Ipotermija Indotta minn Oxcarbazepine Wara li Iskemija Transitorja Forebrain Teżerċita Neuroprotezzjoni Terapewtika Permezz ta' Potenzjal ta' Riċettur Transitorju Vanilloid Tip 1 U 4 f'Gerbils Parti 3

4. Materjali u Metodi

4.1. Annimali Sperimentali

Gerbils maskili (numru totali=252) intużaw fl-età ta' 6 xhur (piż tal-ġisem, 63–78 g). Il-gerbils ġew imrobbija fiċ-Ċentru tal-Annimali Sperimentali tal-Università Nazzjonali ta 'Kangwon (Chuncheon, Korea).

Gerbils huma annimali żgħar ħelu ħafna. Jgħixu f'żoni tad-deżert, huma tajbin biex iħaffru għerien, u għandhom instinti qawwija biex jaħżnu u jillokalizzaw l-ikel. Fost dawn il-ġuvini żgħar, il-gerbils maskili għandhom memorja partikolarment tajba, li ġġiegħel lin-nies ikunu jridu jkunu jafu s-sigrieti tagħhom.

L-ewwel, meta gerbils maskili jfittxu l-ikel, huma jużaw serje ta 'sinjali bħal postijiet familjari u terren biex jiddeterminaw id-direzzjoni. Permezz ta 'osservazzjoni u prattika fit-tul, huma stabbilixxew is-"sistema ta' informazzjoni ġeografika" tagħhom stess. B'kuntrast, il-gerbils femminili għandhom memorja agħar għal dawn is-sinjali, speċjalment f'ambjent li qed jinbidel kontinwament.

It-tieni nett, gerbils maskili juru wkoll memorja qawwija meta jiġġieldu ma 'għedewwa naturali. Skont ix-xjentisti, meta l-gerbils ikunu mhedda, malajr jidħlu fil-ħofra u jippruvaw jaħarbu. Iżda meta jiffaċċjaw l-istess theddida, gerbils maskili jiftakru l-mod ta 'attakk ta' għedewwa naturali u jevitawhom, u jżidu ċ-ċansijiet tagħhom ta 'sopravivenza.

Fl-aħħarnett, il-memorja tal-gerbils maskili tinsab ukoll fl-imġieba soċjali tagħhom ma 'xulxin. Kull gerbilli għandu r-riħa unika tiegħu. Meta jiltaqgħu ma 'gerbils oħra, huma se jużaw is-sens tax-xamm tagħhom biex jidentifikaw l-identità u l-istatus ta' xulxin. Din il-kapaċità tal-memorja mhux biss tippermetti lill-gerbils jistabbilixxu konnessjoni soċjali relattivament stabbli iżda hija wkoll garanzija importanti għar-riproduzzjoni tagħhom.

Fil-qosor, ir-relazzjoni bejn il-gerbils maskili u l-memorja hija inseparabbli. Fil-proċess li jfittxu s-sopravivenza u r-riproduzzjoni fin-natura, jiddependu fuq il-memorja qawwija tagħhom biex jadattaw kontinwament għall-ambjent u jtejbu lilhom infushom. Bħala bnedmin, għandna nitgħallmu minn dawn il-ġuvini ċkejkna u kontinwament nimxu l-memorja tagħna biex naddattaw aħjar għal din id-dinja li dejjem tinbidel. Wieħed jista 'jara li għandna bżonn intejbu l-memorja tagħna, u Cistanche jista' jtejjeb b'mod sinifikanti l-memorja minħabba li jista 'wkoll jirregola l-bilanċ ta' newrotrasmettituri, bħal żieda fil-livelli ta 'acetylcholine u fatturi ta' tkabbir, li huma importanti ħafna għall-memorja u t-tagħlim. Barra minn hekk, Cistanche jista 'wkoll itejjeb il-fluss tad-demm u jippromwovi l-kunsinna tal-ossiġnu, li jista' jiżgura li l-moħħ jikseb biżżejjed nutrizzjoni u enerġija, u b'hekk itejjeb il-vitalità u r-reżistenza tal-moħħ.

Ikklikkja Know biex iżżid il-qawwa tal-memorja

Għal dan l-istudju, il-protokoll sperimentali ġie approvat (nru ta' approvazzjoni KW-200113-1; data ta' approvazzjoni, 18 ta' Frar 2020) mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali.

Il-protokoll ta 'riċerka aderixxa mal-linji gwida ssuġġeriti fil-"Liġijiet u Politiki Internazzjonali kurrenti" tal-Gwida għall-Kura u l-Użu ta' Annimali tal-Laboratorju ppubblikati minn The National Academies Press (8th Ed., 2011).

4.2. Gruppi Sperimentali, Induzzjoni ta 'tFI, u Trattamenti HyT u OXC

Biex jiġu ppruvati l-effetti protettivi ta' OXC kontra korriment iskemiku wara FI fil-gerbils, il-gerbils ġew maqsuma f'sitt gruppi: (1) grupp ta' vettura finta + (n=24); (2) grupp ta 'tFI + vettura (n {{5) }}); (3) grupp sham+HyT (n=24); (4) grupp tFI+HyT (n=60);(5) grupp sham+OXC (200 mg/kg) (n=24); u (6) grupp tFI+OXC (n=60).

Seba' u ħames gerbils fit-tliet gruppi tFI intużaw għall-analiżi tal-Western blot u l-eżami istoloġiku, rispettivament, fi 30 min, 12-il siegħa, ġurnata, jumejn, u 4 ijiem wara l-operazzjoni tFI, u fit-tliet gruppi sham, sebgħa u ħamsa. gerbils intużaw f'30 min u 4 ijiem wara l-operazzjoni finta biex jimminimizzaw in-numri. F'dan l-esperiment, tFI ġie żviluppat kif deskritt qabel [34].

Fil-qosor, thegerbils ġew anestetizzati b'2.5% isoflurane (fi 32% ossiġnu u 68% ossidu nitruż). Taħt anestesija, iż-żewġ arterji karotidi komuni ġew iżolati mill-karotide sheathand occluded bi klipps anewriżmi (Yasargil FE 723K) (Aesculap, Ġermanja, ) għal ħames minuti.

Il-waqfien perfett tal-provvista tad-demm lill-moħħ ġie kkonfermat permezz tal-osservazzjoni tal-fluss tad-demm arterjali fiż-żewġ arterji tar-retina (fergħat ta 'karotidarterji interni) bl-użu ta' oftalmoskopju (HEINE K180®) minn Heine Optotechnik (Herrsching, il-Ġermanja).

It-temperatura tal-ġisem qabel u waqt il-kirurġija fil-gruppi kollha kienet ikkontrollata f'normotermija (37 ± 0.2 ◦C) bl-użu ta 'kutra termometrika. Wara ħames minuti ta' okklużjoni, il-klipps tneħħew.

F'dan l-istudju, saret operazzjoni fittizja billi suġġetthom għall-istess kirurġija tFI mingħajr l-okklużjoni tal-arterji karotidi komuni. HyT fiż-żewġ gruppi sham+HyT u tFI+HyT kien ikkontrollat ​​(simili għall-bidla fit-temperatura tal-ġisem fit-tFI+ grupp OXC) billi tkessaħ il-ġisem kollu b'pakkett tas-silġ għal sitt sigħat.

It-temperatura tal-ġisem taż-żewġ gruppi sham + OXC u tFI + OXC ġiet irreġistrata għal sitt sigħat wara injezzjoni intraperitoneali immedjata ta '200 mg/kg OXC (Sigma–Aldrich, St. Louis, MO, USA) wara l-operazzjoni tFI.

Id-dożaġġ ta 'OXC intgħażlet abbażi ta' studju preċedenti li rrapporta li 200 mg/kg OXC ipproteġi b'mod effettiv kontra l-mewt taċ-ċelluli fil-moħħ wara l-[36]. Biex tirreġistra l-bidla fit-temperatura tal-ġisem, it-temperatura tal-ġisem kienet imkejla fir-rektum kull siegħa wara tFI, aktar minn perjodu ta' 6 sigħat, taħt temperatura ambjentali tal-kamra (madwar 22 ◦C).

Il-gerbils irċevew ħin ta 'rkupru ta' erbat ijiem wara tFI minħabba li ċ-ċelloli piramidali li jinsabu fir-reġjun CA1 ta 'l-ippocampal jibdew imutu f'erba' ijiem wara tFI [30,34,62].

4.3. Test SMA

It-test SMA sar biex jeżamina l-bidliet fl-iperattività fil-gruppi kollha. Fil-qosor, kif deskritt qabel [63], it-test SMA sar f'Jum 1 wara tFI peress li l-attività lokomotriċi tilħaq l-ogħla punt f'Jum 1 wara korriment iskemiku wara tFI.

Il-gerbils tal-gruppi kollha rċevew adattament ambjentali għal sagħtejn, u tpoġġew f'gaġġa miftuħa (wisa ', 44 cm; tul, 44 cm; għoli, 30) miksuba minn Ugo Basile SRL (Gemonio, l-Italja), li fiha żewġ paralleli orizzontali Travi infra-aħmar 4 × 8 'l barra mill-art ġew installati, għal siegħa. SMA ġie rreġistrat bl-użu ta 'Photobeam Activity System-Home Cagefrom San Diego Instruments (San Diego, CA, USA).

Moviment (trajettorja u distanza totali vvjaġġata) ġie skopert permezz tal-interruzzjoni tal-firxa ta 'raġġi infra-aħmar prodotti minn fotoċelluli.

SMA ġiet immonitorjata kontinwament għal siegħa, u d-dejta nġabret bl-użu ta 'analizzatur AMB minn IPC Electronics (Cumbria, UK).

Il-ġbir tad-dejta inbeda 15-il minuta wara l-abitazzjoni fil-gaġġa tal-post miftuħ. Fl-aħħarnett, ir-riżultati miksuba ġew evalwati bħala d-distanza (metri) tal-moviment fil-perjodu tat-test (siegħa).

4.4. Testijiet ta' Funzjonijiet Konjittivi

4.4.1. RAMT

Biex tqabbel il-memorja spazjali fil-gruppi kollha, ir-RAMT twettqet skont studji preċedenti [38,44]. Għal dan it-test intuża labirint radjali 8-driegħ minn Stoelting Co (Wood Dale, IL, USA).

L-istrument tal-labirint kien jikkonsisti fi pjattaforma ċentrali u tmien dirgħajn (kull wisa 'driegħ, 5 ċm; għoli, 9 ċm; tul, 35 ċm). Il-gerbils kienu mħarrġa darba kuljum għal tlett ijiem qabel il-.

Jiġifieri, għalf tal-gerbilli miksub minn DBL Co (Chungbuk, Korea) tpoġġa fit-tarf ta 'kull driegħ, u kull gerbill tqiegħed fuq il-pjattaforma ċentrali. Wara, il-gerbill fittex l-għalf.

Wara l-operazzjoni sham jew tFI, it-test reali wascarried darba kuljum għal erbat ijiem li jibdew jum wieħed wara l-operazzjoni.

Għall-analiżi, in-numru ta 'żbalji ġie evalwat, bi żball wieħed iseħħ kull darba li l-gerbild daħal fi driegħ li kien diġà żar qabel. It-test kien lest meta l-gerbilli kkunsmaw l-għalf.

4.4.2. PAT

Biex tqabbel il-memorja għal żmien qasir bejn il-gruppi, il-PAT twettqet skont metodi rrappurtati qabel [64,65] b'xi modifiki. Fil-qosor, il-gerbils ġew ittestjati bl-użu tas-Sistema ta 'evitar Gemini (GEM 392) minn San Diego Instruments (SanDiego, CA, USA), li tikkonsisti f'żewġ kompartimenti (dlam u ħafif) li jikkomunikaw ma' xulxin permezz ta 'bieb li jiżżerżaq vertikalment.

Is-sessjonijiet sperimentali saru f'żewġ fażijiet: sessjoni ta 'taħriġ u sessjoni ta' test reali mwettqa ġurnata qabel u erba 'jiem wara l-operazzjoni tFI jew sham.

It-test reali sar 20 minuta wara s-sessjoni ta’ taħriġ billi tkejjel il-ħin ta’ latenza (sekondi) matul iż-żjara fil-kamra mudlama. Jiġifieri, fis-sessjoni ta’ taħriġ, il-gerbill tħalla jesplora ż-żewġ kompartimenti b’mod ħieles għal minuta waqt li l-bieb kien miftuħ. .

Wara, meta l-gerbilli daħal fil-kompartiment mudlam, il-bieb ingħalaq u l-gerbilli ngħata xokk elettriku tas-sieq (0.5 mA) minn grilja tal-azzar fuq l-art għal ħames sekondi.

Fis-sessjoni tat-test reali, f'Jum 4 wara t-tFI, il-gerbil tqiegħed fil-kompartiment tad-dawl, u l-ħin ta 'latency fil-kompartiment tad-dawl qabel ma daħal fil-kompartiment skur ġie rreġistrat.

4.5. Analiżi Western Blot għal TRPV1 u TRPV4

Biex teżamina l-livelli ta 'espressjoni ta' TRPV1 u TRPV4 f'gerbil hippocampal CA1, it-teknika tal-Western blot saret skont metodi deskritti qabel [66,67].

Fil-qosor, skont l-iskeda magħżula (30 min, 12-il siegħa, ġurnata, jumejn, u 4 ijiem wara operazzjoni fittizja jew tFI), gerbils (n=5 għal kull grupp) ingħataw anestesija għall-ewtanasja b’injezzjoni intraperitoneali b’ 200 mg/kg pentobarbital sodium (JW Pharm.Co., Ltd., Seoul, Korea).

Minn hemm 'il quddiem, l-imħuħ tagħhom inħasdu u ġew omoġenizzati b'50 mM salina buffered bil-fosfat (PBS, pH 7.4) li kien fih 0.1 mM ethylene glycol-bis (aminoethyl ether)-N, N, N{{ 11}}, aċidu N0-tetraacetic (EGTA) (pH 8.0), 10 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) (pH 8.0), 0.2% Nonidet P{{17 }}, 15 mM pirofosfat tas-sodju, 100 mM -glycerophosphate, 2 mM ortovanadat tas-sodju, 50 mM NaF, 150 mM NaCl, 1 mMphenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), u 1 mM dithiothreitol (DTT).

Sussegwentement, il-kampjuni ġew ċentrifugati, u s-supernatanti ttieħdu biex jiddeterminaw il-livelli ta 'proteina bl-użu ta' kit ta 'assaġġ Micro BCA minn Thermo Fisher Scientific Inc (Waltham, MA, USA) b'albumina bovineserum minn Pierce Chemical Co (Rockford, IL, USA).

Alikwoti inklużi 20 µg ta' proteina totali ġew mgħollija f'loading buffer, 150 mM Tris (pH 6.8) li kien fih 6% sodiumdodecyl sulfate (SDS), 3 mM DTT, 0.3% bromophenol blue, u 30% glycerol.

Il-kampjuni ġew isseparati permezz ta 'elettroforeżi tal-ġell ta' 10% SDS-polyacrylamide (PAGE). Sussegwentement, il-ġeli ġew trasferiti għal membrani ta 'nitrocellulose minn Pall Co (East Hills, NY, USA) f'350 mA u 4 ◦C għal 90 min.

Biex timblokka t-tbajja mhux speċifika, il-membrani ġew inkubati f'5% ħalib bla xaħam għal 60 min f'temperatura tal-kamra. Minn hemm 'il quddiem, ġew immunoreazzjoni ma' kull antikorp primarju: fenek anti-TRPV1 (dilwit 1:1000) (Abcam, Cambridge, UK), fenek anti-TRPV4 (dilwit 1:1000) (Abcam), u fenek anti- - actin (dilwit 1:2000) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) f'4 ◦C għal 7 sigħat.

Sussegwentement, ġew irreaġitti b'IgG kontra l-fenek tal-ħmar konjugat ma' horseradish peroxidase (HRP) (dilwit 1:4500) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA) f'temperatura tal-kamra għal siegħa.

Fl-aħħarnett, intuża kit ta 'kimiluminixxenza bbażat fuq l-aluminol minn Thermo Fisher Scientific Inc (Waltham, MA, USA) biex itejjeb il-viżwalizzazzjoni.

Kif deskritt qabel [68], l-immunoblots ta 'TRPV1 u TRPV4 kienu analizzati permezz ta' softwer Scion Image minn Scion Crop (Frederick, MD, USA). Il-meded ġew skannjati, u saret analiżi densitometrika. Il-livelli tal-proteini kienu normalizzati kontra l-livell korrispondenti ta '-actin.

4.6. Preparazzjoni ta' Sezzjonijiet Istoloġiċi

Għal eżamijiet immunoistokimiċi u istopatoloġiċi, gerbils (n=7 għal kull grupp) ġew sagrifikati skont l-iskeda magħżula (30 min, 12-il siegħa, ġurnata, 2 ijiem, u 4 ijiem wara tFI jew operazzjoni sham).

Kif deskritt qabel [34], il-gerbils kienu anestetizzati profondament b'pentobarbital sodium (200 mg/kg) (JW Pharmaceutical, Seoul, Korea). Taħt anestesija, il-gerbils ġew imlaħlaħ transkardjalment b'0.1 M phosphate buffer saline (pH 7.4) u ffissati b'4% paraformaldehyde (f'0.1 M phosphate buffer, pH 7.4).

Sussegwentement, l-imħuħ tagħhom inkisbu u ġew iffissati wara bl-użu tal-istess fissattiv għal sitt sigħat. Minn hemm 'il quddiem, it-tessuti tal-moħħ inqatgħu (ħxuna ta' 25 µm ta' pjani koronali) f'akryostat (Leica, Wetzlar, il-Ġermanja).

4.7. Tbajja istokimika bl-użu ta' CV

Biex teżamina l-ħsara morfoloġika u newronali fl-ippokampus ta 'kull grupp, tbajja cresyl violet (CV) saret kif iddeskrivejna qabel [69]. Fil-qosor, cresyl violet acetate (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ġie maħlul f'1.0% (w/v)f'ilma distillat, u aċidu aċetiku glaċjali (0.28 %) ġie miżjud ma’ din is-soluzzjoni. Is-sezzjonijiet kienu mtebbgħin u mmuntati bil-balzmu Kanadiż (Kanto, Tokyo, Ġappun).

4.8. FJ B Tbajja

Tbajja FJ B saret biex teżamina d-deġenerazzjoni newronali (mewt jew telf). Skont il-proċedura ppubblikata [34], is-sezzjonijiet tal-moħħ ippreparati ġew mxarrba f'1% idrossidu tas-sodju, immedjatament trasferiti għal 0.06% permanganat tal-potassju, u reazzjoni fil-pront b'0.0004% Fluoro-Jade B (Histochem , Jefferson, AR, l-Istati Uniti).

Is-sezzjonijiet ġew maħsula fil-qosor u mqiegħda fuq slide warmer (madwar 50 ◦C) għal reazzjoni ma 'FJ B. Biex tevalwa l-effett terapewtiku ta' OXC kontra tFI, in-numri ta 'FJ B + ċelluli ġew magħduda fir-reġjun CA1 skond metodu ppubblikat f'[ 70].

Fil-qosor, immaġini diġitali ta 'FJ B + cellswered maqbuda minn ħames sezzjonijiet għal kull gerbil bl-użu ta' mikroskopju epifluworexxenti (Carl Zeiss) (Oberkochen, il-Ġermanja) f'tul ta 'mewġ 450-490 nm. Iċ-ċelloli ġew magħduda f'250 µm2, li kien jinkludi l-SP, fiċ-ċentru tar-reġjun CA1 bl-użu ta 'sistema ta' analiżi tal-immaġni (Optimas 6.5) (CyberMetrics, Scottsdale, AZ, USA).

4.9. Immunoistokimika

Biex tinvestiga bidliet fl-immunoreattività ta' NeuN, TRPV1, u TRPV4 fir-reġjun CA1, saret immunoistokimika ġenerali. Fil-qosor, skont metodu ppubblikat [34], is-sezzjonijiet tal-moħħ ippreparati ġew inkubati b'antikorpi primarji-ġrieden anti-NeuN (dilwit, 1:1100) (Chemicon, Temecula, CA, USA), ġurdien anti-TRPV1 (dilwit, 1:500) (Abcam, Cambridge, UK), u fenek anti-TRPV4 (dilwit, 1:500) (Abcam, Cambridge, UK).

Minn hemm 'il quddiem, dawn is-sezzjonijiet inkubati ġew inkubati fl-antikorpi sekondarji korrispondenti (dilwit, 1:250) (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA, USA) u żviluppati bl-użu ta' Vectastain ABC (dilwit, 1:250) (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA) , l-Istati Uniti). Fl-aħħarnett, dawn is-sezzjonijiet immunoreaġiti kellhom kulur wara viżwalizzazzjoni bi 3,3'-diaminobenzidine.

In-numri ta' ċelluli NeuN+ ġew magħduda kif ġej. Immaġini diġitali taċ-ċelloli NeuN+ inqabdu minn ħames sezzjonijiet għal kull gerbil bl-użu ta 'mikroskopju tad-dawl (AxioM1) (Carl Zeiss, il-Ġermanja).

Iċ-ċelloli ġew magħduda bl-istess mod bħall-għadd taċ-ċelloli FJ B +. Biex tiġi evalwata d-densità tal-istrutturi TRPV1+ u TRPV4+, iż-żoni korrispondenti fir-reġjun CA1 intużaw f'ħames sezzjonijiet għal kull annimal. Stampi tal-istrutturi TRPV1+ u TRPV4+inqabdu permezz ta' mikroskopju tad-dawl AxioM1 (Carl Zeiss) (il-Ġermanja).

Id-densitajiet ta' TRPV{{0}} u TRPV4+strutturi ġew evalwati bħala d-densità ottika relattiva (ROD). Għal dan it-tmiem, l-immaġini ġew trasformati għal-livell medju tal-griż. Il-ROD ġie ppreżentat bħala persentaġġ bl-użu ta 'Adobe Photoshop (verżjoni 8.0) u softwer NIH Image J (NationalInstitutes of Health, Bethesda, MD, USA).

4.10. Analiżi Statistika

Aħna ppreżentajna d-dejta bħala l-medja ± żball standard tal-medja (SEM). L-analiżi statistiċi kollha saru bl-għajnuna ta' GraphPad Prism (verżjoni 5.0) (GraphPadSoftware, La Jolla, CA, USA). Id-differenzi fil-mezzi fost il-gruppi sperimentali ġew analizzati statistikament permezz ta 'analiżi ta' varjanza f'żewġ direzzjonijiet (ANOVA) b'test ta 'paragun multiplu ta' post hocBonferroni biex jiċċara d-differenzi relatati mat-tFI fost il-gruppi kollha. Is-sinifikat statistiku ġie kkunsidrat f'p < 0. 05.

Kontribuzzjonijiet tal-Awtur: Kunċettwalizzazzjoni: M.-HW u T.-KL; Metodoloġija, J.-CL, u DWK;Software, H.-IK, u MCS; Validazzjoni, JHA, IJK, u JHP; Investigazzjoni, J.-CL, H.-IK, andM.CS; Kurazzjoni tad-Data, JHC, IJK, u JHP; Kitba-Tħejjija ta' Abbozz Oriġinali, H.-IK, andJ.-CL; Kitba-Reviżjoni u Editjar, M.-HW; Superviżjoni, S.-SL; Amministrazzjoni tal-Proġett, M.-HW; Funding Acquisition, S.-SL, u T.-KL L-awturi kollha qraw u qablu mal-verżjoni ppubblikata tal-manuskritt.

Finanzjament: Dan ix-xogħol kien appoġġjat minn Brain Korea 21 (BK21) Fostering Outstanding Universities forResearch (ERBA, 4220200913807) iffinanzjat mill-Fondazzjoni Nazzjonali għar-Riċerka (NRF) tal-Korea, u mill-Programm ta 'Riċerka Bażika fix-Xjenza permezz tal-Fondazzjoni Nazzjonali għar-Riċerka tal-Korea (NRF) iffinanzjat mill-Ministeru tal-Edukazzjoni (NRF-2020R1I1A1A01070897).

Dikjarazzjoni tal-Bord ta 'Reviżjoni Istituzzjonali: Il-gerbils ġew imrobbija fiċ-Ċentru tal-Annimali Sperimentali tal-Università Nazzjonali ta' Kangwon (Chuncheon, Korea). Għal dan l-istudju, il-protokoll sperimentali ġie approvat (Nru ta' approvazzjoni, KW-200113-1; data ta' approvazzjoni, 18 ta' Frar 2020) mill-Kumitat Istituzzjonali għall-Kura u l-Użu tal-Annimali.

Il-protokoll ta 'riċerka aderixxa mal-linji gwida ssuġġeriti fil-"Liġijiet u Politiki Internazzjonali kurrenti" tal-Gwida għall-Kura u l-Użu ta' Annimali tal-Laboratorju ppubblikata minn The National Academies Press (8th Ed., 2011).

Dikjarazzjoni ta' Kunsens Informat: Mhux applikabbli.

Dikjarazzjoni tad-Disponibbiltà tad-Data: Id-dejta ppreżentata f'dan l-istudju hija disponibbli fuq talba mill-awtur korrispondenti.

Rikonoxximenti: L-awturi japprezzaw Hyun Sook Kim u Seung Uk Lee għall-għajnuna teknika tagħhom f'dan l-istudju.

Kunflitti ta' Interess: L-awturi ddikjaraw li m'hemm l-ebda kunflitt ta' interess finanzjarju.

Abbrevjazzjonijiet

CA1: subfield Cornu Ammonis 1; CNS, sistema nervuża ċentrali; CV, vjola kresil; DG, dentate gyrus;FJ B, Fluoro-Jade B; HyT, ipotermja; NeuN, nuklei newronali; OXC, oxcarbazepine; PAT, test tal-evitar passiv; ROD, densità ottika relattiva; SMA, attività spontanja tal-mutur; SO, stratum oriens;SP, stratum piramidali; SR, stratum radiatum; tFI, iskemija transitorja tal-forbrain; TRPV1, transientreceptor potenzjal vanilloid tip 1.

Referenzi

1. Busto, R.; Dietrich, WD; Globus, MY; Valdes, I.; Scheinberg, P.; Ginsberg, MD Differenzi żgħar fit-temperatura intraiskemika tal-moħħ jiddeterminaw b'mod kritiku l-estent tal-ħsara newronali iskemika. J. Cereb. Fluss tad-Demm Metab. 1987, 7, 729–738. [CrossRef][PubMed]

2. Maher, J.; Hachinski, V. Ipotermija bħala trattament potenzjali għall-iskemija ċerebrali. Cerebrovasc. Moħħ Metab. Rev 1993, 5,277–300.

3. Nurse, S.; Corbett, D. Neuroprotection wara diversi jiem ta 'ipotermja ħafifa indotta mid-droga. J. Cereb. Fluss tad-Demm Metab. 1996, 16,474–480. [CrossRef]

4. Fisher, M.; Feuerstein, G.; Howells, DW; Hurn, PD; Kent, TA; Savitz, SI; Lo, EH; Grupp, S. Aġġornament tar-rakkomandazzjonijiet prekliniċi roundtable ta 'l-industrija akkademika tat-terapija tal-puplesija. Stroke 2009, 40, 2244–2250. [CrossRef]

5. Liu, L.; Yenari, MA Ipotermija terapewtika: Mekkaniżmi newroprotettivi. Quddiem. Biosci. 2007, 12, 816–825. [CrossRef]

6. Lyden, PD; Krieger, D.; Yenari, M.; Dietrich, WD Ipotermija terapewtika għal puplesija akuta. Int. J. Stroke 2006, 1, 9–19. [CrossRef][PubMed]

7. Klassman, L. Ipotermija terapewtika fi puplesija akuta. J. Neurosci. Nurs. 2011, 43, 94–103. [CrossRef]

8. Groysman, LI; Emanuel, BA; Kim-Tenser, MA; Sung, GY; Mack, WJ Ipotermija terapewtika fi puplesija iskemika akuta. Neurosurg. Focus 2011, 30, E17. [CrossRef] [PubMed]

9. Schwab, S.; Georgiadis, D.; Berrouschot, J.; Schellinger, PD; Graffagnino, C.; Mayer, SA Fattibbiltà u sigurtà ta 'ipotermja moderata wara infart emisferiku massiv. Stroke 2001, 32, 2033–2035. [CrossRef]

10. Katz, LM; Żgħażagħ, AS; Frank, JE; Wang, Y.; Park, K. Ipotermija regolata tnaqqas l-istress ossidattiv tal-moħħ wara iskemija iposika. Brain Res. 2004, 1017, 85–91. [CrossRef]

11. Liu, K.; Khan, H.; Geng, X.; Zhang, J.; Ding, Y. Ipotermija farmakoloġika: potenzjal għal terapija ta 'puplesija fil-futur? Neurol. Res.2016, 38, 478–490. [CrossRef]

12. Ma, J.; Wang, Y.; Wang, Z.; Li, H.; Wang, Z.; Chen, G. Effetti newroprotettivi ta 'ipotermja terapewtika kkaġunata mid-droga f'mard tas-sistema nervuża ċentrali. Curr. Miri tad-Droga 2017, 18, 1392–1398. [CrossRef]

13. Calabresi, P.; Cupini, LM; Centonze, D.; Pisani, F.; Bernardi, G. Drogi antiepilettiċi bħala strateġija newroprotettiva possibbli iskemija fil-moħħ. Ann. Neurol. 2003, 53, 693–702. [CrossRef]

14. Tanaka, T.; Litofsky, NS Mediċini kontra l-epilessija f'korriment trawmatiku fil-moħħ pedjatriku. Espert Dun Neurother. 2016, 16, 1229–1234.[CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com