 100 mg ta' BLP b'1mL ta' 67 fil-mija metanol. Il-kampjuni ġew soġġetti għal vibrazzjoni ultrasonika (30 s) u vortexing(30 s), imbagħad ġew ċentrifugati għal 10 min fi 13,000 rpm f'4◦C. Il-pass ta 'hawn fuq ġie ripetutħames darbiet, u s-supernatanti nġabru fi flixkun tal-kejl ta' 5-mL. Metanolestratti ġew ippreparati fi tliet kopji. L-assaġġ TPC sar f'mikroplates, ualikwoti ta’ 15µL ta 'estratti tal-metanol tqiegħdu f'bjar tal-mikroplate. Sussegwentement,250 µL tar-reaġent Folin–Ciocalteu (preċedentement dilwit bl-ilma 1:15,v/v) ġie miżjud,u t-taħlita ġiet inkubata għal 10 min fid-dlam f'temperatura tal-kamra. Imbagħad, 25µL ta20 fil-mija karbonat tas-sodju ġie miżjud ma 'kull bir, u t-taħlita ġiet inkubata għal 20 min.Il-mikroplate tħawwad awtomatikament qabel il-qari, u tkejjel l-assorbimentfiλ = 755 nm mal-qarrej tal-pjanċa Infinite M1000 PRO (Tecan Group AG, Männedorf,l-Isvizzera). L-aċidu galliku ntuża għall-kalibrazzjoni standard ({{0}}.03–1.0 mg L−1 ), u ilir-riżultati ġew espressi f'mg ta' ekwivalenti ta' aċidu galliku (GAE) għal kull gramma waħda ta' materja niexfa(g DM) ta' GFs jew BLP.

2.4.2. Trolox Kapaċità Antiossidanti Ekwivalenti minn ABTS Assay

Il-Kapaċità Antiossidanti Ekwivalenti Trolox (TEAC) mill-2,20 -Casino-bis (3-ethylbenzenel-assaġġ ta' thiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) sar kif deskritt minn Horszwald uAndlauer [30]. Biex tikseb katjoni radikali ABTS (ABTS· plus) soluzzjoni b'assorbenzavalur ta' 0.70± {{0}}.02 f'734 nm, 10 mL ta' 7-mmoL/L soluzzjoni milwiema ta' ABTS u 0.5 mLta' 51.4-mmoL/L−1 soluzzjoni milwiema ta’ K2S2O4 kienu mħallta, imbagħad maħżuna fid-dlam fitemperatura tal-kamra għal 16-il siegħa. Sussegwentement, l-ABTS· plussoluzzjoni (1480µL) ġie miżjud ma '20µL taestratti tal-metanol ta' BLP u GF. Għall-analiżi fil-mikroplates, alikwoti ta’ 10µL tal-kampjun (l-estratti tal-metanol ta’ BLP jew GF ippreparati kif deskritt hawn fuq għall-assaġġ TPC),standards, jew blanks tqiegħdu fil-bjar tal-mikroplate. Ir-reazzjoni u l-kejl tal-ħininbdew maż-żieda ta’ 270µL tal-ABTS· plussoluzzjoni. Ir-reazzjoni saretbarra fit-30◦C fid-dlam għal 6 min. Wara r-reazzjoni, l-assorbiment tkejjel f'734 nmb'qarrej tal-mikroplate. Trolox intuża għal kalibrazzjonijiet standard (0.25–1000µmol/L−1 ), u r-riżultati ġew espressi fiµmol Trolox g−1 DM ta' GFs jew BLP.

2.4.3. Trolox Kapaċità Antiossidanti Ekwivalenti mill-Assaġġ DPPH

Twettaq l-assaġġ ta' scavenging radikali TEAC minn 2-diphenyl-picryl-hydroxyl (DPPH)skond Horszwald u Andlauer [30]. Biex tikseb is-soluzzjoni DPPH li jassorbufil-medda minn 0.95 sa 1.10 atλ = 517 nm, 10 mg ta 'DPPH ġie maħlul f'250 mL ta'80 fil-mija metanol. Is-soluzzjoni DPPH ġiet ippreparata friska qabel l-analiżi. Għall-analiżi,20 µL ta’ estratti tal-metanol ta’ BLP u GF (deskritti fit-Taqsima2.4.1), blanks jew standardstpoġġew fil-bjar tal-mikroplate, u mbagħad, 300µL ta' DPPH· soluzzjoni ġiet miżjuda. Il-reazzjoni saret f'temperatura ambjentali għal 30 min fid-dlam. Trolox intuża għalkalibrazzjoni standard ({{0}}.005–0.75 mM), u r-riżultati miksuba ġew espressi bħalaµmol TroloxEkwivalenti (TE) għal kull g DM ta' GFs jew BLP.

2.4.4. Assaġġ tal-fotokemiluminixxenza

Twettaq assaġġ ta' photo chemiluminescence (PCL) kif deskritt minn Zieli 'nski,Zieli ´nska, u Kostyra [31]. Dan il-metodu ntuża biex titkejjel il-kapaċità antiossidant ta 'BLP u estratti GF imnixxef bil-friża kontra radikali anjoniċi superossidi ġġenerati mill-fotosensibilizzatur tal-luminol taħt espożizzjoni għal dawl UV fl-apparat Photochem (AnalytikJena, Leipzig, il-Ġermanja). L-attività antiossidant ġiet analizzata b'ACW (hydrophilickundizzjoni) u kits ACL (kondizzjoni lipofilika) skont il-protokolli tal-manifattur.Għal ACW, kampjun ta' 50-mg ġie estratt b'1 mL ta' ilma, u għal ACL—kampjun ta' 50-mgġie estratt b'1 mL tat-taħlita MeOH u hexane (4:1;v/v). Il-konċentrazzjoni ta 'is-soluzzjoni tal-estratt ġiet aġġustata biex tiżgura li l-luminexxenza ġġenerata kienet ġewwail-firxa tal-kurva standard. Il-kapaċità antiossidant ġiet ikkalkulata billi tqabbel il-ħin ta 'dewmien tal-kampjun bil-kurva standard Trolox, u kien espress fiµmolTrolox g−1 DM.

2.5. Evalwazzjoni ta' Attività ta' Inibizzjoni Kontra AGEs

L-attività ta' inibizzjoni kontra prodotti finali ta' glikazzjoni avvanzata (AGEs) ġiet ivvalutatabl-użu ta tnejnin vitrosistemi mudell: albumina tas-serum bovin (BSA)-glukosju uBSA-methylglyoxal (MGO). Il-proċeduri ta 'estrazzjoni u inkubazzjoni ġew adottati minnSzawara-Nowak et al. [32]. Fil-qosor, 150 mg ta 'kampjun imnixxef bil-friża ġie estratt b'67 fil-mijametanol billi tħawwad f'25◦Ċ għal 40 minuta bl-użu ta’ thermomixer (Thermomixer, Eppendorf,Polonja). Is-supernatant miksub wara ċ-ċentrifugazzjoni ġie evaporat sa nixfataħt nitroġenu, u r-residwu niexef ġie maħlul f'buffer tal-fosfat (0.1 M, pH 7.4).0.5 mL tas-soluzzjoni miksuba ġiet inkubata b'1 mL tat-taħlita li fiha BSA(10 mg/mL) u sodium azide (0.1 mg/mL) f'buffer tal-fosfat (0.1 M, pH 7.4) uxieraq D-glucose jew MGO. Għall-kejl, 250µl tat-taħlita ta' reazzjonitqiegħed fil-bjar (microplate 96-bjar, iswed, Porvair). L-intensità fluworexxenti taλeċċitazzjoni330 nm uλemissjoni410 nm (BSA-glukożju), uλeċċitazzjoni340 nm uλemissjoniĠew imkejla 420 nm (BSA-MGO). Għal kull estratt, it-test sar fi tliet kopji. A1 mM ta 'aminoguanidine intuża bħala kontroll pożittiv. Ir-riżultati ġew ippreżentati bħala apersentaġġ ta 'attività inibitorja ta' AGEs.2.6. Analiżi StatistikaSakemm ma jingħadx mod ieħor, id-dejta rrappurtata fit-tabelli kollha hija valuri medji u standarddevjazzjonijiet ta' osservazzjonijiet triplikati. Ġeneralment, id-differenzi bejn sperimentaliGFs ġew analizzati b'unpairedt-test bil-korrezzjoni ta' Weich (p < 0.05), except for id-differenzi bejn il-GFs ikkawżati mill-ħin tal-ħażna li ġie analizzat bil-one-wayANOVA, bl-użu ta' GraphPad Prism verżjoni 8.0.0 għall-Windows, GraphPad Software (SanDiego, CA, l-Istati Uniti).